RO128192A2 - Produs fitoterapeutic cu utilizare în terapia infecţiilor microbiene şi procedeu de obţinere a acestuia - Google Patents

Abstract

Invenţia se referă la un produs fitoterapeutic, cu utilizare în terapia infecţiilor microbiene, şi la un procedeu de obţinere a acestuia. Produsul conform invenţiei cuprinde 2 părţi ulei volatil din părţile aeriene de, 2 părţi ulei volatil din frunze deşi 2 părţi ulei volatil de, părţile fiind exprimate în volum, înglobate în 100 părţi în greutate extract atomizat, obţinut prin prelucrarea soluţiei extractive apoase din, produsul conţinând timol, linalol, tuionă, limonen, 4,882% acizi polifenolcarboxilici exprimaţi în acid rosmarinic, şi 2,821% flavone exprimate în rutozid, şi se prezintă sub formă de pulbere fină, de culoare galben-brun, cu gust amar aromat şi miros caracteristic. Procedeul conform invenţiei constă în antrenarea cu vapori de apă, în circuit închis, a uleiului volatil din fiecare dintre plantele respective, la un raport plantă/solvent de 1/10 m/v, la temperatura de fierbere, timp de 2...4 h, concentrarea extractului apos dinla un volum de 1,5/1 v/m faţă de cantitatea de material vegetal, atomizarea soluţiei concentrate şi înglobarea în 100 părţi în greutate extract atomizat a câte 2 părţi în volum de ulei volatil, urmată de omogenizarea, pulverizarea şi cernerea produsului.

Description

PRODUS FITOTERAPEUTIC CU UTILIZARE IN TERAPIA INFECȚIILOR MICROBIENE SI PROCEDEU DE OBȚINERE A ACESTUIA

Autori: lehim Maria, Enache Ramona, Ichim Liviu-Ionel, Visan Adriana, Grigore Alice, Colceru-Mihul Svetlana, Paraschiv Ileana, Nita Sultana,

Rasit luksel, Draghici Elena, lonescu Daniela, Popa Ovidiu, Babeanu Narcisa.

Invenția se refera la un produs fitoterapeutic cu utilizare in terapia infecțiilor microbiene si la procedeul de obținere a acestuia.

Este cunoscut ca părțile aeriene ale speciei Thymus vulgaris L. (Thymi herba) au acțiune antiinfectioasa, respectiv acțiune antiseptica si antifungica prin constituentii fenolici ai uleiului volatil si a taninului. Uleiul volatil care conține in principal timol si carvacrol, geraniol, linalol, p-cimen precum si alte hidrocarburi monoterpenice, alcooli monoterpenici si esteri demonstrează activitate antimicrobiana fata de un spectru larg de bacterii, acțiune antifungica datorata in special timolului, antivirala, paraziticida, antispastica, anestezic locala, etc.

Este cunoscut ca uleiul din frunzele speciei Salvia officinalis L. (Salviae folium) conținând hidrocarburi mono- si sesquiterpenice, alcooli diterpenici, fenoli, oxizi, aldehide si cetone, esteri derivați ai acidului abietic, cumarine, eteri, trans lactone demonstrează acțiune mucolitica, lipolitica, reglatoare a circulației sanguine, colagog-coleretica, antibacteriana fata de Staphylococcus aureus si streptococul β-hemolitic grupa A si moderata fata de Klebsiella sp., Pseudomonas sp., Escherichia coli, activitate antifungica fata de Candida albicans, antivirala, cicatrizanta (V. Istudor - Farmacognozie, fitochimie, fitoterapie, voi. 2, Ed. Medicala, București, 2001).

Este cunoscut ca uleiul volatil din somitățile florale provenite de la specia Achillea millefolium L. (Millefolii flores) conținând hidrocarburi mono- si sequiterpenice si oxizi terpenici demonstrează activitate stomahica, astringenta, antiinflamatoare, calmanta, ușor antiseptica si tonic amara (D.Gr.Constantinescu, E. Hatieganu, F. Busuricu - Plante

-201 1 - 0 0 6 6 3 -1 4 -07- 2011 medicinale utilizate in terapeutica - Ed. Medicala, București, 2004).

