PT86156B - Processo para a preparacao de derivados fosfonometoxialquilenicos de bases purinicas e pirimidinicas e de composicoes farmaceuticas que os contem - Google Patents

Description

REQUERENTE: BRISTOL-MYERS COMPANY, norte-americana,(Estado de Delaware), Estados Unidos da América, com sede em 345 Park Avenue New York, New York 10154, Estados Unidos da América.

EPÍGRAFE: PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE DERIVADOS FOSFONOMETOXIALQUILÉNICOS DE BASES PURÍNICAS E PIRIMIDÍ NICAS E DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTEM.

INVENTORES: Robert R. Webb II, Joanne J. Bronson e John C Martin.

Reivindicação do direito de prioridade ao abrigo do artigo 4.° da Convenção de Paris de 20 de Março de 1883. Estados Unidos da América em 18 de Novem bro de 1986, sob o n² 932,112.

INP1. MOO. 113 RF 16732 f

!

BRISTOL-MYERS COMPANY

PROCESSO PARA A PREPARACAO DE DERIVADOS DE FOSFONOMETOXI-- - - - . ..... -=¹ . .

ALQUILENICOS DE BASES PURlNICAS E PI RI ΜΙ ΡΙΝΙCAS E DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTÊM

Informação

Isto e uma continuação parcial da publicação norte-americana nQ 932112, arquivada em 18 de Novembro de 1987.

Âmbito da Invenção

A presente invenção diz respeito a análogos nucleotidicos, as sua composições e utilização. Em particular , diz respeito a derivados fosfonometoxialquilenicos acTclicos de bases purTnicas e pi ri midTnicas.

Antecedentes da Invenção

Admite-se que as doenças virais infecciosas constituem um importante problema medico. 0 progresso contra as doenças virais infecciosas requere o desenvolvimento de medicamentos com actividade antiviral selectiva, ainda que com caracter benigno para as linhas celulares normais. Um numero de agentes antivirais, correntemente sob estudo, que parecem possuir alguma selectividade, e o dos análogos dos nucleõsidos. Em geral, estes compostos são análogos estruturais dos nucleõsidos de ocorrência natural. A modificação estrutural, quer no núcleo de base purina, quer no núcleo da base pirimidina, e/ou o componente sacárido, origina um

t * derivado nucleósido, sinteticamente modificado, que quando incor porado num processo de formação de ácido nucleico virai, actua no sentido de destruir também a síntese do ácido nucleico virai. A eficácia destes agentes anti virais depende da conversão selectiva por meio de enzimas virais, mas não por meio de enzimas do hospedeiro, no correspondente nucleótído análogo que se converte, depois, no trifosfato e se incorpora no ácido nucleico virai. Um problema com esta estratégia antiviral tem sido a emergência de certas es^ tirpes virais cujos enzimas promovem, fracamente, a fosforilação dos análogos nucleosidos. Para ultrapassar este problema, os anã logos nucleótidos intactos parecem ser bastante úteis, potencial_ mente, como antivirais para incorporação no ácido nucleico virai .

Reist e Sturm em PCT/US84/04748, publicado em 6 de Dezem bro de 1984, revelaram novos análogos de ácido fosfonico de fosfatos de nucleósido que são úteis como antivirais para incorpora, ção no ADN virai. Mostra-se a seguir, como fórmula(l), a fórmula estrutural destes compostos.

X I	R_ i 3	B
C-(CH 2)n	-CH |	°\l
Y	CH	CH
	r2	h
		z

Nos compostos de Reist, o símbolo B, representa uma base

-3- / /

/ ** de purina ou de pirimidina; os símbolos R^ e R^, em conjunto , completam um açúcar ^-pentafuranose ou o símbolo R^ representa um ãtomo de hidrogénio e o símbolo R^ representa um ãtomo de hidrogénio ou um grupo hidroximeti 1 o; o símbolo Rg representa um ãtomo de hidrogénio ou um grupo OH; o símbolo X representa um ãtomo de hidrogénio ou um grupo OH ou, em conjunto com o símbolo Y, representa um ãtomo de oxigénio do grupo carbonilo e o símbolo Y pode representar, também, um ãtomo de hidrogénio; os símbolos Z-j e Z? representam um ãtomo de hidrogénio ou um grupo alquilo. Estes compostos conhecidos da técnica distinguem-se, geralmente, dos compostos da presente invenção por:

1) a ligação oxigénio do éter ligar-se ao ãtomo de carbono ligado ã base que se pretende que preserve ou imite a ligação oxige nio-acetal de um anel do açúcar pentofuranose; e

2) a modificação do fosfato ser um grupo fosfonoalquileno..

Em contraste, o componente anãlogo do açúcar, acíclico, dos compostos presentes contém toda uma espinha dorsal de átomos de car bono para um grupo fosfonometoxi.

Semelhantemente, a síntese e a actividade anti-vírus de Herpes dos derivados fosfato e fosfonato de 9-/~( 1 ,3-di-hi droxi-2-propoxi) meti Ij^guani na (Formula 2) foram descritas por Prisbe, et al. , em J. Med. Chem., 1986, 29, 671.

OH (X-0, ch₂)

Mais resumidamente referidos são os análogos (Formula 3) de ácido fosfõnico e adenina e suas sínteses que foram referidos no pedido de patente de invenção britânica de Holy , et al.,

GB 2,134,907a, publicado em 8/22/84.

'-r₃-chor₄

Na formula £, os símbolos R^ e Rg representam um ãtomo de hidrogénio ou, em conjunto, completam um anel ribonucleosido; e ambos os símbolos R^ representam, alternadamente, um átomo de hidrogénio e um grupo -CH2P(0)(OH)^Um exemplo preferido de um destes compostos, conhecido como (SJ-HPMPA (Formula 4), foi referido por DeClercq, et al. , em Nature, 1986, 323, pp. 464-467 e, mais anteriormente, por Ho ly, et al., Nuc1ei c Aci ds Research, Symposium Series n914,1984 pp. 277-278.

-5Não ha ensinamentos contidos nestas referencias ou uma sua combinação sugerida, que poderiam tornar óbvios os compostos, as composições e a utilização, envolvidos na presente invenção.

Resumo da Invenção

Tem-se sintetizado derivados de fosfonometoxialqui1enio purina e pirimidina e verificou-se que possuem actividade antiviral eficaz. Estes compostos diferem dos nucleotidos naturais por possuirem variações estruturais no seu componente análogo de açuçar, que podem acompanhar-se de variação, também, no seu grupo de base nucleotfdica. Adicionalmente, estes compostos diferem da estrutura do fosfato de ocorrência natural dos nucleotidos pela natureza das ligações fosforosas carbono-oxigenio estes derivados fosfonometoxi. Os compostos da presente invenção represen tam-se por meio da formula estrutural (I)

B alq,

I ¹

R-j -C-al q£-Q a 1 q o

I ^ύ 0 r₉-ch ^C I =P-0R_o

na qual , o símbolo B representa uma base de purina ou pirimidina;

os símbolos alq^ ₉ a 1qe alq^ representam ligações químicas ou grupos alquileno;

o símbolo Q representa um átomo de hidrogénio ou um grupo oxidrilo; e os símbolos R-j-R₄ representam átomos de hidrogénio ou grupos alquilo.

Outros aspectos da presente invenção envolvem a preparação destes compostos, a sua formulação em composições farmacêuticas, antivirais e a utilização destas formulações para tratar infecções virais.

Descrição Detalhada da Invenção

Os compostos compreendidos na presente invenção são derivados de fosfonometoxialqui1eno purinia e pirimidina que possuem a formula estrutural I.

B alq-j

R,-C-alq _?-Q

I

J ò

r₂-ch

0=P-0R₃

0R₄

w

Na formula estrutural (I), o símbolo B representa uma ba_ se de purina ou pirimidina, escolhida do grupo que consiste em adenina, xantina, hipoxantina, guanina, 8-bromoguanina, 8-cloroguanina, 8-aminoguanina, 8-hidrazinoguanina , 8-hidroxiguanina , 8-meti1guanina, 8-tioguanina , 2-aminopurina, 2,6-diaminopurina , citosina, 5-eti1citosina , 5-meti1citosina , timina, uracilo, -5bro mouracilo, 5-eti1uraci1 o, 5-iodouraci1 o, 5-propi1uraci1 o, 5-viniJ_ uracilo e 5-bromovini 1 uraci 1 o. Os símbolos alqp a 1 qg θ a 1 q3 são escolhidos, independentemente, de uma ligação química e ca deias alquilenicas contendo 1 a 4 átomos de carbono que podem ser de cadeia simples ou ramificada. 0 símbolo Q representa um ãtomo de hidrogénio, ou um grupo oxidrilo, com a condição de que, quando 0 símbolo B representa a base adenina e 0 símbolo alq-| re presenta 0 grupo metileno, 0 símbolo alqg não pode representar uma ligação química; e quando 0 símbolo B representa a base adenina e 0 símbolo Q representa um ãtomo de hidrogénio, 0 símbolo a 1 qj pode representar, apenas, 0 grupo C^Hg. Os símbolos R-| e Rg são escolhidos, independentemente, entre hidrogénio e grupos aj_ quilo C-|_₄ e os símbolos Rg e R^ são escolhidos, independentemen te, entre hidrogénio, grupos alquilo Cpg, fenilo e fenil-alquileno Cp₄. Os compostos do presente invenção incluem, também , os correspondentes sais que podem ser sais bãsicos do grupo ácido fosfónico ou sais de adição de ácidos de base heterocíclica; em adição para as formas zwitteriõnicas/ou solvatos de compostos de fórmula geral (I).

Os compostos da presente invenção podem existir sob a for ma de isÓmeros, Ópticos e formas racemicas e misturas diastereomiê ricas destes isómeros que podem existir para determinados compostos, assim como os isómeros Ópticos individuais que estão, todos,

-8dentro do âmbito da presente invenção. Ainda que as misturas r_a cemicas possam separar-se nos seus isomeros individuais, através de técnicas bem conhecidas , tal como por exemplo, a separação dos sais di astereoméri cos formados com adjuntos, opticamente activos, por exemplo, ácidos ou bases, seguida da conyersão posterior nos substratos, opticamente activos; em muitos exemplos, para os compostos da presente invenção, o isomero Óptico preferido pode sintetizar-se por meio de reacções estereospecíficas, começando com o estereoisÓmero apropriado do material inicial desejado. Como se indicou, a presente invenção engloba, também, os sais não-toxicos, aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, destes compostos. Tais sais podem incluir os sais derivados da combinação de catiões apropriados, tal como iões metálicos alcalinos e iões metálicos al cal i no-terrosos ou iões amónio e iões amino quaternários com a fracção ácida aniÓnica do grupo ácido fosfonico. Como aditamento, os sais podem formar-se a partir da adição ácida de determinados ácidos orgânicos e inorgânicos com centros bã. sicos de purina,especialmente guanina, ou base de pirimidina.Finaj mente, compreende-se que os compostos da presente invenção, na sua forma não-ionizada, assim como na sua forma zwitterionica e/ou sob a forma de solvatos, são considerados, também, parte da presente invenção.

