NO891756L - TEST STRIPS FOR DETERMINING URINARY SUBSTANCES AND THEIR USE. - Google Patents
TEST STRIPS FOR DETERMINING URINARY SUBSTANCES AND THEIR USE.Info
- Publication number
- NO891756L NO891756L NO89891756A NO891756A NO891756L NO 891756 L NO891756 L NO 891756L NO 89891756 A NO89891756 A NO 89891756A NO 891756 A NO891756 A NO 891756A NO 891756 L NO891756 L NO 891756L
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- zone
- reaction zone
- test strips
- reaction
- indicator
- Prior art date
Links
- 239000000126 substance Substances 0.000 title 1
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 title 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 41
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 claims description 26
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 17
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 claims description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 10
- 239000002585 base Substances 0.000 claims description 9
- 235000011121 sodium hydroxide Nutrition 0.000 claims description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 5
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims description 4
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 claims description 3
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000003945 anionic surfactant Substances 0.000 claims description 3
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 claims description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000008051 alkyl sulfates Chemical class 0.000 claims description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims description 2
- ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L magnesium carbonate Chemical compound [Mg+2].[O-]C([O-])=O ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 239000001095 magnesium carbonate Substances 0.000 claims description 2
- 229910000021 magnesium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000005416 organic matter Substances 0.000 claims description 2
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 claims description 2
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims 1
- 238000007598 dipping method Methods 0.000 claims 1
- 239000012051 hydrophobic carrier Substances 0.000 claims 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 19
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 19
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 19
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 8
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 4
- 239000012876 carrier material Substances 0.000 description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000007605 air drying Methods 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- WQYVRQLZKVEZGA-UHFFFAOYSA-N hypochlorite Chemical compound Cl[O-] WQYVRQLZKVEZGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 2
- 238000005470 impregnation Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KPGXRSRHYNQIFN-UHFFFAOYSA-L 2-oxoglutarate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC(=O)C([O-])=O KPGXRSRHYNQIFN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- BGNGWHSBYQYVRX-UHFFFAOYSA-N 4-(dimethylamino)benzaldehyde Chemical compound CN(C)C1=CC=C(C=O)C=C1 BGNGWHSBYQYVRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000950981 Bacillus subtilis (strain 168) Catabolic NAD-specific glutamate dehydrogenase RocG Proteins 0.000 description 1
- FRPHFZCDPYBUAU-UHFFFAOYSA-N Bromocresolgreen Chemical compound CC1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C(=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 FRPHFZCDPYBUAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 102000016901 Glutamate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 206010022998 Irritability Diseases 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000001045 blue dye Substances 0.000 description 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003093 cationic surfactant Substances 0.000 description 1
- 239000003518 caustics Substances 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- FSEUPUDHEBLWJY-HWKANZROSA-N diacetylmonoxime Chemical compound CC(=O)C(\C)=N\O FSEUPUDHEBLWJY-HWKANZROSA-N 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000000446 fuel Substances 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 229920000151 polyglycol Polymers 0.000 description 1
- 239000010695 polyglycol Substances 0.000 description 1
- TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M potassium hydrogencarbonate Chemical compound [K+].OC([O-])=O TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/58—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving urea or urease
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Oppfinnelsen vedrører en teststripe og deres anvendelse til rask kvantitativ bestemmelse av drivstoff, fortrinnsvis fra melk. Den kan umiddelbart bli anvendt så vel i landbruks-vitenskap som i den melkebearbeidende industri. The invention relates to a test strip and their use for rapid quantitative determination of fuel, preferably from milk. It can immediately be used both in agricultural science and in the milk processing industry.
