RO137220A0 - Biomaterial compozit poros cu proprietăţi de stimulare a regenerării ţesutului dermic - Google Patents
Biomaterial compozit poros cu proprietăţi de stimulare a regenerării ţesutului dermic Download PDFInfo
- Publication number
- RO137220A0 RO137220A0 ROA202200483A RO202200483A RO137220A0 RO 137220 A0 RO137220 A0 RO 137220A0 RO A202200483 A ROA202200483 A RO A202200483A RO 202200483 A RO202200483 A RO 202200483A RO 137220 A0 RO137220 A0 RO 137220A0
- Authority
- RO
- Romania
- Prior art keywords
- hours
- temperature
- minutes
- biomaterial
- gelatin
- Prior art date
Links
- 239000012620 biological material Substances 0.000 title claims abstract description 39
- 239000002131 composite material Substances 0.000 title claims abstract description 22
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 title abstract description 14
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 title abstract description 8
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 title description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 22
- 239000000499 gel Substances 0.000 claims abstract description 21
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 claims abstract description 20
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 claims abstract description 19
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 claims abstract description 19
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 claims abstract description 19
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 claims abstract description 19
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims abstract description 18
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 claims abstract description 15
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 claims abstract description 15
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 claims abstract description 15
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims abstract description 14
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 claims abstract description 13
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 claims abstract description 13
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 12
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 claims abstract description 12
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 claims abstract description 12
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 claims abstract description 11
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 claims abstract description 11
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 10
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 claims abstract description 9
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 claims abstract description 9
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims abstract description 8
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 claims abstract description 8
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 claims abstract description 8
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 5
- 238000007654 immersion Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 5
- 230000005855 radiation Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 claims abstract description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 22
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 claims description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 claims description 6
- 229920002959 polymer blend Polymers 0.000 claims description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 6
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 5
- 238000000527 sonication Methods 0.000 claims description 5
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 claims description 3
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 claims description 3
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 3
- -1 polyethylene Polymers 0.000 claims description 3
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 claims description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 claims description 2
- 235000019422 polyvinyl alcohol Nutrition 0.000 claims 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 abstract description 7
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 abstract description 7
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 abstract description 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 abstract description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 27
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 18
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 9
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 9
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 8
- 238000006065 biodegradation reaction Methods 0.000 description 7
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 7
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 7
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 7
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 7
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 6
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 4
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 4
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 4
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 4
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 4
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 4
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 4
- 229920005615 natural polymer Polymers 0.000 description 4
- 230000002020 noncytotoxic effect Effects 0.000 description 4
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 4
- 206010040882 skin lesion Diseases 0.000 description 4
- 231100000444 skin lesion Toxicity 0.000 description 4
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 4
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 3
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 3
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 3
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 3
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 3
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 3
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 3
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 3
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 3
- 231100000065 noncytotoxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 3
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 2
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 2
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 2
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 2
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 2
- 230000003750 conditioning effect Effects 0.000 description 2
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 230000002439 hemostatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 2
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 2
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 2
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 2
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 2
- AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide Chemical compound [Br-].S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-2-(trifluoromethoxy)pyridine Chemical compound FC(F)(F)OC1=CC=C(Br)C=N1 SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229920001287 Chondroitin sulfate Polymers 0.000 description 1
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 description 1
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- 108020005199 Dehydrogenases Proteins 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 108010022355 Fibroins Proteins 0.000 description 1
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 description 1
- 238000000134 MTT assay Methods 0.000 description 1
- 231100000002 MTT assay Toxicity 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 206010040943 Skin Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 208000028990 Skin injury Diseases 0.000 description 1
- 206010072170 Skin wound Diseases 0.000 description 1
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 238000012382 advanced drug delivery Methods 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N calcein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(CN(CC(O)=O)CC(O)=O)=C(O)C=C1OC1=C2C=C(CN(CC(O)=O)CC(=O)O)C(O)=C1 DEGAKNSWVGKMLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229940059329 chondroitin sulfate Drugs 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 229940096422 collagen type i Drugs 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000011888 foil Substances 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001879 gelation Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000010872 live dead assay kit Methods 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- 239000002121 nanofiber Substances 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 229960002378 oftasceine Drugs 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 238000013379 physicochemical characterization Methods 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 description 1
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 1
- 229920002635 polyurethane Polymers 0.000 description 1
- 239000004814 polyurethane Substances 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 238000006748 scratching Methods 0.000 description 1
- 230000002393 scratching effect Effects 0.000 description 1
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 1
- 230000008591 skin barrier function Effects 0.000 description 1
- 231100000019 skin ulcer Toxicity 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003536 tetrazoles Chemical class 0.000 description 1
- 208000037816 tissue injury Diseases 0.000 description 1
- 230000007838 tissue remodeling Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 1
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 1
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 1
- 239000002676 xenobiotic agent Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Materials For Medical Uses (AREA)
Abstract
Invenţia se referă la un procedeu de obţinere a unui biomaterial compozit poros cu proprietăţi de stimulare a regenerării ţesutului dermic. Procedeul, conform invenţiei, constă în etapele: preparare a unei soluţii de alginat de sodiu de concentraţie 3%, respectiv, a unei soluţii de gelatină 4%, precum şi a unei soluţii de alcool polivinilic de concentraţie 10%, prin dizolvare în apă ultrapură, sub agitare continuă, răcirea soluţiilor preparate la temperatura de maximum 40°C, amestecare cu agitare puternică, în rapoarte masice de 1:0,2...0,5:0,1...0,4,, adăugare a unei pulberi de metilceluloză, urmată de răcire şi adăugare a 0,01...0,1% fibronectină sau heparină, repartizarea compoziţiei polimerice în plăci Petri şi incubarea la 4°C timp de 30 min, reticulare a gelurilor prin imersare într-o soluţie de clorură de calciu 2% timp de 2...3 h, urmată de spălare repetată de 3...5 ori, liofilizarea gelurilor reticulate timp de 48...72 h, urmată de tăierea la dimensiuni, din care rezultă un biomaterial poros la dimensiuni dorite care este sterilizat prin iradiere cu radiaţii UV , timp de 8...12 h.
