Uprawniony z patentu: Lwowskij Grosudarstwiennyj Medicinskij Institut, Lwów (Zwiazek Socjalistycznych Republik Radzieckich) Sposób wytwarzania nowych pochodnych tiofosfamidowych alkaloidów, pochodnych homologów izochinoliny Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania nowych pochodnych tiofosfamidowych alkaloidów, pochodnych homologów izochinoliny.Nowe zwiazki wytwarzane sposobem wedlug wynalazku maja wzór ogólny 1, w którym R i Ri oznaczaja atom wodoru i rodnik metoksylowy, albo grupe o wzorze 2, R2 oznacza atom wodoru lub rodnik metoksylowy, albo Rj i R2 oznaczaja grupe o wzorze 2, R3 oznacza atom wodoru, rodnik metylowy lub grupe wodorotlenowa, R4, R5 i R6 oznaczaja atomy wodoru albo R4 i Rs oraz R5 i R6 oznaczaja podstawiony pierscien naftalenowy, przy czym w takim przypadku pomiedzy atomem azotu i atomem wegla wystepuje wiazanie pojedyncze, albo tez atom azotu jest niepodstawiony, czyli R6 nie wystepuje i wtedy atom azotu i atom wegla polaczone sa ze soba wiazaniem podwójnym, a n we wzorze 1 oznacza liczbe calkowita 1-3.Nowe zwiazki sa proszkami obudowie mikrokrystalicznej, barwy zóltawej i jasnobrunatnej, dobrze rozpuszczalnymi wsulfotlenku metylu, dwumetyloformamidzie, chloroformie i innych rozpuszczalnikach orga¬ nicznych, trudno rozpuszczalnymi w wodzie.Zwiazki te posiadaja cenne wlasnosci farmakologiczne i znajduja zastosowanie w medycynie jako preparaty do leczenia nowotworów zlosliwych, jak równiez moga znalezc zastosowanie jako mutageny chemiczne przy hybrydyzacji roslin rolniczych i mikroorganizmów, uzywane jako pestycydy i insektycydy.j Najaktywniejszymi substancjami z wymienionych zwiazków sa dwu-(etylenoimido)-N-berberynoloetylo- amid kwasu tiofosforowego, trój-(N-sangwinarynolo)-etyloamid kwasu tiofosforowego i tiofosfamidowe pochod¬ ne alkaloidów szeregu izochinolonowego glistnika jaskólczego ziela.Dwu-(etylenoimido)-N-berberynoloetyloamid kwasu tiofosforowego i tiofasfamidowe pochodne alkaloidów szeregu izochinolinowego glistnika jaskólczego ziela sa zwiazkami biologicznie czynnymi w preparatach do leczenia nowotworów zlosliwych. Wymienione preparaty znajduja zastosowanie przy leczeniu nowotworów zlosliwych grasicy, jajnika, szyjki, macicy, pecherza moczowego, gruczolu krokowego, krtani, przelyku i innych.Mechanizm ich dzialania polega na wplywie na ukryte mechanizmy metabolizmu komórkowego, które doprowadzaja do naruszenia syntezy kwasów nukleinowych i zwiekszenia zaakcentowania aerobowej fazy oddychania.Sposobem wedlug wynalazku nowe pochodne tiofosfamidowe alkaloidów, pochodnych homologów izochinoliny otrzymuje sie na drodze reakcji tiofosfamidu z alkaloidami szeregu izochinolinowego o wzorze2 81 014 ogólnym 3, w którym R, Ri, R2, Rj, R4, Rs, Ró maJ9 wyzej podane znaczenie lub z mieszanina alkaloidów w srodowisku rozpuszczalnika organicznego, w temperaturze wrzenia mieszaniny reakcyjnej, z której wydziela sie nastepnie produkt koncowy.W celu zwiekszenia wydajnosci produktu koncowego, korzystne jest zastosowanie takich rozpuszczalników organicznych jak benzen, chloroform lub 1,4-dioksan.Aby otrzymac dwu-(etylenoimido)-N-berberynoloetyloamid kwasu tiofosforowego, tiofosfamid poddaje sie reakcji z berberyna w 1,4-dioksanie, w temperaturze wrzenia mieszaniny, a nastepnie wydziela sie produkt.' W celu otrzymania trój-(N-sangwinarynolo)-etyloamidu kwasu tiofosforowego, tiofosfamid poddaje sie reakcji z sangwinaryna w benzenie, w temperaturze wrzenia mieszaniny, a nastepnie wydziela sie produkt.Reakcje prowadzi sie w ten sposób, ze produkty wyjsciowe, czyli tiofosfamid i poszczególne alkaloidy szeregu izochinolinowego lub ich mieszanine poddaje sie reacji w srodowisku rozpuszczalnika organicznego, w temperaturze wrzenia mieszaniny, przy czym nastepuje aminoliza etylenoiminowych pierscieni tiofosfamidu i w wyniku tego procesu otrzymuje sie zadane produkty.Alkaloidy, które sa czwartorzedowymi zasadami amoniowymi, takie jak