PL245253B1 - Stężenie selenu w surowicy jako marker przeżyć u chorych z czerniakiem złośliwym w Polsce - Google Patents

Stężenie selenu w surowicy jako marker przeżyć u chorych z czerniakiem złośliwym w Polsce Download PDF

Info

Publication number
PL245253B1
PL245253B1 PL438563A PL43856321A PL245253B1 PL 245253 B1 PL245253 B1 PL 245253B1 PL 438563 A PL438563 A PL 438563A PL 43856321 A PL43856321 A PL 43856321A PL 245253 B1 PL245253 B1 PL 245253B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
serum
patients
selenium
selenium concentration
malignant melanoma
Prior art date
Application number
PL438563A
Other languages
English (en)
Other versions
PL438563A1 (pl
Inventor
Jan LUBIŃSKI
Jan Lubiński
Karolina Malińska
Emilia Rogoża-Janiszewska
Tadeusz Dębniak
Original Assignee
Pomorski Univ Medyczny W Szczecinie
Read Gene Spolka Akcyjna
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pomorski Univ Medyczny W Szczecinie, Read Gene Spolka Akcyjna filed Critical Pomorski Univ Medyczny W Szczecinie
Priority to PL438563A priority Critical patent/PL245253B1/pl
Publication of PL438563A1 publication Critical patent/PL438563A1/pl
Publication of PL245253B1 publication Critical patent/PL245253B1/pl

Links

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/84Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving inorganic compounds or pH

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Przedmiotem zgłoszenia jest sposób określenia ryzyka zgonu u pacjentów ze zdiagnozowanym czerniakiem złośliwym, charakteryzujący się tym, że obejmuje ilościową ocenę stężenia selenu w surowicy osoby badanej, przy czym stężenie wskazuje na blisko 6-krotnie zmniejszone ryzyko zgonu pacjenta w stosunku do podgrupy ze stężeniem selenu w surowicy zwłaszcza poniżej 76 µg/l, w przypadku występowania wartości stężenia selenu w surowicy zwłaszcza powyżej 96 µg/l.

