PL204473B1 - Sposób otrzymywania genisteiny - Google Patents

Sposób otrzymywania genisteiny

Info

Publication number
PL204473B1
PL204473B1 PL343505A PL34350500A PL204473B1 PL 204473 B1 PL204473 B1 PL 204473B1 PL 343505 A PL343505 A PL 343505A PL 34350500 A PL34350500 A PL 34350500A PL 204473 B1 PL204473 B1 PL 204473B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
deoxybenzoin
genistein
reaction
acetic anhydride
formula
Prior art date
Application number
PL343505A
Other languages
English (en)
Other versions
PL343505A1 (en
Inventor
Osman Achmatowicz
Grzegorz Grynkiewicz
Wiesław Pucko
Wiesław Szelejewski
Krzysztof Sołtysiak
Maria Łypacewicz
Urszula Frączek
Magdalena Glice
Bartłomiej Górecki
Hanna Beczkowicz
Bożena Cichy
Ryszard Modzelewski
Iwona Cendrowska
Grażyna Cieplucha
Joanna Zagrodzka
Original Assignee
Inst Farmaceutyczny
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Inst Farmaceutyczny filed Critical Inst Farmaceutyczny
Priority to PL343505A priority Critical patent/PL204473B1/pl
Publication of PL343505A1 publication Critical patent/PL343505A1/xx
Publication of PL204473B1 publication Critical patent/PL204473B1/pl

Links

Landscapes

  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Pyrane Compounds (AREA)