berberyna, sangwinaryna, hydroksysangwinaryna, koptyzyna i inne, reaguja jak aminoalkohole, poniewaz proces prowadzi sie w srodowisku bezwodnym, a wiadomo, ze alkaloidy te wstanie bezwodnym sa aminoalkoholami. Tak na przyklad alkaloid berberyny, w srodowisku bezwodnym nazywany berberynolem, posiada strukture przedstawiona na schemacie 1.Podczas reakcji alkaloidy, które zachowuja sie jak aminoalkohole powoduja aminolize tiofosfamidu, czyli rozczepienie pierscieni etylenoiminowych wedlug schematu 2, z utworzeniem zwiazków wewnatrzjonowych.Otrzymane w wyniku reakcji produkty koncowe wydziela sie przez oddestylowanie rozpuszczalnika, wymywanie nieprzereagowanych materialów wyjsciowych i krystalizacje produktu. Podczas wytwarzania pro¬ duktu reakcji tiofosfamidu z alkaloidami glistnika jaskólczego ziela, z mieszaniny reakcyjnej oddestylowuje sie rozpuszczalnik, pozostalosc przemywa sie w celu usuniecia nieprzereagowanych materialów wyjsciowych i wydziela sie produkt. Wydajnosc produktu wynosi 32—97% wagowych.Sposób wedlug wynalazku ilustruja nastepujace przyklady.Przyklad I. 7,5 milimola sangwinaryny o temperaturze topnienia 267°C i 14,27 milimola tiofosfami¬ du rozpuszcza sie w 700 ml benzenu i mieszanine ogrzewa do wrzenia w ciagu 2 godzin pod chlodnica zwrotna.Otrzymana mieszanine odbarwia sie weglem aktywowanym i przesacza, oddestylowuje rozpuszczalnik. Sucha pozostalosc przemywa sie starannie eterem w celu usuniecia nieprzereagowanych substancji wyjsciowych.Otrzymuje sie 1,5 g trój-(N-sangwinarynolo)-etyloamidu kwasu tiofosforowego, zóltawej krystalicznej substancji, dobrze rozpuszczalnej w benzenie, chloroformie, dwumetyloformamidzie, dwuchloroetanie, trudno rozpuszczal¬ nej w wodzie, rozpuszczalnej po ogrzaniu w 10% kwasie solnym, a nierozpuszczalnej w metanolu i eterze.Wydajnosc wynosi 50,8% wagowych wydajnosci teoretycznej.Temperatura topnienia po przekrystalizowaniu z mieszaniny chloroformu i metanolu wynosi 189—191°C.Maksimum absorpcji: 238, 338, 398 i 407 nm.DlaC66H57N6015PS obliczono w %: S 2,59; N 6,79; P 2,50; C 64,07; H 4,64. znaleziono w %: S 2,70; 2,71; N 6,82; 6,90; P 2,45; 2,62; C 63,90; 63,87; H 4,60; 4,71.Przyklad II. 8,86 milimola berberyny i 13,5 milimola tiofosfamidu ogrzewa sie do wrzenia wciagu dwóch godzin z 500 ml bezwodnego 1,4-dioksanu pod chlodnica zwrotna. Otrzymana mieszanine odbarwia sie weglem aktywowanym i oddestylowuje rozpuszczalnik pod cisnieniem 10 mm Hg. Sucha pozostalosc przemywa sie eterem i chloroformem. Otrzymuje sie 3,3 g dwu-(etylenoimido)-N-berberynoloetyloamidu kwasu tiofosforo¬ wego, ciemnozóltej substancji krystalicznej, dobrze rozpuszczalnej po ogrzaniu w kwasie solnym, trudno rozpuszczalnej w rozpuszczalnikach organicznych. Wydajnosc wynosi 97% wagowych wydajnosci teoretycznej, a temperatura topnienia po przekrystalizowaniu z mieszaniny benzenu i sulfotlenku metylu 135°C.Dla Ci6H31 N4O5PS obliczono w %: S 5,91; N 10,37; P 10,33; C 57,55; H 5,76. znaleziono w %: S 5,90; 5,79; N 10,52; 10,54; P 10,41; 10,39; C 57,40; H 5,84.Maksimum absorpcji 231, 282, 373 nm.Przyklad III. 3,5 g alkaloidów, wydzielonych z wyciagu wodnego glistnika jaskólczego ziela (Chelido- nium majus L.) (sredni ciezar czasteczkowy 331) i 3,8 g (20,1 milimola) tiofosfamidu rozpuszcza sie w 60 ml81 014 3 chloroformu i ogrzewa do wrzenia wciagu 2 godzin pod chlodnica zwrotna. Otrzymany produkt odbarwia sie weglem aktywowanym i odsacza oddestylowuje rozpuszczalniki. Sucha pozostalosc przemywa sie starannie eterem w celu usuniecia nieprzereagowanych substancji wyjsciowych. Otrzymuje sie 1,45 g produktu koncowego barwy jasnobrunatnej, dobrze rozpuszczajacego sie w chloroformie, sulfotlenku metylu; dwumetyloformamidzie, trudno rozpuszczalnego wdwuchloroetanie, 1,4-dioksanie i metanolu, nieropuszczalnego w wodzie i eterze.Wydajnosc wynosi 34,5% wagowych. Dla sredniego ciezaru czasteczkowego okolo 1120 obliczono w %: S 2,86; N 7,50. znaleziono w %: S 2,82; N 