PL221117B1

PL221117B1 - Medical use of the substance of 5-(3-chlorophenyl)-4-(4-fluorophenyl)-2,4-dihydro-3H-1,2,4-triazole-3-thione

Info

Publication number: PL221117B1
Application number: PL397924A
Authority: PL
Inventors: Tomasz Plech; Jarogniew J. Łuszczki; Monika Wujec
Original assignee: Inst Medycyny Wsi Im Witolda Chodźki; Univ Medyczny W Lublinie
Priority date: 2012-01-27
Filing date: 2012-01-27
Publication date: 2016-02-29
Also published as: PL397924A1

Description

Opis wynalazkuDescription of the invention

Przedmiotem obecnego wynalazku jest nowe zastosowanie medyczne 5-(3-chlorofenylo)-4-(4-fluorofenylo)-2,4-dihydro-3H-1,2,4-triazolo-3-tionu o wzorze 1, który wykazuje działanie przeciwdrgawkowe. Substancja o wzorze 1 jest bioaktywnym s-triazolem zsyntetyzowanym chemicznie, jak opisano szczegółowo w Eur. J, Med, Chem. 2011; 46(1);241-248.The present invention relates to a new medical use of 5- (3-chlorophenyl) -4- (4-fluorophenyl) -2,4-dihydro-3H-1,2,4-triazole-3-thionium of formula 1, which has anticonvulsant activity. . The substance of formula I is chemically synthesized bioactive s-triazole as described in detail in Eur. J, Med, Chem. 2011; 46 (1); 241-248.

W wyniku przeprowadzonych prób i badań, okazało się, że związek o wzorze 1, wykazujący działanie przeciwdrgawkowe może być użyteczny w leczeniu toniczno-klonicznych napadów padaczkowych.As a result of the tests and studies carried out, it has been found that the compound of the formula I exhibiting anticonvulsant activity may be useful in the treatment of tonic-clonic seizures.

Substancja według wynalazku, ze względu na swe działanie przeciwdrgawkowe może mieć zastosowanie jako lek, zwłaszcza w leczeniu toniczno-klonicznych napadów padaczkowych.The substance according to the invention, due to its anticonvulsant effect, can be used as a medicine, especially in the treatment of tonic-clonic epileptic seizures.

Działanie przeciwdrgawkowe substancji o wzorze 1 wykazano przykładowo w teście maksymalnego wstrząsu elektrycznego (MES), odpowiedniego do wykrywania leków, wykazujących działanie przeciwpadaczkowe, o których wiadomo, że są związane z leczeniem napadów padaczkowych u ludzi (np.: karbamazepiny, fenytoiny, fenobarbitalu, kwasu walproinowego). Podstawy testu MES są takie jak opisano w Epilepsy Res. 1991;8:79-94,The anticonvulsant activity of the substances of formula I has been demonstrated, for example, in the Maximum Electric Shock (MES) test, suitable for the detection of anti-epileptic drugs known to be associated with the treatment of seizures in humans (e.g. carbamazepine, phenytoin, phenobarbital, acid valproate). The basics of the MES test are as described in Epilepsy Res. 1991; 8: 79-94.

