PL220864B1

PL220864B1 - The first medical use of the substance of 4-(4-bromophenyl)-5-(4-chlorophenyl)-2,4-dihydro-3H-1,2,4-triazole-3-thione

Info

Publication number: PL220864B1
Application number: PL397270A
Authority: PL
Inventors: Tomasz Plech; Jarogniew J. Łuszczki; Monika Wujec
Original assignee: Inst Medycyny Wsi Im Witolda Chodźki; Univ Medyczny W Lublinie
Priority date: 2011-12-07
Filing date: 2011-12-07
Publication date: 2016-01-29
Also published as: PL397270A1

Description

Opis wynalazkuDescription of the invention

Przedmiotem obecnego wynalazku jest drogie zastosowanie medyczne 4-(4-bromofenylo)-5-(4-chlorofenylo)-2,4-dihydro-3H-1,2,4-triazolo-3-tionu o wzorze 1, który wykazuje działanie przeciwdrgawkowe.The present invention relates to the expensive medical use of 4- (4-bromophenyl) -5- (4-chlorophenyl) -2,4-dihydro-3H-1,2,4-triazole-3-thionium of the formula 1, which has an anticonvulsant effect. .

W publikacji T. Piecha i współ.: „Synthesis and antimicrobial activity of thiosemicarbazides, s-triazoles and their Mannich bases bearing 3-chlorophenyl moiety”; European Journal of Medicinal Chemistry 46 (2011) 241-248 ujawniono syntezę tiosemikarbazydów.In the publication of T. Piech et al: "Synthesis and antimicrobial activity of thiosemicarbazides, s-triazoles and their Mannich bases bearing 3-chlorophenyl moiety"; European Journal of Medicinal Chemistry 46 (2011) 241-248 discloses the synthesis of thiosemicarbazides.

W wyniku przeprowadzonych prób i badań okazało się, że związek o wzorze 1, wykazujący działanie przeciwdrgawkowe może być użyteczny w leczeniu napadów padaczkowych, a w szczególności napadów toniczno-klonicznych oraz napadów częściowych z wtórnym lub bez wtórnego uogólnienia.As a result of the tests and studies performed, it was found that the anticonvulsant compound of formula I may be useful in the treatment of epileptic seizures, in particular tonic-clonic seizures and partial seizures with or without secondary generalization.

Działanie przeciwdrgawkowe substancji o wzorze 1 wykazano przykładowo w teście maksymalnego wstrząsu elektrycznego (MES), odpowiedniego do wykrywania leków, wykazujących działanie przeciwpadaczkowe, o których wiadomo, że są związane z leczeniem napadów padaczkowych u ludzi (np.: karbamazepiny, fenytoiny, fenobarbitalu, kwasu walproinowego). Podstawy testu MES są takie jak opisano w Epilepsy Res. 1991;8:79-94.The anticonvulsant activity of the substances of formula I has been demonstrated, for example, in the Maximum Electric Shock (MES) test, suitable for the detection of anti-epileptic drugs known to be associated with the treatment of seizures in humans (e.g. carbamazepine, phenytoin, phenobarbital, acid valproate). The basics of the MES test are as described in Epilepsy Res. 1991; 8: 79-94.

Grupom po 8 samców myszy szczepu Swiss podano dootrzewnowo substancję o wzorze 1 w różnych czasach (tj. 15 min, 30 min, 60 min i 120 min) oraz w różnych dawkach przed wywoływaniem drgawek elektrycznych przy użyciu generatora prądu zmiennego (Hugo Sachs Elektronik, Freiburg, Niemcy), wytwarzającego prąd elektryczny o natężeniu 25 mA, częstotliwości 50 Hz, napięciu 500 V i czasie trwania 0,2 sek., docierającego do myszy poprzez standardowe, samozaciskowe elektrody zakładane na małżowiny uszne myszy. W teście MES wyznacza się medianę dawki skutecznej (ED50) leku lub substancji badanej (wzór 1), która chroni 50% badanych zwierząt przed wystąpieniem drgawek maksymalnych. Za drgawki maksymalne uważa się pojawienie się sekwencji zmian napięcia mięśniowego u myszy, będącego wyrazem odpowiedzi na drażnienie prądem elektrycznym. Początkowo obserwuje się fazę latencji i tonicznego skurczu zginaczy (trwającą przeciętnie ok. 2 sek.), następnie fazę skurczu prostowników (trwającą średnio ok. 13 sek.), z dominującym wyprostem kończyn tylnych u badanych zwierząt oraz następczym występowaniem fazy uogólnionych drgawek klonicznych (ok. 7 sek.). Za kryterium wystąpienia drgawek przyjmuje się toniczny skurcz prostowników kończyn tylnych. Analogicznie, jako kryterium działania przeciwdrgawkowego leków i substancji badanej (wzór 1) uważa się brak całkowitego wyprostu kończyn tylnych.Groups of 8 male Swiss mice were administered intraperitoneally with the substance of formula 1 at different times (i.e. 15 min, 30 min, 60 min and 120 min) and at different doses before induction of electric convulsions using an AC generator (Hugo Sachs Elektronik, Freiburg , Germany), generating an electric current of 25 mA, a frequency of 50 Hz, a voltage of 500 V, and a duration of 0.2 sec., Reaching the mice through standard, self-gripping electrodes applied to the auricles of mice. The MES test determines the median effective dose (ED50) of the drug or test substance (Formula 1) that protects 50% of the test animals against the occurrence of maximal convulsions. Maximal convulsions are considered to be the appearance of a sequence of changes in muscle tone in mice, which is an expression of a response to electrical irritation. Initially, the phase of latency and tonic contraction of the flexors is observed (lasting on average about 2 seconds), then the phase of extensor contraction (lasting on average about 13 seconds), with the predominant extension of the hind limbs in the tested animals and the subsequent occurrence of the phase of generalized clonic convulsions (approx. 7 sec.). The criterion for the occurrence of convulsions is tonic contraction of the extensors of the hind limbs. Likewise, the criterion for the anticonvulsant effect of the drugs and test substance (Formula 1) is the absence of complete extension of the hind limbs.

