PT93590A

PT93590A - Processo para a preparacao de novos derivados de1,4-didesoxi-1,4-imino-l- arabinitol com actividade inibidora da alfa-glucosidase

Info

Publication number: PT93590A
Application number: PT93590A
Authority: PT
Inventors: Jean-Bernard Ducep; Charles Danzin
Original assignee: Merrell Dow Pharma
Priority date: 1989-03-29
Filing date: 1990-03-28
Publication date: 1990-11-20
Also published as: HUT53115A; ZA902279B; JPH02268154A; CN1045975A; AU5217990A; CA2013382A1; NO901422D0; EP0389723A1; EP0390674A1; FI901548A0; NO901422L; HU901879D0

Description

MERRELL DOW PHARMACEUTICALS INC "PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE NOVOS DERIVADOS DE 1,4-DIDESOXI--1,4-IMIN0-L-ARABINIT0L COM ACTIVIDADE INIBIDORA DA^-GLUCOSIDASE" A presente invenção diz respeito a novos derivados de 1,4-didesoxi-l,4-imino-L-arabinitol, aos processos para a sua preparação e às suas utilizações práticas especialmente à sua uti_ lização no tratamento da diabetes.

Mais específicamente, a presente invenção diz respei_ to a novos derivados N-glicosílicos de 1,4-didesoxi-l,4-imino-L--arabinitol, aos processos químicos para a preparação destes corn postos, à sua capacidade para inibir a ^C-glucosidade e à sua a'pli_ cação prática no tratamento de diabetes, obesidade e doenças associadas com retrovírus especialmente com o vírus HIV descrito como causador do síndrome da imunodeficiência adquirida (SIDA).

Ainda mais especificamente, a presente invenção diz respeito a novos derivados de 1,4-didesoxi-l,4-imino-L-arabini-tol de fórmula geral

I -2- e aos seus sais de adição de ácido aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico em que n representa o número inteiro 1 ou 2 e R representa um grupo glicosilo. Este grupo glicosilo representado pelo símbolo "R" na fórmula geral I consta de radicais que comportam de 1 a 3 hexoses ou pentoses que eventualmente comportam um grupo éter ou acilo no átomo de carbono anómero.

Sais de adição de ácido são os sais preparados a pa:r tir de ácidos inorgânicos como, por exemplo, os ácidos clorídrico, bromídrico, sulfúrico, fosfórico ou outros similares; com ácidos carboxílicos orgânicos como, por exemplo, os ácidos acético, propiónico, glicólico, láctico, pirúvico, malónico, succínico, fumárico, málico, tartárico, . cítrico, ascórbico, maleico, hidroximaleico e di-hidroximaleico, benzóico, 2-aceto_ xibenzóico, madélico ou outros similares; e a partir de ácidos sulfónicos orgânicos, como por exemplo o ácido metanossulfóni-co e o ácido p-toluenossulfónico.

Na generalidade, o grupo mono-, di- ou tri—sacárido (isto é, o grupo glicosilo definido pelo símbolo "R") pode en-contrar-se ligado directamente - ou através de uma ponte alqui-lénica a um átomo de azoto do grupo 1,4-didesoxi-l, 4- -imino-L-arabinitol quer através de um átomo de carbono exocí-clico ou dum núcleo de pentose ou de hexose o que permite a formação de um grande número de isómeros de posição para cada grupo glicosilo individual. Também se podem ligar entre si pentoses ou hexoses similares ou diferentes através de uma ponte glicosídica de oxigénio em que o átomo de oxigénio que serve de ponte se encontra ligado a um átomo de carbono exocíclico e/ou endocíclico da pentose ou da hexose da qual o grupo glicosilo faz parte; também neste caso se incluem todos os isómeros de -3-

posição no âmbito da presente invenção.

Exemplos de grupos glicosilo designados pelo símbolo "R" na fórmula geral I são monossacáridos tais como grupos glucosilo, galactosilo, fucosilo, frutosilo, manosilo, ribosi-lo, arabinosilo, xilosilo, alosilo, altrosilo, gulosilo, ido-silo, talosilo ou lixosilo; dissacáridos tais como, isomalto-silo, tre-halosilo, e p celobiosilo, maltosilo e trissacári-dos tais como maltotriosilo ou celotriosilo. Grupos glicosilo preferidos são 6- ou 4—glucosilo, 1- ou 6·—frutosilo, 6- ou 4—maltosilo e 6- ou 4—.isomaltosilo. Derivados etéreos são os derivados em que o grupo hidroxi ligado ao átomo de carbono anó^ ^ero se encontra eterificado e inclui os derivados alquílicos C, , de preferência derivados metílicos e aromáticos tais como l-o grupos fenilo ou benzilo. Derivados de acilo, tais como os preparados a partir de átomos de carbono anómeros mediante reac-ção do radical hidroxi livre com ácidos alcanóicos ou com o ácido benzóico são também incluídos ainda que tais grupos aci-lados se possam eliminar facilmente do radical glicosilo. Rad_i cais acilo preferidos são os que se obtêm com os ácidos acéti^ co ou benzóico.

Na generalidade, os compostos de fórmula geral I podem-se preparar por técnicas similares às técnicas conhecidas, podendo observar-se estas reacções nos esquemas reaccionais A e B seguintes

ESQUEMA DE REACÇÃO A

•—os2 r20*\ \_j“ a2o. + X-tCHj)^ \ i—or2 ''^H-<CH2)nK1 r2o (2) r2o (3) Desprotecção HO. jy& , Cl OH / * m 1 (CH2)nR

ESQUEMA DE REACÇAO B

+ -> (6)

I -5- em cada um dos Esquemas A e B os compostos de fórmula geral I têm o significado definido antes. representa um grupo glicosilo com, eventualmente radicais hidroxi livres comportando um grupo protector da reacção, contendo este grupo glicosilo uma a três hexoses ou pen-toses, cujos átomos de carbono anómeros terminais podem comportar eventualmente um grupo hidroxi, alcoxi C^_g, -O-C-alquilo C. Q ou benzilo; II 1-8 0 X representa um átomo de cloro, bromo, iodo ou oxigénio acti^ vado; n representa o número inteiro 1 ou 2; R2 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo protector da reacção com a condição de R2 não representar um átomo de hidrogénio e os radicais hidroxi livres dos grupos gli cosilo comportarem um grupo protector da reacção quando X representa um átomo de oxigénio activado. Os compostos de fórmula geral 5 são derivados modificados do 1,4-D-xili-tol.

Para exemplificar mais facilmente a preparação dos compostos de fórmula geral I, apresentam-se os esquemas reaccionais gerais A e B através dos seguintes esquemas reaccionais C e D.

-6- W

ESQUEMA DE REACÇÃO C

BnO .OBn> ^pBn

CS3CI3

(D .íâ)

(9) (10) ESQUEMA DE REACÇAO D:

HO 0CH3(lã) em que, no esquema C, o triflato (istoé, o grupo -OSOD^CF^) é representativo de um átomo de oxigénio activado e, no esque_ ma D, o átomo iodo é representativo dos átomos de halogéneo representados pelo símbolo X e Bn representa um grupo benzilo que é representativo dos grupos protectores do radical hidroxi representado pelo símbolo P'g nos esquemas A e B.

Para realizar as reacções dos esquemas A, C e D, é preferível condensar um grupo 1,4-didesoxi-l,4-imino-L-arabini^ tol convenientemente protegido no grupo hidroxi £ um composto de fármula geral (2) ou (7) ou um composto não protegido de fórmula geral (12)J7 com um triflato de glicosilo convenientemente protegido no grupo hidroxi £ um composto de fórmula geral (3) ou (8) J ou um halogeneto (um composto de fórmula geral (11) de preferência um iodeto. Nestas circunstâncias, quando o 1,4-didesoxi-l,4-imino-L-arabinitol se submete a uma reacção de acoplamento com um triflato, a reacção realiza-se submetendo a aquecimento, à temperatura de refluxo, uma mistura de quantidades equimolares dos reagentes no seio de um dissolvente isento de álcool e água, de preferência no seio de um dissolvente clorado tal como o clorofórmio, em atmosfera inerte, de preferência em atmosfera de azoto ou árgon, durante aproximadamente 1 a 3 dias, até à conclusão da reacção. Utilizando técnicas convencionais para a separação e purificação dos produtos reaccionais, eliminam^se os grupos protectores de modo a obter o produto pretendido. A reacção de desbenzila-ção realiza-se facilmente utilizando técnicas convencionais tais como uma hidrogenação catalítica no seio de um dissolvente apropriado, por exemplo no seio do etanol utilizando um catalisador tal como paládio ou carvão ou mediante uma hidrogenjj -8-

ção de transferência utilizando ciclo-hexeno e metanol. Quando se utilizam ésteres (parcial ou totalmente) como grupos protectores do radical hidroxi, é preferível eliminar primeiro o grupo éster mediante tratamento com quantidades catei líticas de uma base, por exemplo,um alcéxido alcalino (tal co mo metéxido de sédio em etanol) ou com amdnia em metanol para hidrolisar os ésteres e desproteger seguidamente os éteres beri zílicos utilizando as técnicas de hidrogenação citadas antes.

Quando se submete um halogeneto (cloro, bromo ou . iodo) de glicosilo a uma reacção de acoplamento com o l,4-did£ soxi-1t4-imino-L-arabinitol, esta reacção realiza-se mediante aquecimento de reagentes convenientemente protegidos no grupo hidroxi no seio de dimetilformamida (DMF) anidra ou de outro dissolvente equivalente sob o ponto de vista funcional a uma temperatura compreendida entre cerca de 60° e 90°C durante 12 a 36 horas realizando tal aquecimento mediante utilização de quantidades em excesso de uma base fraca como, por exemplo, carbonato de potássio ou de um peneiro molecular, utilizando de preferência quantidades molares excedentes do halogeneto (até ao triplo) relativamente à amina. Nesta reacção de condensação não é necessário utilizar um grupo protector do radical hidroxi mas, em caso afirmativo, embora o grupo preferido seja o grupo benzilo, podem utilizar-se também outros grupos protectores bem conhecidos que se eliminam de acordo com a té£ nica descrita na presente memória'. 0 esquema reaccional B realiza-se aquecendo à temperatura de refluxo os reagentes em associação com acetonitrilo, utilizando um excesso de uma amina de fórmula geral (6) ou na presença de uma amina terciária, de acordo com a técnica des- -9- crita por G. W. J. Fleet and Yong Chan Son em "Tetrahedron", Vol. 44, NS 9, 1988 p. 2637 a 2647).

Triflatos glicosilicos de fórmula geral (3) e halo-genetos glicosilicos de fórmula geral (6) convenientemente pr£ tegidos no grupo hidroxi são radicais glicosilicos (mono-, di-, ou trissacáridos de fórmula'geral I) em que os grupos hidroxi foram protegidos com um grupo éster ou com um éter. Esteres pr£ feridos são os ésteres de benzoatòs ou os de acetatos, embora se possam utilizar outros ésteres alcanoílicos especialmente aqueles que comportam até seis átomos de carbono. 0 éter prefe^ rido é o éter benzílico. Estes compostos protegidos podem pre-Parar-se utilizando técnicas convencionais.

Os triflatos glicosilicos, dos quais o composto de fórmula geral 3 é representativo, preparam-se utilizando técn_i cas convencionais como por exemplo mediante uma reacção de um glicosilo protegido no grupo hidroxi com anidrido de trifluo-ro-metilsulfonato no seio de um dissolvente clorado durante aproximadamente 1 a 3 horas a uma temperatura compreendida entre -78°C e -10°C.

Os halogenetos glicosídicos, dos quais o composto de fórmula geral (6) é representativo, podem preparar-se utilizar^ do técnicas convencionais a partir de um glicosido conveniente^ mente protegido no grupo hidroxi que comporta um grupo hidroxi livre. Nessas circunstâncias converte-se a função álcool no al_ deldo correspondente mediante uma oxidação de Swern (tratamento com cloreto de oxalilo no seio dimetilsulfóxido e trietil-amina), e depois mediante uma conversão in situ do aldeído numa olefina através de uma reacção de Wittig (através de um "ileto" preparado a partir de brometo de metiltrifenilfosfónio utili- -10- zando um equivalente de cada um dos compostos n-butil-lítio, t-butóxido de potássio e t-butanol no seio de tetra-hidrofura^ no à temperatura ambiente durante aproximadamente 4 a 8 horas). Converte-se a olefina no álcool correspondente mediante uma reacção de hidroboração (tratamento com dimetilsulfureto de boro, em atmosfera de azoto, seguida de uma reacção de oxidação com peróxido de hidrogénio ou hidróxido de sódio). Submete-se o álcool a uma reacção de mesilação (tratamento com cloreto de mesilo em diclorometano no seio de trietilamina em excesso a uma temperatura compreendida entre -15°C e 0°C) e converte-se o mesilato no halogeneto correspondente (mediante tratamento no seio de éter à temperatura de 0°C com um halogeneto de magnésio) utilizando de preferência um iodeto.

