PT101067A

PT101067A - Pirazoles de rapamicina e processo para a sua preparacao

Info

Publication number: PT101067A
Application number: PT101067A
Authority: PT
Inventors: Amedeo Arturo Failli; Robert John Steffan
Original assignee: American Home Prod
Priority date: 1991-11-18
Filing date: 1992-11-17
Publication date: 1994-02-28
Also published as: WO1993010122A1; US5164399A; AU3141593A

Description

X

Fundamento do Invento

Este invento diz respeito a pirazoles de rapamicina e seus intermediários e a um método para a sua utilização no tratamento da rejeição à transplantação, doença do hospedeiro vs. enxerto, doenças auto-imunes, doenças de inflamação, tumores e infecções fúngicas. A rapamicina é um antibiótico de trieno macrocíclico produzido por Streptomyces hygroscopicus. que se verificou ter actividade antifúngica, particularmente contra Candida albicans. quer in vitro quer in vivo [C. Vezina et al., J. Antibiot. 28, 721 (1975); S. N. Seghal et al., J. Antibiot. 28, 727 (1975); H. A. Baker et al., J. Antibiot. 31, 539 (1978); U. S. Patent 3 929 992; e U. S. Patent 3 993 749]. A rapamicina isolada (U. S. Patent 4 885 171) ou em combinação com picibanil (U. S. Patent 4 401 653) tem mostrado ter actividade antitumoral. R. Martel et al. [Can. J. Physiol. Pharmacol. 55, 48 (1977)] revelaram que a rapamicina é eficaz no modelo da encefalomielite alérgica experimental, um modelo para a esclerose múltipla; no modelo de artrite adjuvante, um modelo para a artrite reumatóide; e inibia eficazmente a formação de anticorpos do tipo IgE.

Os efeitos imunossupressivos da rapamicina foram revelados em FASEB 3, 3411 (1989). A capacidade da rapamicina prolongar o tempo de sobrevivência de órgãos enxertados em roedores histo-incompatíveis foi revelada por Morris [Med. Sei. Res., 17:877 (1989)]. Ciclosporina A e FK-506, outras moléculas macrocíclicas, também mostraram ser eficazes como agentes imunossupressivos e, por conseguinte, são úteis na prevenção da , >> ; X -7 3, 5256

rejeição a transplante [FASEB 3, 3411 (1989); FASEB (1989); e R. Y. Calne et al.f Lancet 1183 (1978)].

Os derivados mono e diacetilados da rapamicina (esteri-ficada nas posições 28 e 43) mostraram ser úteis como agentes antifúngicos (U. S. Patent 4 316 885) e são utilizados para se fazerem pró-drogas de rapamicina solúveis em água (U. s. Patent 4 650 803). Recentemente, a convenção da numeração para a rapamicina foi mudada; por esta razão, de acordo com a numencla-tura do Chemical Abstracts, os ésteres descritos acima situam-se nas posições 31 e 42.

Descrição do Invento

Este invento proporciona derivados de rapamicina, que são úteis como agentes imunossupressivos, anti-inflamatórios, antitumorais e antifúngicos, que têm a estrutura

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em que 2 representa

H PH 0 ou II ; e c R1 representa hidrogénio, alquilo de 1 até 6 átomos de carbono ou arilalquilo de 7 até 10 átomos de carbono, com a condição de que 2 1 quando R está presente, R está ausente; o R representa hidrogénio, alquilo de 1 até 6 átomos de carbono ou arilalquilo de 7 até 10 átomos de carbono, com a condição de que 1 2 quando R está presente, R está ausente; as linhas a tracejado no anel de pirazole representam ligações duplas entre as posições 31 e 32 e entre as posições 33 e 53 Ί quando R está presente e ligações duplas entre as posições 31 e 2 52 e entre as posições 32 e 33 quando R está presente; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. A porção arilo pode ser substitída conforme definido acima. Dos compostos, os membros preferidos são aqueles nos quais Z representa

H

Ê preferido que a porção arilo do substituinte arilalquilo ê um grupo fenilo que é facultativamente mono-, di- ou trissubstituído com um substituinte seleccionado de entre o grupo constituído por alquilo de 1 até 6 átomos de carbono, alcoxi de 1 até 6 átomos de carbono, hidroxi, ciano, halo, nitro, carbalcoxi de 2 até 7 átomos de carbono, trifluorometilo, amino e carboxi. 6

Os sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser formados a partir de catiões inorgânicos tais como sódio, potássio e semelhantes; mono-, di- e trialquilaminas de 1 até 6 átomos de carbono por grupo alquilo e mono-, di- e tri-hidroxialquilaminas de l até 5 átomos de carbono por grupo alquilo; e ácidos orgânicos, tais como ácido acético, láctico, cítrico, tartárico, succínico, maleico, malónico, glucónico e semelhantes.