Description
BIOMATERIAL COMPOZIT POROS CU PROPRIETĂȚI DE STIMULARE A REGENERĂRII ȚESUTULUI DERMIC
Autori:
Ștefan Lama Mihaela, Uțoiu Elena, Seciu-Grama Ana-Maria, Prelipcean Ana-Maria, losăgeanu Andreea, Moldovan Lucia, Crăciunescu Oana
Prezenta propunere de invenție se referă la un nou biomaterial compozit poros pe bază de polimeri naturali și sintetici utilizabil în medicină ca suport pentru stimularea procesului de regenerare a leziunilor țesutului dermic, precum și la un procedeu de obținere al acestuia.
Biomaterialul se prezintă sub formă de compozit polimeric cu structură poroasă, biocompatibil și biodegradabil, cu proprietăți fizico-chimice și biologice care stimulează viabilitatea, proliferarea și aderarea celulelor specifice țesutului dermic (fibroblaste, keratinocite) în structura sa alveolară, facilitând astfel procesul de vindecare a leziunilor.
Pielea este cel mai vast și complex organ al corpului uman, care joacă un rol important în menținerea homeostaziei, precum și în protecția față de mediul înconjurător și împotriva agenților patogeni. Structura complexă, ierarhică și stratificată a pielii acționează ca o barieră fizică împotriva pătrunderii de xenobiotice în organism și, de asemenea, reglează transportul apei și a metaboliților în afara organismului (Lee V et al., Tissue Engineering C: Methods, 20, 473-484, 2014; Yan WC et al., Advanced Drug Delivery Reviews, 132,270-295,2018). Rănile care provin din traume fizice sau chimice pot compromite semnificativ bariera pielii și pot afecta funcțiile sale fiziologice. în cazul în care o parte importantă a pielii a fost pierdută în urma unei traume, înlocuirea pielii lezate cu grefe devine critică pentru a proteja pierderea apei din organism, a atenua riscul reprezentat de agenții patogeni și a promova procesul de vindecare.
Folosirea de biomateriale pe bază de polimeri naturali și sintetici, care se aseamană structural și funcțional cu țesuturile umane, precum și a unor surse de celule reprezintă o alternativă la grefele de piele (Jang J et al., Biomaterials, 156, 88-106, 2018). Aceste biomateriale trebuie să îndeplinească anumite caracteristici, cum ar fi: să fie ușor de manevrat și aplicat pe suprafața lezată, să fie biodegradabile, necitotoxice, să prezinte o reactivitate inflamatorie minimă, să fie bine tolerate de organism, să stimuleze proliferarea și aderarea celulară, să aibă proprietăți fizice și mecanice adecvate și să asigure reconstrucția țesutului normal (Vyas & Vasconez, In: Healthcare (Basel, Switzerland), 2(3), 356-400,2014).
în ultimii ani, există un interes crescut pentru dezvoltarea de biomateriale compozite în vederea autorizării lor în construcția unor substituenți echivalenți de piele. Interesul pentru aceste materiale se bazează, în principal, pe faptul că structura și proprietățile lor sunt similare cu cele ale matricei extracelulare native (Caliari SR et al., Nature Methods, 13(5), 405-414, 2016).