Os exemplos seguintes ilustram o processo e as té£ nicas apropriadas para a preparação dos compostos de acordo com a presente invenção. EXEMPLO 1 Preparação de 2.5.4- tri — O-benzil-é-O-trifluorometilsulfonil-^W-D-qlucopira-nosldeo metllico A uma solução de 0,46 ml de piridina anidra em 17,5 ml de cloreto de metileno arrefecido à temperatura de -15°C adicionou-se 0,87 ml de anidrido do ácido trifluorometanossul-fónico. Agitou-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -10°C, depois do que se adicionaram 1,2 g (2,58 mmoles) de 2.5.4- tri—0-benzil-\-D-glucopiranos!deo metilico em 5 ml de cloreto de metileno £?. Kovac, V. Sklenar e C. Glaudemans; "Carbohydr. Res."; 175, 1988, p.201.7. Agitou-se a mistura durante -11-

·'/ **s’ •j «p*-' 90 minutos à temperatura de -10°C. Lavou-se a mistura reacci£ nal com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se a pressão reduzida obtendo-se um óleo que se submeteu a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de hexano e acetato de etilo (7:3). Obtiveram-se 1,43 g (rendimein to 93¾) de 2,3,4-tri-0-benzil-6-0-trifluorometilsulfonil-^-D--glucopiranosídeo que se cristalizou no seio de hexano. P.F. 44°-45°C. EXEMPLO 2 Preparação de 2,3,5-tri-Q-benzil-l,4-Didesoxi-l,4-£‘ (2,3,4-tri-0-benzil-6--desoxi-l-O-Metil-6-^-D-qlucopiranosil)-imino .J-L-arabinitol

Em atmosfera de azoto aqueceu-se à temperatura de refluxo durante 48 horas uma solução de 0,903 g (1,52 mmoles) de 2,3,4-tri-O-benzil-é-O-trifluorometilsulfonil D-glucopirano-sídeo metílico e 0,611 g (1,52 mmoles) de 2,3,5-tri-0-benzil--1,4-didesoxi-l,4-imino-L-arabinitol £*G.W.J. Fleet, S.J. Ni-cholas, P.W. Smith, S.V. Evans, L.E. Fellows e R.J. Nash; "Te-trahedron Letters"; 2j5, 1985 p. 3127,,7 em 55 ml de clorofórmio isento de etanol. Diluiu-se a mistura com cloreto de metileno e lavou-se sucessivamente com uma solução aquosa saturada de carbonato de hidrogénio e sódio e uma solução saturada de cloreto de sódio. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sj5 dio, filtrou-se e concentrou-se a pressão reduzida obtendo-se um óleo que se submeteu a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de hexano e de acetato de etilo (6:4). Obteve-se 0,9 g (rendimento 70¾) -12- de 2,3,5-tri-0-benzil-l,4-didesoxi-l,4^f (2,3,4-tri-O-benzil--6-desoxi-l-0-metil-6-A£-D-glucopiranosil)-imino J-L-arabini-tol sob a forma de uma espuma branca. EXEMPLO 3 Preparagão de 1.4- didesoxi-l,4-Z*(é-desoxi-l-Q-metil-ó-^-D-qlucopiranosil)--imino ,7-L-arabinitol

Em 40 ml de uma mistura de metanol e ácido acético (1:1) dissolveu-se 0,773 g (0,91 mmole) de 2,3,5-tri-O-benzil--l,4-didesoxi-l,4-Z. (2,3,4-tri-0-benzil-6-desoxi-l-0-metil-6--¾.-D-glucopiranosil )-imino ,7-L-arabinitol e adicionaram-se 70 mg de paládio a 10% sobre carvão. Agitou-se a mistura em atmos fera de hidrogénio à pressão atmosférica durante 4 dias. Separou-se o catalisador por filtração e evaporaram-se os dissolventes a pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em água e fez-se passar através de uma coluna de Amberlyst A26 OH®. Mediante uma liofilização obteve-se 0,118 g (rendimento 40%) de 1.4- didesoxi-l, 4-£ (é-desoxi-l-O-metil-6-^J-D-glucopiranosil )-imino,7-L-arabinitol sob a forma de um sdlido amorfo. EXEMPLO 4 Preparação de 2.3.4- tri-0-benzil-6,7-didesoxi-^-D-gluco-hept-6-eno-piranosI-deo metílico A uma solução de 1,05 ml (17,22 mmoles) de cloreto de oxalilo em 40 ml de tetra-hidrofurano anidro arrefecido à temperatura de -78°C adicionaram-se gota a gota 1,3 ml (18,04 -13- mmoles) de dimetilsulfdxido anidro depois do que se agitou durante 33 minutos à temperatura de -35°C. Arrefeceu-se a mistura reaccional novamente até à temperatura de -78°C e adicionaram-se 6 g (16,4 mmoles) de 2,3,4-tri-0-benzil-^(l-D-glucopi-ranosideo dissolvidos em 20 ml de tetra-hidrofurano e agitou--se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -35°C depois do que se adicionaram 11,5 ml (82,65 mmoles) de trietilamina e agitou-se a mistura durante 1 hora à temperatura de -35°C. Na reacçao de Wittigque se descreve seguidamente utilizou-se o aldeído citado antes tal e qual, isto é, sem purificar e sem isolar. A 11,7 g (32,8 mmoles) de brometo de trifenilmetilfos-fénio anidro suspenso em 700 ml de tetra-hidrofurano adiciona ram-se, gota a gota, à temperatura de -78°C, 23 ml (32,66 mmoles) de uma solução 1,42 M de n-butil-lítio em hexano. Aqueceu-se a mistura reaccional até à temperatura ambiente e agitou-se durante 90 minutos. Arrefeceu-se depois a mistura até à temperatura de 0°C e adicionaram-se 3,68 g (32,8 mmoles) de t--butilato de potássio e 3 ml (31,8 mmoles) de álcool t-butíli-co anidro. Agitou-se a mistura novamente à temperatura ambiente durante 30 minutos. Arrefeceu-se a mistura reaccional até à tem peratura de -78°C e adicionou-se, gota a gota, a solução do aldeído em tetra-hidrofurano preparada antes. Aqueceu-se a mistjj ra reaccional até à temperatura ambiente e agitou-se durante 2 horas. A pressão reduzida evaporou-se uma solução aquosa saturada de cloreto de amónio e os dissolventes. Dissolveu-se o r£ síduo em éter e lavou-se com água. Secou-se a fase orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se a pressão reduzida obtendo-se um óleo castanho que se submeteu a uma croma tografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de 14-

eluição uma mistura de acetato de etilo e tolueno (4:96) obti^ veram-se 3,26 g (rendimento 55%) da olefina pretendida o 2,3, 4 -*-tri-0-benzil-6,7-didesoxi -D-gluco-hep-6-enopiranosIdeo m£ tllico que cristalizou no seio de hexano. P.F. 460-47°C. EXEMPLO 5 Preparação de 2,3,4-tri-0-benzil-6-desoxi-^.-D-qluco-heptopiranosídeo metilico

I Ά temperatura de 0°C e em atmosfera de azoto adicionou-se a uma solução de 0,878 g (2,43 mmoles) de 2,3,4-tri-O--benzil-6,7-didesoxi-^C-D-gluco-hept-6-enopiranosideo em 5 ml de tetra-hidrofurano anidro, 0,24 ml (2,4 mmoles) de uma solução 10 M de borano em sulfureto de metilo. Agitou-se a mistura durante 3 horas à temperatura ambiente. Destruiu-se o excesso de borano com 1 ml de etanol. Arrefeceu-se a mistura à temperatura de 0°C. Adicionou-se 0,3 ml de peróxido de hidrogénio a 30%. Aqueceu-se a mistura à temperatura de refluxo durante 2 horas. Diluiu-se a mistura reaccional com água e extraiu-se três vezes com éter. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sádio, fi]L trou-se e concentrou-se a pressão reduzida obtendo-se um óleo que se submeteu a uma cromatografia sobre gel de sílica utilizar^ do como agente de eluição uma mistura de acetato de etilo e hexano (1:1). Obteve-se 0,414 g (rendimento 45%) do álcool pretejn dido, o 2,3,4-tri-0-benzil-6-desoxi-\-D-gluco-heptopiranosídeo metilico que cristalizou no seio de hexano. P.F. 50°-53°C. EXEMPLO 6

Preparação de 2,3,4-tri-Q-benzil-6-desoxi-7-Q-metilsulfonil-^C-D-qluco-hepto-piranosídeõ metílico A uma solução de 0,35 g (0,92 mmoles) de 2,3,4-tri-O--benzil-6-desoxi-^i-D-gluco-heptopiranosídeo de metilo em 10 ml de cloreto de metileno anidro adicionaram-se 0,2 ml (1,43 mmoles) de trietilamina. Arrefeceu-se depois a solução até à temperatura de -10°C e adicionou-se 0,08 ml (1 mmole) de cloreto de mesilo. Agitou-se a mistura durante mais 15 minutos à tempe-ratura de -10°C depois do que se deixou a mistura reaccional aquecer até à temperatura ambiente. Lavou-se a mistura três vezes com água. Secou-se a fase orgânica sobre sulfato de sédio, filtrou-se e concentrou-se a pressão reduzida obtendo-se um éleo amarelo que se submeteu a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de acetato de etilo e hexano (40:60). Obteve-se 0,38 g (rendimento 91%) do mesilato pretendido, o 2,3,4-tri-0-benzil-6-desoxi-7-0-metilsul^ fonil-^-D-gluco-heptopiranosídeo metílico, sob a forma de um éleo . EXEMPLO 7 Preparação de 2,3,4-tri-0-benzil-6,7-didesoxi-7-iodo-V-D-qluco-heptopiranosí- deo metílico A uma solução de 0,38 g (0,83 mmole) de 2,3,4-tri-O--benzil-6-desoxi-7-0-metilsulfonil-D-gluco-heptopiranosídeo em 5 ml de éter adicionaram-se, à temperatura de 0°c, 6,7 ml de uma -16-

.·/ \ /V solução de 0,375 M de iodeto de magnésio. Agitou-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de 0°C. Hidrolisou-se o exce£ so de iodeto de magnésio com água. Lavou-se a mistura reaccio-nal com tiossulfato de sódio e água. Secou-se a fase orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se a pressão reduzida obtendo-se um óleo que se submeteu a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de acetato de etilo e éter (2:8). Obteve-se 0,368 g (rendimento 91?ó) do iodeto pretendido, o 2,3,4-tri-0-benzil-6,7--didesoxi-7-iodo-^-D-gluco-heptopiranosídeo metílico que cristja lizou no seio de hexano. P.F. 66°-68°C. EXEMPLO 8 Preparação de 2,3,5-tri-0-benzil-l,4-didesoxi-l,4- ZT(2 ,3,4-tri-0-benzil-6,7-didesoxi-l-O-metil-7-^-D-gluco-heptopiranosil)-imino ,7-L-arabi- nit ol

Durante toda a noite aqueceu-se à temperatura de 80°C uma solução de 0,338 g (0,69 mmole) de 2,3,4-tri-0-benzil-6,7-didesoxi-7-iodo Λ-D -gluco-heptopiranosídeo metílico e 0,093 g (0,23 mmole) de 2,3,5-tri-O-benzil-l,4-didesoxi-l,4-imino-L-ara_ binitol em 3 ml de dimetilformamida anidra com o 0,127 g (0,92 mmole) de carbonato de potássio anidro. Evaporou-se a dimetilfor mamida a pressão reduzida. Tratou-se o resíduo com acetato de etilo e lava-se duas vezes com água. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se a pressão reduzida obtendo-se um óleo que se submeteu a uma cromatografia so bre alumina neutra actividade III utilizando como agente de elui ção uma mistura de hexano e acetato de etilo (8:2). Obteve-se a *17-

amina pretendida, o 2,3,5-tri-0-benzil-l,4-didesoxi-l, (2, 3,4-tri-0-benzil-6,7-didesoxi-l-0-metil-7 M-Q -gluco-heptopira-nosil)-iminoJ7“L-arabinitol sob a forma de uma espuma branca. EXEMPLO 9 Preparação de 1,4-didesoxi-l, i\-£ (6,7-didesoxi-l-0-metil-7-^-D-qluco-heptopi-ranosil)-imino ,7-L-arabitinol

Em 15 ml de ácido acético dissolveu-se 0,1 g (0,116 mmole) de 2,3,5-tri-0-benzil-l,4-didesoxi-l,4-£* (2,3,4-tri-0--benzil-6,7-didesoxi-l-0-metil-7-^£-D-gluco-heptopiranosil)-imino ^-L-arabinitol. Adicionou-se 0,05 g de paládio a 10% sobre carvão. Hidrogena-se a mistura à pressão de 3 atmosferas durante dois dias. Elimina-se o catalisador por filtração e evaporam -se os dissolventes a pressão reduzida. Dissolve-se o resíduo em água e faz-se passar através de uma coluna de Amberlyst A26 OhP. Uma liofilização fornece o 1,4-didesoxi-l,4-ΖΓ(6,7-dideso-xi-l-0-metil- 7-^-D -gluco-heptopiranosil)-imino _7-L-arabinitol. EXEMPLO 10 Preparação de 2,3,5-tri-O-benzil-l,4-didesoxi-l,4-Z"(1-desoxl-2,3: 4,5-di-0--isopropilideno -^-D-frutopiranosil)-imino -arabinitol