Este invento também proporciona processos para a preparação de pirazoles de rapamicina e intermediários. Os pirazoles de fórmula I, conforme definida anteriormente, são preparados por uma das seguintes reacções: a) reacção de 31-oxo-rapamicina com hidrazina para dar um composto de fórmula I, conforme definido anteriormente, onde Z representa

OH 1 2 e R ou R representa hidrogénio; b) reacção de um composto de fórmula I, conforme . 1 2 definido anteriormente, em que R ou R representa hidrogénio, . 3 3

com um agente de alquilação que contém o grupo R , onde R 12 . . representa R ou R conforme definidos anteriormente exceptuando o hidrogénio; c) oxidação de um composto de fórmula I, conforme definido anteriormente, em que Z representa

para dar um composto correspondente de fórmula I em que Z representa c = o, e, se desejado, após qualquer um dos passos a), b) ou c), o isolamento do composto de fórmula I na forma de um sal farmaceu-ticamente aceitável.

Os compostos deste invento podem ser preparados por oxidação de rapamicina com um agente de oxidação de periodinano [J. Org. Chem., 48.: 4155 (1983)], para selectivamente produzir ou 31-oxo-rapamicina ou 31,42-dioxo-rapamicina como se mostra a seguir.

RAPAMICINA

Ainda que a oxidação de um álcool secundário para uma cetona possa ser conseguida por numerosos métodos que têm sido descritos na literatura, a oxidação selectiva de quaisquer das funções hidroxi em macrociclos poli-hidroxilados não é de modo nenhum uma tarefa trivial, visto que em tais sistemas a reactivi-dade do grupo funcional não pode ser prontamente predita [R. B. Woodward et al., J. Am. Chem. Soc. 103, 3215 (1981)]. Para além

δ disso, a oxidação das funções hidroxilo da rapamicina foi particularmente difícil de alcançar, visto que esta lactona macrocí-clica polifuncional é sensível a muitas das condições e reagentes (particularmente os que contêm crómio) que são rotineiramente empregues para oxidar outros substratos menos sensíveis. Um método de fazer 42-oxo-rapamicina foi revelado na U. S. Patent 5 023 263 que ensina a oxidação selectiva da posição 42 da rapamicina.

Para os compostos deste invento em que a posição 42 não tenha sido oxidada, os compostos de pirazole deste invento podem ser feitos a partir da porção 31,33-B-dicarbonilo por tratamento com hidrazina, para se produzir uma mistura de tautõmeros conforme se mostra abaixo.

I h2nnh2

A substituição do anel de pirazole para se obterem compostos em que R ou R é diferente de hidrogénio, pode ser realizada pela reacção da mistura de parcelas de piorazole tautomérico com um agente de alquilação, tal como um haleto de alquilo na presença de um eliminador de ácido, tal como trietil-amina ou carbonato de potássio sólido, para se obter uma mistura de regioisómeros que podem ser separados por métodos convencionais, tais como cromatografia líquida de alta eficiência preparativa [ver por exemplo, Pyrazoles, Pyrazolines, Pyrazolidines, Indazoles and Condensed Rings, Wiley ed., 71 (1967)].

Para os compostos deste invento em que a posição 42 tenha sido oxidada para uma cetona, o anel de pirazole é feito fazendo reagir primeiro o 31,33-B-dicarbonilo com hidrazina produzindo a parcela de pirazole anteriormente descrita, seguido por oxidação do grupo 42-hidroxilo com periodinano Dess-Martin ou um agente de oxidação com base em ruténio. O passo de oxidação pode ser levado a cabo ou antes ou depois da alquilação do azoto de pirazole para compostos em que R ou R é diferente de hidrogénio.