Se știe că, matricile poroase pe bază de polimeri naturali, cum sunt colagenul și gelatina, sunt biocompatibile, prezintă proprietăți hemostatice, biodegradabilitate controlată, antigenicitate scăzută, precum și capacitate de a stimula creșterea și proliferarea celulelor (Suarato G et al., Frontiers in Bioengineering and Biotechnology, 6, 137, 2018). Aplicate pe răni, ca și pansamente, acestea sunt hemostatice, absorb exudatul rănii și mențin un mediu prielnic pentru creșterea celulelor, stimulând astfel procesul de vindecare (Gorgieva S & Kokol V, In: Biomaterials Applications for Nanomedicine, 17-52, 2011). Studii anterioare au descris o serie de compozite obținute prin combinarea biopolimerilor colagen și gelatină cu alți compuși naturali, precum polizaharidele de origine animală (acid hialuronic, chitosan) sau vegetală (celuloză), polifenoli din plante și diverși polimeri sintetici biocompatibili (poliuretani, alcool polivinilic, polietilen glicol, acid polilactic, polivinil pirolidonă, etc) (Gaspar-Pintiliescu A et al., International Journal of Biologicul Macromolecules, 138, 854-865, 2019; Vasile C et al., Polymers, 11(6), 941, 2019; Râpă M et al., Brevet RO 132576B1/2021).
în literatura brevetelor s-a raportat că proteinele și polizaharidele matricei extracelulare, precum colagenul și glicozaminoglicanii (condroitin sulfat, acid hialuronic) se pot asocia in vitro în structuri complexe, tridimensionale, care constituie un suport pentru celule din punct de vedere mecanic și reprezintă o bază pentru remodelarea și reepitelizarea țesutului (Brevet RO 115693B1/2000). De asemenea, au fost descrise compoziții pentru ghidarea regenerării tisulare pe bază de colagen și chitosan cu efect în tratarea escarelor pielii. S-a observat că acest material compozit condiționat sub formă de bureți, hidrogeluri sau nanofibre, prezintă proprietăți biocompatibile, nu produce inflamație și este necitotoxic, are performanțe mecanice bune și eficiență în stimularea creșterii celulare (Brevet EP 3620186A1/2020). în brevetul WO2019175036A1 este prezentată o metodă de obținere a unui material poros pentru regenerarea tisulară pe baza unui amestec format dintr-o proteină insolubilă, fibroina și polizaharidele acid hialuronic și celuloză. Produsul realizat prezintă un grad scăzut de biodegradare la locul aplicării și mimează structura matricei extracelulare. Brevetul WO2004002460A1 descrie un produs pentru tratarea pielii lezate pe 2
RO 137220 AO
3^ bază de polimeri sintetici, respectiv carboximetilceluloză și polivinilpirolidonă, condiționat sub formă de filme sau folii spongioase. înainte de aplicarea pe rană, biomaterialul solid se infuzează în soluții de acid ascorbic, vitamina E sau colagen tip I pentru îmbunătățirea procesului de regenerare.
Problema tehnică pe care o rezolvă prezenta propunere de invenție constă în realizarea unui nou biomaterial condiționat sub formă de compozit polimeric spongios steril, biodegradabil și biocompatibil, având în compoziția sa componente biopolimerice, cum sunt: proteina gelatină și polizaharidul natural alginat, cu efect de stimulare a procesului de regenerare a țesutului dermic, precum și polimeri sintetici biocompatibili, alcoolul polivinilic și metilceluloza, care asigură și rezistența mecanică a produsului. Componentele sunt asociate într-o manieră care oferă compoziției condiționate sub formă de structură alveolară, proprietăți îmbunătățite pentru a asigura un suport adecvat infiltrării și aderării fibroblastelor și keratinocitelor, cu rol în regenerarea țesutului dermic. In plus, condiționarea sub formă de suport spongios tridimensional conferă celulelor capacitatea de a iniția depozitarea de țesut conjunctiv nou. Adăugarea în compoziția biomaterialului a biomoleculelor de fibronectină sau heparină, care prezintă proprietăți de stimulare a aderării celulare, accelerează procesul de vindecare a rănilor pielii.
Biomaterialul, conform propunerii de invenție, este un compozit polimeric cu structură poroasă, steril, biodegradabil și biocompatibil și este constituit din 60...80% gelatină din piele porcină, cu greutatea moleculară medie cuprinsă între 90...180 kDa și o substanță uscată de 0,6...1,0%, 10...30% alginat de sodiu cu vâscozitatea de 200.000-400.000 cP, 4...22% polimer sintetic, ales între alcool polivinilic cu greutatea moleculară medie de 72 kDa, metilceluloză cu vâscozitatea de 1500...4000 cP și 0,01...0,1% biomolecule, alese între fibronectină și heparină, părțile fiind exprimate în greutate.
Procedeul de obținere al produsului, conform invenției, constă din aceea că se realizează un gel compozit prin prepararea inițială a unei compoziții biopolimerice, urmată de asocierea cu polimeri sintetici, amestecarea acestor compoziții și adăugarea de biomolecule, reticularea și spălarea, urmate de liofilizarea, ambalarea și sterilizarea biomaterialului poros obținut.