Em atmosfera de azoto aquece-se à temperatura de r£ fluxo durante 60 horas uma solução de 1,20 g (3,06 mmoles) de 2>3:4,5-di-0-isoprapilideno-l-0-trifluorometilsulfonil-j^-D-fr£ topiranose (P.J. Card e W.D. Hitz, "J. Amer. Chem. Soc.", 106 1984 p. 5348) e 1,233 g (3,06 mmoles) de 1,4-didesoxi-2,3,5-tri--0-benzil-l,4-imino-L-arabinitol em 70 ml de clorofórmio isento -18- de álcool. Diluiu-se a mistura com cloreto de metileno e lava--se sucessivamente com uma solução aquosa saturada de carbonato de hidrogénio e sddio e uma solução saturada de cloreto de sódio. Seca-se a fase orgânica sobre sulfato de sddio, filtra--se e concentra-se a pressão reduzida obtendo-se um dleo que se submete a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizan do como agente de eluição uma mistura de hexano e acetato de etilo. Obtém-se a amina pretendida, o 2,3,5-tri-O-benzil-l,4--didesoxi-1,4^7 (l-desoxi-2,3:4,5-di-O-isopropilideno-^-D-frut£ piranosil)-imino JT-L-arabinitol sob a forma de um dleo. EXEMPLO 11

Preparação de 2,3,5-tri-O-benzil-l,4-didesoxi(l-desoxi-2-0-metil-^-D--frutofuranosil)-imino.7-L-arabinitol

Em 100 ml de metanol contendo 2% de ácido clorídrico anidro dissolve-se 1,4 g (2,17 mmoles) de 2,3,3-tri-0-benzi_l -l,4-didesoxi-l,4-Z" (l-desoxi-2,3:4,5-di-0-isopropilideno-p -*D--frutopiranosil)-imino ,7-L-arabitinol. Aquece-se a mistura à temperatura de refluxo durante 48 horas. Neutraliza-se a mistura com Amberlyst A26 0H^ e filtra-se. Evaporam-se os dissolventes a pressão reduzida. Uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de acetato de etilo e metanol fornece a amina pretendida, o 2,3,5-tri-O-beri zil-1,4-didesoxi-l, 4-ru -desoxi-2-0-metil-V-D-frutofuranosil)--imino J^-L-arabinitol. EXEMPLO 12

Preparação de 1,4-didesoxi-l,4-£ (l-desoxi-2-0-metil-^-D-frutofuranosil)-iroi-no ,7-L-arabinitol

Em 25 ml de ácido acético dissolve-se 0,617 g (1,065 mmoles) da amina 2,3,5-tri-0-benzil-l,4-didesoxi-l,4-•[(l-desoxi-2-O-metil-^-D-frutofuranosil)-imino J^-L-arabinitol e adicionam-se 0,3 g de paládio a 10% sobre carvão. Hidrogena-se a mistura durante 3 dias à pressão de 3 bar. Elimina-se o catalisador por filtração e evaporam-se os dissolventes a pressão reduzida. Dissolve-se o resíduo em água e neutraliza-se com Am-berlyst A26 OH® e fitlra-se. Seca-se a mistura a pressão reduzi^ da. Submete-se a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de clorofórmio, metanol e água. Obtém-se a amina pretendida 1,4-didesoxi-l,4-(desoxi-2-O-metil-^.-D-frutofuranosil )-imino J^-L-arabinitol sob a forma de um sólido amorfo. EXEMPLO 13 Preparação de 2,3,6-tri-0-benzil-4-0-trifluorometilsulfonil -Al-P-gal octopira-nosídeo metílico A uma solução de 0,46 ml de piridina anidra em 17,5 ml de cloreto de metileno arrefecido até à temperatura de -15°C adicionasse 0,87 ml de anidrido do ácido trifluorometanosulfóni_ co. Agita-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -10°C depois do que se adicionam 1,2 g (2,58 mmoles) de 2,3,6-tri-O--benzil D-galactopiranosídeo metílico em 5 ml de cloreto de -20- -20- •0/ .·* metileno (N. Morishima, S.Koto, M. Oshima, A. Sugimoto e S.

Zen, "Buli Chem. Soc. Jpn", 56, 1983 p. 2849). Lava-se a mistu ra com água. Seca-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida obtendo-se sob a forma de um dleo o trlflato pretendido 2,3,6-tri-0-benzil-4-0--trifluorometil-sulfonil-^t-D-galactopiranosideo metllico. EXEMPLO 14 Preparação de 2,3,5-tri-0-benzil-l,4-didesoxi-l,4-£ (2,3,6-tri-0-benzil-4-de-soxi-l-O-metil-4-^C-D-glucopiranosil )-imino .J-L-arabinitol

Em atmosfera de azoto aquece-se à temperatura de re fluxo durante 3 dias uma solução de 1,25 g (2,53 mmoles) de 2, 3,6-tri-0-benzil-4-0-trifluorometilsulfonil-^-D-galactopirano-sídeo metílico e 1,019 g (2,53 mmoles) de 2,3,5-tri-O-benzil--1,4-didesoxi-l,4-imino-L-arabinitol em 70 ml de clorofórmio isento de etanol. Dilui-se a mistura com cloreto de metileno e lava-se sucessivamente com uma solução aquosa saturada de carbci nato de hidrogénio e sódio e uma solução saturada de cloreto de sódio. Seca-se a fase orgânica sobre sulfato de sódio, filtra--se e concentra-se a pressão reduzida obtendo-se um dleo que se submete a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizar^ do como agente de eluição uma mistura de hexano e acetato de eti^ lo. Obtém-se a amina pretendida, 2,3,5-tri-O-benzil-l,4-dideso-xi-1,4^ (2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-l—0-metil-4-^-D-glucopira- nosil)-imino ^-L-arabinitol sob a forma de um óleo. EXEMPLO 15

Preparação de 1.4- didesoxi-l,4-^T (4-desoxi-l-Q-metil-4-<X.-D-glucopiranosil )--imino «7-L-arabitinol

Em 20 ml de ácido acético dissolve-se 0,91 g (1,07 mmoles) da amina 2,3,5-tri-0-benzil-l,4-didesoxi-l,k-C (2,3,6--tri-O-benzil-4-desoxi-l-O-metil-^d-D-glucopiranosil)-imino J7--L-arabinitol. Adiciona-se 0,5 g de paládio a 10¾ sobre carvão. Hidrogena-se a mistura durante 4 dias à pressão de 3 bar. Separa-se o catalisador por filtração. Evaporam-se os dissolventes a pressão reduzida. Dissolve-se o resíduo na água e neutraliza--se com Amberlyst A26 0H®. Filtra-se a mistura e seca-se a camada aquosa até à secagem a pressão reduzida obtendo-se uma espuma que se submete a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de metanol, clorofórmio e água (50:50:4). Obtém-se a amina pretendida 1,4--didesoxi-1,4-X* (4-desoxi-l-0-metil-4-^-D-glucopiranosil)-imino ,7-L-arabinitol sob a forma de uma espuma. EXEMPLO 16 Preparagão de 2.3.4- tri-0-benzil-6-0-(2,3,4-tri-0-benzil-6-0-trifluorometil-sul f o nil-^-D-glucop iranosil-^-D-qlu copirano si deo metílieo A uma solução de 0,24 ml de piridina anidra em 25 ml de cloreto de metileno arrefecido até à temperatura -15°C adicionou-se 0,45 ml de anidrido do ácido trifluorometanossul-fdnico. Agitou-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -10°C depois do que se adicionaram 1,2 (1,34 mmoles) de 6-0- -(2,3,4-tri-O-benzil-^-D-glucopiranosil )-2,3,4-tri-0-benzil-íi(--D-glucopiranosldeo metílico em 5 ml de cloreto de metileno (R. Eby e C. Schuerch, "Carbohydr. Res.", 5£; 1976 p. 203). Agita-se a mistura durante 90 minutos à temperatura de -10°C. Lava-se a mistura reaccional com água. Seca-se a camada orgânji ca sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida obtendo-se 1,35 g (rendimento 98?ó) de um óleo que coji siste no triflato pretendido o 2,3,4-tri-0-benzil-6-0-(2,3,4--tri-0HDenzil-6-0-trifluorometilsulf onil-^t-D-glucopiranosil) -D-glucopiranosideo metílico. EXEMPLO 17 Preparação de 2,3,5-tri-0-benzil-l,4-didesoxi-N-Zr2,3,4-tri-0-benzil-6-deso-xi-1-(2,3,4-tri-0-benzil-l-0-metil-6-0-^-D-qlucopiranosi l)4t-D--qlucopiranosil.7-l,4-imino-L-arabinitol

Em atmosfera de azoto aquece··—se à temperatura de re fluxo durante 48 horas uma solução de 1,35 g (1,31 mmoles) de 2,3,4-tri-0-benzil-6-0-(2,3,4-tri-0-benzil-6-0-trifluorometil-sulfonil-$(-D-glucopiranosil)-^(,-D-glucopiranosídeo metílico e 0,528 g (1,31 mmoles) de 2,3,5-tri-O-benzil-l,4-didesoxi-l,4--imino-L-arabinitol em 50 ml de clorofórmio isento de etanol. Dilui —se a mistura com cloreto de metileno e lava-se sucessivamente com uma solução aquosa saturada de carbonato de hidrogénio e sódio e uma solução saturada de cloreto de sódio. Seca--se a fase orgânica sobre sulfato de sddio, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida obtendo-se uma espuma que se submete a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de hexano e acetato de etilo. -23-

Obtêm-se a amina pretendida 2,3,5-tri-O-benzil-l,4-didesoxi-N--Z* 2,3,4-tri-0-benzil-6-desoxi-l-(2,3,4-tri-0-benzil-l-0-benzil--l-O-metil-6-O-^-D-glucopiranosil )-^-D-glucopiranosil „7-1,4-irni no-L-arabinitol. EXEMPLO 18 Preparação de l,4-didesoxi-N-/r 6-desoxi-l-(l-0-metil-6-0-*^-D-glucopiranosil)--^-D-glucopiranosil ,7-1,4-imino-L-arabinitol

Em 30 ml de metanol dissolvem-se 1,2 g (0,937 mmole) da amina 2,3,5-tri-0-benzil-l,4-didesoxi-N-/* 2,3,4-tri-O-benzil--6-desoxi-l-(2,3,4-tri-0-benzil-l~0-metil-6-0-^£-D-glucopirano-sil)-^-D-glucopiranosil^-1,4-imino-L-arabinitol. Adicionou-se 0,5'g de hidrdxido de paládio a 20?o sobre carvão. Hidrogena-se a mistura durante 4 dias à pressão de 3 atmosferas. Elimina-se o catalisador por filtração e evaporam-se os dissolventes a pre£ são reduzida. Uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de clorofórmio, meta_ nol e água fornece a amina pretendida o 1,4-didesoxi-N-/76-desoxi-l- (l-O-metil-6-O-Q^-D-glucopiranosil) -Q>(-D-glucopiranosil J7--1,4-imino-L-arabinitol. EXEMPLO 19 Preparação de 6-0-(2,3,4-tri-0-benzil-6,7-didesoxi-QÇ-D-qluco-hept-6-enopira-nosil)-2,3,4-tri-O-benzil-^-D-qlucopiranosídeo metílico A uma solução de 0,37 ml (5,97 mmoles) de cloreto de oxalilo em 40 ml de tetra-hidrofurano anidro arrefecido até à temperatura de -78°C adiciona-se gota a gota, 0,45 ml (6,26 mmo

les) de sulfóxido de dimetilo anidro e agita-se depois durante 35 minutos à temperatura de -35°C. Arrefece-se novamente a mistura reaccional até à temperatura de -78°C e adicionam-se 5,1 g (5,69 mmoles) de 6-0-(2,3,4-tri-0-benzil43^-D-glucopiranosil)--2,3,4-tri-O-benzil-C^-D-glucopiranosídeo metilico dissolvidos em 20 ml de tetra-hidrofurano e agita-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -35°C depois do que se adicionam 3,96 ml (28,45 mmoles) de trietilamina e agita-se a mistura durante 1 hora à temperatura de -35°C. Este aldeído utiliza-se depois tal e qual, isto é, sem purificação ou separação numa reacção de Wittig que se descreve seguidamente. A 4,059 g (11,38 mmoles) de brometo de trifenilmetilfosfónio anidro suspensos em 100 ml de tetra-hidrofurano adicionaram-se, gota a gota, à temperatura de 78°C, 7,34 ml (11,38 mmoles) de uma solução 1,55 M de n--butil-litio em hexano. Aquece-se a mistura reaccional até à temperatura ambiente e agita-se durante 90 minutos. Arrefece-se depois a mistura até à temperatura de 0°C e adicionam 1,275 g (11,38 mmoles) de t-butilato de potássio e 1,04 ml (11,38 mmoles) de álcool t-butílico anidro. Agita-se novamente a mistura à temperatura ambiente durante 30 minutos. Arrefece-se a mistura reaccional até à temperatura de -78°C e adiciona-se, gota a gota, a solução em tetra-hidrofurano do aldeído preparado antes. Aquece-se a mistura reaccional até à temperatura ambiente e agita-se durante 2 horas. A pressão reduzida evapora-se uma solução aquosa saturada de cloreto de aménio e os dissolventes. Díí3 solve-se o resíduo em acetato de etilo e lava-se com água. Sec£ -se a camada orgânica sobre sulfato de sédio, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida. Uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de tetra-cloreto de carbono e acetato de etilo fornece a olefina -25-

