PL232812B1 - Szczep Bifidobacterium animalis AMT30 i kompozycja zawierająca szczep Bifidobacterium animalis AMT30 - Google Patents
Szczep Bifidobacterium animalis AMT30 i kompozycja zawierająca szczep Bifidobacterium animalis AMT30Info
- Publication number
- PL232812B1 PL232812B1 PL419333A PL41933316A PL232812B1 PL 232812 B1 PL232812 B1 PL 232812B1 PL 419333 A PL419333 A PL 419333A PL 41933316 A PL41933316 A PL 41933316A PL 232812 B1 PL232812 B1 PL 232812B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- amt30
- strain
- bifidobacterium animalis
- bifidobacterium
- bacteria
- Prior art date
Links
- 241001134770 Bifidobacterium animalis Species 0.000 title claims description 49
- 229940118852 bifidobacterium animalis Drugs 0.000 title claims description 48
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 title claims description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 7
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 claims description 23
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 18
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 16
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 8
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 7
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 2
- 239000006071 cream Substances 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 12
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 description 11
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 10
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 9
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 9
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 9
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 9
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 9
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 9
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 8
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 7
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 7
- 201000003984 candidiasis Diseases 0.000 description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- 206010007134 Candida infections Diseases 0.000 description 6
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N Lactic Acid Natural products CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 6
- 229940095731 candida albicans Drugs 0.000 description 6
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 6
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 6
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 6
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 5
- 241000235645 Pichia kudriavzevii Species 0.000 description 5
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 241001646719 Escherichia coli O157:H7 Species 0.000 description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 4
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 4
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 4
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 4
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 3
- 241000588921 Enterobacteriaceae Species 0.000 description 3
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 3
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 3
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 3
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 3
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 3
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 3
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 2
- -1 Neomecin Chemical compound 0.000 description 2
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 2
- 230000000254 damaging effect Effects 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 2
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 2
- 238000009343 monoculture Methods 0.000 description 2
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 2
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 2
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 210000005000 reproductive tract Anatomy 0.000 description 2
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 2
- 210000002229 urogenital system Anatomy 0.000 description 2
- 210000001215 vagina Anatomy 0.000 description 2
- 210000003905 vulva Anatomy 0.000 description 2
- AYIRNRDRBQJXIF-NXEZZACHSA-N (-)-Florfenicol Chemical compound CS(=O)(=O)C1=CC=C([C@@H](O)[C@@H](CF)NC(=O)C(Cl)Cl)C=C1 AYIRNRDRBQJXIF-NXEZZACHSA-N 0.000 description 1
- OCINXEZVIIVXFU-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-3-[3-methyl-4-[4-(trifluoromethylthio)phenoxy]phenyl]-1,3,5-triazinane-2,4,6-trione Chemical compound CC1=CC(N2C(N(C)C(=O)NC2=O)=O)=CC=C1OC1=CC=C(SC(F)(F)F)C=C1 OCINXEZVIIVXFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKLPUVXBJHRFQZ-UHFFFAOYSA-N 4-amino-n-(6-chloropyrazin-2-yl)benzenesulfonamide Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1S(=O)(=O)NC1=CN=CC(Cl)=N1 QKLPUVXBJHRFQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 101100001635 Alternaria alternata AMT14 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000304886 Bacilli Species 0.000 description 1
- SPFYMRJSYKOXGV-UHFFFAOYSA-N Baytril Chemical compound C1CN(CC)CCN1C(C(=C1)F)=CC2=C1C(=O)C(C(O)=O)=CN2C1CC1 SPFYMRJSYKOXGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000901050 Bifidobacterium animalis subsp. lactis Species 0.000 description 1
- 241001608472 Bifidobacterium longum Species 0.000 description 1
- 241000186015 Bifidobacterium longum subsp. infantis Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000222173 Candida parapsilosis Species 0.000 description 1
- 241000222178 Candida tropicalis Species 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- HZZVJAQRINQKSD-UHFFFAOYSA-N Clavulanic acid Natural products OC(=O)C1C(=CCO)OC2CC(=O)N21 HZZVJAQRINQKSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000193468 Clostridium perfringens Species 0.000 description 1
- 208000002881 Colic Diseases 0.000 description 1
- 108010078777 Colistin Proteins 0.000 description 1
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 1
