RU1782568C - Способ замораживани эмбрионов или йцеклеток - Google Patents
Способ замораживани эмбрионов или йцеклетокInfo
- Publication number
- RU1782568C RU1782568C SU904855540A SU4855540A RU1782568C RU 1782568 C RU1782568 C RU 1782568C SU 904855540 A SU904855540 A SU 904855540A SU 4855540 A SU4855540 A SU 4855540A RU 1782568 C RU1782568 C RU 1782568C
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- freezing
- cryoprotectant
- medium
- container
- embryos
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Использование: животноводство, а именно консервирование биологических объектов. Сущность изобретени : заполнение цилиндрического контейнера первым воздушным пузырьком осуществл ют при условии соотношени диаметра воздушного пузырька к внутреннему диаметру контейнера 2:1. Замораживание эмбрионов или йцеклеток провод т в вертикально расположенном контейнере. При замораживании температуру среды с криопротектором и эмбрионом или йцеклеткой поддерживают выше температуры среды дл выведени криопротекторанеменеечемна 15°С. 1 ил., 2 табл.
Description
Изобретение относитс к сельскому хоз йству , в частности к технике консервировани биологических объектов, например эмбрионов и йцеклеток млекопитающих, и может быть применено в центрах и пунктах трансплантации и в биологических лаборатори х .
Известен способ замораживани эмбрионов в соломинках, по которому заправл ют цилиндрический контейнер средой дл выведени криопротектора, первым воздушным пузырьком, средой с криопротектором и эмбрионом или йцеклеткой, вторым воздушным пузырьком, средой дл выведени криопротектора, замораживают до - 30°С и перенос т в жидкий азот.
При достижении -7°С камера установки вскрываетс , оттуда извлекаетс контейнер с эмбрионом или йцеклеткой, и оператор переохлажденном в жидком азоте пинцетом касаетс стенки контейнера. Убедившись , что в контейнере образуютс первые
кристаллы льда, контейнер укладывают на место и провод т посев льда в следующем.
К недостаткам данного способа следует отнести сложность процесса замораживани , возможное изменение режима, что может привести к гибели эмбрионов.
Цель изобретени - повышение сохранности зародышей после деконсервации, упрощение технологического режима замораживани и снижение затрат на крио- консервацию эмбрионов и йцеклеток.
Поставленна цель достигаетс тем, что в способе замораживани эмбрионов или йцеклеток, включающем заполнение цилиндрического контейнера средой дл выведени криопротектора, первым воздушным пузырьком, средой с криопротектором и эмбрионом или йцеклеткой, вторым воздушным пузырьком, средой дл выведени криопротектора, замораживание до -30°С и перенос в жидкий азот, заполнение цилиндрического контейнера
Х|
00
ю
СЛ О 00
первым воздушным пузырьком осуществл ют при условии соотношени диаметра воздушного пузырька к внутреннему диаметру контейнера 2:1, а замораживание провод т в вертикально расположенном контейнере, причем при замораживании температуру среды с криопротектором и эмбрионом или йцеклеткой поддерживают выше температуры среды дл выведени криопротектора не менее чем на 15°С.
Вли ние размера первого воздушного пузырька йа протекание искусственной инициации кристаллизации показано в табл. 1,
Дл прорастани кристаллов льда при температуре посева льда необходимо, чтобы они уже находились в нижней части. Это достигаетс тем, что температура там всегда ниже, чем в верхней части контейнера. Веро тность образовани кристаллов и их прорастани из нижней-части контейнера в верхнюю показана в табл. 2.
На чертеже изображен контейнер дл замораживани эмбрионов по предлагаемому способу.
Пример. Цилиндрический контейнер дл замораживани 1 с пробкой 2 заправл ют в следующей последовательности: средой дл выведени криопротектора 3 на 35 мм, воздушным пузырьком 4 на 2-3 мм (оптимальность такого размера пузырька показала в табл. 1), средой с криопротектором 7 на 30 мм и эмбрионом 6, воздушным пузырьком 8 на 5-10 мм, средой дл выведени криопротектора 9. Воздушные пузырьки предназначены дл разведени сред дл выведени криопротектора 3, 9 и замораживани 7 в течение криоконсерва- ции. Первый воздушный пузырек4 приобретает новое свойство, так как он используетс не только дл разделени сред 3 и 7, но и дл прорастани кристаллов льда. Это достигаетс разделением сред 3 и 7 в йесте касани поверхности воёдуш ного пузырька 4 размером 2-3 мм с внутренней стенкой контейнера 1. Контакт между двум средами осуществл етс тонким слоем жидкости 5, адсорбированным на внутренней поверхности контейнера 1.
