PL214249B1 - Nowe pochodne triazoli, sposób ich otrzymywania oraz ich zastosowanie - Google Patents
Nowe pochodne triazoli, sposób ich otrzymywania oraz ich zastosowanieInfo
- Publication number
- PL214249B1 PL214249B1 PL382801A PL38280107A PL214249B1 PL 214249 B1 PL214249 B1 PL 214249B1 PL 382801 A PL382801 A PL 382801A PL 38280107 A PL38280107 A PL 38280107A PL 214249 B1 PL214249 B1 PL 214249B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- triazole
- compounds
- derivatives
- amino
- nitrobenzaldehyde
- Prior art date
Links
- 150000003852 triazoles Chemical class 0.000 title description 25
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 78
- FMCUPJKTGNBGEC-UHFFFAOYSA-N 1,2,4-triazol-4-amine Chemical compound NN1C=NN=C1 FMCUPJKTGNBGEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 33
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 21
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 14
- CMWKITSNTDAEDT-UHFFFAOYSA-N 2-nitrobenzaldehyde Chemical class [O-][N+](=O)C1=CC=CC=C1C=O CMWKITSNTDAEDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 229940042055 systemic antimycotics triazole derivative Drugs 0.000 claims abstract description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 9
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims abstract description 5
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 21
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- ZILXIZUBLXVYPI-UHFFFAOYSA-N 2,4-dinitrobenzaldehyde Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(C=O)C([N+]([O-])=O)=C1 ZILXIZUBLXVYPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 claims description 10
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 claims description 10
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 10
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 7
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 5
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 150000007979 thiazole derivatives Chemical class 0.000 claims description 4
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 claims description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 3
- 239000002674 ointment Substances 0.000 claims description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 3
- 239000000829 suppository Substances 0.000 claims description 3
- 239000006188 syrup Substances 0.000 claims description 3
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 claims description 3
- GSNUFIFRDBKVIE-UHFFFAOYSA-N DMF Natural products CC1=CC=C(C)O1 GSNUFIFRDBKVIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 241000588748 Klebsiella Species 0.000 claims 2
- 229910014033 C-OH Inorganic materials 0.000 claims 1
- 229910014570 C—OH Inorganic materials 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 25
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 abstract description 23
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 abstract description 10
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 abstract description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 20
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 17
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 12
- 150000003935 benzaldehydes Chemical class 0.000 description 9
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 8
- 239000002262 Schiff base Substances 0.000 description 7
- 150000004753 Schiff bases Chemical class 0.000 description 7
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- 230000000855 fungicidal effect Effects 0.000 description 7
- 150000002466 imines Chemical class 0.000 description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 7
- ZETIVVHRRQLWFW-UHFFFAOYSA-N 3-nitrobenzaldehyde Chemical class [O-][N+](=O)C1=CC=CC(C=O)=C1 ZETIVVHRRQLWFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- BXRFQSNOROATLV-UHFFFAOYSA-N 4-nitrobenzaldehyde Chemical class [O-][N+](=O)C1=CC=C(C=O)C=C1 BXRFQSNOROATLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 6
- 150000002828 nitro derivatives Chemical class 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- RZDOUWDCYULHJX-UHFFFAOYSA-N 2-chloro-6-nitrobenzaldehyde Chemical class [O-][N+](=O)C1=CC=CC(Cl)=C1C=O RZDOUWDCYULHJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 4
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 4
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- -1 benzaldehyde nitro derivatives Chemical class 0.000 description 4
- 229940095731 candida albicans Drugs 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 4
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 241000588747 Klebsiella pneumoniae Species 0.000 description 3
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 3
- 239000002585 base Substances 0.000 description 3
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 3
- 150000002460 imidazoles Chemical class 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 150000000178 1,2,4-triazoles Chemical class 0.000 description 2
- PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N Aniline Chemical compound NC1=CC=CC=C1 PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 2
- 238000002441 X-ray diffraction Methods 0.000 description 2
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 2
- HUMNYLRZRPPJDN-KWCOIAHCSA-N benzaldehyde Chemical group O=[11CH]C1=CC=CC=C1 HUMNYLRZRPPJDN-KWCOIAHCSA-N 0.000 description 2
- HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N benzenecarboxaldehyde Natural products O=CC1=CC=CC=C1 HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000001728 carbonyl compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N para-ethylbenzaldehyde Natural products CCC1=CC=C(C=O)C=C1 QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 102220240796 rs553605556 Human genes 0.000 description 2
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 2
- 238000003419 tautomerization reaction Methods 0.000 description 2
- 229910052723 transition metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000003624 transition metals Chemical class 0.000 description 2
- QNRATNLHPGXHMA-XZHTYLCXSA-N (r)-(6-ethoxyquinolin-4-yl)-[(2s,4s,5r)-5-ethyl-1-azabicyclo[2.2.2]octan-2-yl]methanol;hydrochloride Chemical compound Cl.C([C@H]([C@H](C1)CC)C2)CN1[C@@H]2[C@H](O)C1=CC=NC2=CC=C(OCC)C=C21 QNRATNLHPGXHMA-XZHTYLCXSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- JGLMVXWAHNTPRF-CMDGGOBGSA-N CCN1N=C(C)C=C1C(=O)NC1=NC2=CC(=CC(OC)=C2N1C\C=C\CN1C(NC(=O)C2=CC(C)=NN2CC)=NC2=CC(=CC(OCCCN3CCOCC3)=C12)C(N)=O)C(N)=O Chemical compound CCN1N=C(C)C=C1C(=O)NC1=NC2=CC(=CC(OC)=C2N1C\C=C\CN1C(NC(=O)C2=CC(C)=NN2CC)=NC2=CC(=CC(OCCCN3CCOCC3)=C12)C(N)=O)C(N)=O JGLMVXWAHNTPRF-CMDGGOBGSA-N 0.000 description 1
- 101100037762 Caenorhabditis elegans rnh-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- 102000002004 Cytochrome P-450 Enzyme System Human genes 0.000 description 1
- 108010015742 Cytochrome P-450 Enzyme System Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- 241000824268 Kuma Species 0.000 description 1
- 102000010750 Metalloproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010063312 Metalloproteins Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 1
- WTKZEGDFNFYCGP-UHFFFAOYSA-N Pyrazole Chemical compound C=1C=NNC=1 WTKZEGDFNFYCGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FZWLAAWBMGSTSO-UHFFFAOYSA-N Thiazole Chemical compound C1=CSC=N1 FZWLAAWBMGSTSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000003377 acid catalyst Substances 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000001147 anti-toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- UORVGPXVDQYIDP-UHFFFAOYSA-N borane Chemical class B UORVGPXVDQYIDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000085 borane Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 description 1
- 230000001882 diuretic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002081 enamines Chemical class 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 230000009422 growth inhibiting effect Effects 0.000 description 1
- PKWIYNIDEDLDCJ-UHFFFAOYSA-N guanazole Chemical class NC1=NNC(N)=N1 PKWIYNIDEDLDCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 125000001841 imino group Chemical group [H]N=* 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- XMYQHJDBLRZMLW-UHFFFAOYSA-N methanolamine Chemical compound NCO XMYQHJDBLRZMLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000005588 protonation Effects 0.000 description 1
- 125000003226 pyrazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- KGQZXOXYPGZOCB-UHFFFAOYSA-N silver;2h-triazole Chemical compound [Ag].C=1C=NNN=1 KGQZXOXYPGZOCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000004577 thatch Substances 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D249/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D249/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
- C07D249/08—1,2,4-Triazoles; Hydrogenated 1,2,4-triazoles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/10—Antimycotics
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oncology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
(22) Data zgłoszenia: 29.06.2007
Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (19) PL (11) 214249 (13) B1 (51) Int.Cl.