- GSXOAOHZAIYLCY-UHFFFAOYSA-N D-F6P Natural products OCC(=O)C(O)C(O)C(O)COP(O)(O)=O GSXOAOHZAIYLCY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000194033 Enterococcus Species 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 206010022678 Intestinal infections Diseases 0.000 description 1
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 description 1
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 description 1
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 description 1
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 description 1
- HLFSDGLLUJUHTE-SNVBAGLBSA-N Levamisole Chemical compound C1([C@H]2CN3CCSC3=N2)=CC=CC=C1 HLFSDGLLUJUHTE-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- OJMMVQQUTAEWLP-UHFFFAOYSA-N Lincomycin Natural products CN1CC(CCC)CC1C(=O)NC(C(C)O)C1C(O)C(O)C(O)C(SC)O1 OJMMVQQUTAEWLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241000235048 Meyerozyma guilliermondii Species 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 1
- 229930195708 Penicillin V Natural products 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 241000607768 Shigella Species 0.000 description 1
- 206010042938 Systemic candida Diseases 0.000 description 1
- 208000005448 Trichomonas Infections Diseases 0.000 description 1
- 241000224527 Trichomonas vaginalis Species 0.000 description 1
- 206010044620 Trichomoniasis Diseases 0.000 description 1
- 229930194936 Tylosin Natural products 0.000 description 1
- 239000004182 Tylosin Substances 0.000 description 1
- 206010046914 Vaginal infection Diseases 0.000 description 1
- KCJJINQANFZSAM-HZDSEHBESA-N [(2s,3s,4r,6s)-6-[(2r,3s,4r,5r,6r)-6-[[(4r,5s,6s,7r,9r,11e,13e,15r,16r)-4-acetyloxy-16-ethyl-15-[[(2r,3r,4r,5r,6r)-5-hydroxy-3,4-dimethoxy-6-methyloxan-2-yl]oxymethyl]-5,9,13-trimethyl-2,10-dioxo-7-(2-oxoethyl)-1-oxacyclohexadeca-11,13-dien-6-yl]oxy]-4-(d Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)O[C@H]([C@@H]([C@H]1N(C)C)O)O[C@@H]1[C@@H](C)[C@H](OC(C)=O)CC(=O)O[C@@H]([C@H](/C=C(\C)/C=C/C(=O)[C@H](C)C[C@@H]1CC=O)CO[C@H]1[C@@H]([C@H](OC)[C@H](O)[C@@H](C)O1)OC)CC)[C@H]1C[C@@](C)(O)[C@@H](OC(=O)CC(C)C)[C@H](C)O1 KCJJINQANFZSAM-HZDSEHBESA-N 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960003683 amprolium Drugs 0.000 description 1
- 230000009604 anaerobic growth Effects 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- BGWGXPAPYGQALX-ARQDHWQXSA-N beta-D-fructofuranose 6-phosphate Chemical compound OC[C@@]1(O)O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H]1O BGWGXPAPYGQALX-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 229940004120 bifidobacterium infantis Drugs 0.000 description 1
- 229940009289 bifidobacterium lactis Drugs 0.000 description 1
- 229940009291 bifidobacterium longum Drugs 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229960003324 clavulanic acid Drugs 0.000 description 1
- HZZVJAQRINQKSD-PBFISZAISA-N clavulanic acid Chemical compound OC(=O)[C@H]1C(=C/CO)/O[C@@H]2CC(=O)N21 HZZVJAQRINQKSD-PBFISZAISA-N 0.000 description 1
- 229960003346 colistin Drugs 0.000 description 1
- 230000000112 colonic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 230000008260 defense mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000002781 deodorant agent Substances 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000003113 dilution method Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 229960003722 doxycycline Drugs 0.000 description 1
- XQTWDDCIUJNLTR-CVHRZJFOSA-N doxycycline monohydrate Chemical compound O.O=C1C2=C(O)C=CC=C2[C@H](C)[C@@H]2C1=C(O)[C@]1(O)C(=O)C(C(N)=O)=C(O)[C@@H](N(C)C)[C@@H]1[C@H]2O XQTWDDCIUJNLTR-CVHRZJFOSA-N 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 229960000740 enrofloxacin Drugs 0.000 description 1
- 210000001842 enterocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 229960003760 florfenicol Drugs 0.000 description 1
- CPEUVMUXAHMANV-UHFFFAOYSA-N flubendazole Chemical compound C1=C2NC(NC(=O)OC)=NC2=CC=C1C(=O)C1=CC=C(F)C=C1 CPEUVMUXAHMANV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004500 flubendazole Drugs 0.000 description 1
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000004153 glucose metabolism Effects 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000004251 human milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000020256 human milk Nutrition 0.000 description 1
- PJBQYZZKGNOKNJ-UHFFFAOYSA-M hydron;5-[(2-methylpyridin-1-ium-1-yl)methyl]-2-propylpyrimidin-4-amine;dichloride Chemical compound Cl.[Cl-].NC1=NC(CCC)=NC=C1C[N+]1=CC=CC=C1C PJBQYZZKGNOKNJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 230000000622 irritating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 description 1
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 description 1
- 229960001614 levamisole Drugs 0.000 description 1
- 229960005287 lincomycin Drugs 0.000 description 1
- OJMMVQQUTAEWLP-KIDUDLJLSA-N lincomycin Chemical compound CN1C[C@H](CCC)C[C@H]1C(=O)N[C@H]([C@@H](C)O)[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](SC)O1 OJMMVQQUTAEWLP-KIDUDLJLSA-N 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000004066 metabolic change Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 210000000110 microvilli Anatomy 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- JORAUNFTUVJTNG-BSTBCYLQSA-N n-[(2s)-4-amino-1-[[(2s,3r)-1-[[(2s)-4-amino-1-oxo-1-[[(3s,6s,9s,12s,15r,18s,21s)-6,9,18-tris(2-aminoethyl)-3-[(1r)-1-hydroxyethyl]-12,15-bis(2-methylpropyl)-2,5,8,11,14,17,20-heptaoxo-1,4,7,10,13,16,19-heptazacyclotricos-21-yl]amino]butan-2-yl]amino]-3-h Chemical compound CC(C)CCCCC(=O)N[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)O)CN[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]1CCNC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCN)NC1=O.CCC(C)CCCCC(=O)N[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)O)CN[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]1CCNC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCN)NC1=O JORAUNFTUVJTNG-BSTBCYLQSA-N 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 210000001331 nose Anatomy 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 description 1
