PL420924A1 - Method for producing hyaluronic acid - Google Patents

Method for producing hyaluronic acid

Info

Publication number
PL420924A1
PL420924A1 PL420924A PL42092417A PL420924A1 PL 420924 A1 PL420924 A1 PL 420924A1 PL 420924 A PL420924 A PL 420924A PL 42092417 A PL42092417 A PL 42092417A PL 420924 A1 PL420924 A1 PL 420924A1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
temperature
hyaluronic acid
filtrate
hours
organic solvent
Prior art date
Application number
PL420924A
Other languages
Polish (pl)
Other versions
PL235053B1 (en
Inventor
Tomasz Kapela
Tomasz Grabowski
Original Assignee
Biologistyka Spółka Z Ograniczoną Odpowiedzialnoscią
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Biologistyka Spółka Z Ograniczoną Odpowiedzialnoscią filed Critical Biologistyka Spółka Z Ograniczoną Odpowiedzialnoscią
Priority to PL420924A priority Critical patent/PL235053B1/en
Publication of PL420924A1 publication Critical patent/PL420924A1/en
Publication of PL235053B1 publication Critical patent/PL235053B1/en

Links

Landscapes

  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Przedmiotem zgłoszenia jest sposób wytwarzania kwasu hialuronowego z wykorzystaniem hodowli kultur bakterii zdolnych do produkcji kwasu hialuronowego, obejmujący kolejne etapy: przygotowania inokulum, zaszczepienia fermentora i hodowli bakterii oraz czynności pofermentacyjnych (ang. downstream) charakteryzuje się tym, że: podłoże hodowlane poddaje się zaszczepieniu kulturą bakterii zdolną do produkcji kwasu hialuronowego, następnie zaszczepione podłoże hodowlane namnaża się na wytrząsarce przy obrotach w zakresie od 100 do 250 obr/min, w temperaturze od 30 do 37°C w czasie od 10 do 24 godz.; następnie fermentor wypełnia się podłożem hodowlanym, po czym podłoże hodowlane szczepi się inokulum w objętości od 5 do 20% obj. fermentora, a następnie prowadzi się hodowlę w temp. od 30 do 37°C, przy stężeniu tlenu od 10 do 40%, w czasie od 12 do 24 godz.; a następnie zawiesinę poddaje się wirowaniu na wirówce ciągłej przy obrotach od 10000 do 15000 obr/min, po czym komórki bakteryjne zawiesza się w wodzie dejonizowanej z dodatkiem od 0,05 do 0,5% wag. detergentów przy zastosowaniu ultradźwięków w czasie od 0,5 do 2 godz., po czym ponownie wiruje się, a uzyskany supernatant filtruje się na membranach do filtracji stycznej o wielkości porów w zakresie od 2 do 10 kDa, po czym filtrat schładza się do temperatury od 4 do 10°C, a następnie dodaje się rozpuszczalnik organiczny o temperaturze od -20 do -10°C w objętości od 100 do 300% obj. w stosunku do filtratu, po czym mieszaninę filtratu i rozpuszczalnika organicznego pozostawia się w temperaturze od -20 do -10°C na czas od 12 do 24 godz., a następnie zawiesinę kwasu hialuronowego odwirowuje się przy obrotach od 5000 do 10000 obr/min, po czym otrzymany osad kwasu hialuronowego rozpuszcza się w wodzie (123) o temperaturze od 40 do 70°C oraz filtruje, a następnie filtrat schładza się do temperatury od 4 do 10°C oraz dodaje się rozpuszczalnik organiczny o temperaturze od -20 do -10°C w objętości od 100 do 300% obj. w stosunku do filtratu, a następnie mieszaninę filtratu i rozpuszczalnika organicznego wytrąca się w temperaturze od -20 do -10°C w czasie od 12 do 24 godz., po czym osad kwasu hialuronowego suszy się w temperaturze od 20 do 40°C pod ciśnieniem od 5 do 300 mbar.The subject of the application is a method for producing hyaluronic acid using cultures of bacteria capable of producing hyaluronic acid, comprising the following stages: preparation of the inoculum, fermentation of the fermenter and bacterial culture, as well as downstream operations characterized in that: the culture medium is seeded with a culture bacteria capable of producing hyaluronic acid, then the inoculated culture medium is propagated on a shaker at rotations in the range from 100 to 250 rpm, at a temperature of 30 to 37 ° C for 10 to 24 hours; the fermentor is then filled with culture medium, after which the culture medium is inoculated with an inoculum volume of 5 to 20% by volume. fermentor, followed by culturing at a temperature of 30 to 37 ° C, an oxygen concentration of 10 to 40%, for 12 to 24 hours; and then the suspension is centrifuged in a continuous centrifuge at 10,000 to 15,000 rpm, after which the bacterial cells are suspended in deionized water with an addition of 0.05 to 0.5 wt. detergents using ultrasound for 0.5 to 2 hours, then centrifuged again, and the resulting supernatant is filtered on tangential filtration membranes with a pore size in the range of 2 to 10 kDa, after which the filtrate is cooled to a temperature of 4 to 10 ° C, followed by the addition of an organic solvent at a temperature from -20 to -10 ° C in a volume of 100 to 300% vol. relative to the filtrate, after which the mixture of the filtrate and the organic solvent is left at a temperature from -20 to -10 ° C for 12 to 24 hours, and then the hyaluronic acid suspension is centrifuged at 5,000 to 10,000 rpm, then the obtained hyaluronic acid residue is dissolved in water (123) at a temperature of 40 to 70 ° C and filtered, and then the filtrate is cooled to a temperature of 4 to 10 ° C and an organic solvent at a temperature of -20 to -10 is added ° C in a volume of 100 to 300% vol. relative to the filtrate, and then the mixture of filtrate and organic solvent precipitates at a temperature of -20 to -10 ° C for 12 to 24 hours, after which the hyaluronic acid precipitate is dried at a temperature of 20 to 40 ° C under pressure from 5 to 300 mbar.