For den kvantitative bestemmelsen av urlnstoffinnhold fra melk er forskjellige metoder kjent, f.eks. enzymatisk spaltning av urinstoffet med urease og titrimetrisk bestemmelse av den dermed dannede ammoniakken, den koiorimetriske målingen av det dannede blå fargestoffet ved omsetning av urinstoffet med fenol og alkalihypokloritt (Thaler, H. og Sturm, W., Deut. Lebensm. Rundsch. 61 (1966) 35-40; Krom, M.D., Analyst 105 (1980 ) 305-316; Broderick, G.A., Kang, J.H., Linow, F. og Schaffner, B. , Nahrung 24 (1980) 85-87; Behringer, G. og Klostermeyer, H.K., Lebensmittel Unters. Forsch. 172 (1981) 362-364) eller fargereaksjonen mellom urlnstoff og p-dimetylaminobenzaldehyd (Brown, H.H. , Anal. Chem. 31 (1959) 1844-1846; Mc Dowell, A. K. R., J. Dairy Res. 39 (1972) 27-33) henholdsvis diacetylmonoksim (Vignon, B., Dissertation, Université Nancy I (1976 ); Siast, G. , Ann. Biol. Clin. 26 (1968) 431-448). Various methods are known for the quantitative determination of organic matter content from milk, e.g. enzymatic cleavage of the urea with urease and titrimetric determination of the ammonia thus formed, the coiorimetric measurement of the blue dye formed by reacting the urea with phenol and alkali hypochlorite (Thaler, H. and Sturm, W., Deut. Lebensm. Rundsch. 61 ( 1966) 35-40; Krom, M.D., Analyst 105 (1980) 305-316; Broderick, G.A., Kang, J.H., Linow, F. and Schaffner, B., Nahrung 24 (1980) 85-87; Behringer, G. and Klostermeyer, H.K., Lebensmittel Unters. Forsch. 172 (1981) 362-364) or the color reaction between urea and p-dimethylaminobenzaldehyde (Brown, H.H., Anal. Chem. 31 (1959) 1844-1846; Mc Dowell, A. K. R., J. Dairy Res. 39 (1972) 27-33) respectively diacetyl monoxime (Vignon, B., Dissertation, Université Nancy I (1976); Siast, G., Ann. Biol. Clin. 26 (1968) 431-448).
Den foreslåtte hurtigbestemmelsen fra firmaet Boehringer baserer seg på spaltning av urlnstoff ved enzymet urease og den tilknyttede omsetning av den dannede ammoniakken med alfa-ketoglutarat i nærvær av glutamatdehydrogenase, hvorved omsetningen av forbrukt mengde NaOH blir spektrofotometrisk bestemt. The proposed rapid determination from the company Boehringer is based on the cleavage of urea by the enzyme urease and the associated conversion of the formed ammonia with alpha-ketoglutarate in the presence of glutamate dehydrogenase, whereby the conversion of the amount of NaOH consumed is determined spectrophotometrically.
Anvendelsen av denne analysefremgangsmåten forutsetter imidlertid omstendelig og tidkrevende laboratorieanalyser, som en rask bestemmelse av urlnstoffinnholdet, eksempelvis i landbruksvitenskapelige industriområder, umulig kan utføre. The use of this analysis method, however, presupposes laborious and time-consuming laboratory analyses, which a rapid determination of the urea content, for example in agricultural scientific industrial areas, cannot possibly carry out.
Den utviklede teststrimmelfremgangsmåte fra firmaet Boehringer for bestemmelse av urlnstoffinnhold i blod, serum og plasma baserer seg på en utnyttelse av fargereaksjonen og krever anvendelse av et refleksjonsfotometer til bestemmelse av fargeintensiteten, som er proporsjonal med urinstoff-konsentrasj onen. The test strip method developed by the company Boehringer for the determination of urea content in blood, serum and plasma is based on an exploitation of the color reaction and requires the use of a reflection photometer to determine the color intensity, which is proportional to the urea concentration.
Den fra firmaet Merck Darmstadt forhandlede teststrimmel for urlnstoff tillater bestemmelse av urinstoffinnhold i blod, men ikke i melk. The test strip for urea sold by Merck Darmstadt allows the determination of urea content in blood, but not in milk.
Det samme gjelder også for urinstoffbestemmelse ifølge DD-PS 137 384. The same also applies to urea determination according to DD-PS 137 384.
På grunn av den høye buffervirkning i melk, blir den enzymureasedannede ammoniakk i reaksjonssonen fastholdt og diffunderer ikke i indikatorsjiktet. Fuktningsproblemer mellom melk og teststrimmelen forhindrer delvis også en riktig påvisning. Due to the high buffering effect of milk, the ammonia produced by enzyme urease is retained in the reaction zone and does not diffuse into the indicator layer. Wetting problems between milk and the test strip partly also prevent a correct detection.
