PL76323B2 - - Google Patents

Description

Pierwszenstwo: Zgloszenie ogloszono: 30.05.1973 Opis patentowy opublikowano: 10.03.1975 76323 KI. 30h,2/04 MKP A61k 23/02 Twórcawynalazku: Józef Cwik Uprawniony z patentu tymczasowego: Urzad Wojewódzki Wydzial Zdrowia i Opieki Spolecznej, Opole (Polska) Sposób wytwarzania surowic wzorcowych anty-D Przedmiotem projektu wynalazczego jest sposób wytwarzania surowic wzorcowych anty-D, które stanowia jedna z surowic grupy Rh.Dotychczasowy sposób produkcji tej surowicy opieral sie na osoczu pochodzacym od dawców posiadaja¬ cych odpowiedni poziom przeciwcial anty-D, wyrazajacy sie mianem nie nizszym niz 1 :32 w srodowisku papainowym lub koloidowym. W przypadkach gdy miano przeciwcial anty-D bylo wyzsze, a wynoszace przynajmniej 1 : 64, wówczas po odwlóknieniu osocza i opracowaniu serologicznym surowice taka rozcienczano przy pomocy surowicy grupy AB do zadanego miana. Surowica AB jako srodowisko serologiczne obojetne nie mogla zawierac zdnych nieregularnych przeciwcial, ani powodowac nieswoistych reakcji.Surowice produkowane dotychczasowym sposobem maja ponadto ograniczony termin waznosci, a do przechowywania ich wymagane sa urzadzenia chlodnicze. Zliofilizowane po rozcienczeniu za pomoca obojetnej surowicy ludzkiej grupy AB, dosyc szybko traca swe wlasnosci diagnostyczne, stajac sie równoczesnie po pewnym czasie trudno rozpuszczalane.Celem wynalazku jest opracowanie produkcji surowic wzorcowych anty-D do odczynu papainowego tak, aby: a) wyeliminowac stosowana do rozcienczania surowic anty-D surowice ludzka grupy AB, b) surowica zliofilizowana szybko sie rozpuszczala po dodaniu rozpuszczalnika, byla klarowna oraz nie tracila przez dlugi okres czasu wlasnosci diagnostycznych.Zadaniem wynalazku jest zastosowanie takiej substancji, która pod wzgledem serologicznym bedzie zastepowac surowice ludzka grupy AB, nie dajac reakcji nieswoistych. Wstanie plynnym bedzie wykazywac wlasnosci co najmniej równe surowicy ludzkiej grupy AB, a w stanie zliofilizowanym nawet przewyzszac wlasnosciami te surowice.Cel ten osiagnieto poprzez zastapienie surowicy ludzkiej grupy AB, jako substancji do rozcienczania surowicy anty-D o wysokim mianie, roztworem wodnym suchego bulionu zwyklego. Bulion zwykly przygoto¬ wuje sie ze zmielonego miesa wolowego lub cielecego, uprzednio oczyszczonego z tluszczu, powiezi lacznotkankowej i kosci. Po wykonaniu zabiegów ekstrakcji, otrzymany wyciag miesny dopelnia sie do objetosci/ 2 76323 1 litra woda destylowana, oraz dodaje 1—2% peptonu i 0,5% roztworu NaCl. Wyciag plynny po gotowaniu zobojetnia sie 10% NaOH do pH = 7,4±0,1, uzyskujac tzw. bulion zwykly. Ten, po wyjalowieniu i liofilizacji, jest suchym bulionen zwyklym.Warunkom tym odpowiadaja buliony zwykle produkowane w stanie zliofilizowanym przez specjalistyczne wytwórnie jak np. Warszawska Wytwórnie Surowic i Szczepionek. Przed przystapieniem do rozcienczania bulionem zwyklym surowicy anty-D, surowice te mianuje sie w celu okreslenia poziomu przeciwcial w odczy¬ nach — papainowym i koloidowym. Nastepnie okresla sie optymalna objetosc bulionu zwyklego, przypadajacego na dana objetosc surowicy anty-D w odczynie papainowym, aby otrzymac zadane miano przeciwcial dla danej serii surowicy. Przygotowuje sie niezbedna ilosc wodnego roztworu bulionu i rozciencza odpowiednia objetoscia do zadanego poziomu przeciwcial.Surowice anty-D do odczynu papainowego rozcienczona bulionem po przesaczeniu przez filtr SKS i dodaniu srodka konserwujacego