Os reagentes usados para preparar os compostos do invento estão comercialmente disponíveis ou podem ser preparados por métodos que estão revelados na literatura. A actividade imunossupressiva foi avaliada num processo de teste farmacológico padrão in vitro para medir a proliferação de linfócitos (LAF) e em dois processos de teste farmacológico padrão in vivo. 0 primeiro processo in vivo foi um processo de teste de nódulo de linfa poplítea (PLN) que mediu o efeito dos compostos deste invento numa reacção de linfócito misto e o segundo processo in vivo avaliou o tempo de sobrevivência de um pequeno enxerto de pele (equivalente a uma beliscadura). 0 processo de proliferação de timócitos induzida por comitogéneo (LAF) foi utilizado como medida in vitro dos efeitos imunossupressivos dos compostos representativos. Em síntese, células do timo de ratos BALB/c normais são cultivadas durante 72 horas com PHA e IL-1 e pulsadas com timidina tritiada durante as últimas seis horas. As células são cultivadas com e sem várias concentrações de rapamicina, ciclosporina A ou composto de teste. As células são recolhidas e incorporadas; é determinada a radio-actividade. A inibição da linfoproliferação é avaliada na mudança percentual em contagens por minuto a partir de controlos 10 10

não tratados com a droga. Os resultados são expressos na forma de lC5Qf expressa em nM, ou na forma de inibição percentual a 100 nM.

Ocorre uma reacção de linfócito misto (MLR) quando células linfóides de animais geneticamente distintos são combinadas na cultura de tecido. Cada uma estimula a outra para suportar a transformação do blasto o que resulta numa síntese aumentada de DNA que pode ser quantificada pela incorporação de timidina tritiada. Uma vez que a estimulação de uma MLR é uma função da disparidade em antígenos de Histocompatibilidade Principal, um processo de teste do nódulo de linfa poplítea (PLN) in vivo correlaciona esteitamente o hospedeiro vs. doença do enxerto.

Resumidamente, células do baço irradiadas de dadores BALB/c são injectadas no pé da pata posterior direita de ratos C3H recipientes. A droga é dada diariamente, i.p. do Dia 0 até ao Dia 4. No Dia 3 e no Dia 4, é dada i.p., 2 vezes/dia, timidina irradiada. No Dia 5, os nódulos de linfa poplítea posteriores são removidos e dissolvidos e faz-se uma contagem da radioactividade. O PLN esquerdo correspondente serve como controlo para o PLN do pé da pata injectada. A supressão percentual é calculada utilizando os animais não tratados com droga como controlo alogénico. A rapamicina numa dose de 6 mg/kg, p.o., deu 86 % de supressão, enquanto a ciclosporina A na mesma dose deu 43 % de supressão. Os resultados são expressos pela seguinte razão: células de PLN-H de rato C3H de controlo - células de PLN-H de rato C3H tratado com rapamicina 3 3 células de PLN-H de rato C3H de controlo - células de PLN-H de rato C3H tratadas com composto de teste O segundo processo de teste in vivo é desenhado para se determinar o tempo de sobrevivência do pequeno enxerto de pele de dadores DBA/2 machos transplantados para recipientes BALB/c machos. O método é adaptado de Billingham R. E. e Medawar P. B., J. Exp. Biol. 28:385-402, (1951). Em síntese, um pequeno enxerto de pele do dador é enxertado no dorso do recipiente como um homo-enxerto e é utilizado um auto-enxerto como controlo na mesma região. Os recipientes são tratados quer com concentrações variadas de ciclosporina A como controlo de teste quer com o composto de teste, intraperitonealmente. Os recipientes não tratados servem como controlo de rejeição. 0 enxerto é acompanhado diariamente e são registadas observações até o enxerto ficar seco e formar uma crosta escurecida. Isto é considerado como o dia de rejeição. 0 tempo de sobrevivência de enxerto médio (número de dias ± D.P.) do grupo de tratamento com droga é comparado com o grupo de controlo. A tabela seguinte sumariza os resultados de um composto representativo deste invento (Exemplo 3) e dos dois intermediários de 31,33-B-dicarbonilo (Exemplos 1 e 2) nestes três proces- sos de teste padrão. TABELA 1* LAF PLN Enxerto de Pele Composto IC5 (nM) (íoo nM)+ (razão) (dias ± D.P.) Exemplo 1 . ++ 84,9 41 ** 9,16 ± 0,47 Exemplo 2 205,3++ 4 ** ** Exemplo 3 0,52 ** Rapamicina 94 11,66 ± 0,47 * ** + ++ Cálculo da razão PLN descrita supra. Não avaliado.

Percentagem de inibição a 100 nM.