- 210000003695 paranasal sinus Anatomy 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 229940056367 penicillin v Drugs 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 1
- BPLBGHOLXOTWMN-MBNYWOFBSA-N phenoxymethylpenicillin Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)COC1=CC=CC=C1 BPLBGHOLXOTWMN-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- XDJYMJULXQKGMM-UHFFFAOYSA-N polymyxin E1 Natural products CCC(C)CCCCC(=O)NC(CCN)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)NC(CCN)C(=O)NC1CCNC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C(CCN)NC(=O)C(CCN)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CCN)NC1=O XDJYMJULXQKGMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KNIWPHSUTGNZST-UHFFFAOYSA-N polymyxin E2 Natural products CC(C)CCCCC(=O)NC(CCN)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)NC(CCN)C(=O)NC1CCNC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C(CCN)NC(=O)C(CCN)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CCN)NC1=O KNIWPHSUTGNZST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009374 poultry farming Methods 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000001902 propagating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 210000004994 reproductive system Anatomy 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 238000007493 shaping process Methods 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 238000007711 solidification Methods 0.000 description 1
- 230000008023 solidification Effects 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 229960004885 tiamulin Drugs 0.000 description 1
- UURAUHCOJAIIRQ-QGLSALSOSA-N tiamulin Chemical compound CCN(CC)CCSCC(=O)O[C@@H]1C[C@@](C)(C=C)[C@@H](O)[C@H](C)[C@@]23CC[C@@H](C)[C@]1(C)[C@@H]2C(=O)CC3 UURAUHCOJAIIRQ-QGLSALSOSA-N 0.000 description 1
- 229960000223 tilmicosin Drugs 0.000 description 1
- JTSDBFGMPLKDCD-XVFHVFLVSA-N tilmicosin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)[C@H](O)CC(=O)O[C@@H]([C@H](/C=C(\C)/C=C/C(=O)[C@H](C)C[C@@H]1CCN1C[C@H](C)C[C@H](C)C1)CO[C@H]1[C@@H]([C@H](OC)[C@H](O)[C@@H](C)O1)OC)CC)[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](N(C)C)[C@H]1O JTSDBFGMPLKDCD-XVFHVFLVSA-N 0.000 description 1
- 229960000898 toltrazuril Drugs 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
- IEDVJHCEMCRBQM-UHFFFAOYSA-N trimethoprim Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=CC(CC=2C(=NC(N)=NC=2)N)=C1 IEDVJHCEMCRBQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001082 trimethoprim Drugs 0.000 description 1
- 229960004059 tylosin Drugs 0.000 description 1
- WBPYTXDJUQJLPQ-VMXQISHHSA-N tylosin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)O[C@H]([C@@H]([C@H]1N(C)C)O)O[C@@H]1[C@@H](C)[C@H](O)CC(=O)O[C@@H]([C@H](/C=C(\C)/C=C/C(=O)[C@H](C)C[C@@H]1CC=O)CO[C@H]1[C@@H]([C@H](OC)[C@H](O)[C@@H](C)O1)OC)CC)[C@H]1C[C@@](C)(O)[C@@H](O)[C@H](C)O1 WBPYTXDJUQJLPQ-VMXQISHHSA-N 0.000 description 1
- 235000019375 tylosin Nutrition 0.000 description 1
- 229960002387 tylvalosin Drugs 0.000 description 1
- 241001148471 unidentified anaerobic bacterium Species 0.000 description 1
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 1
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 1
- 239000011691 vitamin B1 Substances 0.000 description 1
- 235000010374 vitamin B1 Nutrition 0.000 description 1
- 230000036642 wellbeing Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest nowy szczep Bifidobacterium animalis AMT30 i kompozycja zawierająca nowy szczep Bifidobacterium animalis AMT30.
Rodzaj Bifidobacterium (łac. „bifidus” - rozdwojony) - po raz pierwszy wyizolowane i opisane w latach 1899-1900 przez Tissiera - to Gram-dodatnie pałeczki o nieregularnej morfologii (Krieg N. R., Holt J. G., Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology, Wiliams and Wilkins, 1984, Vol. 2). Osiągają rozmiary w przedziale 0,5-1,3x1,5-8 μm. Mogą być proste lub rozdwojone. Różnią się kształtem w zależności od gatunku i szczepu oraz warunków środowiska w jakim żyją. Komórki bakterii świeżo izolowanych z przewodu pokarmowego lub podłoży namnażających, w optymalnych warunkach inkubacji wykazują zwykle charakterystyczne formy X, Y lub V, ale także maczugowate lub łopatkowate, z reguły o zaokrąglonych końcach. Występują pojedynczo lub w skupiskach, nie poruszają się i nie tworzą form przetrwalnych.
Bifidobakterie wymagają ściśle beztlenowych warunków wzrostu (Muller G., Podstawy Mikrobiologii żywności WNT, 1990, Warszawa). Namnażają się w temperaturze 37-41°C, w środowisku o pH w przedziale 6,0-7,0. Wytwarzają podstawowe metabolity - kwas mlekowy i kw. octowy. Wykazują aktywność wewnątrzkomórkowego enzymu fosfoketolazy-fruktozo-6-fosforanu (FKF6F). Enzym ten uczestniczy w metabolizmie glukozy w specyficznym szlaku przemian enzymatycznych - tzw. „szlaku bifidowym”. Jest to enzym charakterystyczny dla rodzaju Bifidobacterium - na jego podstawie można je identyfikować do rodzaju.
Naturalnym środowiskiem występowania bifidobakterii są tak zwane krypty: 0,7-milimetrowe, gęsto upakowane zagłębienia w nabłonku błony śluzowej jelita grubego (Saloff-Coste C. J., Bifidobacteria. Danone World Newsletter, 1997, 16, 1-9; Schlegel H. G., Mikrobiologia ogólna, 2000, PWN, Warszawa). Komórki bakterii wykazują adhezję do mikrokosmków na powierzchni enterocytów nie powodując ich uszkodzenia i do pokrywającego komórki nabłonkowe śluzu.
Bifidobakterie pełnią wiele korzystnych funkcji, jak udział w procesach trawienia i metabolizmu, synteza witamin: B1, B2, B6, B12, kwasu nikotynowego i foliowego, ochrona przewodu pokarmowego przed kolonizacją patogenów, hamowanie wzrostu bakterii gnilnych i chorobotwórczych (Hoover D. G., Bifidobacteria: activity and potential benefits, Food Technol., 1993, 47, 120-124; Gibson G. R., Wang X., Regulatory effects of bifidobacteria on the growth of other colonic bacteria, J. Appl. Bacte-riol., 1994, 77, 412-420; Gomes A. M. P., Malcata F. X., Bifidobacterium ssp. and Lactobacillus aci-dophilus: biological, biochemical, technological and therapeutical properties relevant for use as probio-tics, 1999, Trends in Food Science and Technology, 10, 139-157).