Målet med oppfinnelsen er å utvikle en økonomisk og rask fremgangsmåte for kvantitativ bestemmelse av urinstoffinnhold i melk, som ved hjelp av en egnet teststrimmel overvinner ulempene ved kjente fremgangsmåter. The aim of the invention is to develop an economical and rapid method for the quantitative determination of urea content in milk, which, with the help of a suitable test strip, overcomes the disadvantages of known methods.
Oppfinnelsen legger oppgaven til grunn å utvikle en økonomisk og rask test til kvantitativ bestemmelse av urinstoffinnhold i melk, som kan anvendes under betingelsene til det landbruksvitenskapelige husdyrhold. Oppgaven til oppfinnelsen ligger deri begrunnet, å oppnå frisetting av ammoniakken fra reaksjonssonen, uten at aktiviteten til enzymet urease vesentlig blir påvirket. The invention is based on the task of developing an economic and rapid test for the quantitative determination of urea content in milk, which can be used under the conditions of agricultural scientific livestock husbandry. The task of the invention is based on this, to achieve release of the ammonia from the reaction zone, without the activity of the enzyme urease being significantly affected.
Oppgaven blir ifølge oppfinnelsen løst ved at urinstoff-innholdet i melkeprøven blir bestemt med en urinstoff-teststrimmel, som består av en reaksjonssone og en indikatorsone, som er påført en bærer. Det er funnet at gjennom impregnering av et absorberende bærermateriale med urease-enzym, glukose, en base og et tensid oppstår en reaksjons sone, som bevirker en enzymatisk spaltning av urinstoffet av den derpå påførte melk. According to the invention, the task is solved by determining the urea content in the milk sample with a urea test strip, which consists of a reaction zone and an indicator zone, which is applied to a carrier. It has been found that through impregnation of an absorbent carrier material with urease enzyme, glucose, a base and a surfactant, a reaction zone occurs, which causes an enzymatic cleavage of the urea of the milk applied thereon.
Bærermaterialet i reaksjonssonen kan bestå av naturlig eller også syntetiske faser, hvorved bærermaterialet ikke har noen innvirkning på omsetningen og tilstrekkelig absorbsjon foregår. Filterpapir blir fordelaktig anvendt, der vekten ligger mellom 60 og 400 g/m<2>. Som baser for oppbygning av reaksjonssonen er natronlut, kalilut, fortrinnsvis salte svake syrer, som kaliumkarbonat, natriumkarbonat, magnesiumkarbonat eller natriumcitrat, anvendbare. Basen må ikke være for sterk (lut), og dermed henholdsvis ikke ødelegge enzymet og at systemet ikke forlater det optimale pH-området. På den andre siden må naturligvis melken være bufret, slik at ammoniakk overhodet kan drives ut. The carrier material in the reaction zone can consist of natural or synthetic phases, whereby the carrier material has no effect on the turnover and sufficient absorption takes place. Filter paper is advantageously used, where the weight is between 60 and 400 g/m<2>. As bases for building up the reaction zone, caustic soda, caustic soda, preferably salty weak acids, such as potassium carbonate, sodium carbonate, magnesium carbonate or sodium citrate, can be used. The base must not be too strong (lye), and thus not destroy the enzyme and that the system does not leave the optimal pH range. On the other hand, the milk must naturally be buffered, so that ammonia can be expelled at all.
Det har vist seg at gjennom innsatsen fra ikke-ionogene tensider, som kanskje alkylfenylpolyetylenglykol eller alkylpolyglykoletersulfat, henholdsvis fra aniontensider som f.eks. alkylsulfater, blir en god løsning med melke-eksisterende proteiner og kalsium oppnådd. Det oppnås en god fuktbarhet for den fastgjorte reaksjonssonen med melk som prøvevæske, mens det oppnås en dårligere fuktbarhet av kationiske tensider. It has been shown that through the efforts of non-ionic surfactants, such as perhaps alkylphenylpolyethyleneglycol or alkylpolyglycolethersulphate, respectively from anionic surfactants such as e.g. alkyl sulfates, a good solution with milk-existing proteins and calcium is obtained. A good wettability is achieved for the fixed reaction zone with milk as test liquid, while a poorer wettability is achieved with cationic surfactants.
