PL97491B1 - Sposob wytwarzania antybiotykow,zwlaszcza erytromycyny - Google Patents
Sposob wytwarzania antybiotykow,zwlaszcza erytromycyny Download PDFInfo
- Publication number
- PL97491B1 PL97491B1 PL18151075A PL18151075A PL97491B1 PL 97491 B1 PL97491 B1 PL 97491B1 PL 18151075 A PL18151075 A PL 18151075A PL 18151075 A PL18151075 A PL 18151075A PL 97491 B1 PL97491 B1 PL 97491B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- mycelium
- flour
- homogenate
- erythreus
- suspension
- Prior art date
Links
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 title claims description 7
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 title claims description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 5
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 claims description 57
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 44
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 claims description 36
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims description 30
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 29
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 29
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims description 27
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 26
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 26
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 20
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims description 19
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 19
- 229960003276 erythromycin Drugs 0.000 claims description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims description 13
- 239000002699 waste material Substances 0.000 claims description 13
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 claims description 12
- 235000004977 Brassica sinapistrum Nutrition 0.000 claims description 12
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 11
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 11
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 claims description 10
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 10
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 9
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 9
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 9
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 8
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 claims description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 6
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 claims description 5
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 5
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 5
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 claims description 4
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 claims description 3
- 238000005185 salting out Methods 0.000 claims description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 26
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 20
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 20
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 18
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 13
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 13
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 9
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 9
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 8
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 7
- 240000000759 Lepidium meyenii Species 0.000 description 7
- 235000000421 Lepidium meyenii Nutrition 0.000 description 7
- 235000012902 lepidium meyenii Nutrition 0.000 description 7
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 7
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 7
- 208000035404 Autolysis Diseases 0.000 description 6
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 description 6
- 235000008753 Papaver somniferum Nutrition 0.000 description 6
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 6
- 230000028043 self proteolysis Effects 0.000 description 6
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 5
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 4
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 4
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 3
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 3
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 3
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000228143 Penicillium Species 0.000 description 3
