RO123418B1 - Tioureide ale acidului 1-metil-1h-4-pirazol-carboxilic şi procedeu de preparare a acestora - Google Patents
Tioureide ale acidului 1-metil-1h-4-pirazol-carboxilic şi procedeu de preparare a acestora Download PDFInfo
- Publication number
- RO123418B1 RO123418B1 ROA200900426A RO200900426A RO123418B1 RO 123418 B1 RO123418 B1 RO 123418B1 RO A200900426 A ROA200900426 A RO A200900426A RO 200900426 A RO200900426 A RO 200900426A RO 123418 B1 RO123418 B1 RO 123418B1
- Authority
- RO
- Romania
- Prior art keywords
- methyl
- pyrazol
- carbonyl
- pyrazole
- carboxylic acid
- Prior art date
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract description 16
- YBFIKNNFQIBIQZ-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-pyrazole-3-carboxylic acid Chemical compound CN1C=CC(C(O)=O)=N1 YBFIKNNFQIBIQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 34
- UPPPWUOZCSMDTR-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-pyrazole-4-carboxylic acid Chemical compound CN1C=C(C(O)=O)C=N1 UPPPWUOZCSMDTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims abstract description 8
- SOIFLUNRINLCBN-UHFFFAOYSA-N ammonium thiocyanate Chemical compound [NH4+].[S-]C#N SOIFLUNRINLCBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- QLBBQLJPRXPVOS-UHFFFAOYSA-N 1-methylpyrazole-4-carbonyl chloride Chemical compound CN1C=C(C(Cl)=O)C=N1 QLBBQLJPRXPVOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 150000003585 thioureas Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 3
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 claims abstract description 3
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 claims abstract description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 3
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims abstract description 3
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract 3
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 claims description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 18
- -1 N - [(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl) carbonyl] -N'-phenyl-thiourea N - [(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl) carbonyl] -N '- (3-methylphenylcarbamoyl) thiourea Chemical compound 0.000 claims description 14
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 9
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 claims description 8
- WSLDOOZREJYCGB-UHFFFAOYSA-N 1,2-Dichloroethane Chemical compound ClCCCl WSLDOOZREJYCGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 241000588747 Klebsiella pneumoniae Species 0.000 claims description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 7
- 241000194032 Enterococcus faecalis Species 0.000 claims description 5
- VVUPKTYNAAJWEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylpyrazole-4-carbonyl isothiocyanate Chemical compound CN1C=C(C(=O)N=C=S)C=N1 VVUPKTYNAAJWEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 claims description 4
- 229940032049 enterococcus faecalis Drugs 0.000 claims description 4
- 125000006656 (C2-C4) alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000006650 (C2-C4) alkynyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000005913 (C3-C6) cycloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 2
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 claims description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 2
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 2
- 230000001018 virulence Effects 0.000 claims description 2
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 abstract description 5
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 abstract 2
- DESAOEJGMFSVJR-UHFFFAOYSA-N 1-methylpyrazole-4-carbonyl isocyanate Chemical compound CN1N=CC(=C1)C(=O)N=C=O DESAOEJGMFSVJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 abstract 1
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 abstract 1
- 125000006193 alkinyl group Chemical group 0.000 abstract 1
- 150000005840 aryl radicals Chemical class 0.000 abstract 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract 1
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 abstract 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 59
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 24
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 17
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 16
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 16
- NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 2-[2,4-di(pentan-2-yl)phenoxy]acetyl chloride Chemical compound CCCC(C)C1=CC=C(OCC(Cl)=O)C(C(C)CCC)=C1 NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 13
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 9
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 8
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 8
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 8
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 8
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 7
- 239000000304 virulence factor Substances 0.000 description 7
- 230000007923 virulence factor Effects 0.000 description 7
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 6
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- BFDPNKGQHGOJQH-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-n-[(2-propylphenyl)carbamothioyl]pyrazole-4-carboxamide Chemical compound CCCC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)C1=CN(C)N=C1 BFDPNKGQHGOJQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 4
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 4
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 4
- 102000015439 Phospholipases Human genes 0.000 description 4
- 108010064785 Phospholipases Proteins 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 239000003245 coal Substances 0.000 description 4
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 4
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 4
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 4
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 108010071626 caseinase Proteins 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 3
- 239000003610 charcoal Substances 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 3
- 230000036457 multidrug resistance Effects 0.000 description 3
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- CZZZABOKJQXEBO-UHFFFAOYSA-N 2,4-dimethylaniline Chemical compound CC1=CC=C(N)C(C)=C1 CZZZABOKJQXEBO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VOWZNBNDMFLQGM-UHFFFAOYSA-N 2,5-dimethylaniline Chemical compound CC1=CC=C(C)C(N)=C1 VOWZNBNDMFLQGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MLPVBIWIRCKMJV-UHFFFAOYSA-N 2-ethylaniline Chemical compound CCC1=CC=CC=C1N MLPVBIWIRCKMJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JJYPMNFTHPTTDI-UHFFFAOYSA-N 3-methylaniline Chemical compound CC1=CC=CC(N)=C1 JJYPMNFTHPTTDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000588626 Acinetobacter baumannii Species 0.000 description 2
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 2
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 2
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 2
- PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N Aniline Chemical compound NC1=CC=CC=C1 PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 2
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 102000013382 Gelatinases Human genes 0.000 description 2
- 108010026132 Gelatinases Proteins 0.000 description 2
- MBRVTXIHWNREEU-UHFFFAOYSA-N N-[(2,3-dimethylphenyl)carbamothioyl]-1-methylpyrazole-4-carboxamide Chemical compound CC1=CC=CC(NC(=S)NC(=O)C2=CN(C)N=C2)=C1C MBRVTXIHWNREEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 2
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 2
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 2
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- XHCADAYNFIFUHF-TVKJYDDYSA-N esculin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC(C(=C1)O)=CC2=C1OC(=O)C=C2 XHCADAYNFIFUHF-TVKJYDDYSA-N 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 150000002540 isothiocyanates Chemical class 0.000 description 2
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 2
- 239000008274 jelly Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- NSUTYNXTBCXYHR-UHFFFAOYSA-N n-[(2-ethylphenyl)carbamothioyl]-1-methylpyrazole-4-carboxamide Chemical compound CCC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)C1=CN(C)N=C1 NSUTYNXTBCXYHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000003217 pyrazoles Chemical class 0.000 description 2