På reaksjonssonen blir impregneringen påført i følgende konsentrasj oner: urease i en konsentrasjon fra 0,30 til 0,90 mg/cm<2>, fortrinnsvis 0,70 mg/cm<2>, On the reaction zone, the impregnation is applied in the following concentrations: urease in a concentration from 0.30 to 0.90 mg/cm<2>, preferably 0.70 mg/cm<2>,
glukose i en konsentrasjon på 0,05 til 0,30 mg/cm<2>, fortrinnsvis 0,17 mg/cm<2>, glucose in a concentration of 0.05 to 0.30 mg/cm<2>, preferably 0.17 mg/cm<2>,
tensid i en konsentrasjon på 0,25 til 1,30 mg/cm<2>, fortrinnsvis 0,63 mg/cm<2>, surfactant in a concentration of 0.25 to 1.30 mg/cm<2>, preferably 0.63 mg/cm<2>,
base i en konsentrasjon på 0,2 til 0,4 mg/cm<2>, fortrinnsvis 0,28 mg/cm<2>. base in a concentration of 0.2 to 0.4 mg/cm<2>, preferably 0.28 mg/cm<2>.
Ved anvendelsen av en av de nevnte basene i det angitte konsentrasjonsområdet vil aktiviteten til urease ikke påvirkes. På denne måten lykkes frigivelsen av ammoniakk fra saltet av melk og diffusjonen i indikatorsonen. When using one of the mentioned bases in the indicated concentration range, the activity of urease will not be affected. In this way, the release of ammonia from the salt of milk and the diffusion in the indicator zone are successful.
Tilsatsen av et tensid ifølge oppfinnelsen muliggjør fuktbarheten i den fastgjorte reaksjonssonen, slik at definert mengde med prøvevæske kan opptas. The addition of a surfactant according to the invention enables wettability in the attached reaction zone, so that a defined amount of sample liquid can be taken up.
På et underlag som består av et hydrofobt materiale, fortrinnsvis av vannugjennomtrengelig plastmateriale, er den oppnådde reaksjonssone ved den ene enden og dertil tilknyttet ammoniakk i den andre ende, i og for seg bekjent måte anordnet den oppnådde indikatorsone. Målene er fortrinnsvis for bæreren (underlag) 70 x 6 mm, reaksjonssonen 6x6 mm, indikatorsonen 40 x 6 mm, hvorved avstand fra reaksjons- til indikatorsone utgjør 5 mm. Reaksjons- og indikatorsonen er fiksert på underlaget med en vannuløselig klebemiddel. En slik teststripe befinner seg til påvisningsformål i den ene siden i et lukket rør, hvorved reaksjonssonen befinner seg i den lukkede enden. On a substrate consisting of a hydrophobic material, preferably of water-impermeable plastic material, the obtained reaction zone at one end and associated ammonia at the other end are arranged in a manner known per se as the obtained indicator zone. The measurements are preferably for the carrier (substrate) 70 x 6 mm, the reaction zone 6 x 6 mm, the indicator zone 40 x 6 mm, whereby the distance from the reaction zone to the indicator zone amounts to 5 mm. The reaction and indicator zone is fixed to the substrate with a water-insoluble adhesive. Such a test strip is located for detection purposes on one side of a closed tube, whereby the reaction zone is located at the closed end.
Fordelen med teststrimlene ifølge oppfinnelsen består i den enkle bruk i betjening i landbruksvitenskapelig praksis uten anvendelse av spesielle apparater eller måleredskaper. The advantage of the test strips according to the invention consists in the simple use in operation in agricultural scientific practice without the use of special devices or measuring tools.
Bestemmelsen blir gjennomført slik at teststrimlene med reaksjonssonen blir senket ned i melkeprøven i 3 sekunder eller 15 jjI av prøveløsningen blir opp-pipettert. Det er vesentlig at med denne bruk av reaksjonssonen, blir den undersøkende prøven dosert i en mengde fra 0,040 til 0,070 ml/cm<2>, fortrinnsvis 0,056 ml/cm<2>. I den tilknytning bringer man strimmelen i det ensidig lukkede røret, slik at reaksjonssonen befinner seg på gulvet av det horisontalt liggende røret. Etter 120 minutter måler man lengden av fargingen til indikatorsonen, som er proporsjonal med urinstoffmengden på forhånd i melkeprøven. The determination is carried out so that the test strips with the reaction zone are immersed in the milk sample for 3 seconds or 15 µl of the sample solution is pipetted up. It is essential that with this use of the reaction zone, the test sample is dosed in an amount of from 0.040 to 0.070 ml/cm<2>, preferably 0.056 ml/cm<2>. In this connection, the strip is brought into the one-sided closed tube, so that the reaction zone is located on the floor of the horizontally lying tube. After 120 minutes, the length of the staining of the indicator zone is measured, which is proportional to the quantity of urea in the milk sample beforehand.
