PL224855B1 - Zastosowanie modyfikowanych polisacharydów do neutralizacji heparyny - Google Patents
Zastosowanie modyfikowanych polisacharydów do neutralizacji heparynyInfo
- Publication number
- PL224855B1 PL224855B1 PL391043A PL39104310A PL224855B1 PL 224855 B1 PL224855 B1 PL 224855B1 PL 391043 A PL391043 A PL 391043A PL 39104310 A PL39104310 A PL 39104310A PL 224855 B1 PL224855 B1 PL 224855B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- heparin
- gtmac
- hpc
- polymer
- ammonium chloride
- Prior art date
Links
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 60
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 title claims abstract description 60
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 title claims abstract description 42
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 title claims abstract description 26
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 title claims abstract description 25
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 title claims abstract description 25
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 9
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 9
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims abstract description 5
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims abstract description 3
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 claims description 24
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 claims description 24
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 claims description 24
- PUVAFTRIIUSGLK-UHFFFAOYSA-M trimethyl(oxiran-2-ylmethyl)azanium;chloride Chemical group [Cl-].C[N+](C)(C)CC1CO1 PUVAFTRIIUSGLK-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 24
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 claims description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 10
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical class [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- OEIXGLMQZVLOQX-UHFFFAOYSA-N trimethyl-[3-(prop-2-enoylamino)propyl]azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[N+](C)(C)CCCNC(=O)C=C OEIXGLMQZVLOQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- -1 ammonium halides Chemical class 0.000 claims description 5
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 claims description 4
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 claims description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 2
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 claims description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 abstract description 33
- 230000004048 modification Effects 0.000 abstract description 11
- 238000012986 modification Methods 0.000 abstract description 11
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 abstract description 9
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 abstract description 5
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O ammonium group Chemical group [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 abstract description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 3
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 abstract 1
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 18
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 13
- 239000003055 low molecular weight heparin Substances 0.000 description 12
- 229940127215 low-molecular weight heparin Drugs 0.000 description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 102000007327 Protamines Human genes 0.000 description 9
- 108010007568 Protamines Proteins 0.000 description 9
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 8
- 230000002429 anti-coagulating effect Effects 0.000 description 7
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 7
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 7
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 7
- 229940048914 protamine Drugs 0.000 description 7
- ZQXSMRAEXCEDJD-UHFFFAOYSA-N n-ethenylformamide Chemical compound C=CNC=O ZQXSMRAEXCEDJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000004342 Benzoyl peroxide Substances 0.000 description 5
- 235000019400 benzoyl peroxide Nutrition 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 5
- 229920000729 poly(L-lysine) polymer Polymers 0.000 description 5
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- OMPJBNCRMGITSC-UHFFFAOYSA-N Benzoylperoxide Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=O)OOC(=O)C1=CC=CC=C1 OMPJBNCRMGITSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000003868 ammonium compounds Chemical class 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 238000010526 radical polymerization reaction Methods 0.000 description 3
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 3
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 3
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010062506 Heparin-induced thrombocytopenia Diseases 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000001953 Hypotension Diseases 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 2
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 2
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 2
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 239000004019 antithrombin Substances 0.000 description 2
- 230000005587 bubbling Effects 0.000 description 2
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 239000002607 heparin antagonist Substances 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000036543 hypotension Effects 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 2
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 2
- 231100000956 nontoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 229950008679 protamine sulfate Drugs 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 description 2
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 2
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 201000010000 Agranulocytosis Diseases 0.000 description 1
- 206010002199 Anaphylactic shock Diseases 0.000 description 1
- 206010002388 Angina unstable Diseases 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 239000000592 Artificial Cell Substances 0.000 description 1
- 229930003347 Atropine Natural products 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 208000002177 Cataract Diseases 0.000 description 1
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 108010074860 Factor Xa Proteins 0.000 description 1
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical group NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000926 Galactomannan Polymers 0.000 description 1
- AZKVWQKMDGGDSV-BCMRRPTOSA-N Genipin Chemical compound COC(=O)C1=CO[C@@H](O)[C@@H]2C(CO)=CC[C@H]12 AZKVWQKMDGGDSV-BCMRRPTOSA-N 0.000 description 1
- 229920002581 Glucomannan Polymers 0.000 description 1
- 206010018687 Granulocytopenia Diseases 0.000 description 1
- 108010022901 Heparin Lyase Proteins 0.000 description 1
- RKUNBYITZUJHSG-UHFFFAOYSA-N Hyosciamin-hydrochlorid Natural products CN1C(C2)CCC1CC2OC(=O)C(CO)C1=CC=CC=C1 RKUNBYITZUJHSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 1
- 208000007814 Unstable Angina Diseases 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 206010000891 acute myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001455 anti-clotting effect Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKUNBYITZUJHSG-SPUOUPEWSA-N atropine Chemical compound O([C@H]1C[C@H]2CC[C@@H](C1)N2C)C(=O)C(CO)C1=CC=CC=C1 RKUNBYITZUJHSG-SPUOUPEWSA-N 0.000 description 1
- 229960000396 atropine Drugs 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 239000003633 blood substitute Substances 0.000 description 1
- 238000013130 cardiovascular surgery Methods 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 1
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 239000000385 dialysis solution Substances 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- AZKVWQKMDGGDSV-UHFFFAOYSA-N genipin Natural products COC(=O)C1=COC(O)C2C(CO)=CCC12 AZKVWQKMDGGDSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003055 glycidyl group Chemical group C(C1CO1)* 0.000 description 1
- 238000009499 grossing Methods 0.000 description 1
- 230000001435 haemodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 1
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000001261 hydroxy acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 201000004332 intermediate coronary syndrome Diseases 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000002715 modification method Methods 0.000 description 1
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- JZQGUNMRCOTWIQ-UHFFFAOYSA-N oxiran-2-ylmethanamine;hydrochloride Chemical group [Cl-].[NH3+]CC1CO1 JZQGUNMRCOTWIQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 1
- 229920000058 polyacrylate Polymers 0.000 description 1
- 229920000447 polyanionic polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000006068 polycondensation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Polymers 0.000 description 1
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 description 1
- 208000002815 pulmonary hypertension Diseases 0.000 description 1
- 238000007151 ring opening polymerisation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 1
- 206010043554 thrombocytopenia Diseases 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 1
- 229920001285 xanthan gum Polymers 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/716—Glucans
- A61K31/717—Celluloses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/716—Glucans
- A61K31/721—Dextrans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
- A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Hematology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
Abstract
Przedmiotem wynalazku jest zastosowanie kationowe modyfikowanych polisacharydów, z wyłączeniem chitozanu, do bezpośredniej neutralizacji heparyny we krwi i płynach fizjologicznych u ssaka. Do kationowej modyfikacji związki zawierające kationową grupę amoniową i/lub polisacharydy szczepi się polimerem zawierającym grupy aminowe i/lub amoniowe.