Etapele procedeului de obținere sunt următoarele: a) prepararea soluției de alginat de sodiu de concentrație 3% prin dizolvarea unei pulberi de alginat de sodiu cu vâscozitatea de 200.000-400.000 cP în apă ultrapură, la temperatura de maxim 40 °C, timp de 12...16 ore, cu agitare continuă; b) prepararea soluției de gelatină 4% prin dizolvarea unei pulberi de gelatină farmaceutică, provenită
din piele de porc, cu greutatea moleculară medie de 90...180 kDa, în apă ultrapură, sub agitare continuă pe o plită magnetică, la temperatura de 50...60 °C, timp de 20...30 de minute; c) prepararea soluției de alcool polivinilic de concentrație 10% se realizează prin dizolvarea acestuia în apă ultrapură folosind o baie de apă prevăzută cu agitare, la temperatura de 45...60 °C. Timpul de dizolvare este de minim 12 ore, după care se realizează un proces de sonicare timp de 10...15 minute; d) obținerea compoziției polimerice se face după răcirea soluțiilor de mai sus la temperatura de maxim 40 °C, după care se amestecă, cu agitare puternică, soluțiile de gelatină:alginat:alcool polivinilic în rapoarte de 1:0,2...0,5:0,1...0,4 g/g/g, peste care se adaugă o pulbere de metilceluloză. Adăugarea metilcelulozei este urmată de agitare pe o plită magnetică la 300...500 rpm, la temperatura de maxim 40 °C și sonicare la această temperatură timp de 15...25 minute; e) răcirea amestecului polimeric la temperatura camerei și adăugarea în această compoziție a fibronectinei sau a heparinei de concentrație 0,01-0,1%; f) repartizarea compoziției polimerice omogene în plăci Petri și incubarea acestora la 4 °C, timp de 30 de minute, obținând astfel geluri omogene, cu grosimea constantă de 5...10 mm; g) reticularea gelurilor se face prin imersarea acestora într-o soluție apoasă de clorură de calciu 2%, timp de 2...3 ore, la temperatura camerei, după care se spală prin imersare în apă ultrapură, timp de minim 5 minute, procedura de spălare se repetă de 3...5 ori; h) liofilizarea gelurilor reticulate timp de 48...72 ore; i) tăierea la dimensiunile dorite și ambalarea produsului poros prin introducerea în pungi de polietilenă care se sigilează și, apoi, se sterilizează prin iradiere cu radiații UV, timp de 8...12 ore.
Biomaterialul compozit poros, obținut în conformitate cu prezenta invenție, are următoarele avantaje:
• prezintă o eficiență mare în tratarea leziunilor pielii având în compoziția sa biopolimeri specifici țesutului dermic (gelatină, fibronectină), precum și polizaharide naturale (alginat de sodiu, heparină), care prezintă un efect de stimulare a procesului de regenerare a țesutului dermic;
• compozitul reprezintă o matrice suport tridimensională pentru înglobarea celulelor specifice țesutului dermic (fibroblaste, keratinocite), în vederea prelungirii timpului de viabilitate și proliferare a acestora și de inițiere a procesului de vindecare tisulară;
• este biocompatibil, biodegradabil, biodisponibil și necitotoxic;
• produsul nu generează inflamație, acționează ca o barieră împotriva infecțiilor și asigură absorbția optimă a fluidelor (exudat) la nivelul țesutului lezat;
• biomaterialul compozit pătrunde în interiorul leziunii, unde polimerii naturali din compoziția sa se dizolvă la locul aplicării, printr-un proces de biodegradare controlată și au un efect sinergie asupra regenerării țesutului dermic lezat;
• este ușor de manevrat, ceea ce determină reducerea timpului de intervenție și al disconfortului pacienților;
• este stabil în timp, nu creează toxicitate sau antigenicitate în contact cu organismul;
• procedeul de obținere este relativ simplu, nu necesită aparatură complexă și este fezabil.
Prezenta propunere de invenție se ilustrează prin următoarele exemple:
Exemplul 1
Etapa I Obținerea soluțiilor polimerice într-un vas de sticlă cu volumul de 500 mL, se prepară 125 mL soluție de alginat de sodiu de concentrație 3% prin dizolvarea a 3,75 g pulbere de alginat de sodiu cu vâscozitatea de 300.000 cP, în apă ultrapură, prin agitare continuă pe o plită magnetică, la temperatura de 40 °C, timp de 16 ore. Separat, se prepară 350 mL soluție de gelatină prin dizolvarea a 14 g pulbere de gelatină farmaceutică din piele porcină, cu greutatea moleculară medie de 180 kDa, în apă ultrapură. Dizolvarea gelatinei se realizează la temperatura de 50 °C, timp de 25 de minute, sub agitare continuă pe o plită magnetică.