C07D 249/08 (2006.01) A61K 31/4196 (2006.01) A61P 31/04 (2006.01)
A61P 31/10 (2006.01) (54) Nowe pochodne triazoli, sposób ich otrzymywania oraz ich zastosowanie (73) Uprawniony z patentu:
UNIWERSYTET WROCŁAWSKI, Wrocław, PL INSTYTUT IMMUNOLOGII I TERAPII DOŚWIADCZALNEJ POLSKA AKADEMIA NAUK, Wrocław, PL (43) Zgłoszenie ogłoszono:
05.01.2009 BUP 01/09 (45) O udzieleniu patentu ogłoszono:
31.07.2013 WUP 07/13 (72) Twórca(y) wynalazku:
MACIEJ BARYS, Wrocław, PL ZBIGNIEW CIUNIK, Wrocław, PL KRZYSZTOF DRABENT, Wrocław, PL BOGUMIŁA SZPONAR, Wrocław, PL ANDRZEJ GAMIAN, Wrocław, PL (74) Pełnomocnik:
rzecz. pat. Rafał Witek
PL 214 249 B1
Opis wynalazku
Wynalazek dotyczy nowych związków chemicznych - chiralnych pochodnych triazolu, sposobu ich otrzymywania oraz ich zastosowania.
Nowe pochodne są związkami powstałymi w wyniku reakcji 4-amino-1,2,4-triazolu z nitropochodnymi benzaldehydów. Związki takie nie zostały dotychczas opisane w literaturze. Pochodne te charakteryzują się korzystnie tym, że posiadają centra chiralne. Dzięki ich właściwościom strukturalnym znajdują one zastosowanie jako substancje aktywne leków zapobiegających i stosowanych w leczeniu infekcji wywołanych obecnością grzybów lub bakterii.
Znana jest budowa i właściwości triazoli. 1,2,4-triazole i ich pochodne od wielu lat stanowią atrakcyjny materiał badawczy dla chemików. Znane są zdolności triazoli do tworzenia różnorodnych kompleksów metali przejściowych, ze względu na unikalne własności koordynacyjne, typowe dla grupy związków pirazolowych, i wynikające z obecności atomów azotu w pierścieniu, charakterystyczne dla związków imidazolowych. Ponadto posiadają inną typową dla tej grupy właściwość - są doskonałymi ligandami mostkującymi jony metali, wykazując olbrzymią rozmaitość koordynacyjną, spotęgowaną przyłączeniem do rdzenia triazolowego dodatkowych grup donorowych. Ta cecha, wraz z silnymi właściwościami σ donorowymi oraz relatywnie łatwą syntezą kolejnych pochodnych powodują, że triazole nadają się do projektowania wielojądrowych kompleksów metali, które mogą wykazywać różne ciekawe właściwości. W opisie patentowym nr PL 146 491 omówiono sposób wytwarzania pochodnych 3,5-dwuamino-1,2,4-triazolu.
Triazole mają szerokie zastosowanie w przemyśle. Już w 1960 roku Potts [1] zauważył, że kompleks srebra z triazolem można wykorzystać w przemyśle fotograficznym. Triazole posiadają geometrię zbliżoną do imidazoli, których pochodne są wszechobecne w przyrodzie, gdyż stanowią jeden ze składników kompleksów białek i kwasów nukleinowych. Jest to druga właściwość, która spowodowała, że triazole i ich kompleksy z metalami są badane pod kątem naśladowania imidazoli w naturalnych procesach zachodzących w żywych organizmach [2]. Badane są również możliwości zastąpienia ligandów pirazolowych przez triazole np. w tripirazoloboranach [3]. 1,2,4-Triazole mają szerokie zastosowanie w rolnictwie i przemyśle farmaceutycznym, co jest właśnie związane z podobną geometrią i właściwościami koordynacyjnymi.
W ostatnich kilkudziesięciu latach obserwuje się zainteresowanie pochodnymi triazoli o właściwościach terapeutycznych. Dzięki właściwościom ochronnym oraz leczniczym w różnych infekcjach grzybiczych pochodne triazoli stanowią jedną z najważniejszych grup związków grzybobójczych [4], Związane jest to z działaniem na błonę komórki grzybowej przez inhibicję 14-a-demetylazy, enzymu cytochromu P-450. Znane są również doniesienia o przeciwzapalnych, przeciwbakteryjnych, przeciwnowotworowych i diuretycznych [6-8] właściwościach triazoli. Przeciwbakteryjne działanie pochodnych triazoli opisano również w publikacjach zgłoszeń patentowych, np. US 2005/0113347 czy US 2006/0270628. W patentach US nr 4,251,512, nr 4,147,791, nr 4,038,406 i nr 4,048,318 ujawniono związki i kompozycje przeciwgrzybiczne o synergistycznym działaniu zawierające pochodne triazolu. Podobnie w publikacji zgłoszenia międzynarodowego WO 2006/109933 przedstawiono zastosowanie w terapii związków na bazie triazoli, ich soli i kompozycji farmaceutycznych o aktywności przeciwgrzybicznej. W publikacji W003/065807 omówiono zastosowanie alkoksylowanych amin do wzmacniania aktywności preparatów grzybobójczych zawierających grzybobójcze triazole. Wynalazek ten odnosi się on także do preparatów zawierających jeden lub więcej grzybobójczych triazoli i alkoksylowanych amin. Preparaty takie są użyteczne do zabezpieczania jakiegokolwiek żywego lub martwego materiału, takiego jak plony, rośliny, owoce, nasiona, przedmioty wykonane z drewna, strzechy lub temu podobne, materiału ulegającego biodegradacji oraz tkanin, przed zniszczeniem w wyniku działania grzybów.
