PL1866B1 - Sposób oczyszczania powiekszania czynnej substancji leczniczej surowicy zlozonych mieszanin. - Google Patents

Description

podobnie Lecznicze surowice zostaja, jak wiado¬ mo, sporzadzane z krwi uodpornionych za- pomoca odpowiednich toksyn zwierzat i za¬ wieraj a wszystkie skladniki krwi z wyjat¬ kiem czerwonych cialek i glównej masy wlóknika, które zostaja usuniete. Pomie¬ dzy skladnikami surowicy znajduje si szereg nieczynnych, a nawet czesciowo szkodliwych dla organizmu ludzkiego sub- stancyj, jak nieczynne ciala bialkowe i ich produkty uboczne, tluszcze, ciala wycia¬ gowe i inne. Surowica ma tern wieksza wartosc, im mniej zawiera cial bialkowych i prc duktów ubocznych w stosunku do an- tytoksyny. Juz oddawna dazono do usu¬ niecia niewlasciwych wzglednie szkodli¬ wych materyj z leczniczej surowicy, przez co jednoczesnie byloby osiagniete wzmoc¬ nienie jej zabezpieczajacego i leczniczego dzialania. Próby, przedsiewziete przy sto¬ sowaniu chemicznych srodków do usunie¬ cia wywolujacych niepozadane uboczne dzialanie substancyj, nie daja wystarcza¬ jacego rezultatu.Zasadniczy postep w czyszczeniu su¬ rowicy zostal osiagniety przez stosowanie pradu elektrycznego.Przy poddaniu np. surowicy dyfterytó- wej dzialaniu pradu elektrycznego w zna¬ nej do celów elektroosmotycznych komorze, skladajacej sie z trzech czesci, przy uzyciu odpowiednich przepon, elektrolity i zacho¬ wujace sie jak elektrolity organiczne sub¬ stancje, produkty rozczepienia bialka, takzwane ciala wyciagowe i t. d. zwracaja sie do przestrzeni bocznych. Gdy w srodko¬ wej przestrzeni zostaje osiagniete uwolnie¬ nie od elektrolitów, euglobulina wypada wraz z mala czescia antytoksynowych sub¬ stancyj, które moga byc usuniete zapomo- ca wirówki. *% fV *^j4en saosób^ptrzymuje sie wolna od iAip^o^i g^iAi^^ur|^ice.* Tak oczyszciona surowica zawiera obok wlasciwych substancyj i pseudo - albo paraglobuliny, która jest glównym nosni¬ kiem antytoksyny, jeszcze bialka, jak rów¬ niez pewna ilosc tluszczów i cial tluszczo¬ wych; te ostatnie mozna uwazac, jako za¬ nieczyszczenia leczniczej surowicy, gdyz zawieraja tylko w malym stopniu, albo wcale nie zawieraja antytoksyny i oddzie¬ lenie ich od wlasciwego antytoksynowego bialka jest bardzo waznem, dotychczas nie rozwiazanem zadaniem.Podlug niniejszego wynalazku zostaje osiagniety rozdzial pseudo-albo paraglobu- , liny od zanieczyszczonego nim bialka, tluszczu i substancyj tluszczowych, a za¬ tem osiagniete zostaje wytworzenie czy¬ stego, wlasciwego antytoksynowego bialka.Sposób ten polega na tern, ze uwolnio¬ ny w dowolny sposób, ale najlepiej na dro¬ dze elektroosmotycznej, od euglobuliny i elektrolitdw roztwór surowicy zostaje pod¬ dany w przestrzeni srodkowej przyrzadu, skladajacego sie z trzech komórek pomie¬ dzy odpowiedniemi przeponami, dzialaniu pradu elektrycznego z dodaniem dokladnie odmierzonej ilosci odpowiedniego elektro¬ litu, np. wodorotlenku sodowego przy Wy¬ sokiem napieciu. W tych okolicznosciach przenikaja wlasciwie tylko bialkowe ciala przez dodatnia przepone do aaodowej przestrzeni bocznej, a paraglobulina pozo¬ staje przewaznie w przestrzeni srodkowej obok innych skladników surowicy. W