RU198108U1 - Immunofiltration device for the analysis of fucosylated glycoprotein in blood serum - Google Patents
Immunofiltration device for the analysis of fucosylated glycoprotein in blood serum Download PDFInfo
- Publication number
- RU198108U1 RU198108U1 RU2019104468U RU2019104468U RU198108U1 RU 198108 U1 RU198108 U1 RU 198108U1 RU 2019104468 U RU2019104468 U RU 2019104468U RU 2019104468 U RU2019104468 U RU 2019104468U RU 198108 U1 RU198108 U1 RU 198108U1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- detection
- afp
- utility
- model
- blood serum
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
- G01N33/54386—Analytical elements
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57407—Specifically defined cancers
- G01N33/57438—Specifically defined cancers of liver, pancreas or kidney
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/46—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from vertebrates
- G01N2333/47—Assays involving proteins of known structure or function as defined in the subgroups
- G01N2333/4701—Details
- G01N2333/471—Pregnancy proteins, e.g. placenta proteins, alpha-feto-protein, pregnancy specific beta glycoprotein
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/46—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from vertebrates
- G01N2333/47—Assays involving proteins of known structure or function as defined in the subgroups
- G01N2333/4701—Details
- G01N2333/4724—Lectins
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/70—Mechanisms involved in disease identification
- G01N2800/7023—(Hyper)proliferation
- G01N2800/7028—Cancer
Abstract
Раскрыто иммунофильтрационное устройство для выявления фукозилированного альфафетопротеина (AFP) в сыворотке крови, которое содержит миллипоровый фильтр (2), при этом миллипоровый фильтр в иммунофильтрационном устройстве содержит область выявления, в которой расположены подобласть выявления положительного контроля с фиксированным в ней AFP, подобласть выявления фукозилированного гликопротеина в сыворотке крови с фиксированным в ней лектином Lens culinaris (LCA) и область отрицательного контроля с фиксированным в ней BSA; при этом подобласть выявления имеет одно пятно для выявления, и каждая из области положительного контроля или области отрицательного контроля имеет одно контрольное пятно. Процесс анализа может быть завершен в течение 3-5 минут. В силу этого настоящая полезная модель обладает преимуществами короткого времени тестирования и превосходной стабильности.An immunofiltration device for detecting fucosylated alpha-fetoprotein (AFP) in the blood serum is disclosed, which contains a millipore filter (2), while a millipore filter in the immunofiltration device contains a detection region in which a positive control detection sub-region with a fixed AFP is located, a detection region of fucosylated glycoprotein in blood serum with Lens culinaris lectin fixed in it (LCA) and a negative control region with BSA fixed in it; wherein the detection subdomain has one spot for detection, and each of the positive control region or the negative control region has one control spot. The analysis process can be completed within 3-5 minutes. By virtue of this, the present utility model has the advantages of short testing time and excellent stability.
Description
Область техники, к которой относится полезная модельThe technical field to which the utility model relates.
Настоящая полезная модель относится к области техники выявления белков, в частности к иммунофильтрационному устройству для выявления фукозилированного гликопротеина в сыворотке крови.The present utility model relates to the field of protein detection technology, in particular to an immunofiltration device for detecting fucosylated glycoprotein in blood serum.
Уровень техникиState of the art
Альфа-фетопротеин (AFP), вырабатываемый клетками первичной гепатокарциномы, в значительной степени отличается от альфа-фетопротеина, вырабатываемого при гепатите, циррозе или других доброкачественных заболеваниях печени, по структуре своих углеводных цепей, другими словами, по сравнению с альфа-фетопротеином при доброкачественных заболеваниях печени AFP, вырабатываемый клетками гепатокарциномы, имеет намного более высокий индекс фукозилирования. Фукоза обладает свойством связывания с лектином Lens culinaris (LCA). AFP можно подразделить на AFP-L1, AFP-L2 и AFP-L3 в зависимости от его (опосредованной фукозильными остатками) аффинности к LCA, при этом AFP-L1 преимущественно ассоциирован с доброкачественными заболеваниями печени, AFP-L2 преимущественно вырабатывается у беременных женщин, a AFP-L3 в качестве фукозилированной формы AFP преимущественно ассоциирован с гепатоцеллюлярной карциномой (НСС). В 2005 году FDA официально утвердило AFP-L3 в качестве одного из маркеров первичной гепатокарциномы. AFP-L3 характеризуется более высокой специфичностью и чувствительностью при ранней диагностике, дифференциальной диагностике, оценке терапевтической эффективности, прогнозировании, мониторинге и других аспектах, связанных с гепатокарциномой.Alpha-fetoprotein (AFP) produced by primary hepatocarcinoma cells is significantly different from alpha-fetoprotein produced by hepatitis, cirrhosis or other benign liver diseases in the structure of its carbohydrate chains, in other words, in comparison with alpha-fetoprotein in benign diseases liver AFP produced by hepatocarcinoma cells has a much higher fucosylation index. Fucose has the property of binding to Lens culinaris lectin (LCA). AFP can be subdivided into AFP-L1, AFP-L2 and AFP-L3 depending on its affinity for fucosyl residues (LCA), while AFP-L1 is predominantly associated with benign liver diseases, AFP-L2 is mainly produced in pregnant women, a AFP-L3 as a fucosylated form of AFP is predominantly associated with hepatocellular carcinoma (HCC). In 2005, the FDA officially approved AFP-L3 as one of the markers of primary hepatocarcinoma. AFP-L3 is characterized by higher specificity and sensitivity in early diagnosis, differential diagnosis, assessment of therapeutic efficacy, prognosis, monitoring and other aspects related to hepatocarcinoma.