Od pewnego czasu zasady Schiffa zawierające ugrupowanie triazolowe oraz różne pochodne benzaldehydowe przykuwają uwagę wielu naukowców swoimi właściwościami biologicznymi. Związki te były badane pod kątem właściwości przeciwzapalnych, przeciwgrzybicznych oraz przeciwbakteryjnych [12,13].
Dotychczas otrzymywane związki chemiczne, powstające w wyniku reakcji amin z aldehydami, reagowały ze sobą tworząc iminy (zasady Schaffa). Niezwykle istotne wydaje się więc poznanie budowy i podstawowych właściwości biochemicznych takich substancji.
Zasady Schiffa, czyli związki zawierające grupę iminową (-RC=N-), są to związki organiczne powstałe w wyniku kondensacji cząsteczki związku karbonylowego (aldehydu lub ketonu) z cząsteczką aminy pierwszorzędowej (RNH2).
PL 214 249 B1
Aminy pierwszo- i drugorzędowe reagując z aldehydami i ketonami tworzą iminy:
I I I — C=0 + H2NR —> —C-NHR —* — C = NR OH
Reakcja polega na addycji nukleofilowej aminy, a następnie eliminacji cząsteczki wody. Katalizatory kwasowe ułatwiają zajście reakcji, ale zbyt duża ilość kwasu przeszkadza jej z powodu protonowania aminy.
W przypadku, gdy wyjściowy związek karbonylowy zawiera w cząsteczce atom wodoru a w pierwszym etapie tworzy się najpierw enamina, która następnie ulega szybkiej tautomeryzacji do iminy:
Zjawisko tautomerii iminowo-enaminowej powoduje, że iminy zachowują się w wielu reakcjach tak jakby były aminami, co powszechnie wykorzystuje się w syntezie organicznej. Innym zastosowaniem imin jest traktowanie ich jako wygodnej formy transportowej dla amin pierwszorzędowych, gdyż można je przeprowadzić w te aminy poprzez prostą redukcję, zaś same iminy są trwalsze i mniej reaktywne od amin pierwszorzędowych [9]. Nazwa pochodzi od ich wynalazcy - Hugo Schiffa, który opisał je jako pierwszy w 1864 roku. Reakcja powstawania imin jest odwracalna, przechodzi przez różne pośrednie etapy, w tym tworzenie karbinolaminy, która wymaga odłączenia cząsteczki wody.
Zasady Schiffa odegrały znaczącą rolę w rozwoju chemii koordynacyjnej, gdyż umożliwiały tworzenie trwałych kompleksów z większością metali przejściowych. Odegrały również znaczącą rolę w dziedzinie chemii bionieorganicznej. Szczególnie kompleksy metali z zasadami Schiffa pozwoliły na badanie syntetycznych modeli występujących naturalnie w częściach zawierających metale w enzymach i metaloproteinach. Wiele zasad Schiffa posiada liczne właściwości przeciwbakteryjne, przeciwnowotworowe, przeciwzapalne i przeciwtoksyczne [10], a wymiana lub wprowadzenie nowych podstawników często dodatkowo je wzmacnia [11]. Od pewnego czasu zasady Schiffa zawierające ugrupowanie triazolowe oraz różne pochodne benzaldehydowe przykuwają uwagę wielu naukowców swoimi właściwościami biologicznymi. Związki te były badane pod kątem właściwości przeciwzapalnych, przeciwgrzybicznych oraz przeciwbakteryjnych [12,13],
Otrzymano do tej pory wiele zasad Schiffa, w których częścią aminową była cząsteczka 4-amino-1,2,4-triazolu, a część aldehydową stanowiły różne pochodne benzaldehydów [14-16]. Jednakże, we wszystkich opisanych do tej pory w literaturze przypadkach w wyniku reakcji kondensacji powstawały płaskie zasady Schiffa.
Nieoczekiwane okazało się jednak zastosowanie nitropochodnych benzaldehydów wraz z cząsteczką 4-amino-1,2,4-triazolu.
Istotą wynalazku są zatem związki powstałe w wyniku reakcji 4-amino-1,2,4-triazolu z nitropochodnymi benzaldehydów.
W wyniku takiej reakcji otrzymujemy związki, w których tworzą się dwa centra chiralne, niezwykle interesujące z punktu widzenia warunkowanych nimi właściwości chemicznych i biologicznych.
Przedmiotem wynalazku jest związek o wzorze:
PL 214 249 B1 gdzie:
R oznacza: NO2, Cl albo H,
R1 oznacza: NO2, Cl, H,
R2 oznacza: NO2, H,
R3 oznacza: NO2, Cl, H,
R4 oznacza: NO2, Cl, H,
Korzystnie nowa pochodna 4-amino-1,2,4-triazolu z 2,4-dinitrobenzaldehydem według wynalazku została wybrana spośród związków o wzorach 1 do 5.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania nowych pochodnych triazoli według wynalazku charakteryzujący się tym, że nitrobenzaldehyd poddaje się reakcji z 4-amino-1,2,4-triazolem, w równomolowych ilościach obu substancji rozpuszczonych w rozpuszczalniku, a następnie przeprowadza się wyodrębnienie otrzymanych związków.
Korzystnie uzyskane związki wyodrębnia się poprzez krystalizację. Równie korzystnie rozpuszczalnikiem zastosowanym w reakcji otrzymywania nowych pochodnych triazolu jest rozpuszczalnik organiczny, taki jak metanol, etanol, acetonitryl, propanol, izopropanol, DMF, DMSO, butanol, aceton, fenol i eter dietylowy. Zgodnie z korzystną realizacją wynalazku otrzymywane są aktywne biologicznie mieszaniny racemiczne chiralnych pochodnych tiazolu lub ich czyste izomery.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest zastosowanie nowych pochodnych tiazolu określonych powyżej do wytwarzania leku przeznaczonego do zapobiegania i/lub leczenia infekcji wywołanych bakteriami i grzybami. Korzystnie lek wytwarzany jest w postaci maści, żelu, tabletki, kapsułki, proszku, granulek, syropu, zastrzyku lub czopków.
Do tej pory otrzymywane zasady Schiffa na bazie podobnych związków wykazywały ciekawe właściwości biologiczne. Również triazole posiadają szerokie spektrum właściwości biologicznych.