•trf"' 4· /:

pretendida o 6-0-(2,3,4-tri-0-benzil-6,7-didesoxi-V-D-gluco-hep;t -6-enopiranosil)-2,3,4-tri-0-benzil-Q£-D-glucopiranosideo metíli^ co. EXEMPLO 20 Preparação de 6-0-(2,3,4-tri-0-benzil-6-desoxi-o(-D-qluco-heptopiranosil)-2, 3,4-tri-0-benzil-o(-D-glucopiranosídeo tnetílico

Em atmosfera de azoto e à temperatura de 0°C adiciona-se a uma solução de 2,54 g (2,85 mmoles) de 6-0-(2,3,4-tri--0-benzil-6,7-didesoxi-o(-D-gluco-hept-6-enopiranosil )-2,3,4-tri--0-benzil-o<-D-glucopiranosideo metílico em 10 ml de tetra-hidro-furano anidro 0,28 ml (2,8 mmoles) de uma solução 10 M de bora-no em sulfureto de metilo. Agita-se a mistura durante 3 horas à temperatura ambiente. Arrefece-se depois a mistura até à temperatura de 0°C. Destréi-se o excesso de borano com 1 ml de eta-nol. Arrefece-se a mistura à temperatura de 0°C. Adicionam-se 0,3 ml de perdxido de hidrogénio a 30¾ e 0,3 ml de uma solução aquosa 3 N de hidróxido de sódio. Aquece-se a mistura à temperatura de refluxo durante 2 horas. Dilui-se a mistura reaccio-nal com água e extraí-se três vezes com acetato de etilo. Seca--se a fase orgânica sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida. Uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de tetra--cloreto de carbono e acetato de etilo fornece o álcool pretendido o 6-0-(2,3,4-tri-0-benzil-6-desoxi-of-D-gluco-heptopirano-sil )-2,3,4-tri-0-benzil-o(-D-gluco-piranosideo metílico . EXEMPLO 21

Preparação de 6-0-(2,3,4-tri-0-benzil-6,7-didesoxi-7-iodo-e<-D-qlueo-heptopi-ranosil)-2,3,4-tri-Q-benzil-ot-D-qlucopiranosídeo metilico A uma solução de 1.245 g (1,37 mmoles) de 6-0-(2,3, 4-tri-0-benzil-6-desoxi-o(-D-gluco-heptopiranosil )-2,3,4-tri--O-benzil-íX-D-gluca-piranosideo metilico em 15 ml de cloreto de metileno anidro adiciona-se 0,29 ml (2,05 mmoles) de trie-tilamina. Arrefece-se depois a solução até à temperatura de -10°C e adiciona-se, gota a gota, 0,11 ml (1,42 mmoles) de cl£ reto de mesilo. Agita-se a mistura mais 15 minutos à temperatu_ ra de -10°C depois do que se lava a mistura reaccional três V£ zes com água. Seca-se a fase orgânica sobre sulfato de sódio anidro, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida obtendo-se uma espuma que se utiliza tal e qual. Dissolve-se o 6-0-(2,3,4--tri-0-benzil-6-desoxi-7-0-metilsulfonil-o<-D-gluco-heptopirano-sil)-2,3,4-tri-0-benzil-o<-D-glucopiranosídeo metilico bruto em 20 ml de éter. A esta mistura adiciona-se, gota a gota, e à tejn paratura de 0°C, 17,5 ml de uma solução 0,35 M de iodeto de ma£ nésio em éter. Hidroliza-se o excesso do iodeto de magnésio com água. Lava-se a mistura reaccional com sódio, tiossulfato e água. Seca-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtr£ -se e concentra-se a pressão reduzida obtendo-se uma espuma que se submete a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de tetra-cloreto de carbono e acetato de etilo. Obtém-se o iodeto pretendido o 6-0-(2,3,4-tri-0-benzil-6,7-didesoxi-7-iodo-tf-D-gluco-heptopi-ranosil)-2,3,4-tri-O-benzil-ot-D-gluco-piranosí deo metilico. -27-

EXEMPLO 22 Preparação de 2,3,5-tri-0-benzil-l,4-didesoxi-N-Z*2>3,4-tri-0-benzil-6,7-di-desoxi-l-(2,3,4-tri-0-benzil-l-0-metil-6-Q-«-D-Glucopiranosil)--o(-D-gluco-heptopiranosil.7-l,4-imino-L-arabinitol Ά temperatura de 80°C aquece-se durante toda a noite, com 0,206 g (1,49 mmoles) de carbonato de potássio anidro, uma solução de 1,145 g (1,122 mmoles) do iodeto 6-0-(2,3,4-trjL -0-benzil-6,7-didesoxi-7-iodo-o(-D-gluco-heptopiranosil)-2,3,4--tri-0-benzil-o<-D-glucopiranosí deo metílico e 0,150 g (0,374 mmole) da amina 2,3,5-tri-O-benzil-l,4-didesoxi-l,4-imino-L--arabinitol em 4 ml de dimetilformamida anidra. Evapora-se a di_ metilformamidra a pressão reduzida.Trata-se o resíduo com acetato de etilo e lava-se duas vezes com água. Seca-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida obtendo-se uma espuma que se submete a uma cr£ matografia sobre óxido de alumínio neutro actividade III utili^ zando como agente de eluição uma mistura de tetracloreto de ca£ bono e acetato de etilo. Obtém-se a amina pretendida o 2,3,5--tri-0-benzil-l,4-didesoxi-N-2T2,3,4-tri-0-benzil-6,7-di-deso-xi-1- (2,3,4-tri-0-benzil-l-0-metil-6-0-c<-D-glucopiranosil )-o<--D-gluco-heptopiranosil J^-l^-imino-L-arabinitol . EXEMPLO 23 Preparação de 1,4-didesoxi-N-Z' 7-didesoxi-l-(l-0-metil-6-0-^-D-glucopirano-sil)-o(-D-Gluco-heptopiranosil ^7-1,4-imino-L-arabinitol

Em 30 ml de ácido acético dissolve-se 0,329 g (0,254 1 -28- mmole) da amina 2,3,5-tri-O-benzil-l,4-didesoxi-N-/* 2,3,4-tri- -0-benzil-6,7-didesoxi-1-(2,3,4-tri-0-benzil-l-0-metil-6-0-<*'- -D-glucopiranosil )-Oí-D-gluco-heptopiranosil J-1,4-imino-L-ar£ binitol. Adiciona-se 0,4 g de paládio a 10¾ sobre carvão. Hi- drogena-se a mistura durante 4 dias à pressão de 3 atmosferas.

Elimina-se o catalisador por filtração e evaporam-se os dissol^ ventes a pressão reduzida. Dissolve-se o resíduo em água e faz^ Θ -se passar através de uma coluna de Amberlyst A26 OH . Evapora-se a água a pressão reduzida. Uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de clorofórmio, metanol e água fornece a amina pretendida o 1,4-didesoxi-N-/' 6,7-didesoxi-l - (l-0-metil-6-0-ef*D-glucopirano-sil) -eí-D-gluco-heptopiranosil _7—1,4-imino-L-arabinitol. EXEMPLO 24 Preparação de 2,3,6-tri-0-benzil-4-ciano-4-desoxi-ol-D-qlucopiranosiCieo metí-lico

Em atmosfera de azoto aquece-se à temperatura de refluxo durante 24 horas uma solução de 3 g (6,07 mmoles) de 2, 3,6-tri-0-benzil-4-0-trif lu or orne til sul f onil-tX-D-galactopiran£ sídeo metílico e 6,51 g (24,28 mmoles) de cianeto de tetra-n--butil-amónio em 60 ml de clorofórmio isento de etanol. Diluiij -se a mistura reaccional com cloreto de metileno e lava-se duas vezes com água. Seca-se a fase orgânica sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida obtendo-se um óleo que se submete a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de hexano e acetato de etilo. Obtém-se o nitrilo pretendido o 2,3,6-tri-O-ben- -29- ( d zil-4-ciano-4-desoxi-o4-D-glucopiranosí deo metllico. EXEMPLO 25 Preparação de 2.3.6- tri-0-benzil-4-desoxi-4-formil-o<-D-glucopiranosideo metllico A uma solução de 1,75 g (3,7 mmoles) de 2,3,6-tri--0-benzil-4-ciano-4-desoxi-o<-D-glucopiranosí deo metllico em 10 ml de tetra-hidrofurano anidro adiciona-se, gota a gota, à temperatura de -78°C, 3,1 ml de uma solução 1,2 M de hidreto de di-isobutil-alumínio em m-hexano. Agita-se a mistura em atmosfera de argon à temperatura de -78°C durante 3 horas. Adi_ cionam-se 2 ml de metanol e aquece-se a mistura até à temperatura de 0°C. Evaporam-se depois os dissolventes a pressão redjj zida. Adicionam-se 50 ml de éter e 40 ml de uma solução aquosa 0,1 N de ácido clorídrico e agita-se a mistura durante 1 hora à temperatura de 0°C. Separa-se depois a camada orgânica por decantação, seca-se sobre sulfato de sódio, filtra-se e concein tra-se a pressão reduzida obtendo-se o aldeído pretendido o 2.3.6- tri-0-benzil-4-desoxi-4-formil-o<-D-glucopiranosídeo met_í lico que se utiliza tal e qual. EXEMPLO 26

Preparação de 2.3.6- tri-Q-benzil-4-desoxi-4-hidroximetil-o(-D-glucopiranosí-deo metílico

Dissolvem-se 1,7 g (3,57 mmoles) do aldeído 2,3,6--tri-0-benzil-4-desoxi-4-formil-o(-D-glucopiranosídeo metllico em 15 ml de etanol. Arrefece-se a mistura até à temperatura de -30- 0°C e adiciona-se pouco a pouco 0,068 g (1,8 mmoles) de hidre_ to de boro e sódio. Agita-se a mistura durante 1 hora à temp£ ratura de 0°C. Adiciona-se 0,4 ml de ácido acético e evapora-ram-se os dissolventes a pressão reduzida. Trata-se o resíduo com acetato de etilo e lava-se com uma solução aquosa saturada de carbonato de hidrogénio e sódio e uma solução saturada de cloreto de sódio. Seca-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida obtendo--se um óleo que se submete a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de he-xano e acetato de etilo. Obtém-se o álcool pretendido o 2,3,6--tri-O-benzil-4-desoxi-4-hidroxi-metil-0(-D-glucopiranosídeo rne tílico. EXEMPLO 27

Preparação de 2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-trifluorometilsulfoniloximetil-fl--D-glucopiranosídeo metilico A uma solução de 0,45 ml de piridina anidra em 30 rol de cloreto de metileno arrefecidos até à temperatura de -15°C, adiciona-se 0,84 ml de anidrido do ácido trifluorometa-nosulfónico. Agita-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -10°C depois adiciona-se 1,19 g (2,49 mmoles) de 2,3, ó-tri-0-benzil-4-desoxi-4-hidroximetil-o(-D-glucopiranosídeo metilico em 5 ml de cloreto de metileno. Agita-se a mistura djj rante 90 minutos à temperatura de -10°C. Lava-se a mistura reac cional com água. Seca-se a camada orgânica sobre sulfato de só^ dio, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida obtendo-se 1,443 g (rendimento 95%) do triflato pretendido o 2,3,6-tri-O- -benzil-4-desoxi-4-trif luorometilsulf oniloximetil-oí-D-glucop^L ranosídeo metílico, sob a forma de um óleo. EXEMPLO 28 Preparação de 2.3.5- tri-Q-benzil-l,4-didesoxi-l,4-Z* (2,3,6-tri-0-benzil-4--desoxi-l-0-metil-4-c<-D-glucopiranosil )-metilimino ^7-L-arabi-nitol

Em atmosfera de azoto aquece-se à temperatura de refluxo durante 48 horas uma solução de 1 g (1,64 mmoles) de 2.3.6- tri-0-benzil-4-desoxi-4-trifluorometilsulfoniloximetil--ctf-D-glucopiranosídeo e 0,66 g (1,64 mmoles) de 2,3,5-tri-Q--benzil~-l, 4-didesoxi-l, 4-imino-L-arabinitol em 60 ml de clorofórmio isento de etanol. Dilui-se a mistura com cloreto de metileno e lava-se sucessivamente com uma solução aquosa saturada de carbonato de hidrogénio e sódio e uma solução saturada de cloreto de sódio. Seca-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida obtendo--se uma espuma que se submete a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de hexano e acetato de etilo. Obtém-se a amina pretendida o 2,3, 5-tri-O-benzil-l,4-didesoxi-l,4-Z* (2,3,6-tri-0-benzil-4-deso-xi-1 - 0-me til-4-0(-D-glucop ir ano sil )-metilimino ,7-L-arabinitol. EXEMPLO 29 Preparação de 1,4-didesoxi-l, 4-/~ (4-desoxi-l-0-metil-4-<*»D-glucopiranosil) -me-tilimino ,7-L-arabinitol