Rapamicina tinha uma IC5Q de 0,2 nM como controlo para o Exemplo 1 e uma ic^ de 8,7 nM como controlo para o Exemplo 3. ύυ 12

)

J

Os resultados destes processos de teste farmacológico padrão demonstram a actividade imunossupressiva não só in vitro mas também in vivo dos pirazoles deste invento e seus intermediários. As razões positivas nos processos de teste de LAF e PLN indicam a supressão da proliferação das células T. Como os pequenos enxertos de pele transplantada são tipicamente rejeitados dentro de 6-7 dias sem a utilização de um agente imunossupres-sivo, o aumento do tempo de sobrevivência do enxerto de pele quando tratado com os compostos deste invento demonstra também a sua utilidade como agentes imunossupressivos.

I

Com base nos resultados destes processos de teste farmacológico padrão, os compostos deste invento são úteis no tratamento da rejeição a transplante, tal como transplantes de coração, rim, fígado, medula óssea e pele; doenças autoimunes, tais como lupus, artrite reumatóide, diabetes mellitus, miastenia gravis e esclerose múltipla; doenças de inflamação tais como psoríase, dermatite, eczema, seborreia e doença do intestino inflamatório. Devido aos compostos e seus intermediários serem estruturalmentye relacionados com a rapamicina e terem um perfil de actividade imunossupressiva semelhante â rapamicina, os compostos deste invento e seus intermediários são considerados como tendo actividades antitumor e antifungosa.

Os compostos deste invento podem ser administrados na forma pura ou com um agente de suporte farmacêutico a um mamífero com necessidade dele. O agente de suporte farmacêutico pode ser sólido ou líquido.

Um agente de suporte sólido pode incluir uma ou mais substâncias que também podem actuar como agentes de aromatização, lubrificantes, agentes de solubilização, agentes de suspensão, agentes de enchimento, agentes de deslizamento, agentes de

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compressão, agentes de ligação ou agentes de desintegração de comprimidos; pode também ser um material de encapsulamento. Em pós, o agente de suporte é um sólido finamente dividido que está misturado com um agente de suporte que tem as necessárias propriedades de compressão em proporções adequadas e compactado na forma e dimensões desejadas. Os pós e comprimidos contêm preferencialmente até 99 % de ingrediente activo. Os agentes de suporte sólidos adequados incluem, por exemplo, fosfato de cálcio, estearato de magnésio, talco, açúcares, lactose, dextrina amido, gelatina, celulose, metilcelulose, carboximetilcelulose de sódio, polivinilpirrolidona, ceras de baixa fusão e resinas permutadoras de iões.

Os agentes de suporte líquidos são utilizados na preparação de soluções, suspensões, emulsões, xaropes, elixires e composições pressurizadas. 0 ingrediente activo pode ser dissolvido ou suspenso num agente de suporte líquido farmaceuticamente aceitável tal como água, um solvente orgânico, uma mistura de ambos ou óleos ou gorduras farmaceuticamente aceitáveis. O agente de suporte líquido pode conter outros aditivos farmacêuticos adequados tais como solubilizantes, emulsionantes, agentes de tamponização, conservantes, adoçantes, agentes de aromatização, agentes de suspensão, agentes espessantes, corantes, reguladores da viscosidade, estabilizadores ou osmo-reguladores. Exemplos adequados de agentes de suporte líquidos para administração parentérica e oral incluem água (parcialmente contendo aditivos como os anteriores, e.g., derivados de celulose, preferencialmente solução de carboximetilcelulose de sódio), álcoois (que incluem álcoois mono-hídricos e álcoois poli-hídricos, e.g. glicois) e seus derivados, e óleos (e.g. óleo de coco fraccionado e óleo araquídico). Para administração parentérica, o agente de suporte pode ser também um éster oleoso tal como oleato de etilo e miristato de isopropilo. Os agentes de suporte líquidos 14 estéreis são úteis em composições na forma liquida estéreis para administração parentérica. 0 agente de suporte líquido para composições sob pressão pode ser um hidrocarboneto halogenado ou outro propulsionante farmaceuticamente aceitável.

As composições farmacêuticas líquidas que são soluções ou suspensões estéreis podem ser utilizadas para, por exemplo, injecção intramuscular, intraperitoneal ou subcutânea. As soluções estéreis podem também ser administradas intravenosamente. 0 composto também pode ser administrado oralmente quer em forma de composição líquida quer em forma de composição sólida.