Patrząc więc przez pryzmat chiralności nowych związków okazuje się, że otrzymano związki, które zbudowane są nie tylko z części aktywnych biologicznie (tj. pierścień triazolowy) lecz również nieoczekiwanie uzyskano dodatkowe dwa miejsca aktywne, które potęgują znaczenie i właściwości biologiczne. Najistotniejsze w tej reakcji wydaje się być połączenie właściwości części aminowej oraz aldehydowej.
Znane są związki, w których zastosowano podobną parę związków, ale zawsze ich otrzymanie wynikało z modyfikacji pierścienia triazolowego [17,18]. Pokazuje to jak subtelna zmiana może doprowadzić do niespotykanych i nieznanych do tej pory efektów w postaci tworzenia się dwóch centrów chiralnych. W obu przypadkach [17,18] powstały zasady Schiffa pomimo obecności grupy nitrowej w pierścieniu benzaldehydu. Związane było to z zastosowaniem cząsteczki triazolu podstawionej w pozycjach 3 oraz 5 przez inne podstawniki niż wodór. Również znany jest związek, w którym zastosowano jako aldehyd 2,4-dinitrobenzaldehyd, a jako aminę wybrano anilinę[19]. Również w tym przypadku powstała zasada Schiffa.
W przedmiotowym wynalazku wykazano, że szczególne połączenie właściwości pierścieni triazolowego oraz benzaldehydowego prowadzi do powstania niezwykle oryginalnych i interesujących pod względem ich właściwości związków.
W wyniku reakcji nitropochodnych benzaldehydów, takich jak na przykład 2-nitrobenzaldehyd, 3-nitrobenzaldehyd, 4-nitrobenzaldehyd, 2,4-dinitrobenzaldehyd, 2-chloro-6-nitrobenzaldehyd, z cząsteczką 4-amino-1,2,4-triazolu otrzymano nowe związki triazoli nieoczekiwanie i korzystnie charakteryzujące się centrami chiralnymi na atomie węgla oraz atomie azotu.
Związki te powstają na drodze syntezy prowadzonej w rozpuszczalnikach organicznych, takich jak na przykład acetonitryl, etanol, metanol, izopropanol. W syntezie stosowane są równomolowe ilości nitropochodnej benzaldehydu oraz tiazolu.
Nowe związki według wynalazku znajdują zastosowanie do wytwarzania leku przeznaczonego do zapobiegania i/lub leczenia infekcji wywołanych bakteriami i grzybami. Lek taki wytwarzany jest w postaci maści, żelu, tabletki, kapsułki, proszku, granulek, syropu, zastrzyku lub czopków.
Dla lepszego zilustrowania wynalazku jego opis został uzupełniony figurami.
Figura 1 prezentuje aktywność 2,4dnbald wobec bakterii w zależności od stężenia związku.
Figura 2 prezentuje aktywność 2nbald wobec bakterii w zależności od stężenia związku.
Figura 3 prezentuje aktywność 3nbald wobec bakterii w zależności od stężenia związku.
Figura 4 prezentuje aktywność 4nbald wobec bakterii w zależności od stężenia związku.
Figura 5 prezentuje aktywność badanych związków wobec Candida albicans
Dodatkowo, niniejszy wynalazek zilustrowano poniższymi przykładami.
PL 214 249 B1
P r z y k ł a d 1. Chiralne związki triazoli
W wyniku reakcji nitropochodnych benzaldehydów (2-nitrobenzaldehyd, 3-nitrobenzaldehyd, 4-nitrobenzaldehyd, 2,4-dinitrobenzaldehyd, 2-chloro-6-nitrobenzaldehyd) z cząsteczką 4-amino-1,2,4-triazolu powstają nowe związki z centrami chiralnymi na atomie węgla oraz atomie azotu.
P r z y k ł a d 2. Synteza chiralnych pochodnych triazolu
2.1. Ogólne zasady syntezy
Syntezy prowadzone są w rozpuszczalnikach organicznych, tj. w acetonitrylu, etanolu, metanolu i izopropanolu. Reakcja przebiega w temperaturze otoczenia (20-25°C) przez około 30 minut, a następnie roztwór odstawiany jest do krystalizacji przez odparowanie rozpuszczalnika.
2.2. Synteza wybranych pochodnych
2.2.1. Synteza pochodnej 2,4-dinitrobenzaldehydu z 4-amino-1,2,4-triazolem.
Syntezę prowadzono w następujący sposób: odważano równomolowe ilości 4-amino-1,2,4-triazolu (0,1 mol) oraz 2,4-dinitrobezaldehydu (0,1 mol). Całość następnie przesypywano do naczynka o pojemności 100 ml i dodawano jednego z rozpuszczalników organicznych wymienionych w punkcie 2,1. Po rozpuszczeniu związków roztwór był mieszany przez około 30 min na mieszadle magnetycznym. Po tym procesie odstawiano otrzymany roztwór, w naczynku krystalizacyjnym, do krystalizacji badanego związku przez odparowanie rozpuszczalnika. Po procesie krystalizacji otrzymany związek przesączano na lejku Buchnera pod zmniejszonym ciśnieniem i przemywano eterem.
2.2.2. Synteza pochodnej 2-nitrobenzaldehydu z 4-amino-1,2,4-triazolem.
Synteza tego związku była analogiczna do syntezy opisanej w punkcie 2.2.1. Wykorzystano w tym celu pochodną 2-nitrobenzaldehydu oraz 4-amino-1,2,4-triazol (w stosunku molowym 1:1). Pozostałe procedury syntezy i krystalizacji były identyczne jak we wcześniej opisanym przypadku 2,4-dinitrobenzaldehydu.
2.2.3. Synteza pochodnej 3-nitrobenzaldehydu z 4-amino-1,2,4-triazolem.
Synteza tego związku była analogiczna do syntezy opisanej w punkcie 2.2.1. Wykorzystano w tym celu pochodną 3-nitrobenzaldehydu oraz 4-amino-1,2,4-triazol (w stosunku molowym 1:1). Pozostałe procedury syntezy i krystalizacji były identyczne jak we wcześniej opisanym przypadku 2,4-dinitrobenzaldehydu.
2.2.4. Synteza pochodnej 4-nitrobenzaldehydu z 4-amino-1,2,4-triazolem.
Synteza tego związku była analogiczna do syntezy opisanej w punkcie 2.2.1. Wykorzystano w tym celu pochodną 4-nitrobenzaldehydu oraz 4-amino-1,2,4-triazol (w stosunku molowym 1:1). Pozostałe procedury syntezy i krystalizacji były identyczne jak we wcześniej opisanym przypadku 2,4-dinitrobenzaldehydu.