Rozwój i ostateczna stabilizacja mikroekosystemu przewodu pokarmowego kształtuje się w wyniku równowagi pomiędzy mikroflorą przewodu pokarmowego, fizjologicznym oddziaływaniem organizmu, dietą oraz czynnikami zewnętrznymi (Biedrzycka E., Markiewicz L. H, Bielecka M., Siwicki A. K., 2007, Kształtowanie mikroekosystemu przewodu pokarmowego, Sterowanie rozwojem układu pokarmowego u nowonarodzonych ssaków, pod red. Zabielskiego R., Wydawnictwo Rolne i Leśne, 5, 126-140). Ważnym i decydującym czynnikiem różnicującym mikroflorę niemowląt jest sposób karmienia. Mikroflora niemowląt karmionych mlekiem matki już w ciągu pierwszego tygodnia w 95% zostaje zdominowana przez bifidobakterie, podczas gdy bakterie z rodzaju Lactobacillus stanowią niecały 1% populacji. Stosunek populacji bakterii z rodzaju Bifidobacterium do bakterii z rodziny Enterobacteriaceae wynosi 1000:1. Natomiast mikroflorę niemowląt karmionych sztucznie charakteryzuje dłuższa obecność większych liczebnie populacji bakterii względnie beztlenowych, w tym z rodziny Enterobacteriaceae i rodzaju Enterococcus; stosunek populacji bifidobakterii do Enterobacteriaceae wynosi 1:10. Bifidobakterie nie wytwarzają gazowych i drażniących produktów fermentacji zmniejszając tym samym ryzyko występowania kolki jelitowej i innych zaburzeń pokarmowych. Ponadto, produkowane przez te bakterie kwasy octowy i mlekowy obniżają pH treści jelita grubego, hamując wzrost bakterii patogennych takich jak: Escherichia coli, Shigella, Clostridium perfringens.
Należy, więc zwrócić uwagę na bardzo ważną rolę, jaką pełnią bifidobakterie w prawidłowym kształtowaniu się w początkowym etapie mikroekosystemu przewodu pokarmowego oraz na fakt, że w późniejszym okresie życia liczebność populacji bifidobakterii ulega poważnej redukcji, co skutkuje przyśpieszeniem procesów starzenia, pogorszeniem zdrowia i samopoczucia. Za zasadne uważa się suplementację diety ludzi i zwierząt bakteriami należącymi do szczepu Bifidobacterium animalis o potwierdzonych właściwościach bójczych wobec patogennych bakterii i grzybów.
Naturalna mikroflora układu moczowo-płciowego stanowi swoisty ochronny mikroekosystem (Boris S., Suarez J. A., Vazquez F., Barbes C., Adherence of Human Vaginal Lactobacilli to Vaginal Epithelial Cells and Interaction with Uropathogens, Infection and Immunity, May 1998, Vol. 66, No. 5, 1985-1989). Dominują w nim bakterie z rodzaju Lactobacillus, które można określić mianem „strażników higieny”. Odżywiają się one glikogenem ulegających autolizie komórek nabłonka pochwy, a produkty ich metabolizmu zakwaszają środowisko, uniemożliwiając rozwój bakterii chorobotwórczych. Patogeny dróg moczowo-płciowych pochodzą głównie z przewodu pokarmowego, kolonizują najpierw regiony okołocewkowe, rozszerzając się następnie w kierunku pęcherza i powodując tzw. „bakterio-mocz” (Servin A. L., Antagonistic activities of lactobacilli and bifidobacteria against microbial patho-gens, 2004, FEMS Microbiology Reviews, Vol. 28, 405-440). Mikroorganizmy te charakteryzują się wirulencją, która zwiększa ich oporność wobec efektywnych w normalnych warunkach mechanizmów obronnych gospodarza. Jedną z najczęstszych przyczyn zaburzenia prawidłowego ekosystemu pochwy są kuracje antybiotykowe, szczególnie z udziałem antybiotyków o szerokim spektrum działania (Haberek M., Mierzyński R., Leszczyńska-Gorzelak B., Oleszczuk J., Kandydoza pochwy i sromu (VVC), Zakażenia, 2007, t. 2, 78-81). Niszczą one nie tylko mikroflorę patogenną, ale i przyjazną organizmowi. Pozbawione ochrony środowisko zasiedlają najczęściej grzyby, powodując stany zapalne i odkwaszanie, co sprzyja rozwojowi innych szkodliwych mikroorganizmów. Szeroko badane i już stosowane w stanach zapalnych dróg moczowo-płciowych profilaktyczne i lecznicze kultury Lactobacillus nie wykazują antagonizmu wobec Candida najczęściej infekujących drogi rodne (Haberek M., Mierzyński R., Leszczyńska-Gorzelak B., Oleszczuk J., Kandydoza pochwy i sromu (VVC), Zakażenia, 2007, t. 2, 78-81). Grzyby są organizmami kwasolubnymi, dlatego wytwarzany przez Lactobacillus kwas mlekowy i obniżony poziom pH nie są dla nich czynnikiem hamującym. Potwierdzają to obserwowany w praktyce rozwój drożdży i pleśni w fermentowanych produktach zarówno pochodzenia roślinnego jak i zwierzęcego. W ostatnich latach notuje się wzrost liczby zakażeń grzybami z rodzaju Candida u zwierząt hodowlanych i gospodarskich oraz u tzw. małych zwierząt (Biegańska M. J., Zakażenia grzybami z rodzaju Candida u zwierząt, Mikologia Lekarska, 2008, t. 15, nr 3, 155-159). Patogenem najczęściej izolowanym od psów, kotów, koni i bydła jest Candida albicans, a wśród pozostałych gatunków wymienia się m.in. C. guilliermondii, C. krusei, C. tropicalis i C. parapsilosis. Zmiany kliniczne obserwowane w przebiegu kandydozy u zwierząt swoim umiejscowieniem i nasileniem przypominają grzybice opisywane u ludzi. U zwierząt dominują zakażenia przewodu pokarmowego, układu rozrodczego i układu moczowego oraz gruczołu mlekowego, a także skóry. Stosunkowo rzadsze są kandydozy nosa i zatok przynosowych. Spotyka się także nieliczne przypadki kandydozy narządowej i uogólnionej, choć te ostatnie dotyczą zwykle zwierząt z upośledzoną odpornością. Candida albicans i tzw. non-albicans Candida są przyczyną ciężkich uogólnionych zakażeń, w skrajnych przypadkach prowadzących do śmierci zwierzęcia.