Os compostos da presente invenção existem, também, em sub-classes: duas sub-classes extensas, nas quais o símbolo B r£ presenta uma base de purina ou uma base de pirimidina. Destas sub-classes extensas, preferem-se as classes, nas quais a base de purina é uma guanina ou um grupo guanina substituído e em que as bases de pirimidina são a timina ou a citosina. A classe de com

-9postos, mais preferida, e aquela em que o símbolo B representa a base guanina ou a guanina substituída.

Classes preferidas de componentes análogos de açúcar, por exemplo,

I ¹

R, C-alq₉-Q ¹ I ² alq₃ são aquelas, nas quais o símbolo alq^ representa uma ligação quí mica e o símbolo Q representa um átomo de hidrogénio e aquelas , nas quais o símbolo alq₂ representa o grupo metileno e o símbolo Q representa um grupo hidroxilo.

Os compostos da presente invenção podem, também, sub-cla£ sificar-se de acordo com a estrutura do grupo fosfonato. Estas classes compreendem o diéster, o monoester e o diãcido. Sub-clas^ ses preferidas do grupo fosfonato são o monoester e o diãcido.

Os compostos da presente invenção podem preparar-se por meio dos dois processos gerais, seguintes. Os compostos, nos quais o símbolo Q representa um ãtomo de hidrogénio e o símbolo alq₂ representa uma ligação química, podem preparar-se geralmente por meio do Esquema Sintético (I) e os compostos, nos quais o símbolo Q representa um grupo oxidrilo, podem preparar-se gera([ mente, segundo o Esquema Sintético (II).

	Esquema	Sintético I
X	B		B
	al q i	1) base ,H20 zM® *	al q,
R.-C-H 1 |	1 R-.-C-H 1 |	R.-C-H * I
?,q3	alq- 1 0		alq3
0 1	0 I		?
R9-C-H 2 |	r2-c-h		r9-C-H
0= P-ORQ i	0= P-OR, 1		0= P-OR [
0R4	0R4		0H4
II	Ia (R3, r4^h>		Ib (R3 f h>

l)Me₃SiBr 2) H₂0 ▼

B ^λ al q η

R^-C-H ^alq3

O r₂-c-h

0= P-OH

OH

Ic

-η9 i

/

No Esquema I, os símbolos B, alq-|, alq^, Rp Rg, Rg e R^ têm os significados definidos antes. 0 símbolo X representa um grupo orgânico sintético, padrão, eliminãvel, tal como cloreto , brometo, iodeto, tosilato, mesilato, triflato e similares. Compre^ ende-se que no Esquema I, o símbolo alq^ representa uma ligação química e o símbolo Q representa um átomo de hidrogénio.. Na sequência de reacções que estão compreendidas no Esquema I, a base B converte-se num anião por meio de tratamento com uma base , tal como um hidreto de metal alcalino, no seio de um dissolvente não reactivo, tal como dimetilformamida (DMF), com agitação conjunta, durante cerca de l a 3 horas, enquanto a escala da temperatura vai da temperatura ambiente até cerca de 13O°C. Alquila-se a base aniónica com um composto intermédio de formula geral (II), o fosfonato diéster de fórmula geral (Ia). Este diéster pode converter-se, quer no monoêster Ib ou no diacido Ic. A cojn versão do diéster Ia no monoêster Ib pode efectuar-se por meio da dissolução de Ia numa solução aquosa de hidróxido e manutenção da temperatura entre a temperatura ambiente e 80°C, durante cerca de l a 6 horas. Como alternativa, quando a base tem um grupo protector ãcido-lãbil no núcleo reactivo da base, a conversão de Ia em Ib, com a concomitante eliminação do grupo protector, efe£ tua-se por meio da dissolução do composto Ia protegido, em acido diluído, tal como HCl, e manutenção da temperatura entre cerca da temperatura ambiente e cerca de !00°C, durante cerca de l a 6 horas.

A conversão do diéster Ia no diacido Ic efectua-se rapidamente por meio de tratamento de uma solução de Ia, no seio de um dissolvente não-recativo, tal como DFM, com excesso de brometo de trimetil-sililo e agitação, a cerca da temperatura ambien-12-

te, durante cerca de 4 a 6 horas. Eliminam-se os produtos volã teis por meio de concentração sob vãcuo, num composto residual que se trata com ãgua para originar o composto diãcido Ic deseja, do.

No Esquema Sintético II, mostrado a seguir, o símbolo Q representa um grupo hidroxi.

Esquema Sintético II

B alq, i ¹ 2 PG-L

R,-C —a 1q ₂-OH ι ^c a!q₃

OH

V

PG-B al_q]

Rn -C -a 1 q ₉ -OPG X

B

I

I ^lql

R,-C - alq₉-0H ¹ I ² alq₃ l

H₂0

Δ

R₉CH

O=P-OR₉

I ³

0R₄

PG-B

I a!qi

R-ι -C-a 1q ₉-OPG ¹ I ² alq_

I ³ ι

Rp-CH ^á i

0= p-or₉

I ³ or₄

Ia

III

Também se torna evidente para os entendidos na matéria que os compostos de fórmula geral (I), na qual o símbolo Q repre^ senta um grupo hidroxi, podem preparar-se também, em alguns exem pios, por meio do processo do Esquema I. Mostra-se a seguir, um exemplo de tal síntese, como Esquema III.

Esquema III

XII

B

I

CH_? i ^c

HC-CH₂0PG ch₂

I

I ch₂

I ^c

O=P-OR„

V

B

CH_?

I hc-ch₂oh

I

CH₉

I ^ά

I ch₂ i ^á o=p-or₇

I ⁶

0R₄

Uma vantagem da utilização do processo dos Esquemas I e III reside na versatilidade de utilização dos compostos intermédios de formula geral (II) e (XII); estes podem estar associados a uma base desejada, escolhida entre um vasto grupo de tais bases, para originar uma variedade de compostos de fórmula geral (I) em, apenas, uma das tres fases.

No anterior Esquema II, os símbolos B, alq^ , a 1q₂» alq^, Rp R₂, Rg e R^ tem os significados definidos antes.

símbolo PG representa um grupo protector orgânico, sin tetico, com grupos protectores preferidos, pertencendo à classe trifeni1 meti 10 dos grupos protectores. 0 símbolo L representa um grupo orgânico sintético, eliminãvel, que se pode escolher a partir do grupo definido para 0 Esquema Sintético I, com um hal_o geneto preferido e um cloreto mais preferido. No Esquema Sintético II, 0 símbolo alq^ representa, ou uma ligação química ou tem significado idêntico ao símbolo alq^· 0 Esquema II compreende 0 grupo amino-protector da base purina ou pi ri midina ou 0 grupo hidroxi da base pirimidi.na, assim como 0 grupo hidroxi terminal ligado ao símbolo alq₂· Em geral, esta reacção de introdução do grupo protector efectua-se em dissolventes de reacção inerte, habitualmente contendo um excesso de um reagente básico, tal como a trietilamina, cuja função ê limpar 0 anião do grupo eliminãvel e 0 ião hidrogénio que são libertos quando a reacção prossegue. 0 composto intermédio di-protegi do, resultante, de fórmula geral (IV), é tratado com um hidreto metálico, por exemplo, NaH, seguido de reacção com um composto intermédio fosfonato diêster, de formula geral (VI), para se obter 0 composto intermédio III.

-15/ c

A eliminação dos grupos protectores do composto intermédio III , feita quer por aquecimento do composto III em meios ácidos, quer por meio de ligeira hidrogenolise, resulta no composto diester desejado Ia. Também devera ser evidente para os entendidos na matéria que este composto Ia, no qual o símbolo Q representa um grupo OH, se poderá converter num composto correspondente, no qual o símbolo Q=H por meio de conversão do grupo hidroxi num gr£ po eliminável (como por meio de tratamento com cloreto de tosilo ou cloreto de mesilo), seguida de redução do hidreto a um compos_ to alquilado, ramificado, de formula geral (Ia), na qual o símb£ lo alq^ representa o grupo alquileno, e o símbolo Q represeji ta um átomo de hidrogénio.

Os compostos intermédios reaccionais de formula geral (II), (V) e (VI), que se utilizaram nos Esquemas sintéticos I e II, são úteis sob o ponto de vista comercial ou podem sintetizar-se facilmente.

Apresentamos a seguir, nos Esquemas IV e V, as sínteses representativas de estes compostos intermédios.

-16ESQUEMA IV

Síntsse do composto intermédio

Comoostos intermédios de formula geral (II)

O II x-(C£H₂ p-o-ch-p-or₃ ^R1 ^R2 ^0R4 na qual

II

alq₃

a) n = 2

Ac Cl_v

ZnCl?

AO0/^ZXy^z0\/^P(0RÍ)2 ^R1

Ap(OR) u ³ 2

O ^R1

«1

I

-17Esquema IV (cont.)

B) n = 3,4

c) n = 5-7

MsO-(CH₂)_n-0

II

HC1 (40) _P —> ^Clz/XO-(CH ) -Br2_2^ CH 0 ² (R3O) ₂

Br cloreto de mesilo

HO-(CH_) -OH n

d) R₂ \ H

F£>-(CH_). ,-OPG n

Esquema IV (cont.)

Compostos intermédios de fórmula geral (XII) 0

X - alq^CH-alqj-O-^P (QR^ alq«

I ^Z

OPG

XII

Uma síntese representativa :

PG-L ------> cli vagem

_^OPG 1) PG'-L de acetonida

XII <·

- PG'

No Esquema IV, ο símbolo η representa um numero inteiro de 1 a 7 e todos os outros símbolos têm os significados, defini “ dos antes, ou são convencionais, por exemplo, Ac=aceti1=CH_gt~ etc.. Reacções nas quais, um grupo hidroxi terminal se converte em um grupo eliminável, por exemplo, -OH---->-0Tos, considerar-se-ão apenas, como representativas, visto que outros grupos su^ fonato elimináveis, por exemplo, melisato e triflato, se podem utilizar em substituição do tosilato ou o grupo -OH se pode converter funcionalmente, em outros tipos de grupos elimináveis, por exemplo, halogeneto.

No processo do exemplo mostrado para síntese de um compos_ to intermédio de fórmula geral (XII), o grupo protector PG ê mais lábil do que o grupo PG. Isto permite a eliminação selecti_ va do grupo PG' na presença do grupo PG . Exemplos de tais pares de grupos protectores poderão ser: PG' =di -(p-metoxi feni 1) fem‘2 metilo; PG=tri feni 1 meti 1 o ou PG¹ =buti 1 di meti 1 si 1 i 1 oterc. e PG=beji zi 1 o.

Esquema V

Síntese do Composto Intermédio

Compostos intermédios de fórmula geral (V):

V _20 processo de preparação dos compostos intermédios de formula geral (V) compreende uma primeira fase que é, semelhante à do Esquema I: produção da base aniónica B e alquilação. 0 derivado acetoneto de alquileno, resultante, da base converte-se no composto intermédio, pretendido, de fórmula geral (V) por meio de clivagem acida padrão do grupo acetoneto.