Este cunoscut un produs fitoterapeutic antimicrobian care conține 4,927...6,022% substanța uscata, 0,051...0,062% flavone exprimate in rutozid si 12,746...15,579% alcool sub forma de soluție orala, de culoare bruna, cu densitatea d₂o²⁰ 0,950...1,009 si pH 5,35...5,55 si procedeul de obținere a acestuia care consta in aceea ca se extrag principiile active din materialul vegetal uscat si macinat din Mori radix, cu solvent hidroalcoolic 70% v/v, raport material vegetal/ solvent 1/15 m/v, la temperatura de fierbere a amestecului, cu refluxarea solventului, timp de 2h, cu agitare, după care soluția extractiva se concentrează la un raport material vegetal/ soluție concentrata 1/2 m/v, apoi se lașa in repaos timp de 48h, la temperatura de 6...8°C, substanțele insolubile se indeparteaza prin filtrare si volumul se completează cu alcool etilic de 20% v/v, la un raport material vegetal/ produs fitoterapeutic l/2m/v (RO 122182).

Este cunoscut un produs fitoterapeutic utilizat in tratamentul afecțiunilor cutaneomucoase sub forma de emulsie de culoare bruna obtinut prin prelucrarea soluțiilor extractive din speciile Melissa officinalis, Origanum vulgare, Lychnis coronar ia, 1 parte ulei volatil din specia Thymus vulgaris, 4 parti emulgatori si 45 parti apa deionizată, părțile fiind exprimate in greutate, cu un continui de 0,05...0,10% flavone exprimate in rutozid si 0,55...0,95% ortodihidroxifenoli exprimați in acid cafeic, si la un procedeu de preparare a produsului fitoterapeutic, ce consta in aceea ca se omogenizează 50 parti produs bioactiv, rezultat prin extracția succesiva a principiilor active din 30 parti de Melissae herba, 35 parti de Origani herba si 35 parti de Lychnis herba, cu alcool etilic 30%, raport 1/5-1/20 material vegetal/ml solvent, la temperatura de reflux, timp de 30...120 min, cu agitare, se indeparteaza deseul de planta prin filtrare si se omogenizează soluțiile extractive obținute, se concentrează soluția pana la un continui de 0,25...0,50% flavone exprimate in rutozid si 1,50...2,80% ortodihidroxifenoli exprimați in acid cafeic, se purifica soluția extractiva prin adaugare de alcool etilic pana la o concentrație de 30%, se indeparteaza substanțele insolubile prin filtrare la presiune redusa si se completează volumul la l/2g planta/ml produs bioactiv, 1 parte ulei volatil din Thymi herba, 4 parti emulgatori si 45 parti apa deionizată, părțile fiind exprimate in greutate (RO 122125).

Problema pe care o rezolva invenția consta in realizarea unui produs fitoterapeutic cu utilizare in terapia infecțiilor microbiene prin asocierea uleiului volatil din părțile aeriene ale speciei Thymus vulgaris, uleiul volatil din frunzele speciei Salvia officinalis si uleiul volatil

cu 2 Ο 1 1 - 0 0 6 6 3 1 4 -07- 2011 din florile speciei Achillea millefolium, înglobate in extract atomizat din părțile aeriene ale speciei Thymus vulgaris, astfel incat componentele din cele trei specii sa se potențeze reciproc.

Produsul fitoterapeutic conform invenției este constituit din 2 parti in volum ulei volatil obtinut din Thymi herba, 2 parti in volum ulei volatil din Salviae folium si 2 parti in volum ulei volatil din Millefolii flores înglobate in 100 parti in greutate extract atomizat obtinut prin prelucrarea soluției extractive apoase din Thymi herba si se prezintă sub forma de pulbere omogena conținând timol, linalol, cineol, tuiona, limonen, 4,882% acizi polifenolcarboxilici exprimați in acid rosmarinic si 2,821% flavone exprimate in rutozid.

Procedeul de obținere a produsului fitoterapeutic conform invenției consta din extracția uleiurilor volatile din Thymi herba, Salviae folium si Millefolii flores prin antrenare cu vapori de apa in circuit închis, raport planta/ solvent = l/10m/v la temperatura de fierbere a amestecului timp de 2-5 ore, colectarea uleiului volatil, îndepărtarea deșeului de planta prin filtrare si presare, prelucrarea soluției extractive apoase din Thymi herba prin concentrare la un volum de 1,5/1 v/m fata de cantitatea de material vegetal, centrifugare pentru îndepărtarea substanțelor insolubile, atomizarea soluției concentrate si înglobarea a cate 2 parti in greutate ulei volatil din fiecare specie in extract atomizat.

Invenția prezintă următoarele avantaje:

-Se diversifica gama de produse cu utilizare in terapia infecțiilor microbiene cu un produs natural, de origine vegetala, care poate fi administrat si in cazul bacteriilor rezistente la tratamentul clasic;

-Produsul are o toxicitate redusa;

-Se utilizează o materie prima vegetala accesibila, plantele fiind obținute din cultura;

-Tehnologia are un număr redus de faze;

-Tehnologia este nepoluanta, nu rezulta deșeuri toxice sau ape reziduale.

