PL194390B1

PL194390B1 - Method of obtaining 11α-hydroxy-1-dehydrotestosterone

Info

Publication number: PL194390B1
Application number: PL347523A
Authority: PL
Inventors: Jadwiga Dmochowska-Gładysz; Ewa Huszcza
Original assignee: Univ Przyrodniczy We Wroclawiu
Priority date: 2001-05-11
Filing date: 2001-05-11
Publication date: 2007-05-31
Also published as: PL347523A1

Abstract

1. Sposób wytwarzania 11a-hydroksy-1- -dehydrotestosteronu, o wzorze 2, z 1-dehy- drotestosteronu, o wzorze 1, na drodze mikro- biologicznej, znamienny tym, ze substrat pod- daje sie biotransformacji kultura grzyba z ga- tunku Beauveria bassiana. PL PL PL1. Method for the preparation of 11a-hydroxy-1-dehydrotestosterone of formula 2 from 1-dehydrotestosterone of formula 1 by microbiological route, characterized in that the substrate is biotransformed. Beauveria bassiana. PL PL PL

Description

Opis wynalazkuDescription of the invention

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania 11a-hydroksy-1-dehydrotestosteronu, o wzorze 2 przedstawionym na rysunku.The present invention relates to a process for the preparation of 11α-hydroxy-1-dehydrotestosterone of the formula (II) shown in the drawing.

Związek ten jest biologicznie czynny i może znaleźć zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym.This compound is biologically active and may find application in the pharmaceutical industry.

Znane są metody otrzymywania 11o-hydroksypochodnej 1-dehydrotestosteronu podczas transformacji mikrobiologicznych przez grzyby z gatunku Rhizopus arrhizus (H. R. Holland, P. Chinna Chenchaiah, Can. J. Chem., 1985, vol. 63, s. 1127) i grzyby będące patogenami mrówek Acromyrmex octospinosus (E. R. H. Jones, G. D. Meakins, J. O. Miners, J. H. Pragneli, A. L. Wilkins, J. C. S. Perkin I, 1975, s, 1552), z wydajnością nie przekraczającą odpowiednio: 51% i 13%.There are known methods of obtaining the 11o-hydroxy derivative of 1-dehydrotestosterone during microbiological transformations by fungi of the species Rhizopus arrhizus (HR Holland, P. Chinna Chenchaiah, Can. J. Chem., 1985, vol. 63, p. 1127) and fungi that are pathogens of ants Acromyrmex octospinosus (ERH Jones, GD Meakins, JO Miners, JH Pragneli, AL Wilkins, JCS Perkin I, 1975, p, 1552), with a yield not exceeding 51% and 13% respectively.

W metodzie pierwszej jako substratu użyto 1-dehydrotestosteronu, a w drugiej - 3p-hydroksy-5o-androstan-17onu.In the first method, 1-dehydrotestosterone was used as the substrate, and in the second - 3β-hydroxy-5o-androstane-17one.

Wynalazek dotyczy mikrobiologicznego sposobu wytwarzania 11o-hydroksy-1-dehydrotestosteronu, o wzorze 2, z substratu, którym jest 1-dehydrotestosteron.The invention relates to a microbial process for the preparation of 11o-hydroxy-1-dehydrotestosterone of formula 2 from the substrate 1-dehydrotestosterone.

Istota wynalazku polega na tym, że substrat, poddaje się biotransformacji kulturą grzyba z gatunku Beauveria bassiana.The essence of the invention consists in that the substrate is biotransformed with a culture of the fungus Beauveria bassiana.

Korzystnie jest gdy reakcję prowadzi się wodną kulturą szczepu, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze 285-313 K.It is preferable that the reaction is carried out in an aqueous strain culture, with constant mixing of the reactants, at a temperature of 285-313 K.

Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w żywych komórkach kultury Beauveria bassiana, następuje wprowadzenie grupy hydroksylowej w 11α pozycję szkieletu steroidowego. Uzyskany w ten sposób produkt wydziela się z wodnej kultury mikroorganizmu, znanym sposobem, przez ekstrakcję chloroformem.By following the invention, as a result of the action of the enzyme system contained in the living cells of the Beauveria bassiana culture, the introduction of a hydroxyl group takes place at the 11α position of the steroid skeleton. The product obtained in this way is separated from the aqueous culture of the microorganism by a known method by extraction with chloroform.

Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie 11α-hydroksy-1-dehydrotestosteronu, jako głównego produktu reakcji, z wydajnością 56-62%, a więc wyższą niż w znanych, opisanych wyżej metodach.The main advantage of the invention is to obtain 11α-hydroxy-1-dehydrotestosterone as the main reaction product with a yield of 56-62%, ie higher than in the known methods described above.

Wynalazek jest bliżej objaśniony w dwóch przykładach wykonania.The invention is explained in more detail in two embodiments.

Przykład 1. Do kolby o pojemności 2 dm , w której znajduje się 300 cm sterylnej pożywki zawierającej 9 g glukozy i 3 g aminobaku, wprowadza się szczep Beauveria bassiana. Po dwóch dniach wzrostu szczepu w temperaturze 303 K i przy ciągłym wstrząsaniu, dodaje się 100 mg 1-dehydrotestosteronu, o wzorze 1, rozpuszczonego w 3 cm³ acetonu. Transformację prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu przez 5 dób. Następnie, uzyskany roztwór transformacyjny ekstrahuje się trzykrotnie chloroformem, osusza siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymuje się 110 mg surowego produktu, który oczyszcza się chromatograficznie, używając jako eluentu mieszaniny heksan-aceton w stosunku 2:1.Example 1. Beauveria bassiana strain is introduced into a 2 liter flask containing 300 cm of sterile medium containing 9 g of glucose and 3 g of aminobac. After two days of growth of the strain at a temperature of 303 K and with continuous shaking, is added 100 mg of 1-dehydrotestosterone, of formula 1, dissolved in 3 cm ³ of acetone. The transformation is carried out under continuous shaking for 5 days. Thereafter, the resulting transformation solution was extracted three times with chloroform, dried with magnesium sulfate and the solvent was evaporated. 110 mg of crude product are obtained, which product is purified by chromatography using a 2: 1 hexane-acetone mixture as eluent.

Na tej drodze otrzymuje się 56 mg 11α-hydroksy-1-dehydrotestosteronu (wydajność 56%).In this way, 56 mg of 11α-hydroxy-1-dehydrotestosterone are obtained (yield 56%).

P r z y k ł a d 2. Postępuje się analogicznie tak jak w przykładzie 1, z tym że biotransformację prowadzi się w temperaturze 298 K. Otrzymuje się 114 mg surowego produktu, z którego, po oczyszczeniu chromatograficznym, uzyskuje się 62 mg 11α-hydroksy-1-dehydrotestosteronu (wydajność 62 %).Example 2 The procedure is analogous to that of example 1, except that the biotransformation is carried out at 298 K. 114 mg of crude product are obtained, of which, after chromatographic purification, 62 mg of 11α-hydroxy-1 are obtained. dehydrotestosterone (62% yield).

Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi: ¹H NMR (CDCl₃) d: 0,78 (3H, s, C-18H); 1,27 (3H, s, C-19H); 3,60 (1H, t, J=8,4 Hz, C-17H); 4,00 (1H, m, J=10,1 Hz, C-11H); 6,03 (1H, s, C-4H); 6,09 (1H, dd, J-8,3 Hz; J=1,9 Hz; C-2H); 7,76 (1H, d, J=10,3 Hz, C-1H).The resulting product is characterized by the following spectral data: ^1H NMR _(CDCl3) d: 0.78 (3H, s, C-18H); 1.27 (3H, s, C-19H); 3.60 (1H, t, J = 8.4Hz, C-17H); 4.00 (1H, m, J = 10.1Hz, C-11H); 6.03 (1H, s, C-4H); 6.09 (1H, dd, J-8.3Hz; J = 1.9Hz; C-2H); 7.76 (1H, d, J = 10.3Hz, C-1H).

Claims

Patent claims

A method for the preparation of 11α-hydroxy-1-dehydrotestosterone of the formula 2 from 1-dehydrotestosterone of the formula 1 by microbiological method, characterized in that the substrate is biotransformed with a culture of the fungus Beauveria bassiana.

2. The method according to p. The process of claim 1, wherein the reaction is carried out with an aqueous mushroom culture with continuous stirring.

3. The method according to p. The process of claim 1, characterized in that the reaction is carried out at the temperature of 285-313 K.