Em resumo, os processos sintéticos gerais para a prepara^ ção dos compostos de fórmula geral (I) compreendem:

A. 1) alquilação de um guião de base purina ou pirimidina , com um grupo eliminável derivado de um composto interme di o de fórmula geral(II), fosfonato de alqui lenoximeti_ lo, di-esterificado para se obter o correspondente composto derivado bãsico de fórmula geral (Ia);

2) conversão do composto (Ia) no composto (Ib) por meio de hidrólise catalisada, acida ou básica, ou conversão no composto (Ic) por meio de tratamento do composto (Ia) com excesso de brometo de trimeti 1-si1i1 o, evaporação até a secura e tratamento do residuo com agua.

B. 1) protecção da porção do núcleo reactivo da base, por exem pio, o grupo amino da base adenina ou guanina e do grupo hidroxi terminal do composto inicial diolico de fórmula geral (V), com grupos protectores orgânicos, sintéticos, possuindo as características estéricas e ele£ trónicas necessárias, apropriadas para a seiectividade necessária na ligação para se obter o composto intermédio di-protegido de fórmula geral (IV);

2) conversão do grupo hidroxi remanescente num anião oxi por meio de tratamento do composto (IV) com um hidreto de metal alcalino, seguido, de alquilação com um derivado do grupo eliminãvel de um composto intermédio de fórmula geral (VI), fosfonato de metilo di-esterificado, para se obter o composto intermédio de formula geral (UI);

3) eliminação dos grupos protectores do composto intermédio de fórmula geral (III) para se obter o fosfonato di_ éster de fórmula geral (Ia); e

4) os mesmos processos de A.2).

Os sais aceitáveis, sob o ponto de vista fisiológico , dos compostos de formula geral (I) da presente invenção preparam-se por meio de métodos conhecidos na matéria. Os sais incluem sais de amónio e sais de metais aceitáveis, sob o ponto de vista fisiologico, particularmente Li ,K ,Na ,Ca e Mg , e sao com postos novos que constituem um aspecto adicional da presente invenção. Os sais metálicos podem preparar-se por meio da reacção de um hidróxido metálico com um composto de fórmula geral (I) da presente invenção. Exemplos de sais metálicos que se podem preparar, por esta via, sao os sais contendo Li ,Na e K . Um sal metálico menos solúvel pode precipitar a partir da solução de um sal mais solúvel por meio da adição do composto metálico apropriado. Sais ácidos podem preparar-se por meio da reacção de um composto, de fórmula geral (I) da presente invenção com um ãcido orgânico ou inorgânico, por exemplo, HC1 , HBr, e ácidos suj.

fónicos orgânicos e similares.

/

-9 9 -/ “Ο· / ,

Os compostos da presente invenção,incluindo os seus sais aceitáveis sob o ponto de vista fisiológico, possuem activi_ dade antiviral desejável. Mostram, actividade contra os vírus de ADN, por exemplo, virus I do herpes simples, vírus II do herpes simples, citomegalovírus, vírus da varicela zoster e, também contra os retrovirus. Para utilização contra as infecções virais, os compostos da presente invenção, podem formular-se em preparações farmacêuticas. Tais preparações compõem-se de um ou mais * compostos de fórmula geral (I) em associação com um veiculo aceitável sob o ponto de vista farmacêutico. A referência Remington¹s Pharmaceutical Sciences, 15^a edição, de E. W. Martin (Mark Publishing Company, 1 975) cita veículos, típicos e métodos de preparação .

Os compostos podem administrar-se por yia tópica ou por via sistémica. Por administração sistémica entendem-se as vias: oral, rectal e parentêrica (isto e, via intramuscular, intravenq sa, subcutânea e nasal). Geralmente, será de considerar que, \ quando um composto da presente invenção se administra por via oral, necessita-se de uma maior quantidade do agente reactivo pa_ ra produzir o mesmo efeito do que a quantidade mais pequena administrada por via parentêrica. De acordo com a boa prática clínica, é preferível administrar-se os compostos presentes num nível de concentração que produzira efeitos antivirais eficazes sem cajj sar quaisquer efeitos nocivos ou colaterais desagradáveis. Sob o ponto de vista terapêutico, os compostos presentes administram-se sob a forma de composições farmacêuticas compostas por uma quantidade antiviral eficaz de um composto de fórmula geral (I) ou de um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico e um veí-23-

culo aceitjvel sob o ponto de vista farmacêutico, como se relatou anteriormente. As composições farmacêuticas para efectuar tais tratamentos deverão conter uma maior ou menor quantidade, por exemplo, de 95 a 0,5% de, pelo menos, um composto da preseji te invenção em combinação com o veículo farmacêutico, o diluente líquido, semi-líquido ou solido, o agente de enchimento, e a for. mulação adjuvante que e inerte, não-tõxica e aceitável sob o poji to de vista farmacêutico. Tais composições farmacêuticas encontram-se de preferência, sob formas unitárias de dosagem; isto ê, unidades naturalmente discretas contendo uma quantidade pre-determinada do medicamento correspondendo a uma fracção ou múltiplo da do se que se calcula para produzir a resposta terapêutica desejada . Também podem estar presentes outros agentes terapêuticos. Preferem-se as composições farmacêuticas preparadas com cerca de 1 a 50 mg do ingredinete activo por dose unitária e preparam-se, coji vencionalmente, sob a forma de comprimidos, losangos, cápsulas , pÕs, suspensões oleosas ou aquosas, xaropes, elixires e soluções aquosas. As composições orais preferidas apresentam-se sob a fo£ ma de comprimidps ou cápsulas e podem conter excipientes convencionais, tais como agentes de ligação (por exemplo, xarope, acácia, gelatina, sorbitol, tragacanto ou polivinilpirrolidona), agentes de enchimento (por exemplo, lactose, açúcar, amido de milho, fosfato de cálcio, sorbitol ou glicina), agentes lubrificaji tes (por exemplo, estearato de magnésio, talco, polietilenogl1col ou sílica, agentes desintegrantes (por exemplo, amido) e agentes molhantes (por exemplo, 1auri1 sul fato de sódio). Soluções ou suspensões de um composto de formula geral (I) com veículos far-2 4/ t

maceuticos convencionais utilizam-se para as composições parenté ricas, tais como uma solução aquosa para injecção intravenosa ou uma suspensão oleosa para injecção intramuscular. Tais composições possuindo a pureza, a estabilidade e a adaptabilidade, desejadas, para utilização parenterica, obtêm-se por meio de disso, lução de 0,1% a 10% por peso do composto activo em ãgua ou num veículo consistindo num ãlcool alifãtico poli-hídrico, tal como glicerina, propilenoglicol e polieti1enoglicol ou suas misturas. Os polieti1enoglicois consistem numa mistura de polietilenoglicois, usualmente líquidos, não-volãteis , que são solúveis na ãgua e líquidos orgânicos e possuem pesos moleculares de cerca de 200 a 1500.

Considerando as actividades biológicas possuídas pelos compostos das séries presentes, pode acontecer que estes compostos possuam propriedades antivirais particularmente ajustadas para a sua utilização no combate as infecções virais. Assim, o_u tro aspecto da presente invenção diz respeito a um processo de S tratamento de infecções virais, nos mamíferos, com necessidade de tal tratamento que compreende a administração sistémica ou tópica, a esses mamíferos, de uma dose eficaz de um composto de fórmula geral (I) ou de um sal aceitável sob o ponto de vista fa£ maceutico. Na base do teste, pode considerar-se uma dose eficaz a dose de cerca de 0,01 a cerca de 30 mg/Kg de peso corporal com cerca de 1 a cerca de 20 mg/Kg de peso corporal, como dose preferida naquela escala. Considera-se que, para a aplicação clínica , os compostos da presente invenção deverão administrar-se de modo idêntico ao do medicamento de referência aciclovir. Porem, para aplicações clínicas, a dosagem e o regime devem ajustar-se cuida-

dosamente, para cada caso, utilizando-se o critério profissional correcto e tendo em consideração a idade, o peso e a categoria do recipiente, a via de administração e a natureza e gravidade da doença. Geralmente, uma dose oral, diária, compreenderá de cerca de 150 a cerca de 750 mg, de preferencia 250 a 500 mg de um composto de fórmula geral (I), administrado uma a tres vezes por dia. Em alguns casos, pode obter-se um efeito terapêutico suficiente com doses mais baixas, enquanto que em outros, deverão aplicar-se doses maiores.

Descrição dos Aspectos Específicos

Os compostos que constituem a presente invenção e os seus métodos de preparação apresentar-se-ão mais completos tendo em consideração os exemplos seguintes que são apresentados com a finalidade única de ilustração e não como limitação do âmbito da presente invenção. Todas as temperaturas são apresentadas em graus centígrados qando não estão especificadas. As características espectrais da ressonância magnética nuclear (RMN) referem alterações (<í) químicas expressas em partes por milhão (ppm) ver sus tetrameti1-si 1 ano (TMS), como referência padrão. A área relativa referida para as várias alterações dos dados espectrais protónicos da RMN corresponde ao número de átomos de hidrogénio de um tipo funcional particular na molécula. A natureza das alterações no que respeita ã multiplicidade é assinalada como singleto largo (sl), singleto (s), multipleto (m), dupleto (d), dupleto de dupletos (dd), tripleto (t) ou quarteto (q). As abreviaturas utilizadas são: DMSO-dg (perdeuterodimeti1-sulfÕxido), CDClg (deuterocloroformio) e, por outro lado são convencionais. As

- ra proporcionar um óleo amarelo. A purificação por meio de coluna cromatografica sobre gel de silica (acetato de etilo/hexano ) proporcionou 3,51g (72%) de 5-benzi1oximeti1-2,2-dimeti1-1,3-dio xano, sob a forma de um líquido incolor, transparente.

Agitou-se a temperatura ambiente, durante 20 horas, uma mistura de 3,40g (14,4mmol) de 5-benzi1oximeti1-2,2-dimeti 1-1,3-dioxano e alguns cristais de mono-hidrato do acido p-tolueno-suj fónico em 100 ml de metanol. Eliminou-se o metanol, sob yacuo , e purificou-se o Óleo residual por meio de coluna cromatografica sobre gel de sílica (acetato de etilo) para se obterem 2,25g (80%) de 2-benziloximeti1-1,3-propanodiol , sob a forma de um líquido incolor, transparente.

Lavaram-se, três vezes, com pentano anidro, 0,87g (80% de dispersão em Óleo, 29,lmmol) de NaH secaram-se sob vácuo , e depois, suspenderam-se em 60 ml de THF anidro. A seguir, adici_o nou-se gota a gota, durante 20 minutos, uma solução de 5,70g (29,1 mmol) de 2-benziloximeti1-1,3-propanodiol em 5ml de THF e agitou-se a mistura reaccional ã temperatura ambiente, durante

1,5 horas, para se obter uma pasta branca. Depois, adicionaram-se gota a gota, durante 3 minutos, 4,38g (29,lmmol) de cloreto de buti1dimeti 1-si 1 i 1 o terc. e agitou-se a mistura reaccional a temperatura ambiente, durante mais 2 horas. A seguir, diluiu-se a mistura em 150 ml de acetato de etilo e lavou-se com carbonato de potássio aquoso a 10% e uma solução concentrada de cloreto de sódio, secou-se sobre MgSO^, filtrou-se e concentrou-se para se obter um Óleo incolor. A purificação por meio de coluna cromato gráfica sobre gel de silica (acetato de etilo/hexano) originou *

/

7,41g (82%) de 2-benzi1oximeti1-3-t-buti1dimeti1-si 1oxi-propanol, sob a forma de um líquido incolor transparente.

