NO762267L - - Google Patents

Info

Publication number
NO762267L
NO762267L NO762267A NO762267A NO762267L NO 762267 L NO762267 L NO 762267L NO 762267 A NO762267 A NO 762267A NO 762267 A NO762267 A NO 762267A NO 762267 L NO762267 L NO 762267L
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
strain
spee
nov
dreyfuss
muller
Prior art date
Application number
NO762267A
Other languages
English (en)
Inventor
M M Dreyfuss
H Tscherter
Original Assignee
Sandoz Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sandoz Ag filed Critical Sandoz Ag
Publication of NO762267L publication Critical patent/NO762267L/no

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K7/00Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/50Cyclic peptides containing at least one abnormal peptide link
    • C07K7/54Cyclic peptides containing at least one abnormal peptide link with at least one abnormal peptide link in the ring
    • C07K7/56Cyclic peptides containing at least one abnormal peptide link with at least one abnormal peptide link in the ring the cyclisation not occurring through 2,4-diamino-butanoic acid
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

"Fremgangsmåte for fremstilling av en ny organisk forbindelse."
Foreliggende oppfinnelse vedrorer fremstilling av forbindelsen S 31794/F-l.
Det særegne ved fremgangsmåten i haibold til oppfinnelsen er at en S 31794/F-l produserende stamme av sopparten Acrophialophora limonispora nov. spee Dreyfuss + Muller dyrkes i nærvær av et næringsmedium.
Forbindelsen S 31794/F-l viser folgende egenskaper:
Et hvitt amorft pulver som kan krystalliseres som angitt i eksfeiti empel 3. Hvis ikke annet er angitt vedrorer de folgende tall-angivelser seg til den amorfe som også den krystallinske form.
Smeltepunkt 178 - 18o8c (spalting) (amorf)
Smeltepunkt 181 - 183°C (spalting) (krystallinsk)
[o^° = - 24° (c = 0,5 i metanol)
[a^<0>= + 37° (c =0,5 i pyridin) (krystallinsk)
I UV-spektrum i metanol (fig. 1) opptrer absorpsjonsmaksima ved ^max 194nm'?<]*>= 807'- Xmax225nm (skulder),
Eicm<=>132<")l maxx275™'EJcm= 12'8'jl max 284nra 'atalte)'
Elom=10'5-
IR-spektrum i KBr (amorf) (fig. 2).
IR-spektrum i Nujol(krystallinsk) (fig. 3).
''"H-NMR- spektrum (100 MHz i DMSO) med te trame tyl silan som intern standard (fig. 4).
<13>C-NMR-spektrum i D^-metanol (190 mg i 1,5 ml D^-metanol)
med tetrametylsilan som intern standard, se tabell 1 (krystallinsk).
For analysen ble den amorfe substans torket ved 20°C i hoyvakuum. Elementæranalysen gav folgende grenseverdier: C 53,9% H 7,5% N 10,1% 0, 27,3%
For analysen ble den krystallinske substans torket i hoyvakuum i 2 timer ved 100°C. Elementæranalysen gav folgende grenseverdier: Funnnet C 55, 5 - 56, 5% H 7,5 - 7,7% N 10,5 - 10,8%
O 25,5 -226,0%.
Forbindelsen er lett-loselig i metanol, etanol, pyridin, dimetylsulfoksyd, tungtloselig i vann, kloroform, etylacetat, eter, benzen, heksan.
Forbindelsen er stabil i vanndig metanol ved pH 3 - 7,5
men i alkalisk eller sterk sur pH-område begynner spalting under tapaav iantifungus aktiviteten.
Ved sur hydrolyse (6N HC1/110°C) ble det som nedbygningsprodukt funnet myristinsyre som ble identifisert i form av metylesteren.
I tynnskiktkromatogram på kieselgel-plater merck, 0,25 mm skikt-tykkelse, viser S 31794/F-l folgende Rf-verdier i de angitte flytemidler:
(sammenlikningsbredde for uracil i paranteser)
Flekkene kan gjores synlige med jod eller ved hjelp av
et egnet påsproytingsreagens.
Folgende påsproytingsreagens har vist seg egnet:
Platen som er fullstendig befridd for losningsmiddel for-besproytes ved en blanding av 0,5 iseddik i etanolaceton c(>l : 1). Deretter stilles den i ca. 7 minutter i en kloratmosfære og overskudd Cl'2 blåses deretter bort i en krafig. luftstrom. Deretter besproytes med en losning av 1 del 0,05 molar KJ-losning i vann + 4 deler av en 9,5% benzidin-losning i 20% eddiksyre. Antibiotikumet S 31794/F-l gir ved denne fremkalling en blå flekk.
Med ninhydrin gir S 31794/F-l ingen farge.
Fremgangsmåten lar seg gjennomføre etter kjente metoder for gjæringsutvinning. En foretrukket kultur av den S 31794/F-l produserende stamme ble deponert ved United States Department of Agriculture (Northern Utilization Research and Development Division), Peoria, 111., USA og er der tilgjengelig for offentligheten under betegnelsen NRRL 8095.
Man kan også anvende S 31794/F-l- produserende stammer, som kan utvinnes fra utgangsstammen, av sopparten av limonispora nov. spee. Dreyfuss + Muller ved behandling ved mutagene substanser eller stråler eller ved seleksjon.
Karakteristika for stammen NRRL 8095
Den nye stamme av sopparten Acrophialophora limonispora nov. spee. Dreyfuss + Muller som anvendes ved oppfinnelsen blé isolert
fra en i British Columbia, Canada samlet jordprove.
Den nye stamme NRRL 8095 ble på grunn av sine morfologiåke egenskaper henfort til hyphomyceten-slekten Acrophialophora Edward, men kunne ikke bringes i overensstemmelse med de tre hittil beskrevende arter av denne slekt (Samson og Tariq Mahmood, 1970: The Genus Acrophialophora Acta bot. Neerl. 19 (6) 804 - '808) slik at den nye stamme NRRL 8095 i det folgende betegnes som en ny art, Acrophialophora limonispora nov.
spee.
De lyse- til kraftig brune konodioforer av A. limonispora
NRRL 8095 er for det meste 700 til 1800 ju lange og 4 til 8 yu tykke, septert; rette eller svakt boyde, i nedre eller midlere del uforgrenet eller få ganger gaffeldelt og kan langs hele lengden være skulpturert med vorter. På konodioforspissene utvikles et symmetrisk eller asymmetrisk, oftest kompakt, penicillie-artig forgrenet system, idet hyppigst på de sistnevnte celler av konidiophor-hovedakslen vokser ut en- til få-celledef1 ~ > primære sidegrener enkeltvis vekselstående, men oftest parvis motstående eller utvokst i ansamlinger på 3 ( sjelden 4).
Disse sidegrener bærer på sin side sideveis og på toppen flere
sekundære kvister som analogt kan være tærtiert forgrenet.
På toppen av de sekundære eller tærtiere kvister sitter to
til seks flaskeformede, i en spiss utlopende 7 - 11 x 2,5 - 4 yu store phialider. Spesielt i éldre kulturer kan man iaktta penselliknende strukturer med sterkt forlengede forgrenings-elementer.
De hyaline konider som er dannet basipetalt i kjeder som lett går i stykker er fra siden betraktet sitronformet med små apiculi som synes morkere, 3,2 - 4,2 x 3,0 - 3,5 yu store og på overflaten glatt til svakt vorteaktig skulpturert.
Stammen NRRL 8095 har et meget bredt vekstoptimum mellom 20°C og 27°C idet det på 2% maltekstraktagar i lopet av syv dogn danner omtrent 35 til 40 mm store kolonier. Den nedre vekst-grense ligger ved 4°C, den ovre mellom 33°C og 34°C.
Kolonier på 2%-maltekstraktagar er forst hvitgronne og over-trukket med porost, hvitt luftmysel. Med tiltagende alder farges substratmyselet morkebrunt. Det forst dannede luftmysel overlagres i lopet av 5 - 10 dogn stadig sterkere av de i en tykk matte dannede konidioforer. Konidiemattene virker forst gullgule til gulgronne, senere lysegule/ kraftig-til grå brune.
Den nye stamme NRRL 8095 lar seg dyrke i eller på passende sammensatte nærings-substrater i overflate- eller submers-kultur.