Description

Opis wynalazku
Wstęp
Czerniak jest jednym z najbardziej agresywnych nowotworów złośliwych u ludzi. W 2020 roku na całym świecie zdiagnozowano ponad 320 000 nowych przypadków, a 57 000 osób zmarło. Dane z Global Cancer. Obserwatorzy wskazują, że w ciągu ostatniej dekady zachorowalność na czerniaka wzrosła o blisko 50%, a liczba zgonów wzrosła o 32%. Według prognoz WHO liczba zgonów związanych z czerniakiem zwiększy się o 20% w 2025 roku, a w 2040 roku wzrośnie do 74% [1]. American Cancer Society, opierając się na informacjach z bazy danych SEER, prowadzonej przez National Cancer Institute (NCI), szacuje 5-letnie przeżycie na 99% w zlokalizowanych, 66% w regionalnych i 23% w odległych stadiach SEER czerniaka. Mimo że najczęściej stosowanymi parametrami klinicznymi w prognozowaniu czerniaka są: stopień zaawansowania TNM (Tumor Node and Metastasis), klasyfikacja stopnia złośliwości według skali Clarka oraz grubość nacieku w skali Breslow, precyzyjne prognozowanie przeżycia w obrębie tych samych grup zaawansowania wymaga większej liczby parametrów. Określenie biomarkerów prognostycznych jest istotne dla wczesnego wykrywania nawrotów i włączania chorych do różnych schematów leczenia [2]. Selen jest niezbędnym składnikiem kilku głównych szlaków metabolicznych, w tym systemu obrony antyok sydacyjnej i systemu immunologicznego oraz jest włączany do 30 różnych selenoprotein [3-5]. Selen ma wpływ na proliferację komórek i apoptotyczną śmierć komórek w zdrowych i złośliwych komórkach [6]. Niskie stężenie selenu wiąże się z wysoką zachorowalnością na różnego rodzaju nowotwory [5,7], jak również ze zwiększoną śmiertelnością z powodu nowotworów [5,8,9]. Podwyższone stężenie selenu (selenoza) jest również skorelowane z częstszym występowaniem niektórych powszechnych chorób [7]. Stwierdzono również ścisłą korelację pomiędzy stężeniem selenu (Se) w surowicy krwi a ryzykiem zgonu, niezależnie od jego przyczyny (4). Vinceti M i wsp. wykazali, że długotrwała ekspozycja na nieorganiczny sześciowartościowy selen zawarty w wodzie pitnej, związany był z podwyższonym modelem śmiertelności w przypadku czerniaka [10].
Dotychczas nie prowadzono badań mających na celu ocenę wpływu stężenia selenu w surowicy na rokowanie u chorych na czerniaka. W niniejszej pracy opisujemy 10-letnie przeżycie grupy badanej ze zdiagnozowanym czerniakiem złośliwym zależnie od ich poziomu selenu w surowicy. Nieoczekiwanie stwierdzono, że istnieje korelacja pomiędzy stężeniami selenu w surowicy a ryzykiem zgonów pacjentów z czerniakiem złośliwym.
Protokół badań
Grupa badana i materiał
Do badania włączono 375 pacjentów, którzy zostali wybrani z rejestru 1500 chorych na czerniaka złośliwego (MM) z potwierdzoną histopatologicznie chorobą, znajdującego się w Międzynarodowym Centrum Nowotworów Dziedzicznych w Szczecinie, zdiagnozowanych w lat ach 20062016 w Polsce (Szczecin, Gorzów Wielkopolski, Opole, Białystok, Zielona Góra). Do badania włączono wszystkie nowo zdiagnozowane przypadki czerniaka z zabezpieczoną surowicą. Badanie zostało przeprowadzone zgodnie z Deklaracją Helsińską, a wszyscy uczestnicy podpisali świadomą pisemną zgodę przed oddaniem próbki krwi do analizy. Na przeprowadzenie badania uzyskano zgodę Komisji Bioetycznej Pomorskiego Uniwersytet u Medycznego w Szczecinie (nr KB-0012//73/10). Materiał biologiczny pobierano od pacjentów w momencie rozpoznania czerniaka złośliwego, ale przed rozpoczęciem leczenia (poza chirurgicznym usunięciem zmiany skórnej). Pacjenci, którzy wyrazili zgodę, zostali poproszeni o pozostanie na czczo przez co najmniej cztery godziny przed pobraniem krwi. Próbka krwi została pobrana do probówek certyfikowanych (Vacutainer® System, royal blue cap) w celu ilościowego oznaczania metali śladowych. Próbki krwi pobierano między godziną 8.00 a 14.00 i odwirowywano w ciągu 30 do 120 minut od pobrania w celu oddzielenia surowicy od frakcji komórkowej. Próbki surowicy p rzechowywano w temperaturze -80°C do momentu oznaczenia stężenia selenu.
PL 245253 Β1
Tabela 1 Charakterystyka grupy
Wiek (średnia, zakres) 54,6 (21-90) 64,3 (38-86)
Płeć -kobieta -mężczyzna Stopień zaawansowania klinicznego 2 3 4-5 218 (63%) 14 (45%) 126(37%)__17(55%) _ 70 (20%) 1 (3,2%) 145 (42%) 12 (39%) 129 (38%) 18 (58%)
Metoda oznaczania zawartości selenu w surowicy
1.1 Aparat
Do określenia zawartości selenu wykorzystana została technika spektrometrii mass ze wzbudzeniem w plazmie indukcyjnie sprzężonej (ICP-MS). Do wykonania pomiaru wykorzystano spektrometr mas ELAN DRC-e (PerkinElmer) oraz NexlON 350D (PerkinElmer). Wykorzystanie ICP-MS pozwala uzyskać limity detekcji < 0,1 μ-g/l. Podczas prowadzenia oznaczeń populacji nieeksponowanej zawodowo na metale i ich związki, czułość aparatury odgrywa kluczową rolę.
