Claims (3)
Zastrzeżenia patenoowePateno claims
1. Sposób wytwarzania N-/3-3-alkiloheptanoilo/-D- ^T-glutamyloglicylo-D-alaniny i jej estrów o absolutnym wzorze steeocceernicznym 1, w którymi R oznacza rodnik metylowy lub ety4 51. A process as preparation of N - / 3-3 alkylOH p-tanoilo / - D - ^ T-glutamyloglicylo-D-alanine and its esters of the absolute stereochemical formula steeocceernicznym 1, in which R is methyl or ety4 5
Iowy, oba symbole R i R oznaczają atomy wodoru lub jeden z nich oznacza atom wodoru, a drugi oznacza rodnik /Ci-Cg/alkioowy lub /Cg-Cg/cykloalkilometylowy, znamienny tym, że /a/ kwas R-trans-3-metyoo-4chppt mowy, kwas R-tΓans-3-etyO4-4chepetocwy lub kwas s-3-eetyll-6-hepezlowy w postaci uaktywnionej sorzęga się ze związkiem o absolutnym wzorze steΓeochemicznyel 2, w którym oba symbole RD i R ' oznaczają rodniki benzylowe, albo jeden z nich oznacza rodnik benzylowy a drugi oznacza rodnik /ci-^Cg/al-kioowy lub /Cg-Cg/cykloalkilonetyoowy, i otrzymuje się związek o absolutnym wzorze stehocchemicznym 3, w którymIowa, R and R are both hydrogen atoms or one of them represents a hydrogen atom and the other represents a (C 1 -C 8) alkyl or (C 8 -C 6) cycloalkylmethyl radical, characterized in that (a) R-trans-3- Metyoo-4chppt of speech, R-tΓans-3 -ethylO4-4chepetocwy acid or s-3-eetyll-6-hepezloic acid in an activated form is coupled with a compound of the absolute steeochemical formula 2, in which both the symbols R D and R 'represent radicals benzyl, or one of them is a benzyl radical and the other is a (C-C) alkyl or (Cg-C /) cycloalkylnethyl radical, giving a compound of the absolute stehochemical formula 3 in which
6 76 7
R, R i Rz rają wżej podane znaczenie, a jedna linia przerywana, lecz nie obie, oznacza podwójne wiązanie, przy czym gdy podwójne wiązanie znajduje się w końcowej pozycji 6, 7, wówczas R oznacza rodnik metylowy, po czym /b/ związek o wyżej opisanymi! wzorze 3 uwodornia się, redukując wiązanie z równoczesną hydrolizą benzylowych grup estrowych lub benzylowej grupy estrowej.R, R and R Raja Notices to Mariners e j defined and one dotted line, but not both, is a double bond, wherein when a double bond is in the end position 6, 7, then R represents a methyl radical, and / b / relationship with the above-described! The formula 3 is hydrogenated to reduce the bond with simultaneous hydrolysis of the benzyl ester groups or the benzyl ester group.
2. Sposób według zastrz.l, znamienny tym, że w przypadku wytwarzania - 4 5 związku o wzorze 1, w którym oba symbole R i R oznaczają atomy wodoru, uaktywniony kwas w postaci chlorku kwasowego poddaje się reakcji ze związkiem o wzorze 2, w którym oba sym6 7 bole R i R' oznaczają rodniki benzylowe.2. The method according to claim, characterized in that for the preparation - 4 5 compound of Formula 1 in which both R and R are hydrogen atoms, activated acid, the acid chloride is reacted with a compound of formula 2, in which both the symbols R and R 'represent benzyl radicals.
3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że w przypadku wytwarzania kΓnstalizznego związku o waorze 4 poddaje się go krystalizacji z organicznego rozpuszczalnika lub kommintcji rozpuszczalników organicznych.3. The method according to p. A compound according to claim 1, characterized in that, in the case of the preparation of the crystalline compound of the formula 4, it is crystallized from an organic solvent or by the commission of organic solvents.
