Claims (14)
1. Способ выделения возбудителя туберкулеза на питательной среде Власенко, предусматривающий приготовление питательной основы, подготовку патологического материала, высев патологического материала на питательную основу, последующее термостатирование, который отличается тем, что перед высевом на питательную основу подготовленный посевной материал обрабатывают стимулятором роста Власенко, содержащим сахарозу, натрий углекислый, реактив “Ридин”, в состав которого входят натрий, кислород, водород, углерод в массовом соотношении 3,51:26,32:45,61:24,56, на протяжении 24-48 ч при температуре 36-38°С, после чего посевной материал вместе со стимулятором роста Власенко, которым его обрабатывали, вносят в чашки Петри в дозе 0,5-1,5 мл на питательную основу, содержащую белковую составную в виде сухого ферментативного пептона, полисахаридную составную в виде крахмала картофельного, агар-агар, натрий углекислый, стимулятор кальцийзависимых ферментов, при этом питательную основу готовят непосредственно перед высеванием патологического материала, а чашки Петри со средой и посевным материалом не переворачивают и располагают в термостате крышками вверх.1. The method of isolating the causative agent of tuberculosis in the Vlasenko nutrient medium, which provides for the preparation of a nutrient base, preparation of pathological material, sowing of pathological material on a nutrient base, subsequent temperature control, which is characterized in that before sowing the nutrient base, the prepared seed is treated with Vlasenko growth stimulator containing sucrose , sodium carbonate, the reagent "Ridin", which includes sodium, oxygen, hydrogen, carbon in a mass ratio of 3.51: 26.32 : 45.61: 24.56, for 24-48 hours at a temperature of 36-38 ° C, after which the seed, together with the growth stimulator Vlasenko, which was processed, is applied to Petri dishes in a dose of 0.5-1.5 ml per nutrient base containing a protein component in the form of a dry enzymatic peptone, a polysaccharide component in the form of potato starch, agar-agar, sodium carbonate, a stimulator of calcium-dependent enzymes, while the nutrient base is prepared immediately before sowing the pathological material, and Petri dishes with medium and seed not material turn over and place the lids up in the thermostat.
2. Способ по п.1, который отличается тем, что стимулятор роста Власенко до подготовленного патологического материала перед высевом добавляют в массовом соотношении от 1:1 до 1:1,5 соответственно.2. The method according to claim 1, characterized in that the Vlasenko growth stimulator is added to the prepared pathological material before sowing in a mass ratio of 1: 1 to 1: 1.5, respectively.
3. Питательная среда Власенко для выделения возбудителя туберкулеза, содержащая питательные белковую и полисахаридную составные, химические реагенты, растворитель, которая отличается тем, что белковую составную она содержит в виде сухого ферментативного пептона, полисахаридную составную - в виде крахмала картофельного, кроме того, дополнительно в состав питательной среды входят агар-агар, натрий углекислый, стимулятор кальцийзависимых ферментов, стимулятор роста Власенко, содержащий сахарозу, натрий углекислый и реактив “Ридин”, в состав которого, в свою очередь, входят натрий, кислород, водород, углерод в массовом соотношении 3,51:26,32:45,61:24,56 соответственно, при следующем соотношении всех компонентов питательной среды, мас.%:3. Vlasenko nutrient medium for isolating the causative agent of tuberculosis, containing nutritious protein and polysaccharide compounds, chemical reagents, solvent, which is characterized in that it contains the protein compound in the form of dry enzymatic peptone, the polysaccharide compound in the form of potato starch, in addition, additionally in the composition of the nutrient medium includes agar-agar, sodium carbonate, a stimulator of calcium-dependent enzymes, a growth stimulator Vlasenko containing sucrose, sodium carbonate and the reagent "Ridin", in which, in turn, includes sodium, oxygen, hydrogen, carbon in a mass ratio of 3.51: 26.32: 45.61: 24.56, respectively, with the following ratio of all components of the nutrient medium, wt.%:
Сухой ферментативный пептон 5-7Dry enzymatic peptone 5-7
Агар-агар (агар микробиологический) 1,4-1,6Agar-agar (microbiological agar) 1.4-1.6
Натрий углекислый 0,005-0,015Sodium carbonate 0.005-0.015
Крахмал картофельный 1,377-1,577Potato starch 1,377-1,577
Стимулятор кальцийзависимых ферментов 0,012-0,014Calcium-dependent enzyme stimulator 0.012-0.014
Стимулятор роста Власенко, содержащийVlasenko growth stimulator containing
сахарозу, натрий углекислый, реактив “Ридин”,sucrose, sodium carbonate, reagent "Ridin",
в состав которого входят натрий, кислород,which contains sodium, oxygen,
водород, углерод в массовом соотношенииhydrogen, carbon in a mass ratio
3,51:26,32:45,61:24,56 10-183.51: 26.32: 45.61: 24.56 10-18
Растворитель ОстальноеSolvent Else
4. Питательная среда Власенко по п.3, которая отличается тем, что в качестве стимулятора кальцийзависимых ферментов применяют кальций хлористый.4. Nutrient medium Vlasenko according to claim 3, which is characterized in that calcium chloride is used as a stimulator of calcium-dependent enzymes.
5. Питательная среда Власенко по пп.3 и 4, которая отличается тем, что стимулятор роста Власенко применяют в виде водного раствора.5. Nutrient medium Vlasenko according to claims 3 and 4, which is characterized in that Vlasenko growth stimulator is used in the form of an aqueous solution.
6. Питательная среда Власенко по п.3, которая отличается тем, что содержание аминного азота в готовой питательной среде составляет не менее 1,8%.6. Nutrient medium Vlasenko according to claim 3, characterized in that the content of amine nitrogen in the finished nutrient medium is at least 1.8%.
7. Способ получения питательной среды Власенко, предусматривающий приготовление смеси из питательной основы, содержащей питательные белковую и полисахаридную составные, химические реагенты, растворитель, который отличается тем, что к питательной основе для культивирования микобактерий добавляют стимулирующий раствор в виде стимулятора роста Власенко для ускорения роста возбудителя туберкулеза в массовом соотношении от 1:20 до 1:25 соответственно, при этом питательную основу готовят путем перемешивания сухого ферментативного пептона, полисахаридной составной в виде крахмала картофельного, агар-агара, натрия углекислого, стимулятора кальцийзависимых ферментов, а стимулятор роста Власенко готовят в отдельности путем перемешивания смеси сахарозы, натрия углекислого, а также реактива “Ридин”, в состав которого входят натрий, кислород, водород, углерод в массовом соотношении 3,51:26,32:45,61:24,56 соответственно, растворитель в виде дистиллированной или бидистиллированной воды.7. A method of obtaining a culture medium Vlasenko, comprising preparing a mixture of a nutrient base containing nutritious protein and polysaccharide compounds, chemical reagents, a solvent, which is characterized in that a stimulating solution in the form of a growth stimulator Vlasenko is added to the nutrient base for the cultivation of mycobacteria to accelerate the growth of the pathogen tuberculosis in a mass ratio of 1:20 to 1:25, respectively, while the nutritional basis is prepared by mixing dry enzymatic peptone, p an olisaccharide compound in the form of potato starch, agar agar, sodium carbonate, a calcium-dependent enzyme stimulant, and Vlasenko’s growth stimulator is prepared separately by mixing a mixture of sucrose, sodium carbonate, as well as the Ridin reagent, which contains sodium, oxygen, hydrogen, carbon in a mass ratio of 3.51: 26.32: 45.61: 24.56, respectively, the solvent in the form of distilled or bidistilled water.