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest zastosowanie modyfikowanych polisacharydów do neutralizacji heparyny bezpośrednio we krwi i innych płynach fizjologicznych.
Heparyna, substancja odkryta przez McLeana prawie wiek temu, znajduje kliniczne zastosowanie od 1937 i jest pierwszym opartym na polisacharydach lekiem, który znalazł szerokie zastosowanie w leczeniu ludzi. Heparyna jest złożoną mieszaniną glukozaminoglikanów (GAG) o wysokim stopniu sulfonowania (posiada największą wśród cząsteczek biologicznych gęstość ładunku ujemnego ze średnio 2.7 ładunkami ujemnymi na jednostkę powtarzalną, którą stanowią dwie jednostki glukozy), która jest wytwarzana i przechowywana w komórkach tucznych tkanek zwierzęcych (np. w jelitach wieprzowych lub płucach wołowych). Wykazuje bardzo silne działanie hamujące krzepnięcie krwi, chociaż zaledwie jedna trzecia cząsteczek heparyny posiada właściwości przeciwkrzepliwe. Jej działanie polega na zwiększeniu zdolności antytrombiny (AT) do dezaktywowania trombiny i czynnika Xa, enzymów odpowiedzialnych za krzepnięcie krwi. Dlatego heparyna jest lekiem z wyboru w sytuacjach, w których konieczne jest osiągnięcie szybkiego efektu antykoagulacyjnego, np. podczas operacji chirurgicznych, w szczególności w celu zapobiegania tworzeniu się skrzepów w urządzeniach stosowanych w terapii pozaustrojowej takich jak dializatory lub oksygenatory. Posiada ona również wiele innych zastosowań terapeutycznych, np. w leczeniu niestabilnej dusznicy bolesnej lub ostrego zawału serca.
Jednakże podawanie heparyny wiąże się z wieloma efektami ubocznymi, wśród których najczęściej spotykane są krwawienia, trombocytopenia indukowana heparyną (heparin induced thrombocytopenia, HIT) i osteoporoza.
W związku z tym często zachodzi potrzeba neutralizacji lub usunięcia heparyny z krwioobiegu po uzyskaniu pożądanego działania antykoagulacyjnego. Opracowano szereg metod jej neutralizacji. Najczęściej stosowane jest podawanie siarczanu protaminy, białka wprowadzonego do praktyki klinicznej jako antagonistę heparyny prawie jednocześnie z heparyną (Fischer, A Biochem Zeit. 278, 133, 1935) Charakteryzuje się ono niezwykle wysoką zawartością aminokwasów zasadowych (takich jak arginina, lizyna i histydyna), mogącą osiągać 80%. Innym polimerem stosowanym do usuwania heparyny jest poli-L-lizyna (Ma, X., Mohammad, S.F., Kim, S.W. Biotechnology and Bioengineering Volume 40, Issue 4, 1992, Pages 530-536), którą stosuje się również do wzmacniania działania siarczanu protaminy. Jeszcze innym podejściem do problemu neutralizacji heparyny jest jej enzymatyczna degradacja za pomocą immobilizowanej heparynazy (Kolde, H.-J., Pelzer, H., Borzhenskaya, L., Russo, A., Rose, M., Tejidor, L. Hamostaseologie Volume 14, Issue 1, 1994, Pages 37-43).
Niestety, wymienione metody neutralizacji heparyny mogą same powodować efekty uboczne. Siarczan protaminy, jeśli nie zostanie zneutralizowany lub usunięty z krwioobiegu, może powodować niepożądane reakcje u około 10% pacjentów. Mogą one być bardzo poważne, a często nawet śmiertelne i obejmują nadciśnienie płucne, niedociśnienie tętnicze, wstrząs anafilaktyczny, trombocytopenię, granulocytopenię, aktywację układu dopełniacza i uwolnienie cytokin. Neutralizacja heparyny poprzez zastosowanie siarczanu protaminy jest niekompletna i towarzyszą jej reakcje alergiczne. Z drugiej strony poli-L-lizyna jest nadal dość drogim polimerem.