- 238000011158 quantitative evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- XGCDBGRZEKYHNV-UHFFFAOYSA-N 1,1-bis(diphenylphosphino)methane Chemical compound C=1C=CC=CC=1P(C=1C=CC=CC=1)CP(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 XGCDBGRZEKYHNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PAEBEUZTAPIOIO-UHFFFAOYSA-N 1-(4-chlorophenyl)-3-(1-methyl-3-oxo-2-phenyl-5-propan-2-ylpyrazol-4-yl)urea Chemical compound O=C1N(C=2C=CC=CC=2)N(C)C(C(C)C)=C1NC(=O)NC1=CC=C(Cl)C=C1 PAEBEUZTAPIOIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TVTXCWPPTIONJO-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-n-[(3-methylphenyl)carbamothioyl]pyrazole-4-carboxamide Chemical compound CC1=CC=CC(NC(=S)NC(=O)C2=CN(C)N=C2)=C1 TVTXCWPPTIONJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JVVRJMXHNUAPHW-UHFFFAOYSA-N 1h-pyrazol-5-amine Chemical class NC=1C=CNN=1 JVVRJMXHNUAPHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VVAKEQGKZNKUSU-UHFFFAOYSA-N 2,3-dimethylaniline Chemical compound CC1=CC=CC(N)=C1C VVAKEQGKZNKUSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YKNORODREYVARM-UHFFFAOYSA-N 2-(phenoxymethyl)benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1COC1=CC=CC=C1 YKNORODREYVARM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ILPGQKHPPSSCBS-UHFFFAOYSA-N 2-phenyl-1h-pyrazol-3-one Chemical compound O=C1C=CNN1C1=CC=CC=C1 ILPGQKHPPSSCBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WKURVXXDGMYSDP-UHFFFAOYSA-N 2-propyl-aniline Chemical compound CCCC1=CC=CC=C1N WKURVXXDGMYSDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IMBBXSASDSZJSX-UHFFFAOYSA-N 4-Carboxypyrazole Chemical compound OC(=O)C=1C=NNC=1 IMBBXSASDSZJSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MZRUFMBFIKGOAL-UHFFFAOYSA-N 5-nitro-1h-pyrazole Chemical class [O-][N+](=O)C1=CC=NN1 MZRUFMBFIKGOAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 1
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 101000939500 Homo sapiens UBX domain-containing protein 11 Proteins 0.000 description 1
- 238000002768 Kirby-Bauer method Methods 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 208000037581 Persistent Infection Diseases 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 102100029645 UBX domain-containing protein 11 Human genes 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 238000004115 adherent culture Methods 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid group Chemical group C(C1=CC=CC=C1)(=O)O WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004709 cell invasion Effects 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 238000005100 correlation spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 229910003460 diamond Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010432 diamond Substances 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 235000013345 egg yolk Nutrition 0.000 description 1
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005470 impregnation Methods 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- NPFOYSMITVOQOS-UHFFFAOYSA-K iron(III) citrate Chemical compound [Fe+3].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NPFOYSMITVOQOS-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 239000002068 microbial inoculum Substances 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 1
- 239000003507 refrigerant Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000010183 spectrum analysis Methods 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 238000002328 two-dimensional heteronuclear correlation spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 239000007221 ypg medium Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Invenţia se referă la tioureide ale acidului 1-metil-1H-4-pirazol-carboxilic şi la un procedeu de preparare a acestora, tioureide utilizate ca agenţi cu activitate antibacteriană. Tioureidele acidului 1-metil-1H-4-pirazol-carboxilic, conform invenţiei, sunt derivaţi N-acilaţi ai tioureei cu formula generală:în care R reprezintă un radical alchil liniar sau ramificat, cicloalchil, alchenil, alchinil, aralchil, aril nesubstituit, mono- sau polisubstituit cu radicali alchil, aralchil, acil, halogen, -NO, -NH, heterociclu cu N, S, O. Procedeul de obţinere, conform invenţiei, constă din prepararea, într-o primă etapă, a clorurii acidului 1-metil-1H-4-pirazol-carboxilic, care, în etapa a doua, este încălzită la reflux în prezenţă de tiocianat de amoniu, în mediu de acetonă anhidră, rezultând 1-metil-1H-4-pirazol-carbonil izocianat care, prin reacţia cu amine, conduce la obţinerea unor derivaţil N-acilaţi ai tioureei.
Description
Invenția se referă la tioureide ale acidului 1-metil-1H-4-pirazol-carboxilic și la un procedeu de preparare a acestora, compuși cu activitate antimicrobiană și toxicitate scăzută. Invenția de față se înscrie în cadrul preocupărilor pe plan mondial pentru obținerea unor noi agenți antimicrobieni cu eficacitate maximă și toxicitate scăzută, în special asupra tulpinilor bacteriene rezistente la antibioticele actuale.
Cercetările în clasa derivații de pirazol au evidențiat numeroși compuși cu acțiune antibacteriană. Dintre aceștia menționăm derivații 3-nitropirazolului [HerbertB. și col., brevet US 4172136,1979], derivați ai 4,5-diaril-pirazolului acționând ca inhibitori ai ARN polimerazei [Leping Li și col., brevet US 6673923, 2004], derivații de 5-aminopirazol [Heil și col., brevet US 6444612 B1, 2002], compuși cu structură 1-heteroaril-4-aril-pirazolică [Sasse și col., brevet US 4806540, 1989], derivați ai pirazolului activi pe specii microbiene multiplu rezistente [Lee C.S. și col. , Bioorganic & medicinal chemistry, 2001, 9 (12), 3243-53]
De asemenea, literatura de specialitate menționează o serie de tioureide testate pentru activitatea lor antibacteriană, cum ar fi derivați ai 5-aril-2-(benzoil-tioureido)-1,3,4oxadiazolului [Kapoor K.K. și col., J. Indian Chem. Soc., 1991,68 (2), 104-6], tioureide ale acidului 2-(fenoximetil)benzoic [Limban C. și col., Farmacia 2000,6,73-8] și ale acidului 2-(4cloro-fenoximetil)benzoic [Limban C. și col., Molecules, 2008, 13, 567-80], Derivații ai 2,4bis(metoxianilino)-6-(N-aril-tioureido-N’-aminoacil)-s-triazinei [Desai P.H. și col., J. Inst. Chem., 1989, 61(1), 19-20], derivați ai 1-aroil-3-(4-benzosulfonamidopirimidin)-tioureei [Xueshun J. și col., Chinese Journal of Organic Chemistry, 1993, 13 (3), 250-2] și compuși antimicrobieni a căror grupă tioureidică se leagă de 1-fenil-3-pirazolin-5-ona [Ogura și col., brevet US 4025622, 1977],
Obținerea unor noi compuși cu efecte antibacteriene superioare și toxicitate scăzută derivă și din faptul că studii recente apreciază că omenirea ar putea rămâne fără antibiotice eficiente la sfârșitul acestui deceniu, de aici și necesitatea stringentă a îmbogățirii arsenalului agenților antimicrobieni.
Unele tulpini microbiene întâlnite în clinici manifestă fenomenul de multirezistență la principalele clase de agenți antimicrobieni cunoscuți, dezavantaj major pentru tratamentul infecțiilor provocate de acestea, caz în care nu există alternativă terapeutică.
Problema pe care invenția de față o rezolvă constă în prepararea unor noi compuși din clasa tioureidelor cu toxicitate scăzută, cu efect antimicrobian, atât pe tulpini de referință, dar mai ales pe tulpini microbiene recent izolate din clinici care au prezentat fenomene de multirezistență la principalele clase de agenți antimicrobieni cunoscuți.
Un obiect al invenției se referă la derivați de tioureidă N,N-substituită a acidului 1metil-1H-4-pirazol-carboxilic, cu formulă generală I:
'3 în care R este alchil C^-C4 normal sau ramificat C3-C4, cicloalchil C3-C6, alchenil C2-C4, alchinil C2-C4, fenil nesubstituit, mono- sau polisubstituitcu radicali alchil C^-C4, alcoxi C^Cg, halogeni, nitro, heterociclu penta sau hexa atomic cu N, S, O.
într-un aspect preferat, invenția se referă la derivați de tioureidă N,N-substituită a acidului 1-metil-1H-4-pirazol-carboxilic definiți, care sunt în mod specific selectați dintre: N-[(1-metil-1H-pirazol-4-il)carbonil]-N’-fenil-tiourea, N-[(1-metil-1H-pirazol-4-il)carbonil]-N’-(3-metilfenil-)tiourea, N-[(1-metil-1 H-pirazol-4-il)carbonil]-N’-(2,3-dimetilfenil)-tiourea,
RO 123418 Β1
N-[(1-metil-1 H-pirazol-4-il)carbonil]-N’-(2,4-dimetilfenil)-tiourea,
N-[(1-metil-1H-pirazol-4-il)carbonil]-N’-(2,5-dimetilfenil)-tiourea,
N-[(1-metil-1 H-pirazol-4-il)carbonil]-N’-(2-etilfenil)tiourea,
N-[(1-metil-1H-pirazol-4-il)carbonil]-N’-(2-n-propilfenil)tiourea,
N-[(1-metil-1 H-pirazol-4-il)carbonil]-N’-(2-i-propilfenil)tiourea.
Un alt obiect al invenției se referă la un procedeu de obținere a unui derivat de tioureidă N,N-substituită a acidului 1-metil-1H-4-pirazol-carboxilic, cu formula generală I, definit mai sus, care are loc în următoarele etape:
a. prepararea clorurii acidului 1-metil-1H-4-pirazol-carboxilic prin refluxarea acidului 1-metil-1H-4-pirazol-carboxilic în 1,2-dicloroetan anhidru cu clorură de tionil într-un raport molar de 1:2,1;
HO
C=o
SOCI.
