PL211824B1 - Trimetyloaminowe pochodne poli-cis i poli-trans liniowych oligomerów izoprenowych, sposób ich wytwarzania oraz ich zastosowanie - Google Patents
Trimetyloaminowe pochodne poli-cis i poli-trans liniowych oligomerów izoprenowych, sposób ich wytwarzania oraz ich zastosowanieInfo
- Publication number
- PL211824B1 PL211824B1 PL382448A PL38244807A PL211824B1 PL 211824 B1 PL211824 B1 PL 211824B1 PL 382448 A PL382448 A PL 382448A PL 38244807 A PL38244807 A PL 38244807A PL 211824 B1 PL211824 B1 PL 211824B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- formula
- poly
- cis
- natural number
- derivatives
- Prior art date
Links
- RRHGJUQNOFWUDK-UHFFFAOYSA-N Isoprene Chemical compound CC(=C)C=C RRHGJUQNOFWUDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 7
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical class CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- XKJCHHZQLQNZHY-UHFFFAOYSA-N phthalimide Chemical class C1=CC=C2C(=O)NC(=O)C2=C1 XKJCHHZQLQNZHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 9
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 7
- 238000001890 transfection Methods 0.000 claims description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 5
- NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N (2s)-2,6-diaminohexanoic acid;(2s)-2-hydroxybutanedioic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O.NCCCC[C@H](N)C(O)=O NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N 0.000 claims description 4
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 4
- IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N hydrazine monohydrate Substances O.NN IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N iodomethane Chemical compound IC INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 claims description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 4
- 150000003242 quaternary ammonium salts Chemical class 0.000 claims description 4
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- VVWRJUBEIPHGQF-UHFFFAOYSA-N propan-2-yl n-propan-2-yloxycarbonyliminocarbamate Chemical compound CC(C)OC(=O)N=NC(=O)OC(C)C VVWRJUBEIPHGQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 12
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229920001731 Polyprenol Polymers 0.000 description 8
- 229930186185 Polyprenol Natural products 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 150000003096 polyprenols Chemical class 0.000 description 8
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 6
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 6
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 6
- FVAUCKIRQBBSSJ-UHFFFAOYSA-M sodium iodide Chemical compound [Na+].[I-] FVAUCKIRQBBSSJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 5
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 4
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 4
- RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphine Chemical compound C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BDMCAOBQLHJGBE-UHFFFAOYSA-N C60-polyprenol Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC(=CCCC(=C/CCC(=C/CCC(=C/CCC(=C/CCC(=C/CCC(=C/CCC(=C/CCC(=C/CO)C)C)C)C)C)C)C)C)C)C)C)C BDMCAOBQLHJGBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- TXKJNHBRVLCYFX-RDQGWRCRSA-N all-trans-undecaprenol Chemical compound CC(C)=CCC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CO TXKJNHBRVLCYFX-RDQGWRCRSA-N 0.000 description 3
- 150000002031 dolichols Chemical class 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 125000001453 quaternary ammonium group Chemical group 0.000 description 3
- RORDEOUGMCQERP-UHFFFAOYSA-N (2Z,6Z,10Z,14Z,18Z,22Z,26E,30E,34E)-3,7,11,15,19,23,27,31,35,39-decamethyl-tetraconta-2,6,10,14,18,22,26,30,34,38-decaen-1-ol Natural products CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCO RORDEOUGMCQERP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TXKJNHBRVLCYFX-UHFFFAOYSA-N (2Z,6Z,10Z,14Z,18Z,22Z,26Z,30E,34E,38E)-3,7,11,15,19,23,27,31,35,39,43-undecamethyl-tetratetraconta-2,6,10,14,18,22,26,30,34,38,42-undecaen-1-ol Natural products CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCO TXKJNHBRVLCYFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RORDEOUGMCQERP-CMVHWAPMSA-N (2e,6e,10e,14e,18e,22e,26e,30e,34e)-3,7,11,15,19,23,27,31,35,39-decamethyltetraconta-2,6,10,14,18,22,26,30,34,38-decaen-1-ol Chemical compound CC(C)=CCC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CO RORDEOUGMCQERP-CMVHWAPMSA-N 0.000 description 2