Description

Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania genisteiny, stanowiącej substancję o potencjalnym zastosowaniu terapeutycznym, między innymi w profilaktyce przeciwnowotworowej.
Genisteina jest naturalnym flawonoidem pochodzenia roślinnego, wyodrębnionym po raz pierwszy z Genista tinctoria L. (janowiec barwierski). Pod względem strukturalnym stanowi trójhydroksylową pochodną 3-fenylochromen-4-onu (4',5,7-trihydroksyizoflawon) przedstawioną wzorem 1. Genisteina jest obiektem intensywnych badań jako ligand zdefiniowanych biomakromolekuł spełniających ważne funkcje fizjologiczne. Działanie genisteiny jest wielokierunkowe i wpływa nie tylko na regulację sygnalizacji wewnątrzkomórkowej (hamowanie aktywności kinaz tyrozynowych) zainicjowanej czynnikami wzrostu i prowadzącej do ekspresji onkogenów, ale także na układ immunologiczny, modulację działania receptorów estrogenowych, cykl komórkowy, działanie topoizomerazy II, mechanizmy apoptozy, angiogenezy i in. W wyniku tych ustaleń genisteina oraz zawierające ją zespoły naturalnych flawonoidów izolowanych z soi uzyskały podwójny status: kwalifikowanego dodatku do żywności jako środek zapobiegający osteoporozie, użyteczny w profilaktyce przeciwnowotworowej i korzystnie oddziaływujący na układ krążenia oraz jako potencjalny lek onkologiczny ze wskazaniem do stosowania przy nowotworach prostaty i sutka.
Pozyskanie genisteiny ze źródeł naturalnych jest bardzo trudne i kosztowne, jako że całkowita zawartość izoflawonów w surowcach sojowych wynosi 0,1 do 0,3%, przy czym główne składniki flawonowe nasion Glycine max Merill (fasola sojowa) stanowią β-D-glukozydy, takie jak genistyna, daidzyna i glicytyna, zaś odpowiadające im aglikony (genisteina, daidzeina i glicyteina) występują w ilościach ok. stukrotnie od nich mniejszych i pojawiają się w znaczniejszych ilościach dopiero w trakcie technologicznego przetwarzania, pod wpływem obróbki termicznej lub fermentacji. Wzrasta więc zainteresowanie otrzymywaniem związku w sposób syntetyczny.
Przeglądu znanych sposobów otrzymywania izoflawonów dokonała K. Wahala i in. (Proc. Spc. Exp. Biol. Med. 208, 1995 str. 27-32). Szereg z nich polega na oksydatywnej przemianie pośrednich chalkonów, otrzymywanych z acetofenonów i aldehydów aromatycznych.
Alternatywny sposób otrzymywania izoflawonów polega na zamykaniu pierścienia heterocyklicznego w następstwie formylowania deoksybenzoin. Jak wynika z przeglądu dostępnych danych literaturowych sposób ten jest korzystny tylko w przypadku zastosowania w charakterze związków wyściowych pochodnych zawierających najwyżej dwie grupy hydroksylowe. Opisany przez R. J. Bass (J. Chem. Soc., Chem. Commun., 1976, str.78) sposób otrzymywania chromenonów w jednoetapowej syntezie polegającej na zamykaniu pierścienia częściowo nie zabezpieczonych pochodnych deoksybenzoiny, obejmuje reakcję 2-hydroksyfenyloketonów z chlorkiem metanosulfonowym w N,N-dimetyloformamidzie wobec eteratu trifluorku boru i pozwala na otrzymanie pochodnej 4'-metoksylowej genisteiny (5,7-dihydroksy-4'-metoksyizoflawonu), którą w celu uzyskania genisteiny trzeba poddać demetylowaniu w obecności trójbromku boru.
Próbę otrzymywania polihydroksyizoflawonów w jednostopniowej reakcji bez zabezpieczania grup hydroksylowych podjęli K. Wahala i in. (J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 1991, str. 3005), poddając podstawione fenole i kwasy arylooctowe reakcji Friedla-Craftsa w środowisku eteratu trifluorku boru, a następnie utworzoną pośrednią deoksybenzoinę bez wyodrębniania cyklizując wobec DMF i chlorku metanosulfonowego.
Mimo iż deklarowana przez autorów pracy wydajność całkowita otrzymywania genisteiny w reakcji floroglucyny z kwasem 4-hydroksyfenylooctowym w środowisku eteratu trifluorku boru jest rzędu 50%, w praktyce okazało się, że w mieszaninie poreakcyjnej pozostaje duża ilość nie przereagowanych substratów, powstaje duża ilość produktów ubocznych i jedynie śladowe ilości deoksybenzoiny.
Stosowanie jako surowców wyjściowych polihydroksyflawonów z zabezpieczonymi grupami hydroksylowymi wymaga wprowadzania i usuwania grup zabezpieczających oraz szczególnie ostrożnego doboru warunków reakcji ze względu na dużą reaktywność substratów polifenolowych, które łatwo ulegają reakcjom polikondensacji lub utleniania.