într-un alt vas de sticlă, se prepară 25 mL soluție de alcool polivinilic prin dizolvarea a 2,5 g pulbere de polimer, în apă ultrapură, cu ajutorul unei băi de apă prevăzută cu agitare, la turația de 120 rpm, la 60 °C, timp de 14 ore, după care se face o sonicare a soluției polimerice, timp de 10 minute, în vederea eliminării bulelor de aer formate în timpul agitării.
Etapa II Obținerea gelului polimeric
Se răcește soluția de alcool polivinilic 10% la temperatura de 40 °C și se adaugă peste amestecul soluțiilor de gelatină 4% și alginat de sodiu 3%. Amestecarea se realizează prin agitare continuă pe o plită magnetică, la turația de 500 rpm. După 2 ore de agitare, la temperatura camerei, se introduc peste amestecul obținut 2 mL soluție de fibronectină din plasmă bovină de concentrație 0,01% și se omogenizează. Se formează, astfel, amestecul biopolimeric care se repartizează în plăci Petri și se incubează la 4 °C, timp de 30 de minute, pentru a se solidifica. Se obține un gel omogen cu grosimea de 10 mm, care se reticulează prin imersare într-o soluție de clorură de calciu 2%, timp de 3 ore. Gelul astfel reticulat se spală în apă ultrapură, pentru a elimina excesul de clorură de calciu, prin imersare de cel puțin 3 ori, timp de 5 minute.
RO 137220 AO
3^
Etapa III. Uscarea și ambalarea
Uscarea gelului reticulat se face prin liofilizare la temperatura de înghețare de -40 °C și temperatura de uscare +35 °C, timp de 48 ore. Se obține un biomaterial poros, care se taie la dimensiunile dorite și se ambalează etanș în pungi de polietilenă. Se sterilizează, apoi, compozitul poros prin expunere la radiații UV, timp de 12 ore.
Exemplul 2
Etapele de obținere a soluțiilor polimerice și a amestecului acestora sunt similare cu cele prevăzute în exemplul 1, cu deosebirea că amestecul polimeric este constituit din soluții de gelatină 4%, alginat de sodiu 15% și pulbere de metilceluloză cu vâscozitatea de 1500 cP, în raport de combinare de 1:0,26:0,35 (g/g/g).
Adăugarea pulberii de metilceluloză cu vâscozitatea de 1500 cP peste amestecul de gelatină și alginat de sodiu se realizează la temperatura de 40 °C, prin agitare continuă la 500 rpm, după care amestecul polimeric obținut se supune sonicării timp de 15 minute, pentru îndepărtarea bulelor de aer formate. După răcire la temperatura camerei, peste amestecul polimeric, se adaugă 3 mL heparină 0.01% și se omogenizează ușor, timp de 30 de minute.
Etapele ulterioare de gelifiere, liofilizare și ambalare corespund celor descrise în cadrul exemplului 1.
Exemplul 3
Se procedează conform exemplului 2, cu excepția faptului că, în loc de metilceluloză cu vâscozitatea de 1500 cP, se folosește metilceluloză cu vâscozitatea de 4000 cP. De asemenea, după răcirea amestecului polimeric la temperatura camerei, se adaugă în această compoziție 1 mL fibronectină 0.01% și se omogenizează ușor amestecul. Obținerea gelului polimeric, uscarea și ambalarea produsului sunt similare cu cele descrise anterior.
Biomaterialul compozit poros, obținut conform exemplelor de mai sus, a fost caracterizat fizico-chimic, biochimic și biologic.
Caracterizarea fizico-chimică a constat în: determinarea porozității, densității și a gradului de gonflare, iar caracterizarea biochimică în determinarea gradului de biodegradare, utilizând metode gravimetrice. Rezultatele analizelor fizico-chimice și biochimice, prezentate în tabelul 1, au arătat că porozitatea probelor are valori moderate, variind între minim 54,80% pentru varianta 1 și maxim
M
62,50% pentru varianta 2, în funcție de compoziția acestora. Valorile de densitate a variantelor de materiale obținute au variat invers proporțional cu porozitatea, varianta 1 având o densitate mai mare (0,091 g/cm3), comparativ cu varianta 2 (0,076 g/cm3). Varianta 3 a prezentat valori ale densității și porozității situate între valorile primelor două variante. S-a observat că o probă martor a prezentat o porozitate ridicată (87,22%), iar prin combinarea cu polimeri sintetici se poate regla gradul de porozitate al biomaterialului poros.
Datele privind gradul de gonflare au arătat că toate variantele prezintă valori ridicate, situate între 610,34% pentru varianta 1 și 727,68% pentru varianta 3. Polizaharidele au proprietatea de gonflare, astfel că variantele obținute în exemplele 2 și 3, care conțin metilceluloză, posedă o capacitate ridicată de absorbție a apei, foarte utilă în cazul exudatului prezent în leziuni cronice ale pielii.