2.2.5. Synteza pochodnej 2-chloro-6-nitrobenzaldehydu z 4-amino-1,2,4-triazolem.
Synteza tego związku była analogiczna do syntezy opisanej w punkcie 2.2.1. Wykorzystano w tym celu pochodną 2-chloro-6-nitrobenzaldehydu oraz 4-amino-1,2,4-triazol (w stosunku molowym 1:1). Pozostałe procedury syntezy i krystalizacji były identyczne jak we wcześniej opisanym przypadku 2,4-dinitrobenzaldehydu.
2.3. Krystalizacja.
W zależności od zastosowanej pochodnej benzaldehydu oraz warunków krystalizacja następuje po kilkudziesięciu minutach lub kilku dniach. Powstają związki, z wydajnością powyżej 90%, w postaci monokryształów poddawanych następnie analizie za pomocą promieniowania rentgenowskiego.
2.4. Analiza rentgenograficzna.
Analiza umożliwia poznanie struktury molekularnej badanych układów. W badaniach wykorzystano promieniowanie rentgenowskie.
Pomiary dla badanych związków przeprowadzono w temp 100(2) K przy użyciu dyfraktometru
Kuma KM4CCD, stosując promieniowanie Mo/7 i przystawkę niskotemperaturową firmy Oxford Cryosystems. Wszystkie struktury rozwiązano metodami bezpośrednimi stosując programy G. M. Sheldricka (Shelxs97). Struktury udokładniano pełnomacierzowo stosując program Shelxl97. Atomy wodoru wstawiano na podstawie znajomości geometrii cząsteczek lub lokalizowano ich położenia na mapach różnicowych gęstości elektronowej. Atomy cięższe od wodoru udokładniano anizotropowo.
2.5. Właściwości strukturalne nowych związków. W wyniku syntezy otrzymano następujące struktury pochodnych nitrobenzaldehydów z 4-amino-1,2,4-triazolami. Określono ich budowę za pomocą badań rentgenograficznych.
Budowę chemiczną nowych związków odzwierciedlają wyniki zawarte w tabeli 1 oraz poniżej przedstawione wzory (1-5).
PL 214 249 B1
T a b e l a 1
Podstawowe dane z analizy rentgenograficznej dla nowych związków
| 2,4dnbald (1a) | 2nbald (1b) | 3nbald (1c) | 4nbald (1d) | |
| Kryształ Wzór sumaryczny | C9H8N6O5 | 2(C90N5O3) | C9H9N5O3 | 2(C9H9N5O3) |
| Masa molowa (g mol-1) | 280.21 | 470.42 | 235.21 | 235.21 |
| Układ kryst., grupa | Rombowy, Pccn | Trójskośny, P-1 | Jednoskośny, | Jednoskośny, Cc |
| a (A) | 14.202 (2) | 8.892 (3) | 12.316 (3) | 6.963 (3) |
| b (A) | 14.267 (2) | 10.436 (2) | 10.616 (2) | 20.581 (2) |
| c (A) | 11.223 (3) | 11.591 (2) | 7.863 (2) | 7.377 (4) |
| β (°) | 74.733 (3) | 92.393 (5) | 93.473 (3) | |
| V (A3) | 2274.1(3) | 1037.66(2) | 1027.12(2) | 1055.11(2) |
P r z y k ł a d 3. Właściwości biologiczne nowych związków
Właściwości biologiczne pochodnych nitrobenzaldehydów z 4-amino-1,2,4-triazolem-aktywność bakteriobójcza.
Do określenia tej aktywności bakteriobójczej badanych związków wykorzystano test MABA (Microplate Alamar Blue® Assay), w którym wykorzystywany jest barwnik fluorescencyjny Alamar Blue® jako znacznik żywych komórek bakteryjnych. Metoda jest rutynowo stosowana w badaniach aktywności nowych leków, cytotoksyczności związków z różnych klas chemicznych, w monitorowaniu namnażania komórek ludzkich, zwierzęcych, bakteryjnych i grzybów.
Test Microplate Alamar Blue® Assay (MABA). Test prowadzono na jałowych płytkach do hodowli komórkowych. Kolejne stężenia związku uzyskano poprzez rozcieńczanie (w szeregu geometrycznym) podłożem hodowlanym, właściwym dla danych bakterii. Do tak przygotowanego materiału dodawano zawiesinę bakteryjną o określonej gęstości optycznej. Sporządzono kontrole negatywne „no growth” oraz pozytywne „growth”; zabezpieczone przed parowaniem płytki poddawano inkubacji w warunkach odpowiednich dla danej bakterii. W ostatnim etapie utworzone kompleksy komórka bakteryjna - badany związek poddawano znakowaniu z użyciem barwnika. Komórki wykazujące aktywność metaboliczną doprowadzają do chemicznej redukcji barwnika. Poziom redukcji Alamar Blue®, świadczący o ilości pozostałych przy użyciu komórek bakteryjnych, mierzony jest przy użyciu fluorymetru. Minimalne stężenie hamujące (MIC, Minimal Inhibitory Concentration) oznaczono przez obliczenie zahamowania wzrostu bakterii (w procentach) po wykreśleniu krzywych hamowania.
Badano następujące nitropochodne benzaldehydów z 4-amino-1,2,4-triazolem: 2,4-dinitrobenzaldehyd, 2-nitrobenzaldehyd, 3-nitrobenzaldehyd, 4-nitrobenzaldehyd. Dodatkowo zbadano właściwości 4-amino-1,2,4-triazol zastosowanego następnie jako kontrola wobec nowych związków. Każdy związek badano dwukrotnie. 4-amino-1,2,4-triazol został przebadany w celu sprawdzenia właściwości bakterio- i grzybobójczych samej aminy. Pozwoliło to ocenić jaki wpływ może mieć ewentualnie sam triazol i czy aktywność biologiczna wynika z faktu, że badana substancja jest bakteriobójcza ponieważ jest w niej 4-amino-1,2,4-triazol czy też są to właściwości wynikające z takiego połączenia cząsteczki aminowej oraz aldehydowej.
W badaniach wykorzystane zostały szczepy bakteryjne z Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów (PCM) przy Instytucie Immunologii i Terapii Doświadczalnej PAN we Wrocławiu: Klebsiella pneumoniae PCM 57, Staphylococcus aureus PCM 2602, Escherichia coli PCM 1144, Pseudomonas aeruginosa PCM 2058, Candida albicans PCM 2560.