Aby wyznaczyć wartość ED50 dla substancji o wzorze 1, badanym zwierzętom podaje się dootrzewnowo wzrastające dawki wspomnianej substancji, po czym myszy poddaje się działaniu prądu. W każdej grupie eksperymentalnej stosowany jest prąd o stałym natężeniu, a zmienia się dawki substancji o wzorze 1, dobierając je w ten sposób, aby można było uzyskać grupy zwierząt, w których odsetek myszy reagujących tonicznym skurczem prostowników zawierać się będzie w zakresach pomiędzy; 10-30%, 30-50%, 50-70% i 7090%. Następnie na podstawie analizy zależności dawka-efekt oblicza się tzw. wartość ED50 dla substancji o wzorze 1, czyli taką dawkę substancji o wzorze 1, która chroni 50% badanych zwierząt przed aktywnością drgawkową w teście MES. Wartości ED50 dla substancji o wzorze 1, wraz z odpowiadającymi im błędami standardowymi (S.E.), obliczane były z wykorzystaniem metody logarytmiczno-probitowej wg Litchfieida i Wilcoxona (1949). Badania doświadczalne wykazały, że wartości ED50 dla substancji o wzorze 1 wahają się od 140,9 mg/kg do 272,5 mg/kg (tabela 1), w zależności od czasu podania tej substancji przed testem MES. Przeprowadzone doświadczenia in vivo dały odpowiedź, że szczyt przeciwdrgawkowego działania substancji o wzorze 1 u myszy przypada na 120 min, po jej dootrzewnowym podaniu (tabela 1).In order to determine the ED50 value for the substances of the formula I, increasing doses of said substance are administered to the test animals intraperitoneally, and the mice are subjected to currents. In each experimental group, a constant current is applied and the doses of the substances of formula I are varied, so that it is possible to obtain groups of animals in which the percentage of mice responding with tonic extensor contraction will be between; 10-30%, 30-50%, 50-70% and 7090%. Then, based on the analysis of the dose-effect relationship, the so-called the ED50 value for the substance of formula 1, i.e. the dose of the substance of formula 1 which protects 50% of the test animals against convulsive activity in the MES test. The ED50 values for the substances of formula 1, along with the corresponding standard errors (S.E.), were calculated using the log-probit method according to Litchfieid and Wilcoxon (1949). Experimental studies have shown that the ED50 values for the substances of formula 1 range from 140.9 mg / kg to 272.5 mg / kg (Table 1), depending on the time of administration of this substance before the MES test. The in vivo experiments carried out showed that the peak of the anticonvulsant effect of the substances of formula 1 in mice was 120 min after its intraperitoneal administration (Table 1).

Istotą wynalazku jest zastosowanie substancji o wzorze 1 do wytwarzania leku do leczenia napadów toniczno-klonicznych oraz napadów częściowych z wtórnym lub bez wtórnego uogólnienia.The invention relates to the use of a substance of formula I for the preparation of a medicament for the treatment of tonic-clonic seizures and partial seizures with or without secondary generalization.