Podjęto wiele prób skonstruowania urządzeń do fizycznego usuwania heparyny, w większości opartych na zastosowaniu immobilizowanej poli-L-lizyny (Joseph B. Zwischenberger, MD, Roger A. Vertrees, BA, CCP, Robert L. Brunston, Jr., MD, Weike Tao, MD, Scott K. Alpard, MD, and Paul S. Brown, Jr., MD, The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery 1998 Volume 115, Number 3; Zwischenberger, J.B., Tao, W., Deyo, D.J., Vertrees, R.A., Alpard, S.K., Shulman, G. Annals of Thoracic Surgery Volume 71, Issue 1, 2001, Pages 270-277). Urządzenie do usuwania heparyny (HRD, heparin removal device), opisane w powyższych publikacjach, włączone jest w krwioobieg pacjenta pozaustrojowo poprzez połączenie żylno-żylne. Dokonuje się w nim separacji osocza, które po usunięciu z niego heparyny przez kontakt z poli-L-lizyną, jest zawracane do krwi pacjenta. Pomimo obiecujących wyników eksperymentalnych, doświadczenia z zastosowaniem tego typu urządzeń są ograniczone i jak dotąd żadne z nich nie zostało wdrożone do praktyki klinicznej. Metodą często stosowaną w celu uniknięcia komplikacji spowodowanych przez niezwiązane związki będące antagonistami heparyny jest ich immobilizacja na podłożach polimerowych znajdujących się w urządzeniu do usuwania heparyny. Na przykład protaminę osadzono na matrycy otrzymanej przez naszczepienie polimeru akrylowego na celulozie (Hou, K.C., Roy, S., Zaniewski, R., Shumway, E. Artificial Organs Volume 14, Issue 6, 1990, Pages 436-442) lub wewnątrz włókien celulozowych (Wang, T., Byun, Y., Kim, J.-S.,
PL 224 855 B1
Liang, J., Yang, V.C. International Journal of Bio-Chromatography Volume 6, Issue 2, 2001, Pages 133-149). Wykazano, że przy przepływie krwi 100 mL/min skonstruowany bioreaktor usuwał ponad 50% podanej heparyny w ciągu 10 minut. Podczas gdy szybkie wstrzyknięcie protaminy u psów p owoduje silne niedociśnienie, zastosowanie bioreaktora zawierającego immobilizowaną protaminę nie spowodowało żadnych statystycznie istotnych zmian w monitorowanych parametrach hemodynamicznych. Inne doniesienie opisuje skuteczne usuwanie heparyny przy pomocy kulek otrzymanych z alginianu i poli-L-lizyny (M. Sunil Varghese, D. Hildebrandt, D. Glasser, N. J. Crowther, D. M. Rubin, Artificial Cells, Blood Substitutes and Biotechnology, 34: 419-432, 2006).
Wiadomo, że polisacharydy są wykorzystywane w różnych zastosowaniach medycznych. Na przykład dekstran, który jest polimerem glukozy o wysokim ciężarze cząsteczkowym, jest stosowany jako płyn krwiozastępczy. Chityna, polisacharyd pochodzenia zwierzęcego, dzięki swojej biodegradowalności, nietoksyczności, brakowi działania fizjologicznego, właściwościom antybakteryjnym, zdolności do tworzenia żeli i powinowactwu do białek stosowana jest do immobilizacji enzymów. Innym zastosowaniem chityny jest leczenie ran. Do tego celu jest również stosowany otrzymywany z chityny chitozan. Kwas hialuronowy jest jeszcze innym przykładem polisacharydu o bardzo licznych zastosowaniach medycznych. Obejmują one na przykład wiskosuplementację stawów, wygładzanie zmarszczek, nawilżanie skóry. Jest to polisacharyd bardzo często stosowany w okulistyce, np. w zabiegach katarakty, do przyspieszania gojenia się rogówki i zwiększania stabilności preparatów atropiny. Żele otrzymane z alginianu, polisacharydu otrzymywanego z glonów morskich, są stosowane do enkapsulacji enzymów oraz hodowli komórek. Wiele innych polisacharydów, np. pektyny, glukomannany, galaktomannany, ksantany również posiada zastosowania medyczne. Ostatnio stwierdzono, że do usuwania heparyny z roztworów wodnych można wykorzystać polimer chitozanowy usieciowany genipiną (Kamil Kamiński, Karolina Zazakowny, Krzysztof Szczubiałka, Maria Nowakowska Biomacromolecules 2008, 9(11), 3127-3132). Polimer ten stosuje się w formie mikrosfer lub w formie filmu i w tych postaciach może być potencjalnie wykorzystany w urządzeniach do pozaustrojowego usuwania heparyny. Polimer w formie usieciowanych mikrosfer lub filmu nie może być jednak stosowany dożylnie, w celu osiągnięcia natychmiastowego efektu antykoagulacyjnego. W tym celu stosuje się dotychczas siarczan protaminy, ze wszystkimi negatywnymi konsekwencjami opisanymi wyżej.