- ZFFMLCVRJBZUDZ-UHFFFAOYSA-N 2,3-dimethylbutane Chemical group CC(C)C(C)C ZFFMLCVRJBZUDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000218378 Magnolia Species 0.000 description 2
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 2
- 150000004808 allyl alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 229920002672 di-trans,poly-cis-Undecaprenol Polymers 0.000 description 2
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 2
- 150000004694 iodide salts Chemical class 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical group 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000009518 sodium iodide Nutrition 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 239000012096 transfection reagent Substances 0.000 description 2
- -1 Allylic Amines Chemical class 0.000 description 1
- 235000018185 Betula X alpestris Nutrition 0.000 description 1
- 235000018212 Betula X uliginosa Nutrition 0.000 description 1
- 235000009109 Betula pendula Nutrition 0.000 description 1
- 241000219430 Betula pendula Species 0.000 description 1
- AFPLNGZPBSKHHQ-UHFFFAOYSA-N Betulaprenol 9 Natural products CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCO AFPLNGZPBSKHHQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000208125 Nicotiana Species 0.000 description 1
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-N diphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(O)=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 125000005543 phthalimide group Chemical class 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229940005657 pyrophosphoric acid Drugs 0.000 description 1
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku są czwartorzędowe jodki amoniowe o ogólnym wzorze 1 gdzie n oznacza liczbę naturalną od 7 do 12 i ich zastosowanie. Związki o ogólnym wzorze 1 są pochodnymi liniowych polimerów składających się z pięciowęglowych reszt izoprenowych o konfiguracji E lub głównie Z, zwłaszcza pochodzenia naturalnego, o łańcuchu złożonym z 7 do 12-u reszt izoprenowych i stanowią nowe kationowe lipidy o potencjalnych właściwościach detergentowych i możliwym zastosowaniu w molekularnej biologii komórkowej.
| Η- | ęH3 -ch2—c = | = CH-CH2- | n | CH, n-ch3 i ch3 | H- | ch3 ’ - CH2-c CH-CH2- | — OH n |
| wzór 1 | (n = 7-12) | wzór 2 (n = 7-12) |
Dotychczas znane były z występowania w surowcach roślinnych i u bakterii, jedynie łańcuchy izoprenoidów wymienionej długości w formie wolnych alkoholi o ogólnym wzorze 2, ich estrów z kwasami karboksylowymi, kwasem fosforowym lub pirofosforowym lub ich połączenia z monofosfo- lub difosfocukrowcami. Wymienione wyżej lipidy występujące w tkankach roślinnych lub komórkach bakterii, a także w formie zawierającej zredukowaną OH-terminalną resztę (dihydropoliprenole tzw. dolichole) występujące w tkankach zwierzęcych i w komórkach eukariotycznych drobnoustrojów odgrywają rolę koenzymów ważnych przemian biochemicznych oraz elementów strukturotwórczych warunkujących budowę i funkcję błon biologicznych [1].
Wyniki eksperymentów wykonanych na modelowych błonach lipidowych oraz na izolowanych komórkach [2,3,4,5] pozwalają przypuszczać, że półsynteytyczne, kationowe formy długołańcuchowych poliprenoli mogą odegrać ważną rotę w wysoko specjalistycznych badaniach prowadzonych w biologii molekularnej i komórkowej.
Przeprowadzone badania własne Zgłaszającego, nieoczekiwanie wykazały, że otrzymane pochodne poliprenoli o wzorze 1, zwłaszcza pochodne dla n=7, mogą być wykorzystane do wprowadzania DNA do komórek. Zastosowanie reagenta składającego się z preparatu o wzorze 1 (n=7) i dioteylofosfatydyloetanoloaminy w stosunku 3:1 pozwolił o na transfekcję komórek ludzkiego raka prostaty DU145 plazmidem zawierającym gen kodujący GFP (ang. Green Fluorescent Protein) z wydajnością zbliżoną do transfekcji wywołanej działaniem znanego i stosowanego dotychczas preparatu LipofectamineTM 2000 Transfection Reagent firmy Invitrogen Corporation. Potwierdziło to możliwość wykorzystania otrzymanych poliprenoli do przygotowania nowej generacji lipofektantów umożliwiających transfer DNA do komórek eukariotycznych.
