RO105468B1 - Tulpină Propionibacterium shermanti V.D. 1989 - Google Patents

Tulpină Propionibacterium shermanti V.D. 1989 Download PDF

Info

Publication number
RO105468B1
RO105468B1 RO13938189A RO13938189A RO105468B1 RO 105468 B1 RO105468 B1 RO 105468B1 RO 13938189 A RO13938189 A RO 13938189A RO 13938189 A RO13938189 A RO 13938189A RO 105468 B1 RO105468 B1 RO 105468B1
Authority
RO
Romania
Prior art keywords
culture
pink
medium
cells
vitamin
Prior art date
Application number
RO13938189A
Other languages
English (en)
Inventor
Gheorghe Stefanescu
Mircea Nedea
Maria Caraghin
Original Assignee
Antibiotice De
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Antibiotice De filed Critical Antibiotice De
Priority to RO13938189A priority Critical patent/RO105468B1/ro
Publication of RO105468B1 publication Critical patent/RO105468B1/ro

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Tulpina, conform invenției, este înregistrată în Colecția de bacterii și fulgi de interes industrial a Institutului de științe biologice, București la nr.2011; pe mediile de cultură se prezintă sub formă de celule coco-bacilare, de dimensiuni 1/0,5/μ, dispuse în lamă ca celule în diplo, lanțuri scurte, litere chinezești, pe suprafața mediuluisolid de cultură formează colonii de 1 ... 3 mm cu baza rotundă, profil cilindric - emisferic și culoare crem - roz, pe medii lichide de cultură aerotolerantă, tulbură ușor lichidul de cultură începând cu treimea a doua din înălțimea coloanei de lichid, prezintă sediment accentuat de culoare crem-roz, are capacitate de biosintezâ a vitaminei B12 de 25 pg/ml și la puritate de 95 ... 99%.