For utvinning av den nye forbindelse S 31794/F-l anvendes foretrukket submerskulturer, idet egnede næringssubstater,
som beskrevet i eksemplene 1 og 2, inokoleres med en konidie-eller mycel-suspensjon av den nye stamme NRRL 8095 og inkuleres ved en pH-verdi fra 3 til 8, foretrukket 5 - 7,0 og en temperatur på 15 - 30°C, foretrukket 18 - 27°C, under omroring rysting og/eller belufting i 48 til 360 timer, foretrukket
120 til 288 timer.
Mycelandelen av dyrkingsbuUi ongen oppsluttes eventuelt og
S 31794/F-l utvinnes ved ekstraksjons og/eller adsoprpsjons-metoder på i og for seg kjent måte. Man kan imidlertid også forst frasentrifugere mycelet fra dyrkingsbulliongen, separat ekstrahere dyrkingsfiltratet og mycelet etter oppslutning og videre forarbeide ekstraktene enkeltvis eller samlet.
Sammensetningen av de anvendte dyrkingsbullionger som utvinnes ved dyrking av en S 31794/F-l- produserende stamme, fremgår mer detaljert av det folgende.
S 31794/F-l har interessante pharmakodynamiske egenskaper og kan anvendes som medisin.
S 31794/F-l fremviser en antimikrobiell virkning, særlig mot gjær og sopp. Mot de vanlige representanter for grampositiver og gramnegativer bakterier kunne det ved hjelp av kjente metoder ikke konstateres noen virkning, men derimot er virkningen mot forskjellige, for mennesker patogene !'cCandida-stammer spesielt utpreget. Ved en rekkefortynningsforsok, som ble gjennomfort med et maltekstrakt-medium (2% maltekstrakt), pH 5,2 0 5,4)
ved en inkubasjonstemperatur på 27°C og en inkubasjonstid på
48 til 72 timer ble det for S 31794/F-l påvist folgende minimale hemmende konsentrasjoner.(MIC).
Virkningen kan også påvises invivo med metoden med den eks-perimentelle sepsis-infeksjon i mus med candida albicans. Forbindelsen kan folgelig anvendes som antimykoticum. Daglig dose utgjor ■ 2 til 14 mg/kg s.c. henhv. 100 til 300 mg/kg p.o. Daglig dose for storre pattedyr utgjor 20 til 150 mg s.c. henhv.
1 til 3 g p.o.
Som medisin kan S 31794/F-l tilfores alene eller i passende preparatformer sammen med uorganiske eller organiske, farma-kologisk iridi f er en te hjelpestoffer. For eksempel anvendes S 31794/F-l som bestanddel av en salve, idet konsentrasjonen
i salven kan utgjore ca. 5 til 50 mg virksomt stoff pr. gram salve.
De etterfølgende eksempler skal illustrere utforelsen av fremgangsmåten i henhold til oppfinnelsen.
EKSEMPEL 1 Pyrking_av_NRRL 8095
10 liter av en næringsløsning, som pr. literavmineralisert
vann inneholder 20 g glucose, 5 g caseinpepton, 3 g NåNO^/
lg K2HP04, 0/5 g KCL, 0,5 g MgS04• 7H20 og 10 ml FeS04. 7H20 ble podet med 1 liter av en forkultur av stammen NRRL 8095 og inkubert i et 10 liter gjæringskar under omroring (150 omdreininger pr. minutt) og lufting (1 liter luft/min./liter nærings-løsning) i 4 dogn ved 18°C.
Den som- utgangsmaterial anvendte forkultur erholdes på folgende måte: Den for podingen anvendte spore- og mycel-suspensjon fremstilles fra en kultur av stammen NRRL 8095, som ble dyrket i 10 dogn ved 27°C på agarmedium, som pr. liter avmineralisert vann inneholder 20 g maltekstrakt, 20'^g agar og 4 g gjærekstrakt.
Sporene og mycelet av denne kultur opptas i en physiologisk koksaltlosning. Med denne suspensjon podes 1 liter av en næringsløsning, som pr. liter avmineralisert vann inneholder 20 g maltekstrakt og 4 g gjærekstrakt, og inkuberes i en 2 liters Erlenmeyer-kolbe på en roterende rystemaskin ( .180Omdreininger pr. minutt) i 2 dogn ved 27 oC. Denne dyrkingsbulliong tijener
som podematerial for det 10 liters glass-gjæringskar.
ESKEMPEL 2 ?Y£]5ing_av_NRRL 8095_
For utvinning av S 31794/F-l podes et stål-gjæringskar med