Фукоза в виде метилированной гексозы присутствует в углеводных цепях множества гликопротеинов, как, например, в тканях, сыворотке крови и т.д., и называется фукозой, связанной с белками (P-bf). Остатки фукозы присутствуют в углеводной цепи AFP, и такая гетерогенная молекула называется фукозилированным AFP (FucAFP), который имеет важное теоретическое значение, а также значение с точки зрения клинического применения, и его можно применять в качестве важного показателя в области диагностики и прогнозирования течения гепатокарциномы.Fucose in the form of methylated hexose is present in the carbohydrate chains of many glycoproteins, such as in tissues, blood serum, etc., and is called protein-bound fucose (P-bf). Fucose residues are present in the AFP carbohydrate chain, and such a heterogeneous molecule is called fucosylated AFP (FucAFP), which has important theoretical and clinical significance and can be used as an important indicator in the diagnosis and prognosis of hepatocarcinoma.
Традиционные способы выделения фукозилированных гликопротеинов из сыворотки крови включают перекрестный аффинный иммунный электрофорез, аффинный блоттинг, аффинную хроматографию, твердофазный иммуноферментный двухстадийный «сэндвич»-анализ (ELISA), контрольно-измерительное устройство LiBASys, технологию системы выявления μTASWako®i30 и технологию предварительной обработки с захватом гликозильных остатков на микроцентрифужной колонке Hotgen Biotech, при этом увеличение популярности и применения иммунного электрофореза с фитоагглютининами и технологии системы выявления μTASWako®i30 ограничено ввиду более высоких технических требований, трудоемких операций и дорогостоящих реагентов; тогда как трудоемкость операций захвата гликозильных остатков на микроцентрифужной колонке увеличивается, поскольку обработка и выявление образца проводятся по отдельности.Conventional methods for the isolation of fucosylated glycoproteins from blood serum include cross affinity immune electrophoresis, affinity blotting, affinity chromatography, enzyme-linked immunosorbent assay two-stage sandwich analysis (ELISA), LiBASys control and measuring device, μTASWaki® detection technology with pre-detection technology with μTASWako® pre-detection technology glycosyl residues on a Hotgen Biotech microcentrifuge column, while increasing the popularity and use of immune electrophoresis with phytoagglutinins and the technology of the μTASWako®i30 detection system is limited due to higher technical requirements, laborious operations and expensive reagents; while the complexity of the operations of capturing glycosyl residues on a microcentrifuge column increases, since the processing and identification of the sample are carried out separately.
Краткое описание полезной моделиBrief Description of Utility Model
Настоящая полезная модель направлена на обеспечение иммунофильтрационного устройства для выявления фукозилированного гликопротеина в сыворотке крови; при этом иммунофильтрационное устройство является особенно применимым для выявления FucAFP в биологических образцах и характеризуется универсальностью в отношении различных фукозилированных гликопротеинов.This utility model aims to provide an immunofiltration device for detecting fucosylated glycoprotein in serum; however, the immunofiltration device is especially applicable for the detection of FucAFP in biological samples and is characterized by universality with respect to various fucosylated glycoproteins.
Для достижения данной цели настоящая полезная модель предусматривает следующие технические решения.To achieve this goal, this utility model provides the following technical solutions.
С помощью настоящей полезной модели достигается одновременное выявление нескольких антигенов или антител в образце сыворотки крови единовременно за короткий промежуток времени благодаря применению миллипорового фильтра, и процесс выявления может завершаться всего за 3-5 мин.Using this utility model, simultaneous detection of several antigens or antibodies in a blood serum sample is achieved at a time in a short period of time thanks to the use of a millipore filter, and the detection process can be completed in just 3-5 minutes.
В данном документе FucAFP относится к гетерогенной форме остатков фукозы, присутствующих в углеводной цепи AFP.As used herein, FucAFP refers to the heterogeneous form of fucose residues present in an AFP carbohydrate chain.
Согласно настоящей полезной модели антиген AFP из стадии (1) представляет собой без ограничения антиген AFP человека, экспрессируемый в прокариотических клетках, или антиген AFP, экспрессируемый в эукариотических клетках.According to the present utility model, the AFP antigen from step (1) is, without limitation, a human AFP antigen expressed in prokaryotic cells or an AFP antigen expressed in eukaryotic cells.
Согласно настоящей полезной модели меченное ферментом поликлональное антитело к AFP из стадии (3) представляет собой антитело кроличьего происхождения.According to the present utility model, the enzyme-labeled polyclonal anti-AFP antibody of step (3) is an antibody of rabbit origin.
Согласно настоящей полезной модели фермент из стадии (3) представляет собой пероксидазу хрена (HRP), а также может представлять собой щелочную фосфатазу (ALP), каждая из которых применяется для проявления цвета при реакции с соответствующим субстратом.According to the present utility model, the enzyme from step (3) is horseradish peroxidase (HRP), and can also be alkaline phosphatase (ALP), each of which is used to develop color in the reaction with the corresponding substrate.
В случае с положительной сывороткой крови области выявления антигена AFP и фукозилированного AFP демонстрируют голубое окрашивание; в случае с отрицательной сывороткой крови область выявления антигена AFP демонстрирует голубое окрашивание, а область выявления фукозилированного AFP не окрашивается. В случае с пятном BSA для отрицательного контроля ни положительная сыворотка крови, ни отрицательная сыворотка крови не дают окрашивание.In the case of positive blood serum, the AFP and fucosylated AFP antigen detection regions show blue staining; in the case of negative blood serum, the AFP antigen detection area shows blue staining, and the fucosylated AFP detection area does not stain. In the case of a BSA stain for negative control, neither positive blood serum nor negative blood serum produced staining.
Выявление образцаPattern identification
Нанести каплю разведенного образца сыворотки крови, в котором нужно провести выявление, на область выявления, содержащуюся на миллипоровом фильтре, инкубировать в течение некоторого периода времени и проныть область выявления с помощью PBST для удаления неспецифических конъюгатов; добавить раствор меченного HRP антитела к AFP, разведенного с помощью PBS, инкубировать в течение некоторого периода времени и промыть с помощью PBST для удаления неспецифических конъюгатов; добавить раствор хромогенного субстрата для HRP и наблюдать результаты невооруженным глазом.Apply a drop of the diluted blood serum sample to be detected on the detection area contained on the millipore filter, incubate for a period of time and pierce the detection area with PBST to remove non-specific conjugates; add a solution of HRP-labeled anti-AFP antibody diluted with PBS, incubate for a period of time and rinse with PBST to remove non-specific conjugates; add a chromogenic substrate solution for HRP and observe the results with the naked eye.