- 241000015473 Schizothorax griseus Species 0.000 description 3
- 241000187123 Streptomyces vinaceus Species 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000003625 amylolytic effect Effects 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 3
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 3
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 3
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 3
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 3
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 3
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- 240000001090 Papaver somniferum Species 0.000 description 2
- 241000218180 Papaveraceae Species 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 2
- 239000001166 ammonium sulphate Substances 0.000 description 2
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 2
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 2
- 235000021309 simple sugar Nutrition 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 235000020712 soy bean extract Nutrition 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 2
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 1
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 1
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 1
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- 208000005189 Embolism Diseases 0.000 description 1
- 229930006677 Erythromycin A Natural products 0.000 description 1
- MWFRKHPRXPSWNT-UHFFFAOYSA-N Erythromycin-C Natural products CC1C(OC2C(C(CC(C)O2)N(C)C)O)C(C)(O)CC(C)C(=O)C(C)C(O)C(O)(C)C(CC)OC(=O)C(C)C1OC1CC(C)(O)C(O)C(C)O1 MWFRKHPRXPSWNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000235527 Rhizopus Species 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 108090000787 Subtilisin Proteins 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 1
- 229940025131 amylases Drugs 0.000 description 1
- PERZMHJGZKHNGU-JGYWJTCASA-N bambermycin Chemical compound O([C@H]1[C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O1)CO[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@@H]1O[C@@H]([C@H]([C@H](O)[C@H]1NC(C)=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O1)C(=O)NC=1C(CCC=1O)=O)O)C)[C@H]1[C@@H](OP(O)(=O)OC[C@@H](OC\C=C(/C)CC\C=C\C(C)(C)CCC(=C)C\C=C(/C)CCC=C(C)C)C(O)=O)O[C@H](C(O)=O)[C@@](C)(O)[C@@H]1OC(N)=O PERZMHJGZKHNGU-JGYWJTCASA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 239000003630 growth substance Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M potassium hydroxide Substances [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 108010043535 protease S Proteins 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 239000010802 sludge Substances 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- WPLOVIFNBMNBPD-ATHMIXSHSA-N subtilin Chemical compound CC1SCC(NC2=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C(C)CC)C(=O)NC(=C)C(=O)NC(CCCCN)C(O)=O)CSC(C)C2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C1NC(=O)C(=C/C)/NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(NC(=O)C2NC(=O)CNC(=O)C3CCCN3C(=O)C(NC(=O)C3NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(=C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(N)CC=4C5=CC=CC=C5NC=4)CSC3)C(C)SC2)C(C)C)C(C)SC1)CC1=CC=CC=C1 WPLOVIFNBMNBPD-ATHMIXSHSA-N 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarza¬ nia antybiotyków, zwlaszcza erytromycyny, przy wykorzystaniu odpadowej grzybni promieniowców jako skladnika pozywek do hodowli szczepów.Znane jest stosowanie jako skladników podloza w hodowli drobnoustrojów komórek drozdzy oraz nienaruszonych grzybni promieniowców,, które do¬ dawane sa jako zródlo azotu, wegla i witamin. W opisie patentowym brytyjskim nr 1 139 589 podany jest sposób otrzymywania moenomycyny na podlo¬ zu fermentacyjnym zawierajacym odpadowe grzyb¬ nie promieniowców, Penicillium, Aspergillus, Rhi- zopus i drozdzy.W metodzie wedlug opisu patentowego czeskiego nr 142797 odpadowe grzybnie Penicillium i Strep- tomyces aureofaciens stosuje sie w podlozach do hodowli szczepów, wytwarzajacych L-lizyne. Inne opisy patentowe czeskie nr 131616 i nr 131617 po¬ daja sposób otrzymywania L-lizyny z hodowli drob¬ noustrojów, rozwijajacych sie na podlozu z dodat¬ kiem maki arachidowej poddanej dzialaniu proteaz, zawartych w nienaruszonej grzybni Penicillium.W opisie patentowym polskim nr 64127 