Jodki trimetylopoliprenyloamoniowe (poli-cis) i (poli-trans) o wzorze 1, gdzie n oznacza liczbę naturalną od 7 do 12.
Sposób wytwarzania jodków trimetylopoliprenyloamoniowych (poli-cis) i (poli-trans) o wzorze 1, gdzie n oznacza liczbę naturalną od 7 do 12, według wynalazku polega na tym, że alkohol o wzorze 2, gdzie n oznacza liczbę naturalną od 7 do 12, przekształca się w pochodną ftalimidową o wzorze 3, w reakcji z ftalimidem i azodikarboksylanem diizopropylowym (DIAD) w tetrahydrofuranie. Z pochodnej ftalimidowej o wzorze 3 uwalnia się aminę o wzorze 4 w reakcji z wodzianem hydrazyny w metanolu. Wolną aminę o wzorze 4 poddaje się reakcji czwartorzędowania jodkiem metylu w etanolu otrzymując czwartorzędową sól amoniową o wzorze 1.
W opisanej procedurze wykorzystano dobre rozeznanie dotyczą ce nagromadzania dł ugoła ń cuchowych poliprenoli w materiałach roślinnych, ich preparatyki i identyfikacji [6]. Przy przekształceniu poliprenoli o wzorze 2 (n=7-12) w aminy o wzorze 4 (n=7-12) wzorowano się na znanych sposobach przekształcania alkoholi allilowych w aminy [7].
Sposób wytwarzania czwartorzędowych jodków amoniowych, według wynalazku przedstawiono na rysunku - Schemat 1.
PL 211 824 B1
Schemat 1
Zastosowanie związku o wzorze 1 i dioleylofosfatydyloetanoloaminy, korzystnie w stosunku 3:1 do transfekcji komórek ludzkiego raka prostaty plazmidem zawierającym gen kodujący GFP (ang. Green Fluorescent Protein).
Potwierdzono to w wykonanych przykładach wykorzystania otrzymanych poliprenoli do przygotowania nowej generacji lipofektantów umożliwiających transfer DNA do komórek eukariotycznych.
Poniżej przedstawiono przykłady wykonania wynalazku.
P r z y k ł a d I.
Otrzymywanie czwartorzędowej soli o wzorze 1 (n = 9)
Alkohol o wzorze 2 (n = 9) (2.0 g, 3.2 mmol) rozpuszcza się w bezwodnym tetrahydrofuranie (60 ml) i do roztworu dodaje się azadikarboksylan diizopropylowy (1.0 mL, 5.0 mmol) i trifenylofosfinę (1.3 g, 5 mmol). Roztwór pozostawia się w temperaturze pokojowej na 16 godz., a następnie do roztworu dodaje się wodę (200 mL) i mieszaninę ekstrahuje heksanem (3 x 100 mL). Warstwę organiczną suszy się bezwodnym siarczanem magnezu, a rozpuszczalnik usuwa na wyparce obrotowej. Pozostałość chromatografuje się na żelu krzemionkowym (warstwa 6 x 14 cm), używając do wymywania 3% roztwór octanu etylu w heksanie. Otrzymuje się 1.9 g (wydajność 81%) krystalicznego ftalimidu 3 (n = 9). tt = 48-50°C; 1H NMR (500 MHz, CDCl3), δ = 1.56 (br. s, 6H), 1.60 (br. s, 17H), 1.68 (d, J = 1.1
Hz, 3H), 1.83 (d, J = 0.9 Hz, 3H), 1.91-2.10 (m, 33H), 4.28 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 5.04-5.13 (m, 8H), 5.27 (tq, J = 7.1, 1.2 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 5.4, 3.0 Hz, 2H), 7.83 (dd, J = 5.4, 3.0 Hz, 2H); IR (CHCl3), ν = 1770, 1712, 1468, 1434, 1395, 1325 cm-1;
Analiza elementarna dla wzoru C53H77NO2: obliczono C - 83.74, H - 10.21, N - 1.84, znaleziono C - 83.83, H - 10.24, N - 1.93.