Bestemmelsen av urinstoffkonsentrasjonen skjer en gang gjennom sammenligning av lengden til den fargede indikatorsonen med verdien i henhold til en annen metode bestemt justeringstabell. The determination of the urea concentration occurs once by comparing the length of the colored indicator zone with the value according to another method determined adjustment table.
På den annen side er det i tillegg mulig å gjennom en prøvefarget indikatorsone å behandle en indikatorsone med en urinstoffoppløsning med kjent konsentrasjon (f.eks. 10 mg/100 ml) i vann. Ved måling av de fargede utsnitt til indikatorsonen oppnår man i begge størrelser On the other hand, it is additionally possible to treat an indicator zone with a urea solution of known concentration (e.g. 10 mg/100 ml) in water through a sample colored indicator zone. When measuring the colored sections of the indicator zone, both sizes are obtained
x = lengde utsnitt prøvex = length section sample
y = lengde utsnitt standard,y = length section standard,
og regner urinstoffkonsentrasjonen etter formelen:and calculates the urea concentration according to the formula:
Med eksempler blir testmaterialet ifølge oppfinnelsen og dens anvendelse nærmere forklart. With examples, the test material according to the invention and its application are explained in more detail.
I?5 f? F. eksempelI?5 f? F. example
Eksempel 1Example 1
I et glasskår med målene 300 x 40 x 30 mm blir 200 ml av en etanolisk oppløsning av 0,161 g vinsyre og 100 ml av en etanolisk oppløsning av 0,256 g bromkresolgrønt tilsatt. Med denne oppløsning impregnerer man ved neddypping (1 minutt), lufttørking og etterfølgende tørking i tørkeskap ved 70" C i en time, 37 papirstrimler med målene 300 x 40 mm, fra disse blir indikatorsonen fremstilt ved skjæring av strimler til 6 mm brede og 40 mm lange. In a shard of glass with the dimensions 300 x 40 x 30 mm, 200 ml of an ethanolic solution of 0.161 g of tartaric acid and 100 ml of an ethanolic solution of 0.256 g of bromocresol green are added. With this solution, 37 paper strips measuring 300 x 40 mm are impregnated by immersion (1 minute), air drying and subsequent drying in an oven at 70" C for one hour, from which the indicator zone is produced by cutting strips to 6 mm wide and 40 mm long.
I et glasskår blir 75 ml av en vandig oppløsning av 1,2 g urease-enzym og 0,3 g glukose, så vel som 0,450 ml av en mettet kaliumkarbonatoppløsning i vann så vel som 1,12 g alkylpolyglykoletersulfat tilsatt. Med denne oppløsning impregnerer man ved neddypping (1 minutt) og lufttørking 15 papirstrimler med målene 300 x 40 mm. Etter skjæring av papirstykkene i målene 6 x 6 mm, oppnår man den ferdige reaksj onssonen. In a glass beaker, 75 ml of an aqueous solution of 1.2 g of urease enzyme and 0.3 g of glucose, as well as 0.450 ml of a saturated aqueous potassium carbonate solution as well as 1.12 g of alkyl polyglycol ether sulfate are added. With this solution, 15 paper strips measuring 300 x 40 mm are impregnated by immersion (1 minute) and air drying. After cutting the pieces of paper in dimensions 6 x 6 mm, the finished reaction zone is obtained.
På en vannugjennomtrengelig plaststrimmel med målene 70 x 6 mm, kleber man således et stykke reaksjonssone og indikatorsone, at ved enden av strimmelen befinner reaksjonssonen seg i en avstand fra 5 mm fra indikatorsonen. Det er dertil å legge merke til at det blir klebet med et vannuløselig klebemiddel med kaustisk basis. On a water-impermeable plastic strip measuring 70 x 6 mm, a piece of reaction zone and indicator zone is thus glued, so that at the end of the strip the reaction zone is at a distance of 5 mm from the indicator zone. It is also worth noting that it is glued with a water-insoluble adhesive with a caustic base.