Istotne ograniczenie znanych literaturowych sposobów otrzymywania genisteiny stanowi również dostępność stosowanych surowców wyjściowych w syntezie pośrednich chalkonów lub deoksybenzoin - hydroksylowych pochodnych fenoli i aldehydów aromatycznych.
W polskim zgłoszeniu patentowym P-335526 (nie opublikowanym w dacie zgłoszenia niniejszego wynalazku) zaproponowano sposób otrzymywania genisteiny o wysokim stopniu czystości i z wysoką wydajnością, z wykorzystaniem w reakcji regioselektywnego C-acylowania pierścienia aromaPL 204 473 B1 tycznego fenolu całkowicie nie zabezpieczonej floroglucyny, z której w wyniku reakcji z cyjankiem 4-hydroksybenzylu otrzymuje się produkt pośredni - deoksybenzoinę. Reakcję prowadzi się wobec chlorku cynku jako katalizatora, w rozpuszczalniku eterowym, przepuszczając przez mieszaninę reakcyjną strumień suchego chlorowodoru. Otrzymaną deoksybenzoinę poddaje się jednoczesnej reakcji formylowania i cyklizacji w N,N-dimetyloformamidzie wobec eteratu trifluorku boru i chlorku metanosulfonowego.
Obecnie okazało się, że znacznie wyższą wydajność sumaryczną produktu reakcji w przeliczeniu na wyjściową floroglucynę można uzyskać zmieniając sposób prowadzenia kondensacji floroglucyny z cyjankiem 4-hydroksybenzylu, a następnie cyklizując otrzymaną deoksybenzoinę z bezwodnikiem octowomrówkowym wobec zasady.
Zgodnie ze sposobem według wynalazku genisteinę o wzorze 1 otrzymuje się poddając floroglucynę o wzorze 2 reakcji z cyjankiem 4-hydroksybenzylu o wzorze 3 wobec katalizatora w rozpuszczalniku, po czym tak otrzymany produkt pośredni - deoksybenzoinę o wzorze 4 poddaje się reakcji cyklokondensacji z bezwodnikiem octowomrówkowym w obecności zasady, a następnie otrzymaną surową genisteinę oczyszcza się.
W korzystnym wariancie rozwią zania wedł ug wynalazku reakcję floroglucyny z cyjankiem 4-hydroksybenzylu prowadzi się w temperaturze poniżej pokojowej, korzystnie od 0 do 5°C, w rozpuszczalniku wysyconym uprzednio gazowym chlorowodorem, w obecności chlorku cynku jako katalizatora.
Gazowy chlorowodór można generować w reakcji chlorku amonu i stężonego kwasu siarkowego w rozpuszczalniku stanowiącym medium reakcyjne. Jako rozpuszczalnik stosuje się na przykład etery, takie jak eter dietylowy, eter diizopropylowy, eter tert-butylometylowy.
Korzystnie, jako rozpuszczalnik stosuje się eter typu diglimu (etery glikolu etylenowego i jego oligomerów), zwłaszcza dimetoksyetan.
Zmiana sposobu prowadzenia kondensacji floroglucyny z cyjankiem 4-hydroksybenzylu powoduje znaczący wzrost wydajności reakcji w stosunku do rozwiązania objętego zgłoszeniem patentowym P-335526. Jednocześnie otrzymuje się deoksybenzoinę o bardzo wysokiej czystości tak, że można ją stosować w dalszej reakcji bez wyodrębniania ze środowiska reakcji.
Korzystne jest jednak wyodrębnienie surowej deoksybenzoiny i zastosowanie w kolejnym etapie syntezy bez dodatkowego oczyszczania.
Odpowiednie zasady przydatne w reakcji cyklokondensacji stanowią aminy trzeciorzędowe alifatyczne albo heterocykliczne, takie jak pirydyna i jej pochodne.
Korzystną aminę stanowi trietyloamina.
Bezwodnik octowomrówkowy generuje się in situ w reakcji bezwodnika octowego z kwasem mrówkowym. Korzystnie stosuje się nadmiar molowy bezwodnika octowomrówkowego oraz nadmiar molowy trietyloaminy w stosunku do deoksybenzoiny.
Szczególnie korzystne efekty przynosi zastosowanie trójmolowego nadmiaru bezwodnika octowego i kwasu mrówkowego oraz sześciomolowy nadmiar trietyloaminy w stosunku do deoksybenzoiny. Jako rozpuszczalnik stosuje się na przykład etery takie jak eter dietylowy, eter diizopropylowy, eter tert-butylometylowy.
Korzystnie jako rozpuszczalnik stosuje się eter typu diglimu, zwłaszcza dimetoksyetan.
Reagenty te dodaje się kolejno do mieszaniny reakcyjnej w temperaturze poniżej temperatury pokojowej, korzystnie od +5 do +15°C, a następnie całość miesza się w temperaturze pokojowej przez około 12 godzin.