Przedmiotem w/rnlazku jest sposób wyytwwrzania immmutleh/lacyjnej N-/s-3-alkiloheptazoiW-D- 4glutamyloglicylo-D-3laninn i jej estrów o ogólnym wzorze 1, w którym R oznacza rodnik metylowy lub etylowy, R1 i r1 oznaczają atomy wodory albo jeden z symtaoM R1 i r1 oznaka atom wodoru, a drugi oznacza rodnik /Ci-Cgg-alkioowy lub /^Cg-CC^cyktaolkHometylowy.The present w / rnlazku is a method wyytwwrzania immmutleh / ings N / s-3-alkiloheptazoiW 4glutamyloglicylo-D-D-3laninn and its esters of the general formula 1, wherein R OZNA connector ro d k n methyl or ethyl, R 1 and r1 are both hydrogens, or it en d of symtaoM R 1 and R 1 is hydrogen mark and dru g and k represents degeneration / C i-Cg g -alk of head lu b / ^ -C ^ CC cyktaolkHometylowy.
Stosunkowo nowa dziedzina immeutOartmriOol/i., a zwłaszcza dział ..zajmujący się immunomooulacją, rozwija się szybko. Badano liczne związki pochodzenia naturalnego, a między nimi tetrapept^ o nazwie tuftsynr, to jest n/^-L-treonylo-LolizyloZ-^prolilo _7-L·-rrgtnitę. Wiele uwagi poświęcono synt^a^tyzm^y^m pochodnym peptydoglikanu, a zwłaszcza związkom znanym jako dwupeptydy mLu-amylowe.The relatively new field of immeutOartmriOol / i., Especially the department dealing with immunomooulation, is developing rapidly. Numerous compounds of natural origin have been investigated, among them the tetrapept, called tuftsynr , i.e. n / 2 - L-threonyl-Lolysyl Z-3 prolyl 7-L · -rgnite. Much attention has been given to the synthesis of peptidoglycan derivatives, especially to compounds known as mLu-amyl dipeptides.
Przedmiotem w^m^lazku jest sposób wygrzania N-/S-3-aliiloheptatoilo/-D- glutamyloglicylo-D-αlatiny i jej estrów o ^orze steeoicheπ]ictnym 1, w którym R oznacza rodnik 4 5 metylowy lub etylowy, oba symbole R i R oznaczają atomy wodoru lub jeden z nich oznacza atom odoru, a drugi oznacza rodnik /il-Cg/alkiOowy lub /Cg-Cg/cykloalkiOomhtylocy, który polega na tym, że /a/ kwas R-tΓans-3-mhtylo-4-hephtoowy, kwas R-tΓans-3-etyO444chepttlCwy lub kwas S-3-metylo-6-hepetnowy w postaci uaktywnionej sprzęga się związkiem o absolutem w^oi'ze steΓOochemicznye 2, w którym oba symbole R° i Rl oznaczają rodniki benzylowe, albo jeden z nich oznacza rodnik benzylowy a drugi oznacza rodnik /ci-Cg/al^kioowy lub /Cg-Cg/cyiloalkiloretylocy, i otrzymuje się związek o atsolutnym wzorze stehlichemictny.e 3, w którymThe subject of the invention is a method of annealing N- (S-3-allylheptatooyl) -D-glutamylglycyl-D-αlatine and its steeoicheπ] ic esters 1, where R is a methyl or ethyl radical, both symbols R and R represent hydrogen atoms, or one of them represents a odor atom, and the other is a / C 8 -alkyl or / C 8 -C 8 / cycloalkyl-methyl radical, which consists in the fact that / a) R-tans-3-methyl- 4-hephtoic acid, R-tans-3-ethylO444chepttlCwy or S-3-methyl-6-hepetonic acid in an activated form is coupled with a compound with an absolute value and a chemical concentration of 2, in which both the symbols R ° and R 1 represent radicals benzyl groups, or one of them is a benzyl radical and the other is a (C 1 -C 8) alkyl radical or (C 8 -C 6) cyylalkyl reliethyl radical, which gives a compound of the absolute formula stehlichemical. e 3, in which
156 175156 175
R, rK i R7 rają wyżej podane znaczenie, a jedna linia przerywana, lecz nie obie, oznacza podwójne wiązanie, przy czym gdy podwójne wiązanie znajduje się w końcowej pozycji 6, 7, wówczas R oznacza rodnik metylowy, po czym /b/ związek o wyżej opisanym w^c^i-ze 3 uwodornia się, redukując podwójne wiązanie z równoczesną hydrolizą benzylowych grup estrowych lub benzylowej grupy estrowej.R k and R 7 paradise ± defined above, and one of the dotted line, but not both, is a double bond, wherein when a double bond is in the end position 6, 7, then R represents a methyl radical, and / b / the compound of above described in C 1-6 is hydrogenated by reducing the double bond with simultaneous hydrolysis of the benzyl ester groups or the benzyl ester group.
