PL195419B1 - Środek do zwalczania grzybicy u pszczół - Google Patents

Abstract

Środek do zwalczania grzybicy u pszczół w postaci syropu leczniczego zawierającego substancję aktywną, paska z tworzywa sztucznego z inkorporowaną substancją aktywną, paska z tektury lub drewna nasycanego substancją aktywną, powlekanego paska z tworzywa sztucznego, powleczonego mikrowarstwą zawierającą substancję aktywną, znamienny tym, że jako substancję aktywną stosuje się tiokonazol, ketokonazol, mikonazol, flukonazol lub ich mieszaniny, przy czym syrop leczniczy zawiera tiokonazol, ketokonazol, mikonazol, flukonazol lub ich mieszaniny w ilości od 0,01 do 10,0% wagowych, pasek z tworzywa sztucznego z inkorporowaną substancją aktywną zawiera tiokonazol, ketokonazol, mikonazol, flukonazol lub ich mieszaniny w ilości 20 do 200 mg/pasek, pasek z tektury lub drewna nasycony jest tiokonazolem, ketokonazolem, mikonazolem, flukonazolem lub ich mieszaninami w ilości 50 do 500 mg/pasek, a powlekany pasek z tworzywa sztucznego powleczony jest mikrowarstwą, która zawiera tiokonazol, ketokonazol, mikonazol, flukonazol lub ich mieszaniny, w ilości od 5 do 60% wagowych.

Description

Opis wynalazku

Przedmiotem wynalazku jest środek do zwalczania grzybicy, zwłaszcza grzybicy wapiennej u pszczół.

Grzybica wapienna, inaczej zwana grzybicą otorbielakową jest chorobą dziesiątkującą rodziny pszczele i powodującą znaczne straty w produkcji miodu, wywoływaną przez szczep grzybów Ascosphaera apis. Atakuje głównie czerw i poraża nawet do 50% czerwia we wszystkich stadiach rozwoju.

Znane substancje o działaniu przeciwgrzybiczym stosowane dotychczas to sól cholinowa N-glukozylopolifunginy, amfoterycyna B, nystatyna, klotrimazol i inne. Stosowano je w różnych formach użytkowych, takich jak roztwór lub zawiesina wodna substancji przeciwgrzybiczej do opryskiwania ramek i wnętrza ula, lecznicze syropy dokarmiające, zawierające substancję przeciwgrzybiczą oraz roztwory do odparowania wewnątrz ula. Żaden z tych środków nie zapewnia 100% skuteczności ikażdy z nich po pewnym okresie stosowania na danym terenie indukuje powstawanie opornych szczepów grzybów. Konieczne jest więc prowadzenie ciągłych badań nad znalezieniem nowych aktywnych czynników przeciwko Ascosphaera apis.

Naszymi badaniami objęliśmy grupę pochodnych imidazolu o właściwościach przeciwgrzybiczych, stosowanych w lecznictwie ludzkim, takich jak tiokonazol, ketokonazol, mikonazol, flukonazol i inne. Środki te stosowane były w medycynie ludzkiej w postaciach do podawania doustnie i pozajelitowo, np. w postaci maści, kremów lub szamponów. Znana jest z literatury ich aktywność przeciwko wielu szczepom grzybów, ale nie opisano ich aktywnego działania przeciwko wywołującemu grzybicę wapienną u pszczół szczepowi Ascosphaera apis.

Nieoczekiwanie stwierdzono, że znane pochodne imidazolu o działaniu przeciwgrzybiczym, takie jak tiokonazol, ketokonazol, mikonazol, flukonazol i inne zarówno w badaniach in vitro, jak i w próbach pasiecznych charakteryzują się silnym działaniem przeciwko grzybom ze szczepu Ascosphaera apis.

Przedmiotem wynalazku jest środek do zwalczania grzybicy u pszczół zawierający imidazolową pochodną o działaniu przeciwgrzybiczym, taką jak tiokonazol, ketokonazol, mikonazol lub flukonazol lub ich mieszaniny w ilości zapewniającej skuteczne działanie przeciwgrzybicze w postaci roztworu wodnego lub w postaci innych zwykle stosowanych form przeznaczonych do leczenia pszczół.