Celem wynalazku było opracowanie metody neutralizacji antykoagulacyjnego działania heparyny w krwi i płynach ustrojowych.
Istotą wynalazku jest zastosowanie polisacharydów wybranych spośród dekstranu lub hydroksypropylocelulozy modyfikowanych kationowo za pomocą dopuszczalnych farmaceutycznie halogenków amoniowych i/albo przez szczepienie poliwinyloaminą, do wytwarzania preparatu do bezpośredniej neutralizacji heparyny we krwi i płynach fizjologicznych u ssaka, w postaci roztworu do podawania dożylnego i/albo roztworu do bezpośredniego podawania do krwi lub płynu fizjologicznego pobranego od dawcy.
Korzystnie jako halogenki amoniowe stosuje się chlorki amoniowe.
Korzystnie jako chlorek amoniowy stosuje się chlorek glicydylotrimetyloamoniowy lub chlorek (3-akryloamidopropylo)trimetyloamoniowy.
Korzystnie stosuje się dekstran modyfikowany chlorkiem glicydylotrimetyloamoniowym, hydroksypropylocelulozę szczepioną chlorkiem (3-akryloamidopropylo)trimetyloamoniowym, hydroksypropylocelulozę szczepioną poliwinyloaminą, hydroksypropylocelulozę szczepioną poliwinyloaminą i modyfikowaną chlorkiem glicydylotrimetyloamoniowym.
Polisacharydy, dzięki modyfikacji kationowej, uzyskały zdolność silnego oddziaływania z heparyną, która jest polianionem, i tworzenia z nią kompleksów. Kompleksowanie heparyny prowadzi do utraty przez nią właściwości antykoagulacyjnych. Jako polimery kompleksujące heparynę wybrane zostały polisacharydy ze względu na ich korzystne właściwości biomedyczne - biodegradowalność i nietoksyczność. Do polisacharydu można wprowadzać małocząsteczkowe ugrupowania kationowe lub, alternatywnie, szczepić polisacharyd polimerem zawierającym ugrupowania kationowe, dzięki czemu wprowadza się całe boczne łańcuchy polimerowe zawierające wiele grup kationowych. Bardzo korzystne jest połączenie tych dwóch sposobów modyfikacji, ponieważ stosowane do modyfikacji m ałocząsteczkowej związki amoniowe łatwo reagują z grupami aminowymi obecnymi w polimerze użytym do szczepienia polisacharydu. Przykładowo, szczepienie poliwinyloaminy na hydroksypropylocelulozie pozwoliło na łatwą kationową modyfikację za pomocą chlorku glicydylotrimetyloamoniowego (GTMAC) otrzymanego polimeru, ponieważ GTMAC łatwo reaguje z grupami aminowymi obecnymi w poliwinyloaminie.
PL 224 855 B1
Dzięki kationowym modyfikacjom według wynalazku polisacharydy uzyskały zdolność do kompleksowania heparyny, a przez to i neutralizacji jej antykoagulacyjnego działania.
Jako polisacharydy najkorzystniej stosuje się dekstran i hydroksypropylocelulozę, ale możliwe jest także zastosowanie innych polisacharydów, z wyłączeniem chitozanu. Z kolei do modyfikacji m ałocząsteczkowej można użyć dowolnego związku amoniowego zawierającego grupę funkcyjną mogącą reagować z grupami funkcyjnymi danego polisacharydu. Przykładowo w przypadku GTMAC grupa glicydylowa może reagować z grupami NH2 chitozanu lub OH dekstranu, prowadząc do ich podstawienia przez GTMAC. W ogólnym przypadku związki, które mogą być zastosowane do kationowej modyfikacji polisacharydu mogą być bardzo różnej natury, zatem reakcje modyfikowania nimi polis acharydu mogą być prowadzone w bardzo różnych warunkach eksperymentalnych, ogólnie znanych z literatury chemicznej.
Z kolei do szczepienia polisacharydu można użyć dowolnego związku amoniowego zdolnego do polimeryzacji, np. polimeryzacji rodnikowej, kontrolowanej polimeryzacji rodnikowej, polimeryzacji z otwarciem pierścienia, polikondensacji lub poliaddycji. Może to być np. związek amoniowy zawierający grupę winylową lub hydroksykwas zawierający grupę amoniową. W przypadku polimeryzacji rodnikowej szczepienie polega na wytworzeniu rodników wzdłuż łańcucha polisacharydu (np. poprzez dodanie BPO albo KMnO4), które inicjują wzrost łańcuchów bocznych w obecności odpowiedniego monomeru winylowego.
Przedmiot wynalazku został bliżej przedstawiony w przykładach stosowania.
P r z y k ł a d 1.
Otrzymywanie dekstranu modyfikowanego chlorkiem glicydylotrimetyloamoniowym (GTMAC).
W 100 ml wody destylowanej rozpuszczono 2 g dekstranu o masie molowej 100 000 Da, następnie dodano NaOH i GTMAC w ilości podanej w Tabeli 1. Mieszaninę reakcyjną podgrzano do 60°C. Reakcję prowadzono przez 4 godziny. Roztwór zawierający produkt dializowano względem wody destylowanej tak długo, aż przewodnictwo spadło do wartości 2 gS. Otrzymane polimery wyizolowano poprzez wymrażanie pod zmniejszonym ciśnieniem. Otrzymano dwa polimery o różnym sto pniu modyfikacji, oznaczone odpowiednio jako Dex-GTMAC-1 i Dex-GTMAC-2.