Korzystnie jako uaktywnioną postać kwasu stosuje się chlorek kwasowy, a jako związek o fi 7 wzorze 2 taki związek, w którym R i R oznaczają rodniki benzylowe. Otrzymuje się wtedy Ζ 5 związek o worze 1, w którym R i R oznaczają atomy wodoru.Preferably, an acid chloride is used as the activated form of the acid and a compound of formula II in which R and R are benzyl radicals is used as the compound of formula II. The result is Ζ 5 of a compound of formula 1 in which R and R are hydrogen.
W pewnym szczególnym przypadku sposób według wynalazku proAdzi do otrzymania krystalicznego związku o absolutnym wzorze steroochemicznym 4, a polega on na przeprowadzeniu krystalizacji związku otrzymanego sposobem według wynłazku z rozpuszczalnika organicznego lub z kommiia^ji rozpuszczalników organicznych.In one particular case, the process according to the invention results in a crystalline compound having the absolute steroochemical formula 4, which consists in carrying out the crystallization of the compound obtained according to the invention from an organic solvent or from a commission of organic solvents.
Zgodnie ze sposoben według wyfnlazku, nienasycone kwasy w postaci aktywownej, np. jako chlorek kwasowy, albo jako' zwykły mieszaniny bezwodnik, lub też aktywowane za pomocą zwykłego odwadnnającego środka sprzęgającego, takiego jak dίoyklohrksylokarbodiie.id, sprzęga się w zwykły sposób ze związkiem o wt^i-ze 2 w celu otrzymania związku o wzorze 3.According to the method of the invention, unsaturated acids in active form, e.g. as an acid chloride, either as a conventional anhydride mixture, or activated with a conventional dehydrating coupling agent such as dίoylohrxylcarbodiieid, are coupled in the usual manner with a compound of wt i-ze 2 to obtain a compound of formula 3.
Związek o wzorze 3 uwodornia się następnie wywarzając imraunzreeul3cyj.zn związek o wzorze 1. Podczas tego uwodornnenia, podwójne wiązanie ulega nasyceniu i grupa lub grupy benzylowe ulegają hydrolizie. !Jworodnżanir proAdzi się w obojętnym rozpuszczalniku, w obecności katalizatora, np. niklu lub szlachetnego meealu na nośniku, takiego jak nikiel Ranney’a lub Pd/c, albo bez nośnika, np. RWH^. Rodzaj rozpuszczalnika i temperatura nie mają tu decydującego znaczenia. OdpowiieOzimi rozpuszczalnikami są niższe alkohole, etery, np. dioksan, tetrahydrofuran i dwumetodsyetaz oraz estry, np. octan etylu. Korzystnie stosuje się temperaturę pokojową, ale w przypadku reakcji egzotermicznej można nie stosować chłodzenia, aby nie zwiększać kosztów procesu. Ciśnienie również nie mi decydującego znaczenia i aby uniknąć kosztownej aparatury zw^WLe stosuje się ciśnienie poniżej 7000 hPa. Uwodornianle przy użyciu palladu na węglu prowadzi się korzystnie pod ciśnientom 3-6 razy większym od ciśnienia atmosferycznego.The compound of formula III is then hydrogenated to give an immaterial compound of formula 1. During this hydrogenation, the double bond is saturated and the benzyl group or groups are hydrolyzed. The hydrogensinir is reacted in an inert solvent in the presence of a catalyst, e.g. nickel or a supported noble metal such as Ranney nickel or Pd / c, or without a support, e.g. RWH3. The type of solvent and temperature are not critical. Suitable solvents are lower alcohols, ethers, e.g. dioxane, tetrahydrofuran and dimethyethases, and esters, e.g. ethyl acetate. Preferably room temperature is used, but in the case of an exothermic reaction, cooling may not be used so as not to increase the cost of the process. The pressure is also not of decisive importance and, in order to avoid the expensive equipment of the WLe, a pressure of less than 7000 hPa is used. Hydrogenation with palladium on carbon is preferably carried out at a pressure of 3-6 times the atmospheric pressure.
