RU1788013C - Индикатор дл определени наличи микроорганизмов в воде - Google Patents

Abstract

Использование: определение наличи  микроорганизмов в воде. Сущность: индикатор содержит 2,3,5-трифенилтетрззолий хлористый, этанол, нитро-тетразолий синий и воду. 2 табл.

Description

Изобретение относитс  к микробиологическому контролю и может быть использовано в микробиологии, микроэлектронике, биотехнологии дл  контрол , содержани  бактерий в деминерализованнрй воде.

В насто щее врем  дл  определени  микроорганизмов в воде используют способ выращивани  колоний бактерий на мембранных фильтрах, через которые пропускают определенный объем контролируемой воды.

Мембранный фильтр помещают в питательную среду и после инкубации в течение не менее 24 ч провод т подсчет количества колоний бактерий,, выросших на фильтре. Это значение характеризует содержание бактерий в контролируемой воде.

Дл  вы влени  колоний микроорганизмов используют индикатор - вещество, окрашивающее колонии бактерий.

Известен состав индикатора, включающий бриллиантовый зеленый, бромтимоло- вый синий, генциан фиолетовый и другие.

Однако указанные индикаторы не вы вл ют микроорганизмы, живущие в демине- рализованной воде.

Дл  определени  микроорганизмов в деминерализованной воде известны индикаторы фирм Milh pore США и Gelman ФРГ, окрашивающие микроорганизмы в красный цвет. Недостаток указанного индикатора в том, что врем  на определение колоний микроорганизмов (врем  инкубации) не менее 24 ч.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому положительному эффекту  вл етс  индикатор, содержащий 2,3,5-трифенилтетразолий хлористый (ТТХ) 0,005-0,01%, этанол ректификат 20-40%, остальное - дистиллированна  вода, окрашивающий микроорганизмы в красный цвет. Врем  инкубации не менее 24 ч. Указанный индикатор выбран в качестве прототипа .

Целью изобретени   вл етс  уменьшение времени проведени  анализа за счет сокращени  времени инкубации.

Указанна  цель достигаетс  тем, что в качестве индикатора дл  определени  наличи  микроорганизмов в воде используетс  смесь, содержаща  2,3,5-трифенилтетразолий хлористый, этанол и воду дистиллированную .

Сущность изобретени  заключаетс  в том, что он дополнительно содержит нитро- тетразолий синий при следующем соотношении ингредиентов, %:

2,3,5-трифенилтетразолий хлористый. 0,0017-0,005 нитро-тетразолий

синий0,0012-0,0025 этанол ректификат 5-19 дистиллированна  вода остальное П р и м е р. В приготовленный по прописи питательный агар РПА или ДПА добав- л ют 6 мл раствора предлагаемого индикатора при соотношении ингредиентов индикатора: ТТХ 0,0025%, нитро-СТ 0,0017%; этанол ректификат 12%; остальное - дистиллированна  вода. Полученный питательный агар с введенным индикатором наливают в стерильные чашки Петри, помещают в них фильтр, через который предварительно профильтровали пробу воды , и инкубировали при температуре 37±0,5°С. Через 14 ч по вилось четкое, хорошее окрашивание колоний бактерий без окрашивани  подложки. Подсчет колоний микроорганизмов проводили с помощью бинокул рной лупы п тикратного увеличени , Результаты указаны в табл.1 (сери  опытов 5.3). Аналогично описанному в примере провели серии испытаний индикаторг при различных соотношени х ингредиентов и их данные также указаны в табл.1.

Достижение поставленной цели иллюстрируетс  также многими данными табл.2, где показано, что дл  одной и той же анализируемой деминерализованной воды при использовании е качестве индикатора фирменного состава Millipore, ТТХ и смеси

ТТХ с нитро-СТ (предлагаемый индикатор) при практически совпадающем количестве обнаруженных колоний врем  инкубации уменьшаетс  значительно (на 7-10 ч) в случае использовани  предлагаемого мндикатора .

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   Индикатор дл  определени  наличи  микроорганизмов в воде, содержащий 2,3,5- трифенилтетразолий хлористый, зтанол,дм- стиллированную воду, о тличающийс  тем, что, с целью сокращени  сроков определени , дополнительно он содержит нит- ро-тетразолий синий при следующем соотношении ингредиентов, об.%:

   2,3,5-трифенилтетразолий

   хлористый0,0017-0,005

   нитро-тетразолий

   синий0,0012-0,0025 этанол ректификат 5-19

   дистиллированна  вода остальное.

   а б л и ц а 1

   Сравнительные данные ре упьтлтов испытаний индикатора при различных соотношени х ингредиентов

   ентов индикатора, при котором постигнута поставленна  цель, т.е. врем  инкубации меньше 2 i ц и подсчет колоний микроорганизмов возможен.

   Знаком - отмечено соотношение ингредиентов индикатора, при котором не достигнута поставленна  цель, т.к. врем  инкубации 2 или более члсоо или подсчет колоний микроорганизмов невоз- можен из-зп очень слабого окрашивани  колоний или из-за слабого или  ркого окрашивани  подложки, на фоне которого нельз  подсчитать колонии микроорганизмов.

   Рост микроорганизмов при анализе деминерализованной воды на разных

   питательных средах и с различными индикаторами Таблица 2