Adicionou-se gota a gota, durante 10 minutos, uma solução de 5,05g (16,3mmol) de 2-benzi-oximeti 1-3-t-buti1dimeti1-si loxi-l-propanol em 10 ml de THF anidro, a uma pasta de NaH (0,59g, 80% de dispersão em Óleo, 24,4mmol) em 70 ml de THF anidro, a temperatura de 0°C., sob atmosfera de ãrgon. Após se ter completado a adição removeu-se o banho gelado e agitou-se a mistura reaccional, durante 45 minutos, ã temperatura ambiente. Depois, adicionou-se, durante 5 minutos uma solução de sulfonato dietíli. co de fosfonometi1trif1uorometano (Kluge, A. F. Org. Synthesis 1 985,64, 80 ; Phillion, D. P; Andrew, S. S. Tetrahedron Lett. 1986 , 27 , 1 477; 5,85g. 19,5mmol) em 10 ml de THF anidro. Apos 3 horas, a temperatura ambiente, aqueceu-se a mdstura reaccional ã temperatura de 50°C., durante 2 horas, e depois arrefeceu-se até ã temperatura ambiente. Em seguida, arrefeceu-se a mistura por meio de adição de 50ml de H₂0, diluíu-se com CH₂C1, lavou-se com H₂0 e uma solução saturada de cloreto de sodio, secou-se sobre MgSO^, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o Óleo impuro, obtido, por meio de coluna cromatogrãfica sobre gel de sílica (EtOH/EtoAC) para se obterem 2,550g de 2-benzi1oximeti1-1-t-buti1dimeti-si 1 όχι-3-(dieti 1 fosfonometoxi) propano, sob a forma de um Óleo incolor. A RMN H¹ indica que o composto é 80% puro. 0 maior conta, minante é o triflato dietílico de fosfonometi1 o, não reagido.

Adicionaram-se gota a gota, 8,3 ml (1 M em THF, 8,3 mmol) de fluoreto de tetrabuti1amonio a uma solução de 2,55g (5,5mmol) de 2-benzi 1 oximeti1-1-t-buti1dimeti1-si 1oxi-3-(dieti 1fosfonometoxi)propano em 20 ml de THF, ã temperatura ambiente. Agitou-se a

m.istura reaccional ã temperatura ambiente, durante 1,5 horas, e depois concentrou-se sob vácuo, para se obterem 5,6 g de um oleo amarelo. A purificação por meio de coluna cromatográfica sobre gel de sílica (3-5% de etanol em acetato de etilo) originou l,72g (31% de 2-benziloximeril-3-t-butildimetil-siloxi-l-propanol) de 2-benziloximetil-3-dietilfosfonometoxi-l-propanol, sob a forma te um óleo incolor, transparente.

Arrefeceu-se ã temperatura de C°C, uma solução de 0,25 g (3,72 mmol) de 2-benziloximetil-3-dietilfosfonometoxi-l-propanol em 5 ml de CH^Cl^ e tratou-se com 0,22g (2,16 mmol) de trietilamina. A seguir, adicionou-se uma solução de 0,151g (0,79 mmol) de cloreto de p-tolueno-sulfonilo em 2 ml de CI^Cl? e aqueceu-se gradualmente a mistura reaccional até ã temperatura ambiente. Após 1- horas à temperatura ambiente, diluíu-se a mistura com CH₂C1₂, lavou-se com duas porções de HC1 aquoso a 10% e uma solução saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre MgSO^, filtrou-se e concentrou-se para se obter um óleo cor de laranja. A purificação or meio de coluna cromatográfica sobre gel de sílica (1-3% de tanol em acetato de etilo) originou 0,295 g de 2-benziloximetil

-3-dierilfosfonometoxi-l-(p-tolueno-sulfoniloxi) propano, sob a forma de um óleo amarelo pálido.

-³²7 ί

^]Η RMN (200MHz, CHC1₃): 7 ,79(d, J = 8,4Ηζ, 2Η), 7,21-7,39(m,7Η),

4,41 (brs,2H), 4,06-4,21 (m,6H), 3,71 (d,d=9Hz,2H), 3,60(ΑΒ quar teto, 2Η), 3,48 (ΑΒ quarteto, 2Η), 2,44 (brs,3H), 2,31 (septeto, J=5,8Hz,lH) e 1,32 (t ,J=7Hz,6H).

¹³C RMN (50 MHz, CHC1₃): 144,7, 137,9, 132,9, 129,8, 127,9,

127,6, 127,4, 73,2, 70,9 e 70,7, 68,3, 67,2, 67,1 e 63,8, 62,5 e 62,3, 39,7, 21,7 e 16,6 e 16,5.

IV película: 3100, 3080, 3040, 3000, 2920, 2880, 1600, 1500, 1480, 1460, 1395, 1360, 1260, 1200, 1180, 1100, 1060, 1040, 980, 840, 820, 800, 750, 710 e 680 cm¹.

C. Compostos de formula geral (II)

-0- CH

II

-P (0R₃)₂

Exemplo 3 l-metano-sulfoniloxi-2-(dietilfosfonometoxi)etano

Adicionou-se gota a gota, durante 1 hora, uma solução de 43,2g (550 mmol) de cloreto de acetilo em 100 ml de eter anidro a uma solução de 37,1 g (500 mmol) de 1,3 dioxolano em 300 ml de eter contendo alguns cristais de cloreto de zinco (II), a temperatura ambiente, sob atmosfera de azoto. Agitou-se a mistura ' reaccional ã temperatura ambiente durante 2 horas adicionais, e depois concentrou-se sob vácuo. Purificou-se o composto por meio de destilação (0,6 mmHg, 56-58°C.) para se obterem 67,9 g (89%) de 1-acetoxi-2-(clorometoxi)etano , sob a forma de um Óleo incolor, transparente. Ver: Foye, W. 0.; Kaufmann, J. M.; Kim, Y. H. J. Heterocyclic Chem. 1982, 19, 497.

Aqueceu-se à temperatura de 105-110°C., durante 12 horas, uma mistura de 67,8 g (444 mmol) de 1-acetoxi-2-(clorometoxi)et£ no e 81,3 g (490 mmol) de fosfito de trietilo. Notou-se i ni ci aj_ Λ mente, uma evolução gasosa, vigorosa. A seguir, arrefeceu-se a mistura reaccional ate ã temperatura ambiente e purificou-se o composto impuro, obtido, por meio de destilação (0,9 mmHg, 130-134°C.) para se obterem 76,9 g (68%) de 1-acetoxi-2-(dieti1fosfonometoxi)etano, sob a forma de um liquido incolor.

Adicionaram-se 15 ml de acido clorídrico concentrado numa porção a uma solução de 76,5 g (300 mmol) de 1-acetoxi-2-(di£ ti 1fosfonometoxi)etano em 600 ml de etanol absoluto e aqueceu-se a mistura resultante a temperatura de 55°C., durante 12 horas Depois, arrefeceu-se a mistura reaccional a temperatura ambiente !

( e concentrou-se, sob vácuo. 0 líquido transparente resultante pôde utilizar-se sem purificação ou depois de purificado por meio de destilação (1,5 mmHg, 128-132°C.) para se obterem 52,1 g (82%) de 2-dieti1fosfonometoxi-1-etanol.

Arrefeceu-se a temperatura de 0°C., uma solução de 40,7g (192 mmol) de 2-dieti1fosfonometoxi-1-etanol em 500 ml de CH^Cl^ e depois, adicionaram-se 29,1 g (288 mmol) de trieti1amina, numa porção, seguido da adição de 26,4g (230 mmol) de cloreto de meta no-sulfoni1 o, gota a gota, durante 20 minutos. Conservou-se a mistura reaccional ã temperatura de 0°C., durante 0,5 horas, e depois verteu-se em agua. Extraíu-se a fase aquosa com duas po_r ções de CH^Cle secaram-se as fases orgânicas reunidas, sobre MgSO^, filtraram-se e concentraram-se para se obterem 54,4 g (98%) de 1-metano-sulfoni1oxi-2-(dieti1fosfonometoxi)etano, sob a forma de um óleo transparente, cor de laranja pálido. 0 mesilato obtido pode utilizar-se sem purificação ou depois de purificado por meio de coluna cromatografica sobre gel de sílica (5% de metanol em CH2Cl^) .

^]H RMN (200MHz, CDClg): 4,46-4,50 (m,2H), 4,26 (quinteto, J=6,8Hz,4H), 3,92-3,99(m,4H) , 3,20 (s,3H), e 1,40 (t, J=7Hz, 6H) .

Exemplo 4

- bromo-4-(dieti1fosfonometoxi)butano

A uma solução agitada de 49,5g (323 mmol) de l-bromo-4-butanol e 27,8 ml de forroaldeído a 37%, a temperatura de 0°C.,

adicionou-se lentamente o gas cloreto de hidrogénio anidro. Manteve-se a temperatura a -5^o ate 0°C., durante a adição lenta de 6 horas. Depois, diluiu-se a mistura reaccional com 500 ml de Et^) e lavou-se com 2 x 200 ml de ãgua gelada. Secou-se a solução orgânica sobre MgSO^ e evaporou-se. Destilou-se o resíduo (55-60°/0,2mm ) para se obterem 29g (45%) de 1-bromo-4-(clorometoxi)butano, sob a forma de um Óleo incolor.

RMN H¹ (CDC1₃)Y 5,51 (s,2H), 3,71 (t,2H), 3,49 (t,2H) , ,98 (m,2H), 1,80 (m,2H).

A uma pasta de 6,26g (149 mmol) de NaH a 57% e 300 ml de n-pentano, a temperatura de 0°C, adicionaram-se 17,14g (124mmol) de fosfito de dietilo e agitou-se a mistura, durante 1 hora, ã temperatura de 0°C. Depois, arrefeceu-se a mistura a temperatura de -70°C. e adicionaram-se 25 g (124 mmol) de l-bromo-4-(clorometoxi)butano e aqueceu-se a mistura reaccional ã temperatura de 0°C. agitando-se durante 1 hqra. Depois, filtrou-se a mistura e evaporou-se. Purificou-se o resíduo por meio de cromatogra fia sobre gel de sílica para se obterem 26g (70%) de l-bromo-4-(dietiIfosfonometoxi)butano, sob a forma de um Óleo incolor. RNM H¹ (CDC1₃) o 4,18 (m,4H), <í 3,77 (d,2H), 3,61 (t,2H), 3,45 (t,2H), 1,95 (m,2H), 1,79 (m,2H), 1,35 (t,6H).

Exemplo 5

-(dieti1fosfonometoxi)-5-(metano-sulfoniloxi)pentano

A uma solução de 85,0 g (0,904 mol) de 1 ,5-pentanodiol e

30,3 g (0,30 mol) de trietilamina em 350 ml de CH^C^ anidro, a temperatura de -20°C., adicionou-se gota a gota, uma solução de

-36-/ /

!