, 4 5, 4 5
Związek o wzorze 1, w którym R oznacza rodnik metylowy a R i R oznaczają atomy w>doru, otrzymuje się korzystnie w postaci krystalicznej przez krystalizację z organicznego rozpuszczalnika lub z mieszaniny takich rozpuszczalników. Odpowiednimi rozpuszczalnikami są aceton, acetonitryl z etanolem i tetrahydrofuran z eterem. Z punktu widzenia wydajności procesu krystalizacji korzystnym rozpuszczalnikiem jest mieszanina acetonitrylu z etanolem, ale z uwagi na czystość produktu korzystniej jest stosować aceton. Ta nowa postać tego związku jest znacznie tiwalsza niż znanego produktu bezpostacdowrgo liofll·iziwanegd. Produkt w tej nowej postaci jest bardziej zwarty, można nim łatwo mnipulować i jest mniej elektrostatyczny, toteż można z niego w^w^zać różne dawi.. .The compound of formula I, in which R is methyl and R and R are hydrogen, are preferably obtained in crystalline form by crystallization from an organic solvent or a mixture of such solvents. Suitable solvents are acetone, acetonitrile with ethanol, and tetrahydrofuran with ether. In view of the efficiency of the crystallization process, a mixture of acetonitrile and ethanol is the preferred solvent, but acetone is more preferable for the purity of the product. This new form of this compound is much more valuable than the known product in the form of liofll · izivanegd. The product in this new form is more compact, easy to minimize and less electrostatic, so that it can be used in various ways.
Sposób wtoług whmlazku ilustrują następujące przykłady.The following examples illustrate the method in the woług whmlazku.
Przykład I. Ester benzylowy N-/S-3-meeylo-4-heptenoilo/-D- l-glutamyld/c£brzzyloksy^kaΓbonznod/glicyld-D-alanizy. W czteroszyjnej kolbie kulistej o pojemności 500 ml, wyjpsażonej w mieszadło, termomeer, wtraplacz i wlot azotu, 32,8 g /0,059 mooa/ związku otrz^/manego sposobem podanym w przykładzie IX rozpuszcza się w 175 ml CH^lg, chłodzi do temperatury 0-5°C i utrzymuje tę tempeΓatuΓę, dodając ^wolnym stΓ^mirziem, w ciągu 15 minut, 24,7 ml, to jest 17,9 g /0,177 mooa, 3 równowianZki/ tΓÓjenydaaπlizn. Utrzymując mieszaninę nadal w kąpieli z lodowatej wody dodaje się w ciągu 15 minut całą porcję roztworu chlorku S^-metyloheptenoilu w CHgClg, ot^m^nego sposobem podanym w przykładzie X. Temperatura mieszaniny wzrasta do 2l°C i nie usuwając kąpieli chłodzącej uciera się dalej w ciągu 45 minut, aż do dndli, gdy mieszanina nabiera konsystencji żelatynowatej i nie daje się mieszać. Otrzymaną rasę rozdrabnia się, miesza z 125 ml 10% HC1 i 50 ml CHgClg, oddziela warstwę organiczną, płucze ją kolejno 2 x 125 ml wody, 2 x 125 ml 10% roztworu K^^Oj i 125 mlEXAMPLE 1 N- (S-3-meyyl-4-heptenoyl) -D-1-glutamid (c. Bzyloxy) carbonate benzyl ester of d (glycidyl-D-alaniase). In a 500 ml four-neck round bottom flask equipped with a stirrer, thermomeer, incubator and nitrogen inlet, 32.8 g (0.059 moles) of the compound obtained in the manner described in Example 9 are dissolved in 175 ml of CH ^ 1 g, cooled to the temperature of y 0- 5 ° C and maintained c e tempeΓatuΓę adding stΓ ^ free ^ Mirza, for 1 5 minutes, 24.7 ml, i.e. 17.9 g / 0.177 mooa 3 równowianZki / tΓÓjenydaaπlizn. Keeping the mixture still in the ice-water bath, all of the solution of S1-methylheptenoyl chloride in CHgCl3, same as in Example 10, was added over 15 minutes. The temperature of the mixture was raised to 21 ° C and the mixture was rubbed without removing the cooling bath. continue for 45 minutes until dndla, when the mixture becomes gelatinous and does not mix. The obtained race is ground, mixed with 125 ml of 10% HCl and 50 ml of CHgClg, the organic layer is separated, washed successively with 2 x 125 ml of water, 2 x 125 ml of 10% K ^^ O, and 125 ml
156 175 wody, po czym suszy nad MgSO^ i usuwa rozpuszczalnik, otrzymując produkt stały o barwie białej. Produkt ten rozpuszcza się w 500 ml gorącego octanu etylu i odpędza się rozpuszczalnik, co powoduje krystalizację produktu podanego w tytule.Water, then dried over MgSO 4 and the solvent removed to give a white solid. This product was dissolved in 500 ml of hot ethyl acetate and the solvent was stripped, causing the title product to crystallize.
