PL110627B1 - Method of producing triphosphate organic compounds 32 plabelled in alpha position - Google Patents

Method of producing triphosphate organic compounds 32 plabelled in alpha position Download PDF

Info

Publication number
PL110627B1
PL110627B1 PL19348176A PL19348176A PL110627B1 PL 110627 B1 PL110627 B1 PL 110627B1 PL 19348176 A PL19348176 A PL 19348176A PL 19348176 A PL19348176 A PL 19348176A PL 110627 B1 PL110627 B1 PL 110627B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
adenosine
guanosine
triphosphate
alpha position
pattern
Prior art date
Application number
PL19348176A
Other languages
English (en)
Other versions
PL193481A1 (pl
Inventor
Tadeusz Galamon
Original Assignee
Akad Medyczna
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Akad Medyczna filed Critical Akad Medyczna
Priority to PL19348176A priority Critical patent/PL110627B1/pl
Publication of PL193481A1 publication Critical patent/PL193481A1/pl
Publication of PL110627B1 publication Critical patent/PL110627B1/pl

Links

Landscapes

  • Saccharide Compounds (AREA)

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania trójfosforanowych zwiazków organicznych znaczo¬ nych izotopem "P w pozycji alfa, o ogólnym wzo¬ rze 1, w którym R oznacza ugrupowanie o wzorze 2 pochodzace od adenozyny lufo ugrupowanie o wzo- 5 rze 3 pochodzace od guanozyny, majacych zastoso¬ wanie do badan nad kwasami nukleinowymi i do o- znaczania aktywnosci cyklazy adenylowej i tfosfo- dwuesterazy cyklicznych nukleotydów, przy regula¬ cji hormonalnej oraz przy dzialaniu niektórych en- 10 zymów w organizmach zywych.Znany sposób otrzymywania tych zwiazków jest opisany przez W. E. Wehrli, D. L. M. Verheyden, J. G. Moffat w Journal of the American Cheimical Society 87,2265 (1965) i polega na fosforylacji 2',3'-o- 15 -izopropylideno-adenozyny lub guanozyny za pomo¬ ca 2-cyjanoetylo-/8*P/-fosfoxariu, prowadzacej do o- trzymania adenozyno- lub guanozyno-5'-monofosfo- ranu znaczonego izotopem "P, a nastepnie usuwaniu grupy izopropylidenowej i zamienieniu w morfolidat, 20 a po tym na kondensowaniu otrzymanego zwiazku z pirofosforamem w bezwodnym dwumetylosulfo- -tlemku.Niedogodnosc tego sposobu stanowi duze zanie¬ czyszczenie produktu w ilosci 10,5°/o nieprzereago- 15 wanym 2-cyjanometylon/82P/-fosforanem i dwume- tylosulfotlenkiem.Inny znany sposób jest opisany przez R. H. Sy- monsa w Biochimica et Biophysica Acta 155, 609 (1968) i polega na dzialaniu kwasem ortofosforowym n znaczonym izotopem **P na adenozyno- lub guano- zyno-5'-monofosforan i zadaniu calosci 2',3'-o-izopro- pylidenoadenozyna" lufo guanozyna w srodowisku acetonitrylu lub trójetyloaminy albo tez trójchloro- acetonitrylu lub dwumetyloformamidu. Usuwanie grupy izopropylidenowej nastepuje poprzez dziala¬ nie na otrzymany zwiazek dwumolowym kwasem octowym w temperaturze 100°C przez 40 minut, co doprowadza nastepnie do czesciowego odczepienia izotopu *P i pozostania w masie reakcyjne] czescio¬ wo nieprzereagowanego zwiazku wyjsciowego.Niedogodnoscia tego sposobu jest to, ze otrzymu¬ je sie produkt zanieczyszczony izotopem 82P.Poza tym znany jeszcze sposób opisany przez R. H.Symonsa w Biochimica et Biophysica Acta 330, 535 (1973), polega na sprzeganiu kwasu ortofosforowego znaczonego izotopem 5aP z 40—50.-krotnym nadmia¬ rem 2',3'-o-izopropylidenoadenozyny, przy uzyciu trójchloToacetonitrylu jako czynnika kondensujaca- go w obecnosci rozpuszczalnika trójetyloaminy luti dwumetylenosulfotlenku. Mase reakcyjna nastepnie ogrzewa sie, zadaje wodorotlenkiem sodowym, po czym otrzymuje sie krystaliczny produkt adenozy¬ no-5'-monofosforanu znaczonego izotopem "P. Tak samo sie otrzymuje guanozyno-5'-monofosfoiran.Niedogodnoscia tego procesu jest zanieczyszczenie produktu nieprzereagowanym kwasem ortofosforo¬ wym znaczonym izotopem ^P, oraz wolna lub 2',3'-o- -izopropylidenoadenozyna albo guanozyna.Wszystkie te sposoby charakteryzuja sie skompli- 110 627110 627 3 kowanym i dlugotrwalym procesem wytwarzania zwiazków radioaktywnych, wymagajacym najpierw przylaczenia do grup hydroksylowych grupy izo- propylidenowej, a nastepnie wyodrebnienia pólpro¬ duktu przejsciowego, po czym droga odrebnej syn¬ tezy przy udziale kwasu ortofosforowego znaczone¬ go izotopem 82P otrzymuje sie drugi pólprodukt przejsciowy i z nich dopiero sie tworzy trzeci pól¬ produkt z którego po usunieciu grupy cyjanoetylo- wej przez zadanie wodorotlenkiem sodowym otrzy¬ muje