CI
CI I
II
b. obținerea 1-metil-1H-4-pirazol-carbonil izotiocianatului prin încălzirea la reflux a clorurii acidului 1 -metil-1 Η-4-pirazol-carboxilic cu tiocianat de amoniu, în mediu de acetonă anhidră, în raport stoichiometric;
CI
II
CI I
Ojj
c. obținerea noilor tioureide prin reacția 1 -metil-1 Η-4-pirazol-carbonil izotiocianatului cu aminele corespunzătoare.
III r-nh2
IV
V
Astfel, procedeul de obținere a derivaților N-acilați ai tioureei, definiți ca mai sus, cuprinde următoarele etape:
a) prepararea clorurii acidului 1-metil-1H-4-pirazol-carboxilic prin refluxarea acidului 1-metil-1H-4-pirazol-carboxilic în 1,2-dicloroetan anhidru cu clorură de tionil într-un raport molar de 1:2;
RO 123418 Β1
b) obținerea izotiocianatului de 1-metil-1 Η-4-pirazol-carbonil prin încălzirea la reflux a clorurii acidului 1 -metiI-1 Η-4-pirazol-carboxilic cu tiocianat de amoniu, în mediu de acetonă anhidră, în raport stoichiometric;
c) obținerea noilor tioureide prin reacția 1-metil-1 Η-4-pirazol-carbonil izotiocianatului cu aminele corespunzătoare.
Un alt obiect al invenției se referă la compoziții farmaceutice care conțin ca unic principiu activ antimicrobian un derivat de tioureidă N,N-substituită a acidului 1-metil-1H-4pirazol-carboxilic, cu formula generală I, definit în revendicarea 1, împreună cu excipienți acceptabili farmaceutic.
Un alt obiect al invenției se referă la utilizarea unui derivat de tioureidă N, N-substituită a acidului 1-metil-1H-4-pirazol-carboxilic, cu formula generală I, definit mai sus, pentru prepararea unui medicament destinat tratamentului antimicrobian.
într-un aspect preferat al invenției în utilizare de mai sus, medicamentul antimicrobian este destinat inhibării expresiei virulenței tulpinilor bacteriene selectate dintre Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae 126/2007, Enterococcus faecalis 13773.
Compușii descriși prin această invenție exercită o activitate antimicrobiană cuprinsă între 250 și 1000 pg/mL și la concetrații subinhibitorii interferează expresia coordonată a factorilor de virulență enzimatici și, consecutiv, capacitatea bacteriilor patogene de a invada țesuturile gazdei. Efectul antimicrobian este prezent și față de tulpinile microbiene recent izolate din clinică care prezintă fenomene de multirezistență la principalele clase de agenți antimicrobieni cunoscuți.
a. Sinteza clorurii acidului 1-metil-1 Η-4-pirazol-carboxilic (schema 1)
Acidul 1-metil-1H-4-pirazol-carboxilic (I) este transformat în clorură acidului corespunzător (II) prin tratare cu clorură de tionil, în mediu de 1,2-dicloretan anhidru. Amestecul de reacție se refluxează timp de 3 h, iar apoi se distilează la presiune redusă, pentru a elimina 1,2-dicloretanul și clorură de tionil.
HO
ch3
I
Schema 1
b. Sinteza 1-metil-1 Η-4-pirazol-carbonil izotiocianatului (schema 2)
Izotiocianatul de 1-metil-1H-4-pirazol-carbonil (III) arezultatîn reacția clorurii acidului
-metil-1 Η-4-pirazol-carboxilic cu tiocianat de amoniu, prin refluxare timp de o oră în acetonă
RO 123418 Β1 anhidră. Tiocianatul de amoniu se anhidrizează prin uscare prealabilă la 100°C. 1
Izotiocianatul de 1-metil-1H-4-pirazol-carbonil se folosește în continuare fără a fi izolat.
nh4scn
-nh4ci
ch3
II
III
Schema 2
c. Sinteza noilor tioureide (schema 3)
S-a realizat prin adiția de amine primare (IV) la izotiocianatul de 1 -metil-1 Η-4-pirazol- 17 carbonil (III), în mediu de reacție acetona anhidră. Amestecul de reacție a fost refluxattimp de o oră și apoi turnat în apă, pentru precipitarea tioureidelor. 19
R are semnificația prezentată anterior la formula generală a noilortioureide, Schema 3. 33
Spectrele IR s-au realizat cu un aparat JASCO FT/IR-4200 prevăzut cu un accesoriu
ATR PRO450-S cu optică diamand, folosind substanță solidă în tehnica ATR. Intensitatea 35 benzilor de absorbție s-a notat: „s” pentru valori ale absorbției între 0 și 25%, „m” pentru valori ale absorbției între 25 și 50% și „i” pentru valori ale absorbției între 50 și 75%. 37
Spectrele 1H-RMN au fost înregistrate la 300 MHz, folosind un aparat Gemini 300BB, iar spectrele 13C-RMN la 75,075 MHz, folosind același aparat. Ca solvent s-a utilizat DMSO- 39 d6, iar ca standard intern TMS. Pentru atribuirea univocă a semnalelor s-au efectuat și experimente bidimensionale COSY și HETCOR. 41
Spectrele UV au fost efectuate cu un spectrofotometru UV-Vis Jasco V-650, folosind ca accesoriu o sferă integratoare ISV-722, lucrându-se cu substanța solidă pulverizată. 43 Spectrele s-au realizat pe domeniul 200-800 nm, operând la o rezoluție spectrală de 0,5 nm.
Analiza elementală s-a realizat cu un aparat Perkin Elmer CHNS/O Analyser Series 45 112400. Temperaturile de topire au fost determinate cu un aparat Electrothermal 9100 și sunt necorectate. Rezultatele obținute prin analiza spectrală și elementală confirmă structura 47 noilor compuși.
RO 123418 Β1
Se dau în cele ce urmează opt exemple de realizare a invenției.
Exemplul 1. Sinteza N-[(1-metil-1H-pirazol-4-il)carbonil]-N’-fenil-tioureei C12H12N4OS
a. Sinteza clorurii acidului 1-metil-1H-4-pirazol-carboxilic într-un balon prevăzut cu refrigerent ascendent cu tub cu clorură de calciu, se introduc 1,26 g (0,01 moli) acid 1-metil-1H-4-pirazol-carboxilic și 150 ml_ de 1,2-dicloretan anhidrizat pe clorură de calciu și proaspăt distilat.
Se adaugă 2,5 g (1,5 ml_) (0,021 moli) clorură de tionil (Mr 119; d4 201,638) și se refluxează 3 h, excesul de clorură de tionil și 1,2-dicloretanul eliminându-se apoi prin distilare la presiune scăzută. Pentru faza următoare a sintezei, se utilizează clorură acidului în stare brută.
b. Obținerea noii tioureide
1,45 g (0,01 moli) clorură a acidului 1-metil-1H-4-pirazol-carboxilic (Mr 144,56) se solubilizează în 30 ml_ acetonă anhidră. Separat, 0,76 g (0,01 moli) tiocianat de amoniu (Mr 76,13), uscat în prealabil la 100°C, se solubilizează în 5 ml_ acetonă anhidră.
Se amestecă la rece cele două soluții, constatându-se apariția unei tulbureli și apoi a unui precipitat abundent. Amestecul de reacție se refluxează o oră, pentru obținerea izotiocianatului de 1-metil-1H-4-pirazol-carbonil.
Se răcește amestecul la temperatura camerei și se adaugă, în mici porțiuni și sub agitare, o soluție preparată din 0,93 g (0,91 ml_) (0,01 moli) anilină (Mr 93,12; d20 20 1,022) și 10 ml_ acetonă anhidră. Amestecul de reacție se refluxează timp de o oră. Se răcește și se toarnă amestecul în 500 ml_ apă, când precipită produsul brut. Se purifică prin recristalizare din alcool izopropilic.
Rezultă 1,95 g de compus cristalin alb (Mr 260,32) (randament 74,9% față de clorură acidului), cu T.t. 188-189°C, ușor solubil la rece în acetonă și cloroform, și la cald în alcooli inferiori, benzen, toluen, xilen, insolubil în apă.
