RO110405B1 - Cuvă pentru separări electroforetice, în medii poroase - Google Patents

Abstract

Invenția se referă la o cuvă pentru separări electroforetice, în medii poroase, a amestecurilor complexe de compuși biologici, având molecule ionizate, în soluții cu pH controlat. Cuva conform invenției este alcătuită dintr-un corp (IJ prevăzut cu un spațiu anodic (2) și unul catodic (3), în care se află dispuși niște electrozi (4) și o placă mobilă (5), care este acționată pe verticală de o tijă (6) cu ajutorul unei pârghii (7) prevăzută la un capăt cu un buton de acționare (8). iar la celălalt capăt, cu o articulație (9) dispusă în corpul cuvei (1). Placa mobilă (5) mai susține un suport poros (17) și o folie poroasă (15), în care se efectuează separarea electroforetică; contactul optim între folia poroasă (5) și punțile electrice (13) se realizează, prin intermediul unor benzi de presiune (21), aflate în capacul (13) al cuvei (1).

Description

Prezenta invenție se referă la o cuvă pentru separări electroforetice, în medii poroase, a amestecurilor complexe de compuși biologici, având molecule ionizate, în soluții cu pH controlat.

Cuva realizează separarea simultană, a unui număr mare de amestecuri, în scopuri analitice și poate fi utilizată, în cadrul laboratoarelor de biochimie clinică medicală sau cercetare.

Este cunoscut un aparat pentru electroforeză, US 3208929, care este prevăzut cu două rezervoare tampon, de formă cubică sau hexagonală, suprapuse una peste alta, iar camera de separare se întinde peste niște suprafețe laterale, formate prin suprapunerea celor două forme geometrice.

Contactul electric, dintre rezervoarele tampon și camera de separare, se realizează prin aceea că peretele lateral menționat, posedă, la partea superioară și inferioară, câte o altă posibilitate de separare. Separarea inferioară este pusă în legătură cu un suport poros nemetalic, care lasă să treacă fluxul și pe de altă parte, împiedică ca la umplerea camerei de separare, cu lichid, componentele putând trece în vasul tampon inferior și preiau gelul solidificat.

Datorită construcției sale, acest aparat nu este indicat pentru electroforeză preparativă, pe lângă faptul că nu se prevede nici un dispozitiv de spălare a suportului poros menționat, împiedică trecerea substanțelor supuse procesului de separare. în plus, nu este prevăzută nici un fel de compensare hidrostatică, a presiunii, astfel încât nu se poate renunța la solidificarea gelului pe suportul poros, atunci când, în interesul unei electroforeze reușite, greutatea gelului și respectiv a fluidului tampon, stratificat, deasupra lui se compensează. Chiar și o diferență mică de presiune poate produce o detașare a gelului de pereții camerei de separare și în acest fel, intervine o înfundare, mai mult sau mai puțin intensă, care pune sub semnul întrebării și succesul electroforezei. în afară de aceasta, diferențele de presiune influențează, într-un mod nedorit, viteza de difuzie.

Problema tehnică, pe care o rezolvă invenția, este crearea posibilității de efectuare concomitentă a mai multor determinări analitice, cu aducerea comodă, în anumite poziții, a plăcii poroase, în interiorul incintei cuvei.

Cuva ce face obiectul invenției prezente, elimină dezavantajele cuvelor similare, prin utilizarea a două punți electrice, a unei plăci mobile, a unui suport poros și a unui capac cu două benzi de presiune.

Invenția prezintă următoarele avantaje:

- permite efectuarea unui număr mare de determinări analitice, simultan, utilizarea cu randament foarte bun a foliilor poroase, consum redus de reactivi și energie, reproductibilitate bună.

în cele ce urmează, se dă un exemplu de realizare a invenției, cu referire și la fig. 1 ... 9, care reprezintă:

- fig.l, vedere de ansamblu, a cuvei;

- fig.2, vedere a punții electrice;

- fig.3, vedere a unei alte fețe a punții electrice;

- fig.4, vedere cu secțiune, a montării punții electrice, în corpul cuvei;

- fig.5, vedere a suportului poros;

- fig.6, vedere a capacului;

- fig.7, vedere a unei alte fețe a capacului;

-fig.8, vedere parțial secționată a cuvei;

- fig.9, vedere parțial secționată, a cuvei cu dispozitivul de acționare a plăcii mobile.