Preferivelmente, a composição farmacêutica encontra-se em forma de dosagem unitária, e.g. em comprimidos ou cápsulas. Em tais formas, a composição está subdividida em doses unitárias que contêm quantidades apropriadas do ingrediente activo; as formas de dosagem unitárias podem ser composições embaladas, por exemplo, pós enpacotados, frascos, ampolas, seringas pré-cheias ou carteiras que contêm líquidos. A forma de dosagem unitária pode ser, por exemplo, a própria cápsula ou comprimido, ou pode ser o número apropriado de qualquer destas composições em forma de embalagem. A dosagem a ser utilizada no tratamento deve ser subjectivamente determinada pelo médico assistente.

Os compostos deste invento podem ser administrados rectalmente na forma de um supositório convencional. Para administração por inalação intranasal ou intrabrônquica, os compostos deste invento podem ser formulados numa solução aquosa ou parcialmente aquosa, que pode em seguida ser utilizada na forma de um aerossol. Os compostos deste invento podem também ser administrados transdermicamente pela utilização de um emplastro transdérmico que contém o composto activo e um agente de suporte que é inerte em relação ao composto activo, não é tóxico para a p+ele e permite a entrega do agente para absorção sistémica na corrente sanguínea via pele. O agente de suporte pode tomar qualquer número de formas, tais como cremes e pomadas, pastas, geles e dispositivos oclusivos. Os cremes e pomadas podem ser emulsões semi-sólidas ou líquidas viscosas quer do tipo óleo em água quer do tipo água em óleo. As pastas constituídas por pós absorvidos dispersos em petróleo ou petróleo hidrofílico que contém o ingrediente activo podem ser também adequadas. Uma variedade de dispositivos oclusivos pode ser utilizada para libertar o ingrediente activo na corrente sanguínea, tal como uma membrana semipermeável que cobre um reservatório que contém o agente activo com ou sem um agente de suporte ou uma matriz que contém o ingrediente activo. Outros dispositivos oclusivos são conhecidos na literatura.

Em aditamento, os compostos deste invento podem ser empregues na forma de uma solução, creme ou loção por meio de formulação com veículos farmaceuticamente aceitáveis que contêm 0,1-5 porcento, preferivelmente 2 %, de composto activo que pode ser administrado topicamente.

Os seguintes exemplos ilustram a preparação de compostos representativos deste invento. EXEMPLO 1 3l-Desoxi-31-oxo-rapamicina

Sob condições anidras, uma solução de rapamicina (2 g; 2,1 mmol) em 20 mL de diclorometano, é tratada com periodinano Dess-Martin (1,06 g; 2,5 mmol) numa porção. A mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas, diluída com 16

diclorometano e lavada cora bicarbonato de sódio saturado e água salgada. A purificação por cromatografia flash (sobre sílica Merck 60; eluente: hexano:acetato de etilo 1:1) produziu 0,650 g do composto mencionado em título na forma de um sólido amarelo pálido, o qual existe na forma de uma mistura de tautómeros, conforme determinado por HPLC (coluna: Altex Spherogel TSK 7,5 mm 60 cm; eluição gradiente: acetato de etilo em hexano 30 até 70 %; caudal: 5 mL/min). RMN (CDC13; 400 MHz): δ 1,642 e 1,655 (2s, 3H, CH3C=C); 1,79 - 1,82 (m, 3H, CH3C=C); 3,11 - 3,14 (m, 3H, CH30) ; 3,31 - 3,38 (m, 3H, C^O) ; 3,410 - 3,411 (2s, 3H, CH30); 13C RMN (CDC13; 400MHz): 210,8; 209,11; 207,95,; 207,61; 207,17; 206,25; 202,089; 98,69; 98,65; 98,59; 97,55; 73,84; EM (FAB de ião negativo; m/z) 911 (M ); 880 (M-H-OCH3) . Exemplo 2 31»42-Didesoxi-3l,42-dioxo-rapamicina 0 composto mencionado em título foi obtido como um produto menor na preparação de 31-desoxi-31-oxo-rapamicina do Exemplo 1. Foi também determinado ser uma mistura de tautómeros pelo método descrito no Exemplo 1. XH RMN (CDC13; 400 MHz): δ 1,64 (s, 3H, CH3C=C); 1,80 e 1,863 (2s, 3H, CH3C=C); 3,123 (s, 3H, CH30); 3,33 e 3,36 (s, 3H, CH30); 3,461 (s, 3H, CH30); EM (FAB de ião negativo; m/z) 909 (M ); 878 (M-H-OCH3) ; Análise Calculada para C51H75N013 + 3H20: N - 1,45; C - 63,53; H - 8,47;

XV C - 63,60; H - 7,90; N - 1,36.