50 liter medium, bestående av 200 g saccharose, 10 g soja-eggehvite, 10 g gjærekstrakt, 10 g maltekstrakt, 2 g KE^PO^
2 g Mg SO^ • 7 H^ O til en liter avmineralisert vann, med 10
liter sekundærforkultur. Gjæringen foregikk i 12 dogn ved 24°C
i et pH område på 5 til 7, en lufttilførsel på 0,8 til 1,0 liter luft/min./liter medium og stigende turtall på 150 - 400 omdreininger pr. minutt.
Den som utgangsmaterial anvendte forkultur fremstilles på folgende måte:
Inkubasjonen av stammen NRRL 8095 i skråågar-ror for utvinning av konidier foregikk i lopet av 19 dogn ved 27°C på et medium som er sammensatt på folgende måte: 100 g sorbit (seksverdig alkohol, hexit), 10 g tripton (pepton fra kasein , fordoyet med tirypsin), 250 mg KH2P04, 250 mg Mg S047H2°/250 mg Ca (N03)2• 4 H20, 125 mg K Cl, 16 mg Fe S047 H20, 7 mg Zn S047 H20, 15 g Agar til en liter avmineralisert vann. For fremstilling av en primær forkultur podes 1 liter forkultur - medium, bestående av 20 g maltekstrakt og 4 g gjærekstrakt til 1 liter avmineralisert vann, i 2 liters Erlenmeyerkolbe med 8-9 10 9 konidier i 10 ml 0,9% NaCl-losning og inkuberes i 4 dogn ved 24°C på en roterende rystemaskin med 180 omdreininger pr. minutt.
For fremstilling av den sekundære forkultur inkuberes 2 liter
av en primær forkultur i glass-gjæringskar med 10 liter for-kulturmedium og inkuberes i 4 dogn ved 24°, 150 omdreininger pr. minutt og en lufttilførsel på 0,5 liter/liter medium/min.
EKSEMPEL 3 ^solering_av_S 31794/F-l
90 liter etter eksempel 1 og 2 erholdt dyringsbulliong tilsettes 90 liter av en blanding av etylacetat og isopropanol (4 : 1) og homogeniseres ved romtemperatur i 30 min. med en ' ultra-hurtig roreinnretning (ultraturrax). Nå fraskilles den organiske fase med separator og ekstrakten inndampes i vakuum ved maksimalt 40°C. Ekstraktresten kromatograferes på den tidobbelte mengde kieselgel (Merck, 0,06 - 0,2 mm). For dette opprettes råekstrakten på den 1-2 dobbelte mengde kieselgel (Merck. 0,2 - 0,5 mm) idet losningen av resten i så lite metanol eller metanol-vannblanding som mulig tilsettes kieselgelen, og losningsmidlet deretter på nytt fjernes i vakuum. Den således impregnerte kieselgel suspenderes i kloroform-metanol (95 : 5) og denm tykke oppslemning påføres kromatograferingskolonnen. Elueringen begynnes med kloroform-metanol (95 : 5) og videre-føres så under i det enkelte tilfelle fordobling av metanol-andelen til 40%. Kromatogramfraksjonen med antifungusaktivitet mot Candida albicans og metaboliter i tynnskiktkromatogram-området av
området av S 31794/F-l forenes.
De således erholdte fraksjoner kromatograferes på den 100-dobbelte mengde sephadeks LH-20 med metanol og fraksjonene forenes på nytt tilsvarende antifungis-aktiviteten og på grunn av den tynnskikt-kromatografiske resultat. Det nå sterkt anrikede antibiotikum kromatograferes på nytt på den 100-dobbelte mengde, kieselgel (Merck: 0,05 - 0,2 mm) hvorved det for eluering anvendes kloroform-metanol-vann (71 : 25 : 4). Fraksjonsrestene undersokes tynnskikt-kromatografisk på innhold av antibiotikum S 31794/F-l og de rene andeler forenes. Substansen loses i litt metanol og helles ved tilsetning av eter, hvorved S 31794-1 erholdes i form av et hvitt, amorft pulver. Etter torking i hoyvakuum ved 25 - 30°C smelter amoroft S 31794/F-l ved 178 - 18o8c, (spalting). Det amorfe stoff krystalliseres fra den 10-dobbelte mengde av blandingen etylacetat (metanol-vann (80 : 12 ; 8) hvorved trådformede krystaller av antibiotikumet S 31794/F-l erholdes. Smeltepunkt 181 - 183°C (spalting) etter torking i hoyvakuum i 20°C.