Odczynniki i materiały do testu MABA.
a) barwnik Alamar Blue® (Biosource, USA) - (nazwa chemiczna i wzór objęte patentem)
- był stosowany jako znacznik bakterii do pomiaru fluorescencji,
b) dimetylosulfotlenek (DMSO, Merck) - rozpuszczalnik dla badanych związków,
c) jałowa woda miliQ.
Podłoże do hodowli bakterii. Stosowano podłoże płynne - standardowy bulion odżywczy (Difco).
Hodowla bakterii. Bakterie przechowywane na skosie agarowym (inoculum - pasaż 3), każdorazowo przesiewano na podłoże płynne i hodowano przez 24 godz. w temp 37°C. Prowadzono pomiar
PL 214 249 B1 gęstości optycznej zawiesiny bakterii przy długości fali 550 nm. W celu ujednolicenia pomiaru zawiesinę (w razie potrzeby) rozcieńczano do wartości absorbancji 0,3.
Przygotowanie związków do oznaczenia aktywności bakteriobójczej przy użyciu testu MABA
Związki o naważce 10 mg były rozpuszczane w 100 μΐ DMSO, a następnie rozcieńczane do objętości 10 ml wodą miliQ (1 mg/ml). 4-amino-1,2,4-triazol został rozpuszczony w miliQ (1 mg/ml).
Badane związki były rozcieńczane w postępie geometrycznym w podłożu bakteryjnym na jałowej 96-studzienkowej płytce do hodowli komórkowych (Nunc), początkowe stężenie 1 mg/1 ml, następnie 0,5 mg/1 ml, 0,25 mg/1 ml itd. W tym celu nanoszono do wszystkich studzienek (za wyjątkiem pierwszej) po 100 μΐ 1 wody miliQ, następnie do pierwszej w szeregu naniesiono 200 μΐ badanego związku. Pobierano po 100 μl i przenoszono 20 (rozcieńczając) do kolejnych studzienek.
Kontrole dla testu stanowiły:
- jałowe podłoże hodowlane (200 μΐ),
- podłoże hodowlane (100 μΐ) + zawiesina bakterii (100 μΐ),
- nierozcieńczona zawiesina bakterii (200 μΐ),
- woda miliQ (100 μθ + zawiesina bakterii (100 p1).
Procedura laboratoryjna
Na płytkę z szeregami rozcieńczeń badanych związków nanoszono zawiesinę bakterii i inkubowano w 37°C przez 24 godz. Kompleks komórka bakteryjna - badany związek znakowany był następnie barwnikiem Alamar Blue® (20 μΐ) i reinkubowany przez 2 godz. Poziom fluorescencji, której źródłem był barwnik pochłonięty przez pozostałe przy życiu komórki bakteryjne, był odczytywany przy użyciu czytnika Victor2 (Wallac, Perkin Elmer), przy długości fali 540 - 590 nm (wzbudzenia-emisji).
Aktywność bakteriobójcza
Działanie hamujące wzrost bakterii związków określano za pomocą MIC (Minimal Inhibitory Concentration - minimalne stężenie hamujące), czyli najniższe stężenie [pg/mi], przy którym wystąpiło hamowanie wzrostu bakterii.
Wyniki zgromadzono poniżej.
T a b e l a 2
Zestawienie wyników badań dotyczących właściwości bakteriobójczych nowych związków.
| MIC [mg/ml] | 2,4dnbald | 2nbald | 3nbald | 4nbald |
| E. coli | 0.25 | 0.5 | 0.5 | 1 |
| K. pneumoniae | 0.5 | 0 | 0 | 0.25 |
| P. aeruginosa | 0 | 0 | 0 | 0 |
| Staph, aureus | 0.125 | 0 | 0 | 0 |
Aktywność bakteriobójcza związku otrzymanego z pochodnej 2,4-dinitrobenzaldehydu oraz 4-amino-1,2,4-triazolu (2,4dnbald)
Zaobserwowano hamowanie wzrostu wszystkich badanych bakterii. Najskuteczniejsze działanie wykazano w stosunku do Staphylococcus aureus (MIC 125 μg/ml), następnie do Escherichia coli (MIC 250 μg/ml) i Klebsiella pneumoniae (MIC 500 μg/ml). Wynik świadczy o znacznym potencjale bakteriobójczym, zarówno w stosunku do bakterii Gram- dodatnich, jak i Gram-ujemnych (patrz fig. 1).
Aktywność bakteriobójcza związku otrzymanego z pochodnej 2-nitrobenzaldehydu oraz 4-amino-1,2,4-triazolu (2nbald)
Zaobserwowano działanie hamujące wzrost E. coli w stężeniu 1 mg/ml.
Bakteriobójcza aktywność 2nbald jest znikoma (patrz fig. 2).
Aktywność bakteriobójcza związku otrzymanego z pochodnej 3-nitrobenzaldehydu oraz 4-amino-1,2,4-triazolu (3nbald)
Podobnie jak w przypadku związku 2nbald, obserwuje się jedynie zahamowanie wzrostu E. coli, przy minimalnym stężeniu potrzebnym do zahamowania wzrostu 0.5 mg/ml. W stosunku do pozostałych bakterii nie obserwuje się aktywności przeciwbakteryjnej (patrz fig. 3).
Aktywność bakteriobójcza związku otrzymanego z pochodnej 4-nitrobenzaldehydu oraz 4-amino-1,2,4-triazolu (4nbald)
Zauważyć można działanie hamujące wzrost bakterii Klebsiella pneumoniae (MIC 0.25 mg/ml) oraz - jak w przypadku 2nbald - wobec E. coli w maksymalnym stężeniu (patrz fig. 4).
Aktywność grzybobójcza otrzymanych związków wobec drożdży Candida albicans
PL 214 249 B1
Badania wykonano dla czterech związków. Najsilniejsze właściwości hamujące wzrost Candida albicans wykazał związek 2,4dnbald, dla którego MIC wynosi 0.125 mg/l ml (patrz fig. 5). Działanie hamujące występuje również dla związków 2nbald oraz 4nbald, ale tylko w maksymalnym stężeniu (MIC 1 mg/1 ml).
Wnioski. Otrzymane wyniki mają istotne znaczenie dla badań pochodnych nitrobenzaldehydów z 4-amino-1,2,4-triazolem. Stwierdzono, że właściwości hamujące wzrost bakterii wynikają z charakterystycznych własności nowych związków na bazie triazoli, nie są one zaś spowodowane obecnością części triazolowej: cząsteczka 4-amino-1,2,4-triazolu nie ma żadnych właściwości hamujących wzrost badanych bakterii, działanie takie wykazuje natomiast grupa jego pochodnych.