podany jest sposób wytwarzania nowych pozywek, zawie¬ rajacych drozdze, stanowiace produkt uboczny przy mikrobiologicznym odparafinowaniu frakcji ropy naftowej.W opisanych dotychczas metodach jako dodatek do podloza stosuje sie nienaruszone komórki drob- so noustrojów, nie poddawane zadnej obróbce wstep¬ nej, co utrudnia ich pelne wykorzystanie.Sposób wedlug wynalazku eliminuje powyzsze wady i rózni sie od uprzednio opisanych tym, ze z grzybni promieniowców uwalniane sa zawarte w komórkach enzymy hydrolityczne, a w szczegól¬ nosci proteolityczne i amylolityczne, które dziala¬ jac na bialka i weglowodany zawarte w tej grzy¬ bni, powoduja ich hydrolize do latwo przyswajal¬ nych przez drobnoustroje peptydów oraz/lub wol¬ nych aminokwasów i cukrów prostych.Wedlug wynalazku zawiesine wodna odpadowej grzybni promieniowców, w szczególnosci grzybni szczepu Streptomyces erythreus, otrzymanej np. z biosyntezy erytromycyny, poddaje sie rozbiciu komórek, korzystnie za pomoca dezintegratora ul¬ tradzwieków oraz/lub homogenizatora, otrzymany homogenat inkubuje sie w temperaturze 20—50°C korzystnie w temperaturze 30—35°C, przy wartosci pH = 7—11, korzystnie przy wartosci pH okolo 10, a otrzymany plynny autolizat ewentualnie pozba¬ wia sie reszty antybiotyku i ewentualnie suszy; lub z otrzjrmanego homogenatu po ewentualnym od¬ dzieleniu czesci stalych wysala sie enzymy, surowy preparat enzymatyczny wyodrebnia sie i ewentu¬ alnie suszy, dodaje sie do zawiesiny wodnej maki sojowej, rzepakowej lub innej, mieszanine inkubu¬ je sie w podanych wyzej warunkach temperatury i wartosci pH, a otrzymana trawiona make pozba¬ wia sie reszty antybiotyku oraz/lub suszy; albo tez 97 49197 491 3 4 homogenat bezposrednio dodaje sie do maki, mie¬ szanine ikubuje sie w podanych wyzej warunkach temperatury i wartosci pH, a otrzymana trawiona make pozbawia sie reszty antybiotyku oraz/lub su¬ szy; po czym otrzymany w ten sposób autolizat lub trawiona make dodaje sie do podloza do hodo¬ wli drobnoustrojów, zastepujac w czesci lub calko¬ wicie make sojowa, rzepakowa lub inna make, sto¬ sowana zwykle jako skladnik pozywek oraz pro¬ wadzi sie proces biosyntezy w warunkach konwen¬ cjonalnych.Przed zhomogenizowaniem odpadowa grzybnie zawiesza sie w wodzie w stosunku wagowym 1—5 czesci wody na 1 czesc wilgotnej grzybni.Wysolenie enzymów z homogenatu ewentualnie fJUzLJa" WUJJWjflft!''pScJ stalych prowadzi sie korzyst- lire yrWz^aoaa^aTLijp stalego siarczanu amonowego bo stezenia okolo 6|%.I "^-LbM^" ljjftwifi4nv maki w wodzie, korzystnie lkoto .'Ln(^TLffHTTrjlM^jr maki w wodzie, dodaje sie Itn^Wy^^repa^aT^enzymatyczny w ilosci 10—1000 j proteazy, korzystnie 100—500 j proteazy, na 1 ml zawiesiny. Make dodaje sie do homogenatu w ta¬ kiej ilosci, aby otrzymac 1—20% zawiesine, korzyst¬ nie okolo 10% zawiesine maki w homogenacie.Stosujac wedlug wynalazku w/w preparaty w podlozach do hodowli szczepu wytwarzajacego ery¬ tromycyne, uzyskuje sie zwiekszenie wydajnosci antybiotyku o okolo 20% w stosunku do wydaj¬ nosci, uzyskiwanych w hodowli na standardowym podlozu opisanym w opisie patentowym nr 59792.Grzybnia promieniowców jest bogatym zródlem wegla, azotu, substancji wzrostowych i enzymów.Wsród enzymów znaczna ilosc stanowia enzymy hydrolityczne, a w szczególnosci enzymy o aktyw¬ nosci proteolitycznej czyli proteazy. Dla przykladu podano w tablicy 1 aktywnosc proteaz i amylaz w grzybni rozbitej przy uzyciu dezintegratora ultra¬ dzwieków firmy MSE 100 W lub laboratoryjnego homogenizatora mechanicznego firmy Eppenbach Inc. Long Tsland, N.Y. USA.Tablica 1 Rodzaj grzybni S. erythreus S. linconensis S. vinaceus S. griseus Proteazy w j/ml homo- genizator 725 82 50 85 ultra¬ dzwieki 740 88 52 45 a-amylazy w mg maltozy (10') ml homo- geni- zator 3,0 1,4 0 0 ultra¬ dzwie¬ ki i 3,4 1,2 0 0 Optimum dzialania enzymów proteolitycznych S. erythreus z grzybni znajduje sie przy wartosci pH okolo 10 i jest identyczne z optimum wartosci pH proteazy S. erythreus, wydzielanej do podloza.Proteazy te wykazuja równiez znaczna stabilnosc w temperaturach do 50°C w czasie ich izolowani* (Acta MiCrobiol. Pol., Ser. B. 1973,5, 21—27), co umozliwia ich praktyczne wykorzystanie. W przy-. gotowaniu homogenatów grzybni promieniowców sposobem wedlug wynalazku szczególnie przydatna jest grzybnia szczepu S. erythreus, wytwarzajacego erytromycyne, z uwagi na duza aktywnosc zawar- tych w nich