Tabelul 1-Caracteristicile fizico-chimice și biochimice ale variantelor de biomaterial obținute
| Probe de biomateriale | Porozitate (%) | Densitate (g/cm3) | Grad de gonflare (%) | Grad de biodegradare la 48 h (%) |
| Exemplul 1 (Gel:Alg:APV:Fn) | 54,80 | 0,091 | 610,34 | 82,34 |
| Exemplul 2 (Gel:Alg:CM1500:Hep) | 62,50 | 0,076 | 727,68 | 62,86 |
| Exemplul 3 (Gel:Alg:CM4000:Fn) | 57,20 | 0,087 | 656,06 | 94,55 |
| Martor (Gel:Alg) | 87,22 | 0,056 | 161,16 | 90,37 |
Testul de simulare a biodegradării variantelor de biomaterial, s-a realizat într-un mediu fiziologic similar celui inflamat, în condiții de rănire a pielii (pH 7,4, 37 °C, în prezența colagenazei). Probele testate prezintă o biodegradare controlată în timp, care a atins valori de 62-94%, după 48 h de incubare. Astfel, amestecarea gelatinei și alginatului de sodiu cu polimeri sintetici și polizaharide, și condiționarea ca structuri poroase, nu blocheză acțiunea colagenazei, iar degradarea controlată le asigură un rol de pansament temporar, care permite formarea de țesut nou în zona afectată, pe măsură ce suportul este biodegradat.
Caracterizarea biologică a constat în evaluarea biocompatibilității compozitelor polimerice, a aderării celulelor la structura alveolară a acestora și testarea in vitro a efectului de vindecare tisulară.
Biocompatibilitatea in vitro a fost evaluată pe 2 linii celulare stabilizate: fibroblaste de șoarece NCTC clona L929 și keratinocite umane HaCaT, folosind metoda contactului direct, în acord cu standardul SR EN ISO 10993-5:2009. Pentru aceasta, s-a determinat viabilitatea celulară prin metoda cantitativă MTT (bromură de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazoliu), după cultivarea celulelor în prezența variantelor de biomateriale obținute, timp de 48 de ore. Testul MTT evaluează activitatea metabolică celulară prin capacitatea de reducere a colorantului tetrazolic de către dehidrogenazele mitocondriale. Densitatea optică a soluției de formazan formată este măsurată spectrofotometric, iar valorile obținute sunt direct proporționale cu numărul celulelor vii prezente la finalul incubării. Rezultatele viabilității celulare, prezentate în tabelul 2, au evidențiat efectul benefic al variantelor de biomateriale compozite testate asupra viabilității și proliferării celulelor specifice țesutului dermic (fibroblaste și keratinocite), valorile situându-se peste 80% (efect necitotoxic), comparativ cu martorul de cultură.
Tabelul 2-Viabilitatea celulelor NCTC și HaCaT tratate cu variantele de materiale compozite timp de 48 de ore
| Probe de biomaterial | Viabilitate celulară într-o cultură de fibroblaste NCTC (%) | Viabilitate celulară într-o cultură de keratinocite HaCaT (%) |
| Martor de cultură | 100 | 100 |
| Exemplul 1 (Gel:Alg:APV:Fn) | 94,71 | 90,84 |
| Exemplul 2 (Gel:Alg:CM1500:Hep) | 89,92 | 90,29 |
| Exemplul 3 (Gel:Alg:CM4000:Fn) | 88,22 | 86,84 |
| Martor (Gel-Alg) | 89,92 | 83,90 |
Evaluarea aderării celulare la structura poroasă a biomaterialului a fost efectuată prin microscopie de fluorescență utilizând testul LIVE/DEAD, care se bazează pe detecția simultană a celulelor vii (emit fluorescență de culoare verde) și a celulelor moarte (emit fluorescență de culoare roșie). Pentru realizarea acestui experiment, au fost utilizate două linii celulare caracteristice tegumentului, respectiv fibroblastele și keratinocitele, care au fost însămânțate pe suprafața biomaterialului cu structură poroasă la o densitate de 5x104 celule/probă și cultivate pentru 48 de ore. La finalul perioadei de cultivare, biomaterialul a fost tratat cu cei doi reactivi specifici testului (calceină și bromură de etidiu) și vizualizate la un microscop de fluorescență. Rezultatele obținute
RO 137220 AO ξ!
demonstrează că, atât fibroblastele cât și keratinocitele au pătruns și au aderat ferm în interiorul structurilor poroase ale biomaterialului (Fig. 1). Densitatea celulară a fost mai mare în cazul variantelor de compozite obținute conform exemplelor 1, 2 și 3 (Fig. 1b, Ic, Id), comparativ cu proba martor (Fig la). Celulele aderate prezintă un aspect normal, caracteristic, iar raportul dintre celulele vii și celulele moarte confirmă rezultatele pozitive obținute în urma testelor de biocompatibilitate.