Description

Invenția se referă la o tulpină Propionibacterium shermanii V.D. 1989, folosită în industria farmaceutică și alimentară având un potențial crescut de bosinteză a vitaminei B12. 5
Este cunoscut un procedeu de izolare a microorganismului Propionbacterium lacticum ce constă în izolarea tulpinilor de bacterii de pe substraturi reactivate de brânză și șvaițer, în condiții aerobe, 10 cultivarea tulpinilor izolate pe un mediu agarizat solid prin treceri repetate și termostatare timp de 7 ... 14 zile pentru o trecere, după care, în final, tulpinile izolate și purificate se cultivă pe mediu 15 lichid, în vederea determinării.
Scopul prezentei invenții este de a obține o tulpină bacteriană cu un nivel crescut de biosinteză și cu un înalt grad de puritate. 20
Problema pe care o rezolvă invenția sunt caracterele morfologice, taxonomice și de cultură specifice tulpinii respective.
Tulpina, conform invenției, înregistrată în colecția de Bacterii și fungi de interes 25 industrial a Institutului de științe biologice, București, la nr.2011, pe mediile de cultură se prezintă sub formă de celule coco-bacilare de dimensiuni 1/0,5/μ, dispuse în lamă ca celule în diplo, lanțuri scurte, litere chinezești; pe suprafața mediului solid de cultură formează colonii de 1... 3 mm, cu baza rotundă, profil cilindric - emisferic și culoare crem - roz, pe medii lichide de cultură aerotolerantă, tulbură ușor lichidul de cultură începând cu treimea a doua din înălțimea coloanei de lichid, prezintă sediment accentuat de culoare crem - roz, are capacitate de biosinteză a vitaminei B12 de 25 pg/ml și o puritate de 95 ... 99%.
Pentru obținerea tulpinii Propionibacterium shermanii V.D. - 1989 se folosește tulpina de tip sălbatic Propionibacterium shermanii V.D. - 1987, înregistrată în aceeași colecție, la nr.2012. Tulpina Propionibacterium shermanii V.D. - 1989 face parte din Fam. Propionibacteriacese, genul Propionibacterium, specia freudenreichii, ssp. shermanii.
în tabelele 1, 2, 3, și 4 se dau caracterele microscopice, morfologice, culturale și fiziologice, în comparație cu tulpina parentală.
Tabelul 1
Caracteristici microscopice Tulpina parentală Propionibacterium shermanii V.D. - 1987 Tulpina selecționată Propionibacterium shermanii V.D.- 1989
Forma celulei Dimensiunea celulei Dispunere în lamă Colorația celulei Formarea de spori coco-bacili 1/0,5 μ diplo, lanțuri scurte Gram pozitivă, slabă Nu formează spori coco-bacili 1/0,5 μ diplo, lanțuri scurte, litere chinezești Gram pozitivă, intensă Nu formează spori
Tabelul 2
Caracteristici morfologice Tulpina parentală Propionibacterium shermanii V.D. - 1987 Tulpina selecționată Propionibacterium shermanii V.D.- 1989
Dimensiunea coloniei cca 1 mm 1 ... 3 mm
4
Tabelul 2 (continuare)
Caracteristici morfologice Tulpina parentală Propionibacterium shermanii V.D.- 1987 Tulpina selecționată Propionibacterium shermanii V.D. - 1989
Forma coloniei rotundă rotundă
Profilul coloniei emisferic cilindric-emisferic
Marginea coloniei întreagă întreagă
Aspectul coloniei lucios lucios
Culoarea coloniei alb-crem crem-roz
Aderența la substrat slabă slabă
Tabelul 3
Caracteristici culturale pe mediu lichid Tulpina parentală Propionibacterium shermanii V.D. - 1987 Tulpina selecționată Propionibacterium shermanii V.D. - 1989
Grad de tulburare a mediului Comportament față de O2 Formare de sediment Pigmentarea sedimentului Formarea de peliculă la suprafața mediului mediu limpede anaerobă sediment slab galben-crem nu formează peliculă mediu ușor tulbure aerotolerantă sediment accentuat crem-roz nu formează peliculă
Tabelul 4
Caracteristici fiziologice Tulpina parentală Propionibacterium shermanii S.V. - 1987 Tulpina selecționată Propionibacterium shermanii V.D. - 1989
Redeucere nitrați - -
Producere CO2 ++ +++
Acidifierea mediului + +++
Producere H2S - -
Activitate celulozolitică - -
Temperatură optimă de creștere 30°C ± 1°C 30°C ± 1°C
pH optim de dezvoltare 6,5 ... 6,8 6,5 ... 6,8