Согласно настоящей полезной модели инкубирование можно проводить при комнатной температуре в течение 3-5 с, как, например, 3 с, 3,5 с, 4 с, 4,5 с или 5 с.According to the present utility model, incubation can be carried out at room temperature for 3-5 s, such as, for example, 3 s, 3.5 s, 4 s, 4.5 s or 5 s.
Иммунофильтрационное устройство для выявления фукозилированного гликопротеина в сыворотке крови содержит миллипоровый фильтр, где на подложке миллипорового фильтра расположена по меньшей мере 1 область выявления, и в области выявления расположены подобласть выявления положительного контроля, подобласть выявления фукозилированного гликопротеина в сыворотке крови и область отрицательного контроля, и где дополнительно AFP фиксирован в подобласти выявления положительного контроля, LCA фиксирован в подобласти выявления фукозилированного гликопротеина в сыворотке крови, и бычий сывороточный альбумин (BSA) фиксирован в области отрицательного контроля; кроме того, пятна для выявления в одной и той же подобласти выявления имеют одну и ту же концентрацию вещества. Подобласть выявления и контрольная область соответственно содержат по меньшей мере 1 пятно для выявления, как, например, 2, 3, 4, 5 или 6 пятен для выявления.An immunofiltration device for detecting fucosylated glycoprotein in blood serum contains a millipore filter, where at least 1 detection area is located on the substrate of the millipore filter, and the detection area contains the positive control detection area, the serum fucosylated glycoprotein detection area and the negative control area, and where in addition, AFP is fixed in the subregion of detecting a positive control, LCA is fixed in the subregion of detecting fucosylated glycoprotein in blood serum, and bovine serum albumin (BSA) is fixed in the region of the negative control; in addition, spots for detection in the same detection sub-region have the same concentration of substance. The detection sub-area and the control region respectively contain at least 1 spot for detection, such as, for example, 2, 3, 4, 5, or 6 spots for detection.
Иммунофильтрационное устройство согласно настоящей полезной модели состоит из пластмассового изделия с хорошей прочностью, водопоглощающего бумажного материала и нитроцеллюлозного фильтра, при этом оно может выдерживать удары и столкновения, и его сложно разбить.The immunofiltration device according to this utility model consists of a plastic product with good strength, a water-absorbing paper material and a nitrocellulose filter, while it can withstand shock and collision and is difficult to break.
В варианте осуществления на подложке миллипорового фильтра имеется 1 область выявления, 1 пятно для выявления в подобласти выявления и 1 контрольное пятно в каждой из области положительного контроля и области отрицательного контроля; и AFP представляет собой AFP человека, экспрессируемый в прокариотических клетках.In an embodiment, on the millipore filter substrate, there is 1 detection area, 1 spot for detection in the detection subregion, and 1 control spot in each of the positive control region and the negative control region; and AFP is human AFP expressed in prokaryotic cells.
Иммунофильтрационное устройство согласно настоящей полезной модели также содержит меченное HRP поликлональное антитело к AFP и растворы хромогенного субстрата; при этом меченное HRP поликлональное антитело к AFP представляет собой антитело кроличьего происхождения; и иммунофильтрационное устройство также содержит блокирующие буферы для промывания и разведения, т.е. PBST и PBS.The immunofiltration device according to the present utility model also contains HRP-labeled polyclonal anti-AFP antibody and chromogenic substrate solutions; wherein the HRP-labeled polyclonal anti-AFP antibody is an antibody of rabbit origin; and the immunofiltration device also contains blocking buffers for washing and dilution, i.e. PBST and PBS.
В настоящей полезной модели предпочтительно применяется иммунофильтрационное устройство с миллипоровым фильтром, которое по сравнению с белковым микрочипом обладает преимуществами меньшей длительности выявления, более низкой стоимости, лучшей стабильности и т.д., и процесс выявления на нем может осуществляться в пределах 3-5 мин.In this utility model, an immunofiltration device with a millipore filter is preferably used, which, in comparison with a protein microchip, has the advantages of a shorter detection time, lower cost, better stability, etc., and the detection process on it can be carried out within 3-5 minutes.
С другой стороны, настоящая полезная модель также предусматривает иммунофильтрационное устройство для выявления фукозилированных гликопротеинов в сыворотке крови, которое содержит миллипоровый фильтр, где подложка миллипорового фильтра в иммунофильтрационном устройстве содержит по меньшей мере 1 область выявления, в которой расположены подобласть выявления положительного контроля с фиксированным в ней AFP, подобласть выявления фукозилированного гликопротеина в сыворотке крови с фиксированным в ней LCA и область отрицательного контроля с фиксированным в ней BSA; кроме того, пятна для выявления в одной и той же подобласти выявления имеют одну и ту же концентрацию вещества.On the other hand, the present utility model also provides an immunofiltration device for detecting fucosylated glycoproteins in blood serum, which contains a millipore filter, where the millipore filter substrate in the immunofiltration device contains at least 1 detection region, in which a positive control detection sub-region with a fixed one is located AFP, a subdomain of detection of fucosylated glycoprotein in serum with fixed LCA in it and a negative control region with fixed BSA in it; in addition, spots for detection in the same detection sub-region have the same concentration of substance.
Согласно настоящей полезной модели подобласть выявления содержит по меньшей мере 1 пятно для выявления, как, например, 2, 3, 4, 5 или 6 пятен для выявления.According to the present utility model, the detection subdomain contains at least 1 spot for detection, such as, for example, 2, 3, 4, 5, or 6 spots for detection.
Согласно настоящей полезной модели на подложке миллипорового фильтра имеется 1 область выявления, подобласть выявления имеет 1 пятно для выявления, и область положительного контроля и область отрицательного контроля соответственно имеют по 1 контрольному пятну.According to the present utility model, there is 1 detection area on the millipore filter substrate, the detection subdomain has 1 spot for detection, and the positive control area and the negative control area respectively have 1 control spot.