Przykład II. :\'-/S-3-netyloheptar.oilo/-D- ^ggluaarnyloglicylo-D-alanina.Example II. : \ '- (S-3-netylheptar.oyl) -D- < E > glycuaarnylglycyl-D-alanine.
30,8 g produktu otrzymanego według przykładu I miesza się w 300 ml bezwodnego etanolu w autoklawie o pojemności 2 litrów, po czym dodaje się 1,54 g 5% Pd/θ o zawartości wody 505ί i uwodornia mieszaninę pod ciśnieniem 4050 hPa w ciągu 1 godziny, do zakończenia pochłaniania wodoru. Następnie odsącza się katalizator, najpierw przez bibułę filtaacyjną, a następnie przez nylon o średnicy porów 0,45 mikrona, stosując do przesączania i przemywania 100-150 ml etanolu. Przesącz z potoczyrami odparowuje się i wilgotną stałą pozostałość o barwie białej rozpuszcza w 150 ml gorącej mieszaniny bezwodnego etanolu z acetonitryemm 1:10, a następnie przesącza na gorąco, odparowuje do objętości 35 ml, chłodzi do temperatury pokojowej, granuluje i odsącza, otrzymując 20,1 g /94% wydaaności teoretycznej/ krystalicznego, zwartego i nieelektrosaatycznego produktu. Produkt ten widmo ir /proszek w nujolu/ o dobrze zarysowanych, ostrych pikach przy 3340, 3300, 2900, 2836, 1725, 1650, l629, 1580, 1532, 1455, 1410, 1370, 1280, 1240, 1216 i 1175 cm_1.30.8 g of the product obtained according to Example 1 are mixed in 300 ml of anhydrous ethanol in a 2-liter autoclave, then 1.54 g of 5% Pd / θ with a water content of 505 are added and the mixture is hydrogenated at 4050 hPa for 1 hours until the uptake of hydrogen is complete. The catalyst is then filtered off, first through filter paper and then through 0.45 micron nylon, using 100-150 ml of ethanol to filter and rinse. The filtrate with the stream is evaporated and the wet white solid residue is dissolved in 150 ml of a hot mixture of anhydrous ethanol with acetonitrile 1:10, then filtered hot, evaporated to a volume of 35 ml, cooled to room temperature, granulated and filtered to give 20. 1 g / 94% of theory / a crystalline, compact and non-electrosaatic product. This product has an ir spectrum (powder in nujol) with well defined sharp peaks at 3340, 3300, 2900, 2836, 1725, 1650, 1629 , 1580 , 1532 , 1455 , 1410, 1370 , 1280 , 1240, 1216 and 1175 cm -1 .
9,4 g ktystalycznego produktu, otrzymanego w opisany wyżej sposób, rozpuszcza się w 1000 ml acetonu, utrzymując w stanie wrzenia pod chłodnicą zwrotną w ciągu 1 godziny, po czym roztwór chłodzi się do temperatury pokojowej i zaszczepia śladową ilością krysztarów produktu w celu wywiania krystalizacji. Miesza się w ciągu 6 godzin, odsącza osad, przemywając młą ilością acetonu i suszy pod zmniejszonym ciśnieniem w temperaturze 35°C, otrzymując 7,25 g produktu, który w widmie ir wskazuje piki identyczne jak produkt otrzymany z acetonitrylu/etanolu w sposób opisany wyżej.9.4 g of the crystalline product obtained as described above are dissolved in 1000 ml of acetone and refluxed for 1 hour, then the solution is cooled to room temperature and seeded with a trace of crystals of the product in order to cause crystallization. . After stirring for 6 hours, the precipitate is filtered off, washed with a small amount of acetone, and dried in vacuo at 35 ° C to give 7.25 g of product, which in the ir spectrum shows peaks identical to the product obtained from acetonitrile / ethanol as described above. .