Według wynalazków opatentowanych w Polsce, PL212096 i PL208421 oraz zgłoszenia P.406050 szczepy z rodzaju Bifidobacterium mogą pełnić zasadniczą rolę zwiększającą odporność organizmu na wszelkiego rodzaju infekcje, w tym głównie infekcje jelitowe. Mając zdolność przeżycia w przewodzie jelitowym przez określony czas w pH 5,5-6,5 wytwarzając i wydzielając glutaminę i uczestnicząc w przemianie amoniaku wpływają na przemiany metaboliczne w przewodzie jelitowym. Mogą również wpływać na układ immunologiczny i nerwowy. Podobne obserwacje były podstawą do udzielenia patentów dla Bifidobacterium infantis PL212096, Bifidobacterium longum PL208421, Bifidobacterium lactis UA84513 czy EP1840205.
Istotą wynalazku jest nowy szczep Bifidobacterium animalis AMT30 oraz kompozycja zawierająca nowy szczep Bifidobacterium animalis AMT30 lub kompozycja z bakteriami Lactobacillus plantarum AMT14 i nośnik, wyróżniająca się wybitnymi właściwościami probiotycznymi ze szczególnym uwzględnieniem antagonizmu wobec grzybów i bakterii potencjalnie patogennych i/lub patogennych dla ludzi i zwierząt. Analizując unikatowe właściwości szczepu Bifidobacterium animalis AMT30 należy stwierdzić, że może być on stosowany do wytwarzania kremów i maści, preparatów/produktów para-farmaceutycznych, farmaceutycznych, spożywczych, dodatków do żywności i wody dla ludzi i zwierząt oraz jako preparat dezodorujący.
Zdolność szczepu Bifidobacterium animalis AMT30 do hamowania wzrostu i następnie redukcji populacji grzybów z rodzaju Candida jest unikatowa, szczególnie w sytuacji braku takich właściwości u innych bakterii. Dowodzą tego badania kliniczne przeprowadzone u kobiet z różnymi schorzeniami dróg rodnych, takimi jak: infekcje bakteryjne, kandydozy, rzęsistkowice. Wyizolowane zarówno od zdrowych jak i chorych kobiet szczepy Lactobacillus produkujące H2O2 mogły chronić przed infekcjami bakteryjnymi, ale były nieskuteczne w przypadku zarażenia drożdżakami Candida i rzęsistkiem pochwowym (Trichomonas vaginalis) (Mijać V. D., Dukić S. V., Opavski N. Z., Dukić M. K., Ranin L. T., Hydrogen peroxide producing lactobacilli in women with vaginal infections, 2006, European Journal of Obstetrics & Gynecology and Reproducive Biology, 129, 69-76). Dane te potwierdzają celowość zastosowania w leczeniu zarażeń grzybiczych i bakteryjnych probiotycznych bakterii Bifidobacterium animalis AMT30.
Wynalazek dotyczy kompozycji szczepów bakteryjnych Bifidobacterium animalis. Oprócz dodatkowych korzyści związanych z działaniem kwasu mlekowego wytwarzanego przez te bakterie mogą one chronić bifidobakterie przed szkodliwym wpływem tlenu.
Szczep Bifidobacterium animalis AMT30 został zdeponowany w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów w Instytucie Immunologii i Terapii Doświadczalnej Polskiej Akademii Nauk we Wrocławiu -PCM, nr depozytu B/00109.
Oznaczenie przynależności gatunkowej szczepu Bifidobacterium animalis AMT30. Identyfikacja szczepu.
Szczep Bifidobacterium animalis AMT30 został wyizolowany ze stolca dorosłego człowieka. Szczep został zdeponowany zgodnie z traktatem Budapesztańskim w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów (PCM) w Instytucie Immunologii i Terapii Doświadczalnej Polskiej Akademii Nauk, Wrocław.
Depozyt złożono w dniu 31 -05-2016 r. i nadano numer B/00109.
Izolacja szczepu Bifidobacterium animalis AMT30
Izolację szczepu prowadzono metodą skryningu wieloetapowego. Procedurę izolacji szczepu z rodzaju Bifidobacterium przeprowadzono na podstawie wysiewów rozcieńczeń dziesiętnych próbki materiału na podłoże Garche'a. Płytki inkubowano w temp. 37°C/72 h w warunkach beztlenowych (anaerostat z wkładem GasPack AN0025A, Oxoid). Kolonie bakterii potencjalnie należących do rodzaju Bifidobacterium namnażano w płynnym podłożu Garche'a i inkubowano w temp. 37°C/24 h w warunkach beztlenowych (anaerostat z wkładem GasPack AN0025A, Oxoid).
Procedurę namnażania i wysiewów prowadzono do momentu uzyskania czystych kultur bakterii zakwalifikowanych na podstawie obserwacji mikroskopowych do rodzaju Bifidobacterium.