Grapom po 8 samców myszy szczepu Swiss podano dootrzewnowe substancję o wzorze 1 w różnych czasach (tj. 15 min, 30 min, 60 min i 120 min) oraz w różnych dawkach przed wywoływaniem drgawek elektrycznych przy użyciu generatora prądu zmiennego (Hugo Sachs Elektronik, Freiburg, Niemcy), wytwarzającego prąd elektryczny o natężeniu 25 mA, częstotliwości 50 Hz, napięciu 500 V i czasie trwania 0,2 sek., docierającego do myszy poprzez standardowe, samozaciskowe elektrody zakładane na małżowiny uszne myszy. W teście MES wyznacza się medianę dawki skutecznej (ED₅₀) leku łub substancji badanej (wzór 1), która chroni 50% badanych zwierząt przed wystąpieniem drgawek maksymalnych. Za drgawki maksymalne uważa się pojawienie się sekwencji zmian napięcia mięśniowego u myszy, będącego wyrazem odpowiedzi na drażnienie prądem elektrycznym. Początkowo obserwuje się fazę latencji i tonicznego skurczu zginaczy (trwającą przeciętnie ok. 2 sek.), następnie fazę skurczu prostowników (trwającą średnio ok. 13 sek.), z dominującym wyprostem kończyn tylnych u badanych zwierząt oraz następczym występowaniem fazy uogólnionych drgawek klonicznych (ok, 7 sek.). Za kryterium wystąpienia drgawek przyjmuje się toniczny skurcz prostowników kończyn tylnych. Analogicznie, jako kryterium działania przeciwdrgawkowego leków i substancji badanej (wzór 1) uważa się brak całkowitego wyprostu kończyn tylnych.8 male mice of the Swiss strain were administered intraperitoneally the substance of formula 1 at different times (i.e. 15 min, 30 min, 60 min and 120 min) and in different doses before induction of electric convulsions using an alternating current generator (Hugo Sachs Elektronik, Freiburg , Germany), generating an electric current of 25 mA, a frequency of 50 Hz, a voltage of 500 V, and a duration of 0.2 sec., Reaching the mice through standard, self-gripping electrodes applied to the auricles of mice. The MES test determines the median effective dose (ED ₅₀ ) of the drug or test substance (formula 1) that protects 50% of the test animals against the occurrence of maximal convulsions. Maximal convulsions are considered to be the appearance of a sequence of changes in muscle tone in mice, which is an expression of a response to electrical irritation. Initially, the phase of latency and tonic contraction of the flexors is observed (lasting on average about 2 seconds), then the phase of extensor contraction (lasting on average about 13 seconds), with the predominant extension of the hind limbs in the tested animals and the subsequent occurrence of the phase of generalized clonic convulsions (approx. , 7 sec.). The criterion for the occurrence of convulsions is tonic contraction of the extensors of the hind limbs. Likewise, the criterion for the anticonvulsant effect of the drugs and test substance (Formula 1) is the absence of complete extension of the hind limbs.

Aby wyznaczyć wartość ED50 dla substancji o wzorze ł, badanym zwierzętom podaje się dootrzewnowo wzrastające dawki wspomnianej substancji, po czym myszy poddaje się działaniu prądu, W każdej grupie eksperymentalnej stosowany jest prąd o stałym natężeniu, a zmienia się dawki substancji o wzorze 1, dobierając je w ten sposób, aby można było uzyskać grupy zwierząt, w których odsetek myszy reagujących tonicznym skurczem prostowników zawierać się będzie w zakresach pomiędzy: 1030%, 30-50%, 50-70% i 70-90%. Następnie na podstawie analizy zależności dawka-efekt oblicza się tzw. wartość ED50 dla substancji o wzorze 1, czyli taką dawkę substancji o wzorze 1, która chroni 50% badanych zwierząt przed aktywnością drgawkową w teście MES. Wartości ED50 dla substancji o wzorze 1, wraz z odpowiadającymi im błędami standardowymi (S.E.), obliczane były z wykorzystaniem metody logarytmiczno-probitowej wg Litchfielda i Wilcoxona (1949). Badania doświadczalne wykazały, że wartości ED50 dla substancji o wzorze 1 wahają się od 35,2 mg/kg do > 200 mg/kg (tabela 1), w zależności od czasu podania tej substancji przed testem MES. Przeprowadzone doświadczenia in vivo dały odpowiedź, że szczyt przeciwdrgawkowego działania substancji o wzorze 1 u myszy przypada na 15 min. po jej dootrzewnowym podaniu (tabela 1). Jednakże ze względu na toksyczność substancji o wzorze 1 przy zastosowaniu wyższych dawek (> 200 mg/kg), nie jest możliwe jej zastosowanie jako leku przeciwdrgawkowego o dłuższym czasie działania w zapobieganiu występowania napadów padaczkowych.In order to determine the ED50 value for the substance of formula I, increasing doses of said substance are administered to the test animals intraperitoneally, and the mice are then subjected to a current. In each experimental group, a constant current is applied, and the doses of the substance of formula 1 are changed by selecting them in such a way that it would be possible to obtain groups of animals in which the percentage of mice responding with tonic extensor contraction would be in the ranges between: 1030%, 30-50%, 50-70% and 70-90%. Then, based on the analysis of the dose-effect relationship, the so-called the ED50 value for the substance of formula 1, i.e. the dose of the substance of formula 1 which protects 50% of the test animals against convulsive activity in the MES test. The ED50 values for the substances of formula 1, along with the corresponding standard errors (S.E.), were calculated using the log-probit method according to Litchfield and Wilcoxon (1949). Experimental studies have shown that the ED50 values for the substances of formula I range from 35.2 mg / kg to> 200 mg / kg (Table 1), depending on the time of administration of this substance before the MES test. The in vivo experiments carried out showed that the peak of the anticonvulsant effect of the substances of formula I in mice was 15 minutes. after its intraperitoneal administration (Table 1). However, due to the toxicity of the substance of formula I at higher doses (> 200 mg / kg), it is not possible to use it as an anticonvulsant with a longer duration of action in the prevention of seizures.