Przykład III. Ester benzylowy N-/S-3-etylo-4-heptenoilo/-D-ff-glutornylo/cC be.ocyloksykaΓbonyl·o/-glicylo-D-rlariny. 1,1 g /0,00222 moto/ produktu otrzymanego w przykładzie IX rozpuszcza się w 30 ml Ch^Clj, dodaje 0,935 ml /0,00666 mola/ tΓÓjetylaeminy, po czym dodaje się 2,3 ml /0,00211 moLa/ chlorku S^-etyloheptenoilu i miesza w atmosferze azotu w cisgu 0,75 godziny. Natępnie płucze się mieszaninę kolejno 20 ml 10% HC1, wody i 10% roztworu KjCO^ oraz solanki, suszy nad MgSO^ i odparowuje. Stałą pozostałość rozciera się z eterem i odsącza.Example III. N- (S-3-ethyl-4-heptenoyl) -D-ff-glutornyl / cC be.ocyloxycarbonyl o / -glycyl-D-rlarine benzyl ester. 1.1 g (0.00222 mole) of the product obtained in Example 9 are dissolved in 30 ml of CH 2 Cl 2, 0.935 ml (0.00666 mol) of thymethylamine is added, followed by the addition of 2.3 ml (0.00211 mol) of chloride. S6-ethylheptenoyl and stirred under a nitrogen atmosphere for 0.75 hours. Then the mixture is washed successively with 20 ml of 10% HCl, water and 10% K 2 CO 3 solution and brine, dried over MgSO 4 and evaporated. The solid residue is triturated with ether and filtered off.
Przykład IV. N-/S-3-etylo-4-heptenoilo/-D- yLglutameloglicylo-D-alanina. 467 mg tytuoowego produktu z poprzedniego przykładu uwodornia się metodą podaną w przykładzie II i po odsączeniu katalizatora przesącz odparowuje się. Pozostałość o konsystencji piany rozpuszcza się w wodzie, przesącza i liofilizuje, otrzymując produkt podany w tytule.Example IV. N- (S-3-ethyl-4-heptenoyl) -D-yL-glutameloglycyl-D-alanine. 467 mg of the title product of the previous example are hydrogenated by the method described in Example 2 and, after the catalyst has been filtered off, the filtrate is evaporated. The foamy residue is dissolved in water, filtered and lyophilized to give the title product.
Przykład V. Ester tonzylowy N-^-^me-tylo-ć-lieptenoilo/--- iT-glutamylo/ benzyloksylkιrbonnlo/-glicylo-D-rlaniny. Stosując metodę z przykładu I, 2,77 g /5 mmmH/ produktu z przykładu IX sprzęga się z chlorkiem kwasowym w CH2CI2· Przesączony roztwór organiczny płucze się wodą, suszy i odparowuje, otrzymując 2,77 g produktu, który rozpuszcza się w 20 ml gorącego octanu etylu, rozcieńcza roztwór 20 ml heksanu, chłodzi i odsącza osad, otrzymując 2,24 g /77% wy^da ności teoretycznej/ podanego w tytule produktu, topniejącego w temperaturze 137,5-139,5°C. . Example V. E ster tonzylowy N - ^ - ^ me-methyl-c-lieptenoilo / - - - glutamyl-iT / benzyloksylkιrbonnlo / -glycyl-D-rlaniny. Using the method of Example 1, 2.77 g (5 mmmH) of the product of Example 9 was coupled with the acid chloride in CH 2 Cl 2. The filtered organic solution was washed with water, dried and evaporated to give 2.77 g of the product, which was dissolved in 20 ml. hot ethyl acetate, dilute the solution with 20 ml of hexane, cool and filter the precipitate to give 2.24 g (77% of theory) of the title product, melting at 137.5-139.5 ° C. .