Em 20 ml de metanol dissolve-se 0,98 g (1,13 mmoles) da amina 2,3,6-tri-0-benzil-l,5-didesoxi-l,5-/T(2,3,6-tri-0--benzil-4-desoxi-l-0-metil-4-ítf-D-glucopiranosil)-metil-imino J--L-arabinitol. Adicionam-se 10 ml de ciclo-hexeno e 0,8 g de hidróxido de paládio a 20% sobre carvão e aquece-se a mistura à temperatura de refluxo em atmosfera de azoto e durante 8 h£ ras. Elimina-se o catalisador por filtração e evaporam-se os dissolventes a pressão reduzida. Uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de clorofórmio, metanol e água fornece a amina pretendida, o 1,4-didesoxi-l, 4-2Γ (4-desoxi-l-0-metil-4-úí-D-glucopiranosil )--metilimino ^-L-arabinitol. EXEMPLO 30 Preparação de 2,3,6-tri-Q-benzil-D-galactopiranose A temperatura de 0°C dissolve-se 5 g (10,775 mmoles) de 2,3,6-tri-O-benzil-^-D-galactopiranosídeo metílico em 50 ml de uma mistura de ácido trifluoroacético e água (9:1) (N. Morishima, S. Koto, M.Oshima, A. Sugimoto e S. Zen,"Bull Chem. Soc. Jpn"; 56 1983, p.2849). Agita-se a mistura durante toda a noite à temperatura de 0°C. Evaporam-se os dissolventes a pre£ são reduzida sem aquecimento. Dissolve-se o resíduo em acetato de etilo e lava-se sucessivamente com carbonato de hidrogénio e sódio e cloreto de sódio. Seca-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida obtendo-se um óleo que se submete a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de acetato de etilo e hexano. Obtém-se a 2,3,6-tri-O-ben-zil-D-galactopiranose. EXEMPLO 31

Preparagão da l^-di-O-acetil-Z^, 6-tri-O-benzil-D-galactopiranose

Em 25 ml de piridina anidra dissolvem-se 3,927 g (8,72 mmoles) de 2,3,6-tri-O-benzil-D-galactopiranose e adicionam-se 5 ml de anidrido acético. Agita-se a mistura durante 24 horas à temperatura ambiente. Evapora-se o dissolvente no vácuo. Dissolve-se o resíduo em acetato de etilo e lava-se com água. Seca-se a camada orgânica sobre sulfato de sédio, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida obtendo-se o dia-cetato pretendido a 1,4-di-0-acetil-2,3,6-tri-0-benzil-D-gala£ topiranose sob a forma de um óleo que se utiliza tal e qual. EXEMPLO 32 Preparagão da

Cloreto de 4-0-acetil-2,3,6-tri-O-benzil-o^-D-galactopiranosilo

Trata-se uma solução de 4,64 g (8,67 mmoles) de 1,4--di-0-acetil-2,3,6-tri-O-benzil-D-galactopiranose em 10 ml de éter com 25 ml de uma solução éterea contendo 0,2 g de ácido clorídrico por ml. Agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 48 horas. Evapora-se os dissolventes a pressão reduzida obtendo-se um óleo que se submete a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de tetracloreto de carbono e acetato de etilo. Obtém--se 3,142 g (rendimento 71¾) de cloreto de 4-0-acetil-2,3,6--tri-O-benzil-0(-D-galaetQpiranosilo sob a forma de um óleo. EXEMPLO 33

Preparação de 4-0-(4-Q-acetil-2,3,6-tri-O-benzil-^-D-galactopiranosil)-2,3, 6-tri-0-benzil-c<-D-qlucopiranosldeo metílico

Com agitação adiciona-se ã temperatura de -30°C 84,5 ml (6,76 mmoles) de uma solução éterea 0,08 M de per-clorato de prata a uma solução de 2,284g(4,93 mmoles) de 2,3, ô-tri-O-benzil-eC-D-glucopiranosideo metílico C P.J. Garegg, H. Hultberg e S. Wallin, "Carbohydr. Res."; 108_ 1982, p .97 J 3,142 g (6,154 mmoles) de cloreto de 4-0-acetil-2,3,6-tri-0--benzil-rt-D-galactopiranosilo e 0,89 ml (6,76 mmoles) de 2,4, 6-trimetilpiridina em 20 ml de éter. Agita-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -30°C obtendo-se um precipitado de cloreto de prata. Filtra-se a mistura através de uma almofa da de celite, lavam-se os sdlidos com éter, e concentra-se o filtrado a pressão reduzida. Disolve-se o resíduo em cloreto de metileno e lava-se a camada orgânica sucessivamente com uma s£ lução aquosa de tiossulfato de sódio e água. Seca-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se a Pressão reduzida obtendo-se uma espuma que se submete a uma cr£ matografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de hexano e acetato de etilo. Obtém-se o 4--0-(4-0-acetil-2,3,6-tri-O-benzil-c<-D-galactopiranosil)-2,3,6--tri-O-benzil-0(-D-glucopiranosídeo metílico. EXEMPLO 34 Preparagão de 2,3,6-tri-0-benzil-4-0-(2,3,6-tri-0-benzil-^-D-qalactopiranosil)—<X-D-qlu-copiranosídeo metílico

Em 20 ml de tolueno quente dissolvem-se 2,543 g (2,71 -35- « .« mmoles) de 4-0-(4-0-acetil-2,3,6-tri-0-benzil-o(-D-galactopira-nosil )-2,3,6-tri-O-benzil-0<-D-glucopiranosídeo metllico e adí-cionam-se 80 ml de metanol seguidos de algumas gotas de uma so lução metanólica 1 M de metóxido de sódio. Agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 2 horas. Neutraliza-se a mistura reaccional com uma resina de Amberlite IR 120 (H+), filtra--se e concentra-se a pressão reduzida obtendo-se 2,42 g (rendimento 100?ó) de 2,3,6-tri-0-benzil-4-0-(2,3,6-tri-0-benzil-o(-D--galactopiranosil)-<rt-D-glucopiranosídeo metllico sob a forma de um sólido amorfo. EXEMPLO 35 Preparação de 4-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-0-trifluorometilsulf onil-o^-D-galacto-piranosil)-2,3,6-tri-0-benzil-o(-D-qlucopiranosideo metilico A uma solução de 0,49 ml de piridina anidra em 40 ml de cloreto de metileno anidro, arrefecida até à temperatura de -15°C, adicionam-se 0,91 ml de anidrido do ácido trifluoromet.a-nossulfónico. Agita-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -10°C, depois do que se adicionam 2,428 g (2,71 mmoles) de 2,3,6-tri-0-benzil-4-0-(2,3,6-tri-O-benzil-eX-D-galactopira-nosil)-o(-D-glucopiranosIdeo metllico em 10 ml de cloreto de me--tileno. Agita-se a mistura durante 90 minutos à temperatura de -10°C. Lava-se a mistura reaccional com água. 5eca-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se a prejs são reduzida obtendo-se um óleo que é o triflato pretendido o 4-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-0-trifluorometilsulfonil-^-D-galacto-piranosil)-2,3,6-tri-0-benzil-o(-D-glucopiranosIdeo metllico. -36- -36-

EXEMPLO 36 Preparação de 2,3,5-tri-0-benzil-l,4-didesoxi-N-/* 2,3,6-tri-0-benzil-4-deso- xi-l-(2,3,6-tri-0-benzil-l-0-metil-4-0-o<-D-qlucopiranosil )-o<- -D-qlucopiranosil ,7-1-4-imino-L-arabinitol

Em atmosfera de azoto aquece-se à temperatura de re fluxo durante 48 horas uma solução de 1,52 g (1,46 mmoles) de 4-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-0-trif luorometil-sulf onil-o(-D-galac-topiranosil )-2,3,6-tri-0-benzil-<tf-D-glucopiranosídeo metílico e 0,588 g (1,46 mmoles) de 2,3,5-tri-0-benzil-l,4-didesoxi-l,4--imino-L-arabinitol em 50 ml de clorofórmio isento de etanol. Di-lui-se a mistura com cloreto de metileno e lava-se sucessivameji te com uma solução aquosa saturada de carbonato de hidrogénio e sódio e uma solução saturada de cloreto de sódio. Seca-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra--se a pressão reduzida obtendo-se uma espuma que se submete a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de hexano e acetato de etilo. Obtém -se a amina pretendida o 2,3,5-tri-0-benzil-l,4-didesoxi-N-Z" 2, 3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-l-(2,3,6-tri-0-benzil-l-0-metil-4-0--^(-D-glucopiranosil )-of-D-glucopiranosil _7-l,4-imino-L-arabinitol. EXEMPLO 37 Preparação de 1,4-didesoxi-N-/* 4-desoxi-l - (l-0-metil-4-0-^'-D-glucopiranosil )--c<-D-glucopiranosil ,7-1,4-imino-L-arabinitol

Em 30 ml de ácido acético dissolve-se 1 g (0,78 mmole) de 2,3,5-tri-O-benzil-l,4-didesoxi.-N-Z"2,3,6-t'ri-0-benzi’l-4-desoxi-l-(2,3,6-tri-O- -37- h

II -benzil-l-0-metil-4-;0-oí-D-glucopiranosil í-af-D-glucopiranosil _7-l,4--imino-L-arabinitol. Adiciona-se 0,5 g de paládio a 10% sobre carvão. Hidrogena-se a mistura durante 4 dias à pressão de 3 atmosferas. Elimina-se o catalisador por filtração e evaporam--se os dissolventes a pressão reduzida. Trata-se o resíduo com água e passa-se através de uma coluna de Amberlyst A26 OH . Evíi pora-se a água a pressão reduzida e submete-se a uma cromatogra^ fia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de elui-ção uma mistura de clorofórmio, metanol e água. Obtém-se a ami^ na pretendida o 1,4-didesoxi-N-/* 4-desoxi-l-(l-O-metil-A-O-of-D--glucopiranosil)-í^-D-glucopiranosil ,7-1,4-imino-L-arabinitol. EXEMPLO 38 Preparação de l-etenil-1,2:3,4-di-O-isopropilideno-^-D-arabinopiranose A uma solução de 1,05 ml (17,22 mmoles) de cloreto de oxalilo em 40 ml de tetra-hidrofurano anidro arrefecida até à temperatura de -78°C adiciona-se, gota a gota, 1,3 ml (18,04 mmoles) de sulfdxido de dimetilo anidro depois do que se agita durante 35 minutos à temperatura de -35°C. Arrefece-se novamente a mistura reaccional até à temperatura de -78°C e adicionam--se depois 4,26 g (16,04 mmoles) de 2,3 :4,5-di-O-isopropilideno--D-frutopiranose (R.F. Brady, "Carbohydr. Res.", 15; 1970 p.35) dissolvidos em 20 ml de tetra-hidrofurano e agita-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -35°C depois do que se adicionam 11,5 ml (82,65 mmoles) de trietilamina e se agita a mistura durante 1 hora à temperatura de -35°C. 0 aldeído resultante utiliza-se tal e qual, isto é, sem purificar e sem isolar na reacção de Wittig que se descreve seguidamente. A 11,7 g (32,8

I -38- // (1 mmoles) de brometo de trifenil-metilfosfónio anidro suspensos em 400 ml de tetra-hidrofurano adiciona-se, gota a gota, à tem peratura de -78°C, 21 ml (32,66 mmoles) de uma solução 1,55 M de n-butil-litio em hexano. Aquece-se a mistura reaccional até à temperatura ambiente e agita-se durante 90 minutos. Arrefece--se depois a mistura até à temperatura de 0°C e adicionam-se 3,68 g (32,8 mmoles) de t-butilato de potássio e 3 ml (31,8 mino les) de álcool t-butílico anidro. Agita-se novamente a mistura à temperatura ambiente durante 30 minutos. Arrefece-se a reac-ção até à temperatura de -78°C depois do que se adiciona, gota a gota, a solução em tetra-hidrofurano do aldeído preparado antes. Aquece-se a mistura reaccional até à temperatura ambiente e agita-se durante 2 horas. A pressão reduzida evaporam-se a s£ lução aquosa saturada de doreto de amónio e os dissolventes. Dissolve-se o resíduo no éter e lava-se com água. Seca-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida obtendo-se um óleo castanho que se submete a uma cromatografia sobre gel de sílica utilizando como agente de eluiçãci uma mistura de hexano e acetato de etilo. Obtém-se a ol£ fina pretendida, a 1-etenil-l, 2 :3,4-di-0-isopropilideno-y|?-D-arja binopiranose. EXEMPLO 39 Preparação de l,2:3,4-di-0-isopropilideno-l-(2-hidroxietil) -P-D-arabinopiranose