Exemplo 3 33-Desoxo-31-desoxi-31,33-(l-hidrazinil-2-ilideno)rapa- micina

Uma solução de 31-desoxi-31-oxo-rapamicina do Exemplo 1 (0,50 g; 0,55 mmol) e hidrato de hidrazina a 85 % (0,033 g; 0,55 mmol) em 2 mL de metanol foi aquecida com agitação a 60 °C durante 2 horas. 0 solvente foi removido no vácuo e o resíduo foi purificado por cromatografia flash (sobre sílica Merck 60; eluente: acetato de etilo:hexano 2:1) para se obter 0,080 g do composto mencionado em título na forma de um sólido amarelo. ΧΗ RMN (CDC13; 400 MHz): δ 1,59 (s, 3H, CH3C=C); 1,62 (2s, 3H, CH3C=C); 3,11 - 3,25 (m, 3H, CH30); 3,36 -3,42 (m, 3H, CH30); 3,61 - 3,68 (2s, 3H, CH30); 13C RMN (CDC13; 400 MHz): 208; 197; 170; 169,9; 169,28; 98,9; 98,6; 98,4; 84,94; 84,36; EM (FAB de ião negativo; m/z) 911 (M) .

Lisboa, 17 de Novembro de 1992

J. PEREIRA DA CRUZ Agente Oficial da Propriedade Industrial RUA VICTOR CORDON, 10-A 3« 1200 LISBOA

Claims

REIVINDICAÇÕES lâ. Composto caracterizado por apresentar a fórmula

H \

C 0II ou c 9 e R1 representa hidrogénio, alquilo de 1 até 6 átomos de carbono ou arilalquilo de 7 até 10 átomos de carbono, com a condição de que 2 1 quando R está presente, R esta ausente; 2 R representa hidrogénio, alquilo de 1 ate 6 átomos de carbono ou arilalquilo de 7 até 10 átomos de carbono, com a condição de que 1 2 quando R está presente, R esta ausente; as linhas a tracejado no anel de pirazole representam ligações duplas entre as posições 31 e 32 e entre as posições 33 e 53 quando R1 está presente e ligações duplas entre as posições 31 e . _ 2 52 e entre as posiçoes 32 e 33 quando R esta presente; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. 2s. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracte-rizado por Z representar

ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
32. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracte-rizado por ser o 33-desoxo-31-desoxi-31,33-(l-hidrazinil-2-ilide-no)rapamicina ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
42. Composto caracterizado por ser o 31-desoxi-31-oxo--rapamicina ou um seu sal ou tautómero farmaceuticamente aceitável.
52. Composto caracterizado por ser o 31,42-didesoxi--31,42-dioxo-rapamicina ou um seu sal ou tautómero farmaceutica-ménte aceitável.
62. Processo para a preparação de um composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por compreender uma das seguintes reacções: 3

a) reacção de 31-oxo-rapamicina com hidrazina para dar um composto de fórmula I, conforme definido na reivindicação 1, onde Z representa H OH 1 2 e R ou R representa hidrogénio; b) reacção de um composto de fórmula I, conforme . . . . . 1 2 definido na reivindicação 1, em que R ou R representa hidrogé- . 3 3 mo, com um agente de alquilação que contem o grupo R , onde R 12 . · . representa R ou R conforme definidos na reivindicação 1 excep- 1 2 representa R ou R conj tuando o hidrogénio; ou conforme c) oxidação de um composto de fórmula I, definido na reivindicação 1, em que Z representa H. OH 'C para dar um composto correspondente de fórmula I em que Z representa C = 0, e,‘ se desejado, após qualquer um dos passos a), b) ou c), o isolamento do composto de fórmula I na forma de um sal farmaceu-ticamente aceitável. 7a. Composição farmacêutica, caracterizada por compreender um composto de fórmula I de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
82. Processo para a preparação de um composto de acordo com a reivindicação 4 ou reivindicação 5, caracterizado por compreender a oxidação de rapamicina usando um agente de oxidação de periodinano e, se desejado, o isolamento do composto de acordo com a reivindicação 4 ou reivindicação 5 na forma de um sal farmaceuticamente aceitável. Lisboa, 17 de Novembro de 1992

J. PEREIRA DA CRUZ Agente Oficial da Propriedade Industrial RUA VICTOR COROON, 10-A 3« 1200 USBOA