1.2 Przygotowanie do pomiaru
Zebrane próby surowicy, zostały rozmrożone z temperatury -80°C do temperatury pokojowej, w dniu wykonywania analiz. Każda próbka została dokładnie wymieszana przy użyciu worteksu w celu uzyskania możliwie największej homogenności materiału. Próbki surowicy zostały rozcieńczone w stosunku 1:30 (50 μΙ surowicy : 1450 μΙ buforu).
Z uwagi na specyfikę pomiaru do rozcieńczeń zastosowano roztwór wodorotlenku tetrametyloamonowego (TMAH). W celu lepszej dyspersji rozpuszczonych składników surowicy zastosowano dodatek niejonowego surfaktantu w postaci Trytonu Χ-100. Wykorzystanie tego związku nie tylko ułatwia rozpuszczanie m.in. białek ale także przyczynia się do szybszego wypłukiwania próbki z układu wprowadzenia spektrometru. Uwzględniając efekt matrycy oraz dryf aparatu użyty został standard wewnętrzny w postaci rodu (103Rh). Do uzyskania stabilności jonów metali rozpuszczonych w roztworze zastosowany został dodatek kwasu wersenowego (EDTA). Dodatkowo, z racji zawartości związków zawierających węgiel, zastosowano dodatek butanolu do wszystkich roztworów w celu niwelacji efektu związanego ze znaczną ilością węgla w badanej próbie.
1.3 Warunki pomiaru
Wszystkie oznaczenia przeprowadzono z wykorzystaniem kwadrupolowej celi reakcyjnej spektrometru wtzw. trybie DRC (ang. Dynamie Reaction Celi) aparatu Elan DRC-e oraz NexlON 350D (PerkinElmer) z tlenem jako gazem reakcyjnym.
1.4 Walidacja pomiarów
Do walidacji pomiarów zastosowano materiał referencyjny ClinCheck (Recipe, Niemcy). Jest to standard odniesienia powszechnie stosowany w spektrometrii, pozwalający na potwierdzenie precyzji, czułości i specyfiki pomiaru. Laboratorium jest członkiem programu zewnętrznej kontroli jakości (QMEQAS) organizowanym przez Centre du Toxicologie de Quebec.
Statystyka
Do analizy przeżycia zastosowano wieloczynnikowy model regresji Cox'a oraz krzywą KaplanMeier. W analizie wieloczynnikowej wzięto pod uwagę następujące czynniki ryzyka: wiek, płeć oraz stopień zaawansowania klinicznego wg skali Clarka (II, III, IV/V).
Wyniki
Analiza otrzymanych wyników wykazała korelację między stężeniem selenu w surowicy a ryzykiem zgonu pacjentów z czerniakiem złośliwym.
Pacjenci ze zdiagnozowanym czerniakiem złośliwym, u których stężenie selenu w surowicy jest wyższe niż 96,15 μg/l wykazują istotnie blisko 6-krotnie zmniejszone ryzyko zgonu w porównaniu do pacjentów ze stężeniem selenu w surowicy poniżej 76 μg/l (p: 0,02; HR: 5,83; 95%CI: 1,32-25,8). Wyniki przedstawiono w tabeli 2.
PL 245253 Β1
Tabela 2. Częstość zgonów w zależności od stężenia selenu w surowicy u pacjentów z czerniakiem złośliwym.
Cu iart
I 56,7-76,2 78 16
II 76,4-85,01 86 7
III 85,15-96,06 88 6
IV 96,15-168 92 2
wicloczynnikowy model regresji Cox'a 2 wynik istotny statystycznie
a®·
5,83 1,32-25,8 0,022
3,37 0,7-16,3 0,13
3,34 0,67-16,7 0,14
Ref. Ref. Ref.
Figura 1 stanowi załącznik do opisu zgłoszenia patentowego.
Figura 1. Prawdopodobieństwo przeżycia pacjentów z czerniakiem złośliwym w 10-letniej obserwacji.
Opisy osi: Probability ofsurvival - prawdopodobieństwo przeżycia; years - lata obserwacji Legenda - I-I V- ćwiartki I do IV
Literatura
1. Vanella V, Festino L, Vitale MG, Altano B, Ascierto PA. Emerging PD-1/PD-L1 antagonists forthe treatment of malignant melanoma. Expert Opin Emerg Drugs. 2021 Jun; 26(2):79-92.
2. Lou-Qian Z, Rong Y, Ming L, Xin Y, Feng J, Lin X. The prognostic value of epigenetic silencing of p16 gene in NSCLC patients: a systematic review and metaanalysis. PloS One. 2013; 8(1):e54970.
3. Short SP, Williams CS. Selenoproteins in Tumorigenesis and Cancer Progression. Adv Cancer Res. 2017; 136:49-83.
4. Rayman MP. Selenium in cancer prevention: a review of the evidence and mechanism of action. Proc NutrSoc. 2005 Nov; 64(4):527-42.
5. Rayman MP. Selenium and human health. Lancet Lond Engl. 2012 Mar 31; 379(9822): 1256-68.
6. Fernandes AP, Gandin V. Selenium compounds as therapeutic agents in cancer. Biochim Biophys Acta. 2015 Aug; 1850(8): 1642-60.
7. Navarro Silvera SA, Rohan TE. Tracę elements and cancer risk: a review ofthe epidemiologie evidence. Cancer Causes Control CCC. 2007 Feb; 18(1):7-27.
8. Vinceti M, Filippini T, Del Giovane C, Dennert G, Zwahlen M, Brinkman M, et al. Selenium for preventing cancer. Cochrane Database Syst Rev. 2018 Jan 29;1 :CD005195.
9. Avery JC, Hoffmann PR. Selenium, Selenoproteins, and Immunity. Nutrients. 2018 Sep 1; 10(9).
10. Vinceti M, Ballotari P, Steinmaus C, Malagoli C, Luberto F, Malavolti M, et al. Long-term mortality patterns in a residential cohort exposed to inorganic selenium in drinking water. Environ Res. 2016 Oct; 150:348-56.