I en melkeprøve dypper man teststrimmelen ca. 3 sekunder til fullstendig fuktighet i reaksjonssonen. Den overflødige væsken tørker man vekk. Deretter blir strimmelen skjøvet inn i det ensidige lukkede glassrøret med en diameter på 6,5 mm, slik at reaksjonssonen befinner seg i den lukkede enden. Etter 120 minutter blir lengden på den fargede indikatorsonen målt. Fra en justeringstabell blir verdien av urinstoffkonsentrasjonen bestemt. Oppstillingen av justeringstabellen foregår etter en annen urinstoffmetode (f.eks. Conway-bestemmelsen). Justeringstabellen er gyldig for en fullstendig ladning av teststrimler. In a milk sample, dip the test strip approx. 3 seconds to complete moisture in the reaction zone. The excess liquid is wiped away. The strip is then pushed into the one-sided closed glass tube with a diameter of 6.5 mm, so that the reaction zone is located at the closed end. After 120 minutes, the length of the colored indicator zone is measured. From an adjustment table, the value of the urea concentration is determined. The preparation of the adjustment table takes place according to another urea method (e.g. the Conway determination). The calibration chart is valid for a full load of test strips.
Eksempel 2Example 2
På reaksjonssonen til en etter eksempel 1 fremstilt teststrimmel, blir 15 pl melk utpipettert. Teststrimmelen som beskrevet i eksempel 1, blir skjøvet inn i et glassrør. På analog måte behandler man to urinstoffoppløsninger med kjent konsentrasjon (20 mg/100 ml og 30 mg/100 ml) i vann. Ved utmåling av det fargede utsnittet av indikatorsonen oppnår man de begge størrelsene x og y som skal anvendes i henholdsvis formel I og formel II. On the reaction zone of a test strip prepared according to example 1, 15 pl of milk is pipetted out. The test strip as described in example 1 is pushed into a glass tube. In an analogous way, two urea solutions of known concentration (20 mg/100 ml and 30 mg/100 ml) in water are treated. When measuring the colored section of the indicator zone, the two sizes x and y are obtained, which are to be used in formula I and formula II, respectively.
I tilfelle med melk med et urinstof f innhold på 25 mg/100 ml oppnås etter 120 minutters reaksjonstid følgende måleverdier: In the case of milk with a urea content of 25 mg/100 ml, the following measurement values are obtained after a reaction time of 120 minutes:
Melk: X = 8,5 mmMilk: X = 8.5 mm
20 mg/100 ml: y = 9,5 mm ) gjennomsnitt20 mg/100 ml: y = 9.5 mm ) avg
30 mg/100 ml: y = 13,0 mm ) 25 mg/100 ml: y = 11,25 mm 30 mg/100 ml: y = 13.0 mm ) 25 mg/100 ml: y = 11.25 mm
Claims (12)
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DD31521088 | 1988-04-29 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO891756D0 NO891756D0 (en) | 1989-04-27 |
| NO891756L true NO891756L (en) | 1989-10-30 |
Family
ID=5598804
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO89891756A NO891756L (en) | 1988-04-29 | 1989-04-27 | TEST STRIPS FOR DETERMINING URINARY SUBSTANCES AND THEIR USE. |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0339331A3 (en) |
| DK (1) | DK177089A (en) |
| FI (1) | FI891920A (en) |
| NO (1) | NO891756L (en) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FI88310C (en) * | 1990-12-03 | 1993-04-26 | Valio Meijerien | FOERFARANDE OCH MEDEL FOER BESTAEMNING AV UREA |
| FR2731276A1 (en) * | 1995-03-03 | 1996-09-06 | D Aquitaine Comp Chimique | Test strip for urea determn. in milk |
| US7390674B2 (en) | 2005-03-14 | 2008-06-24 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Lateral flow devices using reactive chemistry |