T a b e l a 1.
Ilości katalizatora i GTMAC użyte podczas syntezy polimerów
| Nazwa polimeru | Dex-GTMAC-1 | Dex-GTMAC-2 |
| Ilość katalizatora NaOH [mg] | 400 | 400 |
| Ilość GTMAC [ml] | 12 | 24 |
Dla obydwu otrzymanych polimerów wyznaczono stopień modyfikacji na podstawie analizy elementarnej. Wyniki oznaczania składu pierwiastkowego obydwu otrzymanych polimerów przedstawiono w Tabeli 2.
T a b e l a 2.
Skład pierwiastkowy zmodyfikowanych dekstranów
| C% | H% | N% | |
| Dex-GTMAC-1 | 43,605 | 7,223 | 2,02 |
| Dex-GTMAC-2 | 43,61 | 7,29 | 2,86 |
Obliczony na podstawie otrzymanych wyników analizy elementarnej stopień podstawienia dekstranu przez GTMAC (zdefiniowany jako liczba cząsteczek GTMAC przyłączonych do jednostki gluk ozowej) wynosi 0,48 i 0,67 odpowiednio dla Dex-GTMAC-1 i Dex-GTMAC-2.
Kompleksowanie heparyny niefrakcjonowanej (UFH) przez Dex-GTMAC.
Zbadano zależność stężenia UFH od stężenia dodanego Dex-GTMAC stosując metodę spektrofotometryczną opartą na zastosowaniu barwnika Azuru A. Na Fig. 1 przedstawiono zależność stężenia UFH w wodnym roztworze od masy dodanego a) Dex-GTMAC-1 i b) Dex-GTMAC-2. Obliczona na podstawie Fig. 1 masa polimeru potrzebna do związania 90% mg UFH wynosi odpowiednio 3,15 i 1,95 mg odpowiednio dla Dex-GTMAC-1 i Dex-GTMAC-2.
PL 224 855 B1
Kompleksowanie heparyny niskocząsteczkowej (LMWH) przez Dex-GTMAC-2.
Przeprowadzono analogiczne badania nad wiązaniem LMWH przez Dex-GTMAC-2. Wykazały one, że związanie 90% LMWH obecnej w roztworze wymaga dodania około 19 μg Dex-GTMAC-2. Na Fig. 2.przedstawiono zależność stężenia LMWH w wodnym roztworze od masy Dex-GTMAC-2.
P r z y k ł a d 2
Synteza hydroksypropylocelulozy szczepionej chlorkiem (3-akrylamidopropylo)trimetyloamoniowym.
W 15 ml dimetyloformamidu (DMF) rozpuszczono 1,5 g (~5 mmol) hydroksypropylocelulozy (HPC). Roztwór odtleniono przepuszczając przez niego azot przez 30 minut. W analogiczny sposób odtleniono 7,5 ml DMF, do którego następnie dodano 1,35 g inicjatora - nadtlenku benzoilu (BPO). Roztwory połączono w kolbie trójszyjnej, która umożliwiała przepuszczanie azotu przez ciecz znajdującą się w naczyniu w trakcie reakcji. Po 5 minutach dodano 17,72 g (~85,75 mmoli) około 75% wodnego roztworu chlorku (3-akryloamidopropylo)trimetyloamoniowego (APTMAC). Mieszaninę reakcyjną o temperaturze 70°C mieszano przez 3 godziny na mieszadle magnetycznym ciągle przepuszczając przez nią azot. Następnie po ochłodzeniu przeniesiono ją do tuby dializacyjnej i dializowano najpierw przez 2 dni wobec DMF, następnie przez tydzień wobec mieszanin DMF/woda stopniowo zwiększając zawartość wody aż do osiągnięcia czystej wody i przez kolejne dwa tygodnie wobec wody destylowanej. Otrzymany polimer, oznaczony symbolem HPC-APTMAC, wyizolowano poprzez wymrażanie pod zmniejszonym ciśnieniem.
Wyniki przeprowadzonej analizy składu pierwiastkowego HPC-APTMAC przedstawia Tabela 3.
T a b e l a 3.
Skład pierwiastkowy HPC i HPC-APTMAC
| Polimer | Procentowy udział pierwiast | ców[%] | ||
| C | H | N | C/N | |
| HPC | 53,15 | 8,45 | 0 | 0 |
| HPC-APTMAC | 50,33 | 9,078 | 9,29 | 0,18 |
Na podstawie zawartości azotu w zsyntetyzowanym polimerze otrzymanej w wyniku analizy elementarnej obliczono stopień szczepienia (DG) HPC przez APTMAC zdefiniowany jako liczba prz yłączonych cząsteczek APTMAC na 100 jednostek glukozowych Obliczona średnia liczba merów APTMAC przyłączonych do 100 jednostek glukozowych wynosi 411.
Kompleksowanie heparyny przez HPC-APTMAC.
Zbadano zależność stężenia heparyny od stężenia dodanego HPC-APTMAC stosując metodę spektrofotometryczną opartą na zastosowaniu barwnika Azuru A. Obliczona na podstawie wykresu masa HPC-APTMAC potrzebna do związania 1 mg heparyny wynosi 1,20 mg. Zależność stężenia heparyny w wodnym roztworze od masy dodanego HPC-APTMAC przedstawiono na Fig. 3.