tej mierze, jak ciala bialkowe wychodza z przestrzeni srodkowej, wydzielaja sie tam tluszcze i tluszczowe zanieczyszczenia su¬ rowicy i moga byc oddzielone od pozosta¬ lej w roztworze paraglobuliny, np. zapo- moca wirówki. Ostatecznie otrzymuje sie klarowny roztwór, skladajacy sie z para¬ globuliny i wlasciwych substancyj, np. an¬ tytoksyny.Poniewaz dodany przy procesie elek¬ trolit (np. wodorotlenek sodowy) pod wplywem pradu równiez odbywa wedrów¬ ke i w rezultacie nie byloby elektrolitu, to nalezy utrzymac odpowiednie warunki do wedrówki bialka przez dodawanie od czasu do czasu lugu sodowego. Proces czyszcze¬ nia jest ukonczony, jezeli przez nasycenie próby siarczanem amonowym stracone zo¬ staje cale bialko.Przy tern postepowaniu lug alkaliczny moze byc z tym samym rezultatem zasta¬ piony przez inne organiczne albo nieorga¬ niczne zasady. Jako przepony wskazane jest uzycie przy katodzie roslinnych prze¬ pon, jak papier pergaminowy, wiskoza i t. p., przy anodzie — ze skóry zwierzecej (roslinnie albo mineralnie wygarbowane skóry, krowie albo konskie pecherze i t. d.).Przy uzyciu zamiast substancyj zasa¬ dowych kwasów, bialko wedruje do prze¬ strzeni katodowej.Gdy pracuje sie, dodajac kwasnego elektrolitu, to katodow*a przepone nalezy obrac ze skóry zwierzecej.Postepowanie moze byc wyjasnione przez nastepujacy przyklad: Przyrzadem jest znana komórka, skla¬ dajaca sie z trzech czesci, która zostaje przeponami 6 i 7 podzielona na przestrze¬ nie 1, 2 i 3. Pod przeponami leza bieguny 4 i 5. W srodkowej przestrzeni przyrzadu 3 umieszcza sie surowice, w przestrzeni 1 i 2 — destylowana wode. Przepona 7 skla¬ da sie z pergaminu, przepona 6 — ze zwie¬ rzecej skóry. 2 litry poprzednio oczyszczonej i uwol¬ nionej od euglobuliny surowicy, w danym razie, surowicy dyfterytowej, umieszcza sie w srodkowej przestrzeni 3, a boczne prze-strzenie 1 i 2 zostaja wypelnione destylo¬ wana woda. Wskazanem jest wykonywac prace przy wysokiem napieciu, mianowicie do 500 woltów poczatkowego napiecia przy 0,1 — 0,2 A. Przy ciaglem poruszaniu dodaje sie do srodkowej przestrzeni stop¬ niowo 20 cm3 normalnego lugu sodowego, przyczem sila pradu z poczatku wzrasta, a nastepnie znacznie sie zmniejsza. Doda¬ wanie lugu sodowego musi byc czasami kil¬ kakrotnie powtarzane.Podczas procesu ciala bialkowe prze¬ chodza do przestrzeni anodowej; jedno¬ czesnie wypadaja w przestrzeni srodkowej ciala tluszczowe. Gdy w przestrzeni srod¬ kowej nie pozostaje wiecej bialka, to dzia¬ lanie sie przerywa i plyn odciaga; wydzie¬ lone tluszcze i t. p. zostaja wydalone za¬ pomoca wirówki.Otrzymany roztwór surowicy przedsta¬ wia roztwór klarowny, jak woda, który moze byc do uzycia zgeszczony w prózni przy niskiej temperaturze do suchosci albo do pozadanej koncentracji.Surowy materjal, który przed doswiad¬ czeniem mial nastepujacy sklad: Antytoksyny 1 cm3 — 200 A. E. 1 g bialka — 2320 A. E.Suchej zawartosci 10,19%, z której popiolu 1,53% calkowitego bialka 8,66%, z którego globuliny 5,36% albuminy 3,3%, zostaje przedewszystkiem uwolniony od euglobuliny i elektrolitów, a nastepnie trak¬ towany, jak powyzej opisano w sklada¬ jacej sie z trzech czesci komórce. Po