Sproszkowany ftalimid o wzorze 3 (n = 9) (1.2 g, 1.6 mmol) dodaje się do 0.3 M, roztworu wodzianu hydrazyny w metanolu (40 mL) i mieszaninę miesza się w temperaturze 60°C aż do uzyskania klarownego roztworu. Następnie mieszaninę filtruje się przez płytkę za szkła spiekanego i do przesączu dodaje się wodę (8 mL) i 10% kwas solny (8 mL). Mieszaninę miesza się w temperaturze pokojowej przez 12 godzin, a następnie odsącza wytrącony osad. Osad przemywa się wodą i wytrząsa z mieszaniną eteru dietylowego (200 mL) i 5% wodnego roztworu wodorotlenku sodu (100 mL). Warstwę organiczną przemywa się nasyconym roztworem chlorku sodu i suszy bezwodnym siarczanem sodu. Rozpuszczalnik usuwa się na wyparce obrotowej, a pozostałość, będącą aminą 4 rozpuszcza się w etanolu (40 mL) i do roztworu dodaje się jodek metylu (6 mL) i wodorowęglan sodu (9.0 g). Mieszaninę miesza się w temperaturze pokojowej przez 15 godzin, a następnie filtruje przez płytkę ze spieku szklanego. Osad na płytce przemywa się chloroformem (150 mL), a przesącz wytrząsa się z 5% wodnym roztworem jodku sodu (50 mL). Warstwy rozdziela się i z warstwy organicznej usuwa się rozpuszczalnik na wyparce obrotowej. Pozostałość krystalizuje się z etanolu. Otrzymuje się 0.96 g (wydajność 76%) czwartorzędowej soli amoniowej o wzorze 1 (n = 9).
PL 211 824 B1 tt = 162-164°C; 1H NMR (500 MHz, CDCl3), δ = 1.60 (br. s, 24H), 1.68 (s, 3H), 1.92 (s, 3H), 1.95-2.00 (m, 14H), 2.03-2.10 (m, 14H), 2.14-2.22 (m, 4H), 3.39 (s, 9H), 4.26 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 5.035.14 (m, 8H), 5.34 (t, J = 8.2 Hz, 1H); IR (CHCI3), ν = 1662, 1485, 1474, 1449, 1383, 888 cm-1;
Analiza elementarna dla wzoru C48H82IN: obliczono C - 72.06, H - 10.33, N - 1.75, znaleziono C - 71.97, H - 10.41, N - 1.65.
P r z y k ł a d II.
Otrzymywanie czwartorzędowej soli o wzorze 1 (n = 7)
Alkohol 2 (n = 7) (2.0 g, 4.0 mmol) rozpuszcza się w bezwodnym tetrahydrofuranie (60 ml) i do roztworu dodaje się azadikarboksylan diizopropylowy (1.2 mL, 6.0 mmol) i trifenylofosfinę (1.6 g, 6.0 mmol). Roztwór pozostawia się w temperaturze pokojowej na 16 godz., a następnie do roztworu dodaje się wodę (200 mL) i mieszaninę ekstrahuje heksanem (3 x 100 mL). Warstwę organiczną suszy się bezwodnym siarczanem magnezu, a rozpuszczalnik usuwa na wyparce obrotowej. Pozostałość chromatografuje się na żelu krzemionkowym (warstwa 6 x 14 cm), używając do wymywania 3% roztwór octanu etylu w heksanie. Otrzymuje się 1.9 g (wydajność 76%) ftalimidu 3 (n = 7) w postaci oleju.
1H NMR (500 MHz, CDCl3), δ = 1.58-1.61 (m, 9H), 1.67-1.71 (m, 15H), 1.95-2.10 (m, 20H), 2.12-2.17 (m, 2H), 2.25-2.29 (m, 2H), 4.26 (dd, J = 7.1, 0.9 Hz, 2H), 5.07-5.16 (m, 5H), 5.18 (td, J = 7.1, 3 Hz, 1H), 5.28 (td, J = 7.1, 1.3 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 5.4, 3.0 Hz, 2H), 7.83 (dd, J = 5.4, 3.0 Hz, 2H); IR (film) ν = 1772, 1719, 1430, 1392, 1376, 1322, 1103, 719 cm-1;
HRMS (ESI) dla wzoru C43H61NO2Na+: obliczono 646.4594, otrzymano 646.4588.