Dovedirea structurii noului compus conform invenției
Analiza IR: Principalele benzi sunt (cm-1): 3271 s; 2988s; 2153s; 1740s; 1668s; 1591s; 1518s; 1438s; 1400s; 1316s; 1243s; 1218s; 1198s; 1152s; 1064s; 989s; 936s; 870s; 822s; 770s; 737m; 697m; 677m; 646m; 609m; 540s; 495s; 457s; 414s.
Analiza RMN
1H-RMN (DMSO-d6, δ ppm, J Hz): 12,35 (s, NH, H-9); 11,32 (s, NH, H-7); 8,60 (s, 1H, H-3); 8,22 (s, 1H, H-5); 7,67 (m, 7,7, 3,7, 2H, H-11, H-15); 7,41 (t, 7,7, 2H, H-12, H-14); 7,26 (t, 1H, H-13); 3,90 (s, 3H, H-16).
13C-RMN (DMSO-d6, δ ppm): 179,26 (C-8); 163,09 (C-6); 140,45 (C-5); 137,97 (C-10); 134,66 (C-3); 128,74 (C-12, C-14); 126,32 (C-13); 124,35 (C-11, C-15); 115,60 (C-4); 39,13 (C-16).
RO 123418 Β1
Analiza UV: λ max (nm): 227; 262; 342,5. 1
Analiza elementală
| c% | H% | N% | S% | ||||
| teoretic | experimental | teoretic | experimental | teoretic | experimental | teoretic | experimental |
| 55,37 | 55,12 | 4,65 | 4,60 | 21,52 | 21,29 | 12,32 | 12,08 |
Exemplul 2. Sinteza N-[(1-metil-1H-pirazol-4-il)carbonil]-N’-(3-metilfenil)tioureei
C13H14N4OS 9
Compusul se prepară prin metoda menționată anterior, fiind necesare 1,07 g (0,01 moli) meta-toluidină (Mr 107,16), alcool izopropilic și cărbune pentru purificare. Rezultă 11 1,75 g compus (Mr 274,35) (randament 63,8% față de clorură acidului), cristalizat, alb, cu T.t. 138-139°C, ușor solubil la rece în acetonă și cloroform, și la cald în alcooli inferiori, benzen, 13 toluen, xilen, insolubil în apă.
Dovedirea structurii noului compus conform invenției15
Analiza IR: Principalele benzi caracteristice sunt (cm-1): 3673s; 2987s; 2153s; 1746s;
1655s; 1606s; 1546m; 1489s; 1399s; 1347s; 1308s; 1256s; 1225m; 1148m; 1093s; 992s;17
884s; 783s; 739m; 698s; 681 m; 616s; 544s; 519s; 448s; 405s.
Analiza RMN:19
1H-RMN (DMSO-d6, δ ppm, J Hz): 12,37 (s, NH, H-9); 11,31 (s, NH, H-7); 8,60 (s, 1H, 27 H-3); 8,21 (s, 1H, H-5); 7,48 (m, 8,0, 2H, H-11, H-15); 7,29 (t, 8,0, 1H, H-14); 7,07 (d, 8,0,
1H, H-13); 3,90 (s, 3H, H-16); 2,32 (s, 3H, H-17). 29 13C-RMN (DMSO-d6, δ ppm): 179,20 (C-8); 163,13 (C-6); 140,38 (C-5); 138,10 (C-10);
137,89 (C-12); 134,61 (C-3); 128,48 (C-14); 126,90 (C-13); 124,65 (C-11); 121,33 (C-15); 31
115,53 (C-4); 39,06 (C-16); 20,93 (C-17).
Analiza UV: λ max (nm): 233,5; 259; 299,5.
Analiza elementală: 35
| C% | H% | N% | S% | ||||
| teoretic | experimental | teoretic | experimental | teoretic | experimental | teoretic | experimental |
| 56,92 | 56,81 | 5,14 | 5,01 | 20,42 | 20,63 | 11,69 | 11,82 |
Exemplul 3. Sinteza N-[(1-metil-1H-pirazol-4-il)carbonil]-N’-(2,3-dimetilfenil)-tioureei 41 C14H16N4OS
Se lucrează ca și în cazurile precedente, folosind 1,21 g (0,01 moli) 2,3-dimetil-anilină 43 (Mr 121,18), alcool izopropilic și cărbune pentru purificare.
RO 123418 Β1
Rezultă 2,05 g compus (Mr 288,37) (randament 71,1 % față de clorură acidului), cristalizat, alb, cu T.t. 141-142°C, ușor solubil la rece în acetonă și cloroform, și la cald în alcooli inferiori, benzen, toluen, xilen, insolubil în apă.
Dovedirea structurii noului compus conform invenției
Analiza IR: Principalele benzi caracteristice sunt (cm-1): 3853s; 3734s; 3673s; 3648s; 2987s; 1717s; 1660m; 1525m; 1472s; 1455s; 1393s; 1310s; 1269s; 1208m; 1169s; 1152m; 1096s; 1068s; 996s; 969s; 875s; 817s; 765m; 729m; 698m; 648s; 612s; 549s; 476s; 415s.
Analiza RMN:
1H-RMN (DMSO-d6, δ ppm, J Hz): 12,34 (s, NH, H-9); 11,35 (s, NH, H-7); 8,58 (s, 1H, H-3); 8,21 (s, 1H, H-5); 7,27 (t, 4,9, 1H, H-14); 7,11 (d, 4,9, 2H, H-13, H-15); 3,89 (s, 3H, H16); 2,26 (s, 3H, H-18); 2,10 (s, 3H, H-17).
13C-RMN (DMSO-d6, δ ppm): 180,63 (C-8); 163,18 (C-6); 140,42 (C-5); 137,27 (C-10); 136,86 (C-12); 134,62 (C-3); 132,40 (C-11); 128,55 (C-14); 125,48 (C-13(15)); 124,89 (C15(13)); 115,62 (C-4); 39,09 (C-16); 20,05 (C-18); 13,96 (C-17).
Analiza UV: λ max (nm): 227; 259; 299,5.
Analiza elementală:
| c% | H% | N% | S% | ||||
| teoretic | experimental | teoretic | experimental | teoretic | experimental | teoretic | experimental |
| 58,31 | 58,53 | 5,59 | 5,71 | 19,43 | 19,91 | 11,12 | 11,51 |
Exemplul 4. Sinteza N-[(1-metil-1H-pirazol-4-il)carbonil]-N’-(2,4-dimetilfenil)-tioureei C14H16N4OS
Sinteza urmează modul de lucru descris, utilizându-se 1,21 g (0,01 moli) 2,4-dimetilanilină (Mr 121,18), alcool izopropilic și cărbune pentru purificare.
Rezultă 2,15 g compus (Mr 288,37) (randament 74,5% față de clorură acidului), cristalizat, alb, cu T.t. 169-170°C, ușor solubil la rece în acetonă și cloroform, și la cald în alcooli inferiori, benzen, toluen, xilen, insolubil în apă.
Dovedirea structurii noului compus conform invenției
Analiza IR: Principalele benzi caracteristice sunt (cm-1): 3853s; 3734s; 3673s; 2971 s; 1748s; 1656s; 1592s; 1540s; 1490s; 1455s; 1392s; 1339s; 1229s; 1208s; 1144s; 1066s; 993s; 866s; 813s; 748s; 660s; 612s; 531s; 425s.
RO 123418 Β1
Analiza RMN:
1H-RMN (DMSO-d6, δ ppm, J Hz): 12,36 (s, NH, H-9); 11,34 (s, NH, H-7); 8,60 (s, 1H, H-3); 8,22 (s, 1H, H-5); 7,44 (d, 8,0, 1H, H-15); 7,10 (d, 1,5, 1H, H-12), 7,02 (dd, 8,0, 1,5, 1H, H-14); 3,89 (s, 3H, H-16); 2,29 (s, 3H, H-17(18)); 2,19 (s, 3H, H-18(17)).