Согласно настоящей полезной модели AFP представляет собой AFP человека, экспрессируемый в прокариотических клетках.According to the present utility model, AFP is human AFP expressed in prokaryotic cells.
Согласно настоящей полезной модели иммунофильтрационное устройство также содержит меченное HRP поликлональное антитело к AFP и растворы хромогенного субстрата.According to the present utility model, the immunofiltration device also contains HRP-labeled polyclonal anti-AFP antibody and chromogenic substrate solutions.
Согласно настоящей полезной модели меченное HRP поликлональное антитело к AFP представляет собой антитело кроличьего происхождения.According to the present utility model, the HRP-labeled polyclonal anti-AFP antibody is an antibody of rabbit origin.
Согласно настоящей полезной модели иммунофильтрационное устройство также содержит блокирующие буферы для промывания и разведения, т.е. PBST и PBS.According to the present utility model, the immunofiltration device also contains blocking buffers for washing and diluting, i.e. PBST and PBS.
Настоящая полезная модель также предусматривает применение иммунофильтрационного устройства в выявлении фукозилированных гликопротеинов в сыворотке крови для недиагностической и/или нетерапевтической цели.The present utility model also provides for the use of an immunofiltration device in the detection of fucosylated glycoproteins in blood serum for non-diagnostic and / or non-therapeutic purposes.
Настоящая полезная модель обладает по меньшей мере следующими преимуществами:A true utility model has at least the following advantages:
(1) с помощью настоящей полезной модели достигается одновременное выявление нескольких антигенов или антител в образце сыворотки крови единовременно за короткий промежуток времени благодаря применению миллипорового фильтра;(1) using this utility model, simultaneous detection of several antigens or antibodies in a blood serum sample is achieved at a time for a short period of time due to the use of a millipore filter;
(2) для иммунофильтрационного устройства, предусматриваемого в настоящей полезной модели, количество требуемых сырьевых материалов и стоимость инструментов и оборудования в значительной степени снижены; при этом иммунофильтрационное устройство представляет собой бумажное или пластмассовое изделие с очень невысокой стоимостью, составляющей приблизительно 1 юань RMB, и, помимо этого, для подготовки экспериментальной процедуры, инкубирования и сканирования результатов не требуется никаких инструментов и оборудования, и вследствие этого стоимость выявления и расходы на него в значительной степени снижены.(2) for the immunofiltration device provided for in this utility model, the amount of raw materials required and the cost of tools and equipment are significantly reduced; however, the immunofiltration device is a paper or plastic product with a very low cost of approximately 1 RMB RMB, and, in addition, no tools and equipment are required to prepare the experimental procedure, incubate and scan the results, and therefore the cost of detection and the cost of him greatly reduced.
Краткое описание графических материаловA brief description of the graphic materials
На фиг. 1 показано схематическое изображение иммунофильтрационного устройства согласно настоящей полезной модели с 1 - крышкой, 2 - миллипоровым фильтром, 3 - водопоглощающим бумажным материалом и 4 - пластмассовой основой.In FIG. 1 shows a schematic representation of an immunofiltration device according to the present utility model with 1 — a cover, 2 — a millipore filter, 3 — water-absorbing paper material, and 4 — a plastic base.
На фиг. 2 показано изображение результатов согласно настоящей полезной модели, где 1-3 представляют собой положительные результаты, на которых пятна для положительного контроля выявления на миллипоровом фильтре вверху демонстрируют голубой и коричневый положительные сигналы, пятна LCA для выявления посредине демонстрируют голубой и коричневый положительные сигналы, а контрольное пятно BSA внизу не окрашено; 4-5 представляют собой отрицательные результаты, на которых пятна для положительного контроля выявления на миллипоровом фильтре вверху демонстрируют голубой и коричневый положительные сигналы, а пятна LCA для выявления посредине и контрольное пятно BSA внизу не окрашены.In FIG. Figure 2 shows the image of the results according to the present utility model, where 1-3 are positive results, in which the spots for positive detection control on the millipore filter show blue and brown positive signals at the top, LCA spots for middle detection show blue and brown positive signals, and the control the BSA spot below is not stained; 4-5 are negative results, in which the spots for positive detection control on the millipore filter at the top show blue and brown positive signals, and the LCA spots for detection in the middle and the BSA control spot at the bottom are not stained.
На фиг. 3 показано схематическое изображение подготовки нитроцеллюлозного фильтра для иммунофильтрации, при которой AFP фиксируется в области положительного контроля, LCA фиксируется в области выявления посредине, a BSA фиксируется в области отрицательного контроля.In FIG. Figure 3 shows a schematic representation of the preparation of a nitrocellulose filter for immunofiltration, in which AFP is fixed in the region of positive control, LCA is fixed in the region of detection in the middle, and BSA is fixed in the region of negative control.
Настоящая полезная модель более подробно объясняется ниже. Однако приведенные ниже варианты осуществления являются лишь простыми примерами настоящей полезной модели, но не будут представлять или ограничивать область охранительного действия прав на настоящую полезную модель, и при этом область охранительного действия прав на настоящую полезную модель определяется формулой полезной модели.The present utility model is explained in more detail below. However, the following embodiments are merely simple examples of the present utility model, but will not represent or limit the scope of the protective effect of the rights to the present useful model, and the scope of the protective effect of the rights to the present utility model is determined by the formula of the utility model.
Конкретные варианты осуществленияSpecific Embodiments
Варианты осуществления настоящей полезной модели будут подробно описаны ниже со ссылкой на графические материалы.Embodiments of the present utility model will be described in detail below with reference to graphical materials.