Otrzymany surowy osad produktu reakcji, który może być zanieczyszczony estrami formylowymi i acetylowymi genisteiny, poddaje się reakcji hydrolizy w ś rodowisku metanolowo-wodnym przy pH 8-13,5, a następnie zakwasza się roztworem kwasu mineralnego do pH 0,5-3,5 i krystaliczny osad genisteiny wyodrębnia się w typowy sposób przez odsączanie, przemywanie wodą i suszenie, otrzymując genisteinę o wysokiej czystości chromatograficznej (ok. 99,8% wg. HPLC).
Sposób według wynalazku umożliwia otrzymywanie genisteiny o wysokim stopniu czystości i z wysoką wydajnoś cią z łatwo dostępnych surowców.
Wynalazek ilustruje następujący przykład wykonania.
P r z y k ł a d
A. 2,4,6,4'-Tetrahydroksydeoksybenzoina
W kolbie umieszczonej na ł a ź ni woda z lodem umieszczono roztwór gazowego HCl (generowanego z 535 g chlorku amonu i 535 ml stężonego kwasu siarkowego) w suchym dimetoksyetanie (1195 g) ochłodzonym do temperatury ok. 10°C (stężenie 27,19% wag). Następnie dodano, mieszając, floro4
PL 204 473 B1 glucynę bezwodną (126,11 g; 1 mol), chlorek cynku bezwodny (68,14 g; 0,5 mola) i porcjami 152,15 g (1 mol) cyjanku 4-hydroksybenzylu tak, aby temperatura nie przekroczyła +10°C. Mieszanie kontynuowano w temperaturze 0-5°C przez 24 godziny. W celu całkowitego przereagowania substratów do otrzymanej zawiesiny dodano pozostałą ilość HCl (g) w DME (1,195 kg; 8,9 mola HCl). Całość mieszano w temperaturze 0-5°C przez 3 doby. Powstały żółty osad chlorowodorku ketoiminy odsączono, przemyto suchym dimetoksyetanem (2 x 200 ml). Osad zadano 2% roztworem wodnym kwasu solnego (2,5 l) i całość ogrzewano w temperaturze wrzenia przez 3,5 godziny. Po ochłodzeniu do temperatury pokojowej produkt odsączono, przemyto wodą (2 x 500 ml) i wysuszono w temperaturze 100-105°C. Wydajność: 216 g (83%). Czystość produktu sprawdzano metodą TLC na żelu krzemionkowym w układzie chloroform:etanol:kwas octowy 90:10:0,01 (obj.).
IR (KBr, cm-1): 3490, 3323, 3205, 1646, 1611, 1592, 1540, 1515, 1475, 1417, 1214, 1079, 994, 819, 799, 529.
1H-NMR (200 MHz, aceton-d6), δ (ppm): 4,30 (s, 2H); 5,93 (s, 2H); 6,75 (dd, J1 = 2,0 Hz, J2 = 6,4 Hz, 2H); 7,10 (dd, J1 = 2,0 Hz, J2 = 6,4 Hz, 2H); 8,13 (bs, 1H); 11,74 (bs, 1H).
Produkt bez dalszego oczyszczania stosowano w następnym etapie reakcji.
B. 4',5,7-Trihydroksyizoflawon (genisteina)
W kolbie umieszczono 260,24 g (1 mol) deoksybenzoiny z przykł adu 1 i 1 l dimetoksyetanu. Całość chłodzono, mieszając, na łaźni woda z lodem do temperatury 5-10°C. Następnie kolejno dodano 306,3 g (3 mole) bezwodnika kwasu octowego i 143,8 g (3 mole) kwasu mrówkowego 96%. Do otrzymanej zawiesiny wkraplano 607,1 g (832 ml, 6 moli) trietyloaminy w porcjach po ok. 50 ml przez 1 godzinę , utrzymuj ą c temperaturę mieszaniny w granicach 10-15°C. Po dodaniu ok. 200 ml aminy mieszanina stała się homogeniczna, klarowna o zabarwieniu jasno-żółtym. Mieszanie kontynuowano przez 12 godzin, stopniowo podwyższając temperaturę mieszaniny do 20-25°C. Przebieg reakcji kontrolowano metodą chromatografii cienkowarstwowej na płytkach pokrytych żelem krzemionkowym (SiO2/CHCl3:EtOH:CH3COOH 90:5:0,01 obj.). Po stwierdzeniu zaniku deoksybenzoiny, mieszaninę wylano na wodę z lodem (8 l). Z wody wypadł kremowy osad. Całość mieszano przez godzinę, po czym osad odsączono i przemyto 2 l zimnej wody. Otrzymany wilgotny osad zawieszono w 8 l metanolu, po czym do zawiesiny dodano w jednej porcji 2 l 1M NaOH. Hydrolizę kontynuowano przez 12 godzin w temperaturze pokojowej, kontrolując jej przebieg metodą TLC w wymienionych warunkach analizy. Do klarownego roztworu metanolowo-wodnego dodano 2 l 1M HCl, a po 30 minutach dodano 4 l wody destylowanej. Cało ść ochł odzono do temperatury +5-10°C i mieszano przez 1 godzinę . Osad odsączono i przemyto 2 x 800 ml oziębionej mieszaniny metanol-woda (1:1). Po wysuszeniu na powietrzu (temperatura 30-35°C, 12 godzin) otrzymano 225,6 g genisteiny (99,8%, HPLC). Wydajność 82,84%; T.t. 300-301°C.
IR (KBr, cm-1): 3411, 3105, 1652, 1615, 1520, 1504, 1310, 1274, 1203, 1180, 1145, 1044, 791.
1H-NMR (200 MHz, DMSO-d6), δ (ppm): 6,20 (d, J = 2,0 Hz, 1H); 6,33 (d, J = 2,0 Hz, 1H); 6,83 (dd, J1 = 2,0 Hz, J2 = 6,0 Hz, 2H); 7,33 (dd, J1 = 2,0 Hz, J2 = 6,6 Hz, 2H); 8,09 (s, 1H); 9,35 (s, 1H); 10,55 (s, 1H); 12,87 (s, 1H).