Testarea in vitro a efectului de vindecare tisulară s-a efectuat cu ajutorul unui model experimental in vitro în care s-au realizat leziuni cutanate (metoda scratch) și s-a evaluat capacitatea variantelor de biomaterial de a accelera migrarea și proliferarea celulelor pentru acoperirea zonei lezate. Această evaluare s-a efectuat pe o linie de keratinocite umane HaCaT, însămânțate la o densitate celulară de 2x105 celule/mL. După 24 ore de cultivare, când celulele au ajuns la confluență, s-a realizat o zgâriere a monostratului celular (leziune cutanată in vitro) și s-au adăugat probele de biomaterial incubate, în prealabil, în mediul de cultură, timp de 24 de ore (metoda extractului). Celulele au fost fotografiate imediat după zgâriere (timp=0 ore) (Fig. 2 b, c, d) și după 24 ore de tratament (Fig. 2 f, g, h). O cultură de celule zgâriate (Fig. 2 a) și netratate (Fig. 2 e) a servit drept cultură control. Rata de migrare și de refacere a monostratului celular s-a determinat prin prelucrarea analitică a imaginilor cu ajutorul programului ImageJ.
Rezultatele obținute au aratat că toate variantele de biomaterial testate, obținute conform exemplelor 1, 2 și 3 au fost mai eficiente în refacerea monostratului celular zgâriat (Fig. 2 f, g, h), în comparație cu proba control (leziune netratată) (Fig. 2 e), după 24 de ore de tratament. S-a observat că, în prezența variantelor de biomaterial, celulele au avut o capacitate mai mare de a migra și prolifera în zona lezată, prezentând un procent de închidere a acesteia cu 17-23% mai mult decât în cazul probei control.
Experimentele realizate demonstrează ca biomaterialul obținut conform propunerii de invenție, se prezintă sub formă de compozit polimeric cu structură poroasă, biodegradabil, biocompatibil și prezintă proprietăți bioactive și de stimulare a regenerării țesuturilor dermice lezate. Biomaterialul poros se aplică direct pe suprafața țesuturilor dermice lezate, unde are loc o biodegradare controlată a componentelor sale, care asigură celulelor din interiorul biomaterialului un suport necesar formării unui țesut conjunctiv nou și, respectiv, reepitelizarea țesuturilor.
Claims (2)
1. Biomaterialul compozit poros, caracterizat prin aceea că, este constituit din 60...80% gelatină din piele porcină, cu greutatea moleculară medie cuprinsă între 90...180 kDa și o substanță uscată de 0,6...1,0%, 10...30% alginat de sodiu cu vâscozitatea de 200.000-400.000 cP, 4...22% polimer sintetic ales între alcool polivinilic cu greutatea moleculară medie de 72 kDa și metilceluloză cu vâscozitatea de 1500...4000 cP și 0,01...0,1% biomolecule, alese între fibronectină și heparină, părțile fiind exprimate în greutate.
2. Procedeul de obținere al produsului, caracterizat prin aceea că, prezintă următoarele etape: a) prepararea soluției de alginat de sodiu de concentrație 3% prin dizolvarea unei pulberi de alginat de sodiu cu vâscozitatea de 200.000-400.000 cP în apă ultrapură, la temperatura de maxim 40 °C, timp de 12...16 ore, cu agitare continuă; b) prepararea soluției de gelatină 4% prin dizolvarea unei pulberi de gelatină farmaceutică, provenită din piele de porc, cu greutatea moleculară medie de 90...180 kDa, în apă ultrapură, sub agitare continuă pe o plită magnetică, la temperatura de 50...60 °C timp de 20...30 de minute; c) prepararea soluției de alcool polivinilic de concentrație 10% se realizează prin dizolvarea acestuia în apă ultrapură, folosind o baie de apă prevăzută cu agitare, la temperatura de 45...60 °C. Timpul de dizolvare este de minim 12 ore, după care se face sonicarea timp de 10...15 minute; d) obținerea compoziției polimerice se face după răcirea soluțiilor de mai sus, la temperatura de maxim 40 °C, după care se amestecă cu agitare puternică soluțiile de gelatină, alginat de sodiu, alcool polivinilic în raport de 1:0,2...0,5:0,1...0,4 (g/g/g), peste care se adaugă o pulbere de metilceluloză. Adăugarea metilcelulozei este urmată de amestecare la 300...500 rpm, la temperatura de maxim 40 °C și sonicare la această temperatură, timp de 15...25 minute; e) răcirea amestecului polimeric la temperatura camerei și adăugarea în această compoziție a fibronectinei sau heparinei de concentrație 0,01...0,1%; f) repartizarea compoziției polimerice omogene în plăci Petri și incubarea acestora la 4 °C, timp de 30 de minute. Se obțin gelurile omogene, cu grosimea constantă de 5...10 mm; g) reticularea gelurilor se face prin imersarea acestora într-o soluție apoasă de clorură de calciu 2%, timp de 2...3 ore, la temperatura camerei, după care se spală prin imersare în apă ultrapură, timp de minim 5 minute, procedura de spălare se repetă de 3...5 ori; h) liofilizarea gelurilor reticulate timp de 48...72 ore; i) tăierea la dimensiunile dorite și ambalarea produsului poros prin introducerea în pungi de polietilenă, care se sigilează și, apoi, se sterilizează prin iradiere cu radiații UV, timp de 8...12 ore.