7,60.Maksimum absorpcji 284 nm.Przyklad IV. Reakcje prowadzi sie analogicznie jak w przykladzie III, z tym ze jako rozpuszczalnik stosuje sie benzen.Wydajnosc produktu koncowego wynosi 35% wagowych, dla sredniego ciezaru czasteczkowego okolo 1180 obliczono w%: S 2,72; N 7,12. znaleziono w %: S 2,64; 2,62; N 7,30; 7,25.Maksimum absorpcji 271, 375 nm. PL PLThe right holder of the patent: Lwowskij Grosudarstwannyj Medicinskij Institut, Lwów (Union of Soviet Socialist Republics) Method for the production of new thiophosphamide alkaloids derivatives, derivatives of isoquinoline homologues. where R and Ri represent a hydrogen atom and a methoxy radical, or a group of the formula 2, R2 is a hydrogen atom or a methoxy radical, or Rj and R2 are a group of the formula 2, R3 is a hydrogen atom, a methyl radical or a hydroxyl group, R4, R5 and R6 represent hydrogen atoms or R4 and Rs and R5 and R6 represent a substituted naphthalene ring, in which case there is a single bond between the nitrogen atom and the carbon atom or the nitrogen atom is unsubstituted, i.e. R6 does not exist and then the nitrogen atom and carbon atoms are linked to each other by a double bond, an in formula 1 is an integer of 1-3. The new compounds are microcrystalline powders of yellowish and light brown color, well soluble in methyl sulfoxide, dimethylformamide, chloroform and other organic solvents, sparingly soluble in water. These compounds have valuable pharmacological properties and find application in medicine as preparations for the treatment of malignant neoplasms, as well as they can be used as chemical mutagens in the hybridization of agricultural plants and microorganisms, used as pesticides and insecticides. j The most active substances of the mentioned compounds are di- (ethyleneimide) -N-berberolethyl amide phosphoric, tri-(N-sanguinarinol) -ethylamide of thiophosphoric acid and thiophosphamide alkaloids of the isoquinolone series of celandine celandine. la are biologically active compounds in preparations for the treatment of malignant tumors. The above-mentioned preparations are used in the treatment of malignant neoplasms of the thymus, ovary, cervix, uterus, bladder, prostate gland, larynx, esophagus, and others. Their mechanism of action consists in influencing the hidden mechanisms of cellular metabolism, which lead to a violation of the synthesis of nucleic acids and increased stress According to the invention, new derivatives of isoquinoline homologues are obtained by reacting thiophosphamide with alkaloids of the isoquinoline series of formula 2 81 014 general 3, in which R, Ri, R2, Rj, R4, Rs, Ró maJ9 given above meaning or with a mixture of alkaloids in an organic solvent environment at the boiling point of the reaction mixture from which the final product is subsequently separated. In order to increase the yield of the final product, it is preferable to use organic solvents such as benzene, chloroform or 1,4-dioxane. di- (ethyl enoimido) -N-thiophosphoric acid -N-berberolethylamide, thiophosphamide is reacted with berberine in 1,4-dioxane at the reflux temperature of the mixture and the product is then isolated. In order to obtain thiophosphoric acid tri (N-sanguinarinol) ethylamide, thiophosphamide is reacted with sanguinarine in benzene at the boiling point of the mixture, and the product is then separated. The reaction is carried out in such a way that the starting products, i.e. thiophosphamide and the individual isoquinoline series alkaloids or a mixture thereof are reacted in an organic solvent environment, at the boiling point of the mixture, whereby the aminolysis of the ethyleneimine thiophosphamide rings takes place and the desired products are obtained as a result of this process. , coptysine and others react as amino alcohols because the process is carried out in an anhydrous environment, and it is known that these alkaloids are in anhydrous state amino alcohols. For