Substancja o wzorze 1, ze względu na swe działanie przeciwdrgawkowe w teście MES może znaleźć zastosowanie jako lek oraz środek medyczny w leczeniu napadów toniczno-klonicznych lub padaczki częściowej z wtórnym lub bez wtórnego uogólnienia, przy których to napadach padaczkowych wymagane jest podawanie leków przeciwpadaczkowych. W przypadku wyżej wspomnianych wskazań, odpowiednie dawkowanie substancji o wzorze 1 będzie zróżnicowane i zależnie od, na przykład, natężenia stanu chorobowego pacjenta czy sposobu podawania leku. Jednakże, wskazuje się na osiągnięcie zadowalających wyników u zwierząt przy dawkach dziennych wynoszących 100-300 mg/kg masy ciała zwierzęcia. Dawki dzienne u większych ssaków, takich jak ludzie, zależećThe substance of formula I, due to its anticonvulsant effect in the MES test, can be used as a medicine and a medical agent in the treatment of tonic-clonic seizures or partial epilepsy with or without secondary generalization, in which the administration of antiepileptic drugs is required. For the above-mentioned indications, the appropriate dosage of the substances of formula 1 will vary depending on, for example, the severity of the patient's disease or the mode of administration. However, satisfactory results in animals have been shown to be achieved with daily doses of 100-300 mg / kg animal body weight. Daily dosages in larger mammals such as humans depend

PL 220 864 B1 będą od wyniku badań klinicznych i dawki te mogą być podawane w podzielonych dawkach do dwóch razy dziennie. Substancję o wzorze 1 można również podawać każdym zwykłym sposobem, np. doustnie w postaci tabletek lub kapsułek, lub pozajelitowo w postaci zastrzyków roztworów lub zawiesin.The results of clinical trials may be used, and these doses may be administered in divided doses up to twice daily. The substance of formula I can also be administered by any conventional route, e.g. orally in the form of tablets or capsules, or parenterally in the form of injections of solutions or suspensions.

T a b e l a 1T a b e l a 1

Przeciwdrgawkowe działanie 4-(4-bromofenylo)-5-(4-chlorofenylo)-2,4-dihydro-3H-1,2,4-triazolo-3-tionu (wzór 1), w różnych czasach dootrzewnowego podania, w teście maksymalnego wstrząsu elektrycznego u myszy.The anticonvulsant effect of 4- (4-bromophenyl) -5- (4-chlorophenyl) -2,4-dihydro-3H-1,2,4-triazole-3-thione (formula 1), at different times of intraperitoneal administration, in the test maximum electric shock in mice.

Czas (min.) Time (min.) ED 50 (mg/kg) ED 50 (mg / kg) n n 15 15 272,5 ± 21,4 272.5 ± 21.4 32 32 30 thirty 181,7 ± 44,3 181.7 ± 44.3 8 8 60 60 152,6 ± 23,5 152.6 ± 23.5 24 24 120 120 140,9 ± 25,1 140.9 25.1 16 16

Przeciwdrgawkowe działanie 4-(4-bromofenylo)-5-(4-chlorofenylo)-2,4-dihydro-3H-1,2,4-triazolo-3-tionu (wzór 1) przedstawiono jako mediany dawek skutecznych (ED50 w mg/kg ± S.E.), które chronią 50% badanych zwierząt przed tonicznym wyprostem kończyn tylnych w teście maksymalnego wstrząsu elektrycznego (MES). Wartości ED50 wyznaczono wg metody logarytmiczno-probitowej wg Litchfielda i Wilcoxona (1949). Test MES przeprowadzono dla 4 różnych czasów (tj. 15, 30, 60 i 120 min) po dootrzewnowym (i.p.) podaniu substancji o wzorze 1. n - całkowita liczba zwierząt dla tych dawek substancji o wzorze 1, dla których spodziewany efekt przeciwdrgawkowy wahał się pomiędzy 4 a 6 probitem. S.E. - błąd standardowy dla wartości ED50.The anticonvulsant effect of 4- (4-bromophenyl) -5- (4-chlorophenyl) -2,4-dihydro-3H-1,2,4-triazole-3-thionium (formula 1) is presented as median effective doses (ED50 in mg / kg ± SE), which protect 50% of the test animals against tonic extension of the hind limbs in the maximum electric shock test (MES). ED50 values were determined according to the log-probit method according to Litchfield and Wilcoxon (1949). The MES test was performed for 4 different times (i.e. 15, 30, 60 and 120 min) after intraperitoneal (ip) administration of the substance of formula 1. n - total number of animals for those doses of the substance of formula 1 for which the expected anticonvulsant effect fluctuated between 4 and 6 probit. S.E. - standard error for the ED50 value.

Claims

Patent claim

The use of 4- (4-bromophenyl) -5- (4-chlorophenyl) -2,4-dihydro-3H-1,2,4-triazole-3-thionium of formula 1 in the manufacture of a medicament for the treatment of tonic-clonic seizures and partial seizures with or without secondary generalization.