sie trójfosforanowy produkt finalny. Poza tym we wszystkich rodzajach syntezy wystepuja odpady radioaktywne, nieprzydatne do przerobu i klopotli¬ we w niszczeniu.Celem sposobu wedlug wynalazku jest usuniecie niedogodnosci znanych rozwiazan, poprzez skrócenie i uproszczenie procesu wytwarzania wskutek bezpo¬ sredniego napromieniowywania zwiazku wyjsciowe¬ go. Istota jego polega na tym, ze sól wapniowa ade- nozyno-5'- lub guanozyno-5'-monofosforanu poddaje sie bezposredniemu napromieniowaniu wiazka neu¬ tronów w temperaturze nizszej luib równej 180°C.Nastepnie na otrzymany jeden ze zwiazków dziala sie sola cykloheksyloamoniowa-2-cyjanoetylopirofo- sfoimidazolu, po czym z otrzymanego zwiazku usu¬ wa sie w znany sposób grupe cyjanoetylowa przez ogrzewanie z dwumetyloformamidem, a nastepnie zaleje sie calosc wodorotlenkiem sodu w temp. 0°C.Zaleta sposobu wedlug wynalazku jest skrócony i uproszczony cykl wytwarzania przy zachowaniu zawsze tej samej grupy fosforanowej, wskutek bez¬ posredniego napromieniowania wiazka neutronów zwiazków nukleozydo-5'-monofosforowych, z których sie otrzymuje inne zwiazki nukleozydo-5'-trójfosfo- ranowe znaczone izotopem 82P w pozycji alfa. Poza tym proces przebiega bez wystepowania odpadów radioaktywnych.Sposób wedlug wynalazku jest opisany w przy¬ kladach wykonania, a wzory chemiczne przedsta¬ wiajace zwiazki otrzymane tym sposobem sa uwi¬ docznione na rysunku.Przyklad I. 694 czesci wagowych kwasu lub soli wapniowej adenozyno-5'-nionofosforowej suszy sie w 105°C do stalej masy celem unikniecia radio- lizy wody. Nastepnie kwas lub sól wprowadza sie do ampulki kwarcowej, która po zatopieniu umiesz¬ cza sie w zasobniku, a ten z kolei w kanale reak¬ cyjnym reaktora jadrowego. Calosc sie poddaje na¬ promieniowaniu wiazka neutronów najkorzystniej o gestosci 101*—«101* n/cm8S w temperaturze 160— 180°C, najlepiej w sposób ciagly przez 20—21 dni.Do otrzymanego znaczonego izotopem *P kwasu lub soli adenozyno»5'-mc4Kfosforowej przylacza sie 4 reszte pirofosforanowa dodajac 10—15 mikromoli soli cykloheksyloamoniowej-2^cyjanoetylopirofosfo- imidazolu i po wymieszaniu calosc suszy sie przez dodanie porcjami acetanitrylu, a nastepnie mase s reakcyjna poddaje sie odparowaniu pod próznia. Do calosci dodaje sie w znany sposób suchego dwume- tyloformamidu i w szczelnym naczyniu poddaje sie ja ogrzewaniu w temperaturze 37°C w czasie 4 go¬ dzin. Po usunieciu pod próznia rozpuszczalnika, do io calosci sie dodaje dwumolowego roztworu wodoro¬ tlenku sodowego i ja sie utrzymuje w temperaturze 0°C przez 50—70 minut celem usuniecia grupy cy- janoetylowej. Po tym do masy reakcyjnej dodaje sie wegla aktywowanego i calosc poddaje sie oczyszcze- 15 niu w kolumnie chromatograficznej.Otrzymany krystaliczny proszek adenozyno-5'^trój- fosforanu znaczonego izotopem **P w pozycji alfa ma aktywnosc wlasciwa 2,5—3,5 mCi/mikromol.Wydajnosc procesu wynosi 75—80%. 20 Przyklad II. 720 czesci wagowych suchego kwasu lub soli wapniowej guanozyno-5'-monofosfo- rowej napromieniowuje sie wiazka neutronów o do¬ wolnej gestosci w /prizedziaie 1012—1014 n/cm2S w temperaturze dowolnej miedzy 160—180°C, najlepiej 25 w sposób ciagly dowolnie przez 20—21 dni. Calosc poddaje sie dzialaniu dowolnej ilosci w przedzale 10—15 mikromili soli cykloheksyloamoniowej 2-cyja- noetylopirofosfoimiidazolu. Nastepnie suszenie masy oraz jej inkubowanie i oczyszczenie odbywa sie wed- 20 lug przykladu I.Otrzymany krystaliczny proszek guanozyno-5'-trój- fosforanu znaczonego izotopem MP w pozycji alfa ma aktywnosc wlasciwa 2,7—2,7 mCi/mikromol.Wydajnosc procesu wynosi 70—75°/o. 55 Zastrzezenie patentowe Sposób wytwarzania trójfosforanowych zwiazków |0 organicznych znaczonych izotopem 82P w pozycji al¬ fa, o ogólnym wzorze 1, w którym R oznacza ugru¬ powanie o wzorze 2 pochodzace od adenozyny lub ugrupowanie o wzorze 3 pochodzace od guanozyny, znamienny tym, ze sól wapniowa adenozyno-5'- lub guanozyno-5'-monofosforanu poddaje sie bezposred¬ niemu napromieniowaniu wiazka neutronów w tem¬ peraturze nizszej lub równej 180°C i na otrzymane zwiazki dziala sie sola cykloheksyloamoniowa-2-cy- janoetylopirofosfoimidazolu, po czym z otrzymane¬ go zwiazku usuwa sie w znany sposób grupe cyja- 50 noetylowa przez ogrzewanie z dwumetyloformami¬ dem, a nastepnie przez zadanie calosci wodorotlen¬ kiem sodowym w temperaturze 0°C.110 627 0 0 0 HC-P-0-P-0-^-0-CH„-R III z OH ON OH WZÓR 1 WZÓR 2 WZÓR 3 PL

