RU1779377C - Средство, обладающее антибактериальной активностью - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к медицинской микробиологии и может быть использовано дл  повышени  общего иммунологического статуса и борьбы со стафилококковой инфекцией . Цель - повышение биологической активности средства. Сущность изобретени : средство содержит живую культуру ацидофильных лактобактерий в сочетании с комплексом сывороточных иммуноглобулинов , вз тых в одинаковых весовых част х, при концентрации жизнеспособных микробных клеток 10 -10 на массу 0,1 г и процентном соотношении компонентов в комплексе иммуноглобулина G:M:A, равном (55-60):(20-25):(15-20). Положительный эффект: средство обладает высокой биологической активностью за счет дво кого механизма противомикробного действи . сл с

Description

Изобретение относитс  к медицине, в частности к медицинской микробиологии и микробиологической технологии, и касаетс  составов лечебных препаратов, содержащих эубиотики.

Высокий уровень носительства патогенных и условно-патогенных микроорганизмов на слизистых полостей, и в частности ороназофарингеальной и вагинальной , представл ет потенциальную опасность развити  воспалительных процессов , что приобретает особую значимость в услови х растущего распространени  лекарственно-устойчивых штаммов. Проблема санации т. называемого здорового носительства госпитальных штаммов, а также лечени  обусловленных ими уже развившихс  неспецифических воспалительных

процессов приобретает особую активность дл  контингентов ослабленных групп - детей раннего возраста, беременных женщин, реконвалесцентов после длительных заболеваний и др В числе таких групп особо ранимыми  вл ютс  лица с нарушенным иммунологическим статусом,который нередко сочетаетс  с дисбактериозом.

Лечение таких пациентов антибиотиками и другими химиотерапевтическими препаратами не достигает должного эффекта и еще более усугубл ет дисбактериоз при одновременном снижении общей иммунологической резистентности. Это требует новых подходов к тактике терапии путем использовани  м гко действующих препаратов биологической природы, свободных

3

«

vj

от побочного действи  химических противо- микробных средств

Известны составы дл  лечени  неспецифических гнойно-воспалительных процессов ороназофарингеальной области, содержащие противостафилококковый анатоксин и бактериофаг в различных сочетани х с дезинфицирующими средствами и др. Однако эти составы характеризует узка  направленность санирующего действи  против стафилококковой этиологии носи- тельства и отсутствие активности против других этиологических факторов, в том числе грамотрицательных микробов, которые приобретают все более важную роль в развитии неспецифических воспалений указанных открытых полостей.

Дл  целей повышени  иммунологической резистентности у ослабленных больных находит применение коммерческий гамма-глобулин. Однако, в его составе содержитс  главным образом / -иммуноглобулин , тогда как антибактериальные антитела относ тс  к фракции М Этим можно объ снить недостаточную эффективностьобычныхпрепаратов гамма-глобулина при острых инфекци х у детей раннего возраста, кровь которых отличаетс  низким содержанием иммуноглобулинов классов М и А. Очевидно, что дл  преодолени  этого недостатка необходимы иммуноглобулиновые препараты обогащенного состава, содержащие как G, так М и А-антитела. Наиболее обоснованным и перспективным дл  указанных целей следует считать подбор сочетаний таких обогащенных иммуноглобулиновых комплексов с микробными эубиотиками, обладающими достаточно широким спектром и высоким уровнем антагонистической активности против возбудителей современных инфекций оппортунистического р да.

Наиболее близким к за вл емому  вл етс  состав, содержащий живую культуру молочнокислых бактерий и бифидобактерий согласно патенту США 1986 г. Из описани  данного аналога, прин того за прототип, следует, что примен емый состав содержит посуществу три микробных компонента, поскольку в его технологии, кроме молочнокислых и бифидобактерий, используетс  культура термофильного стрептококка.

Однако наличие трехкомпонентного межвидового микробного комплекса в составе препарата указывает на недостаточную активность молочнокислых бактерий в чистом виде, вход щих в препарат. Вместе с тем, усложнение состава  вл етс  нежелательным качеством препарата из живых культур микроорганизмов в силу сложности

технологии, а главное качественного контрол  за стабильностью каждого из компонентов . Кроме того, включение в состав прототипа указанного третьего микробного

компонента требует использовани  в качестве ростового субстрата молока, что снижает биологическую активность препарата дл  значительного контингента больных из числа наиболее ослабленных групп, страдающих лактазной недостаточностью. Преодоление данного недостатка требует дополнительных разработок, которые порой служат предметом специальных изобретений . К числу существенных

недостатков прототипа следует также отнести и ограниченность механизма его действи , который определ етс , в первую очередь, местным коррекционным вли нием на микрофлору патологического очага и

не направлен на быстрое купирование воспалени  и санацию от возбудител  при помощи противомикробных антител через иммунную систему.