Exemplu de realizare a invenției

Se da in continuare un exemplu de realizare a invenției:

Materialul vegetal utilizat consta in părțile aeriene ale speciei Thymus vulgaris (Thymi herba), uscate si măcinate sita III, frunzele speciei Salvia officinalis (Salviae folium), uscate si ‘λ

Ο 1 1 - 0 0 6 6 3 -1 4 -07- 2011 măcinate sita III si somitățile florale ale speciei Achillea millefolium (Millefolii flores), uscate si măcinate sita III.

Fazele tehnologice parcurse pentru obținerea a Ikg produs fitoterapeutic sunt următoarele:

Obținerea uleiului volatil din Thymi herba

Intr-un vas de inox de capacitate 2501 prevăzut cu manta de încălzire, refrigerent de sticla, sistem de colectare a uleiului volatil in circuit închis din sticla, sistem de agitare si stut de evacuare, se introduc 12kg material vegetal constând din părțile aeriene ale speciei Thymus vulgaris si 120 1 apa distilata (raport planta/solvent=l/10 m/v) si se încălzește amestecul la fierbere timp de 2 ore cu agitare continua. După racirea vaporilor de apa, la trecerea prin refrigerent se obține uleiul volatil in sistemul de colectare iar apa se recircula. Rezulta 48ml ulei volatil de culoare galbena cu miros caracteristic, gust iute-arzator, insolubil in apa/ solubil in alcool etilic.

La analiza gaz-cromatografica se observa ca uleiul volatil conține in special timol, pcimen, linalol, carvacrol.

Obținerea uleiului volatil din Salviae folium

Intr-un vas de inox de capacitate 250 1 prevăzut cu manta de încălzire, refrigerent de sticla, sistem de colectare a uleiului volatil in circuit închis din sticla, sistem de agitare si stut de evacuare, se introduc 2,5kg material vegetal constând din frunzele speciei Salvia officinalis si 25 1 apa distilata (raport planta/solvent=l/10 m/v) si se încălzește amestecul la fierbere timp de 5 ore cu agitare continua. După racirea vaporilor de apa la trecerea prin refrigerent se obține uleiul volatil in sistemul de colectare iar apa se recircula. Rezulta 21 ml ulei volatil de culoare slab gălbuie cu miros caracteristic, gust arzator, insolubil in apa/ solubil in alcool concentrat.

La analiza gaz-cromatografica se observa ca uleiul volatil conține in special tuiona, camfor, cineol.

Obținerea uleiului volatil din Millefolii flores

Intr-un vas de inox de capacitate 250 1 prevăzut cu manta de încălzire, refrigerent de sticla, sistem de colectare a uleiului volatil in circuit închis din sticla, sistem de agitare si stut de evacuare, se introduc lOkg material vegetal constând din inflorescențele speciei Achillea millefolium si 100 1 apa distilata (raport planta/solvent=l/10 m/v) si se încălzește amestecul la

^-2011-00563-- β-0

4 -07- 2011 fierbere timp de 5 ore cu agitare continua. După racirea vaporilor de apa la trecerea prin refrigerent se obține uleiul volatil in sistemul de colectare iar apa se recircula. Rezulta 21ml ulei volatil de culoare albastra cu miros aromat specific, gust amar, insolubil in apa/ solubil in alcool concentrat.

La analiza gaz-cromatografica se observa ca uleiul volatil conține in special azulene, cineol, tuina, borneoL

Obținerea extractului atomizat din Thymi herba

Soluția extractiva apoasa obtinuta după antrenarea uleiului volatil in circuit închis din 12kg material vegetal, după îndepărtarea deșeului de planta prin filtrare si presare (82 1) se concentrează la 18 1 (raport planta/ extract concentrat = 1/ 1,5 m/v) si soluția concentrata se lașa in repaos la temperatura de 4-6°C timp de 24 ore după care se centrifugheaza. Soluția concentrata limpede se introduce cu ajutorul unei pompe peristaltice in echicurent cu aer uscat prin răcire cu ajutorul unui dezumidificator intr-un atomizor cu încălzire electrica. Se programează temperatura de intrare 130°C si temperatura de ieșire la aproximativ 60°C. Produsul atomizat se colectează in vas cu ajutorul unui ciclon sub forma de pulbere fina. Se obțin 1040g extract atomizat de culoare bruna cu miros caracteristic si gust amar aromat. Extractul atomizat conține 7,16% acizi polifenolcarboxilici exprimați in acid rosmarinic si 3,257% flavone exprimate in rutozid.