Claims (1)

1. Zastrzezenie patentowe Sposób wytwarzania trójfosforanowych zwiazków |0 organicznych znaczonych izotopem 82P w pozycji al¬ fa, o ogólnym wzorze 1, w którym R oznacza ugru¬ powanie o wzorze 2 pochodzace od adenozyny lub ugrupowanie o wzorze 3 pochodzace od guanozyny, znamienny tym, ze sól wapniowa adenozyno-5'- lub guanozyno-5'-monofosforanu poddaje sie bezposred¬ niemu napromieniowaniu wiazka neutronów w tem¬ peraturze nizszej lub równej 180°C i na otrzymane zwiazki dziala sie sola cykloheksyloamoniowa-2-cy- janoetylopirofosfoimidazolu, po czym z otrzymane¬ go zwiazku usuwa sie w znany sposób grupe cyja- 50 noetylowa przez ogrzewanie z dwumetyloformami¬ dem, a nastepnie przez zadanie calosci wodorotlen¬ kiem sodowym w temperaturze 0°C.110 627 0 0 0 HC-P-0-P-0-^-0-CH„-R III z OH ON OH WZÓR 1 WZÓR 2 WZÓR 3 PL
PL19348176A 1976-11-03 1976-11-03 Method of producing triphosphate organic compounds 32 plabelled in alpha position PL110627B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL19348176A PL110627B1 (en) 1976-11-03 1976-11-03 Method of producing triphosphate organic compounds 32 plabelled in alpha position