Cuva pentru separări electroforetice, conform unui exemplu de realizare, este alcătuită dintr-un corp 1, prevăzut cu un spațiu anodic 2 și unul catodic 3, în care se află niște electrozi 4 și o placă mobilă 5. Placa mobilă 5 este acționată, pe verticală, de o tije 6, cu ajutorul unei pârghii 7, prevăzută, la un capăt, cu un buton de acționare 8, iar la celălalt capăt, cu o articulație 9, dispusă în corpul cuvei 1.

Pentru menținerea plăcii mobile 5 întro poziție superioară A, aceasta se realizează, prin intermediul unei piese de fixare 10. în corpul cuvei, se află dispuse niște plăci dreptunghiulare 11 și niște suporți mecanici 12, în număr de patru, pentru fixarea unor punți electrice 13. Puntea electrică 13 este placată cu o folie poroasă 14, peste care se aplică o altă folie poroasă 15, ambele folii poroase având aceeași compoziție. întreg ansamblul format din puntea electrică 13 și foliile poroase 14, 15 este prevăzut cu niște elemente de fixare 16, prin intermediul cărora ansamblul astfel format se poate monta în suporți mecanici 12, din interiorul cuvei 1. Pe placa mobilă 5, se așază un suport poros 17, prevăzut cu un șanț longitudinal a, cu rol de a împiedica difuzia probelor.

Pe părțile laterale ale corpului cuvei 1, se află dispuse niște elemente de sprijin, din care unul fix 18 și un altul mobil 19, dispuse opus pentru montarea unui capac 20 și a plăcii mobile 5.

Capacul 20 este prevăzut cu o fantă b ce permite aplicarea probelor de analizat și niște locașuri c, ce permit poziționarea aplicatorului de probe, iar pe partea dorsală, are prevăzute niște benzi de presiune 21.

Utilizarea cuvei conform invenției se efectuează în modul următor: se introduc, în spațiul anodic și cel catodic, volume de soluție tampon, confonn construcției cuvei, astfel încât nivelul lichidului să fie cu 2 mm deasupra plăcilor centrale. Punțile electrice 13 umectate cu soluție tampon se fixează în corpul cuvei, cu ajutorul suporților mecanici

12. Se fixează placa mobilă 5 în poziția superioară, utilizând butonul de acționare 8 și piesa de fixare 10. Suportul poros 17 umectat cu soluție tampon se așază pe placa mobilă cu șanțul longitudinal a în partea stângă. Folia poroasă 15 ce alcătuiește mediul poros, în care se efectuează separarea electroforetică, umectată cu soluție tampon, se montează deasupra suportului poros 17, in contact cu punțile electrice 13. Se montează capacul 20 utilizând elementele de sprijin 18 și 19. Benzile de presiune 21 realizează contactul optim, între folia poroasă 15 și punțile electrice 13. Prin fanta b a capacului 20 se aplică pe suprafața foliei poroase 15 probele de analizat, utilizând spreexemplu un aplicator, în sine cunoscut, (US 2868020). Se fixează placa mobilă în poziția coborât B, utilizând piesa de fixare 10 și butonul de acționare 8. în acest mod, suportul poros 17 nu mai este în contact cu folia poroasă 15. Se opturează fanta b din capacul 20 și se alimentează cuva pentru electroforeză la curent continuu. în exemplul de realizare, pentru separarea pe folii de acetat de celuloză, a proteinelor din serul sanguin uman, alimentarea electrică se face timp de 20 min, la 275 v.

Folia este ulterior prelucrată chimic, iar probele sunt evaluate, utilizând un densitometru colorimetric. Punțile electrice și suportul poros sunt păstrate în soluție tampon până la o nouă utilizare.

Claims (4)

1. Revendicări

   1. Cuvă pentru separări electroforetice, în medii poroase, cuprinzând un corp paralilipipedic cu un spațiu anodic și unul catodic, în care se află electrozi și o placă mobilă caracterizată prin aceea că placa mobilă (5) este deplasabilă, pe verticală, de o tije mobilă (6), prinsă de o pârghie (7), prevăzută la un capăt cu un buton de acționare (8), iar la celălalt capăt, cu o articulație (9), amplasată într-un locaș în corpul cuvei, pentru menținerea plăcii mobile (5), în poziția superioară, servind o piesă de fixare (10).
2. 2. Cuvă confonn revendicării 1, caracterizată prin aceea că cuprinde două punți electrice (13), alcătuite din o folie poroasă (14) și un element de fixare (16).
3. 3. Cuvă conform revendicării 1, caracterizată prin aceea că cuprinde un suport poros (17) prevăzut cu un șanț longitudinal (a).
4. 4. Cuvă confonn revendicării 1, caracterizată prin aceea că cuprinde un capac (20) prevăzut cu niște benzi de presiune (21).