В отличие от прототипа, за вл емое

средство, нар ду с полезно действующими живыми микробами, содержит в своем составе мощный иммуноглобулиновый компонент , что определ ет вторую, не менее важную сторону антибактериальной активности . Последн   обеспечивает не только местное подавление патогенного начала в очаге воспалени , но и стимулирует быструю противомикробную защиту через системный иммунитет. Таким образом,

приведенное сопоставление четко определ ет принципиальные преимущества по биологической активности за вл емого средства перед известным.

Приведенные соображени  иллю стрируютс  как результатами лабораторных наблюдений за стабильностью показателей биологической активности средства в процессе хранени  (таблицы 1, 2, 3 Акта в комплекте первичных документов за вки),

так и данными экспериментов на модели острой диареи у обезь н.

В группе из 15 обезь н, страдающих острой диареей (жидкий стул с кровью), применение через рот или ректально комплекса иммуноглобулинов КИП в составе средства обеспечивало купирование диареи уже к 3- 4 дню лечени . При исследовании сыворотки крови леченых обезь н в РПГА

обнаружено повышение титров антител против шигелл, эшерихий и сальмонелл на 2-3 двукратных разведени  по сравнению с исходным, что указывало на поступление средства в кровь после энтерального введени 

Кроме больных обезь н, свечи с КИП были испытаны на трех здоровых обезь нах массой тела 8-10 кг с целью контрол  за состо нием сывороточных антител. Кровь дл  серологических исследований брали до введени  свечей, а также на 3-й и 7-й день после их применени . В РПГА определ ли титры антител против эшерихий, шигелл и сальмонелл. У всех обезь н на 3 сутки отмечено нарастание титров антител к E.coli (О - диагностикум комплексный) на 2-3 двукратных разведени  по сравнению с исходными и сохранение повышенных титров до 7 суток , что свидетельствовало о поступлении средства в кровь после ректального введени .

Цель изобретени  - повышение биологической активности средств, содержащих микробные эубиотики.

Поставленна  цель достигаетс  тем, что средство содержит живую культуру ацидофильных лактобактерий в сочетании с комплексом сывороточных иммуноглобулинов в одинаковых весовых част х при концентрации жизнеспособных микробных клеток 107-108 на массу 0,1 г и процентном соотношении компонентов в комплексе иммуноглобулинов G:M:A,равном (55-60):(20-25): :(15-20).

В зависимости от способа введени  за вл емое средство представл ет собой две различных лекарственных формы, а именно:

1)таблетки дл  орального применени , содержащие:

сухую биомассу ацидофильных лактобактерий25% -0,1 г

сухую биомассу комплекса иммуноглобулинов25% -0.1 г сахарный гранул т50% - 0,2 г стеарат кальци  1.0% - 0,004 г тальк 1,0% -0,004 г

2)медицинские свечи дл  интраваги- нального введени  содержат:

сухую биомассу ацидофильных лактобактерий10 ,0%-0,2 г.

сухую биомассу комплекса иммуноглобулина ,10,0%-0,2 г кондитерский жир 80,0% - 1,5% г парафин7,0% -0.15 г Способ получени  предлагаемого двухкомпонентного средства заключаетс  в следующем.

Йммуноглобулиновый компонент КИП получают из III фракции Кона (осадок В) путем солевой экстракции, с последующей обработкой экстракта осадка В хлороформом и декстрансульфатом с целью удалени  липопротеидов; далее осуществл ют осаждение иммуноглобулинов водорастворимым полимером полиэтиленгликолем (ПЭГ)

в концентрации 12%. Готовый препарат содержит 2% глюкозы. Дл  предотвращени  фрагментации Ig p препарат лиофилизиру- ют. В сухом препарате содержитс  комп- 5 леке иммуноглобулинов р , М, А в соотношении55-60%, 20-25% и 15-20% соответственно . По сравнению с коммерческим иммуноглобулином КИП содержит повышенные титры антител против р да эн0 теробактерий (шигелл, сальмонелл, эшерихий ), а также против псевдомонад, менингококков и ротавирусов.