На фиг. 1 показано схематическое изображение иммунофильтрационного устройства согласно настоящей полезной модели, которое имеет миллипоровый фильтр и в котором крышка 1, миллипоровый фильтр 2, водопоглощающий бумажный материал 3 и пластмассовая основа 4 расположены по порядку сверху вниз. При сборке миллипоровый фильтр предварительно вырезают в виде круга диаметром приблизительно 1,5 см, водопоглощающий бумажный материал 3 помещают на пластмассовую основу 4, предварительно вырезанный миллипоровый фильтр 2 располагают над центром водопоглощающего бумажного материала, а затем накрывают крышкой 1.In FIG. 1 shows a schematic representation of an immunofiltration device according to the present utility model, which has a millipore filter and in which a
Применяемый в настоящей полезной модели миллипоровый фильтр может представлять собой нитроцеллюлозный фильтр. В варианте осуществления настоящей полезной модели применяется RPN303B от GE Healthcare. Кроме того, водопоглощающий бумажный материал может представлять собой водопоглощающую бумагу; и как крышка, так и основа представляют собой пластмассовые изделия.The millipore filter used in this utility model may be a nitrocellulose filter. In an embodiment of the present utility model, an RPN303B from GE Healthcare is used. In addition, the water-absorbing paper material may be water-absorbing paper; and both the lid and the base are plastic products.
На фиг. 2 показано изображение результатов согласно настоящей полезной модели, где в случае с положительной сывороткой крови (1-3 на фиг. 2) как положительный контроль, так и область выявления FucAFP демонстрируют голубое окрашивание; в случае с отрицательной сывороткой крови (4-6 на фиг. 2) область выявления FucAFP не окрашивается, тогда как положительный контроль демонстрирует голубое окрашивание; и в случае с любой из положительной или отрицательной сыворотки крови отрицательный контроль не окрашивается.In FIG. 2 shows an image of the results according to the present utility model, where in the case of positive blood serum (1-3 in FIG. 2), both the positive control and the FucAFP detection region show blue staining; in the case of negative blood serum (4-6 in Fig. 2), the FucAFP detection area is not stained, while the positive control shows blue staining; and in the case of any of the positive or negative blood serum, the negative control is not stained.
На фиг. 3 показано схематическое изображение подготовки нитроцеллюлозного фильтра для иммунофильтрации, при которой AFP фиксируется в области положительного контроля, LCA фиксируется в области выявления посредине, a BSA фиксируется в области отрицательного контроля.In FIG. Figure 3 shows a schematic representation of the preparation of a nitrocellulose filter for immunofiltration, in which AFP is fixed in the region of positive control, LCA is fixed in the region of detection in the middle, and BSA is fixed in the region of negative control.
Для лучшего пояснения настоящей полезной модели и для удобства понимания технического решения настоящей полезной модели ниже приведены следующие типичные, но не ограничивающие примеры настоящей полезной модели.For a better explanation of the present utility model and for the convenience of understanding the technical solution of the present utility model, the following are typical but non-limiting examples of the present utility model.
Пример 1. Процедура подготовки и применения иммунофильтрационного устройстваExample 1. The procedure for the preparation and use of immunofiltration device
Реагенты и инструменты, применяемые для эксперимента: AFP, экспрессируемый в прокариотических клетках (Abcam, США); LCA (Sigma); нитроцеллюлозный фильтр (GE Healthcare) и меченное HRP антитело кроличьего происхождения (Abcam, США); растворы хромогенного субстрата для HRP (Millipore, США).Reagents and tools used for the experiment: AFP expressed in prokaryotic cells (Abcam, USA); LCA (Sigma); nitrocellulose filter (GE Healthcare) and rabbit-labeled HRP antibody (Abcam, USA); chromogenic substrate solutions for HRP (Millipore, USA).
Состав PBS: 8 г NaCl, 0,2 г KCl, 1,44 г Na2HPO4, 0,24 г KH2PO4 при значении рН, доведенном до 7,4, и при постоянном объеме, составляющем 1 л.Composition of PBS: 8 g of NaCl, 0.2 g of KCl, 1.44 g of Na 2 HPO 4 , 0.24 g of KH 2 PO 4 at a pH adjusted to 7.4, and with a constant volume of 1 liter.
Состав PBST: 1 л PBS + 1 мл Tween-20.Composition of PBST: 1 L PBS + 1 ml Tween-20.
Нитроцеллюлозный фильтр (GE Healthcare), каждое иммунофильтрационное устройство содержит 1 область выявления, при этом в каждой области выявления может происходить выявление маркера AFPL3 в одном образце сыворотки крови за один раз.Nitrocellulose filter (GE Healthcare), each immunofiltration device contains 1 detection area, and in each detection area, AFPL3 marker can be detected in one serum sample at a time.
В каждой области выявления на нитроцеллюлозный фильтр по порядку производят нанесение пятнами по 0,5 мкл AFP человека, экспрессируемого в прокариотических клетках (Abcam, США), и 0,5 мкл LCA (Sigma), чтобы получить концентрацию при нанесении образца, составляющую 0,5 мг/мл для AFP и 4 мг/мл для LCA; в качестве отрицательного контроля берут 10% BSA, и производят нанесение пятном 0,5 мкл в область контрольного пятна.In each detection area, 0.5 μl of AFP human expressed in prokaryotic cells (Abcam, USA) and 0.5 μl of LCA (Sigma) are stained in order in order to obtain a concentration of 0, 5 mg / ml for AFP and 4 mg / ml for LCA; 10% BSA was taken as a negative control, and 0.5 μl stained in the area of the control spot.
Операционная процедура иммунофильтрацииImmunofiltration Operating Procedure
Опухолевый маркер AFPL3 в динамических образцах сыворотки крови из контрольной группы здоровых субъектов и экспериментальной группы пациентов с гепатокарциномой выявляли с помощью подготовленного иммунофильтрационного устройства.Tumor marker AFPL3 in dynamic blood serum samples from the control group of healthy subjects and the experimental group of patients with hepatocarcinoma was detected using the prepared immunofiltration device.
При комнатной температуре 10 мкл образца сыворотки крови наносят каплями на фильтр иммунофильтрационного устройства, при этом LCA связывается с фукозой в сыворотке крови с образованием соединения антиген-LCA благодаря использованию связывающих свойств LCA и фукозы; спустя 3 с вода в фильтре, пропитанном жидкостью сыворотки крови, поглощается водопоглощающим материалом под фильтром.At room temperature, 10 μl of a blood serum sample is applied dropwise to the filter of an immunofiltration device, while LCA binds to fucose in the blood serum to form the antigen-LCA compound through the use of the binding properties of LCA and fucose; after 3 s, the water in the filter, impregnated with a blood serum liquid, is absorbed by the water-absorbing material under the filter.