Claims (4)

1. Fremgangsmåte for fremstilling av S 31794/F-l, karakterisert ved atenS 31794/F-l produserende stamme av sopparten acrophialophora limonispora nov. spee. Dreyfuss + Muller dyrkes på eller i et nærings-medium og her-etter isoleres S 31794/F-l fra g jaer ing sbulliongen og renses på i og for seg kjente måter.
2. Fremgangsmåte som angitt i krav 1, karakterisert ved at det som ny stamme av sopparten Acrophialophora limonispora nov. spee. Dreyfuss + Muller anvendes stammen NRRL 8095.
3. Fremgangsmåte som angitt i krav 2, karakterisert ved at det anvendes en stamme som utvinnes av utgangsstammen av sopparten Acrophialophora limonispora nov. spee. Dreyfuss + Muller ved behandling, med mutagene substanser éLLec stråler eller ved seleksjon.
4. Dyrkingsbulliong, karakterisert ved at den er oppnådd ved dyrking av en S 31794/F-l produserende stamme av sopparten acrophialophora limonispora nov. spee. Dreyfuss + Muller.
NO762267A 1975-07-08 1976-06-30 NO762267L (no)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CH889475 1975-07-08

Publications (1)

Publication Number Publication Date
NO762267L true NO762267L (no) 1977-01-11

Family

ID=4345963

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO762267A NO762267L (no) 1975-07-08 1976-06-30

Country Status (16)

Country Link
JP (1) JPS5210493A (no)
AT (1) ATA492476A (no)
AU (1) AU1564776A (no)
BE (1) BE843845A (no)
DE (1) DE2628965A1 (no)
DK (1) DK292776A (no)
ES (1) ES449582A1 (no)
FI (1) FI761878A (no)
FR (1) FR2316966A1 (no)
IL (1) IL49978A0 (no)
NL (1) NL7607326A (no)
NO (1) NO762267L (no)
NZ (1) NZ181395A (no)
PT (1) PT65328B (no)
SE (1) SE7607472L (no)
ZA (1) ZA764071B (no)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5452797A (en) * 1977-10-04 1979-04-25 Meiji Seika Kaisha Ltd Novel antibiotic substance bn-200, and its preparation
CA1170598A (en) * 1979-12-13 1984-07-10 Bernard J. Abbott Process for the preparation of cyclic peptide nuclei
JPH01227817A (ja) * 1988-03-09 1989-09-12 Kioritz Corp 二サイクル・ユニフロー火花点火機関

Also Published As

Publication number Publication date
DE2628965A1 (de) 1977-01-20
FI761878A (no) 1977-01-09
PT65328A (fr) 1976-08-01
PT65328B (fr) 1978-04-05
NZ181395A (en) 1978-09-25
DK292776A (da) 1977-01-09
AU1564776A (en) 1978-01-12
ZA764071B (en) 1978-02-22
SE7607472L (sv) 1977-01-09
JPS5210493A (en) 1977-01-26
IL49978A0 (en) 1976-09-30
FR2316966A1 (fr) 1977-02-04
ES449582A1 (es) 1977-12-01
BE843845A (fr) 1977-01-06
ATA492476A (de) 1979-05-15
NL7607326A (nl) 1977-01-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5055487A (en) Novel anti-fungal compounds
OKA et al. Terpestacin, a new syncytium formation inhibitor from Arthrinium sp.
US5352800A (en) Process for the production of a novel endothelin antagonist
AU640756B2 (en) 2,8-dioxabicyclo(3,2,1)octane derivatives,their production from cultures of MF 5447 and MF 5466 and their use as anti hyper cholesterolemics
IE49743B1 (en) Antihypercholesteraemic agent,monacolin k,and its preparation
NO753291L (no)
US5132320A (en) Squalene synthetase inhibitors
US3432598A (en) Antibiotic sl 2266
US4952604A (en) Antifungal agent
NO762267L (no)
US5276055A (en) Antibiotic agents
US5801172A (en) Antifungal agent from sporomiella minimoides
US3847742A (en) Process for deacetoxycephalosporin c
WO1982000587A1 (en) New metabolites,processes for their production and their use
Morooka et al. Chemical and Toxicological Studies of the Phytotoxin, 6α, 7 β, 9α-Trihydroxy-8 (14), 15-isopimaradiene-20, 6-γ-lactone, Produced by a Parasitic Fungus, Phomopsis sp., in Wilting Pine Trees
US5597806A (en) Antifungal agents
US5304485A (en) Antibiotic producing microorganism
US5441987A (en) Antifungal agent
GB2261375A (en) Inhibitors of farnesyl protein transferase as anti-cancer agents
US5770587A (en) Antifungal agents
US5236929A (en) Compound uca1064-b
US6521600B1 (en) Compound, WF002, production thereof and use thereof
US5543429A (en) Antifungal agents
US5166217A (en) Antifungal agents
US5686637A (en) Antifungal agent