Замораживание провод т в вертикально расположенном контейнере. При сниже- нии температуры среды с криопротектором и эмбрионом, расположенной в центральной части контейнера, температуру среды дл выведени криопротектора, наход щейс в нижней части контейнера, поддержива- 0 ют ниже температуры центральной части не меньшее чем на 15°С.
Предложенный способ замораживани эмбрионов или йцеклеток обладает р дом преимуществ. Улучшаетс технологичность режима замораживани , так как не требуетс вмешательства оператора и доступа к объекту, что исключает нарушение режима замораживани , повышает сохранность эмбрионов после замораживани - оттаивани , при этом улучшаютс услови труда технологов.
Claims (1)
- Формула изобретениСпособ замораживани эмбрионов или йцеклеток, включающий заполнение цилиндрического контейнера средой дл выведений криопротектора, первым воздушным пузырьком, средой с криопротектором и эмбрионом или йцеклеткой, вторым воздушным пузырьком, средой дл выведени криопротектора, замораживание до -30°С и перенос в жидкий азот, отличающий- с тем, что, с целью, повышени сохранности зародышей после деконсервации, упрощени технологического режима замораживани и снижени затрат, заполнение цилиндрического контейнера первым воздушным пузырьком осуществл ют при условии соотношени диаметра воздушного пузырька и внутреннего диаметра контейнера 2:1, а замораживание провод т в вертикально расположенном контейнере, причем при замораживании температуру среды с криопротектором и эмбрионом или йцеклеткой поддерживают выше темпера- туры среды дл выведени криопротектора не менее, чем на 15°С.Таблица 1050505Таблица 2
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU904855540A RU1782568C (ru) | 1990-07-30 | 1990-07-30 | Способ замораживани эмбрионов или йцеклеток |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU904855540A RU1782568C (ru) | 1990-07-30 | 1990-07-30 | Способ замораживани эмбрионов или йцеклеток |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU1782568C true RU1782568C (ru) | 1992-12-23 |
Family
ID=21530063
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU904855540A RU1782568C (ru) | 1990-07-30 | 1990-07-30 | Способ замораживани эмбрионов или йцеклеток |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU1782568C (ru) |
-
1990
- 1990-07-30 RU SU904855540A patent/RU1782568C/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Безуглый Н.Д. Осмотическа реакци йцеклеток и эмбрионов млекопитающих при криоконсервации: Дис. канд. биол. наук, 1984. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US10244749B2 (en) | Micromanipulation and storage apparatus and methods | |
US9169460B2 (en) | Flooding dish and method for changing media in the dish in the preparation of mammalian specimen culture and for cryo-preservation, freezing, vitrification and the thawing and warming of such specimens | |
Vajta et al. | Sterile application of the open pulled straw (OPS) vitrification method | |
Renard et al. | High survival of mouse embryos after rapid freezing and thawing inside plastic straws with 1–2 propanediol as cryoprotectant | |
US8633023B2 (en) | Method of liquid nitrogen surface vitrification | |
EP1028623B1 (en) | Method for cryopreservation | |
CN104918487B (zh) | 利用矿物成核剂进行冷冻的方法 | |
Gandhi et al. | Appendix A: Cryotech® vitrification thawing | |
RU1782568C (ru) | Способ замораживани эмбрионов или йцеклеток | |
JP2005040073A (ja) | 生殖細胞の凍結保存方法及び凍結保存容器 | |
Inna et al. | Rapid freezing versus Cryotop vitrification of mouse two-cell embryos | |
Bondioli | Cryopreservation of bovine embryos | |
CN214841876U (zh) | 一种可控温液氮装置 | |
CN117063916A (zh) | 一种提高移植受胎率的奶牛体外胚胎冷冻方法 | |
WO2010124663A2 (en) | Method for adding, removing or exchange a liquid medium in culturing biological cells and culture device | |
JP2582327B2 (ja) | 哺乳動物胚の凍結保護物質の簡易除去法 | |
Berkovitz et al. | Single Sperm Cryopreservation for Azoospermia Management | |
US20220408718A1 (en) | Aqueous solution for cell preservation | |
Gosden | Techniques for slow cryopreservation of embryos | |
Amer et al. | Cryopreservation of rare ejaculate and testicular spermatozoa, a novel simple technique; the culture dish slice freezing: A pilot study. | |
Nagy et al. | The human embryo: Vitrification Vitrification | |
JP2001328901A (ja) | マウス精子凍結保存用キット | |
Talwar | Embryo Vitrification | |
SU986412A1 (ru) | Устройство дл сохранени и транспортировки биологических объектов в замороженном состо нии | |
JP2889654B2 (ja) | 植氷凍結装置 |