Capacitate de biosinteză a vitaminei B12 15 μg/ml 25 pg/ml
Ca procedeu de obținere se procedează la treceri succesive de pe mediu solid de izolare pe mediul solid de selecție, urmate de selecția plus-variantelor tulpinei de tip sălbatic. 5
Mediul A folosit conține extract de porumb 2 g s.u., dextroză 3 g s.r., fosfat monopotasic 0,4 g, clorură de cobalt 0,001 g și ulei de floarea soarelui 0,2 g. Mediul B folosit conține extract de porumb 2 g s.u., dextroză 3 g s.r., fosfat monopotasic 0,4 g, clorură de cobalt 0,001 g și agar-agar 20g. Ingredientele se aduc la 100 ml cu apă de robinet, după care se sterilizează la 115 ...
s
... 120°C, timp de 30 min.
Creșterea culturii pe mediul lichid A se face în flacoane sterile de 500 ml mediu, prevăzute cu dop tare de vată și tifon, însămânțate cu o ansă de cultură de Propionibacterium sp. V.D. - 1987, prelevată de suprafața conservului vegetativ, care se țin la termostat la temperatura de 30 ± 1°C, timp de 72 ... 96 h, după care se fac treceri pe suprafața mediului solid B, turnat în plăci Petri sterile, cu diametrul de 120 mm, care se țin la termostat, în aceleași condiții de temperatură, timp de 14 ... 21 zile, pentru dezvoltarea coloniilor tipice.
Sunt apoi preluate cu ansa un număr de 100 colonii tipice, de culoare crem-roz, care se înămânțează în bandă ondulată pe suprafața mediului agarizat B, turnat în eprubete înclinate de 20/40 mm, prevăzute cu dop tare de vată și tifon.
Selecția coloniilor stocate pe eprubete se face în urma determinării potențialului de biosinteză a vitaminei B12, în finalul unei etape de selecție reținându-se, pentru treceri ulterioare pe mediile A și B, un număr de 2 ... 4 colonii, având cel mai ridicat nivel de biosinteză.
Determinarea potențialului de biosinteză a vitaminei B12 se face prin cultivarea coloniilor stocate pe mediul lichid C, având următoarea compoziție, în gând: extract de porumb 4,5 g s.u.; dextroză 7 g s.r.; fosfat monopotasic 1,4 g; clorură de cobalt 0,005 g; clorură de magneziu 0,05 g; pantotenat de calciu 0,05 g; cistină 0,0001 g; 5,6 - dimetilbenzimidazol 0,001 g și ulei rafinat de floarea soarelui 0,125 g; pH-ul este 6,6 ... 6,8, corectat cu NaOH și sterilizat în etuvă, timp de 30 min, la temperatura 115 ... 120°C.
Fiecare din coloniile stocate estecultivată și crescută timp de 110 h în flacoane sterile de 500 ml cu 250 ml mediu C, la termostat, la temperatura de 30 ± 1°C, după care se face determinarea potenția6 lului de biosinteză prin extracția vitaminei B12 din biomasă, prin tehnicile cunoscute și citirea titrului la spectrofometru în lungimea de undă de 550 nm.
După un număr de 8 ... 10 treceri succesive ale coloniilor selecționate pe mediile A și B după trecere stocându-se un număr de 100 colonii din care sunt selecționate 2 ... 4 colonii având cel mai ridicat nivel de biosinteză a vitaminei B12, determinat pe mediul C, se obține un material biologic nou, având un potențial de biosinteză maxim stabil de 22 ... 25 pg/ml vitaminei B12. Acest material biologic, păstrat sub formă de conserv vegetativ pe suprafața mediului solid B, în eprubete înclinate de 20/240 mm, constituie tulpina selecționată Propionibacterium shermanii V.D. - 1989.
Invenția prezintă următoarele avantaje:
- realizează o tulpină selecționată de Propionibacterium shermanii V.D. - 1989, cu o capacitate de biosinteză a vitaminei B12de 25 pg/ml;
- reprezintă un material biologic cu o mare valoare aplicativă prin posibilitățile pe care le oferă în urma prelucrărilor genetice prin metode elastice și modemr, cum ar fi recombinate, mutageneză, fuziune de protoplaști, etc;
- oferă un produs de biosinteză cu un grad înalt de puritate, de 95 ... 99% vitaminei B12;
- tulpina selecționată poate fi utilizată în industria de medicamente;
- tulpina selecționată poate fi utilizată în industria brânzeturilor de tip șvaițer, pentru obținerea unui produs calitativ superior, cu o pastă elastică și aromată și cu un conținut crescut de vitaminei B12.