13C-RMN (DMSO-d6, δ ppm): 180,28 (C-8); 163,15 (C-6); 140,41 (C-5); 136,23 (C-10); 134,61 (C-3); 134,40 (C-13); 133,02 (C-11); 130,95 (C-12); 126,67 (C-14); 126,43 (C-15); 115,60 (C-4); 39,08 (C-16); 20,61 (C-18); 17,60 (C-17).
Analiza UV: λ max (nm): 235; 258; 314,5.
Analiza elementală:
| c% | H% | N% | S% | ||||
| teoretic | experimental | teoretic | experimental | teoretic | experimental | teoretic | experimental |
| 5831 | 5813 | 559 | 547 | 1943 | 1954 | 1112 | 1092 |
Exemplul 5. Sinteza N-[(1-metil- 1H-pirazol-4-il)carbonil]-N’-(2,5-dimetilfenil)-tioureei C14H16N4OS
Se procedează la fel ca și pentru sinteza compușilor precedenți, folosind 1,21 g (0,01 moli) 2,5-dimetilanilină (Mr 121,18), alcool izopropilic și cărbune pentru purificare.
Rezultă 2,11 g compus (Mr 288,37) (randament 73,2% față de clorură acidului), cristalizat, alb, cu T.t. 137-137,5°C, ușor solubil la rece în acetonă și cloroform, și la cald în alcooli inferiori, benzen, toluen, xilen, insolubil în apă.
Dovedirea structurii noului compus conform invenției
Analiza IR: Principalele benzi caracteristice sunt (cm-1): 3853s; 3838s; 3734s; 3673s; 3648s; 3629s; 2974s; 2341s; 1748s; 1716s; 1669s; 1620s; 1542m; 1456s; 1402s; 1339s; 1297s; 1259s; 1226s; 1204s; 1152s; 1109s; 1082s; 991 s; 872s; 795s; 763s; 670s; 613s; 557s; 482s; 443s; 422s.
Analiza RMN:
w
RO 123418 Β1 1H-RMN (DMSO-d6, δ ppm, JHz): 12,39 (s, NH, H-9); 11,34 (s, NH, H-7); 8,59 (s, 1H, H-3); 8,21 (s, 1H, H-5); 7,39 (d, 1,5, 1H, H-15); 7,16 (d, 7,8, 1H, H-12);7,02 (dd, 7,8,1,5, 1H, H-13); 3,89 (s, 3H, H-16); 2,27 (s, 3H, H-18); 2,18 (s, 3H, H-17).
13C-RMN (DMSO-d6, δ ppm): 180,19 (C-8); 163,19 (C-6); 140,43 (C-5); 136,72 (C-14); 135,34 (C-10); 134,63 (C-3); 130,29 (C-11); 130,22 (C-12); 127,73 (C-13); 126,97 (C-15); 115,61 (C-4); 39,11 (C-16); 20,58 (C-18); 17,29 (C-17).
Analiza UV: λ max (nm): 234; 310,5.
Analiza elementală:
| c% | H% | N% | S% | ||||
| teoretic | experimental | teoretic | experimental | teoretic | experimental | teoretic | experimental |
| 58,31 | 58,01 | 5,59 | 5,45 | 19,43 | 19,99 | 11,12 | 11,37 |
Exemplul 6. Sinteza N-[(1-metil-1H-pirazol-4-il)carbonil]-N’-(2-etilfenil)tioureei
C14H16N4OS
Sinteza este similară celorlalți compuși, luându-se în lucru 1,21 g (0,01 moli) 2etilanilină (Mr 162,02), purificarea făcându-se prin recristalizare cu alcool izopropilic și cărbune animal.
Rezultă 2,07 g compus (Mr 288,37) (randament 71,8 % față de clorură acidului), cristalizat, alb, cu T.t. 130-131°C, ușor solubil la rece în acetonă și cloroform, și la cald în alcooli inferiori, benzen, toluen, xilen, insolubil în apă.
Dovedirea structurii noului compus conform invenției
AnalizaIR: Principalele benzi caracteristice sunt (cm-1): 3126s; 1658s; 1579s; 1511m; 1319s; 1216s; 1199s; 1151m; 990s; 944s; 879s; 832s; 755m; 666s; 612m; 570s; 530s; 460s.
Analiza RMN:
1H-RMN (DMSO-d6, δ ppm, J Hz): 12,47 (s, NH, H-9); 11,40 (s, NH, H-7); 8,60 (s, 1H, H-3); 8,22 (s, 1H, H-5); 7,55-7,52 (m, 1H, H-15), 7,32-7,23 (m, 3H, H-12, H-13, H-14); 3,89 (s, 3H, H-16); 2,57 (q, 7,6, 2H, H-17); 1,14 (t, 7,6, 3H, H-18).
13C-RMN (DMSO-d6, δ ppm): 180,80 (C-8); 163,34 (C-6); 140,47 (C-5); 139,04 (C-10); 136,30 (C-11); 134,70 (C-3); 128,84 (C-12); 127,44 (C-14); 127,36 (C-13); 126,15 (C-15); 115,58 (C-4); 39,12 (C-16); 24,21 (C-17); 14,51 (C-18).
RO 123418 Β1
Analiza UV: λ max (nm): 237,5; 294,5; 252. 1
Analiza elementală:
| c% | H% | N% | S% | ||||
| teoretic | experimental | teoretic | experimental | teoretic | experimental | teoretic | experimental |
| 58,31 | 58,07 | 5,59 | 5,64 | 19,43 | 19,32 | 11,12 | 10,63 |
Exemplul 7. Sinteza N-[(1-metil-1H-pirazol-4-il)carbonil]-N’-(2-n-propilfenil)tioureei C15H-18N4OS9
Se lucrează conform tehnicii menționate, folosind 1,35 g (0,01 moli) 2-n-propil-anilină (Mr 135,21), alcool izopropilic și cărbune animal pentru purificare.11
Rezultă 2,15 g (randament 71,1%) compus alb, cristalizat (Mr 302,40), cu T.t. 118,5120°C, ușor solubil la rece în acetonă și cloroform, și la cald în alcooli inferiori, benzen, 13 toluen, xilen, insolubil în apă.
Dovedirea structurii noului compus conform invenției15
Analiza IR: Principalele benzi caracteristice sunt (cm-1): 3124s; 2950s; 1657m; 1579s;
1510m; 1362s; 1321s; 1247s; 1211m; 1196m; 1152m; 1115s; 1090s; 989m; 872s; 837s;17
Os; 774m; 756m; 689; 656m; 611m; 592s; 552s; 532s; 465s; 417s.
Analiza RMN:19
1H-RMN (DMSO-d6, δ ppm, J Hz): 12,49 (s, NH, H-9); 11,39 (s, NH, H-7); 8,60 (s, 1H,31
H-3); 8,23 (s, 1H, H-5); 7,58-7,55 (m, 1H, H-15); 7,30-7,22 (m, 3H, H-12, H-13, H-14); 3,89 (s, 3H, H-16); 2,51 (t, 7,6, 2H, H-17); 1,54 (sxt, 7,6, 2H, H-18); 0,87 (t, 7,6, 3H, H-19).33 13C-RMN (DMSO-d6, δ ppm): 180,74 (C-8); 163,35 (C-6); 140,44 (C-5); 137,37 (C-10);
136,45 (C-11); 134,73 (C-3); 129,73 (C-12); 127,47 (C-14); 127,14 (C-13); 126,17 (C-15);35
115,55 (C-4); 39,10 (C-16); 33,11 (C-17); 23,07 (C-18); 13,83 (C-19).
Analiza UV: λ max (nm): 206,5; 235; 330,5; 351.
Analiza elementală: 39
| C% | H% | N% | S% | ||||
| teoretic | experimental | teoretic | experimental | teoretic | experimental | teoretic | experimental |
| 59,58 | 59,64 | 6,00 | 6,18 | 18,53 | 18,66 | 10,60 | 10,76 |
RO 123418 Β1
Exemplul 8. Sinteza N-[(1-metil-1H-pirazol-4-il)carbonil]-N’-(2-i-propilfenil)tioureei C15H18N4OS
Se lucrează conform tehnicii menționate folosind 1,35 g (0,01 moli) 2-izopropil-aniIină (Mr 135,21), alcool izopropilic și cărbune animal pentru purificare.