| PL1982183T3 (en) | 2006-01-19 | 2012-11-30 | Lattec I/S | Dry stick device and method for determining an analyte in a sample |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NL101441C (en) * | 1959-03-13 | |||
| US3997470A (en) * | 1971-10-20 | 1976-12-14 | Mallinckrodt, Inc. | Surfactant containing reagent formulations for assaying biological specimens and methods of preparing same |
| DE2649002A1 (en) * | 1976-10-28 | 1978-05-11 | Albert Dr Suedhoff | Test equipment for taking urea levels in saliva - has rod with reactor and indicator zones and protective sleeve |
| DE2711634A1 (en) * | 1977-03-17 | 1978-09-21 | Riedel De Haen Ag | Test kit for urea determn. esp. in serum - comprising spaced reaction and indicator zones in a container and used e.g. to diagnose renal insufficiency |
| DD137384B1 (en) * | 1977-11-04 | 1981-07-29 | Kallies Karl Heinz | INDICATOR CAPILLARY ROUGHS FOR UREA DETERMINATION |
-
1989
- 1989-04-07 EP EP19890106132 patent/EP0339331A3/en not_active Withdrawn
- 1989-04-12 DK DK177089A patent/DK177089A/en not_active Application Discontinuation
- 1989-04-21 FI FI891920A patent/FI891920A/en not_active Application Discontinuation
- 1989-04-27 NO NO89891756A patent/NO891756L/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0339331A3 (en) | 1990-09-19 |
| DK177089A (en) | 1989-10-30 |
| FI891920A (en) | 1989-10-30 |
| NO891756D0 (en) | 1989-04-27 |
| EP0339331A2 (en) | 1989-11-02 |
| DK177089D0 (en) | 1989-04-12 |
| FI891920A0 (en) | 1989-04-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5925026B2 (en) | Dry specimen for creatinine measurement and creatinine measurement method | |
| EP1000352B1 (en) | Method, composition and device for the determination of free halogens in aqueous fluids | |
| FI57782B (en) | REFERENCES FOR ENZYMATIC KINCENTRATIONSBESTAEMNING HOS ETT SUBSTRAT | |
| NO300853B1 (en) | Assay methods, reagent composition and use thereof in glucose determination | |
| WO2005111230A3 (en) | Apoenzyme reactivation electrochemical detection method and assay | |
| US5156947A (en) | Process for reduction of the matrix effect in a fructosamine determination assay | |
| FI81120C (en) | FOERFARANDE FOER BESTAEMNING AV GLUKOS UR BIOLOGISKA VAETSKA SAMT REAGENSBLANDNING FOER TILLAEMPNING AV FOERFARANDET. | |
| Pirvutoiu et al. | Flow injection analysis of mercury (II) based on enzyme inhibition and thermometric detection | |
| EP1113270A3 (en) | Reagent and method for measuring a concentration of protein | |
| WO1999057306A3 (en) | Method for diagnosing a vascular condition | |
| NO891756L (en) | TEST STRIPS FOR DETERMINING URINARY SUBSTANCES AND THEIR USE. | |
| JPH0425000B2 (en) | ||
| DE60329679D1 (en) | TEST PROCEDURE WITH A SULPHONIC ACID AND A NITRO COMPOUND | |
| Jelikić-Stankov et al. | Determination of uric acid in human serum by an enzymatic method using N-methyl-N-(4-aminophenyl)-3-methoxyaniline reagent | |
| EP0490286A1 (en) | Enzymatic composition for ethanol assay | |
| CN104048928A (en) | Detection kit for direct bilirubin | |
| US5776780A (en) | Method for quantitatively measuring white blood cells esterase activity in urine | |
| ATE360206T1 (en) | METHOD FOR MEASURING THE TOTAL CONCENTRATION OF AN ANALYTE | |
| JP4544598B2 (en) | Liquid reagent and storage method | |
| Girotti et al. | Bioluminescent flow-sensing device for the determination of magnesium (II) | |
| CN110849870A (en) | Detection reagent for N-acetyl- β -D-glucosaminidase | |
| CN106198513A (en) | A kind of xylan reagent paper and preparation method thereof | |
| JP2748134B2 (en) | Determination of magnesium | |
| Song et al. | Determination of hemoglobin in plasma and serum by linear-sweep polarography | |
| SU1701749A1 (en) | Matrix for pesticides detection with antiesterase action |