Potwierdzenie właściwości wyizolowanego szczepu na poziomie genetycznym (RAPDi/lub rep-PCR). W celu izolacji genomowego DNA zastosowano zestaw odczynnikowy Bacterial & Yeast Genomic DNA Purification Kit firmy Eurx (Gdańsk) i procedurę oczyszczania przeznaczoną dla bakterii Gram-dodatnich. Jakość wyizolowanego DNA sprawdzano elektroforetycznie (1% agaroza, 0,5xTBE, 100 V, 30 min.)
Typowanie izolatów przeprowadzono stosując opartą na technice amplifikacji metodę rep-PCR ze starterem (GTG)5 oraz metodę RAPD (losową amplifikację polimorficznych odcinków) ze starterem S1 (CGACGTCATC). Zastosowana procedura była identyczna z opisaną wcześniej (Markiewicz L. H., Biedrzycka E., Wasilewska E., Bielecka M., Rapid molecular identification and characteristics of Lactobacillus strains. Folia Microbiol., 2010, 55 (5), 481-488).
Identyfikacja wyizolowanego szczepu Bifidobacterium animalis AMT30 poprzez sekwen-cjonowanie fragmentu genu kodującego 16S rRNA
Dokonanie identyfikacji wyizolowanego szczepu poprzez sekwencjonowanie fragmentu genu kodującego 16S rRNA o długości przynajmniej 500 par wykonano w etapach: 1) Izolacja DNA z kolonii na szalkach.
Wykonano izolację materiału genetycznego (DNA) z kolonii mikroorganizmów dostarczonych na szalkach. DNA izolowano metodą z wykorzystaniem złoża CHELEX (Biorad) i dodatkiem enzymów niezbędnych do strawienia ściany komórkowej. 2) Reakcja PCR z wykorzystaniem specyficznych starterów i sekwencjonowanie matryc PCR. W celu potwierdzenia występowania bakterii w badanej próbce wykonano amplifikację za pomocą PCR fragmentów 16S rDNA z wykorzystaniem specyficznych starterów na matrycy DNA wyizolowanej z kolonii.
Uzyskano pozytywny wynik amplifikacji. Produkty PCR oczyszczono i przeprowadzono sekwencjonowanie z użyciem zestawu: BigDye Terminator Mix v3.1 i analizatora genetycznego AB13730xl oraz specyficznych starterów. Uzyskane odczyty (odczyty ze specyficznych dla bakteryjnego 16S rDNA starterów: 27F i 1492R) złożono w odpowiednie kontigi uzyskując sekwencję konsensusową. 3) Porównanie otrzymanych sekwencji z bazą danych NCBI.
Uzyskane konsensusy sekwencji porównano z bazą danych NCBI - GeneBank używając programu BLAST.
Analiza porównawcza z sekwencjami DNA zdeponowanymi w Banku genów (NCBI) wykazała, że analizowana sekwencja jest identyczna z sekwencją Bifidobacterium animalis.
Badanie in vitro antagonistycznego działania szczepu Bifidobacterium animalis AMT30 wobec czynników patogennych przewodu pokarmowego i układu moczowo-płciowego
Badanie antagonistycznych właściwości szczepu Bifidobacterium animalis AMT30 wobec patogenów: Escherichia coli O157:H7 (szczep enterokrwotoczny), Candida albicans 637, Candida kru-sei 8, przeprowadzono w hodowlach wspólnych w mleku hydrolizowanym (10% mleko regenerowane z odtłuszczonego mleka w proszku, hydrolizowane pankreatyną). Użyte w badaniach in vitro szczepy patogenne pochodziły z Instytutu Rozrodu Zwierząt i Badań Żywności Polskiej Akademii Nauk w Olsztynie. Natomiast szczep Bifidobacterium animalis AMT30 pochodzi z kolekcji własnej mikroorganizmów firmy PROBIOS Sp. z o.o. Szczepy patogenne przechowywano w postaci zamrożonej w temperaturze -80°C i bezpośrednio przed badaniem uaktywniano przez dwukrotny pasaż w mleku hydrolizowanym.
Hodowle wspólne (próby badane) inokulowano liofilizowanym szczepem Bifidobacterium animalis AMT30 na poziomie 109 jednostek tworzących kolonie/ml (opisanych dalej powszechnie przyjętym polskim skrótem jtk/ml) i aktywną monokulturą szczepu patogennego z gatunków Escherichia coli O157:H7, Candida albicans 637, Candida krusei 8 w ilości 105 jtk/ml. Próbami kontrolnymi w przeprowadzonym doświadczeniu były pojedyncze szczepy mikroorganizmów patogennych (Escherichia coli O157:H7, Candida albicans 637, Candida krusei 8) i monokultura Bifidobacterium animalis AMT30 z zastosowaniem poziomu inokulum oraz płynnego podłoża jak w hodowlach wspólnych.
Hodowle wspólne i pojedyncze przygotowywano w czterech równoległych probówkach w trzech powtórzeniach. Inkubację prowadzono w warunkach beztlenowych w temp. 37°C przez 0 (tzw. próba zerowa określająca inokulum) 24, 48 i 72 godziny. Po inkubacji określano liczbę żywych komórek bakterii Bifidobacterium animalis AMT30 i patogenów we wspólnych hodowlach i w kontrolnych, metodą płytkową z zastosowaniem odpowiednich podłoży agarowych (Tabela 1).
Badany materiał rozcieńczano 1% wodą peptonową z zastosowaniem metody seryjnych dziesięciokrotnych rozcieńczeń i wysiewano na dno płytki Petriego, następnie zalewano upłynnioną pożywką agarową o temperaturze około 45°C. Bezpośrednio po zestaleniu podłoża, płytki odwracano dnem do góry i inkubowano w temperaturze 37°C przez 24 lub 48 godzin w warunkach tlenowych lub beztlenowych. Warunki hodowli podano w tabeli 1. Po inkubacji zliczano kolonie bakterii w hodowlach wspólnych i porównywano z liczbą bakterii w hodowlach kontrolnych (pojedynczych).