Rezultă 1,97 g (randament 65,2%) compus alb, cristalizat (Mr 302,40), cu T.t. 177,5179°C, ușor solubil la rece în acetonă și cloroform, și la cald în alcooli inferiori, benzen, toluen, xilen, insolubil în apă.
Dovedirea structurii noului compus conform invenției
Analiza IR: Principalele benzi caracteristice sunt (cm-1): 3181s; 2679s; 1670s; 1552s; 1515m; 1315s; 1241s; 1216m; 1198s; 1157m; 1061s; 995s; 976s; 865s; 834s; 761m; 720s; 666m;
620s; 582s; 557s; 532s; 469s; 439s.
Analiza RMN:
1H-RMN (DMSO-d6, δ ppm, J Hz): 12,41 (s, NH, H-9); 11,40 (s, NH, H-7); 8,60 (s, 1H, H-3); 8,22 (s, 1H, H-5); 7,41 (dd, 7,5, 1,8, 1H, H-12); 7,38 (dd, 7,5, 1,8, 1H, H-15); 7,30 (td, 7,5, 1,8, 1H, H-13);7,23 (td, 7,5, 1,8, 1H, H-14); 3,89 (s, 3H, H-16); 3,04 (septet, 6,7, 1H, H17); 1,18 (d, 6,7, 6H, H-18, H-19).
13C-RMN (DMSO-d6, dppm): 181,26 (C-8); 163,33 (C-6); 143,74 (C-10); 140,46 (C-5); 135,64 (C-11); 134,69 (C-3); 127,96 (C-12); 127,71 (C-13); 125,98 (C-14); 125,86 (C-15); 115,58 (C-4); 39,12 (C-16); 27,99 (C-17); 23,07 (C-18, C-19).
Analiza UV: λ max (nm): 221; 261; 330,5.
Analiza elementală:
| c% | H% | N% | S% | ||||
| teoretic | experimental | teoretic | experimental | teoretic | experimental | teoretic | experimental |
| 5958 | 5944 | 600 | 607 | 1853 | 1868 | 1060 | 1076 |
Testarea activității antimicrobiene
Testarea s-a realizat prin metode calitative și cantitative.
Screening-ul calitativ al spectrului de sensibilitate al diferitelor tulpini microbiene față de compusul testat, prin variante adaptate ale metodei disc-difuzimetrice (metoda KirbyBauer)
Materiale necesare:
a) Plăci Petri sterile cu diametrul de 10 cm în care s-a repartizat mediu MuellerHinton cu grosimea de 4 mm, agarizat 1,5% (pH= 7,2...7,4);
RO 123418 Β1
b) Tulpini microbiene testate:1
Activitatea antimicrobiană a fost testată față de tulpini bacteriene de referință sau recent izolate din clinică (Acinetobacter baumannii 15896, Bacillus subtilis 10.10.2006,3
Enterococcus faecalis 13773, Pseudomonas aeruginosa 5541, Klebsiella pneumoniae 126/2007, Staphylococcus aureus, Escherichia coli 637/2007).5
Trebuie precizat că tulpinile microbiene menționate, recent izolate din clinică, au prezentat fenomene de multirezistență la principalele clase de agenți antimicrobieni, utilizate7 în tratamentul infecțiilor cu respectivele tulpini de microorganisme. Aceste tulpini au fost izolate din infecții persistente, dificil de tratat, pentru care nu a existat alternativă terapeutică 9 cunoscută.
Din aceste tulpini se realizează inoculul microbian reprezentat de o suspensie în bulion 11 Mueller Hinton sau în A.F.S. (apă fiziologică sterilă), realizată dintr-o cultură tânără (4...5 colonii izolate) dezvoltată pe un mediu solid, în vârstă de 15... 18 h, cu o densitate de 1 -3 x 108 U FC/mL, 13 ajustată nefelometric (utilizând un etalon McFarland 0,5 = 1,5 x 108 UFC/mL) sau spectrofotometric, prin măsurarea absorbanței la 660 nm (A660= 0,12). 15
c) soluția stoc de substanță testată în DMSO (concentrație 1000 pg/mL).
Metoda 1. Testarea activității antimicrobiene a compusului prin metoda disc-difuzimetrică 17
Impregnarea discurilor de hârtie de filtru cu soluție de compus (concentrație 1000 pg/mL) se realizează astfel: cu ajutorul unei pense sterile, rondelele de hârtie de filtru se așază într-o 19 placă Petri la distanță unele de altele. Cu ajutorul micropipetei, se distribuie 5 pLde compus, astfel încât toate discurile să fie acoperite. Se plasează la termostat placa închisă, pentru 21 uscarea discurilor.
Discurile impregnate vor fi în continuare folosite la realizarea antibiogramei pe diferite 23 tulpini microbiene prin metoda disc-difuzimetrică.
în acest scop, se însămânțează plăcile “în pânză”, cu ajutorul tamponului de vată 25 steril, după care, pe suprafața mediului însămânțat, se dispun individual discurile impregnate cu compus, cu ajutorul unei pense sterile flambată în prealabil. Plasarea discurilor pe 27 suprafața mediului se face la o distanță de 3 cm față de centrele discurilor și la cel puțin 1,5 cm de marginea plăcii. După depunere, discul se apasă ușor cu pensa, pentru a asigura 29 contactul intim cu suprafața mediului. După dispunerea discurilor, plăcile se lasă în repaus la temperatura camerei 20...30 min, pentru a asigura difuzarea uniformă a substanței active 31 în mediu. Plăcile se incubează timp de 24 h, la 37°C, cu capacul în jos.
Citirea rezultatelor se realizează prin vizualizarea apariției unor zone de inhibiție a 33 creșterii microbiene în jurul discului impregnat cu soluție de compus.
Metoda 2. Testarea activității antimicrobiene a noului compus prin metoda repartizării 35 soluției de compus în godeuri decupate în agar.
Se repartizează în plăcile Petri mediul Mueller Hinton / YPG însămânțat cu inocul 37 bacterian/ fungic, după care se decupează în mediul solidificat godeuri cu latura de 0,5 cm, în care se repartizează cate 5 pL din soluția produsului de testat. Plăcile se incubează la 39 37°C, timp de 24 h.
Pentru citirea rezultatelor, se va observa apariția unor zone de inhibiție a creșterii 41 microbiene în jurul godeurilor cu compus.
Metoda 3. Testarea calitativă a activității antimicrobiene a compusului analizat 43 incubat în prealabil cu suspensia microbiană.
pl_ soluție din compus se repartizează sub formă de spoturi pe mediul de cultură 45 însămânțat în prealabil “în pânză” cu tulpina de testat. Suspensiile martor microbiene se însămânțează în aceleași condiții, darîn absența produsului de testat, care constituie martorul 47 de cultură. Plăcile se incubează la termostat cu capacul în jos, la 37°C, timp de 24 h.
RO 123418 Β1
Pentru citirea și interpretarea rezultatelor, se examinează mai întâi plăcile martor de cultură unde trebuie să se observe dezvoltarea striurilor de cultură microbiană. Dacă în placa ce conține produs nu s-a dezvoltat tulpina însămânțată, înseamnă că substanța a avut efect bactericid.
Dacă în placa respectivă se observă creștere microbiană, se compară abundența culturii cu cea a striurilor obținute pe placa martor de cultură.
Dacă creșterea și dezvoltarea culturii bacteriene este mai puțin intensă comparativ cu martorul de cultură, se apreciază că substanța ar avea efect bacteriostatic.
Se poate constata o creștere și o dezvoltare a culturilor bacteriene, în prezența compusului de testat, superioară ca intensitate martorului de cultură. Acest fapt denotă că soluția respectivă conține substanțe cu efect stimulator pentru dezvoltarea microorganismelor respective.
Dacă intensitatea creșterii microbiene în placa cu compus este comparabilă cu cea din martorul de cultură, înseamnă că respectivul compus nu influențează vizibil creșterea și dezvoltarea tulpinii microbiene respective.