rozlewa sie do ampulek w ilosci 1 ml. Calosc zamraza sie w odpowiednich blokach i nastepnie liofilizuje sie przez okres 24 godzin. Po zakonczeniu procesu liofilizacji ampulki zatapia sie w jalowym boksie operacyjnym. Jako rozpuszczalnik do surowicy zliofilizowanej stosuje sie wode destylowana w objetosci równej objetosci wlanej surowicy anty-D, przypadajacej na 1 ampulke.Sposób wedlug wynalazku pozwala na liofilizacje surowic, które w tym stanie praktycznie maja dlugi termin waznosci, do przechowywania nie wymagaja urzadzen chlodniczych, rozpuszczane w wodzie -destylowanej sa dobrze rozpuszczalnymi i klarownymi. W stanie plynnym wykazuja mniejsza wrazliwosc na zmiany temperatu¬ ry, anizeli surowice produkowane dotychczasowym sposobem.Przyklad I. Surowica grupy AB zawierala przeciwciala anty-D w odczynie papainowym o mianie 1 :8, a w odczynie koloidowym + albumina 1 :4, oraz przeciwciala anty-D w odczynie papainowym o mianie 1:1024, a w odczynie koloidowym +albumina miano przeciwcial anty-D równiez 1 :1024. Surowice te rozcienczono w stosunku 1/20 uprzednio przygotowanym roztworem wodnym suchego bulionu zwyklego, opisanego wyzej. Do 1 ml surowicy anty-D o mianie 1 : 1024 dodawano 20 ml roztworu bulionu zwyklego.Roztwór wodny z bulionu suchego przygotowano zgodnie z receptura. Tym sposobem otrzymano odpowiednia objetosc surowicy przydatnej diagnostycznie jako surowice anty-D w odczynie koloidowym + albumina o mianie 1 : 32, oraz w odczynie papainowym o mianie 1 : 64, jak równiez w odczynie antyglobulinowym. Czesc surowicy tak przygotowanej po dodaniu srodka konserwujacego merthiolatu przesaczono przez krazek SKS, rozlano w jalowym boksie operacyjnym do ampulek w ilosci 1 ml na ampulke i poddano procesowi liofilizacji przez okres 24gpdzin. Surowice po procesie liofilizacji skontrolowano, czy zachowala wstanie niezmienionym wszystkie cechy diagnostyczne, wlasciwe dla surowic wzorcowych. Jako rozpuszczalnik dla surowicy zliofilizo¬ wanej sluzy woda destylowana. W powyzszym przykladzie zawartosc 1 ampulki rozpuszczano w 1 ml wody destylowanej.Przyklad II. Surowica grupy A — Rh minus zawierala przeciwciala anty-D w odczynie papainowym o mianie 1 : 64. W celu pozbycia sie izoaglutynin surowice poddano absorpcji krwinkami grupy B — Rh minus w temperaturze + 4°C przez okres 2 godzin. W ten sposób otrzymano surowice bezgrupowa, posiadajaca przeciwciala anty-D w odczynie papainowym 1 :64. Surowice ta rozcienczono w stosunku 1/1 roztworem wodnym suchego bulionu zwyklego, opisanego wyzej, dodajac do 1 ml surowicy anty-D o mianie przeciwcial 1:64 1 ml roztworu bulionu zwyklego, otrzymujac tym sposobem surowice o mianie przeciwcial anty-D w odczynie papainowym 1:32, diagnostycznie przydatna w odczynach - papainowym i antyglobulinowym.Surowice tak przygotowana po dodaniu srodka kanserwujacego i przesaczeniu przez krazek SKS rozlano po 1 ml do ampulek i liofilizowano przez okres 24 godzin. Surowice po liofilizacji skontrolowano pod wzgledem wlasnosci diagnostycznych dla surowic wzorcowych. Zawartosc ampulki przed uzyciem rozpuszczono w 1 ml wody destylowanej. PL PL

Claims (1)

1. Zastrzezeniepatentowe Sposób wytwarzania surowic wzorcowych anty-D, znamienny tym, ze do rozcienczania surowic anty-D o wysokim mianie stosuje sie bulion zwykly, bedacy wyciagiem miesnym z miesa wolowego lub cielecego o pH = 7,4±0,1, stosowany w bakteriologii jako pozywka plynna do hodowli drobnoustrojów. Prac. Poligraf. UP PRL. Zam. 1801/75 naklad 120+18 Cena 10 zl PL PL