Do oleistego ftalimidu 3 (n =7) (1.2 g, 1.9 mmol) dodaje się do 0.3 M roztworu wodzianu hydrazyny w metanolu (40 mL) i mieszaninę miesza się w temperaturze 60°C aż do uzyskania klarownego roztworu. Następnie mieszaninę filtruje się przez płytkę ze szkła spiekanego i do przesączu dodaje się wodę (8 mL) i 10% kwas solny (8 mL). Mieszaninę miesza się w temperaturze pokojowej przez 12 godzin, a następnie dekantuje się klarowną ciecz znad wydzielonego oleju. Olej przemywa się wodą i wytrząsa z mieszaniną eteru dietylowego (200 mL) i 5% wodnego roztworu wodorotlenku sodu (100 mL). Warstwę organiczną przemywa się nasyconym roztworem chlorku sodu i suszy bezwodnym siarczanem sodu. Rozpuszczalnik usuwa się na wyparce obrotowej, a pozostałość, będącą aminą 4 (n =7) rozpuszcza się w etanolu (40 mL) i do roztworu dodaje się jodek metylu (6 mL) i wodorowęglan sodu (9.0 g). Mieszaninę miesza się w temperaturze pokojowej przez 15 godzin, a następnie filtruje przez płytkę ze spieku szklanego. Osad na płytce przemywa się chloroformem (150 mL), a przesącz wytrząsa się z 5% wodnym roztworem jodku sodu (50 mL). Warstwy rozdziela się i z warstwy organicznej usuwa się rozpuszczalnik na wyparce obrotowej. Pozostałość krystalizuje się z etanolu. Otrzymuje się 1.1 g (wydajność 84%) czwartorzędowej soli amoniowej 1 (n = 7) w postaci oleju.
1H NMR (500 mHz, CDCI3), δ = 1.58-1.62 (m, 9H), 1.67-1.70 (m, 15H), 1.95-2.17 (m, 22H), 2.23-2.28 (m, 2H), 3.40 (s, 9H), 4.13 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 5.08-5.16 (m, 6H), 5.40 (t, J = 8.0 Hz); IR (film), ν = 1661, 1476, 1449, 1416, 1375, 890, 837 cm-1;
HRMS (ESI) dla wzoru C38H66N+: obliczono: 536.5190, otrzymano: 536.5207 P r z y k ł a d III.
Zastosowano związek o wzorze 1 otrzymany w przykładzie I i II, do przygotowania reagenta z dioleylofosfatydyloetanoloaminą w stosunku 3:1 do transfekcji komórek ludzkiego raka prostaty DU145 plazmidem zawierającym gen kodujący GFP (ang. Green Fluorescent Protein). Uzyskano wydajność zbliżoną do transfekcji wywołanej działaniem znanego i stosowanego dotychczas preparatu LipofectamineTM 2000 Transfection Reagent firmy Invitrogen Corporation. Potwierdziło to możliwość wykorzystania otrzymanych poliprenoli do przygotowania nowej generacji lipofektantów umożliwiających transfer DNA do komórek eukariotycznych.
Nie stwierdzono także toksyczności wyżej wymienionych uzyskanych czwartorzędowych jodków amoniowych 1 (n = 7) i 1 (n = 9) w stosunku do kilku typów komórek eukariotycznych hodowanych in vitro.
Przebadano z wynikiem pozytywnym wytwarzanie ftalimidów i trójmelyloamin w wypadku dekaprenolu (C-50), undekaprenolu (C-55) i dodekaprenolu (C-60) oraz długołańcuchowego (C-100) dihydroeikozaprenolu (dolicholu).