Obținerea produsului fitoterapeutic

Intr-un vas de porțelan de capacitate 5 1 se omogenizează 1040g extract atomizat din Thymi herba cu 20,8ml ulei volatil din Thymi herba, 20,8ml ulei volatil din Salviae folium si 20,8ml ulei volatil din Millefolii flores. După omogenizare produsul este pulverizat si cernut sita VIII. Se obține 1,010 kg produs sub forma de pulbere fina de culoare bruna care este condiționai sub forma de capsule de 250mg. Se obțin 4000 capsule de uz oral.

Produsul conține timol, linalol, cineol, tuiona, limonen identificați gaz-cromatografic si 4,882% acizi polifenolcarboxilici exprimați in acid rosmarinic si 2,831% flavone exprimate in rutozid.

Componentii uleiului volatil demonstrează activitate antimicrobiana. Astfel:

-timolul manifesta activitate asupra bacteriilor Gram-pozitive si Gram-negative ca Escherichia coli, Streptococcuspneumoniae si Streptococcuspyogenes dar si asupra drojdiilor ¢-2 0 1 1-00563-1 4 -07- 2011 de tipul Candida (interfera cu formarea si viabilitatea hifelor inducând alterări morfologice ale membranei). De asemenea, inhiba creșterea miceliilor de Aspergillus flavus si A. niger si producerea de micotoxine in cazul Aspergillus flavus, A. parasiticus, A. ochraceus si Fusarium moniliforme.

-cineolul este frecvent activ pe Staphylococcus aureus.

La testarea activitatii antimicrobiene s-a demonstrat ca produsul manifesta activitate fata de tulpini bacteriene-test Gram-negative (Escherichia coli ATCC 8739 si Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027), Gram-pozitive (Staphylococcus aureus ATCC 25923), levuri (Candida albicans ATCC 10231) si fungi (Aspergillus niger ATCC 16404) la concentrații cuprinse intre l-5mg/ml (0,1-0,5%). Tulpinile testate dețin un potențial patogen ridicat. Astfel, bacteria E.coli poate produce infecții digestive sau ale tractului urinar; infecțiile cu Pseudomonas aeruginosa sunt o cauza frecventa de morbiditate si mortalitate a pacientilor spitalizați iar tratamentul a devenit complicat datorita rezistentei (intrinsenci si dobândite) a acestei bacterii si de aceea foarte multe aspecte ale tratamentului raman controversate; Staphylococcus aureus poate produce infecții supurative sau chiar septicemii la om si animale, patogenitatea fiind exercitata atat de structura sa cat si de enzimele produse; Candida albicans poate determina atat infecții ale mucoaselor cat si sistemice, in special la persoanele imunocompromise la care evoluția devine severa; Aspergillus niger produce in special otomicoze sau infecții pulmonare.

La testarea toxicității produsului in experiment acut prin administrarea orala de 5007500 mg/kgc la șoarece nu sunt induse fenomene toxice sau letalitate. Doza 7500 mg/kgc la șoarece este corespunzătoare dozei 5000 mg/kgc la șobolan - doza minima de încadrare in categoria substanțelor practic netoxice.

Claims (2)

1. REVENDICĂRI

   1. Produs fitoterapeutic cu utilizare in terapia infecțiilor microbiene caracterizat prin aceea ca se prezintă sub forma de pulbere fina de culoare galben-brun, cu gust amar aromat, miros caracteristic si conține timol, linalol, tuiona, limonen identificate gaz-cromatografic, 3,906-5,858% acizi polifenolcarboxilici exprimați in acid rosmarinic si 2,265-3,397% flavone exprimate in rutozid.
2. 2. Procedeu de obținere a produsului fitoterapeutic definit in revendicarea 1 caracterizat prin aceea ca se antrenează uleiul volatil din Thymi herba, Salviae folium si Millefolii flores cu vapori de apa in circuit închis, raport planta/ solvent=T/10 m/v la temperatura de fierbere timp de 2-5 ore cu agitare, se prelucrează extractul apos din Thymi herba ramas după antrenarea uleiului volatil prin concentrare, repaos la 4-6°C timp de 24 ore si atomizare urmata de înglobarea in 100 parti in greutate extract atomizat a cate 2 parti in volum ulei volatil din fiecare specie, omogenizarea, pulverizarea si cernerea produsului.