proteaz. Enzymy proteolityczne hydro- lizuja zawarte w grzybni bialka do peptydów i wolnych aminokwasów. Tak uzyskany autolizat stosuje sie jako skladnik pozywki, zastepujacy inne substancje bialkowe (jak np. make sojowa) w ho¬ dowli szczepów wytwarzajacych antybiotyki, Auto¬ lizat dodaje sie w postaci plynnej zawiesiny, badz po wysuszeniu w postaci sproszkowanej. W tym celu grzybnie odpadowa zawiesza sie w takiej ilos¬ ci wody, aby uzyskac plynna mase, korzystnie w stosunku 100 g grzybni w 200 ml wody, po czyro pH doprowadza sie do wartosci 7—11, korzystnie okolo 10, przy uzyciu np. roztworu wodorotlenku sodowego.Zawisine grzybni poddaje sie rozbiciu ultra¬ dzwiekami badz w homogenizatorze mechanicznym w celu uwolnienia zawartych w grzybni bialek, aminokwasów i enzymów hydrolitycznych. Rozbi¬ cie duzych ilosci grzybni w skali technicznej mo¬ zna przeprowadzic przy uzyciu homogenizatora me¬ chanicznego pracujacego w sposób ciagly, np. za pomoca homogenizatora Dyno-Muhle KD5 firmy Willy A. Bachofen, Bazylea, Szwajcaria, lub cisnie¬ niowego, np. za pomoca homogenizatora firmy Manton-Gaulin 15 M 8TBA.Zhomogenizowana zawiesine rozbitej grzybni po¬ zostawia sie w temperaturze 20—50°C, korzystnie w temperaturze 30—35°C, przy umiarkowanym mieszaniu na okres 3—20 godzin w celu przepro- Vvradzenia enzymatycznej hydrolizy zawartych w homogenacie bialek do zwiazków prostszych.W tablicy 2 przedstawiono przyrost stezenia aminokwasów w czasie autolizy rozbitych grzybni róznych szczepów promieniowców.Tablica 2 Szczep S. erythreus S. linkonensis S. vinaceus S. griseus Aminokwasy w mg/ml grzybnia przed autoliza 3,04 3,00 2,35 0,17 ,00 grzybnia po autolizie 6,70 29,2 2,r5 2,46 ,70 Autolizat grzybni po inkubacji moze byc prze¬ chowywany w postaci plynnej z dodatkiem srodka konserwujacego, badz tez moze byc wysuszony w suszarce rozpylowej.Autolizaty stosuje sie do przygotowania podlóz do hodowli szczepów wytwarzajacych antybiotyki, zastepujac nimi czesciowo lub calkowicie takie skladniki, jak maka sojowa, maka arachidowa i inne. Homogenaty przygotowane z grzybni sa¬ czonych z uzyciem ziemi okrzemkowej sa w pelni przydatne jako dodatki do podlóz.Enzymy proteolityczne zawarte w rozbitej grzy¬ bni w postaci homogenatu stosuje sie równiez do 40 45 50 55 605 97 491 6 trawienia innych bialek, np. zawartych w mace sojowej, mace arachidowej, mace rzepakowej, ma¬ ce grochowej i innych. W róznego rodzaju makach poddanych trawieniu, wskutek dzialania enzymów proteolitycznych uwalniaja sie peptydy i wolne aminokwasy, jak równiez wskutek dzialania enzy¬ mów amylolitycznych wzrasta ilosc wolnych cu- krów, zwiekszajac w ten sposób przyswajalnosc podlóz przez rózne drobnoustroje. Wsród wolnych aminokwasów uwalniajacych sie z maki pod wply¬ wem enzymów proteolitycznych stwierdzono wy¬ stepowanie znacznej ilosci metioniny. Aminokwas ten odgrywa duza role zarówno przy biosyntezie erytromycyny, gdzie dostarcza grup metylowjich w reakcji przeksztalcania erytromycyny C do ery¬ tromycyny A, jak równiez w biosyntezie L-lizyny, gdzie odgrywa duza role regulatora procesu.W tablicy 3 przedstawiono przyrost wolnych aminokwasów, w szczególnosci metioniny, oraz prostych cukrów, uwalniajacych^ sie pod wplywem dzialania enzymów proteolitycznych i amylolitycz¬ nych, zawartych w homogenacie rozbitej grzybni Streptomyces erythreus, na poszczególne rodzaje mak trawionych.Tablica 3 Rodzaj maki Maka sojowa Maka rzepakowa Maka owsiana Maka arachidowa j Maka grochowa Aminokwasy w mg/ml maka nie- trawiona 0,88 0,60 0,0 0,59 0,94 maka po autolizie 21,0. 24,0 9,1 19,8 16,0 Metionina maka nie- trawiona 2 — — 46 — w mg/ml maka po autolizie . 150 - — 92 — Cukry w mg/ml | maka nie- trawiona 4,4 2,9 2,3 2,3 ,5 maka po autolizie 8,6 9,6 7,9 | ,6 9,6 Do proteolizy maki moga byc uzyte proteazy, zawarte w róznych gatunkach promieniowców, jak równiez proteazy z Bacillus subtilis, które znajdu¬ ja sie w handlu pod róznymi nazwami, jak np. maksatasa, subtilizyna. Jednakze najlepsze wyniki proteolizy uzyskuje sie stosujac rozbita grzybnie S. erythreus, co ilustruja wyniki przedstawione w tablicy 4.Tablica 4 Preparat enzymatyczny Homogenat grzybni S. erythreus Homogenat grzybni S. linkolnensis Homogenat grzybni S. vinaceus Homogenat grzybni • S. griseus Proteaza izolowana z B. subtilis 1000 j/ml Aminokwasy ogólem w mg/ml maka nie- trawiona 0,88 0,88 0,88 0,88 0,88 maka po proteolizie 21,00 