Badanie wielkości cząstek kompleksu HPC-APTMAC z heparyną przy pomocy pomiarów DLS.
Za pomocą dynamicznego rozpraszania światła zmierzono wielkość kompleksów HPC-APTMAC z heparyną otrzymanych poprzez zmieszanie roztworu heparyny (0,2 g/l) i HPC-APTMAC (0,6 g/l). Proporcja ta odpowiada ilości polimeru wystarczającej do całkowitego związania heparyny wyznaczonej spektrofotometrycznie. Na Fig. 4 przedstawiono rozkład rozmiarów kompleksu heparyna/HPC-APTMAC w różnych temperaturach. Jak widać na Fig. 4 kompleksy HPC-APTMAC i heparyny są mniejsze niż kompleksy heparyny z protaminą (odpowiednio 148 nm i 1300 nm), a ich dyspersja rozmiarów stosunkowo niewielka. Kompleksy o tak niewielkich rozmiarach są łatwo usuwane z krwiobiegu. W temperaturze powyżej LCST średnica kompleksów jest tylko nieco większa (171 nm) niż w temperaturze pokojowej, zatem nawet w temperaturze powyżej LCST kompleksy te są na tyle małe, że mogą być łatwo usuwane przez organizm.
P r z y k ł a d 3
Synteza hydroksypropylocelulozy szczepionej poliwinyloaminą i modyfikowanej kationowo chlorkiem glicydylotrimetyloamoniowym g hydroksypropylocelulozy (HPC) rozpuszczono w 30 ml dimetyloformamidu (DMF) i umieszczono w zamkniętej kolbie trójszyjnej o pojemności 250 ml mieszając mieszadłem magnetycznym.
PL 224 855 B1
Roztwór odtleniono przepuszczając przez 30 minut azot. Następnie dodano 2,7 g (11,16 mM) nadtlenku benzoilu (BPO) rozpuszczonego w 15 ml DMF. Po 5 minutach dodano 12,19 g (171,50 mM) N-winyloformamidu (NVF). Temperaturę podwyższono do 70°C i prowadzono reakcję przez trzy godziny ciągle mieszając i odtleniając roztwór azotem. Po trzech godzinach mieszaninę reakcyjną ochłodzono i dializowano przez tydzień najpierw względem DMF, a następnie względem wody dest ylowanej. Otrzymany roztwór polimeru zagęszczono na wyparce, następnie usunięto resztę wody p oprzez wymrażanie pod zmniejszonym ciśnieniem. Po wysuszeniu 460 mg otrzymanego polimeru rozpuszczono w 40 ml wody destylowanej i umieszczono w kolbie okrągłodennej o pojemności 50 ml zawierającej 20 ml stężonego kwasu solnego. Mieszaninę reakcyjną odtleniono przepuszczając azot przez 2 h. Roztwór pozostawiono na mieszadle magnetycznym na 72 godziny, po czym dializowano względem wody aż do obojętnego pH. Do 50 ml dializowanego roztworu (około 50% całego roztworu otrzymanego w wyniku dializy) dodano 50 mg NaOH i 5 ml roztworu GTMAC. Tak otrzymaną mieszaninę reakcyjną mieszano na mieszadle przez 24 godziny. Po upływie tego czasu otrzymany roztwór dializowano względem wody przez 2 tygodnie.
W wyniku analizy elementarnej otrzymano skład pierwiastkowy HPC stosowanej podczas syntezy (Tabela 4).
T a b e l a 4.
Skład pierwiastkowy HPC stosowanej podczas syntezy
| C% | H% | O% |
| 53,147 | 8,455 | 38,398 |
Obliczona na podstawie składu pierwiastkowego liczba grup hydroksypropylowych przypadających na jedną jednostkę glukozową wynosi 3,034.
Skład pierwiastkowy HPC szczepionej poli(N-winyloformamidem) przedstawia Tabela 5.
T a b e l a 5.
Skład pierwiastkowy HPC szczepionej poli(N-winyloformamidem)
| C% | H% | N% | O% |
| 49,989 | 8,279 | 2,039 | 39,692 |
Na podstawie otrzymanych wyników analizy elementarnej obliczono, że na jedną jednostkę glukozową przypada 0,64 jednostek N-winyloformamidowych.
W oparciu o widma H-NMR (relatywnie niewielka zmiana w składzie procentowym nie pozwala posłużyć się tu analizą elementarną) stwierdzono, że stopień hydrolizy grup formamidowych naszczepionych na polimerze wynosi 50%, dlatego liczba grup NH2 przypadających na jednostkę glukozową wynosi 0,32. Ostateczny stopień modyfikacji cząsteczkami GTMAC grup NH2 obecnych w polimerze obliczono posługując się wynikami z analizy elementarnej i przedstawiono w Tabeli 6.
T a b e l a 6.
Skład pierwiastkowy HPC szczepionej poli(N-winyloformamidem) poddanej hydrolizie a następnie modyfikacji GTMAC
| C% | H% | N% |
| 48,259 | 8,352 | 2,692 |
W oparciu o otrzymane wyniki obliczono, ze stopień przyłączenia cząsteczek GTMAC do grup NH2 wynosi 0,95 cząsteczek GTMAC na grupę NH2. W oparciu o wcześniejsze wyniki stwierdzono, że na 100 jednostek glukozowych przypada średnio 30 grup NH2, podstawionych GTMAC.