Wskazuje się na osiągnięcie zadowalającego wyniku terapeutycznego u zwierząt przy dawkach jednorazowych wynoszących 25-50 mg/kg masy ciała zwierzęcia. Dawki jednorazowe u większych ssaków, takich jak ludzie, zależeć będą od wyniku badań klinicznych. Substancję o wzorze 1 należy podawać pozajelitowo w postaci zastrzyków roztworów lub zawiesin.A satisfactory therapeutic result in animals is shown to be achieved with single doses of 25-50 mg / kg of animal body weight. Single doses for larger mammals, such as humans, will depend on the outcome of clinical trials. The substance of formula I should be administered parenterally in the form of injections of solutions or suspensions.

PL 221 117 B1PL 221 117 B1

T a b e l a 1. Przeciwdrgawkowe działanie 5-(3-chlorofenylo)-4-(4-fluorofenyIo)-2,4-dihydro-3H-1,2,4-triazolo-3-tionu (wzór 1), w różnych czasach dootrzewnowego podania, w teście maksymalnego wstrząsu elektrycznego u myszy.TABLE 1. Anticonvulsant effects of 5- (3-chlorophenyl) -4- (4-fluorophenyl) -2,4-dihydro-3H-1,2,4-triazole-3-thionium (formula 1) at different times intraperitoneally administration, in the maximum electric shock test in mice.

Czas (min.) Time (min.) ED50 (mg/kg) ED50 (mg / kg) n n 15 15 35,2 = 5,3 35.2 = 5.3 8 8 30 thirty 93,6 ± 9,4 93.6 ± 9.4 16 16 60 60 >200 > 200 (toksyczność/ataksja) (toxicity / ataxia) 120 120 >200 > 200 (toksyczność/ataksja) (toxicity / ataxia)

Przeciwdrgawkowe działanie 5-(3-chlorofenylo)-4-(4-fluorofenylo)-2,4-dihydro-3H- 1,2,4-triazolo-3-tionu (wzór 1) przedstawiono jako mediany dawek skutecznych (ED50 w mg/kg ± S.E.), które chronią 50% badanych zwierząt przed tonicznym wyprostem kończyn tylnych w teście maksymalnego wstrząsu elektrycznego (MES). Wartości ED50 wyznaczono wg metody logarytmiczno-probitowej wg Litchfielda i Wilcoxona (1949). Test MES przeprowadzono dla 4 różnych czasów (tj. 15, 30, 60 and 120 min) po dootrzewnowym (i.p.) podaniu substancji o wzorze 1. n - całkowita liczba zwierząt dla tych dawek substancji o wzorze 1, dla których spodziewany efekt przeciwdrgawkowy wahał się pomiędzy 4 a 6 probitem. S.E. - błąd standardowy dla wartości ED50. Substancja 5-(3-chlorofenylo)-4-(4-fluorofenylo)-2,4-dihydro-3H-1,2,4-triazolo-3-tionu (wzór 1) po 60 i 120 min, od podania dootrzewnowego wywiera działanie niepożądane u badanych zwierząt w postaci ataksji, będącej objawem toksyczności związku.The anticonvulsant effect of 5- (3-chlorophenyl) -4- (4-fluorophenyl) -2,4-dihydro-3H-1,2,4-triazole-3-thion (formula 1) is presented as median effective doses (ED50 in mg / kg ± SE), which protect 50% of the test animals against tonic extension of the hind limbs in the maximum electric shock test (MES). ED50 values were determined according to the log-probit method according to Litchfield and Wilcoxon (1949). The MES test was performed for 4 different times (i.e. 15, 30, 60 and 120 min) after intraperitoneal (ip) administration of the substance of formula 1. n - total number of animals for those doses of the substance of formula 1 for which the expected anticonvulsant effect varied between 4 and 6 probit. S.E. - standard error for the ED50 value. The substance 5- (3-chlorophenyl) -4- (4-fluorophenyl) -2,4-dihydro-3H-1,2,4-triazole-3-thionium (formula 1) after 60 and 120 min, after intraperitoneal administration adverse reaction in the tested animals in the form of ataxia, which is a symptom of the toxicity of the compound.

Claims

Patent claims

1. A substance 5- (3-chlorophenyl) -4- (4-fluorophenyl) -2,4-dihydro-3H-1,2,4-triazole-3-thion of the formula I for use as a medicament.

2. A substance as described in claim 1 for use in the treatment of tonic-clonic seizures.