Claims (1)

  1. Tulpina Propionibacterium shermanii
    V.D. - 1989, caracterizată prin aceea că este înregistrată în Colecția de Bacterii și fungi de interes industrial a Institutului de științe Biologice, București la nr.2011, pe mediile de cultură se prezintă sub formă de celule coco-bacilare, de dimensiuni 1/0,5 μ, dispuse în lamă ca celule în diplo, lanțuri scurte, litere chinezești, pe 5 suprafața mediului solid de cultură formează colonii de 1 ... 3 mm cu baza rotundă, profil cilindric - emisferic și cu8 loare crem-roz, pe medii lichide de cultură aerotolerantă, tulbură ușor lichidul de cultură începând cu treimea a doua din înălțimea coloanei de lichid, prezintă sediment accentuat de culoare crem-roz, are capacitate de biosinteză a vitaminei B12 de 25 pg/ml și o puritate de 95 ... 99%.
RO13938189A 1989-04-24 1989-04-24 Tulpină Propionibacterium shermanti V.D. 1989 RO105468B1 (ro)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RO13938189A RO105468B1 (ro) 1989-04-24 1989-04-24 Tulpină Propionibacterium shermanti V.D. 1989

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RO13938189A RO105468B1 (ro) 1989-04-24 1989-04-24 Tulpină Propionibacterium shermanti V.D. 1989

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RO105468B1 true RO105468B1 (ro) 1995-01-23

Family

ID=20124550

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RO13938189A RO105468B1 (ro) 1989-04-24 1989-04-24 Tulpină Propionibacterium shermanti V.D. 1989

Country Status (1)

Country Link
RO (1) RO105468B1 (ro)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MD615G2 (ro) * 1994-12-26 1997-06-30 Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы Procedeu de cultivare a Propionibacterium freudenreichii s.s. shermanii

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MD615G2 (ro) * 1994-12-26 1997-06-30 Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы Procedeu de cultivare a Propionibacterium freudenreichii s.s. shermanii

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Sopalun et al. Isolation and screening of extracellular enzymatic activity of endophytic fungi isolated from Thai orchids
Magan et al. Effect of temperature and pH on water relations of field and storage fungi
Antai et al. Micro‐organisms associated with African locust bean (Parkia filicoidea Welw) fermentation for ‘dawadawa’production
Obeta A note on the micro‐organisms associated with the fermentation of seeds of the African oil bean tree (Pentaclethra macrophylla)
Yong et al. Microbial succession in experimental soy sauce fermentations
Ghelue et al. Early interactions between Alnus glutinosa and Frankia strain ArI3. Production and specificity of root hair deformation factor (s)
Buhagiar et al. The yeasts of strawberries
Zahoor et al. Isolation and characterization of vinegar culture (Acetobacter aceti) from indigenous sources
CN107354102B (zh) 一种耐高糖季也蒙毕赤酵母菌株及其应用
CN100434506C (zh) 尖顶羊肚菌菌株的筛选及菌种制备方法
JPH03172171A (ja) 微生物の培養法
Bechem et al. Characterization of palm wine yeasts using osmotic, ethanol tolerance and the isozyme polymorphism of alcohol dehydrogenase
Oladoja et al. Wine produced from date palm (Phoenix dactylifera L.) fruits using Saccharomyces cerevisiae X01 isolated from Nigerian locally fermented beverages
Chapman Effect of temperature on growth rate of seven thermophilic fungi
RO105468B1 (ro) Tulpină Propionibacterium shermanti V.D. 1989
Swings et al. The genera Gluconobacter and Acetobacter
CN103190585A (zh) 一种新的芽菜生产工艺
JP7152921B2 (ja) 特定の地域の生育する椿由来の新規酵母
Delucca II et al. Isolation and identification of lipolytic microorganisms found on rough rice from two growing areas
Jagadeesh et al. Effect of Fermentation Period on Alcohol Content, pH, TSS and Titrable Acidity during Microbial Processing of Coconut Water for the Development of Coconut Wine
B. Shayo, A. Kamala, AB Gidamis, SAM Nnko Aspects of manufacture, composition and safety of orubisi: a traditional alcoholic beverage in the north-western region of Tanzania
Chysirichote Effect of aeration mode on the red pigment production by Monascus ruber on rice during fermenting in the packed bed bioreactor
Dag et al. Antimicrobial pigment from Fusarium graminearum: optimizing conditions and utilizing agro-industrial residues
Kinderlerer Ethanol production in table jelly by two species of Chrysosporium
Anyanwu et al. Bacteria and fungi associated with the deterioration of cocoyam Colocasia esculenta (Taro)