Evaluarea cantitativă a activității antimicrobiene a compusului testat
Metoda microdiluțiilorîn mediu lichid (bulion Mueller Hinton și respectiv bulion YPG) Se realizează diluții binare seriale ale produsului de testat (obținându-se concentrații de la 1000 pg/mL până la 1,95 pg/mL) într-un volum final de 200 pl_ de mediu de cultură, repartizat în plăci cu 96 de godeuri, după care, în fiecare godeu se adaugă 30 μL de suspensie microbiană cu densitate corespunzătoare standardului MacFarland 0,5. La fiecare testare se lucrează cu martor de cultură microbiană (un șir de godeuri care conține exclusiv mediu de cultură inoculat cu suspensie microbiană) și cu martor de sterilitate a mediului (un șir de godeuri care conțin exclusiv mediul de cultură).
După incubarea adecvată a plăcilor la 37°C, timp de 24 h, se citește valoarea concentrației minime inhibitorii (C.M.I.), exprimată în pg/mL, prin observarea macroscopică a godeurilor: în primele godeuri, cu concentrații mari de compus, creșterea culturii nu este vizibilă, microorganismele fiind omorâte sau inhibate în prezența compusului. Cantitatea de compus corespunzătoare godeului cu cea mai mică concentrație care inhibă creșterea vizibilă a culturii microbiene reprezintă valoarea C.M.I. pentru produsul respectiv. în godeurile următoare, inclusiv șirul de godeuri martor de creștere, mediul se tulbură ca urmare a creșterii microbiene. în șirul de godeuri martor de sterilitate obligatoriu, mediul trebuie să rămână limpede. Din ultimul godeu ce prezintă activitate antimicrobiană și din primul godeu pozitiv pentru creșterea microorganismelor, se realizează frotiuri colorate Gram pentru confirmarea rezultatelor.
Tulpinile folosite pentru testarea activității antimicrobiene a compusului conform invenției menționate și în tabelul anterior sunt tulpini recent izolate din clinică și care nu au răspuns la tratamentul cu substanțe antimicrobiene cunoscute, cu excepția tulpinii de B. subtilis, care este o tulpină de referință.
RO 123418 Β1
Rezultatele obținute la evaluarea cantitativă a acțiunii antimicrobiene sunt prezentate în tabelul următor:
| Acinetobacter baumannii | Bacillus subtilis | Enterococcus faecalis | Pseudomonas aeruginosa | Klebsiella pneumoniae | Staphylococcus aureus | Escherichia coli | |
| Exemplul 1 | > 1000 | > 1000 | > 1000 | > 1000 | > 1000 | > 1000 | 1000 |
| Exemplul 2 | > 1000 | 1000 | > 1000 | > 1000 | 1000 | > 1000 | > 1000 |
| Exemplul 3 | 250 | > 1000 | > 1000 | 1000 | 500 | > 1000 | > 1000 |
| Exemplul 4 | > 1000 | > 1000 | 500 | > 1000 | 1000 | > 1000 | 1000 |
| Exemplul 5 | 1000 | > 1000 | > 1000 | > 1000 | > 1000 | > 1000 | > 1000 |
| Exemplul 6 | 250 | 1000 | > 1000 | 500 | 1000 | 250 | > 1000 |
| Exemplul 7 | 250 | 500 | 250 | 1000 | 500 | 500 | 1000 |
| Exemplul 8 | > 1000 | > 1000 | > 1000 | > 1000 | 1000 | > 1000 | > 1000 |
Determinarea citotoxicității compușilor brevetați
S-au utilizat culturi de celule aderente HeLa menținute la 37°C, în atmosferă de 5% CO2, în mediu de cultură DMEM:F12 = 1:1 (Sigma), suplimentat cu 10% ser fetal de vițel (Sigma) și 400 UI/mL penicilină, 200 mg/mL streptomicină. Celulele au fost cultivate în plăci Falcon cu 96 de godeuri, 1 x 105 celule/godeu și au fost menținute la 37°C în atmosferă cu 5% CO2. La 24 h s-a realizat tratamentul, utilizând diferite concentrații ale substanțelor testate, respectiv: 1 mg/mL; 100 pg/mL; 10 pg/mL; 1 pg/mL; 100 ng/mL; 10 ng/mL; 1 ng/mL, 100 pg/mL. S-a lucrat în triplicat. La 24 h de la tratament, s-a cuantificat viabilitatea, folosind trusa Cell Titer (Promega).
Citotoxicitatea compușilor analizați este dependentă de concentrația analizată, compușii manifestând niveluri foarte scăzute sau, respectiv, citotoxicitate absentă la concentrații <10 pg/mL. Toți compușii testați au prezentat niveluri foarte scăzute de citotoxicitate (viabilitate celulară >90%) la 10 pg/mL.
La concentrația de 100 pg/mL, compușii prezentați în exemplele 1,2 și 7 au prezentat niveluri ridicate de citotoxicitate (viabilitatea celulară <80%)
La concentrația de 1000 pg/mL, niciun compus nu a prezentat niveluri acceptabile de citotoxicitate, cu viabilitate celulară >80%.
Detectarea influenței concentrațiilor subinhibitorii a compușilor testați asupra producerii de factori de virulență solubili
Pentru a stabili influența compușilor asupra expresiei factorilor de virulență, tulpinile bacteriene au fost cultivate în prezența substanțelor sintetizate. După incubare la 37°C, timp de 24 h, tulpinile bacteriene au fost investigate pentru evidențierea diferiților factori de virulență.
RO 123418 Β1
Pentru evidențierea producerii de lecitinază, culturile au fost însămânțate în spot pe mediu solid cu gălbenuș de ou și incubate la 37°C până la 7 zile. Prezența unei zone opace (de precipitare) în jurul ariei de creștere a indicat producerea de lecitinază. Producerea de lipază a fost evidențiată prin însămânțarea culturilor în spot pe mediu solid cu adaos de Tween 80 în concentrație finală de 1% și au incubare la 37°C până la 7 zile. Prezența unei zone opace (de precipitare) în jurul ariei de creștere a indicat producerea de lipază. Pentru evidențierea producerii de proteaze, tulpinile au fost însămânțate în spot pe două tipuri de medii solide - cu cazeină, respectiv, cu gelatină, și incubate 24 h, la 37°C. Prezența unei zone de precipitare în jurul ariei de creștere a indicat proteoliza cazeinei/gelatinei și prezența cazeinazei, respectiv, a gelatinazei. Pentru observarea producerii de ADN-ază, tulpinile au fost însămânțate în spot pe geloză cu ADN și incubate 24 h, la 37°C. După incubare, peste culturile în spot s-au adăugat câteva picături de soluție HC11N, clarificarea zonei în jurul ariei de creștere a fost înregistrată ca reacție pozitivă. Producerea de amilază se observă prin însămânțarea tulpinilor în spot, pe geloză cu amidon, și incubare 24 h, la 37°C. După incubare, peste culturile în spot s-au adăugat câteva picături de soluție Lugol, clarificarea zonei în jurul ariei de creștere, față de fondul albastru al mediului, fiind înregistrată ca reacție pozitivă. Hidroliză esculinei se evidențiază prin însămânțarea tulpinilor în tuburi cu citrat de fer și esculină și incubare 24 h, la 37°C. După incubare, apariția unor precipitate de culoare neagră a fost înregistrată ca reacție pozitivă (Lazărși col., Roum. Biotechnol. Lett., 2005,10, 2225-32).
Testele pentru determinarea influenței compușilor asupra exprimării factorilor de virulență solubili au evidențiat, în general, o inhibare, în diferite grade, a exprimării unor factori de virulență. Cel mai eficient s-a dovedit a fi compusul din exemplul 5, care a înhibat producerea de lipază la S. aureus și lecitinază la Klebsiella pneumoniae, ambele enzime fiind implicate în liza celulelor eucariote și invazia procesului infecțios. Producerea de lecitinază de către Klebsiella pneumoniae a fost de asemenea inhibată de către compușii prezentați în exemplele 3, 4, și 6. Compusul de la exemplul 7 a inhibat producerea de cazeinază la E. faecalis, protează implicată de asemenea în invazia țesuturilor gazdă.