28,5 g (0,25 mol) de cloreto de metano-sulfoni1 o em 100 ml de CH^Cl^, durante 2 horas, sob atmosfera de azoto. Agitou-se a S£ lução, durante 2 horas, ã temperatura de -20°C., e depois, ã tem peratura de -4°C., durante 18 horas. Lavou-se a mistura reacci£ nal com H^O, HC11N e H^O, depois secou-se e evaporou-se. Subm^ teu-se a cromatografia o Óleo residual sobre uma coluna de gel de sílica, eluindo-se com EtOAc-CH^Cl^ (2:8). ApÕs reunião das fracções apropriadas, obtiveram-se 25,7g(56,5%) de sulfonato de

5-hidroxipentiImeti1 o, sob a forma de um Óleo incolor.

RMN H¹ (CHC1₃) 4,25 (t,J=6,2Hz,2H), 3,65 (t, J = 5,4Hz ,2H} ,3 ,03 (s,3H), 2,35 (s,lH) e 1,75-1,85 (m,6H).

Saturou-se com HC1 anidro, durante um período de 2,5 horas, uma mistura de 18,2g (0,1 mol) de sulfonato de 5-hidroxipejn tilmetilo e 3,6 g (0,036 mol) de trioxano em 30 ml de dicloroeta. no, com arrefecimento a -10°C. Secou-se a mistura resultante s£ bre MgSOp filtrou-se e evaporou-se o dissolvente, sob vácuo. Obteve-se um óleo branco (24 g) que não pode ser destilado, sob -a vácuo, devido à decomposição, mas reagiu sob a forma de composto intermédio clorometoxi não-purificado.

RMN H¹(CDC1₃) 5,51 (s,2H), 4,28 (t,J=5Hz,2H) , 3,68 (t, J = 5,8Hz,2H), 3,02 (s,3H) e 1 ,40 a 1,80 (m,6H).

Constituíu-se uma pasta de 6,16g de hidreto de sodio (0,154 mol sob a forma de um oleo de dispersão a 50%, pré-lavado coro n-pentano) em 100 ml de n-pentano. Arrefeceu-se a solução ã temperatura de 0°C., e adicionou-se gota a gota, durante 20 mi_ nutos, uma solução de 20,34 g (0,147 mol) de fosfito de dietilo em 10 ml de n-pentano. Arrefeceu-se a pasta ã temperatura de -78°C. . A esta pasta arrefecida, adicionou-se uma solução de

-37-/ k___

Ζ

31,Og (0,134 mol ) de 5-clorometoxi-1-metano-sulfonoxi-pentano, não-purificado, em 120 ml de THF, com agitação vigorosa. Apos ter completado a adição, aqueceu-se a mistura ã temperatura de -15°C., durante 2 a 3 horas. Diluiu-se com 500 ml de acetato de etilo, lavou-se com H^O, secou-se sobre MgSO^ e evaporou-se ate ã secura. Submeteu-se a cromatografia o Óleo resultante, através de uma coluna de gel de sílica (10% EtOAc-CH£Cl£) , para se obterem

22,5 g de um óleo incolor (47%).

RMN H¹ (CDC1₃) 4,3 (m,6H), 3,8 (d,2H), 3,6 (t,2H), 3,0 (s,3H) e 1,4-1 ,8 (m,12H).

II. Síntese de Compostos

Exemplo 6

9-(2-di eti1fosfoncmetoxi)etilguanina(Ia)

Aqueceu-se à temperatura de 100°C., durante 4 horas, uma mistura de 6,47g (33,5 mmol) de N -acetil guanina, 9,80g (30,4 mmol) de 2-(dieti1fosfonometoxi)-1-iodoetano e 8,41g (60,9 mmol) de car bonato de potássio em 350 ml de DMF anidro. Depois, arrefeceu-se a mistura reaccional ate a temperatura ambiente e eliminou-se qualquer material ,insoluvel por meio de filtração. Concentrou-se o filtrado, sob vácuo, para se obter um Óleo viscoso amarelo que se purificou por meio de coluna cromatográfica sobre gel de sílica (5-10% de metanol em CH^Cl^)- A recristalização das fracções reunidas contendo o composto desejado, a partir do acetato de etilo, originou um total de 1,50g (13%) de 2-N-aceti1-9-^¹ -(dieti 1 fosfonometoxi )eti 1) guani na, sob a forma de um solido cristalj_ no, branco; p. f.: 140,5°-l41 ,5^o.

-3§-_r /

Análise: calculado para C25OgP.1/2H0:C, 42,42%; H,5,85%;

N,17,67%. Encontrado: C,42,33%; H, 5,60%; N, 17,99%.

Dissolveram-se 1 ,42g (3,68 mmol) de 2-N-aceti1-9-(2-(die ti 1fosfonometoxi)eti1)guanina em 50 ml de metilanina aquosa a 40% e agitou-se a solução ã temperatura ambiente, durante 45 minutos. Concentrou-se a mistura reaccional, sob vácuo e evaporou-se três vezes com tolueno para originar um sólido gomoso, branco. Agitou-se 0 composto impuro em acetato de etilo quente, durante 1 hora, depois arrefeceu-se até ã temperatura ambiente e recolheu-se 0 composto por meio de filtração para se obterem 1 ,19g de 9-(2-dieti1fosfonometoxi)eti1)guani na.

RMN( 200MHz, dg-DMSO) : 1 0,4-10,7 (brs , 1H), 7,65(s, 1H), 6,46 (brs, 2H), 4,14(t, J = 7Hz, 2H), 3,99(quinteto, J=6Hz, 4H), 3,78-3,89 (m, 4H), e 1,20 (t,J=7Hz, 6H).

RMNC¹³(50,3MHz,d₆-DMS0): 156,7, 153,4, 151,1, 137,5, 116,3, 70,5 e 70,2, 65,4 e 62,2, 61,7 e 61,6, 42,1, e 16,2 e 16,1.

IV(KBr): 3200 (br), 3160, 3000, 1700, 1620, 1545, 1480, 1380, 1255, 1180, 1110, 1060, 1030, 900, 820 e 795 cm^-1.

Analise. Calculado para C^2^20^5θ5^*^/²^2θ^: Η» 5,98%;

N, 19,77%. Encontrado: C, 40,61%, H, 5,74%; N, 19,79%.

Exemplo 7

9-(2-(fosfonometoxi)eti1)guani na(Ic)

Adicionaram-se gota a gota, dunante 2 minutos, 2,77 g (18,1 mmol) de bromotrimetil-silano a uma solução de 0,625g

(1,80 mrool) de 9-(2¹-(dieti1fosfonometoxi)eti1)guanina em 15 ml de DMF anidro, ã temperatura ambiente, sob atmosfera de árgon , num frasco coberto de folha metálica. Agitou-se a mistura reaccional ã temperatura ambiente, durante 4 horas, e depois, eliminaram-se os produtos voláteis, sob vácuo para se obter um óleo viscoso, amarelo. Tratou-se o resíduo com 5 ml de água, origina_n do a formação imediata de um solido branco. Adicionaram-se mais 5 ml de água, seguidos de 10 ml de acetona e recolheu-se o precipitado por meio de filtração. Purificou-se o composto impuro por meio de recristalização a partir de ãgua/etanol para se obterem 0,483g de 9-(2-(fosfonometoxi)eti1)guanina, sob a forma de cristais brancos; p. f.:> 260°C.

^]H RMN (200MHz, dg-DMSO): 10,55(brs, 1H, exch), 7,70(s, 1H) ,

6,45(brs, 2H, exch), 4,00-6,00(br m, exch), 4,12(t, J=7Hz, 2H) ,

3,80 (t, J=7Hz, 2H), e 3,59(d, J=8,8Hz, 2H).

¹³C RMN (50,3MHz,dg-DMSO): 157,0, 153,6, 151,3, 138,3, 116,1,

70,6 e 70,4, 68,0 e 64,8 e 42,6.

Análise: Calculado para CgH^₂Ng0gP.2H₂0: C, 29,54%; H, 4,96%;

N, 21,54%. Encontrado: C, 29,56%; H, 5,05%; N, 21,67%.

Exemplo 8

9-(2-(monoeti1fosfonometoxi)eti1)guani na(Ib)

Dissolveram-se 0,198g (0,57 mmol) de 9-(2-(dieti 1fosfon£ metoxi)eti1)guanina em 15 ml de uma solução de hidróxido de sódio IN e agitou-se a mistura à temperatura ambiente, durante 1 hora.

Depois, acidificou-se a solução com acido clorídrico aquoso a 10% a um pH=l e concentrou-se sob vácuo. Eliminaram-se os sais residuais por meio de cromatografia de coluna de fase inversa (adsorvente C^g, ebulição com agua) para se obterem 0,150 g de 9-(2-(eti1fosfonometoxi)eti1)guanina , sob a forma de um solido cristalino, branco; p.f.: 192,5°-193_r5°C.

^]H RMN (200 MHz, dg-DMSO): 10,6 (brs, 1H), 7,69 (s,lH), 6,48 (brs, 2H), 4,12 (t, J=5,2Hz,2H); 3,89 (quinteto, J=7,2Hz,2H) ,

3,81 (t, J=5,2Hz,2H), 3,68 (d, J=8,6Hz, 2H), e 1,15 (t, J=7,2Hz, 3H).

Exemplo 9

9-(3-hidroxi -2 - (fosfonometoxi )propi 1) guani na( I cj_

Tratou-se uma suspensão de 5,0g (0,022 mol) de 9-(2,3-di-hidroxi)propi1guanina em dimeti 1formamida anidra com 30 g (0,097 mol ) de p-ani si 1 di feni 1 cl orometano, 40 ml de trietilamina e 0,5 g de N,N-dimeti 1aminopiridina e aqueceu-se a mistura re_ sultante ã temperatura de 80°C., durante 12 horas. Depois, arre^ feceu-se a solução, adicionaram-se 50 ml de metanol e eliminaram-se os produtos voláteis, sob vácuo, a temperatura de 70°C e 5mro. Dividiu-se o resíduo entre acetato de etilo e água e secaram-se sobre MgSO^, as camadas reunidas de acetato de etilo e concentraram-se sob vácuo. Submeteu-se a cromatografia, o óleo escuro remanescente sobre gel de sílica, eluindo-se com acetato de etilo/hexano (1:1) para se obterem 4,5g (27%) do composto bis-mon£ metoxitriti 1 o, sob a forma de uma espuma ligeira, cor de laranja; p. f.: 104°-106° (dec.).

-41- / /

/ / *

Tratou-se de uma só carga, uma solução de 3,0g (0,0039 mol) do composto anterior, bis-monometoxitriti lo, em 30 ml de THF anidro, com NaH (Aldrich, 0,311g, 0,0041 mol, 60% por peso em Óleo). Agitou-se a solução, durante 15 minutos, ã temperatura ambiente, depois tratou-se com dieti 1 fosfonato de tosiloximei tilo (Holy, A.; Rosenberg, I. Colect. Czech. Chem. Commun. 1982, 47, 3447 ; 1,50 g,(0,0046 mol) e agitou-se a mistura resultante, durante 12 horas, ã temperatura ambiente.