example, the alkaloid berberine, in an anhydrous environment called berberolol, has the structure shown in Scheme 1. During the reaction, the alkaloids that behave like aminoalcohols cause the aminolysis of thiophosphamide, i.e. the cleavage of ethyleneimine rings according to Scheme 2, with the formation of internal compounds. final separation by distillation of the solvent, elution of unreacted starting materials and crystallization of the product. In the preparation of the reaction product of thiophosphamide with celandine alkaloids, the solvent is distilled from the reaction mixture, the residue is washed to remove unreacted starting materials, and the product is isolated. The yield of the product is 32-97% by weight. The method according to the invention is illustrated by the following examples: EXAMPLE 1 7.5 millimoles of sanguinarine having a melting point of 267 ° C and 14.27 millimoles of thiophosphamide are dissolved in 700 ml of benzene and the mixture is heated to the boiling point. within 2 hours under reflux. The mixture obtained is decolourised with activated carbon, filtered, and the solvent is distilled off. The dry residue is washed thoroughly with ether to remove unreacted starting materials. This gives 1.5 g of thiophosphoric acid tri (N-sanguinarinol) ethylamide, a yellowish crystalline substance, well soluble in benzene, chloroform, dimethylformamide, dichloroethane, sparingly soluble in water, soluble after heating in 10% hydrochloric acid, and insoluble in methanol and ether. Yield is 50.8% by weight of theoretical yield. The melting point after recrystallization from a mixture of chloroform and methanol is 189-191 ° C. Maximum absorption: 238, 338, 398 and 407 nm. For C66H57N6015PS calculated in%: S 2.59; N 6.79; P 2.50; C 64.07; H 4.64. found in%: S 2.70; 2.71; N 6.82; 6.90; P 2.45; 2.62; C 63.90; 63.87; H 4.60; 4.71 Example II. 8.86 millimoles of berberine and 13.5 millimoles of thiophosphamide are boiled for two hours with 500 ml of anhydrous 1,4-dioxane under reflux. The resulting mixture was decolorized with activated carbon and the solvent was distilled off at 10 mm Hg. The dry residue is washed with ether and chloroform. 3.3 g of thiophosphoric acid di (ethyleneimido) -N-berberolethylamide, a dark yellow crystalline substance, readily soluble in hydrochloric acid after heating, sparingly soluble in organic solvents. The yield is 97% by weight of theory and the melting point after recrystallization from a mixture of benzene and methyl sulphoxide is 135 ° C. For C16H31, N4O5PS is calculated as%: S 5.91; N 10.37; P 10.33; C 57.55; H 5.76. Found in%: S 5.90; 5.79; N 10.52; 10.54; P 10.41; 10.39; C 57.40; H 5.84 Maximum absorption 231, 282, 373 nm. Example III. 3.5 g of alkaloids isolated from the water extract of celandine celandine (Chelidonium majus L.) (average molecular weight 331) and 3.8 g (20.1 mmol) of thiophosphamide are dissolved in 60 ml of 81 014 3 chloroform and heated to boiling for 2 hours under a reflux condenser. The product obtained is decolored with activated carbon and the solvents are distilled off by filtration. The dry residue is washed thoroughly with ether to remove unreacted starting materials. 1.45 g of a light brown-colored final product which is well soluble in chloroform is obtained, i.e. methyl sulphoxide; dimethylformamide, sparingly soluble in dichloroethane, 1,4-dioxane and methanol, insoluble in water and ether. Yield 34.5% by weight. For an average molecular weight of around 1120 the following% were calculated: S 2.86; N 7.50. found in%: S 2.82; N 7.60 Absorption maximum 284 nm. Example IV. The reactions are carried out analogously to example III, except that benzene is used as the solvent. The yield of the final product is 35% by weight, for an average molecular weight of about 1180, calculated in%: S 2.72; N 7.12. found in%: S 2.64; 2.62; N 7.30; 7.25 Maximum absorption 271.375 nm. PL PL