Kompleksowanie heparyny przez HPC-PVA-GTMAC. a) Heparyna niefrakcjonowana
Badanie kompleksowania heparyny przez HPC-PVA i HPC-PVA-GTMAC przeprowadzono metodą spektrofotometryczną przy użyciu Azuru A jako barwnika (Fig. 5 - widma absorpcyjne roztworu Azuru A (c=4-10- mol/dm ) w buforze PBS o pH 7,4 zawierającym UFH (200 μg/ml) w obecności różnych stężeń HPC-PVA-GTMAC). Wykazano, że w miarę wzrostu stężenia HPC-PVA-GTMAC i HPC-PVA w roztworze heparyny niefrakcjonowanej (UFH) stężenie wolnej (nieskompleksowanej) heparyny malało. Na podstawie widm przedstawionych na Fig. 5 obliczono zawartość wolnej UFH przy danym
PL 224 855 B1 stosunku masy HPC-PVA i HPC-PVA-GTMAC do masy UFH (Fig. 6 - zależność stężenia heparyny w roztworze PBS od masy dodanego HPC-PVA i HPC-PVA-GTMAC w przeliczeniu na 1 mg heparyny niefrakcjonowanej).
Obydwa te polimery powodują więc kompleksowanie UFH, przy czym silniej kompleksuje ją polimer HPC-PVA-GTMAC. Ilości tych polimerów potrzebne do związania 1 mg UFH przedstawia Tabela 7.
T a b e l a 7.
Masa polimeru potrzebna do związania 1 mg UFH
| Polimer | Masa polimeru potrzebna do związania 1 mg UFH (mg) |
| HPC-PVA | 4,61 |
| HPC-PVA-GTMAC | 3,64 |
b) Kompleksowanie heparyny niskocząsteczkowej (LMWH)
W celu wyznaczenia masy HPC-PVA-GTMAC potrzebnej do skompleksowania LMWH przeprowadzono analogiczne pomiary jak w przypadku UFH. Na Fig. 7 przedstawiono widma absorpcyjne roztworu Azuru A w buforze PBS o pH 7,4 zawierającym LMWH (28,5 jednostki /ml) w obecności różnych stężeń HPC-PVA-GTMAC, a na Fig. 8 przedstawiono procentową zawartość wolnej LMWH w zależności od stosunku masy dodanego HPC-PVA-GTMAC do masy LMWH obecnej w roztworze. Ilość HPC-PVA-GTMAC potrzebna do usunięcia 100 jednostek LMWH to 2,35 mg.
Claims (7)
1. Zastosowanie polisacharydów wybranych spośród dekstranu lub hydroksypropylocelulozy modyfikowanych kationowo za pomocą dopuszczalnych farmaceutycznie halogenków amoniowych i/lub przez szczepienie poliwinyloaminą, do wytwarzania preparatu do bezpośredniej neutralizacji heparyny we krwi i płynach fizjologicznych u ssaka, w postaci roztworu do podawania dożylnego i/albo roztworu do bezpośredniego podawania do krwi lub płynu fizjologicznego pobranego od dawcy.
2. Zastosowanie według zastrz. 1, znamienne tym, że jako halogenki amoniowe stosuje się chlorki amoniowe.
3. Zastosowanie według zastrz. 2, znamienne tym, że jako chlorek amoniowy stosuje się chlorek glicydylotrimetyloamoniowy lub chlorek (3-akryloamidopropylo)trimetyloamoniowy.
4. Zastosowanie według zastrz. 1 albo 3, znamienne tym, że stosuje się dekstran modyfikowany chlorkiem glicydylotrimetyloamoniowym.
5. Zastosowanie według zastrz. 1 albo 3, znamienne tym, że stosuje się hydroksypropylocelulozę szczepioną chlorkiem (3-akryloamidopropylo)trimetyloamoniowym.
6. Zastosowanie według zastrz. 1 albo 3, znamienne tym, że stosuje się hydroksypropylocelulozę szczepioną poliwinyloaminą.
7. Zastosowanie według zastrz. 1, znamienne tym, że stosuje się hydroksypropylocelulozę szczepioną poliwinyloaminą i modyfikowaną chlorkiem glicydylotrimetyloamoniowym.