PL420924A 2017-03-21 2017-03-21 Method for producing hyaluronic acid PL235053B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL420924A PL235053B1 (en) 2017-03-21 2017-03-21 Method for producing hyaluronic acid

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL420924A PL235053B1 (en) 2017-03-21 2017-03-21 Method for producing hyaluronic acid

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL420924A1 true PL420924A1 (en) 2018-09-24
PL235053B1 PL235053B1 (en) 2020-05-18

Family

ID=63578698

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL420924A PL235053B1 (en) 2017-03-21 2017-03-21 Method for producing hyaluronic acid

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL235053B1 (en)

Also Published As

Publication number Publication date
PL235053B1 (en) 2020-05-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
BR112018003214A2 (en) manufacture of alkaline phosphatases
SG161210A1 (en) Methods for expression and purification of recombinant human growth hormone
RU2016128955A (en) METHOD FOR EFFECTIVE CLEANING OF NEUTRAL HUMAN MILK OLIGOSACCHARIDES (HMO) OBTAINED BY MICROBIOLOGICAL FERMENTATION
MX2019002495A (en) Methods for producing virus for vaccine production.
BR112012009520A2 (en) process for algae cultivation
EA201991976A1 (en) METABOLICALLY OPTIMIZED CELL CULTURE
EA200501774A1 (en) CULTURES OF E1-IMMORTALIZED CELLS AND METHODS FOR THEIR CULTIVATION WITH THE PURPOSE OF INCREASING THE OUTPUT OF THEIR PRODUCTS
RU2013143307A (en) METHOD FOR PRODUCING CELLULAR LAYER FROM CELLS OF PIGMENTAL EPIDELIUM RETAIL
DE502006009084D1 (en) Process for the preparation of L-amino acids using improved strains of the family Enterobacteriaceae
WO2009004922A1 (en) Lactic acid production method
RU2010131632A (en) ENVIRONMENTS FOR MAMMAL CELL CULTURES THAT CONTAIN AN ADDITIVE LIQUID OF STEON FACTION STAGES AND THEIR APPLICATION
MX2016016227A (en) Method for producing bacterial cellulose membranes useful in biomedical applications.
BR112012012915A2 (en) bacteria belonging to the enterobacteriaceae family, and method for producing l-cysteine, l-cystine, a derivative thereof, or a mixture thereof
PL420924A1 (en) Method for producing hyaluronic acid
EA201301163A1 (en) HIGHLY EFFICIENT WAY OF ENZYMATION
MX2020013633A (en) Methods of producing recombinant proteins.
CN108977402B (en) Culture method for obtaining high-content glycerol glucoside algae cells
BR112023001384A2 (en) METHOD FOR CULTIVATING A BACILLUS HOST CELL, AND BACILLUS HOST CELL CULTURE
TWI736413B (en) Preparation method of microbial extract
CN110819574B (en) Method for screening myxobacteria for cracking haematococcus from sludge
TH12549C3 (en) Production method of yeast cell mass production of fat for culturing water mites.
TH12549A3 (en) Production method of yeast cell mass production of fat for culturing water mites.
PL416899A1 (en) Tracheal prosthesis and method for producing it
RU2012119278A (en) METHOD FOR DETERMINING ADHESIVE PROPERTIES OF ENTEROCOCCUS GENUS BACTERIA USING CELL-2 CELL LINE
BR102017027243A2 (en) PROCESS FOR PRODUCTION AND PURIFICATION OF HYALURONIC ACID BY MICROBIAN, HYALURONIC ACID AND THE SAME USE