Em atmosfera de azoto e à temperatura de 0°C adiciona-se a uma solução de 2 g (7,81 mmoles) de 1-etenil-l,2:3,4-di--O-isopropilideno-^i-D-arabinopiranose em 15 ml de tetra-hidrofu-rano anidro, 0,78 ml (7,8 mmoles) de uma solução 10 M de borano em sulfureto de metilo. Agita-se a mistura durante 3 horas à tem -39- -39-

//.. 4.ν peratura ambiente. Destrói-se o excesso de borano com 3 ml de etanol. Arrefece-se a mistura à temperatura de 0 C. Adicionam--se 1 ml de peróxido de hidrogénio a 30% e 1 ml de uma solução aquosa 3 N de hidróxido de sódio. Aquece-se a mistura à temperatura de refluxo durante 2 horas. Dilui-se a mistura reaccio-nal com água e extrai-se três vezes com acetato de etilo. Seca--se a camada orgânica. Sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida obtendo-se um óleo que se submete a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de acetato de etilo e hexano (1:1). Obtém-se o álcool pretendido o 1,2:3,4-di-O-isopropilideno-l--(2-hidroxietil)-JJ-D-arabinopiranose. EXEMPLO 40 Preparação de l,2:3,4-di-Q- isopropilideno-l-(2-iodoetil)-/3-P-arabinopiranose A uma solução de 1,7 g (6,2 mmoles) de 1,2:3,4-di-0--isopropilideno-1-(2-hidroxietil)-β-D-arabinose em 30 ml de cl£ reto de metileno anidro adicionaram-se 1,3 ml (9,3 mmoles) de trietilamina. Arrefece-se depois a mistura até à temperatura de -10°C e adiciona-se, gota a gota, 0,3 ml (6,46 mmoles) de clor£ to de mesilo. Agita-se a mistura durante mais 15 minutos à temperatura de -10°C depois do que se aquece a mistura reaccional até à temperatura ambiente. Lava-se a mistura três vezes com água. Seca-se a fase orgânica sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida obtendo-se um óleo amarelo que se utiliza tal e qual. Dissolve-se a 1,2:3,4-di-O-isopropilide-no-1-(2-metilsulf oniloxietil )-ot-D-arabinose impura em 15 ml de éter. A esta mistura adicionam-se, à temperatura de 0°C, 53 ml de uma solução 0,35 M de iodeto de magnésio em éter. Agita-se a mis- tura durante 15 minutos à temperatura de 0°C. Hidrolisa-se o excesso do iodeto de magnésio com água. Lava-se a mistura reac cional com uma solução aquosa de tiossulfato de sddio e água. Seca-se a camada orgânica sobre sulfato de sédio,filtra-se e concentra-se a pressão reduzida obtendo-se um áleo que se subine te a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando c£ mo agente de eluição uma mistura de hexano e acetato de etilo (9:1). Obtém-se o iodeto esperado a 1,2:3,4-di-O-isopropilideno--l-(2-iodoetil)-j^-D-arabinopiranose. EXEMPLO 41 Preparação de 2,3,5-tri-Q-benzil-1,4-didesoxi-l, 4- {Ç 2-(1,2 : 3,3-di-0-isopro-propilideno-l-l^-D-arabinopiranosil)-etil ,7-imino 1 -L-arabinitol Ά temperatura de 80°C aquece-se durante toda a noite uma solução de 1,9 g (4,95 mmoles) de 1,2:3,4-di-0-isopropilid£ no-1-(2-iodoetil )-j$-D-arabinose e 0,665 g (1,65 mmoles) de 2,3, 5-tri-0-benzil-l,4-didesoxi-l,4-imino-L-arabinitol em 10 ml de dimetilformamida anidra com 0,91 g (6,6 mmoles) de carbonato de potássio anidro. Evapora-se a dimetilformamida a pressão reduzida. Trata-se o resíduo com acetato de etilo e lava-se duas vezes com água. Seca-se a camada orgânica sobre sulfato de sédio, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida obtendo-se um óleo que se submete a uma cromatografia sobre óxido de alumínio neutro actividade III utilizando como agente de eluição uma mi£ tura de hexano e acetato de etilo. Obtém-se a amina pretendida, 0 2,3,5-tri-O-benzil-l,4-didesoxi-l, 4 V 2-(l,2:3,4-di-0-isopro-pilideno-l-^-D-arabinopiranosil) „7-imino^ -L-arabinitol. -41- EXEMPLO 42 \ / - x L:

Preparação de 2,3,5-tri-O-benzil-l,4-didesoxi-l,4- { [ 2-(l-Q-metil-l-c<-D-ara-binofuranosil)-etil j7-iminoj -L-arabinitol

Em 60 ml de metanol contendo 5% de ácido clorídrico anidro dissolve-se 0,74 g (0,95 mmole) de 2,3,5-tri-O-benzil--l,4-didezoxi-l,4- V 2-(1/2:3,4-di-0-isopronilideno-l-/3-D-ara-binopiranosil)-etil ,7-iminoJ -L-arabinitol e aquece-se à temperatura de refluxo durante 24 horas. Arrefece-se a mistura reac-cional até à temperatura ambiente e neutraliza-se com Amberlyst A 26 OH®. Filtra-se a mistura e evapora-se o dissolvente a pressão reduzida obtendo-se uma espuma que se submete a uma cromato-grafia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de elui^ ção uma mistura de acetato de etilo e metanol. Obtém-se a amina pretendida o 2,3,5-tri-O-benzil-l,4-didesoxi-l,4- U 2-(1-0-me-til-l-fl^-D-arabino-furanosil)-etil ,7-iminoj -L-arabinitol. EXEMPLO 43 Preparação de 1,4-didesoxi-l,4- Cí 2 - (1-0-metil-l-of-D-arabinof uranosil )-etil J--iminoj -L-arabinitol

Dissolve-se em 20 ml de ácido acético 0,4 g (0,69 mmole) da amina 2,3,5-tri-0-benzil-l,4-didesoxi-l, 4- [í 2-(1-0--metil-l-c<-D-arabino-furanosil)-etil /-imino} -L-arabinitol. Adi^ ciona-se'0,2 g de paládio a 10¾ sobre carvão e hidrogena-se a miss tura durante 4 dias à pressão de 3 atmosferas. Elimina-se o catalisador por filtração e evaporam-se os dissolventes a pressão reduzida. Dissolve-se o resíduo em água e faz-se passar através de uma coluna de Amberlyst A 26 OH®. Evapora-se a água a pres são reduzida. Uma cromatografia rápida sobre gel de sílica uti_ lizando como agente de eluição uma mistura de clorofórmio, metanol e água permite a obtenção da amina pretendida o 1,4-dide soxi-1,4- {& - (1-0-metil-l-oC-D-arabinof uranosil)-etil .7-imino } --L-arabinitol. EXEMPLO 44 Preparação de 6-0-(4-Q-acetil-2,3,6-tri-O-benzil-a^-D-galactopiranosil )-2,3,4--tri-Q-benzil-o<-D-glucopiranosídeo metilico

Com agitação e à temperatura de -30°C adicionam-se 76,9 ml (6,15 mmoles) de uma solução éterea 0,08 M de perclo-rato de prata a uma solução de 2,078 g (4,48 mmoles) de 2,3,4--tri-0-benzil-e<-D-glucopiranosídeo metilico, 2,859 g (5,6 mmoles) de cloreto de 4-0-acetil-2,3,6-tri-0-benzil-o(-D-galactopi-ranosilo e 0,81ml(6,15 mmoles) de 2,4,6-trimetilpiridina em 20 ml de éter. Agita-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -30°C, observando-se a precipitação do cloreto de prata. Filtra--se a mistura através de uma almofada de celite, lavam-se os sé lidos com éter e concentra-se o filtrado a pressão reduzida. Dis-solve-se o resíduo em cloreto de metileno e lava-se a camada orgânica sucessivamente com uma solução aquosa de tiossulfato de sédio e água. Seca-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida obtendo-se uma espuma que se submete a uma cromatograf ia sobre gel de sílica uti_ lizando como agente de eluição uma mistura de hexano e acetato de etilo. Obtém-se o 6-0-(4-0-acetil-2,3,6-tri-0-benzil-o(-D-ga-lactopiranosil)-2,3,4-tri-O-benzil-o(-D-glucopiranosí deo metilico.

EXEMPLO 45

Preparação de 2,3,4-tri-Q-benzil-6-Q-(2,5,6-tri-0-benzil-o<-D-galactopirano-sil) -g<-D-glucopiranosí deo metílico

Em 20 ml de tolueno quente dissolvem-se 2,314 g (2,46 mmoles) de 6-0-(4-0-acetil-2,3,6-tri-0-benzil-e(-D-galactopirano-sil)-2,3,4--tri-0-benzil-*-D-glucopiranosídeo metílico e adicionam-se 80 ml de metanol depois do que se adicionam algumas gotas de uma solução metanólica 0,1 M de metóxido de sódio. Agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 2 horas. Neutraliza-se a mistura reaccional com uma resina de Amberlite IR 120 (H+), filtra-se e concentra-se a pressão reduzida, obtendo-se 2,21 g (rendimento 100¾) de 2,3,4-tri-0-benzil-6-0-(2,3,6-tri-0-benzil--<5í-D-galactopiranosil )-oí-D-glucopiranosídeo metílico. EXEMPLO 46 Preparação de 6-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-0-trifluorometilsulfonil-a<-D-qalacto-piranosil)-2,3,4-tri-O-benzil-ef-D-qlucopiranosdeo metílico A uma solução de 0,45 ml de piridina anidra em 40 ml de cloreto de metileno anidro arrefecida até à temperatura de -15°C, adiciona-se 0,83 ml de anidrido de um ácido trifluor£ metanossulfónico. Agita-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -10°C depois do que se adicionam 2,21 g (2,46 mmoles) de 2,3,4-tri-0-benzil-6-0-(2,3,6-tri-0-benzil-ot-D-galacto-piranosil)-o<-D-glucopiranosídeo metílico em 10 ml de cloreto de metileno. Lava-se a mistura com água. Seca-se a camada orgânica sobre sulfato de sádio, filtra-se e concentra-se a pressão redu- zida obtendo-se um óleo que constitui o triflato pretendido, isto é, o 6-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-0-trifluorometilsulfonil-Qi· -•D-galactopiranosil )-2,3,4-tri-0-benzil-c(-D-glucopiranosí deo metílico. EXEMPLO 47 Preparação de 2,3,S-tri-Q-benzil-l^-didesoxi-N-/*2,3,6-tri-Q-benzil-desoxi--1-(2,3,4-tri-0-benzil-l-0-metil-6-0-g^-D-glucopiranosil qlucopiranosil ,7-1,4-imino-L-arabinitol

Em atmosfera de azoto aquece-se à temperatura de refluxo durante 48 horas uma solução de 1,6 g (1,55 mmoles) de 6-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-0-trifluorometilsulfonil-tf-D-galacto-piranosil )-2,3,4-tri-O-benzil-oí-D-glucopiranosideo metilico e 0,625 g (1,55 mmoles) de 2,3,5-tri-O-benzil-l,4-didesoxi-l,4--imino-L-arabinitol em 50 ml de clorofórmio isento de etanol-Dilui-se a mistura com cloreto de metileno e lava-se sucessivamente com uma solução aquosa saturada de carbonato de hidrogénio e sódio e com uma solução saturada de cloreto de sódio. Se ca-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida obtendo-se uma espuma que se subme te a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando co mo agente de eluição uma mistura de hexano e acetato de etilo. Obtém-se a amina pretendida, o 2,3,5-tri-0-benzil-l,4-didesoxi--N-Z* 2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-l-(2,3,4-tri-0-benzil-l-0-metil--6-0-d-D-glueopiranosil)-tf-D-glucopiranosil J-1,4-imino-L-ara-binitol. -45- -45-

EXEMPLO 48 Preparação de 1,4-didesoxi-N-/* 4-desoxi-l-(l-Q-metil-6-0-c^-D-glucopiranosil)--#-D-qlucopiranosil .7-1,4-imino-L-arabinitol

Em 30 ml de ácido acético dissolvem-se 1,2 g (0,936 mmole) de 2,3,5-tri-O-benzil-l, 4-didesoxi-N-jT 2,3,6-tri--0-benzil~4-desoxi-l-(2,3,4-tri-0-benzil-l-0-metil-6-0-cX-D-glu-copiranosil )-<?£-D-glucopiranosil J7l, 4-imino-L-arabinitol. Adici£ na-se 0,6g de paládio a 10¾ sobre carvão. Hidrogena-se a mistura durante 4 dias à pressão de 3 atmosferas. Elimina-se o catalisador por filtração e evaporaram-se os dissolventes a pressão reduzida. Dissolve-se o resíduo em água e passa-se através de Θ uma coluna de Amberlyst A26 OH . Evapora-se a água a pressão reduzida e submete-se a uma comotografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de clorofórmio, metanol e água. Obtém-se 0,22 g (rendimento 49¾) da ami na pretendida, o l,4-didesoxi-N-/f4-desoxi-l-(l-0-metil-6-0-o(--D-glucopiranosil)-tf-D-glucopiranosil J-1,4-imino-L-arabinitol sob a forma de um sdlido amorfo. EXEMPLO 49