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL391043A PL224855B1 (pl) | 2010-04-22 | 2010-04-22 | Zastosowanie modyfikowanych polisacharydów do neutralizacji heparyny |
| US13/642,279 US9504707B2 (en) | 2010-04-22 | 2011-04-20 | Use of the modified polysaccharides for heparin neutralization |
| PCT/PL2011/000040 WO2011133052A2 (en) | 2010-04-22 | 2011-04-20 | Use of the modified polysaccharides for heparin neutralization |
| EP11727810.1A EP2560661B1 (en) | 2010-04-22 | 2011-04-20 | Use of the modified polysaccharides for heparin neutralization |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL391043A PL224855B1 (pl) | 2010-04-22 | 2010-04-22 | Zastosowanie modyfikowanych polisacharydów do neutralizacji heparyny |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL391043A1 PL391043A1 (pl) | 2011-10-24 |
| PL224855B1 true PL224855B1 (pl) | 2017-02-28 |
Family
ID=44627484
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL391043A PL224855B1 (pl) | 2010-04-22 | 2010-04-22 | Zastosowanie modyfikowanych polisacharydów do neutralizacji heparyny |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US9504707B2 (pl) |
| EP (1) | EP2560661B1 (pl) |
| PL (1) | PL224855B1 (pl) |
| WO (1) | WO2011133052A2 (pl) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PL398814A1 (pl) * | 2012-04-16 | 2013-10-28 | Uniwersytet Jagiellonski | Zastosowanie pochodnych dekstranu do przeciwdzialania lub leczenia niedokrwistosci |
| PL229768B1 (pl) | 2015-06-10 | 2018-08-31 | Univ Jagiellonski | Zastosowanie polimeru blokowego zawierającego blok poli- (chlorku 3-metakryloilaminopropylotrimetyloamoniowego) (PMAPTAC) do neutralizacji heparyny |
| PL235490B1 (pl) * | 2016-04-04 | 2020-08-24 | Univ Jagiellonski | Kationowa pochodna dekstranu do zastosowania w hamowaniu replikacji wirusa HSV-1 |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4131576A (en) * | 1977-12-15 | 1978-12-26 | National Starch And Chemical Corporation | Process for the preparation of graft copolymers of a water soluble monomer and polysaccharide employing a two-phase reaction system |
| FR2484419B1 (fr) * | 1980-06-16 | 1985-10-04 | Meito Sangyo Kk | Derives du dextranne et leurs sels, leur preparation et produits cosmetiques comprenant ces substances |
| US5354472A (en) * | 1991-12-04 | 1994-10-11 | Cobe Cardiovascular, Inc. | Anion exchange materials comprised of derivatized cellulose-polyester composites |
| US5416198A (en) * | 1993-02-05 | 1995-05-16 | Research Medical, Inc. | Selective sorbent removal system using polycation activated substrates |
| IL140844A0 (en) * | 2001-01-10 | 2002-02-10 | Polygene Ltd | Cationic polysaccharide compositions |
| US20030040125A1 (en) * | 2001-08-21 | 2003-02-27 | 3M Innovative Properties Company | Methods for performing immunological assays |
| PL387249A1 (pl) * | 2009-02-10 | 2010-08-16 | Uniwersytet Jagielloński | Zastosowanie polimeru chitozanowego do neutralizacji heparyny |
-
2010
- 2010-04-22 PL PL391043A patent/PL224855B1/pl unknown
-
2011
- 2011-04-20 US US13/642,279 patent/US9504707B2/en active Active
- 2011-04-20 EP EP11727810.1A patent/EP2560661B1/en not_active Not-in-force
- 2011-04-20 WO PCT/PL2011/000040 patent/WO2011133052A2/en active Application Filing
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2011133052A2 (en) | 2011-10-27 |
| WO2011133052A3 (en) | 2011-12-15 |
| US20130034516A1 (en) | 2013-02-07 |
| US9504707B2 (en) | 2016-11-29 |
| EP2560661A2 (en) | 2013-02-27 |
| EP2560661B1 (en) | 2018-08-15 |
| PL391043A1 (pl) | 2011-10-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Mo et al. | Advances in Injectable and Self‐healing Polysaccharide Hydrogel Based on the Schiff Base Reaction | |
| Wu et al. | Chitosan-based composite hydrogels for biomedical applications | |
| Chen et al. | Review on the preparation, biological activities and applications of curdlan and its derivatives | |
| US11672756B2 (en) | Temperature sensitive hydrogel composition including nucleic acid and chitosan | |
| Sahoo et al. | Chitosan: a new versatile bio-polymer for various applications | |
| Linhardt et al. | Immobilization of heparin: approaches and applications | |
| Smelcerovic et al. | Microbial polysaccharides and their derivatives as current and prospective pharmaceuticals | |
| Pandit et al. | Self-healing and injectable hydrogels for anticancer drug delivery: A study with multialdehyde gum arabic and succinic anhydride chitosan | |
| Zhou et al. | Advances and impact of arginine-based materials in wound healing | |
| Das et al. | A terpolymeric hydrogel of hyaluronate-hydroxyethyl acrylate-gelatin methacryloyl with tunable properties as biomaterial | |
| Bhatia | Systems for Drug Delivery | |
| Mali et al. | Delivery of drugs using tamarind gum and modified tamarind gum: A review | |
| Sahoo et al. | Chitosan: The most valuable derivative of chitin | |
| Thomas et al. | Chemical modification of chitosan and its biomedical application | |
| Neamtu et al. | Nanogels containing polysaccharides for bioapplications | |
| US9504707B2 (en) | Use of the modified polysaccharides for heparin neutralization | |
| Lopes et al. | Chitosan as biomaterial in drug delivery and tissue engineering | |
| JPWO2020131513A5 (pl) | ||
| Li et al. | Review on adaptation between biomaterials function of chitosan and its structure | |
| ES2765630T3 (es) | Síntesis de nanoagregado de quitosano modificado mediante un péptido de autoensamblable y su aplicación para el transporte de proteínas | |
| Erothu et al. | Hydrophilic polymers | |
| Barbosa et al. | " Click" chemistry as a tool to create novel biomaterials: a short review | |
| US20110301120A1 (en) | Use of a chitosan polymer for heparin neutralization | |
| da Costa | Alginate in biomedical applications | |
| Mondal et al. | Marine Polysaccharide‐Based Nanomaterials |