Claims (2)

1. Sposób określenia ryzyka zgonu u pacjentów ze zdiagnozowanym czerniakiem złośliwym, znamienny tym, że obejmuje ilościową ocenę stężenia selenu w próbce surowicy osoby badanej, przy czym stężenie wskazuje na 5,8-krotnie zmniejszone ryzyko zgonu pacjenta w stosunku do podgrupy ze stężeniem selenu w próbce surowicy poniżej 76 μ-g/l, w przypadku występowania wartości stężenia selenu w próbce surowicy powyżej 96 jLig/l.
2. Sposób wg zastrzeżenia 1, znamienny tym, że stężenie Se w próbce surowicy oznacza się przez bezpośredni pomiar Se w próbce surowicy.
PL438563A 2021-07-22 2021-07-22 Stężenie selenu w surowicy jako marker przeżyć u chorych z czerniakiem złośliwym w Polsce PL245253B1 (pl)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL438563A PL245253B1 (pl) 2021-07-22 2021-07-22 Stężenie selenu w surowicy jako marker przeżyć u chorych z czerniakiem złośliwym w Polsce

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL438563A PL245253B1 (pl) 2021-07-22 2021-07-22 Stężenie selenu w surowicy jako marker przeżyć u chorych z czerniakiem złośliwym w Polsce

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL438563A1 PL438563A1 (pl) 2023-01-23
PL245253B1 true PL245253B1 (pl) 2024-06-10

Family

ID=84982736

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL438563A PL245253B1 (pl) 2021-07-22 2021-07-22 Stężenie selenu w surowicy jako marker przeżyć u chorych z czerniakiem złośliwym w Polsce

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL245253B1 (pl)

Also Published As

Publication number Publication date
PL438563A1 (pl) 2023-01-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Yie et al. Detection of survivin-expressing circulating cancer cells (CCCs) in peripheral blood of patients with gastric and colorectal cancer reveals high risks of relapse
Cornu et al. Urine TMPRSS2: ERG fusion transcript integrated with PCA3 score, genotyping, and biological features are correlated to the results of prostatic biopsies in men at risk of prostate cancer
Cristaudo et al. Combined serum mesothelin and plasma osteopontin measurements in malignant pleural mesothelioma
Fritz-Rdzanek et al. HE4 protein and SMRP: Potential novel biomarkers in ovarian cancer detection
Ismail et al. Pathological implications of Cx43 down-regulation in human colon cancer
Tian et al. The expression and prognostic role of IMPDH2 in ovarian cancer
Hosking et al. Considerations for the Use of the DNA Damage Marker γ‐H2AX in Disease Modeling, Detection, Diagnosis, and Prognosis
PL245253B1 (pl) Stężenie selenu w surowicy jako marker przeżyć u chorych z czerniakiem złośliwym w Polsce
Tuzun et al. Correlation of tumour markers in ascitic fluid and serum: are measurements of ascitic tumour markers a futile attempt?
Nerlich et al. Paleo-oncology and mummies
RU2521229C1 (ru) Способ прогнозирования степени злокачественности рака предстательной железы
Sánchez-Ibarra et al. Complete screening of exons 2, 3, and 4 of KRAS and NRAS genes reveals a higher number of clinically relevant mutations than food and drug administration quantitative polymerase chain reaction-based commercial kits
Russo et al. 1133p skin photoaging around the site of occurrence of primary melanoma as a clinical predictive biomarker of response to pd-1 inhibitors
Than et al. Immunoexpression of Mutated BRAF V600E Protein in Papillary Thyroid Carcinoma
Sundar et al. Biological copper levels in oral squamous cell carcinoma: A meta-analysis with insights into disease progression and prognosis
Waalkes et al. Altered expression of Akt signaling pathway parameters in prostate needle biopsies derived from benign, adjacent and cancerous tissue
Gumulec et al. Post‐treatment urinary sarcosine as a predictor of recurrent relapses in patients with prostate cancer
Shenoy et al. Age-specific Reference Range of Prostate-specific Antigen among Indian Men: A Retrospective Observational Study.
Krammes et al. State-of-the-Art Colorectal Cancer and Advanced Precancerous Lesion Screening: a Multitarget Stool DNA Test.
PL243865B1 (pl) Sposób określenia ryzyka raków u mężczyzn w zależności od stężenia ołowiu we krwi
Huang et al. High expression of 5-hydroxymethylcytosine is associated with a more favorable hepatoblastoma prognosis in Chinese patients
Gao et al. EphB3 protein is a potential ancillary diagnostic biomarker for thyroid cancers
Gaber et al. Mini review: immunohistochemistry using EGFR-mutant specific antibodies in non-small cell lung carcinoma: accuracy and reliability
Ahmed et al. Validation of ProteinBiomarker Candidates for Diagnosis of HBV induced HCC
Friis-Ottessen et al. Reduced hTERT protein levels are associated with DNA aneuploidy in the colonic mucosa of patients suffering from longstanding ulcerative colitis