10 мкл PBST наносят каплями для промывания, чтобы удалить неспецифические конъюгаты, что повторяют трижды. Затем добавляют разведенное в PBS меченное HRP первичное антитело кроличьего происхождения, и антитело к AFP кроличьего происхождения связывается с антигеном AFP в сыворотке крови с образованием соединения LCA-фукоза (AFP)-меченное HRP первичное антитело кроличьего происхождения; при этом антитело кроличьего происхождения одновременно связывается с AFP положительного контроля, фиксированным на фильтре, с образованием соединения AFP-меченное HRP первичное антитело кроличьего происхождения. Спустя 3 с вода в фильтре, пропитанном жидкостью сыворотки крови, поглощается водопоглощающим материалом под фильтром.10 μl of PBST is applied in drops for washing to remove non-specific conjugates, which is repeated three times. The rabbit-derived PBS labeled primary antibody diluted in PBS is then added, and the rabbit-derived AFP antibody binds to serum AFP antigen to form the LCA-fucose (AFP) -labeled HRP-primary antibody of rabbit origin; wherein the rabbit antibody simultaneously binds to a filter-controlled positive control AFP to form the AFP-labeled HRP primary antibody of rabbit origin. After 3 seconds, the water in the filter, impregnated with a blood serum liquid, is absorbed by the water-absorbing material under the filter.
10 мкл PBST наносят каплями для промывания, чтобы удалить неспецифические конъюгаты, что повторяют трижды. Добавляют хромогенный субстрат для HRP, и после выдерживания без доступа света в течение 1 мин вносят каплями 10 мкл PBST для промывания. В области пятен для выявления с положительной сывороткой крови проявляются голубые пятна.10 μl of PBST is applied in drops for washing to remove non-specific conjugates, which is repeated three times. A chromogenic substrate for HRP was added, and after incubation without access of light for 1 min, 10 μl PBST was added dropwise for washing. Blue spots appear in the area of spots for detection with positive serum.
Пример 2Example 2
Опухолевый маркер AFPL3 в динамических образцах сыворотки крови из контрольной группы здоровых субъектов и экспериментальной группы пациентов с гепатокарциномой выявляли с помощью подготовленного иммунофильтрационного устройства.Tumor marker AFPL3 in dynamic blood serum samples from the control group of healthy subjects and the experimental group of patients with hepatocarcinoma was detected using the prepared immunofiltration device.
При комнатной температуре 2,5 мкл образца сыворотки крови разводят в четыре раза и затем наносят каплями на фильтр иммунофильтрационного устройства, при этом LCA связывается с фукозой в сыворотке крови с образованием соединения LCA-фукоза (AFP) благодаря использованию связывающих свойств LCA и фукозы; спустя 5 с вода в фильтре, пропитанном жидкостью сыворотки крови, поглощается водопоглощающим материалом под фильтром.At room temperature, 2.5 μl of a blood serum sample is diluted four times and then applied dropwise to the filter of an immunofiltration device, while LCA binds to fucose in the blood serum to form LCA-fucose (AFP) due to the binding properties of LCA and fucose; after 5 s, the water in the filter, impregnated with a blood serum liquid, is absorbed by the water-absorbing material under the filter.
10 мкл PBST наносят каплями для промывания, чтобы удалить неспецифические конъюгаты, что повторяют пять раз. Затем добавляют разведенное в PBS меченное HRP первичное антитело кроличьего происхождения, и антитело кроличьего происхождения связывается с антигеном AFP в сыворотке крови с образованием соединения LCA-фукоза (AFP)-меченное HRP первичное антитело кроличьего происхождения; при этом антитело кроличьего происхождения одновременно связывается с AFP положительного контроля, фиксированным на фильтре, с образованием соединения AFP-меченное HRP первичное антитело кроличьего происхождения. Спустя 5 с вода в фильтре, пропитанном жидкостью сыворотки крови, поглощается водопоглощающим материалом под фильтром.10 μl of PBST was applied dropwise to wash to remove non-specific conjugates, which was repeated five times. The rabbit-derived PBS labeled primary antibody diluted in PBS is then added and the rabbit antibody binds to serum AFP antigen to form the LCA-fucose (AFP) -labeled HRP primary antibody of rabbit origin; wherein the rabbit antibody simultaneously binds to a filter-controlled positive control AFP to form the AFP-labeled HRP primary antibody of rabbit origin. After 5 s, the water in the filter, impregnated with a blood serum liquid, is absorbed by the water-absorbing material under the filter.
10 мкл PBST наносят каплями для промывания, чтобы удалить неспецифические конъюгаты, что повторяют пять раз. Добавляют хромогенный субстрат для HRP, и после выдерживания без доступа света в течение 1 мин. вносят каплями 10 мкл PBST для промывания. В области пятен для выявления с положительной сывороткой крови проявляются голубые пятна.10 μl of PBST was applied dropwise to wash to remove non-specific conjugates, which was repeated five times. A chromogenic substrate for HRP is added, and after incubation without access of light for 1 min. add dropwise 10 μl of PBST for washing. Blue spots appear in the area of spots for detection with positive serum.
Подводя итог, следует отметить, что с помощью настоящей полезной модели достигается одновременное выявление нескольких антигенов или антител в образце сыворотки крови единовременно за более короткий промежуток времени благодаря применению миллипорового фильтра, и процесс выявления может осуществляться всего за 3-5 мин. Он обладает преимуществами экономии времени, низкой стоимости, хорошей стабильности и т.д.Summing up, it should be noted that using this utility model, simultaneous detection of several antigens or antibodies in a blood serum sample is achieved at a time for a shorter period of time due to the use of a millipore filter, and the detection process can be carried out in just 3-5 minutes. It has the advantages of saving time, low cost, good stability, etc.