în schimb, compusul prezentat la exemplul 5 a stimulat producerea de lipază, amilază și gelatinază la Klebsiella pneumoniae, iar cel din exemplul 8 producerea de cazeinază.
Așadar, în concentrații subinhibitorii, unii dintre compușii testați interferează expresia coordonată a factorilor de virulență enzimatici și, consecutiv, capacitatea bacteriilor patogene de a invada țesuturile gazdei.
Claims (6)
- Revendicări1. Derivați de tioureidă N,N-substituită a acidului 1-metil-1H-4-pirazol-carboxilic, cu formulă generală I:caracterizați prin aceea că R este alchil CrC4 normal sau ramificat C3-C4, cicloalchil C3-C6, alchenil C2-C4, alchinil C2-C4, fenil nesubstituit, mono- sau polisubstituitcu radicali alchil Cr C4, alcoxi C-j-Cg, halogeni, nitro, heterociclu penta sau hexa atomic cu N, S, O.
- 2. Derivați de tioureidă N,N-substituită a acidului 1-metil-1H-4-pirazol-carboxilic conform revendicării 1, caracterizați prin aceea că sunt selectați dintre:N-[(1-metil-1H-pirazol-4-il)carbonil]-N’-fenil-tioureaN-[(1-metil-1H-pirazol-4-il)carbonil]-N’-(3-metilfenil-)tioureaN-[(1-metil-1H-pirazol-4-il)carbonil]-N’-(2,3-dimetilfenil)-tioureaN-[(1-metil-1H-pirazol-4-il)carbonil]-N’-(2,4-dimetilfenil)-tioureaN-[(1-metil-1H-pirazol-4-il)carbonil]-N’-(2,5-dimetilfenil)-tioureaN-[(1-metil-1H-pirazol-4-il)carbonil]-N’-(2-etilfenil)tioureaN-[(1-metil-1H-pirazol-4-il)carbonil]-N’-(2-n-propilfenil)tiourea N-[(1-metil-1H-pirazol-4-il)carbonil]-N’-(2-i-propilfenil)tiourea.
- 3. Procedeu de obținere a unui derivat de tioureidă N,N-substituită a acidului 1-metil1H-4-pirazol-carboxilic, cu formula generală I, definit în revendicarea 1, caracterizat prin aceea că are loc în următoarele etape:a. prepararea clorurii acidului 1-metil-1H-4-pirazol-carboxilic prin refluxarea acidului 1-metil-1H-4-pirazol-carboxilic în 1,2-dicloroetan anhidru cu clorură de tionil într-un raport molar de 1:2,1;b. obținerea 1-metil-1H-4-pirazol-carbonil izotiocianatului prin încălzirea la reflux a clorurii acidului 1 -metil-1 Η-4-pirazol-carboxilic cu tiocianat de amoniu, în mediu de acetonă anhidră, în raport stoichiometric.RO 123418 Β1c. obținerea noilor tioureide prin reacția 1 -metil-1 Η-4-pirazol-carbonil izotiocianatului cu aminele corespunzătoare.R-NH, £IV s oII
- 4. Compoziții farmaceutice, caracterizate prin aceea că acestea conțin ca unic principiu activ antimicrobian un derivat de tioureidă N,N-substituită a acidului 1-metil-1H-4pirazol-carboxilic, cu formula generală I, definit în revendicarea 1, împreună cu excipienți acceptabili farmaceutic.
- 5. Utilizare a unui derivat de tioureidă N,N-substituită a acidului 1 -metil-1 Η-4-pirazolcarboxilic, cu formula generală I, definit în revendicarea 1, pentru prepararea unui medicament destinat tratamentului antimicrobian.
- 6. Utilizare conform revendicării 5, în care medicamentul antimicrobian este destinat inhibării expresiei virulenței tulpinilor bacteriene selectate dintre Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae 126/2007, Enterococcus faecalis 13773.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ROA200900426A RO123418B1 (ro) | 2009-06-11 | 2009-06-11 | Tioureide ale acidului 1-metil-1h-4-pirazol-carboxilic şi procedeu de preparare a acestora |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ROA200900426A RO123418B1 (ro) | 2009-06-11 | 2009-06-11 | Tioureide ale acidului 1-metil-1h-4-pirazol-carboxilic şi procedeu de preparare a acestora |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RO123418B1 true RO123418B1 (ro) | 2012-03-30 |
Family
ID=45876105
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ROA200900426A RO123418B1 (ro) | 2009-06-11 | 2009-06-11 | Tioureide ale acidului 1-metil-1h-4-pirazol-carboxilic şi procedeu de preparare a acestora |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RO (1) | RO123418B1 (ro) |
-
2009
- 2009-06-11 RO ROA200900426A patent/RO123418B1/ro unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Masunari et al. | A new class of nifuroxazide analogues: synthesis of 5-nitrothiophene derivatives with antimicrobial activity against multidrug-resistant Staphylococcus aureus | |
| Kaplancikli et al. | Synthesis and study of antibacterial and antifungal activities of novel 2-[[(benzoxazole/benzimidazole-2-yl) sulfanyl] acetylamino] thiazoles | |
| Vicini et al. | Synthesis and antimicrobial activity of novel 2-thiazolylimino-5-arylidene-4-thiazolidinones | |
| Ashraf et al. | Metal complexes of benzimidazole derived sulfonamide: Synthesis, molecular structures and antimicrobial activity | |
| Haroun et al. | Thiazole-based thiazolidinones as potent antimicrobial agents. Design, synthesis and biological evaluation | |
| CA2529510A1 (en) | Compositions for manipulating the lifespan and stress response of cells and organisms | |
| Amnerkar et al. | Synthesis and biological evaluation of some 4-(6-substituted-1, 3-benzothiazol-2-yl) amino-1, 3-thiazole-2-amines and their Schiff bases | |
| Ghasemi et al. | Evaluation of anti-bacterial effects of some novel thiazole and imidazole derivatives against some pathogenic bacteria | |
| Tahir et al. | DNA-binding studies and biological activities of new nitrosubstituted acyl thioureas | |
| RU2019132396A (ru) | Миторибосцины: терапевтические средства на основе митохондрий, направленные на раковые клетки, бактерии и патогенные дрожжи | |
| Burkholder et al. | Further studies on the antibiotic activity of lichens | |
| Paulrasu et al. | Synthesis of 4-methyl-N′-(3-alkyl-2r, 6c-diarylpiperidin-4-ylidene)-1, 2, 3-thiadiazole-5-carbohydrazides with antioxidant, antitumor and antimicrobial activities | |
| Fareed et al. | Synthesis, spectroscopic characterization and pharmacological evaluation of oxazolone derivatives | |
| CN115768517B (zh) | 非人类动物用抗菌剂 | |
| WO2010136804A1 (en) | Pyrimidine derivatives for use as antibiotics | |
| Ichim et al. | Antimicrobial efficacy of some plant extracts on bacterial ring rot pathogen, Clavibacter michiganensis ssp. sepedonicus | |
| Dam et al. | Factors influencing capillary permeability in the vitamin E deficient chick | |
| Lam et al. | Antifungal study of substituted 4-pyridylmethylene-4′-aniline Schiff bases | |
| Gadhe et al. | Synthesis of some novel methyl2 (2 (arylideneamino) oxazol4 ylamino) benzoxazole5carboxylate derivatives as antimicrobial agents | |
| Başkan et al. | 3-Imino derivative-sulfahydantoins: Synthesis, in vitro antibacterial and cytotoxic activities and their DNA interactions | |
| El Subbagh et al. | Synthesis and biological testing of 2, 4-disubstituted thiazole derivatives as potential antitumor antibiotics | |
| Khan et al. | Schiff bases of thiazole as antibacterial and antifungal agents | |
| RO123418B1 (ro) | Tioureide ale acidului 1-metil-1h-4-pirazol-carboxilic şi procedeu de preparare a acestora | |
| Sidorov et al. | Synthesis and study of the antimicrobial activity of nifuroxazide derivatives | |
| Erol et al. | Synthesis and antibacterial and antifungal properties of thiazolinoethyl-2 (3H)-benzoxazolone derivatives. II |