Przykład VI. N-/S-3-eeiyloheptanoilo/-D- -glutamyloglicylo-D·-alanina, W sposób podobny do opisanego w przykładzie II, produkt z poprzedniego przykładu przekształca się w związek tytuoowy.Example VI. N- (S-3-eeiylheptanoyl) -D-glutamylglycyl-D · -alanine. In a similar manner to that described in Example 2, the product of the previous example is converted into the title compound.
Przykład VII. Chlorowodorek estru benzylowego glicylo-D-alaniny. Do zimnego /0°C/ roztworu 10 g /57 mimoi/ ^τ-III-Γzęd.butyOoksykrrlti>nylogiicyny, 20 g /57 mimoi/ p-toluenosllfonianu estru benzylowego D--alaniny i 5,77 g /57 mrally/ trójetyOαaminy w 100 ml chlorku metylenu dodaje się 12,3 g /60 mme0i/ awncykloheksylokarbodouimidu i pozostawia mieszaninę do ogrzania się do temperatury pokojowej. Po upływie 18 godzin mieszaninę przesącza się, przesącz odparowuje pod zmnnejszonym ^έηΐβηίθπι, pozostałość przemywa 2,5%Example VII. Glycyl-D-alanine benzyl ester hydrochloride. For cold / 0 ° C / solution 10 g / 57 mimoi / ^ τ -III-Γboot Ooksykrrlti> nylogicin, 20 g / 57 mimoi / p-toluenesilphonate of benzyl ester D - alanine and 5.77 g / 57 mrally / triets of Oαamines in 100 ml of methylene chloride, 12.3 g (60 mmole) of awncyclohexylcarbodiimide are added and the mixture is allowed to warm to room temperature. After 18 hours, the mixture is filtered, the filtrate is evaporated under reduced ηΐβηίθπι, the residue is washed with 2.5%
156 175 kwasem solnym, wodą, nasyconym roztworem wodorowęglanu sodowego i solanką, po czym suszy roztwór organiczny nad MgSO^ i odparowuje pod zmiiejszonym ciśnieniem. Do oleistej pozostałości dodaje się 200 ml dioksanu nasyconego chlorowodorem i po 30 mintach dodaje się 400 ml eteru dwuetylowego. Po odsączeniu osadu w atmosferze azotu, otrzymuje się 10,9 g produktu wydajności teoretycznej/.Hydrochloric acid, water, saturated sodium bicarbonate solution and brine, then the organic solution is dried over MgSO 4 and evaporated under reduced pressure. 200 ml of dioxane saturated with hydrogen chloride are added to the oily residue, and after 30 minutes, 400 ml of diethyl ether are added. After filtering off the precipitate under nitrogen atmosphere, 10.9 g of product of theory are obtained.
Przykład VIII. Ester N-III-ręęd.uuookSkkarbonylo-D- f -glutamylo/ oC -benzylowy/ amidu kwasu hydroksybursztynowego. Do 1500 ml chlorku metylenu zawierającego 50 g /143 mmooe/ estru /cC-.benzyoowego/ kwasu N-III-ręęd.Uuloksyk^Γbonslσ-D- ^Γ-gluta minowego i 17,3 g /150 mimol/ N-hydroksybursztynamidu dodaje się 30,9 g /15 wiioH/ dwucykloheksylokarbodwuimidu i otrzymaną mieszaninę miesza w pokojowej temperaturze w ciągu 18 godzin. Następnie odsącza się osad, odparowuje przesącz pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość rozciera z eterem dwuetylowym. Po odsączeniu osadu w atmosferze azotu otrzymuje się 43,7 g /68% wydajności/ produktu.Example VIII. Hydroxysuccinic acid amide N-tertiary ester of uuook S-carbonyl-D-f-glutamyl (oC-benzyl). To 1500 ml of methylene chloride containing 50 g / 143 mmooe / N-tertiary acid / cC- benzyl ester / Uuloxyc ^ Γbonslσ-D- ^ Γ-glutamate and 17.3 g / 150 mimol / N-hydroxysuccinimide are added 30.9 g (15.5 H) of dicyclohexylcarbodiimide were added and the resulting mixture was stirred at room temperature for 18 hours. The precipitate is then filtered off, the filtrate is evaporated under reduced pressure and the residue is triturated with diethyl ether. After filtering off the precipitate under nitrogen, 43.7 g (68% yield) are obtained.