Заявитель указывает, что подробно описанные структурные признаки настоящей полезной модели объясняются в вышеизложенных вариантах осуществления, но настоящая полезная модель не ограничивается вышеизложенными подробно описанными структурными признаками, другими словами, это не означает, что настоящая полезная модель должна быть реализована на основе изложенных выше подробно описанных структурных признаков. Специалисты в данной области техники должны понимать, что любое улучшение настоящей полезной модели, эквивалентная замена компонентов, выбранных для настоящей полезной модели, добавление вспомогательных компонентов, выбор конкретных вариантов и т.д., находятся в пределах объема правовой охраны и объема раскрытия настоящей полезной модели.The applicant indicates that the detailed structural features of the present utility model are explained in the above embodiments, but the present utility model is not limited to the above detailed structural features, in other words, this does not mean that the present utility model should be implemented based on the above detailed structural signs. Specialists in the art should understand that any improvement of the present utility model, equivalent replacement of the components selected for the present utility model, the addition of auxiliary components, the selection of specific options, etc., are within the scope of legal protection and the scope of disclosure of this utility model .
Предпочтительные варианты реализации настоящей полезной модели подробно описаны выше, и, тем не менее, настоящая полезная модель не ограничивается конкретными подробностями в приведенных выше вариантах реализации. В пределах объема технической идеи настоящей полезной модели для технического решения настоящей полезной модели допустимы многочисленные простые модификации, и все такие простые модификации находятся в пределах объема правовой охраны, предоставляемой настоящей полезной моделью.Preferred embodiments of the present utility model are described in detail above, and yet the present utility model is not limited to the specific details in the above embodiments. Within the scope of the technical idea of the present utility model, numerous simple modifications are permissible for the technical solution of the present utility model, and all such simple modifications are within the scope of legal protection provided by the present utility model.
Также необходимо указать, что, в случае отсутствия противоречия, конкретные технические признаки, описанные в приведенных выше вариантах реализации, можно комбинировать любым подходящим способом; и во избежание ненужных повторений в настоящей полезной модели не будут приведены дополнительные пояснения различных возможных способов комбинирования.It is also necessary to indicate that, in the absence of a contradiction, the specific technical features described in the above embodiments can be combined in any suitable way; and in order to avoid unnecessary repetitions in the present utility model, additional explanations of various possible combination methods will not be given.
Более того, различные варианты реализации настоящей полезной модели также можно комбинировать любым способом. При условии отсутствия противоречия с идеей настоящей полезной модели они также будут считаться содержанием, раскрытым в настоящей полезной модели.Moreover, various options for implementing this utility model can also be combined in any way. Provided that there is no contradiction with the idea of the present utility model, they will also be considered as the content disclosed in the present utility model.
Claims (2)
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610579801.7A CN106248959B (en) | 2016-07-21 | 2016-07-21 | A kind of immunity percolation method and immunity percolation device detecting serum fucose albumen |
| CN201610579801.7 | 2016-07-21 | ||
| PCT/CN2017/090864 WO2018014709A1 (en) | 2016-07-21 | 2017-06-29 | Immunofiltration method and immunofiltration device for serum fucose protein assay |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU198108U1 true RU198108U1 (en) | 2020-06-18 |
Family
ID=57145104
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2019104468U RU198108U1 (en) | 2016-07-21 | 2017-06-29 | Immunofiltration device for the analysis of fucosylated glycoprotein in blood serum |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3222251U (en) |
| CN (1) | CN106248959B (en) |
| AU (1) | AU2016101733A4 (en) |
| DE (1) | DE212017000022U1 (en) |
| PH (1) | PH12019500151A1 (en) |
| RU (1) | RU198108U1 (en) |
| WO (1) | WO2018014709A1 (en) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106248959B (en) * | 2016-07-21 | 2019-01-25 | 首都医科大学附属北京佑安医院 | A kind of immunity percolation method and immunity percolation device detecting serum fucose albumen |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2009104505A (en) * | 2009-02-11 | 2010-08-20 | Учреждение Российской академии наук Институт прикладной механики РАН (RU) | METHOD FOR SIMULTANEOUS IMMUNOCHROMATOGRAPHIC DETERMINATION OF AFP AND CEA ONCOANTIGENS |
| CN102053153A (en) * | 2010-11-25 | 2011-05-11 | 西安微通生物技术有限公司 | Dot immuno gold directed infiltration detection kit and application thereof |
| CN104849468A (en) * | 2014-08-05 | 2015-08-19 | 首都医科大学附属北京佑安医院 | Chemiluminescent protein chip, kit and detection method for detection of fucose index of seroglycoid |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1773286A (en) * | 2005-10-09 | 2006-05-17 | 北京微龙阵列生物技术有限公司 | Agglutinant competitive process liver cancer a-fetoglobulin heteroplasmon AFP-L3 quantitative test reagent kit |
| WO2011007764A1 (en) * | 2009-07-14 | 2011-01-20 | 独立行政法人産業技術総合研究所 | Sugar chain marker as measure of disease conditions of hepatic diseases |
| US20110223607A1 (en) * | 2010-03-12 | 2011-09-15 | Quest Diagnostics Investments Incorporated | Circulating microrna as a marker for hepatocellular carcinoma |
| CN102081100B (en) * | 2010-07-20 | 2015-06-24 | 李伯安 | Liver cancer multi-marker micro-array kit as well as preparation method and application thereof |
| CN103822878A (en) * | 2012-11-16 | 2014-05-28 | 上海市肿瘤研究所 | Lectin functionalized nanogold, and preparation method and application thereof |