PL 211 824 B1
Izolacja poliprenoli z naturalnych surowców roślinnych została przeprowadzona według [6]: heptaprenol izolowano z trocin brzozowych (Betula verrucosa), nonaprenol (solanezol) z liści tytoniu (Nicotiana tabacum), dekaprenol, undekaprenol i dodekaprenol izolowano z liści magnolii (Magnolia sp.)
Literatura:
[1] The biological role of dolichol (1988). Chojnacki T.,Dallner G. Biochem.J. 251.1-9
[2] The influence of dolichol, dolichol esters and dolichyl phophate on phospholipid polymorphism and fluidity in model membranes (1985). Valtersson C.,Van Duijn A., Verkleij A.J.,Chojnacki T.,De Kruijff B.,Dallner G. J.Biol.Chem 260, 2742-2751.
[3] Properties of lecithin-dodecaprenol macrovesicular bilayer membranes (1986). Janas T.,Kuczera J.,Chojnacki T.,Krajewska-Rychlik I. Chem.Phys.Lipids 39, 347-355
[4] The influence of phosphorylated derivatives of heptaprenol on some properties of macrovesicular bilayer membranes (1988). Janas T., Kuczera J.,Chojnacki T., Świeżewska E. Studia Biophysica 124, 32-45.
[5] Induction of an attachment and spreading on glass of Ehrlich ascitres tumor cells by alphasaturated polyprenols (1980). Korohoda W.,Stanisz J.,Stanisz A.,Chojnicki T., Palamarczyk G., Radomińska-Pyrek A. Eur.J.Cell.Biol. 21, 239-243.
[6] The search for plant polyprenols (1994). Świeżewska E.,Sasak W.,Mańowski T., Jankowski W.,Vogtman T.,Krajewska I.,Hertel J.,Skoczyłas E.,Chojnacki T. Acta Biochim.Polon. 41, 221-260.
[7] A convenient Two-step Procedure for the Synthesis of Substituted Allylic Amines from Allylic Alcohols (1995) Sen S.E., Roach S.L. Synthesis 756-758.
Claims (3)
1. Trimetyloaminowe pochodne poli-cis i poli-trans liniowych oligomerów izoprenowych o wzorze 1, gdzie n oznacza liczbę naturalną od 7 do 12.
2. Sposób wytwarzania trimetyloaminowych pochodnych poli-cis i poli-trans liniowych oligomerów izoprenowych o wzorze 1, gdzie n oznacza liczbę naturalną od 7 do 12, znamienny tym, że alkohol o wzorze 2, gdzie n oznacza liczbę naturalną od 7 do 12, przekształca się w pochodną ftalimidową o wzorze 3, w reakcji z ftalimidem i azodikarboksylanem diizopropylowym w tetrahydrofuranie, z której uwalnia się aminę o wzorze 4 w reakcji z wodzianem hydrazyny w metanolu, którą następnie poddaje się reakcji czwartorzędowania jodkiem metylu w etanolu do wytworzenia czwartorzędowej soli amoniowej o wzorze 1.
3. Zastosowanie in vitro związku o wzorze 1, określonego w zastrz. 1, do transfekcji komórek ludzkiego raka prostaty plazmidem zawierającym gen kodujący GFP, korzystnie w obecności dioleylofosfatydyloetanoloaminy w stosunku 3:1.