A análise cromatogrãfica, em camada fina, da mistura impura revelou a ausência do álcool inicial (rf. 0,4 em acetato de etilo/hexano (1:1) e a presença de um produto polar único (rf 0,1 no mesmo). Adicionaram-se 10 ml de metanol e eliminaram-se os produtos voláteis, sob vãcuo. Dissolveu-se o óleo remanescente em acetato de etilo, aplicou-se a uma coluna de gel de sílica (ca. 3x300 cm) e eluíu-se com acetato de etilo puro. Obteve-se o composto em 40 fracções que se reuniram e concentraram, sob vjí cuo, para se obterem 3,2g de 2-N-(monometoxi tri ti 1 o)-9—((2-di etij_ fosfonometoxi)-3-(monometoxi tri ti 1 oxi )propi 1) guani na (90%), sob a forma de uma espuma incolor; p. f.: 78°-80°.

Aqueceu-se , ligeiramente, num banho de vapor, durante

0,5 horas, uma solução de l,5gm (0,0016 mol) de dieti1fosfonato de bis-(monometoxi)triti 1 o em 50 ml de acido acético aquoso a 80%. A análise cromatogrãfica em camada fina indicou que o fosf£ nato inicial estava ausente e que o produto acessório tritanol e o dieti1-HPMPG eram os únicos compostos presentes. Secou-se por meio de evaporação, com tolueno, o composto solido remanescente, após trituração , e depois secou-se sob vãcuo, durante duas horas. Tratou-se o composto impuro (Ia), assim obtido (p.

/ f.: 87-90 graus), com 5 ml de bromotrimeti 1-si 1 ano em 10 ml de dimeti 1formamida anidra. Conservou-se ã temperatura ambiente , durante 5 horas, a mistura ligeiramente amarela, resultante. Depois, eliminaram-se os produtos voláteis, sob vácuo, adicionaram-se 5 ml de água, seguidos de 5 ml de acetona, e conservou-se a solução turva a temperatura de -20 graus, durante 1 hora. Recolheu-se o solido que se formou, por meio de filtração-sucção, 1£ vou-se cora acetona e recri s tal i zou-se a partir de água/acetona pa_ ra se obter a 9-(3-hidroxi-2-(fosfonometoxi)propi1)guanina, sob a forma de ura sólido esbranquiçado; p. f. : 185°-190° (dec.) ^]RMN(360MHz, DMSO-dg) 7,72(s, 1H), 6,47(brs, 2H), 4,15(parte B, ABq, J=3,5, 14Hz, 1H), 3,98(parte A, ABq, J=7, 14Hz, 1H), 3,67 (ra, complexo, 1H), 3,62(m, 5 linhas, 2H), 3,37(m, complexo, 2H), 3,37(m, complexo, 2H),^I3 _C RMN(90MHz, DMSO-dg 1 56,72, 1 53,67 , 1 51 ,31 , 138,25, 115,83, 80,45 (J_c_₀__c__p =10Hz), 69,86, 66,39, 64,61 (J_c__p = 160Hz), 43,28.

Exemplo 10

3-bromo-9-(2^l-(fosfonometoxi)eti1)guani na(Ic)

Adicionou-se 1 ml de bromo a 100 ml de agua e agitou-se a mistura vigorosamente a temperatura ambiente ate todo o bromo estar dissolvido (15 minutos).

Depois, dissolveram-se 0,360g (1,04 mmol) de 9-(2'-(dieti1fosfonometoxi)eti1)guanina em 10 ml de H^O e trataram-se gota a gota cora a solução aquosa de brorao ate a cor do bromo persistir. Conservou-se a mistura reaccional ã temperatura de 0°C., durante 1 hora, e depois concentrou-se para se obter uma goma vi£

cosa, amarela escura. A purificação efectuou-se por meio de coluna cromatogrãfica sobre gel de sílica (MeOH-CHgCl₂) para se obterem 0,31 g de 8-bromo-9-(2¹-(dieti1fosfonometoxi)eti1)guanina, sob a forma de um põ cor de laranja.

^]RMN (200MHz, dg-DMSO): 6,58(brs, 2H), 4,12(t, J=5Hz, 2H), 3,95 (quinteto, J = 7Hz, 4H), 3,74-3,85(m, 4H), e l,17(t, J = 7Hz, 6H).

¹³C RMN (50,3MHz, dg-DMSO): 155,4, 153,7, 152,4; 120,9, 116,6,

69,7 e 69,5, 65,7 e 62,5, 61,8 e 61,6, 43,1, e 16,2 e 16,1.

Adicionaram-se 0,47 g (3,1 mmol) de bromotrimetiIsi1 ano, gota a gota, durante 5 minutos a uma solução de 0,13g (0,31 mmol) de 8-bromo-9-(2¹-(fosfonometoxi)eti1)guanina em 3 ml de DMF, ã temperatura ambiente, sob atmosfera de árgon, num frasco coberto de folha metálica. Agitou-se a mistura reaccional ã temperatura ambiente, durante 4 horas, e depois, eliminaram-se o dissolvente e o excesso de silano, sob vácuo. Tratou-se o Óleo cor de laraji ja, resultante, com H^O e acetona para originar um sólido puro , amarelo pálido, que se recolheu por meio de filtração. Purificou-se o sólido por meio de recristalização a partir de H₂O/EtOH para se obterem 21 mg de 8-bromo-9-(2¹(fosfonometoxi)eti1)guanina, sob a forma de cristais amarelos, pálidos.

^]RMN (200MHz, dg-DMSO): 10,6(brs, 1H), 6,63(brs, 2H), 4,10(t, J=5Hz, 2H), 3,79(t, J=5Hz, 2H), e 3,57(d, J=8H, 2H).

¹³C RMN (50,3MHz, d -DMSO): 155,4, 153,8, 152,4, 120,8, 116,7,

69,3 e 69,2 e 65,0, e 42,9.

-44/ ~

Exemplo 11

9-(3-(monoetilfosfonometoxi)propi1 )guanína(Ib)

Aqueceu-se à temperatura de 85°, durante 3,5 horas, uma solução de 9-(3-dietilfosfonometoxi)-6-0-( metoxietil)guanina (Ia 417 mg, 1 mmol) em 10 ml de HC1 3N. Eliminou-se o dissolvente , utilizando-se vácuo elevado para se obterem 400 mg do monoester do composto vítreo.

RMN H¹ (D₂0) 7,95(s, 1H), 4,38(t, 2H); 4,15(quinteto, 2H), 3,85 (d, 2H), 3,70(t, 2H), 2,25(m, 2H) e 1,30 (t, 3H).

Exemplo 12

9-(4-(fosfonometoxi)buti1)adeni na(Ic)

Adicionaram-se, em porção única, 3,363gm (24,9 mmol) de adenina a uma pasta de 0,962g (22,8 mmol) de NaH a 57% em 150 ml de DMF destilada. Aqueceu-se ã temperatura de 80°C, durante 1 hora, a mistura e depois, arrefeceu-se a temperatura de 30°C e adicionaram-se 6,30 g (20,7 mmol) de 4-(dieti1fosfonometoxi)1-br£ mobutano e aqueceu-se a mistura ã temperatura de 60°C agitando-se durante 2 horas . Depois, eliminou-se o dissolvente, sob vácuo elevado, e triturou-se o resíduo, três vezes, com 100 ml de CH₂C1₂ e filtrou-se. Evaporaram-se os filtrados reunidos e purificaram-se por meio de cromatografia sobre gel de sílica para se obterem 4,9 g (66%) do composto Ia, sob a forma de um produto cristalino, branco; p. f.: 67°.

/ ¹RMN (CDC1₃) o 8,25(s, 1H), 7,80 (s,H), 6,50 (s,2H), 4,10 (m,6H), 3,67 (d,2H), 3,52 (t, 2H), 1,91 (m,2H), 1,53 (m,2H), 1,23 (t,6H).

UV max (MeOH) 261 mm (£ 14155)

Análise: Calculado para C^H^N^O^P: C, 47,02 ; H, 6,77 ;

N, 19,60. Encontrado: C, 46,81; H, 6,83; N, 19,69.

Adicionaram-se 13 ml (90 mmol) de bromotrimeti 1 si 1 ano a uma solução de 3,3 g (9,2 mmol) do composto Ia em 75 ml de DMF destilada. Agitou-se a solução a temperatura de 20°C durante 5 horas, e depois concentrou-se sob vácuo. Cristalizou-se o resíduo a pa£ tir de 30 ml de H^O para se obterem 2,5 g (90%) do composto Ic, sob a forma de um produto cristalino, branco; p.f.: 238°C.

¹RMN (D₂0) ò 8,02 (s, 1H), 8,00 (s, 1H), 4,13 (t, 2H),

3,66 (m,4H), 1,84 (m,2H), 1,67 (m,2H).

UV max (MeOH) 261 ( £ 13824)

Análise: Calculado para C-j qH^ 4N5O4P: C,39,87; H, 5,35;

N, 23,25. Encontrado: C,39,46; H, 5,08; N,23,17.

Exemplo 13

9-(4-(fosfonometoxi)buti1)guani na(Ic)

Adicionaram-se 8,0 g (41 mmol) de 6-0-(metoxieti1)guanina a uma pasta de 560 mg (70 mmol) de LiH em 200 ml de DMF destilada (Rjellberg, J.: Liijenberg, M.; Johannson, N. G. Tetrahedron

-46f ’

Lett. 1986 , 27 , 877). Agitou-se a mistura a temperatura de 20°C durante 1,5 horas, e depois, adicionaram-se 12,6 g (41,5 mmol)de

4-(dieti1fosfonometoxi)-1-bromobutano em 5 ml de DMF e aqueceu-se a mistura a temperatura de 60°C, durante 4,5 horas. Depois, arrefeceu-se a mistura reaccional à temperatura de 10°C e tratou-se gota a gota, com HC1 diluído para um pH=8. Depois, eliminaram-se os dissolventes, sob vácuo elevado e purificou-se o resíduo impuro por meio de cromatografia sobre gel de sílica para se obterem 4,2g do composto Ia de guanina protegido em 0-6, sob a forma de um óleo ligeiramente amarelo.

^]RMN (CDC1₃) & 7,65 (s,lH), 4,92(s,2H), 4,66(t,2H),

4,15 (m,6H), 3,81 (m,4H), 3,62 (t,2H), 3,45 (s,3H), 1,96 (m,2H),

1,62 (m,2H), 1,35 (t,6H) .

Aqueceu-se ã temperatura de refluxo, durante 5,5 horas, uma solução de 3,0 gm (7,0 mmol) do composto intermédio Ia, 6-0-(metoxieti1)-9-(4-dieti1fosfonometoxi)buti1)guanina, em 30 ml de HC1 6N. Depois, eliminou-se o dissolvente, sob vácuo elevado, dissolveu-se o resíduo vítreo em 3 ml de h^O e diluíu-se com ace_ tona ate ficar turvo. Após agitação, durante a noite, obtiveram-se 1,6 gm (73%) do composto cristalino Ic; p. f. 240°.