12,50 8,92 ¦ 7,30 ¦ 6,85 Hydrolize maki przy uzyciu enzymów proteoli¬ tycznych, zawartych w rozbitej grzybni, przepro¬ wadza sie w ten sposób, ze sporzadza sie 10% za¬ wiesine odpowiedniej maki w swiezo przygotowa¬ nym homogenacie z grzybni promieniowca, np. S. erythreus, dodaje sie srodka konserwujacego, np. toluen w ilosci 0,1—0,5%, i inkubuje w tempera¬ turze 32°C w ciagu 3—20 godzin mieszajac.Poniewaz homogenat rozbitej grzybni zawiera antybiotyk pozostaly w grzybni, po dodaniu do pod- 40 45 loza moze on hamowac rozwój drobnoustroju, gdy hodowle prowadzi sie z uzyciem szczepu wrazli¬ wego na dany antybiotyk. W tym przypadku anty- biotyk, zawarty w autolizacie, neutralizuje sie zna¬ nymi metodami, np. erytromycyne rozklada sie przez hydrolize kwasna, dodajac do mieszaniny po zakonczeniu inkubacji kwas solny dó stezenia IN i ogrzewajac w temperaturze wrzenia w ciagu 1 godziny pod chlodnica zwrotna, a nastepnie mie¬ szanine oziebia i neutralizuje np. wodorotlenkiem sodowym, potasowym lub amonowym.Obecnosc antybiotyku w autolizacie moze nie wywierac efektu hamujacego, gdy w hodowli sto¬ suje sie szczep niewrazliwy na dzialanie okreslone¬ go antybiotyku, badz moze byc korzystna z uwagi na ochronne dzialanie antybiotyku, zapobiegajace zakazeniu obcymi drobnoustrojami. W przypadku hodowli szczepu S. erythreus na podlozu, zawiera¬ jacym autolizat, obecnosc antybiotyku nie przesz¬ kadza w rozwoju drobnoustroju wytwarzajacego erytromycyne.W podobny sposób przeprowadza sie hydrolize maki przy uzyciu surowego preparatu enzymatycz- 50 nego, wydzielonego z homogenatu grzybni. Prepa¬ rat ten otrzymuje sie w ten sposób, ze odmyta grzybnie promieniowca np. S. erythreus, rozbija sie wedlug metody, stosowanej do sporzadzenia homogenatu. Otrzymany homogenat odwirowuje 55 sie przy sile wirowania 23 000 X g i czesci stale odrzuca. Do roztworu po odwirowaniu dodaje sie techniczny siarczan amonowy dó'-stezenia 60%, po¬ zostawia na kilka godzin i wydzielony osad odwi¬ rowuje. Osad ten wysuszony w suszarce próznio¬ wo wej w temperaturze 40—50°C lub w suszarce roz- pylowej stanowi surowy preparat enzymatyczny.W celu przeprowadzenia hydrolizy enzymatycznej sporzadza sie 1 do 20%, korzystnie okolo 10%,'za¬ wiesiny maki w wodzie i dodaje sie preparat enzy- 65 matyczny w takiej ilosci, aby uzyskac aktywnosc£7 491 s proteazowa od 10 do 1000 j/ml, korzystnie 100 do 500 j/ml. Nastepnie mieszanine inkubuje sie w tem¬ peraturze 30—40°C w sposób podany powyzej. Za jednostke przyjeto te ilosc enzymu, która powo¬ duje zmiane ekstynkcji równa 0,01 w okreslonych warunkach reakcji (enzyn inkubowany z 2°/o roz¬ tworu kazeiny przy wartosci pH = 11, w tempera¬ turze 40°C w ciagu 40 minut, odczyt: ekstynkcji przy 280nm).W tablicy 5 przedstawione sa wyniki hydrolizy maki sojowej przy uzyciu surowego preparatu enzymatycznego S. erythreus w zaleznosci od cza¬ su inkubacji.Tablica 5 Preparat" enzymatyczny Homogenat grzybni S. erythreus roztwór surowe¬ go preparatu enzymatycznego J z grzybni S. erythreus Stezenie proteazy w j/ml 400 8,3 33,0 66,0 Zawartosc amino- \ i kwasów w mg/ml przy czasie inku¬ bacji godziny 3 godziny 120 godzin| 18,0 1,0 3,64 ,88 29,3 0,94 2,24 1 ,00 1 Wyniki, przedstawione w tablicy 5, wskazuja na mozliwosc skrócenia czasu inkubacji w przypadku trawienia maki surowym preparatem enzymatycz¬ nym.Sposób wedlug wynalazku wyjasniaja nastepu¬ jace^przyklady: Przyklad I. Przygotowanie autolizatu grzy¬ bni S. erythreus oraz zawiesiny trawionej ' maki sojowej.Do 250 g odpadowej grzybni pofermentacyjnej S. erythreus dodano 500 ml wody, doprowadzono pH do wartosci 10,5 przy uzyciu 1 N NaOH i za¬ wiesine homogenizowano w homogenizatorze labo¬ ratoryjnym w ciagu 20 minut. Efektywnosc rozbi¬ cia obserwowano w mikroskopie, przy czym po¬ winny byc widoczne ziarnistosci z rozbitej grzybni Homogenat grzybni zawieral 465 j proteazy/ml.Homogenat stosowano do przygotowania autoliza¬ tu z grzybni, to jest preparatu, zawierajacego glównie peptydy i aminokwasy, uwolnione z bia¬ lek grzybni, oraz do przygotowania trawionej ma¬ ki sojowej, to jest preparatu, zawierajacego glów¬ nie peptydy i aminokwasy, uwolnione zarówno z bialek grzybni, jak i z bialek maki. a. Przygotowanie autolizatu grzybni Homogenat rozlano w ilosci 200 ml do kolb Erlen- mayera o pojemnosci 500 ml i inkubowano w temperaturze 32°C w ciagu 20 godzin lekko mie¬ szajac. Ilosc aminokwasów wzrasta