Największą aktywność wobec wzrostu bakterii zaobserwowano dla związku 2,4dnbald. Hamował on wzrost wszystkich badanych bakterii już w stężeniu 0,125 mg/ml, i to zarówno wobec bakterii Gram-dodatnich, jak i Gram-ujemnych oraz przedstawicieli Candida.
Pozostałe związki wykazywały aktywność bakteriobójczą i grzybobójczą w małym stopniu, zwykle powodowały zahamowanie wzrostu komórek bakteryjnych i/lub drożdży w maksymalnym badanym stężeniu tych związków (1 mg/ml).
Literatura
[1] K. T. Potts., Chem. Rev. 61 (1961), 87
[2] J. Reedijk, In: G. Wilkinson (Ed.), Comprehensive Coordination Chemistry, Vol II, Pergamon, Oxford, 1987, 73
[3] C. Janiak, J. Chem. Soc. Chem. Commun. (1994), 545
[4] Y. S. Wu, H. K. Lee, S. F. Y., Li, Journal of Chromatography A, 912 (2001), 171
[5] T. L. Lee, L. Ya-Chuan, J. W. Chia-Lin, L. Mei-Shey, Y. Su-Chen, Ch. Hsiao-Jen, Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. Vol. 6, No. 12, (1996), 1335
[6] F.R. Benson, Tetrazoles, tetrazines and Purines and Related Ring Systems, Heterocyklic Compounds, Vol. 8, edited by R. C. Elderfield, 1-104. New York: Weiley
[7] S. Demirayak, K. Benkli, K. Guven, Pharm. Acta Helv. 72 (1998) 285
[8] G. J. Tanoury, C. H. Senanayake, R. Hett, A. M. Kuhn, D. W. Kessler, S. A. Wald, Tethraedron Lett. 39, (1998), 6845
[9] http://pl.wikipedia.org/wiki/Imina
[10] D. R. Williams, Chem Rev. 72, (1972), 203
[11] Z. Zhang, Μ. Li, L. Lhao, Z. Li, Org. Chem., 14, (1993), 397
[12] N. Weiss, A. Bahajaj, E. Elsherbini, J. Heterocycl. Chem., 23, (1986), 1451
[13] I. Awad, A. Abel-Rahman, E. Bakite, J. Chem. Technol. Bioteehnol., 51, (1991), 483
[14] Z. Ciunik, K. Drabent, L. Szetenberg, Journal of Molecular Structure, 641, (2002) 175
[15] Z. Ciunik, K. Drabent, Polish J. Chem., 75, (2001) 1475
[16] S. Berski, Z. Ciunik, K. Drabent, Z. Latajka, J. Panek, J. Phys. Chem. B, 108, (2004) 12327
[17] Y. Xiu-Ying, Z. Pu-Yong, X. Zhong-Jie, Acta Cryst. E63, (2007), o511
[18] L. Yuan-Fang, Ch. Suchada, S. S. S. Raj, F. Hong-Fun, Z. Yin-Han, X. Fu-Xin, T. Yu-Peng, N Shi-Sheng, Acta Cryst. C55, (1999), 93
[19] M. Barys, Z. Ciunik, Acta Cyst. E61, (2006), 1967
[20] S. Mukopadhay, M. Mohanty, A. Mangla, A. George, V. Bal, S. Rath, B. Ravindran, J. Immunol. 168, (2002), 2914
[21] L. E. DeForge, K. L. Billeci, S. M. Kramer, J. J Immunol. Methods. 245, (2000) ,79
[22] L. A. Collins, S. G. Franzblau, Antimicrob. Agents Chemother. 41, (1997), 1004
[23] F. C. Tenover, J. M. Swenson, C. M. O'Hara, S. A. Stocker. J. Clin. Microbiol. 33, (1995), 1524
[24] D. M. Yajko, J. J. Medej, Μ. V. Lancaster, C. A. Sanders, V. L. Cawthon, B. Gee, A. Babst, W. K. Hodley, J. Clin. Microbiol. 33, (1995), 2324
PL 214 249 B1
Claims (8)
- Zastrzeżenia patentowe1. Związek o wzorze:RR.R'RRH-C-OHNH gdzie:R oznacza: NO2, Cl albo H,R1 oznacza: NO2, Cl, H,R2 oznacza: NO2, H,R3 oznacza: NO2, Cl, H,R4 oznacza: NO2, Cl, H.
- 2. Nowa pochodna 4-amino-1,2,4-triazolu z 2,4-dinitrobenzaldehydem według zastrz. 1, znamienna tym, że została wybrana spośród związków o wzorach 1 do 5.
- 3. Sposób otrzymywania nowych pochodnych triazoli określonych w zastrz. od 1 do 2, znamienny tym, że nitrobenzaldehyd poddaje się reakcji z 4-amino-1,2,4-triazolem, w równomolowych ilościach obu substancji rozpuszczonych w rozpuszczalniku, a następnie przeprowadza się wyodrębnienie otrzymanych związków.
- 4. Sposób według zastrz. 3, znamienny tym, że związki wyodrębnia się poprzez krystalizację.
- 5. Sposób według zastrz. 3, znamienny tym, że rozpuszczalnikiem zastosowanym w reakcji otrzymywania nowych pochodnych triazolu jest rozpuszczalnik organiczny, taki jak metanol, etanol, acetonitryl, propanol, izopropanol, DMF, DMSO, butanol, aceton, fenol i eter dietylowy.
- 6. Sposób według zastrz. 3, znamienny tym, że otrzymywane są aktywne biologicznie mieszaniny racemiczne chiralnych pochodnych tiazolu lub ich czyste izomery.
- 7. Zastosowanie nowych pochodnych tiazolu określonych w zastrz. od 1 do 2 do wytwarzania leku przeznaczonego do zapobiegania i/lub leczenia infekcji wywołanych bakteriami i grzybami.