Tabela 1
Warunki hodowli badanych szczepów bakterii
W przeprowadzonych badaniach in vitro stwierdzono całkowitą redukcję liczby bakterii entero-krwotocznego szczepu Escherichia coli O157:H7 oraz grzybów Candida albicans 637 i Candida kru-sei 8 w czasie 72-godzinnej inkubacji hodowli wspólnej z Bifidobacterium animalis AMT30. Wyniki podano w tabeli 2.
Tabela 2
Hamowanie wzrostu patogennych bakterii i grzybów przez Bifidobacterium animalis AMT30
Nb* - nieobecne w 1 ml hodowli wspólnej z Bifidobacterium animalis AMT30
Dane uzyskane na podstawie hamowania wzrostu szczepów patogennych pozwalają na stwierdzenie, że wyselekcjonowany szczep z rodzaju Bifidobacterium ma właściwości antagonistyczne wobec wybranych szczepów bakterii i grzybów patogennych.
Oznaczenie przeżywalności szczepu Bifidobacterium animalis AMT30 w niskim pH oraz w obecności soli żółciowych
Przeżywalność szczepu Bifidobacterium animalis AMT30 w niskim pH oznaczono przez obniżenie kwasowości hodowli Bifidobacterium animalis AMT30, będącej w stacjonarnej fazie wzrostu do wartości pH równej 3. Natomiast oznaczenia przeżywalności szczepu Bifidobacterium animalis AMT30 w obecności soli kwasów żółciowych, oznaczano na początku podwyższając wartości pH hodowli Bifidobacterium animalis AMT30 do wartości równej 6, a następnie dodawano sole żółciowe w ilości stanowiącej 3% hodowli. Oznaczenie przeżywalności szczepu Bifidobacterium animalis AMT30 w niskim pH wykonano przed obniżeniem pH hodowli (próba kontrolna), tuż po obniżeniu pH hodowli do wartości równej 3 (tzw. 0 minuta), a następnie po 40 i 180 minutach inkubacji w temperaturze 37°C w warunkach beztlenowych. Przeżywalność Bifidobacterium animalis AMT30 w obecności soli żółci wykonano przed dodaniem soli żółci (próba kontrolna), tuż po dodaniu soli żółci tzw. 0 minuta oraz po 1, 3 i 6 godzinach inkubacji w temperaturze 37°C w warunkach beztlenowych. Żywe komórki bakterii Bifidobacterium animalis AMT30 oznaczono w jednostkach tworzących kolonie (jtk/ml) z zastosowaniem techniki płytek lanych. Przeżywalność szczepu Bifidobacte-
rium animalis AMT30 wyrażono w procentach w odniesieniu do liczby komórek Bifidobacterium animalis AMT30 po 180 minutach inkubacji w przypadku oznaczenia przeżywaIności w pH równym 3, po 6 godzinach w przypadku oznaczenia liczebności Bifidobacterium animalis AMT30 w obecności soli żółci, w porównaniu odpowiednio do liczebności szczepu Bifidobacterium animalis AMT30 w kontroli.
Tabela 3
Przeżywalność szczepu Bifidobacterium animalis AMT30 w pH=3
Tabela 4
Przeżywalność szczepu Bifidobacterium animalis AMT30 w obecności 3% soli kwasów żółciowych
Badany szczep Bifidobacterium animalis AMT30 wykazywał 100% przeżywalność w niskim pH 3 oraz 94% przeżywalność w obecności soli żółci w 3% stężeniu w podłożu. Wykazano dużą oporność szczepu Bifidobacterium animalis AMT30 na niskie pH jak i na sole żółci, co świadczy o przystosowaniu tego szczepu do warunków panujących w przewodzie pokarmowym.
Określenie zdolności wzrostu Bifidobacterium animalis AMT30 w obecności wybranych antybiotyków najczęściej stosowanych w terapii zwierząt
Badanie zdolności wzrostu Bifidobacterium animalis AMT30 w obecności wybranych 20 antybiotyków wykonywane było przy zastosowaniu metody hodowli wspólnych. W tym celu płynną pożywkę Garche’a inokulowano szczepem Bifidobacterium animalis AMT30 w ilości 4,9 x106 jednostek tworzących kolonie/ml i jednym z 20 antybiotyków w stężeniu odpowiadającym dawce antybiotyku stosowanej u zwierząt w przeliczeniu na kilogram masy ciała. Hodowlę prowadzono w trzech równoległych probówkach w warunkach beztlenowych w temperaturze 37°C przez 24 godziny. Dodatkowo równolegle prowadzono hodowlę kontrolną badanego szczepu bez dodatku badanych antybiotyków. Liczbę żywych komórek oznaczano bezpośrednio po inokulacji i po 24 godzinach. Inkubację bakterii na płytkach Petriego prowadzono w temperaturze 37°C przez 48 godzin w warunkach beztlenowych (anaerostat z wkładem GasPack AN0025A, Oxoid). Wyniki przedstawia Tabela 5.