Przykład IX. Chlorowodorek estru benzylowego D- ^-glutamylo-/cć-bbenzyloksykarbonylo/-glicylo-D-alaniny. Roztwór 4,3 g /9,45 ooiooi/ estru N-III-rzęd.buooksykabbonylo-D- Jf-glutamylo-/σ6biersy0owego /amidu kwasu hsdrokssburszSynowego, 2,71 g /9,92 mimoa/ chlorowodorku estru benzylowego glicylo-D-alaniny i 1,0 g /9,92 imiooi/ trójeSyOoominy w 100 ml chlorku metylenu miesza się w pokojowej temperaturze w ciągu 18 godzin, po czym odparowuje pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozpuszcza się w 200 ml octanu etylu, płucze roztwór 2,5% kwasem solnym, 10% roztworem węglanu potasowego i solanką, suszy nad NgSO^ i odparowuje pod zmnejszonym ciśnienieo. Po z os stałość traktuje się 200 ml dioksanu nasyconego chlorowodorem, miesza w ciągu 2 godzin i odparowuje do sucha pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozciera się z eterem dwuetyooiym, odsącza w atmosferze azotu i otrzymuje 3,41 g /wydajność 73%/ produktu.When k order IX. Hydrogen chloride acid k b enz y lowe g of D- ^ -glutamylo- / C C- bbenzyloks carbonyl y / -glycyl-D-alanine. A solution of 4.3 g (9.45%) of N-tertiary buoxycabbonyl-D- Jf-glutamyl / σ6bieric acid / hsdroxsbursyn amide, 2.71 g (9.92 nevi) benzyl glycyl-D- ester hydrochloride alanine and 1.0 g (9.92 imoyl) triethylumine in 100 ml of methylene chloride were stirred at room temperature for 18 hours and then evaporated in vacuo. The residue is dissolved in 200 ml of ethyl acetate, the solution is washed with 2.5% hydrochloric acid, 10% potassium carbonate solution and brine, dried over NgSO4 and evaporated under reduced pressure. The solid is mixed with 200 ml of dioxane saturated with hydrogen chloride, stirred for 2 hours and evaporated to dryness in vacuo. The residue is triturated with diethyl ether and filtered off under nitrogen to give 3.41 g (73% yield) of the product.
W analogiczny sposób, produkt z poprzedniego przykładu i ester butylowy glicylo-D-alaniny przeprowadza się w ester D- jLglutamylo/oC-benrsloksylk^rbonySoO-glicylo-D-alanins.In an analogous manner, the product of the preceding example and the glycyl-D-alanine butyl ester are converted to D-1 -L-glutamyl / C-benrsyloxy-carbonyl-D-glycyl-D-alanins ester.
Przykład X. Chlorek S-3-metyloheptenoilu. 8,5 g /0,062 mooa/ kwasu S-3-metylo-4-hepeeoowego rozpuszcza się w 18 ml CHgCLgi dodaje 5,36 ml /7,80 g, 0,0614 mola/ chlorku oksalilu i pozostawia imeszaninę na okres 4 godzin, aż do zakończenia reakcji, czego dowodem jest ustanie wylzzi^^lania się gazu. Otrzymany roztwór chlorku kwasowego stosuje się bezpośrednio w przykładzie I.Example X. S-3-Methylheptenoyl chloride. 8.5 g (0.062 moles) of S-3-methyl-4-hepenoic acid are dissolved in 18 ml of CHgCl, and 5.36 ml (7.80 g, 0.0614 moles) of oxalyl chloride are added and the imesanine is left for 4 hours, until the reaction is complete, as evidenced by the cessation of gas leakage. The obtained acid chloride solution is used directly in Example 1.
Przykład XI. Chlorek S^-metylo^-heptenoilu. 0,747 g /5 mmli/ kwasu S-3-metylo66-hepeenowego przeprowadza się w roztwór podanego w tytule związku w C^C^, stosując metodę podaną w przykładzie X i stosuje się bezpośrednio w przykładzie V.Example XI. S 1 -methyl 4 -heptenoyl chloride. 0.747 g (5 mml) of S-3-methyl66-hepeenoic acid is converted to a solution of the title compound at C5C2 using the method set out in Example 10 and used directly in Example 5.