8. Способ получения питательной среды Власенко по п.7, который отличается тем, что питательную основу в количества 9,0 г размешивают в 100 мл очищенной воды, кипятят 2-3 мин до полного расплавления агара, фильтруют через ватно-марлевый фильтр, после чего стерилизуют при температуре (121±1)°С на протяжении 15 мин в паровом стерилизаторе.8. The method of obtaining a nutrient medium Vlasenko according to claim 7, characterized in that the nutrient base in the amount of 9.0 g is stirred in 100 ml of purified water, boiled for 2-3 minutes until the agar is completely melted, filtered through a cotton-gauze filter, after which is sterilized at a temperature of (121 ± 1) ° C for 15 minutes in a steam sterilizer.
9. Способ получения питательной среды Власенко по п.7, который отличается тем, что после стерилизации питательную основу разливают в асептических условиях в стерильные чашки Петри слоем 6-8 мм.9. The method of obtaining a nutrient medium Vlasenko according to claim 7, characterized in that after sterilization, the nutrient base is poured under aseptic conditions into sterile Petri dishes with a layer of 6-8 mm.
10. Способ получения питательной среды Власенко по п.7, который отличается тем, что растворимость, прозрачность и окрашенность питательной основы характеризуются прозрачным, желтой окраски раствором, получаемым после кипячения полностью растворенной навески питательной основы весом 9 г в 100 мл дистиллированной воды при ее перемешивании и кипячении на протяжении 2-3 мин.10. The method of obtaining a nutrient medium Vlasenko according to claim 7, characterized in that the solubility, transparency and coloration of the nutrient base are characterized by a transparent, yellow color solution obtained after boiling a fully dissolved sample of the nutrient base weighing 9 g in 100 ml of distilled water while stirring and boiling for 2-3 minutes.
11. Способ получения питательной среды Власенко по п.7, который отличается тем, что перемешивание компонентов осуществляют на протяжении 5-10 минут.11. The method of obtaining a nutrient medium Vlasenko according to claim 7, characterized in that the mixing of the components is carried out for 5-10 minutes.
12. Стимулятор роста Власенко, содержащий химические соединения, в состав которых входят элементы: натрий, кислород, водород, углерод, который отличается тем, что он содержит смесь сахарозы, натрия углекислого, а также реактив “Ридин”, в состав которого входят натрий, кислород, водород, углерод в массовом соотношении 3,51:26,32:45,61:24,56 соответственно, растворитель в виде дистиллированной или бидистиллированной воды в следующем соотношении этих компонентов:12. Vlasenko growth stimulator containing chemical compounds, which include elements: sodium, oxygen, hydrogen, carbon, which is characterized in that it contains a mixture of sucrose, sodium carbonate, as well as the reagent "Ridine", which contains sodium, oxygen, hydrogen, carbon in a mass ratio of 3.51: 26.32: 45.61: 24.56, respectively, a solvent in the form of distilled or bidistilled water in the following ratio of these components:
Сахароза 2,0-4,0 гSucrose 2.0-4.0 g
Натрий углекислый 0,05-0,15 гSodium carbonate 0.05-0.15 g
Реактив “Ридин”, в состав которого входят натрий, кислород, водород, углерод 0,3-0,5 млThe reagent "Ridin", which includes sodium, oxygen, hydrogen, carbon 0.3-0.5 ml
Растворитель До 1000 млThinner Up to 1000 ml
13. Стимулятор роста Власенко по п.12, который отличается тем, что реактив “Ридин” применяют в виде 7-25%-ного водного раствора.13. The growth stimulator Vlasenko according to item 12, which is characterized in that the reagent "Ridin" is used in the form of a 7-25% aqueous solution.
14. Стимулятор роста Власенко по пп.12 и 13, который отличается тем, что в качестве растворителя применяют дистиллированную или бидистиллированную воду.14. Vlasenko growth stimulator according to claims 12 and 13, which is characterized in that distilled or bidistilled water is used as a solvent.