^]H RMN (D₂0) ζ 7,813 (s,lH), 4,07 (t,2H), 3,59 (m,4H),

1,89 (m,2H), 1 ,61 (m,2H), , ,

UV max - (H₂0) 271 £=8494

Análise: Calculado para CθHθNg0₅P: C, 37,85; H, 5,08; N,22 ,07. Encontrado: C,38,26; H, 5,00; N, 21,45.

-47i

Exemplo 14

-(4-(fosfonometoxi)buti1)ti mi na (Ia)

Adicionaram-se,em porção única, 2_s07g (16,4 mmol) de timina a uma pasta de 0,634g (15 mmol) de NaH a 57% em 80 ml de DMF destilada. Aqueceu-se a mistura a temperatura de 80°, durante 1 hora. Depois, arrefeceu-se a mistura reaccional ã temperatura de 60°C e, para isso, adicionaram-se 4,15g (13,7 mmol) de 4-(dÍ£ ti 1 fosfonometoxi)-1-bromobutano e aqueceu-se a mistura a tempera; tura de 90°, durante 1 hora. Então, eliminou-se o dissolvente, sob vácuo elevado, triturou-se o resíduo com 3x100 ml de CH^Cl₂, reuniram-se as fracções e fi1traram-se. Purificou-se o resíduo por meio de cromatografia sobre gel de sílica para se obterem 2,2g (46%) do composto IA,, sob a forma de um óleo incolor.

RMN H¹ (CDC1₃) í 7,01 (s,lH), 4,07 (m, 4H), 3,52 (t, 2H),

1,82 (s, 3H), 1,69 (m, 2H), 1,55 (m, 2H), 1,25 (t, 6H) .

Adicionaram-se 7,6 ml de bromotrimeti 1-si 1 ano a uma solju ção de 2,0g (5,75 mmol) de fosfonato de dietilo (IA) em 50 ml de DMF destilada. Agitou-se a solução, durante 16 horas, a tempera, tura de 20°c, e depois, eliminaram-se os dissolventes, sob vácuo elevado. Cristalizou-se o resíduo vítreo a partir de H^O-acetona, para se obterem 810 mg (48%) do composto cristalino IC, bra£ co; p. f.: 140°.

^]H RMN (D₂0) (í 7,46 (s, 1H), 3,73 (t, 2H) , 3,64 (d, 2H),

3,58 (t, 2H), 1,82 (s, 3H), 1,69 (m, 2H), 1,56 (m, 2H).

Os exemplos anteri ores, uti 1 i zados , podem sofrer modificai ções apropriadas para originarem compostos intermédios ou compo£ /

tos de estrutras desejadas, cujas modificações são evidentes para os entendidos na matéria; podem preparar-se outros exemplos de compostos dentro do âmbito da presente invenção. Como se pode ver, os compostos monoéster Ib e os compostos diãcidos Ic , obtêm-se, facilmente, a partir dos precursores diéster Ia.

Exemplos adicionais de compostos de formula geral (Ib) e (Ic) que se preparam por meio dos métodos referidos aqui, mostram-se nos Quadros 1, 2 e 3. Subentende-se que estão incluídos os análogos Ia correspondentes.

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QUADRO

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Quadro 1 (continuação)

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Compostos adicionais de formula geral_Ic

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III. Teste Biológico

Exemplo 54

Teste e avaliação de compostos contra o vírus Herpes

A. Ensaio de redução da placa

Cultivaram-se estirpes de vírus de herpes simples (VHS) e titularam-se à temperatura de 37°C em células vero (células renais do macaco verde africano) e utilizaram-se como virus de tra_ balho antes da décima passagem.

Cultivaram-se as células e mantiveram-se em Earlés Mi nimum Essential Médium (EMEM), Gibco Laboratories, suplementado com 0,75% de bicarbonato de sódio, 2mM de 1-glutamina, Pen-estrept. e 5-10%, de soro fetal de vitela.

titulo das estirpes (VHS) determina-se por meio de um método de titulação da placa (Rodizman e Roane, Virolog/, 15 : 75-79 , 1 961 ). Semeiam-se as células em 24 placas de petri de cuj_ turas de tecido e utilizam-se para ensaios quando em monocamada de aproximadamente 75%. Inoculam-se 0,1 ml de volumes de diluições logarítmicas das estirpes dos vírus, em cada grupo de trés semeji teiras, e absorvem-se durante 1 hora, com agitação intermitente. Depois, elimina-se o inoculado e adiciona-se 1 ml de 5-10% de EMEN contendo, 0,3% de Imunoglobulina de soro humano. ApÓs um período de incubação de 48 horas, a temperatura de 37°C, numa atmosfera de 5% de C0₂, elimina-se a camada superficial do meio e coram-se as células com corante de Giemsa. Conta-se o numero de placas , faz-se a média dos grupos de tres sementeiras e calcula-se o numero de unidades por ml que formam as placas.

Testam-se os compostos, no que respeita à actividade con_ tra as estirpes virais do herpes simples, utilizando-se um lote de soluções de cada composto, preparadas de fresco. Preparam-se diluições apropriadas de cada composto em EMEM a 10%, antes, da utilização. Determina-se a eficácia antiviral de cada composto utilizando-se o ensaio de redução de placa, descrito antes. Em resumo, inoculam-se 24 placas de cultura do tecido com uma monocamada celular de, aproximadamente, 75%, com cerca de 50 placas formando unidades de VHS por 0,1 ml , e o vírus é absorvido duraji te 1 hora, com agitação intermitente. ApÕs eliminação do inoculado, adiciona-se ãs triplas sementeiras, 1 ml de EMEM a 10% co£ tendo diluições duplas do medicamento apropriado. As placas em triplicado não recebem medicamento e utilizam-se como controlo do vírus. Após um período de incubação de 48 horas, a temperatura de 37°C, numa atmosfera de C0₂ a 5%, elimina-se a camada superficial do meio, coram-se as células como se descreveu antes e contam-se as placas. Faz-se a média das contagens das placas em triplicado e calcula-se o numero de placas em presença em cada diluição medicamentosa.

Determina-se por meio de a potência antiviral do me dicamento, a concentração medicamentosa necessária para reduzir o número de placas a 50% das de culturas virais de controlo (Dlgg).

B. Ensaio Co1orimétrico

Para a primeira sondagem, utiliza-se um ensaio colorimetrico (McLaren , C., et al., Antiviral Research, 3:323, 1983) empregando células vero de crescimento rápido. Em resumo, adici£ nam-se diluições virais, células e compostos dentro de 96 placas

de cultura tecidular, simultaneamente, utilizando-se as células os vírus e o meio, descritas antes. ApÕs 48 horas de incubação, ã temperatura de 37°C, sob atmosfera de COg a 5%, elimina-se a camada superficial do meio e coram-se as células com uma solução vermelha neutra a 0,04%. ApÕs 30 minutos de incubação, a temperatura de 37°C, lavam-se as células coradas e eluíu-se o corante com 0,05M de monofosfato de sódio em 47% de etanol e determina-se

D. 0. num comprimento de onda de 540 nm.

A dose inibitória de 50% (DI₅₀), para cada medicamento , determina-se por meio da análise de regressão linear.

Exemplo 55

Teste e avaliação de compostos contra o citomegalovírus humano

Cultivou-se a estirpe AD169 do citomegalovírus humano (CMVH) e titulou-se ã temperatura de 37°C em células pulmonares (diplóides) embri onari as, humanas, MRC-5, e utilizou-se para o e_n saio anti yi ral.

Testam-se os compostos pela actividade contra o CMVH, utilizando-se o processo do ensaio de redução da placa, descrita antes .

Exemplo 56

Teste e avaliação dos compostos contra os retrovírus muri nos

Avaliaram-se os compostos pela actividade antiviral coji tra estirpes de vírus de leucemia de murina (VLMU) utilizando-se a placa de ensaio UV-XC (Rowe, et al., Virology, 42:1136 ,

-5 6- / >

1970).

Cultivaram-se as estirpes VLMU em células de ratos do cam po (SC-1) e utilizaram-se para testes antivirais, utilizando-se a placa de ensaio UV-XC. Em resumo, cultivam-se células SC-1, em monocamadas, em 4 placas de cultura tecidular e inoculam-se com, aproximadamente, 50-100 placas formando unidades de VLMU, em 0,5ml de EMEM a 5% contendo 20 /ig/ml DEAE/dextrano. Após 1 hora de absorção, elimina-se o inoculado e adicionam-se 5 ml de EMEM a 5% contendo triplas diluições do medicamento apropriado. Após cinco dias, irradiam-se as culturas com uma lâmpada de ultravioletas e adicionam-se, células de sarcoma de ratos XC, as culturas. ApÕs 3 a 4 dias da irradiação ultravioleta, coram-se as culturas celulares com corante de Giemsa e contam-se as placas. A actividade antiviral expressa-se em termos de redução do número médio de placas UV-XC, contadas no medicamento tratado, das culturas infectadas por vírus, comparadas com o número médio de placas contadas, não tratadas, das culturas infectadas por vírus, de contro^ 1 o.

Alguns dados representativos do teste antiviral estão indicados no Quadro IV.

Quadro 4

Resultados do teste antiviral de alguns compotos

	representativos de formula geral
Coloração	Redução da placa	CMVH	VLMu
	Compostos de VHS-1	VHS-2	VHS-1	VHS-2
	referênci a
	Aci clovi r	0,5	1,0	0,3	1,5		N.T
- ·	9-(l ,3-Di hidroxi - p rop o xi metil) guani na					1,2
	31 - Azi do-3 1 -deoxi ti mi di na	N.T.	N.T.	N.T.	N.T.		0,0001
	(S)-9-(3-Hi dro xi-2-fosfonome toxi)propi1ade nina	15,1	>25	13,8	35,8	0,13	2,0
	Compostos de Formula geral	I
	Ex.7	<0,6	N.T.	0,1	0,36	<0,08	0,0009
	Ex. 8	12	8	4,8	5,1	0,23	0,56
-A	Ex. 9	25	30,0	9,8	21 ,6		2,1
	Ex. 15	8,7	10,4	3,0	3,3
	Ex. 22					6,0	0,04
	Ex. 34					<0,032
	Ex. 45	1,5	3,8	1 ,6	1 ,2		0,05
	Ex. 46			9,7	9,9
	Ex. 47			74,9	34,8		1 ,72

-5 8β₌Ι₌Ι₌Υ₌ΐ₌Ο=Ι=£=Μ=5₌£=1

1. - Processo para a preparação de compostos de fórmula geral

B

I al q-.