Preparação de 2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-hidroximetil-D-glucopiranose A temperatura de 0°C dissolvem-se 4,78 g (10 mmoles) de 2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-hidroximetil-e(-D-glucopirano-sídeo metílico em 50 ml de uma mistura de ácido trifluoroacét£ co e água (9:1). Agita-se a mistura durante toda a noite à temperatura de 0°q. Evapora-se os dissolventes a pressão redu- -46- -46-

zida sem aquecimento. Dissolve-se o resíduo em acetato de eti-lo e lava-se sucessivamente com uma solução de carbonato de h_i drogénio e sódio e uma solução de cloreto de sódio. Seca-se a camada orgânica sobre, sulfato de sódio, filtra-se e concentra--se a pressão reduzida obtendo-se um óleo que se submete a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de acetato de etilo e hexano. Obtém-se a 2.3.6- tri-0-benzil-4-desoxi-4-hidroxi-metil-D-glucopiranose. EXEMPLO 50 Preparação de 2.3.6- tri-0-benzil-4-desoxi-4-acetiloximetil-D-glucopiranosídeo acetílico

Em 25 ml de piridina anidra dissolvem-se 5,10 g (9,30 mmoles) de 2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-hidroximetil-D-glucop.i ranose e adicionam-se 5 ml de anidrido acético. Agita-se a mistura durante 24 horas à temperatura ambiente. Evapora-se o dissolvente no vácuo. Dissolve-se o resíduo em acetato de etilo e lava-se com água. Seca-se a fase orgânica sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida, obtendo-se o diacetato pretendido, isto é, o 2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4--acetiloximetil-D-gluco-piranosídeo acetílico sob a forma de um óleo que se usa tal e qual. EXEMPLO 51 Preparação de

Cloreto de 2,3,6-tri-O-benzil-l,4-didesoxi-4-acetiloximetil-D--glucopiranosilo

Tratam-se 5,10 g (9,30 mmoles) de 2,3,6-tri-O-benzil- -47- -47-

4 -4-desoxi-4-acetiloximetil-D-glucopiranosídeo acetílico em 10 ml de éter com 25 ml de uma solução étera de ácido clorídrico a 0,2 g/ml. Agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 48 horas. Evaporam-se os dissolventes a pressão reduzida, obte£ do-se um dleo que se submete a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como agente de eluição uma mistura de tetracloreto de carbono e acetato de etilo. Obtém-se o cloreto de 2,3,6-tri-0-benzil-l,4-didesoxi-4-acetiloximetil-D-glucopira^ nosilo. EXEMPLO 52 Preparação de 4-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-acetiloximetil-ot-D-qlucopira-nosil)-2,3,6-tri-O-benzil-af-D-qlucopiranosídeo metílico

Com agitação, adiciona-se,- à temperatura de -30°C, 9,58 ml (7,67 mmoles) de uma solução éterea 0,08 M de perclora-to de prata a uma solução de 2,592 g (5,59 mmoles) de 2,3,6-tr_i -O-benzil-^-D-glucopiranosídeo metílico, 3,661 g (6,98 mmoles) de cloreto de 2,3,6-tri-O-benzil-l,4-didesoxi-4-acetiloximetil--D-gluco-piranosilo em 20 ml de éter. Agita-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -30°C, observando-se a formação de um precipitado de cloreto de prata. Filtra-se a mistura atra^ vés de uma almofada de celite, lavam-se os sólidos com éter e concentra-se o filtrado a pressão reduzida. Dissolve-se o resíduo em cloreto de metileno e lava-se a camada orgânica sucessivamente com uma solução aquosa de tiossulfato de sódio e água. Seca-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida. Uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de hexano e acetato de etilo, fornece o 4-0-(2,3,6-tri-0~benzil-4--desoxi-4-acetiloximetil-c(-D-glucopiranosil )-2,3,6-tri-0-benzi_l -e(-D~glucopiranosídeo metílico. EXEMPLO 33 Preparação de 4-0-(2,3,6-tri-Q-benzil-4-desoxi-4-hidroximetil-0(-D-glucopira-nosil )-2,3, 6-tri-O-benzil-oc-D-glucopiranosí deo metílico

Em 20 ml de tolueno quente dissolvem-se 3,19 g (3,33 mmoles) de 4-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-acetiloximetil-a(--D-glucopiranosil)-2,3,6-tri-O-benzil-tf-D-glucopiranosídeo metílico e 80 ml de metanol seguindo-se depois algumas gotas de uma solução metanólica 1 M de metóxido de sódio. Agita-se a mi^ tura à temperatura ambiente durante 2 horas. Neutraliza-se a mistura reaccional com resina de Amberlite IR 120 (H+), filtra--se e concentra-se a pressão reduzida, obtendo-se o 4-0-(2,3,6--tri-0-benzil-4-desoxi-4-hidroximetil-e(-D-glucopiranosil )-2,3,6-tri-O-benzil-rf-D-glucopiranosídeo metílico . EXEMPLO 34 Preparação de 4-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-trifluorometilsulfoniloxime-til-ot-D-glucopiranosil )-2,3,6-tri-O-benzil-i^-D-glucopiranosídeo metílico A uma solução de 0,6 ml de piridina anidra em 50 ml de cloreto de metileno anidro, arrefecida até à temperatura de -15°C, adicionam-se 1,12 ml de anidrido de trifluorometanossulfónico. Agita-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -10°C depois do que se adicionam 3,049 g (3,35 mmoles) de 4-0-(2,3,6- -49- -49-

-tri-0-benzil-4-desoxi-4-hidroximetil-o(-D-glucopiranosil )-2,3, 6-tri-O-benzil-tf-D-glucopiranosídeo metílico em 15 ml de clor£ to de metileno. Lava-se a mistura com água. Seca-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida, obtendo-se 3,42 g (rendimento 98¾) de um óleo sob a forma do triflato pretendido, isto é, o 4-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-trifluorometilsulfoniloximetil-e(-D-glucopira-nosil)-2,3,6-tri-0-benzil-«<-D-glucopiranosIdeo metílico. EXEMPLO 55 Preparagão de 2,3,5-tri-0-benzil-l, 4'-didesoxi-N- { Ç 2,3,6-tri-0-benzil-4-de-soxi-l-(2,3,6-tri-0-benzil-4-Q-*t-D-qlucopiranosil )-4-3-D-glucopi-ranosil J-mstil } -1,4-imino-L-arabinitol

Em atmosfera de azoto aqueceu-se à temperatura de refluxo durante 48 horas uma solução de 1,82 g (1,75 mmoles) de 4-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-trifluorometil-sulfoniloxi-metil-0(-D-glucopiranosil )-2,3,6-tri-0-benzil-e<-D-glucopiranos£ deo metílico e 0,705 g (1,75 mmoles de 2,3,5-tri-O-benzil-l,4--didesoxi-1,4-imino-L-arabinitol em 50 ml de clorofórmio isento de etanol. Dilui-se a mistura em cloreto de metileno e lava-se sucessivamente com uma solução saturada de cloreto de sódio. Seca-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida obtendo-se uma espuma que se sub^ mete a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de hexano e acetato de eti-lo. Obtém-se a amina pretendida, o 2,3,5-tri-0-benzil-l,4-dide-soxi-N- jf £ 2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-l-(2,3,6-tri-0-benzil-l- -0-metil-4-0-of-D-glucopiranosil)-4-e^-D-glucopiranosil «7-metil^ - -50-

-1,4-imino-L-arabinitol. EXEMPLO 56 Preparação de 1,4-didesoxi-N- [ /4-desoxi-l- (l-0-metil-4-0-cit-D-glucopiranosil) -^-c^-D-glucopiranosil J-metil} -1,4-imino-L-arabinitol

Dissolvem-se 1,3 g (1,146 mmoles) de 2,3,5-tri-O-ben-zil-l,4-didesoxi-IM- £ £ 2,3j6-tri-0-benzil-4-desoxi-l-(2,3,6-tri--O-benzil-l-O~metil-4-O-0(-D-glucopiranosil)-4-ei(-D-glucopirano-silJ7-metil} -1,4-imino-L-arabinitol em 40 ml de ácido acético. Adiciona-se 0,6 g de paládio a 10¾ sobre carvão. Hidrogena-se a mistura durante 4 dias à pressão de 3 atmosferas. Elimina-se o catalizador por filtração e evaporam-se os dissolventes a pressão reduzida. Dissolve-se o resíduo em água e faz-se passar atrai Vés de uma coluna de Amberlyst A26 OH®. Evapora-se a água a pre£ são reduzida e submete-se a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de clorofórmio, metanol e água. Obtém-se a amina pretendida, o 1,4-djL desoxi-N- -desoxi-1- (l-O-metil-4-O-eí-D-glucopiranosil )-4-4--D-glucopiranosil J-metilJ -1,4-imino-L-arabinitol. EXEMPLO 57 Preparação de 6-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-acetiloximetil-a^-D-qlucopira-nosil)-2,3,4-tri-O-benzil-g-D-qlucopiranosídeo metílico

Com agitação adiciona-se à temperatura de -30°C 76,7 ml (6,13 mmoles) de uma solução éterea 0,08 M de perclorato de prata, a uma solução de 2,074 g (4,472 mmoles) de 2,3,4-tri-0--benzil-e(-D-glucopiranosldeo metílico, (6,13 mmoles) de cloreto -51- de 2,3,6-tri-0-benzil-l,4-didesoxi-4-acetiloximetil-D-gluco-pi ranosilo e 0,80 rçil (6,13 mmoles) de 2,4,6-trimetilpiridina em 20 ml de éter. Agita-se a mistura durante 15 minutos à temper^ tura de -30°C observando-se a precipitação do cloreto de prata. Filtra-se a mistura através de uma almofada de celite, lavam--se os sólidos com éter e concentra-se o filtrado a pTessão re duzida. Dissolve-se O resíduo em cloreto de metileno e lava-se a camada orgânica sucessivamente com uma solução aquosa de tios-sulfato de sódio e água. Seca-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida obtendo-se uma espuma que se submete a uma cromatografa rápida sobre gel de sílica utilizando como agente de eluição uma mistura de hexano e acetato de etilo. Obtém-se o 6-0-(2,3,6-tri-0-benzil--4-de sox i -4-a cetiloxime til -oi- D-glucopiranosil )-2,3,4-tri-0-ben-zil-<tf-D-glucopiranosídeo metílico. EXEMPLO 58 Preparação de 6-0-(2,3,6-tri-Q-benzil-4-desoxi-4-hidroximetil-#-glucopirano-sil )-2,3,4-tri-0-benzil-<*-D-glucopiranosideo metílico

Em 20 ml de tolueno quente dissolvem-se 2,469 g (2,593 mmoles) de 6-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-acetilox£ me til-^-D-glucopiranosil )-2,3,4-tri-0-benzil-<tf-D-glucopiranosí_ deo metílico e adicionam-se 80 ml de metanol, seguidos de algumas gotas de uma solução metanólica 1 M de metóxido de sódio. Agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 2 horas. Neutraliza-se a mistura reaccional com resina Amberlite IR 120 (H+), filtra-se e concentra-se a pressão reduzida obtendo-se o 6-0--(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-hidroximetil-«ií-D-glucopiranosil)- -52- V. -2,5,4-tri-O-benzil-tf-D-glucopiranosídeo metílico. EXEMPLO 59 Preparação de 6-0-(2,3,6-tri-O-benzil-4-desoxi-4-trifluorometil-sulfoniloxi-metil-^-D-glucopiranosil )-2,3,4-tri-0-benzil-o{-D-qlucopiranosí-deo metílico. A uma solução de 0,46 ml de piridina anidra em 40 ml de cloreto de metileno anidro arrefecido até à temperatura de -15°C, adiciona-se 0,86 ml de anidrido do ácido trifluorometa-nossulfdnico. Agita-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -10°C depois do que se adicionam 2,36 g (2,593 mmoles) de 6-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-hidroximetil-#-D-glucopi-ranosil)-2,3,4-tri-O-benzil-o^-D-glucopiranosídeo metílico em 10 ml de cloreto de metileno. Agita-se a mistura durante 90 minutos à temperatura de -10°C. Lava-se a mistura reaccional com água. Seca-se a camada orgânica sobre sulfato de sddio, filtra-se e concentra-se a pressão reduzida obtendo-se um áleo que constitui o triflato pretendido, isto é, o 6-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4--desoxi-4-trif luorometilsulf oniloximetil-«(-D-glucopiranosil )--2,3,4-tri - 0-benzi l-e<-D-gluco pira no sldeo metílico . EXEMPLO 60 Preparação de 2,3,5-tri-O-benzil-l,4-didesoxi-N- [ /2,3,6-tri-0-benzil-4-deso-xi-1- (2,3,4-tri-Q-benzil-l-Q-metil-6-0-ol-D-qlucopiranosil)-4-<<--D-qlucopiranosil ,7-metil 1 -1,4-imino-L-arabinitol