Tabela 5
Określenie zdolności wzrostu Bifidobacterium animalis AMT30 w obecności wybranych antybiotyków najczęściej stosowanych w terapii leczenia zwierząt
Bifidobacterium animalis AMT30 wykazał unikatowe, szerokie spektrum antybiotykooporności wobec badanych antybiotyków. W obecności 7 (Kolistyna, Toltrazuryl, Amprolium, Lewamizol, Fluben-dazol, Neomecyna, Sulfachloropirazyna sodowa) spośród 20 badanych antybiotyków stwierdzono znakomitą zdolność namnażania się szczepu AMT30 w odniesieniu do liczebności jaką szczep osiągnął w hodowli kontrolnej. Natomiast w obecności Trimetoprim/sulfmetoksazolu, Tylmykozyny i Tylo-zyny liczebność Bifidobacterium animalis AMT30 utrzymała się na poziomie inokulum. W przypadku hodowli wspólnych z Tiamuliną, Enrofloksacyną, Florfenikolem, Amoksycykliną, Doksycykliną, Amok-
sycyklianą + kwasem klawulanowym, Fenoksymetylopenicyliną, Linkomycyną i Tylwalozyną odnotowano spadek liczby bakterii szczepu AMT30 od 1 do 3 rzędów wielkości w porównaniu do kontroli. Bifidobacterium animalis AMT30 wykazał również antybiotykooporność wobec najczęściej stosowanych antybiotyków w hodowli drobiu.
Claims (2)
1. Szczep bakterii Bifidobacterium animalis AMT30 zdeponowany wg numeru PCM B/00109 w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów.
2. Kompozycja przeznaczona do wytwarzania kremów i maści, preparatów/produktów parafar-maceutycznych, farmaceutycznych, spożywczych oraz dodatków do żywności i wody dla ludzi i zwierząt składająca się ze szczepu bakterii, nośnika i substancji wypełniającej, znamienna tym, że jako szczep bakteryjny zawiera Bifidobacterium animalis AMT30, PCM B/00109 określony w zastrzeżeniu 1 w ilości od 103 do 1013 jednostek tworzących kolonie/g.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL419333A PL232812B1 (pl) | 2016-11-02 | 2016-11-02 | Szczep Bifidobacterium animalis AMT30 i kompozycja zawierająca szczep Bifidobacterium animalis AMT30 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL419333A PL232812B1 (pl) | 2016-11-02 | 2016-11-02 | Szczep Bifidobacterium animalis AMT30 i kompozycja zawierająca szczep Bifidobacterium animalis AMT30 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL419333A1 PL419333A1 (pl) | 2018-05-07 |
| PL232812B1 true PL232812B1 (pl) | 2019-07-31 |
Family
ID=62062385
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL419333A PL232812B1 (pl) | 2016-11-02 | 2016-11-02 | Szczep Bifidobacterium animalis AMT30 i kompozycja zawierająca szczep Bifidobacterium animalis AMT30 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL232812B1 (pl) |
-
2016
- 2016-11-02 PL PL419333A patent/PL232812B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL419333A1 (pl) | 2018-05-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3993168B2 (ja) | ラクトバシルス・ペントサス株を含む組成物およびそれらの使用 | |
| TWI627276B (zh) | 新穎之卷曲乳酸桿菌（ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｒｉｓｐａｔｕｓ）菌株 | |
| JP7012377B2 (ja) | 新規な細菌種 | |
| WO2022140401A1 (en) | Lactobacillus compositions and methods for prevention and treatment of microbial infection | |
| KR102166596B1 (ko) | 항균 활성, 항노화 활성 및 프로바이오틱스 특성을 가지는 락토바실러스 플란타룸 jdfm lp11 균주 및 이의 용도 | |
| CN103409334B (zh) | 抑制阴道炎病原菌之乳酸杆菌及其用途 | |
| US11045507B2 (en) | Bifidobacterium animalis AMT30 strain and the composition containing the strain of Bifidobacterium animalis AMT30 | |
| CN113040390A (zh) | 一株益生、耐盐约氏乳杆菌及其在畜禽水产养殖中防治病原菌的应用 | |
| KR101201338B1 (ko) | 신규 락토바실러스 루테리 및 이를 포함하는 사료첨가제 조성물 | |
| KR101201337B1 (ko) | 신규한 락토바실러스속 유산균 복합 균주를 포함하는 사료첨가제 | |
| EP3489350B1 (en) | Bifidobacterium animalis amt30 strain and composition containing the strain of bifidobacterium animalis amt30 | |
| CN113604387B (zh) | 一株耐盐、耐高温罗伊氏乳杆菌及其在畜禽水产养殖中防治病原菌的应用 | |
| US10166262B2 (en) | Strain of bacteria and composition comprising the same | |
| Paliy et al. | Enhanced cultivation technology for lacto and bifidobacteria | |
| KR19990035280A (ko) | 락토바실러스 애시도필러스 ky 2104 및 그 용도 | |
| KR20050041808A (ko) | 항암효과 및 항균활성이 뛰어난 신규 유산균 류코노스톡시트리움 km20 | |
| KR102003822B1 (ko) | 반려동물의 모질을 개선하는 효능을 갖는 유산균과 이를 포함하는 생균제 조성물을 유효성분으로 함유하는 모질 개선을 위한 동물 사료용 첨가제 및 동물 사료 조성물 | |
| PL241510B1 (pl) | Nowy szczep Lactobacillus plantarum AMT14 i kompozycja zawierająca szczep Lactobacillus plantarum AMT14 | |
| TW201016847A (en) | A strain of Lactobacillus plantarum and its use for inhibiting Helicobacter pylori growth | |
| PL232812B1 (pl) | Szczep Bifidobacterium animalis AMT30 i kompozycja zawierająca szczep Bifidobacterium animalis AMT30 | |
| Raju et al. | Isolation, Characterization and Sequencing of Lactobacillus from the Oral and Fecal Samples of Healthy Dogs | |
| Jahangiri et al. | Isolation of probiotic bacteria from guppy Poeciliareticulata (Cyprinodontiformes: Poecilidae) | |
| Shallal et al. | Isolation and identification of Enterococcus faecium bacteria from the vaginal cavity of local ewes and study of some of their antagonistic properties against types of pathogenic bacteria | |
| KR100400411B1 (ko) | 질염 치료용 생균제제 | |
| CN119530073B (zh) | 一种卷曲乳杆菌x25b及其用途 |