Claims (5)

1. Sposób otrzymywania genisteiny o wzorze 1, znamienny tym, że floroglucynę o wzorze 2 poddaje się reakcji z cyjankiem 4-hydroksybenzylu o wzorze 3 wobec chlorku cynku jako katalizatora, w wysyconym gazowym chlorowodorem rozpuszczalniku eterowym, takim jak eter dietylowy, eter diizopropylowy, eter tert-butylometylowy lub diglim, po czym wyodrębniony produkt pośredni - deoksybenzoinę o wzorze 4 poddaje się reakcji cyklokondensacji z bezwodnikiem octowomrówkowym w obecności drugo- lub trzeciorzędowej aminy albo pirydyny, a następnie otrzymaną surową genisteinę oczyszcza się.
2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że reakcję floroglucyny z cyjankiem 4-hydroksybenzylu prowadzi się w temperaturze poniżej pokojowej, korzystnie od 0 do +5°C.
3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że w reakcji cyklokondensacji deoksybenzoiny stosuje się trietyloaminę.
4. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że w reakcji cyklokondensacji deoksybenzoiny stosuje się bezwodnik octowomrówkowy generowany in situ z bezwodnika octowego i kwasu mrówkowego.
PL 204 473 B1
5. Sposób według zastrz. 1 albo 4, znamienny tym, że w reakcji cyklokondensacji deoksybenzoiny stosuje się trójmolowy nadmiar bezwodnika octowego i kwasu mrówkowego oraz sześciomolowy nadmiar trietyloaminy w stosunku do deoksybenzoiny.
PL343505A 2000-10-26 2000-10-26 Sposób otrzymywania genisteiny PL204473B1 (pl)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL343505A PL204473B1 (pl) 2000-10-26 2000-10-26 Sposób otrzymywania genisteiny

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL343505A PL204473B1 (pl) 2000-10-26 2000-10-26 Sposób otrzymywania genisteiny

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL343505A1 PL343505A1 (en) 2002-05-06
PL204473B1 true PL204473B1 (pl) 2010-01-29

Family

ID=20077624

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL343505A PL204473B1 (pl) 2000-10-26 2000-10-26 Sposób otrzymywania genisteiny

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL204473B1 (pl)

Also Published As

Publication number Publication date
PL343505A1 (en) 2002-05-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US7906660B2 (en) Production of isoflavone derivatives
CA2003504C (en) Chalcone derivatives and process for producing the same
Wang et al. Practical synthesis of naringenin
CA2492274C (en) Flavonoid compounds as therapeutics antioxidants
CA2167714A1 (en) Isoflavone derivatives
Patadiya et al. An efficient method for synthesis of flavanone
US5981775A (en) Process for the preparation of isoflavones
Sobottka et al. Effect of Flavonol Derivatives on the Carrageenin‐Induced Paw Edema in the Rat and Inhibition of Cyclooxygenase‐1 and 5‐Lipoxygenase in Vitro
EP1523478B1 (en) Manufacture of isoflavones
PL204473B1 (pl) Sposób otrzymywania genisteiny
FR3002543A1 (fr) Procede de synthese enzymatique de flavonoides, et application a la synthese de derives de diosmetine
US20040059100A1 (en) Process for the preparation of flavone derivatives
HUP0100146A2 (hu) 3-(1-Hidroxi-pentilidén)-5-nitro-3H-benzofurán-2-on, eljárás előállítására és felhasználása
Kluge et al. First syntheses of natural products with the 2, 7‐dihydroxy‐2H‐1, 4‐benzoxazin‐3 (4H)‐one skeleton
JP7550981B2 (ja) 大麻フラボノイドの調製方法
PL194989B1 (pl) Sposób otrzymywania genisteiny
IINUMA et al. Flavonoids syntheses. V. Synthesis of flavonoids with three hydroxy and four methoxy groups and their spectral properties
Nógŕdi et al. Synthesis of 4′, 7‐Dihydroxy‐6‐methoxyisoflavone 7‐O‐β‐d‐Glucopyranoside (Glycitin)
Wang et al. Development of a concise synthesis of the flavonoid chrysin
EP1392671B1 (en) Process for the preparation of isoflavones
CS101891A2 (en) Method of pyridin and quinoline derivatives preparation
WO2002024676A1 (en) N-disubstituted carbamoyloxy flavones
KR100542724B1 (ko) 이소플라보노이드 계열 화합물의 제조방법
Ibrahim et al. Benzopyrans from 2-bromo-4, 6-diacetyl resorcinol
Baker et al. 381. A new synthesis of iso flavones. Part I