- 8. Zastosowanie według zastrz. 7, znamienne tym, że lek wytwarzany jest w postaci maści, żelu, tabletki, kapsułki, proszku, granulek, syropu, zastrzyku lub czopków.PL 214 249 B1RysunkiWzór 2Wzór 3PL 214 249 B1Wzór 5PL 214 249 B1Fig. 12nbald2,4 drtbaldKlebsiella 2,4dnbald 28.11.06-Staph aureus70000004000000 <300000020000001000000 01 0,500 0,250 0,125 0,063 0,031 0,016 0,008 0,004 0,002- Klebsiella 2nbald 13.12.06 —— Ecoli 2nbald 13.12.O0O/n1 Staph aureus —Rseud. aeruginosa700000060000005000000 4000000 30000002000000 100000060000005000000Fig. 2PL 214 249 B1PL 214 249 B1Departament Wydawnictw UP RP Cena 4,92 zł (w tym 23% VAT)
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL382801A PL214249B1 (pl) | 2007-06-29 | 2007-06-29 | Nowe pochodne triazoli, sposób ich otrzymywania oraz ich zastosowanie |
| PCT/PL2008/000047 WO2009005381A1 (en) | 2007-06-29 | 2008-06-28 | The novel chiral triazole derivatives, synthesis and application thereof |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL382801A PL214249B1 (pl) | 2007-06-29 | 2007-06-29 | Nowe pochodne triazoli, sposób ich otrzymywania oraz ich zastosowanie |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL382801A1 PL382801A1 (pl) | 2009-01-05 |
| PL214249B1 true PL214249B1 (pl) | 2013-07-31 |
Family
ID=39869758
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL382801A PL214249B1 (pl) | 2007-06-29 | 2007-06-29 | Nowe pochodne triazoli, sposób ich otrzymywania oraz ich zastosowanie |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL214249B1 (pl) |
| WO (1) | WO2009005381A1 (pl) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101142054B1 (ko) * | 2009-10-28 | 2012-05-03 | 한국화학연구원 | 트리아졸 화합물 및 이를 포함하는 결핵 치료용 약학 조성물 |
| PL406149A1 (pl) * | 2013-11-20 | 2015-05-25 | Wrocławskie Centrum Badań Eit + Spółka Z Ograniczoną Odpowiedzialnością | Pochodne 4-amino-3, 5-dimetylo-4H-1, 2,4-triazoli, sposób ich otrzymywania, środek farmaceutyczny zawierający te związki oraz ich zastosowanie |
| CZ306408B6 (cs) * | 2014-12-11 | 2017-01-11 | Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové | Dinitrofenyloxadiazol nebo -triazol, jeho použití a farmaceutický přípravek ho obsahující |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU2002328176A1 (en) * | 2002-08-26 | 2004-03-11 | Ranbaxy Laboratories Limited | Azole derivatives as antifungal agents |
-
2007
- 2007-06-29 PL PL382801A patent/PL214249B1/pl unknown
-
2008
- 2008-06-28 WO PCT/PL2008/000047 patent/WO2009005381A1/en not_active Ceased
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL382801A1 (pl) | 2009-01-05 |
| WO2009005381A1 (en) | 2009-01-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Mesbah et al. | Synthesis, characterization, spectroscopic studies and antimicrobial activity of three new Schiff bases derived from Heterocyclic moiety | |
| Bitu et al. | Anti-pathogenic activity of cu (II) complexes incorporating Schiff bases: a short review | |
| Singh et al. | Design, synthesis and antimicrobial activity of novel benzothiazole analogs | |
| Sumrra et al. | Complexes of imino-1, 2, 4-triazole derivative with transition metals: synthesis and antibacterial study | |
| Maddila et al. | New class of triazole derivatives and their antimicrobial activity | |
| Lobana et al. | Synthesis and structures of 5-nitro-salicylaldehyde thiosemicarb-azonates of copper (ii): molecular spectroscopy, ESI-mass studies, antimicrobial activity and cytotoxicity | |
| Karadağ et al. | Five novel dicyanidoaurate (I)-based complexes exhibiting significant biological activities: synthesis, characterization and three crystal structures | |
| Singh et al. | Copper (II), nickel (II), zinc (II) and cadmium (II) complexes of 1, 2, 4-triazole based Schiff base ligand: synthesis, comparative spectroscopic, thermal, biological and molecular docking studies | |
| Islam et al. | Biological screening of a novel nickel (II) tyrosine complex | |
| PL214249B1 (pl) | Nowe pochodne triazoli, sposób ich otrzymywania oraz ich zastosowanie | |
| Murad et al. | Preparation and diagnosis of new derivatives of the tetrazole ring derived from 2-bromoisophthaladehyde and evaluation of their biological effectiveness | |
| Khalil et al. | Synthesis and characterization of five-membered heterocyclic compounds of tetrazole derivatives and their biological activity | |
| Al-Muhanaa et al. | Preparation and Biological Activities of New Heterocyclic Azo Ligand and Some of Its Chelate Complexes | |
| Elewa et al. | Synthesis and characterization of some tetrazoles and their prospective for aerobic micro-fouling mitigation | |
| Chohan et al. | Metal‐based isatin‐bearing sulfonamides: their synthesis, characterization and biological properties | |
| Pooja et al. | Synthesis, characterization, anti-bacterial and DNA nicking activity of new complexes of 1-(2, 4-dinitrophenylamino)-4, 4, 6-trimethyl-3, 4-dihydropyrimidine-2-(1H)--thione | |
| Zakir et al. | Antibacterial activities of benzoin thiosemicarbazone and its complexes with Co (II) and Ni (II) | |
| Ayrim et al. | Hexahydro-1, 2, 3-triazine derivatives: synthesis, antimicrobial evaluation, antibiofilm activity and study of molecular docking against glucosamine-6-phosphate | |
| Chandra et al. | Antibacterial and antifungal activity of Schiff base ligands and their metal complexes-A Review | |
| Fahmi et al. | Stereochemical, biochemical and ligation behaviour of divalent platinum complexes of sulfur and nitrogen donor agents | |
| Singh et al. | SYNTHESIS, SPECTRAL STUDIES AND BIOLOGICAL ACTIVITY OF SOME IMIDAZO [2, 1-B][1, 3, 4] THIADIAZOLE DERIVATIVES. | |
| Zabin et al. | The bivalent Cu, Ni and Zn complexes of unsymmetrical ONO tridentate Schiff base ligands derived from 2-aminobenzoic acid: antimicrobial and molluscicidal activity | |
| Karabasannavar et al. | Synthesis, Characterization, Antimicrobial, DNA cleavage, and Cytotoxicity Studies of Some Metal (II) Complexes of Tridentate Schiff Base Ligand: 2-hydroxy-3-((4-(4-phenylthiazol-2-yl) semicarbazide) methyl) Benzoic Acid | |
| Al-Haidari et al. | Synthesis of New 5-Aryl Tetrazoline from N-Aceto Hydrazide Cyclic Imides and Study of Biological Activity | |
| Mahmood et al. | PREPARATION, PHYSICOCHEMICAL AND BIOLOGICAL STUDY OF SCHIFF BASE DERIVED FROM 2-AMINO-5-MERCPTO-1, 3, 4 THIADIAZOLE WITH SOME METAL IONS. |