w czasie inku¬ bacji z 3,04 mg/ml do 6,70 mg/ml, a ilosc wolnej metioniny z 21 mcg/ral do 64 mcg/ml. Autolizat poddano wysuszeniu w suszarce rozpylowej, lub pozostawiono w postaci zawiesiny plynnej. b. Przygotowanie trawionej maki sojowej Sporzadzono zawiesine maki sojowej w homoge- s nacie w ilosci 5 g maki w 100 ml homogenatu oraz inkubowano ja w warunkach podanych w pkt. a Po inkubacji ilosc aminokwasów wzrasta z 3,92 mg/ml do 21 mg/ml, a ilosc metioniny z 94 mcg/ml do 150 mcg/ml. Zawiesine trawionej maki sojowej io poddano ewentualnie wysuszeniu w suszarce roz¬ pylowej.Przyklad II. Przygotowanie preparatu tra- wionej maki sojowej przy uzyciu homogenatu grzy¬ bni S. erythreus Homogenat z grzybni S. erythreus, uzyskany we¬ dlug przykladu I, zawierajacy 337 j proteazy/ml, stosowano da przygotowania preparatu trawionej ma.ki sojowej, Zawiesine maki-w homogenacie w proporcji 10 g maki na 100 ml homogenatu inku- bowano, jak w przykladzie I. W celu usuniecia antybiotyku, pozostalego w grzybni S. erythreus, do zawiesiny do inkubacji dodano 4 N HC1 w ilosci °/o objetosciowych w stosunku do homogenatu i ogrzewano pod chlodnica zwrotna w ciagu 1 go- dziny. Oziebiona zawiesine zobojetniono przy po¬ mocy stalego NaOH, a nastepnie wysuszono w su¬ szarce rozpylowej. Z 1 g maki sojowej uzyskano 1,2 g preparatu trawionego. Porównanie ilosci ami¬ nokwasów w preparacie trawionym i nietrawio- nym podano w tablicy 6.Tablica 6 Preparat Maka sojowa nietrawiona Maka sojowa trawiona Aminokwasy ogólem w mg/g 8,0 91,5 W tym metio¬ nina w mg/g 0,08 1,47 Przyklad III. Przygotowanie preparatu tra¬ wionej maki rzepakowej przy uzyciu homogenatu grzybni S. erythreus Homogenat z grzybni S. erythreus, uzyskany spo¬ sobem, opisan37m w przykladzie I, zawierajacy 548 j proteazy/ml stosowano do przygotowania pre¬ paratu trawionej maki rzepakowej. Zawiesine 10°/o maki w homogenacie inkubowano w ciagu 20 go¬ dzin w warunkach, opisanych w przykladzie I.Antybiotyk pozostaly w grzybni usunieto sposo¬ bem, opisanym w przykladzie II. Preparat wysu¬ szono w suszarce rozpylowej. Z 1 g maki rzepako¬ wej uzyskano 1,2 g preparatu trawionego. Porów¬ nanie ilosci aminokwasów w preparacie trawio¬ nym i nietrawionym podano w tablicy 7.Tablica 7 Preparat Maka rzepakowa nietrawiona Maka rzepakowa trawiona Aminokwasy ogólem w mg/g ,6 72,0 W tym metio¬ nina w mg/g 0,81 1,109 97 491 Przyklad IV. Otrzymywanie surowego prepa¬ ratu enzymatycznego z homogenatu S. erythreus Homogenat grzybni S. erythreus, uzyskany spo¬ sobem wedlug przykladu I, wirowano przy sile wirowania 23000 X g w ciagu 30 minut, czesci stale odrzucono, a z supernatantu wysolono enzy¬ my przez wysycenie siarczanem amonowym do stezenia 60%. Wytracony surowy enzym odwiro¬ wano po 18 godzinach przy 23000 X g w ciagu 30 minut i wysuszono w suszarce w temperaturze okolo 50°C. Preparat zawiera 28000 j proteaz wig Przyklad V. Przygotowanie preparatu tra¬ wionej maki sojowej przy uzyciu surowego prepa¬ ratu enzymatycznego z grzybni S. erythreus.Preparat enzymatyczny, otrzymany sposobem we¬ dlug przykladu IV, stosowano do otrzymania pre¬ paratu trawionej maki sojowej, dodajac go w ilosci 100 j proteazy na 1 ml 10°/o zawiesiny maki sojo¬ wej w wodzie, oraz doprowadzajac pH do wartosci ,5 przy uzyciu IN NaOH. Zawiesine inkubowano w ciagu 3 godzin w warunkach, podanych w przy¬ kladzie I, a nastepnie wysuszono w suszarce rozpy- lowej.Porównanie ilosci aminokwasów w preparacie maki trawionej i nierawionej podano w tablicy 8 Tablica 8 Preparat Maka sojowa Maka sojowa trawiona Aminokwasy ogólem w mg/g | 8,0 58,8 Przyklad VI. Przyrost suchej masy S. eryth¬ reus i biosynteza antybiotyku na podlozu rozpusz¬ czalnym z dodatkiem autolizatu z grzybni S. eryth¬ reus.Do rozpuszczalnego plynnego podloza, zawiera¬ jacego ekstrakt z maki sojowej, o skladzie: 3% wyciagu z maki sojowej; 5% glukozy; 0,3% (NH4)2S04; 0,5% NaCl, 0,6% CaCOs; 1% propanolu, i wody wodociagowej do 100% dodano w postaci plynnej autolizat, otrzymany wedlug przykladu I w ilosciach 7,5%, 15% lub 30% w stosunku do objetosci pozywki, a nastepnie zaszczepiono po¬ dloze hodowla S. erythreus. W 120 godzinie ho¬ dowli zaobserwowano zwiekszenie suchej masy grzybni i zwiekszenie biosyntezy antybiotyku w porównaniu z podlozem kontrolnym nie zawiera¬ jacym autolizatu, co wynika z tablicy 9.T ablica 9 Po 120 godzinach hodowli bez dodatku autolizatu po dodaniu autolizatu