I

R,-C-a1q_?-Q ¹ I ^alt<3 t

I

I

R₉-CH ^c I °=P-°^R3 or₄ (I) na qual

B representa uma base purínica ou pirimidínica escolhida entre as bases adenina, xantina, hipoxantina, guanina , 8-bromoguanina, 8-cloroguanina, 8-aminoguanina, 8-hidrazinoguanina, 8-hidroxiguanina, 8-meti1guanina, 8-tioguani na, 2-ami nopuri na, 2,6-di ami nopuri na, ci tosi na, 5 - et i 1_ citosina , 5-meti1citona, timina, uracilo, 5-bromouracilo, 5-i oduraci 1 o, 5-eti 1 uraci 1 o , 5-propi 1 uraci 1 o , 5-viniJ_ uracilo e 5-bromovini1uraci1 o;

alqp alq₂ e alq₃ representam, cada um, independentemente, uma ligação química ou um grupo alquileno com a condição de o símbolo alq₂ não representar uma ligação química quando o símbolo B representa a base adenina e o símbolo alq-j representa um grupo metileno;

-59Q representa um átomo de hidrogénio ou um grupo hidroxi com a condição de o símbolo alq^ náo representar um gru po -C^Hg quando B representa a base adenina e Q represeji ta um átomo de hidrogénio;

R-j e R^ representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C^_₄; e

Rg e R^ representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C^_g, fenilo ou fenil-alquileno C-j-C^;

dos sais, dos zwitteriões (sais internos) e/ou dos produtos de solvatação correspondentes, caracterizado pelo facto:

a) Para a preparação de compostos de formula geral I na qual o símbolo Q representa um átomo de hidrogénio e o símbolo alq^ representa uma ligação química

i) de se alquilar uma base purinica ou pirimidínica sob forma aniónica com um composto intermédio de formula geral

X alq,

I ¹

R,-C-H ¹ I alq.

I ³ 0

I r₉-c-h ² I

0= P-ORI ³ 0R₄

CII)

Χ

-6 Οna qual

X representa um radical orgânico sintético e eliminavel como, por exemplo, um átomo de bromo, iodo ou cloro ou um grupo tosilato, mesilato, triflato ou similares, e

alq·], alq^, alq^, R-j , R^, R^e R^ tem os significados de finidos antes, para se obter um composto correspondente de formula geral

B

I alq-.

I ¹

R,-C-H

I alq_?

I

I r₂-ç-h

0= P-OR,

I ^{3 0R}4 (Ia) na qual

B, alq-], alq^, R-j , R^, R^ e R^ têm o significado definido antes, e ii) de se converter um composto de formula geral Ia, citada antes, em um composto de fórmula geral ί

Β

I al q,

I ιη-c-H al q ο

I ^J

Ο !

r₉-c-h ² I

0= P-OR

I

OH (Ib) na qual

B, a 1 q-j , alqj, R-j , R₂ e R₃ tem o significado definido an. tes, mediante uma hidrólise acida ou básica na presença de um catalisador, ou em um composto de fórmula geral

B

I alq,

I

R.-C-H ¹ I alq₃

I) r₉-c-h ² I

0= P-OH

OH

Ic alq₃, R₁ e R₂ têm o significado definido an-62-

na qual mediante tratamento com brometo de trimeti1 si 1i1 o em excesso, evaporação até ã secura e tratamento do resíduo resultante com agua;

ou

b) para a preparação de compostos de fórmula geral I em que o símbolo Q representa um grupo hidroxi

i) de se proteger um grupo reactivo como, por exemplo, o grupo amino de uma base tal como a adenina ou a guanina e um grupo hidroxi terminal do composto inicial de fõrm£ la geral

B

I alq,

I

R.-C - alq?-0H ¹ I ^c a 1 q _q

I ^J

OH (V) na qual

B, a 1 q-], a 1 q, alq₃ e R^ têm o significado definido antes com grupos protectores orgânicos sintéticos que possuem as condi_ ções estereoquimicas e as caracteristicas electrõnicas apropriadas para a selectividade necessária na capacidade de ligação, pa_ ra se obter um composto intermédio diprotegido de formula geral

-63 -/ i

/

PG-B

I alq,

I ^r

R-i ~C - alq₉-OPG ¹ I ^à alqi ¹⁵ (IV)

OH na qual

PG representa um grupo protector sintético orgânico, e alqp alq^, alq^ e R-| têm o significado definido antes ii) de se converter primeiro o ultimo grupo hidroxi em um anião oxi, mediante tratamento de um composto de formula geral IV citada antes com um hidreto de metal alcalino e de se alquilar depois com um grupo eliminãvel derivado de um composto intermédio de formula geral

R₉ 0

Γ x-ch-p-or₃

0R₄ (VI) na qual

X, R₂, Rg e R^ tem o significado definido antes, para se obter um composto intermédio de fórmula geral PG-B

I ^a]^ql

Rj-C-a1q g-OPG ^a?3 0

Rg-CH

0= P-ORo

I ³

Claims (27)

1. (III)

   -6 4-/ l I k na qual

   PG, B, a 1 q _} alq^, alq^, Rp R₂, Rg e R^ tem o significado definido antes, iii) de se eliminar os grupos protectores de um composto intermédio de formula geral III citada antes para se obter um composto de formula geral Ia citada antes, e iiii) de se converter um composto de formula geral Ia ci. tada antes em um composto de formula geral Ib ou em um composto de fórmula geral Ic, citadas antes, utilizando a técnica descrita na fase a)ii) .
2. 2. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de formula geral I na qual B representa uma base pjj rínica, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
3. 3. - Processo de acordo com a rei yi ndi cação 2, caracterizado pe. lo facto de se utilizar como uma base purínica a guanina.
4. 4. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual B representa uma base pirimidínica, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
5. 5. - Processo de acordo com a reivindicação 2, para a preparação de compostos de formula geral I na qual Rp R₂ e Q representam , cada um, um ãtomo de hidrogénio, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
6. 6. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação

   -65- / /

   de compostos de fórmula geral I na qual Rg e representam, cada um, um ãtomo de hidrogénio, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
7. 7. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual um dos símbolos Rg e R^ representam um ãtomo de hidrogénio e o outro representa um grupo alquilo C -j _ θ, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
8. 8. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 9-(3-hidroxi-2-fosfonometoxipropi1)-guanina, caracterizado p£ lo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substi tuidos.
9. 9. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 9-/2-(fosfonometoxi)-eti ij-guanina, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos .
10. 10. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 9-/3-(fosfonometoxi)-propi//-guanina, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos .
11. 11. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 9-/4-(fosfonometoxi)-buti l/-guanina, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos
12. 12. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 8-bromo-9-/2-(fosfonometoxi )-eti lj-guani na, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituidos.
13. 13. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 1-^-(fosfonometoxi)-buti l_7-timina , caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente sub£ ti tuTdos.
14. 14. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 9-^Ί -meti 1-2-(fosfonometoxi)-eti lj-guanina, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente subs_ ti tuidos .
15. 15. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação ca 9-^/2-( fosfonometoxi)-1-propi ij^-guani na , caracterizado pelo fac to de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
16. 16. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 9-^2-hi droxi meti 1 -3-(fosfonometoxi)-propijZ-guani na , caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais corresponderi

    Λ temente substituídos.
17. 17. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 9-/2-hi droxi meti 1-3-(fosfonometoxi)-propil/T-adem’na, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
18. 18. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 8-metil-9-/2-(fosfonometoxi )-etil_7-guanina, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente subs^ ti tuidos.

    -67-/
19. 19. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 9-£4-hidroxi-3-(fosfonometoxi)-buti Ij^-guani na , caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondente mente substituídos.
20. 20. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 9-/4-hidroxi-3-(fosfonometoxi)-1-buti iy~adenina, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais corresponder^ temente substituídos.
21. 21. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 9-/*2-monoeti 1 fosf onometoxi)-eti Ty^-guani na , caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substi tuídos.
22. 22. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 9-^2-(monometi 1 f os fonometoxi)-eti iy-guani na , caracteriza^ do pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
23. 23. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a prepara^ ção da 9-/.2-(mono-propi 1 n .-fosfonometoxi)-eti l^J-guani na , caracte rizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais corresponder^ temente substituídos.
24. 24. - Processo de acordo com a reivindicação 1 , para a preparação da 9y 2-(mono-i sopropi 1 fosfonometoxi)-eti l_/-guani na , caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondeji temente substituídos.
25. 25. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 9η/2-(1-fosfono-1-etoxi)-eti]7-guanina, caracterizado pe- lo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente subs ti tuí dos .
26. 26. - Processo para a preparação de composições farmacêuticas apropriadas para o tratamento de doenças provocadas por vírus , caracterizado pelo facto de se misturar uma quantidade efectiva de um um composto de formula geral I, como ingrediente activo , preparado pelo processo de acordo com a reivindicação 1, com um veículo aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.
27. 27. - Processo de acordo com a reivindicação 26, caracterizado pelo facto de se utilizar como ingrediente activo antiviral a 9-/~2-( fosf onometoxi) -eti 17-guani na.

    Lisboa, 18 de Novembro de 1987

    O Agente Oficial da Propriedade Industrial

    RESUMO

    Processo para a preparação de derivados fosfonometoxialquilénicos de bases purínicas e pirimidínicas e de composições farmacêuticas que os contêm

    Descreve-se um processo para a preparação de derivados fosfonometoxialquilénicos de bases purínicas e pirimidínicas de fórmula geral

    B i

    alq,

    I ^x

    R₁-Ç-alq₂-Q alq₃

    I

    R--CH t

    0=P-0R₉ i ^J

    OR. I que consiste: a) para a preparação de compostos de fórmula geral

    I na qual o símbolo Q representa um átomo de hidrogénio e o símbolo alq₂ representa uma ligação química (i) em alquilar uma base purínica ou pirimidínica sob forma iónica com um composto intermédio de fórmula geral

    X alq₁

    R -C-H t

    alc_.

    I ^R2-/^H

    0- P-OR₃ ór₄ para se obter um composto correspondente de fórmula geral

    B

    I alq.

    I

    R -C-H

    1 ) alq.

    I i

    R--C-H ² I

    0= P-OR..

    I Ia ^0R4 e (ii) em converter um composto de fórmula geral Ia, citada antes, em um composto de fórmula geral

    B

    alq. i R -C-H alq₃ 1 0 | 0= P-OR-. 1 Ib OH mediante uma hidrólise ácida ou básica, na presença de um catali-

    sador, ou em um composto de fórmula geral

    B

    I alq.

    i

    R.-C-H ¹ i alq₃

    Ò

    R₂-c-H i

    0= P-OH ) Ic

    OH mediante tratamento com brometo de trimetilsililo em excesso, evaporação até à secura e tratamento do resíduo resultante com água;

    ou b) para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual o símbolo Q representa um grupo hidroxi, (i) em proteger um grupo reactivo como, por exemplo, o grupo amino de uma base tal como a adenina ou a guanina e um grupo hidroxi terminal do composto inicial de fórmula geral

    B

    R.- C -alq^-OH

    1 i 2 alq₃

    OH com grupos protectores orgânicos sintéticos que possuem as condições estereoquímicas e as características electrónicas apropriadas para a selectividade necessária na capacidade de ligação, para se obter um composto intermédio diprotegido de fórmula geral

    PG-B ^alql

    R.-C - alq_-OPG

    1 i £ aiq₃

    OH

    IV (ii) em converter primeiro o último grupo hidroxi em um anião oxi, mediante tratamento de um composto de fórmula geral IV, citada antes, com um hidreto de metal alcalino e em alquilar depois com um grupo eliminavel derivado de um composto intermédio de fórmula geral

    R_n 0

    LI 1

    X-CH-P-OR₃ para se obter um composto intermédio de fórmula geral

    PG-B alq-L

    R^- C - alq2^_0PG alq₃