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ROA202200483A RO137220A0 (ro) | 2022-08-09 | 2022-08-09 | Biomaterial compozit poros cu proprietăţi de stimulare a regenerării ţesutului dermic |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ROA202200483A RO137220A0 (ro) | 2022-08-09 | 2022-08-09 | Biomaterial compozit poros cu proprietăţi de stimulare a regenerării ţesutului dermic |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RO137220A0 true RO137220A0 (ro) | 2023-01-30 |
Family
ID=85035457
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ROA202200483A RO137220A0 (ro) | 2022-08-09 | 2022-08-09 | Biomaterial compozit poros cu proprietăţi de stimulare a regenerării ţesutului dermic |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RO (1) | RO137220A0 (ro) |
-
2022
- 2022-08-09 RO ROA202200483A patent/RO137220A0/ro unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Chandika et al. | Wound healing properties of triple cross-linked poly (vinyl alcohol)/methacrylate kappa-carrageenan/chitooligosaccharide hydrogel | |
| Bano et al. | Preparation, characterization and evaluation of glycerol plasticized chitosan/PVA blends for burn wounds | |
| Huang et al. | Preparation and evaluation of Bletilla striata polysaccharide/carboxymethyl chitosan/Carbomer 940 hydrogel for wound healing | |
| Tavakoli et al. | Nanocomposite hydrogel based on carrageenan-coated starch/cellulose nanofibers as a hemorrhage control material | |
| Xie et al. | Carboxymethyl konjac glucomannan-crosslinked chitosan sponges for wound dressing | |
| Balaji et al. | Preparation and comparative characterization of keratin–chitosan and keratin–gelatin composite scaffolds for tissue engineering applications | |
| Yu et al. | Thiolated hyaluronic acid/silk fibroin dual-network hydrogel incorporated with bioglass nanoparticles for wound healing | |
| Lan et al. | Chitosan/gelatin composite sponge is an absorbable surgical hemostatic agent | |
| Baysal et al. | Chitosan/alginate crosslinked hydrogels: Preparation, characterization and application for cell growth purposes | |
| Xie et al. | Biocompatible, antibacterial and anti-inflammatory zinc ion cross-linked quaternized cellulose‑sodium alginate composite sponges for accelerated wound healing | |
| Li et al. | Preparation of sodium hyaluronate/dopamine/AgNPs hydrogel based on the natural eutetic solvent as an antibaterial wound dressing | |
| Zhu et al. | Novel enzymatic crosslinked hydrogels that mimic extracellular matrix for skin wound healing | |
| Taghiabadi et al. | Fabrication and characterization of spongy denuded amniotic membrane based scaffold for tissue engineering | |
| de Souza et al. | Mechanically-enhanced polysaccharide-based scaffolds for tissue engineering of soft tissues | |
| Zhao et al. | Construction of highly biocompatible hydroxyethyl cellulose/soy protein isolate composite sponges for tissue engineering | |
| Chhabra et al. | Optimization, characterization, and efficacy evaluation of 2% chitosan scaffold for tissue engineering and wound healing | |
| CA2771365A1 (en) | Chitosan tissue dressing | |
| Iswariya et al. | Design and development of a piscine collagen blended pullulan hydrogel for skin tissue engineering | |
| Tang et al. | Preparation and characterization of chitosan/sodium cellulose sulfate/silver nanoparticles composite films for wound dressing | |
| Zhu et al. | Sulfated zwitterionic poly (sulfobetaine methacrylate)/κ-capacarragan double network hydrogel wound dressing for skin wound repair | |
| CN111012803A (zh) | 用于引导组织再生的生物材料装置和局部组合物 | |
| Chen et al. | Collagen-rich porcine acellular dermal matrix-eggshell membrane sponge promotes programmed healing of diabetic wounds through the sustained release of Cu2+/Zn2+ | |
| Zhu et al. | Biocompatible and antibacterial Flammulina velutipes-based natural hybrid cryogel to treat noncompressible hemorrhages and skin defects | |
| Sah et al. | Eggshell membrane protein modified silk fibroin-poly vinyl alcohol scaffold for bone tissue engineering: in vitro and in vivo study | |
| Acar et al. | Thymol incorporated gellan gum/carboxymethyl cellulose/hyaluronic acid films for wound dressings applications |