| CN104502611A (en) * | 2014-12-25 | 2015-04-08 | 西安交通大学医学院第一附属医院 | Kit for detecting protein glycosylation subtype and detection method thereof |
| CN104714026B (en) * | 2014-12-31 | 2018-08-21 | 北京热景生物技术股份有限公司 | A kind of separation detection composition, system and its application of alpha-fetoprotein variant |
| CN104965088B (en) * | 2015-05-29 | 2016-05-04 | 广州华弘生物科技有限公司 | Alpha-fetoprotein variant AFP-L3 immue quantitative detection reagent box and application thereof |
| CN105891509B (en) * | 2016-05-03 | 2018-05-11 | 同昕生物技术（北京）有限公司 | For quantitatively detecting the lateral chromatography system of alpha-fetoprotein variant |
| CN106248959B (en) * | 2016-07-21 | 2019-01-25 | 首都医科大学附属北京佑安医院 | A kind of immunity percolation method and immunity percolation device detecting serum fucose albumen |
-
2016
- 2016-07-21 CN CN201610579801.7A patent/CN106248959B/en not_active Expired - Fee Related
- 2016-09-29 AU AU2016101733A patent/AU2016101733A4/en not_active Ceased
-
2017
- 2017-06-29 WO PCT/CN2017/090864 patent/WO2018014709A1/en active Application Filing
- 2017-06-29 JP JP2019600070U patent/JP3222251U/en not_active Expired - Fee Related
- 2017-06-29 RU RU2019104468U patent/RU198108U1/en active
- 2017-06-29 DE DE212017000022.8U patent/DE212017000022U1/en not_active Expired - Lifetime
-
2019
- 2019-01-21 PH PH12019500151A patent/PH12019500151A1/en unknown
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2009104505A (en) * | 2009-02-11 | 2010-08-20 | Учреждение Российской академии наук Институт прикладной механики РАН (RU) | METHOD FOR SIMULTANEOUS IMMUNOCHROMATOGRAPHIC DETERMINATION OF AFP AND CEA ONCOANTIGENS |
| CN102053153A (en) * | 2010-11-25 | 2011-05-11 | 西安微通生物技术有限公司 | Dot immuno gold directed infiltration detection kit and application thereof |
| CN104849468A (en) * | 2014-08-05 | 2015-08-19 | 首都医科大学附属北京佑安医院 | Chemiluminescent protein chip, kit and detection method for detection of fucose index of seroglycoid |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| COMUNALE M.A. et al. Identification and development of fucosylated glycoproteins as biomarkers of primary hepatocellular carcinoma // J Proteome Res., 2009, V.8, pp.595-602. * |
| SUZUKI Y. et al. Close topographical relationship in alpha foetoprotein (AFP) between a lens culinaris binding glycan and the epitope recognized by AFP-reactive monoclonal antibody, 18H4 // Br. J. Cancer, 1987, V.55, 147-152. * |
| SUZUKI Y. et al. Close topographical relationship in alpha foetoprotein (AFP) between a lens culinaris binding glycan and the epitope recognized by AFP-reactive monoclonal antibody, 18H4 // Br. J. Cancer, 1987, V.55, 147-152. COMUNALE M.A. et al. Identification and development of fucosylated glycoproteins as biomarkers of primary hepatocellular carcinoma // J Proteome Res., 2009, V.8, pp.595-602. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PH12019500151A1 (en) | 2019-10-14 |
| DE212017000022U1 (en) | 2018-02-12 |
| JP3222251U (en) | 2019-07-25 |
| CN106248959B (en) | 2019-01-25 |
| AU2016101733A4 (en) | 2016-10-27 |
| CN106248959A (en) | 2016-12-21 |
| WO2018014709A1 (en) | 2018-01-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ndao | Diagnosis of parasitic diseases: old and new approaches | |
| Kuno et al. | A serum “sweet-doughnut” protein facilitates fibrosis evaluation and therapy assessment in patients with viral hepatitis | |
| CN104634974B (en) | Detection, the discriminating conduct of intrahepatic cholangiocarcinoma | |
| US6916626B1 (en) | Detection of Candida | |
| CN104422772B (en) | A kind of time resolution immuno-chromatographic test paper strip of detection by quantitative pepsinogen I and preparation method thereof | |
| CN107765002B (en) | Colloidal gold immunochromatography test strip and preparation method and application thereof | |
| AU2006264946A1 (en) | Fibrosis markers | |
| JP2014062820A (en) | Membrane for immunochromatography test strip, test strip, and inspection method | |
| CN102081100A (en) | Liver cancer multi-marker micro-array kit as well as preparation method and application thereof | |
| KR20160119166A (en) | Combo-hepatitis antigen assays and kits for detection of active hepatitis virus infections | |
| US6723502B2 (en) | Hepatitis C antigen—antibody combination assay for the early detection of infection | |
| RU198108U1 (en) | Immunofiltration device for the analysis of fucosylated glycoprotein in blood serum | |
| US20210247392A1 (en) | Direct immunoassay measurement of autoantibodies | |
| CN111351924B (en) | Near-infrared fluorescence immunoassay kit based on enzyme-induced phosphate ion activation and detection method | |
| CN106442993A (en) | Preparation method of enzyme-linked immunosorbent assay kit for detecting ovarian cancer tumor marker CA125 based on trypsin fluorogenic substrate | |
| US9632086B2 (en) | Method and kit for determining-antibody sensitivity and clone cell strain | |
| CN110716050A (en) | Application of antigen combination in preparation of kit for detecting lung cancer related autoantibody, corresponding kit and detection method | |
| SøRENsEN et al. | Automated time-resolved immunofluorometric assay for Toxoplasma gondii-specific IgM and IgA antibodies: study of more than 130 000 filter-paper blood-spot samples from newborns | |
| Kuno et al. | Differential glycan analysis of an endogenous glycoprotein: toward clinical implementation—from sample pretreatment to data standardization | |
| CN116679066A (en) | Kit for quantitatively detecting high-efficiency matrix glycoprotein 73 based on fluorescence immunochromatography and application of kit | |
| CN111239411B (en) | Mycoplasma pneumoniae antibody IgG immunoassay kit, preparation method and use method thereof | |
| CN105974127A (en) | Human neutrophil apolipoprotein heterodimer quantifying device based on enzyme-linked immune adsorption technology | |
| CN206002549U (en) | A kind of human neutrophil apolipoprotein heterodimer proportioning device based on Enzyme-linked Immunosorbent Assay technology | |
| CN216771761U (en) | Cryptococcus detection card | |
| Wang et al. | A simple and effective method for detecting phosphopeptides for phosphoproteomic analysis |