Rysunek
CH,
1 3
CH,
I 3
i-
co
X
Οι_
-ch2 —c =
= CH-CH2-
N-CH, I
I 3
H-
CH2-C = CH-CH2-
_J
n
ch3
L -
wzór 1
(n = 7-12)
wzór 2 (n = 7-12)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL382448A PL211824B1 (pl) | 2007-05-17 | 2007-05-17 | Trimetyloaminowe pochodne poli-cis i poli-trans liniowych oligomerów izoprenowych, sposób ich wytwarzania oraz ich zastosowanie |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL382448A PL211824B1 (pl) | 2007-05-17 | 2007-05-17 | Trimetyloaminowe pochodne poli-cis i poli-trans liniowych oligomerów izoprenowych, sposób ich wytwarzania oraz ich zastosowanie |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL382448A1 PL382448A1 (pl) | 2008-11-24 |
| PL211824B1 true PL211824B1 (pl) | 2012-06-29 |
Family
ID=43036601
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL382448A PL211824B1 (pl) | 2007-05-17 | 2007-05-17 | Trimetyloaminowe pochodne poli-cis i poli-trans liniowych oligomerów izoprenowych, sposób ich wytwarzania oraz ich zastosowanie |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL211824B1 (pl) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2016032348A1 (en) | 2014-08-28 | 2016-03-03 | Instytut Biochemii I Biofizyki Pan | Use of cationic derivatives of polyprenols ptai in production of immunomodulating substances |
-
2007
- 2007-05-17 PL PL382448A patent/PL211824B1/pl unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2016032348A1 (en) | 2014-08-28 | 2016-03-03 | Instytut Biochemii I Biofizyki Pan | Use of cationic derivatives of polyprenols ptai in production of immunomodulating substances |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL382448A1 (pl) | 2008-11-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Kates et al. | pH-dissociation characteristics of cardiolipin and its 2′-deoxy analogue | |
| SU1367859A3 (ru) | Способ получени производных метилендифосфоновой кислоты | |
| OHNO et al. | An enantioselective synthesis of platelet-activating factors, their enantiomers, and their analogues from D-and L-tartaric acids | |
| WO2012103279A2 (en) | Methods and compositions for the synthesis of multimerizing agents | |
| DE3239858A1 (de) | Neue d-mannitderivate als ausgangsprodukte zur synthese von phospholipiden | |
| CA3190433A1 (en) | Methods of making cholic acid derivatives and starting materials therefor | |
| Dueymes et al. | Facile synthesis of simple mono-alkyl phosphates from phosphoric acid and alcohols | |
| CN115417769B (zh) | 番茄潜叶蛾性信息素成分的合成方法以及中间体 | |
| WO2013071418A1 (en) | Methods for the synthesis of plasmalogens and plasmalogen derivatives, and therapeutic uses thereof | |
| Naoshima et al. | Synthesis of Racemates and (+)-Enantiomers of f-γCaprolactone, γ-Dodecanolactone and δ-Hexadecanolactone, Lactonic Sex Pheromones of the Dermestid Beetle, Rove Beetle and Oriental Hornet | |
| CN103232369A (zh) | 一种芴甲氧羰酰谷氨酸-5-叔丁酯的制备方法 | |
| US3678137A (en) | Adamantyl-substituted-alkyl 2-aminoethyl phosphates and phosphonates | |
| Ozaki et al. | Synthesis of 2-Substituted myo-Inositol 1, 3, 4, 5-Tetrakis (phosphate) and 1, 3, 4, 5, 6-Pentakis (phosphate) Analogs. | |
| PL211824B1 (pl) | Trimetyloaminowe pochodne poli-cis i poli-trans liniowych oligomerów izoprenowych, sposób ich wytwarzania oraz ich zastosowanie | |
| EP0072531A1 (de) | Neue Cyclophosphamid-Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung | |
| DE2033357C3 (de) | Palmitoyl-propandioKl 3)-phosphorsäure-S-trimethylaminophenylester und Verfahren zu dessen Herstellung | |
| EP2221313A1 (en) | Process for the preparation of ursodeoxycholic acid disodium 3,7-disulfate | |
| Sureshan et al. | A simple and practical resolution of 1, 2: 4, 5-di-O-isopropylidene-myo-inositol | |
| EP4519281B1 (en) | Process for the preparation of cholic acid derivatives | |
| EP0026737A1 (de) | Verfahren zur Herstellung von 2,3,5,6-Tetrachlorpyridin | |
| DE2318329A1 (de) | Verfahren zur herstellung neuer heterocyclischer verbindungen | |
| IT8522695A1 (it) | Processo per la separazione enzimatica degli isomeri ottici del 2-amminobutanolo. | |
| CN101407530B (zh) | 一种2-脱氧-l-核糖的合成方法 | |
| EP0078766B1 (de) | Verfahren zur Herstellung von Aminomethylphosphonsäure | |
| Singh et al. | A facile method to enable a model phospholipid cell-permeable and photoactivatable |