Дл  получени  микробного компонента биомассу ацидофильных лактобактерий

5 выращивают в казеиново-дрожжевой среде и сушат лиофильным способом. Сухую микробную биомассу соедин ют с сухой биомассой КИП в соотношении 1: 1 и используют дл  приготовлени  оральной

0 или ректальной формы за вл емого средства .

Дл  получени  таблеточной формы к смешанной биомассе добавл ют структурные и вспомогательные вещества. Получае5 мый состав тщательно перемешивают и таблетируют на ротационном прессе любой марки.

Дл  получени  свечей смешанную биомассу соедин ют с расплавленной жировой

0 основой. Полученный состав перемешивают и разливают в охлажденный формовочный аппарат.

За вл емое средство обладает высокой пр мой антибактериальной активно5 стью против широкого круга патогенных и условно-патогенных микробов местно в очаге воспалени  или носительства и одновременно содержит антимикробные антитела

0 против кишечной палочки, сальмонелл, шигелл , псевдомонад и менингококка, тогда как обычно примен емый нормальный человеческий гамма-глобулин содержит IgM только в количестве не более 4% от общего

5 белка. Таким образом, средство обеспечивает антибактериальную активность за счет поступающих в кровь антител против таких распространенных этиологических факторов патологии, как шигеллы, сальмонеллы,

0 энтеропатогенные кишечные палочки, псевдомонады , менингококк, ротавирусы и др.

В группе из 30 взрослых здоровых людей-добровольцев были изучены иммуноло- 5 гические сдвиги в сыворотке крови после введени  комплекса иммуноглобулинов в состав средства, содержанию 0-антител в РПГА с эритроцитарными диагностикумами - сальмонеллезными (комплексным), из шигелл Флекснера и эшерихиозным (комплексным ). Средство вводили через рот (таблетки ) или ректально (свечи).

После однократного перорального введени  через 2 дн  было вы влено нарастание титров антител к энтеробактери м на 2-3 двукратных разведени  у всех добровольцев . После ректального введени  отмечено нарастание титров антител к энтеробактери м также через 2 дн , преимущественно на 2 двукратных разведени . Группе добровольцев через 3 недели после перорального введени  средство было применено ректально. Вы влено повторное нарастание титров антител до уровн , достигнутого при пероральном введении.

В прилагаемом акте лабораторных испытаний за вл емого средства приведены данные об удовлетворительной стабильности микробного и иммуноглобулинового компонентов в его составе при длительном хранении.

Таким образом, предлагаемое средство отличаетс  от ранее известных одновре- менным наличием антибактериальной активности дво кого механизма действи  (местный и системный), что предусматривает сочетанное воздействие как непосредственно на микрофлору патологического очага, так и на общую иммунную систему организма.

Результаты предварительных клинических испытаний определ ют перспективность применени  за вл емого средства с целью лечени  воспалительных процессов

открытых полостей и быстрой санации от возбудителей оппортунистических инфекций у лиц с ослабленным иммунологическим статусом и принадлежавших к группам риска по развитию инфекции. Внедрение средства в арсенал отечественных средств бактериальной терапии предполагает и определенный экономический эффект за счет сокращени  сроков лечени  и расхода менее действенных эубиотиков моносостава, а также нормального иммуноглобулина. Замена инъекционного пути введени  последнего на энтеральный у таких больных облегчает лечебную процедуру, что особенно существенно дл  детей, которые составл ют наиболее обширный контингент нуждающихс  в коррекционной бактерио- и иммунотерапии.

Claims (1)

1. Формула изобрет.ени 

   Средство, обладающее антибактериальной активностью, содержащее микробные эубиотики, отличающеес  тем, что, с целью повышени  биологической активности , в качестве микробного эубиотика средство содержит живую культуру ацидофильных лактобактерий и дополнительно комплекс сывороточных иммуноглобулинов G, М, А при следующем соотношении компонентов . мас.%:

   жива  культура ацидофильных лактобактерий в концентрации 107-10/ 1г 50

   комплекс сывороточных иммуноглобулинов G:M:A(55-60):(20-25):(15-20) 50