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL19348176A PL110627B1 (en) 1976-11-03 1976-11-03 Method of producing triphosphate organic compounds 32 plabelled in alpha position

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL193481A1 PL193481A1 (pl) 1978-05-08
PL110627B1 true PL110627B1 (en) 1980-07-31

Family

ID=19979226

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL19348176A PL110627B1 (en) 1976-11-03 1976-11-03 Method of producing triphosphate organic compounds 32 plabelled in alpha position

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL110627B1 (pl)

Also Published As

Publication number Publication date
PL193481A1 (pl) 1978-05-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Weimann et al. Studies on Polynucleotides. XVII. 1 On the Mechanism of Internucleotide Bond Synthesis by the Carbodiimide Method 2
Hulshof et al. Prebiotic condensation reactions in an aqueous medium: a review of condensing agents
Moffatt et al. Nucleoside Polyphosphates. VIII. 1 New and Improved Syntheses of Uridine Diphosphate Glucose and Flavin Adenine Dinucleotide Using Nucleoside-5'Phosphoramidates2
Roseman et al. Nucleoside polyphosphates. XI. 1 An improved general method for the synthesis of nucleotide coenzymes. Syntheses of uridine-5', cytidine-5'and guanosine-5'diphosphate derivatives
Österberg et al. Further studies of urea-catalyzed phosphorylation reactions
Kennedy The biological synthesis of phospholipids
US3534017A (en) Process for the preparation of nucleoside-5'-diphosphates and triphosphates and mono- and oligo-nucleotidyl-nucleoside-5'-diphosphates and triphosphates
Müller et al. Synthesis of phosphonate analogues of CMP-Neu5Ac determination of α (2–6)-sialyltransferase inhibition
Lipkin et al. Action of hydrogen fluoride on nucleotides and other esters of phosphorus (V) acids
Kenner et al. 705. Nucleotides. Part XVII. N-Chloroamides as reagents for the chlorination of diesters of phosphorous acid. A new synthesis of uridine-5′ pyrophosphate
Brown et al. Nucleotides. Part XXXIV. The hydrolysis of dialkyl esters of uridine-3′ phosphate and its relevance to the question of phosphotriester linkages in ribonucleic acids
Verheyden et al. Dismutation reactions of nucleoside polyphosphates. I. General features of the reaction
Brown et al. 12. Nucleotides. Part IX. The synthesis of adenylic acids a and b from 5′-trityl adenosine
Corby et al. 704. Nucleotides. Part XVI. Ribonucleoside-5′ phosphites. A new method for the preparation of mixed secondary phosphites
Connolly et al. Streospecific substitution of oxygen-18 for sulfur in nucleoside phosphorothioates.
PL110627B1 (en) Method of producing triphosphate organic compounds 32 plabelled in alpha position
Adam et al. Dismutation Reactions of Nucleoside Polyphosphates. V. Syntheses of P1, P4-Di (guanosine-5') Tetraphosphate and P, P-Di (guanosine-5') Triphosphate1
Okruszek et al. The synthesis of nucleoside 5'-O-(1, 1-dithiotriphosphates)
DE1918282A1 (de) Verfahren zur Herstellung von Diestern kondensierter Phosphorsaeure
Khorana et al. Nucleoside Polyphosphates. IX. 1 The Reversible Formation of Pyrophosphates from Monoesters of Phosphoric Acid by Reaction with Acetic Anhydride2
US2970139A (en) 5-fluorouracil nucleotides and preparation thereof
Baddiley et al. 550. Phosphorylation through glyoxalines [iminazoles] and its significance in enzymic transphosphorylation
Shpirt et al. Conversion of N-acetylneuraminic acid glycosyl chloride into dibenzyl glycosyl phosphate: O-glycosylation in the absence of a promoter
Kenner et al. Nucleotides. Part XXVIII. A synthesis of uridine-5′ triphosphate (UTP)
Forrest et al. 479. Nucleotides. Part XI. Some preliminary experiments on a projected synthesis of flavin-adenine dinucleotide. New methods for the preparation of riboflavin-4′: 5′ phosphate

Legal Events

Date Code Title Description
RECP Rectifications of patent specification