dwu- godzinnem traktowaniu sklad jest nastepu¬ jacy: Calkowitego bialka 2,92%, z którego globuliny 2,90% albuminy slady 1 cm3 zawiera 145 A. E. 1 g. bialka zawiera okolo 5000 A. E.W podobny sposób zostaja stosowane bakterjologiczne i antibakterjologiczne su¬ rowice uodporniajace.Szczególnie waznym jest nowy sposób, w tym wypadku, gdy ilosc zawartego w su¬ rowicy z krwi tluszczu i cholesteryny jest duza. Tego rodzaju surowice wywoluja czesto ciezkie i niezrozumiale reakcje; w normalnej surowicy jest zawartosc tych cial bardzo nieznaczna, ale moze byc znacz¬ nie powiekszona, gdy uzyte do uodpornie¬ nia zwierzeta, np. konie, przechodzily dlu¬ gi okres febry. W pewnym wypadku suro¬ wica z krwi konia byla metna i miala mlecz¬ ny zupelnie nieprzezroczysty wyglad. Obok zawartosci 10,3% bialka i 1,2% popiolu za¬ wierala surowica ta nie mniej, niz 1,4% rozpuszczalnych w eterze substancyj. Cen- tryfugat, który byl otrzymany po uwolnie¬ niu z elektrolitów i euglobuliny z jednego litra surowicy zapomoca pradu elektrycz¬ nego, wykazywal równie silne zmetnie¬ nie, a mala czesc tluszczu byla mechanicz¬ nie porwana przez wydzielona euglobuline.Po pierwszej osmozie z litra surowicy otrzymano 23,3 g suchej pozostalosci, 1100 cm3 centryfugatu z 7,2% rozpuszczonego bialka. Centryfugat ten wykazywal to sa¬ mo zmetnienie, jak materjal wyjsciowy i dla oddzielenia paraglobuliny od albuminy podlug nowego sposobu byl poddany dzia¬ laniu pradu elektrycznego przy ciaglem dodawaniu lugu sodowego. Po przewedro¬ waniu albuminy w przestrzeni srodkowej wydzielil sie znaczny osad, który zostal oddzielony od plynu zapomoca wirówki.W ten sposób otrzymano 13,5 g calko¬ wicie rozpuszczalnego w eterze produktu i zupelnie klarowny centryfugat, a miano¬ wicie 800 cm3 z 5,5% bialka, a wiec z 44 g paraglobuliny. PL

Claims (4)

1. Zastrzezenia patentowe. 1. Sposób oczyszczania i powieksza¬ nia czynnej substancji leczniczej surowicy — 3 —i mieszanin o podobnym skladzie, które przedewszystkiem w znany sposób zostaja uwolnione od popiolu, cial wyciagowych i euglobuliny, znamienny tern, ze surowice zostaja poddane elektroosmozie pomiedzy przeponami o okreslonym potencjale przy dodawaniu odpowiednich elektrolitów, przyczem niewlasciwe albuminy zostaja wydalone przez wywedrowanie, a tluszcze i t. p. ciala wydzielaja sie.
2. 2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamien¬ ny tern, ze dodawanie odpowiednich elek¬ trolitów odbywa sie ciagle albo z przerwa¬ mi odpowiednio do przebiegu oczyszczania.
3. 3. Sposób wedlug zastrz. 1, znamien¬ ny tern, ze znane samo przez sie uwolnie¬ nie leczniczych surowic i mieszanin o po¬ dobnym skladzie od skladników popiolu i globulin zapomoca elektroosmozy zostaje polaczone ze sposobem podlug zastrz. 1.
4. 4. Sposób wedlug zastrz. 1 i 3, zna¬ mienny tern, ze elektroosmotyczne trakto¬ wanie leczniczych surowic i podobnie zlo¬ zonych mieszanin zostaje wykonane po¬ czatkowo przy stosunkowo niskiem napie¬ ciu, a po usunieciu skladników popiolu i globuliny — przy napieciu podwyzszonem. Elektro-Osmose, Aktiengesellschaft (Graf Schwerin Gesellschaft). Zastepca: M. Brokman, rzecznik patentowy. Druk L. Boguslawskiego, Warszawa. PL