w ilosci: 7,5% % % Przyrost suchej masy grzybni w mg/ml 9,93 11.73 12,94 Stezenie ery¬ tromycyny w brzeczce fermentacyjnej 1540 j/ml 2040 j/ml 2180 j/ml 2560 j/ml Przyklad' VII. Zastosowanie preparatów* enzymatycznych grzybni S. erythreus w podlozu do biosyntezy erytromycyny.W standardowej plynnej pozywce dla produkcji erytromycyny, opisanej w opisie patentowym nr 59792 o skladzie: 3% maki sojowej, 2% skrobi, 4% glukozy, 0,5% NaCl, 0,0% CaC03, 0,9% alkoholu n-propylowego i wody wodociagowej do 100%: a) zastapiono 25% maki sojowej wysuszonym auto- lizatem grzybni E. erythreus, przygotowanym wedlug przykladu I, b) zastapiono calkowicie make sojowa suszonym preparatem trawionej maki sojowej przygoto- wanej wedlug przykladu I; c) uzupelniono standardowa pozywke plynnym autolizatem grzybni, uzyskanym . wedlug przy¬ kladu I, dodajac go w ilosci 20% w stosunku objetosciowym do ilosci pozywki na poczatku i w 48 h hodowli..We wszystkich wymienionych przypadkach tak wzbogaconego podloza zaszczepiono je hodowla S. erythreus, oznaczajac w brzeczce zawartosc ery¬ tromycyny po 144 godzinach fermentacji. Wyniki porównano z fermentacja prowadzona na podlozu, nie zawierajacym w/w preparatów w tym samym czasie.Wyniki przedstawiono w tablicy 10: Tablica 10 Wprowadzona zmiana podloza a) Zastapienie 25% maki sojowej wysu- soszynym autoliza¬ tem grzybni S. erythreus b) Zastapienie calko¬ wite maki sojowej preparatem maki trawionej z grzybni S. erythreus c) Uzupelnienie podlo¬ za plynnym autoli¬ zatem grzybni S. erythreus w O h fermentacji w 48 h fermentacji Wydajnosc biosyntezy erytromycyny w mcg/ml brzeczki podloze kontrolne 3730 3600 2640 3800 podloze wzbogacone 4050 4400 3730 4360 55 PL
Claims (6)
- Zastrzezenia patentowe 1. Sposób wytwarzania antybiotyków, zwlaszcza erytromycyny, przez wykorzystanie odpadowej 60 grzybni promieniowców do hodowli drobnoustro¬ jów i fermentacje w warunkach konwencjonalnych, znamienny tym, ze jako skladnik pozywki stosuje sie produkt, otrzymany z zawiesiny wodnej odpa¬ dowej grzybni promieniowców, w szczególnosci 65 grzybni Streptomyces erythreus z biosyntezy ery-11 97 491 12 tromycyny, w stosunku wagowym 1—5 czesci wo¬ dy na 1 czesc grzybni, przez rozbicie komórek, ko¬ rzystnie za pomoca dezintegratora ultradzwieków oraz/lub homogenizatora, inkubacje otrzymanego homogenatu w temperaturze 20—50°C, korzystnie w temperaturze 30—35CC, przy wartosci pH = 7—11, korzystnie przy wartosci pH okolo 10, i nastepne pozbawienie otrzymanego autolizatu reszty anty¬ biotyku oraz/lub suszenie, który to produkt doda¬ je do podloza do hodowli drobnoustrojów, zaste¬ pujac w czesci lub calkowicie make sojowa, rze¬ pakowa lub inna, stosowana zwykle jako skladnik pozywek w stosunku wagowym 5—100% w przeli¬ czeniu na sucha mase.
- 2. Sposób wytwarzania antybiotyków, zwlaszcza erytromycyny, przez wykorzystanie odpadowej grzybni promieniowców do hodowli drobnoustro¬ jów i fermentacji w warunkach konwencjonalnych, znamienny tym, ze jako skladnik pozywki stosuje sie produkt, otrzymany z zawiesiny wodnej odpa¬ dowej grzybni promieniowców, w szczególnosci grzybni Stroptomyces erythreus z biosyntezy ery¬ tromycyny, w stosunku wagowym 1—5 czesci wo¬ dy na 1 czesc grzybni, przez rozbicie komórek, ko¬ rzystnie za pomoca dezintegratora ultradzwieków oraz/lub homogenizatora, oddzielenie z otrzyma¬ nego homogenizatu czesci stalych, wysolenie enzy¬ mów i wyodrebnienie surowego preparatu "enzy¬ matycznego, ewentualne wysuszenie go, dodanie do zawiesiny wodnej maki sojowej, rzepakowej lub innej stosowanej zwykle jako skladnik pozywki, inkubacje mieszaniny w temperaturze 20—50°C, korzystnie w temperaturze 30—35°C, przy war¬ tosci pH 7—11, korzystnie przy wartosci pH okolo 10, nastepne pozbawienie otrzymanej trawionej ma¬ ki reszty antybiotyku oraz/lub suszenie, który to produkt dodaje sie do podloza do hodowli dro¬ bnoustrojów, zastepujac w czesci lub calkowicie make sojowa, rzepakowa lub inna w stosunku wa¬ gowym 5—100% w przeliczeniu na sucha mase.
- 3. Sposób wedlug zastrz. 2, znamienny tym, ze wysolenie enzymów prowadzi sie korzystnie przez 5 dodawanie stalego siarczanu amonowego do steze¬ nia okolo 60%.
- 4. Sposób wedlug zastrz. 2, znamienny tym, ze stosuje sie preparat enzymatyczny w ilosci 10—1000 j proteazy, korzystnie 100—500 j proteazy, na 1 ml 1—20% zawiesiny maki w wodzie, korzystnie oko¬ lo 10% zawiesiny maki w wodzie.