W celu zwalczania grzybicy u pszczół, pochodną imidazolu o działaniu przeciwgrzybiczym można stosować w postaci syropu leczniczego, w postaci inkorporowanej do pasków z tworzywa sztucznego, w postaci pasków drewnianych lub z tektury nasyconych roztworem substancji przeciwgrzybiczej, w postaci pasków z tworzywa sztucznego powleczonych mikrowarstwą zawierającą substancję przeciwgrzybiczą i innych znanych metod stosowanych do leczenia pszczół.

Jeśli środek przeciwgrzybiczy jest w postaci syropu leczniczego, to może to być roztwór syropu dokarmiającego, zawierający cukier rozpuszczony w wodzie w stosunku od 1:10 do 5:1, w którym ilość substancji przeciwgrzybiczej wynosi od 0,01 do 10,0% wag.

Jeśli środek przeciwgrzybiczy jest w postaci paska z tworzywa sztucznego z inkorporowaną substancją aktywną, to zawartość substancji przeciwgrzybiczej wynosi w nim od ok. 50 do ok. 500 mg w pasku o wymiarach 45 x 20 x 2 mm.

Jeśli środek przeciwgrzybiczy jest w postaci paska z drewna lub tektury nasyconego substancją aktywną, to zawartość substancji przeciwgrzybiczej w pasku wynosi od ok. 50 do 500 mg w pasku.

Jeśli środek przeciwgrzybiczy jest w postaci paska z tworzywa sztucznego powleczonego mikrowarstwą z tworzywa sztucznego, to zawartość substancji przeciwgrzybiczej w mikrowarstwie wynosi od 20 do 200mg w jednym pasku. Mikrowarstwa składa się z substancji aktywnej w ilości od 5 do 60% oraz polimeru, takiego jak polistyren, polietylen, polichlorek winylu, polipropylen i in. lub ich mieszaniny, w ilości łącznej 40 do 95%.

Badania pasieczne przeprowadzono w okresie jesiennym. Porażenie grzybicą wapienną oznaczano licząc całkowitą powierzchnię czerwiu w rodzinie, ilość komórek ze zmumifikowanym czerwiem w plastrach, a następnie obliczając procentowy udział czerwiu chorego.

P r z y k ł a d I. Przygotowanie syropu leczniczego z klotrimazolem

2,0 g klotrimazolu rozpuszczono w 100 ml wody i dodano do 0,9 litra syropu o stosunku cukru do wody wynoszącym 2:1. Całość dokładnie wymieszano i stosowano do dokarmiania rodziny pszczelej.

Przykład II. Przygotowanie syropu leczniczego z flukonazolem

2,0 g flukonazolu rozpuszczono w 100 ml wody i dodano do 0,9 litra syropu o stosunku cukru do wody wynoszącym 2:1. Całość dokładnie wymieszano i stosowano do dokarmiania rodziny pszczelej.

PL 195 419 B1

Pr zy kł a d III. Przygotowanie syropu leczniczego z ketokonazolem

2,0 g ketokonazolu rozpuszczono w 100 ml wody i dodano do 0,9 litra syropu o stosunku cukru do wody wynoszącym 2:1. Całość dokładnie wymieszano i stosowano do dokarmiania rodziny pszczelej.

Pr zy kł a d IV. Przygotowanie syropu leczniczego z tiokonazolem

2,0 g tiokonazolu rozpuszczono w 100 ml wody i dodano do 0,9 litra syropu o stosunku cukru do wody wynoszącym 2:1. Całość dokładnie wymieszano i stosowano do dokarmiania rodziny pszczelej. Pr zy kł a d V. Przygotowanie syropu leczniczego z ketokonazolem i tiokonazolem 1,0 g ketokonazolu i 0,5 g tiokonazolu rozpuszczono w 100 ml wody i dodano do 0,9 litra syropu o stosunku cukru do wody wynoszącym 2:1. Całość dokładnie wymieszano i stosowano do dokarmiania rodziny pszczelej.

P r z y k ł a d VI. Badanie skuteczności syropów leczniczych uzyskanych według sposobów opisanych w przykładach I-V

Ocenę porażenia pszczół grzybicą wapienną przeprowadzono przed i po 14 dniach dokarmiania w okresie jesiennym. Wyniki ilustruje tabela.