Em atmosfera de azoto aquece-se à temperatura de re- -53-

fluxo durante 48 horas a uma solução de 1,8 g (1,72 mmoles) de 6-0-(2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-4-trifluorometilsulfoniloxime^ til-e(-D-glucopiranosil )-2,3,4-tri-O-benzil-tf-D-glucopiranosídeo metílico e 0,693 g (1,72 mmoles) de 2,3,5-tri-0-benzil-l,4-di-desoxi-1,4-imino-L-arabinitol em 50 ml de clorofórmio isento de etanol. Dilui-se a mistura com cloreto de metileno e lava-se su cessivamente com uma solução aquosa saturada de carbonato de hjl drogénio e sódio e uma solução saturada de cloreto de sódio. S£ ca-se a camada orgânica sobre sulfato de sódio, filtra-se e coji centra-se a pressão reduzida, obtendo-se uma espuma que se submete a uma cromatografia rápida sobre gel de sílica, utilizando como agente de eluição uma mistura de hexano e acetato de etilo. Obtém-se a amina pretendida, isto é, o 2,3,5-tri-0-benzil-l,4-di-desoxi-N- ir 2,3,6-tri-0-benzil-4-desoxi-1-(2,3,4-tri-0-benzil--l-0-metil-6-0-qf*D-glucopiranosil)-4-<tf-D-glucopiranosil J^-metil^ --1,4-imino-L-arabinitol. EXEMPLO 61 Preparação de 1,4-didesoxi-N- JJL 4-desoxi-l-(l-O-metil-6-Q-rt-D-glucopiranosil)--4-#-D-glucopiranosil ,7-metil } -1,4-imino-L-arabinitol

Em 30 ml de ácido acético dissolvem-se 1,3 g (1,003 mmoles) de 2,3,5-tri-O-benzil-l,4-didesoxi- N- / [ 2,3,6-tri-O--benzil -4-desoxi-l -(2,3,4-tri-0-benzil-l-0-metil - 6-0- <*-D-gluco-piranosol)-4-e(-D-glucopiranosil J-metilj -1,4-imino-L-arabini-tol. Adiciona-se 0,6 g de paládio a 10¾ sobre carvão. Hidroge-na-se a mistura durante 4 dias à pressão de 3 atmosferas. Elimina-se o catalisador por filtração e evaporam-se os dissolventes a pressão reduzida. Dissolve-se o resíduo em água e faz-se -54-

passar através de uma coluna de Amberlyst A26 OH^. Evapora-se a água a pressão reduzida e submete-se a uma cromatografia rá pida sobre gel de sílica, utilizando como agente de eluição uma mistura de clorofórmio, metanol e água. Obtém-se a amina preteji dida, o 1,4-didesoxi-N- £ C 4-desoxi-l-(l-0-metil-6-0-^-0-glucopi-ranosil )-4-e^-D-glucopiranosil „7-metil} -1,4-imino-L-arabinitol. EXEMPLO 62 Preparação de 1,5-didesoxi-l,5-(6-desoxi-6-D-qlucopiranosil)-imino-L-arabinitol

Em 10 ml de uma mistura de água e ácido trifluoroacé-tico (1:1) dissolve-se 0,150 g (0,485 mmole) de 1,4-didesoxi-l,4-- (6-desoxi-l-0-metil-6-4-D-glucopiranosil)-imino-L-arabinitol. Agita-se a mistura durante 24 horas à temperatura de 0°C. Evaporam-se os dissolventes a pressão reduzida obtendo-se uma espuma que se submete a uma cromatografia sobre Amberlyst A26 OH6* obtendo-se a amina pretendida, o 1,5-didesoxi-l,5-(6-desoxi-6--D-glucopiranosil)-imino-L-arabinitol.

Os enzimas que catalisam a hidrólise de hidratos de carbono complexos, por exemplo, as o(-glicosidases, convertem os hidratos de carbono não absorvíveis em açucares absorvíveis. A acção rápida destes enzimas especialmente após a ingestão de grandes quantidades de hidratos de carbono, conduz a níveis sajo guíneos elevados de glucose o que, no caso de diabéticos, conduz a manifestações indesejáveis, pelo que se pretende há muito obter compostos que obviem à hiperglicemia provocada por deficiências alimentares. De igual modo, no caso de obesidade, o con trolo de níveis sanguíneos elevados de glucose, com a sua conver são subsequente em gordura, provocada pela catálise de hidratos de carbono tem inspirado a procura de compostos que obviem aos problemas associados com as deficiências alimentares.

Os compostos de fórmula geral I, de acordo com a presente invenção são inibidores potentes e de longa duração da tf-glucosidase e, mediante métodos laboratoriais convencionais para a determinação dos níveis de glucose no soro, mostram ser úteis no tratamento de doenças provocadas pela sub-utilização e/ou excesso de glucose no soro sem afectar de um modo inconveniente a velocidade de transporte através das membranas celulares. Deste modo, estes compostos são úteis no tratamento da diabetes e da obesidade.

Na aplicação prática da presente invenção uma quanti^ dade eficaz de um composto de acordo com a mesma é a quantidade necessária para reduzir a quantidade de glucose no soro (relatjl vamente a um controle) após a ingestão de hidratos de carbono convertíveis em glucose absorvível. A dose específica para o tratamento de um qualquer indivíduo que apresente uma das doenças citadas antes, depende de vários factores como raça e idade do doente bem como da gravidade da doença, factores estes que normalmente são familiares ao médico que os deve ter em consideração. Na generalidade os compostos de acordo com a presente invenção administram-se por via oral em doses compreendidas entre 0,2 e 20 miligramas por Kilograma de peso do corpo, preferindo-se administrar uma dose compreendida entre 0,5 e 5 miligramas por peso do corpo. Os compostos preferidos da presente invenção administram-se oralmente às refeições em doses unitárias múltiplas ou simples contendo 25 a 250 mg. E evidente que no tratamento da obesidade o período de administração inclui o tratamento da doença bem como a administração contínua de poso- -56- //" logias apropriadas para a manutenção do peso pretendido pelo doente.

Observou-se também que os compostos de férmula geral I, de acordo com a presente invenção exibem uma acção ini-bidora sobre glicosidases, isto é, enzimas essenciais para a elaboração da estrutura final das cadeias laterais oligosacarí-dicas de glicoprotelnas, especialmente da glicoprotelna de HIV (gp 120). Para avaliar os efeitos sobre o crescimento do vírus HIV e para determinar as doses a utilizar podem utilizar-se té£ nicas de doseamento apropriadas como, por exemplo, formação srn ciai, doseamento da transcriptase inversa, testes de imunofluo-rescência e microscopia preferencial. Os efeitos antívirais podem confirmar-se por imunoflurescência com soro proveniente de doentes infectados pelo vírus. No tratamento de doenças relacionadas com o vírus HIV, bem como de outras doenças retrovirais relacionadas com glicoprotelnas, contrariamente ao que acontece no tratamento da diabetes e da obesidade, os compostos de acordo com a pr£ sente invenção podem administrar-se por via parentérica. Para o tratamento da diabetes e da obesidade utilizam-se doses especificas compreendidas entre os valores limites citados antes.

Na prática clínica os compostos de acordo com a presente invenção incorporam-se de preferência numa composição far_ macêutica constituída por um veículo aceitável em farmácia associado a um composto de acordo com a presente invenção. A expressão "veículo aceitável sob o ponto de vista farmacêutico" diz res_ peito a excipientes conhecidos aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico que se utilizam na preparação de composições farmacêuticas que incluem compostos activos para administrar inteic namente a animais, apresentando-se tais veículos como substâncias não téxicas e não sensibilizantes nas condições de utiliza -57- ção. Estas composições que se podem preparar utilizando técnicas convencionais para a preparação de comprimidos, cápsulas, elixires, xaropes, emulsões, dispersões e pds molháveis e efe£ vescentes podem conter excipientes apropriados convencionais úteis na preparação do tipo especial de composição que se pretende. Em códigos farmacêuticos convencionais tais como o Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, Pa. podem encontrar-se veículos aceitáveis sob o ponto de vista farmacêntico e técnicas de formulações apropriados.

Claims

t % reivindicaçOes 1 · “ Processo para a preparação de compostos de fórmula geral

I

na qual n representa o número inteiro 1 ou 2, e R representa um grupo glicosilo com 1 a 3 hexoses ou pentoses, cujos átomos de carbono anoméricos terminais podem comportar eventualmente um radical OH, alcoxi 0^_6 -0-C(0)-alquilo C1_g ou benzilo, e dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, cara-cterizado pelo facto a) de se condensar um composto de fórmula geral or2 r2o

/ NH (II) c R20 na qual R2 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo protector da reacção, com um composto de fórmula geral

na qual n representa o número inteiro um ou dois, X representa um átomo de cloro, bromo ou iodo ou um radical oxigénio activado, e representa um grupo glicosilo com 1 a 3 hexoses ou pento-ses cujos grupos hidroxi podem comportar um grupo protector da reacção e cujos átomos de carbono anoméricos terminais podem comportar eventualmente um grupo OH, alcoxi -0-C(0)-alquilo C]__8 ou benzilo, com a condição de R2 não representar um átomo de hidrogénio e os grupos hidroxi livres dos radicais glicosílicos comportarem um grupo protector da reacção quando X representa um radical oxigénio activado; ou -60- 3 3 5¾ ο /

b) de se condensar ura composto de fórmula geral •OR-i R2° 00 r2o na qual X e R2 têm os significados definidos antes na fase a), com um composto de fórmula geral na qual n e R-^ têm os significados definidos antes na fase a), de se eliminar, depois, dos produtos de condensação preparados em a) ou b) qualquer grupo protector da reacção. e de se converterem, eventualmente, os produtos de condensação citados antes nos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico. Lisbo, 20 de Setembro de 1991 : ''k ··' ··

1 -61-

mente substituídos.
3. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual R representa um grupo 6-glucosilo, 4-glucosilo, 1-frutosilo, 6-frutosilo, 6-mal- ) tosilo, 4-maltosilo, 6-isomaltosilo ou 4-isomaltosilo, caracte-rizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
4. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação do l,4-didesoxi-l,4-^*(6-desoxi-l-0-metil-6-^C-D-glucopi-ranosil)-iminoJ7-L-arabinitol, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
3.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação do 1,4-didesoxi-l,4-Z" (6,7-didesoxi-l-0-metil-7- -D-glu- co-heptopiranosil)-imino_7-L-arabinitol, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos .
6.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a prepa ração do 1,4-didesoxi-l,4-jT (l-desoxi-2-0-metil- ^C-D-fructofu-ranosi1)-imino_7-L-arabinitol, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos. I I »
7.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação do 1,4-didesoxi-l,4-iT (4-desoxi-l-0-metil-4- -D-glu-copiranosil)-iminoJ7-L-arabinitol, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
8. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação do 1,4-didesoxi-N-Z*6-desoxi-l-(l-0-metil-6-0--D-glu- copiranosil) - ^-D-gluco-heptopiranosil7-l ,4-imino-L-arabinitol, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
9. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação do 1,4-didosoxi-N-,^" 6,7-didesoxi-l (1-0 —met il —6 —0— 0( —D — —glucopiranosil)- ^ -D-gluco-heptopiranosil.7-l,4-imino-L-arabi-nitol, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentmente substituídos.
10. - Processo de acordo com a reivindicação 19 para a preparação do 1,4-didesoxi-l,4-/T (4-desoxi-l-0-metil-4- <*-D -gluco-piranosiD-metiliminoJ^-L-arabinitol, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
11.- Processo de acordo com a reivindciação 1, para a pre- -63- paração do 1, 4-didesoxi-N-if 4-desoxi-l-(l-0-meti1-4-0- OC-D -gluco-piranosil)--D-glucopiranosilJ7_l>^“imino-L-arabinitol, caracte- rizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspon-pondentemente substituídos.
12.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação do 1,4-didesoxi-l,4- í' 2-(1-0-metil-l -D-arabino-furanosil)-etil „7-imino ^ -L-arabinitol, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
13.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação do 1,4-didesoxi-N-/* 4—desoxi-l-(1-0-metil-6-0- Od-D -glu-copiranosil-0|£-D-glucopiranosil.J,-l,4-imino-L-arabinitol, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
14.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação do 1,4-didesoxi-N-^T 4-desoxi-l-(l-0-metil-4-0- C*-D -gluco-piranosil)-4- -D-glucopiranosil.J-metiiJ. 1,4-imino-L-arabini-tol, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
13.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação do 1,4-didesoxí-N- f 4-desoxi-1-(1-0-meti1-6-0- -D- -64-

-glucopiranosil)-4- -D-glucopiranosil-meti1 j 1,4-imino--L-arabinitol, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
16.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação do 1,4-didesoxi-l,4-(6-desoxi-6-D-glucopiranosi1-imino--L-arabinitol, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
17.- Método para o tratamento da diabetes e da obesidade, caracterizado pelo facto de se administrar a um doente, por via oral, 0,2 a 20 mg por kg de peso do corpo de um composto de formula geral I, preparado pelo processo de acordo com a reivindicação 1, e que apresenta uma acção inibidora da -glucosida-se, Lisboa, 28 de Março de 1990 docfe Indusfriol & Agente O ri ciai da Prope s

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