- 5. Sposób wytwarzania antybiotyków, zwlaszcza erytromycyny, przez wykorzystanie odpadowej grzybni promieniowców do hodowli drobnoustro¬ jów i fermentacje w warunkach konwencjonalnych, znamienny tym, ze jako skladnik pozywki stosuje sie produkt, otrzymany z zawiesiny wodnej odpa¬ dowej grzybni promieniowców, w szczególnosci grzybni Streptomyces erythreus z biosyntezy ery¬ tromycyny, w stosunku wagowym 1—5 czesci wo¬ dy na 1 czesc grzybni, przez rozbicie komórek, ko¬ rzystnie za pomoca dezintegratora ultradzwieków oraz/lub homogenizatora, dodanie otrzymanego ho¬ mogenatu do maki sojowej, rzepakowej lub innej, stosowanej zwykle jako skladnik pozywki, inku¬ bacje mieszaniny w temperaturze 20—50°C, korzyst¬ nie w temperaturze 30—35°C, przy wartosci pH = 7—11, korzystnie przy wartosci pH okolo 10, nastepne pozbawienie otrzymanej trawionej maki reszty antybiotyku oraz/lub suszenie, który to pro¬ dukt dodaje sie do podloza do hodowli drobno¬ ustrojów, zastepujac w czesci lub calkowicie make sojowa, rzepakowa lub inna w stosunku wagowym 5—100% w przeliczeniu na sucha mase.
- 6. Sposób wedlug zastrz. 5, znamienny tym, ze stosuje sie 1—20% zawiesine maki w homogenacie; korzystnie okolo 10% zawiesine maki w homoge- nacle. 25 30 OZGraf. Zam. 828 naklad 110+17 egz. Cena 45 zl PL
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL18151075A PL97491B1 (pl) | 1975-06-23 | 1975-06-23 | Sposob wytwarzania antybiotykow,zwlaszcza erytromycyny |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL18151075A PL97491B1 (pl) | 1975-06-23 | 1975-06-23 | Sposob wytwarzania antybiotykow,zwlaszcza erytromycyny |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL97491B1 true PL97491B1 (pl) | 1978-02-28 |
Family
ID=19972680
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL18151075A PL97491B1 (pl) | 1975-06-23 | 1975-06-23 | Sposob wytwarzania antybiotykow,zwlaszcza erytromycyny |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL97491B1 (pl) |
-
1975
- 1975-06-23 PL PL18151075A patent/PL97491B1/pl unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Letourneau et al. | Keratinolytic activity of Streptomyces sp. S. K1–02: a new isolated strain | |
| Naidu et al. | Optimization of thermostable alkaline protease production from species of Bacillus using rice bran | |
| Sandhya et al. | Comparative evaluation of neutral protease production by Aspergillus oryzae in submerged and solid-state fermentation | |
| Varalakshmi et al. | Production and Characterization of a-Amylase from Aspergillus niger JGI 24 Isolated in Bangalore | |
| Sangali et al. | Isolation and characterization of a novel feather-degrading bacterial strain | |
| Kim et al. | Feather-degrading Bacillus species from poultry waste | |
| Gote et al. | Thermostable α-galactosidase from Bacillus stearothermophilus (NCIM 5146) and its application in the removal of flatulence causing factors from soymilk | |
| De Azeredo et al. | A low-cost fermentation medium for thermophilic protease production by Streptomyces sp. 594 using feather meal and corn steep liquor | |
| Kotwal et al. | Production of α-galactosidase by thermophilic fungus Humicola sp. in solid-state fermentation and its application in soyamilk hydrolysis | |
| JPH01502079A (ja) | 新規プロテアーゼ | |
| Murao et al. | Isolation of amylase inhibitor-producing microorganism | |
| Lakshmi et al. | Media optimization of protease production by Bacillus licheniformis and partial characterization of Alkaline protease | |
| Korkmaz et al. | Characterization of alkaline keratinase of Bacillus licheniformis strain HK-1 from poultry waste | |
| Ionata et al. | A novel keratinase from Clostridium sporogenes bv. pennavorans bv. nov., a thermotolerant organism isolated from solfataric muds | |
| SU1190992A3 (ru) | Способ получени 2,5-дикето- @ -глюконовой кислоты | |
| Suzuki et al. | Studies on the decomposition of raffinose by α-galactosidase of mold: Part I. α-galactosidase formation and hydrolysis of raffinose by the enzyme preparation | |
| CH639695A5 (it) | Procedimento enzimatico-microbiologico per la produzione di amminoacidi otticamente attivi a partire da idantoine e/o carbamil-derivati racemi. | |
| Elgammal et al. | Enhanced production, partial purification, and characterization of alkaline thermophilic protease from the endophytic fungus BT21 | |
| Sindhu et al. | Optimization of process parameters for the production of alkaline protease from Penicillium godlewskii SBSS 25 and its application in detergent industry | |
| Bhosale et al. | Optimization of lipase production by thermo-alkalophilic Bacillus sp. 8C | |
| Hashimoto et al. | Thermostable acid protease produced by Penicillium duponti K1014, a true thermophilic fungus newly isolated from compost | |
| Singh | Characterization of an extracellular keratinase of Trichophyton simii and its role in keratin degradation | |
| Bhushan et al. | Lipase production from an alkalophilic yeast sp. by solid state fermentation | |
| Basu et al. | Production and characterization of extracellular protease of mutant Aspergillus niger AB100 grown on fish scale | |
| Anisha et al. | Production and characterization of partially purified thermostable α-galactosidases from Streptomyces griseoloalbus for food industrial applications |