Tabe la

Badania pasieczne środków przeciwgrzybiczych w postaci syropu leczniczego

Środek przeciwgrzybowy	Porażenie przed zabiegiem w %	Porażenie po zabiegu w %
Klotrimazol	2,12	0,21
Flukonazol	1,68	0,17
Ketokonazol	2,80	0,32
Mikonazol azotan	2,24	2,12
Mikonazol zasada	2,30	0,50
Tiokonazol	2,78	0,00
Ketokonazol i tiokonazol	2,48	0,05

Pr zy kł a d VII. Paski z tworzywa sztucznego z inkorporowaną substancją przeciwgrzybiczą Przygotowano taśmę o grubości 2 mm z polietylenu zawierającego ketokonazol. Z taśmy tej wycięto paski o wymiarach 20 x 4,5 x 2 mm. Po pocięciu pasków na kawałki o wymiarach 5 x mm kawałki te mieszano w 50 ml acetonu w ciągu 4 godzin i następnie metodą HPLC oznaczono zawartość ketokonazolu. Paski zawierały średnio po 345 mg substancji aktywnej. 4 paski zawieszono w ulu i przetrzymywano w czasie 6 tygodni. Porażenie grzybicą wapienną z 2,45% zmniejszyło się do 0,75%.

Przykład VIII. Paski z tektury nasycane substancją przeciwgrzybiczą

Flukonazol (2,0 g) rozpuszczono w 50 ml wody i do roz tworu dodano 50 g cukru. Po rozpuszczeniu, uzyskanym roztworem nasycano paski z tektury o wymiarach 200 x 45 x 2 mm. Po rozdrobnieniu i ekstrakcji acetonem zawartość flukonazolu w pasku oznaczano metodą HPLC. W każdym pasku znajdowało się 280 mg flukonazolu. 4 paski zawieszono w ulu i przetrzymywano w czasie 6 tygodni. Porażenie grzybicą wapienną z 2,88% zmniejszyło się do 0,52%.

Pr zy kł a d IX. Paski powlekane mikrowarstwą zawierającą substancję przeciwgrzybiczą W mieszaninie 1 litra octanu etylu rozpuszcza się 10 g flukonazolu i mieszając dodaje 100 g polistyrenu. Osobno przygotowuje się roztwór 100 g polichlorku winylu w 1 litrze octanu etylu. Oba roztwory łączy się. Następnie roztworem tym powleka paski z polietylenu o wymiarach 200 x 45 x 2 mm. Paski suszy się i oznacza w nich flukonazol za pomocą HPLC. Każdy z pasków zawierał flukonazol w zakresie 180-190 mg, przy grubości mikrowarstwy ok. 7μ. 4 paski zawieszono w ulu i przetrzymywano w czasie 6 tygodni. Porażenie grzybicą wapienną z 2,70% zmniejszyło się do 0,34%.

Claims (1)

1. Zastrzeżenie patentowe

   Środek do zwalczania grzybicy u pszczół w postaci syropu leczniczego zawierającego substancję aktywną, paska z tworzywa sztucznego z inkorporowaną substancją aktywną, paska z tektury lub drewna nasycanego substancją aktywną, powlekanego paska z tworzywa sztucznego, powleczonego

   PL 195 419B1 mikrowarstwą zawierającą substancję aktywną, znamienny tym, że jako substancję aktywną stosuje się tiokonazol, ketokonazol, mikonazol, flukonazol lub ich mieszaniny, przy czym syrop leczniczy zawiera tiokonazol, ketokonazol, mikonazol, flukonazol lub ich mieszaniny w ilości od 0,01 do 10,0% wagowych, pasek z tworzywa sztucznego z inkorporowaną substancją aktywną zawiera tiokonazol, ketokonazol, mikonazol, flukonazol lub ich mieszaniny w ilości 20 do 200 mg/pasek, pasek z tektury lub drewna nasycony jest tiokonazolem, ketokonazolem, mikonazolem, flukonazolem lub ich mieszaninami w ilości 50 do500 mg/pasek, a powlekany pasek z tworzywa sztucznego powleczony jest mikrowarstwą, która zawiera tiokonazol, ketokonazol, mikonazol, flukonazol lub ich mieszaniny, w ilości od 5 do 60% wagowych.