NO741113L

NO741113L -

Info

Publication number: NO741113L
Application number: NO741113A
Authority: NO
Inventors: Luz A P Da
Original assignee: Luz A P Da
Priority date: 1973-07-02
Filing date: 1974-03-28
Publication date: 1975-01-27
Also published as: GB1438422A; FI90974A; FR2245661A1; CH606011A5; CA1033357A; SE7403907L; DK148074A; NL7405287A; BE815615A; FR2245661B3; DE2411765A1; ZA741317B

Description

Fremgangsmåte for fremstilling av semi-syntetiske cefalosporin-derivater samt nye mellomprodukter som kan brukes for deres fremstilling. Process for the production of semi-synthetic cephalosporin derivatives as well as new intermediates that can be used for their production.

Foreliggende oppfinnelse angår en ny -fremgangsmåte for fremstilling av semi-syntetiske cefalosporin-derivater eller salter med følgende formel: The present invention relates to a new method for the production of semi-synthetic cephalosporin derivatives or salts with the following formula:

hvor R* er et organisk radikal forskjellig fra n-butyl 4~amino-4-karboksylsyre, og som kan inneholde alkyl, aryl» aralkyl eller where R* is an organic radical different from n-butyl 4~amino-4-carboxylic acid, and which may contain alkyl, aryl» aralkyl or

heterosykliske grupper og som videre kan inneholde en eller flere substituenter såsom alkoksyd, hydroksyd eller aminfunksjoner, halogenatomer eller andre; og hvor X representerer et hydrogenatom eller et organisk radikal som kan være hydroksyd, acyloksy, heterosyklooksyd eller et aminresiduum og hvor A kan være hydrogen, eller et alkali eller alkalijordmetall, eller en ammoniumgruppé eventuelt substituert med organiske radikaler. heterocyclic groups and which may further contain one or more substituents such as alkoxide, hydroxide or amine functions, halogen atoms or others; and where X represents a hydrogen atom or an organic radical which can be hydroxide, acyloxy, heterocyclooxide or an amine residue and where A can be hydrogen, or an alkali or alkaline earth metal, or an ammonium group optionally substituted with organic radicals.

Det er videre en hensikt ved foreliggende oppfinnelse å tilveiebringe en fremgangsmåte for fremstilling av nye c-efalo-sporinmell<q>mprodukter som kan brukes for fremstilling av nevnte semi-syntetiske cefalosporin-derivater såvel som fremstilling av andre nye mellomprodukter. It is also a purpose of the present invention to provide a method for the production of new c-cephalosporin intermediates which can be used for the production of said semi-synthetic cephalosporin derivatives as well as the production of other new intermediates.

Semi-syntetiske cefalosporiner utgjør en viktig gruppe antibiotiske stoffer med meget verdifulle egenskaper noe som skyldes at de har et meget bredt spektrum med hensyn til anti-bakteriell virkning, videre har de penicillinaseresistens og i visse tilfelle-også god syreresistens noe som muliggjør en effektiv oral tilførsel. Semi-synthetic cephalosporins form an important group of antibiotic substances with very valuable properties, which is due to the fact that they have a very broad spectrum with regard to antibacterial action, furthermore they have penicillinase resistance and in certain cases - also good acid resistance, which enables an effective oral supply.

Det er i både litteratur og i forskjellige patenter beskrevet mange fremgangsmåter for fremstilling av semi-syntetiske cefalosporiner. Alle disse fremgangsmåter er basert på at man danner en peptidbinding mellom den organiske syre_som utgjør side-.kjeden og et derivat av "cefalosporin-kjernen", d.v.s. en cefalo-sporahinsyre eller eventuelt en modifisert utgave av denne. Spesielt viktig i denne forbindelse er derivater av 7-amin.odesacet-oksycefalosporanirisyre og 7-aminocefalosporaninsyre. Det er meget vanskelig og kostbart å fremstille disse cefaiosporaninsyrer som. utgjør "cefalosporin-kjernen", og som er nødvendig i de klassiske fremgangsmåter for fremstilling av semi-syntetiske cefalosporiner.. 7-aminocefalosporaninsyren fremstilles vanligvis ved enzymatisk eller kjemisk deacylering av et cefalosporin som oppstår ved fermentering, vanligvis cefalosporin C, og alle kjente fremgangsmåter er vanskelig å gjennomføre og gir dårlige utbytter. 7-aminodesacet-oksycefalosporaninsyre fremstilles vanligvis på en annen måte ved at man går ut fra et penicillin eller et 6-aminopenicillansyre-derivat, dette omdannes til et sulfoksyd som ved en utvidelse av tiazolidinringen gir en di-hydrotiazinring, hvorved man har fått en forbindelse i desacetoksycefalosporinserien. Andre cefalo sporaninsyrer, nemlig de som er modifisert i 3-stillingen av kjernen (nomenklatur ifølge Morin, J. Am.Chem.Soc., 84: 3400 (1962)) oppnås vanligvis fra 7-aminocefalosporaninsyre på flere måter. I et hvert tilfelle er det nødvendig ved slutten av de omdannelser som er nevnt ovenfor, å isolere de respektive cefalosporaninsyrer. Many methods for the production of semi-synthetic cephalosporins are described both in the literature and in various patents. All these methods are based on the formation of a peptide bond between the organic acid which forms the side chain and a derivative of the "cephalosporin core", i.e. a cephalo-sporahic acid or possibly a modified version of this. Particularly important in this connection are derivatives of 7-amino-odesacet-oxycephalosporaniric acid and 7-aminocephalosporaninic acid. It is very difficult and expensive to produce these cefaiosporanic acids which. constitutes the "cephalosporin core", and which is necessary in the classic methods for the production of semi-synthetic cephalosporins. The 7-aminocephalosporanic acid is usually produced by enzymatic or chemical deacylation of a cephalosporin that occurs during fermentation, usually cephalosporin C, and all known methods is difficult to implement and yields poor yields. 7-aminodesacet-oxycephalosporanic acid is usually prepared in a different way by starting from a penicillin or a 6-aminopenicillanic acid derivative, this is converted into a sulfoxide which, by expansion of the thiazolidine ring, gives a dihydrothiazine ring, whereby a compound has been obtained in the desacetoxycephalosporin series. Other cephalosporaninic acids, namely those modified in the 3-position of the core (nomenclature according to Morin, J. Am.Chem.Soc., 84: 3400 (1962)) are usually obtained from 7-aminocephalosporaninic acid in several ways. In each case, it is necessary at the end of the conversions mentioned above to isolate the respective cephalosporanic acids.

En slik isolering innbefatter alltid en senkning av,.utbyttet. ' Det er videre vist seg umulig å fremstille en oefalosporaninsyre Such isolation always includes a lowering of the yield. ' It has also proved impossible to produce an oephalosporanic acid

som direkte er akseptabel som utgangsmateriale for semi-syntetiske which is directly acceptable as starting material for semi-synthetics

cefalosporiner. Man har alltid vært nøtt for å innbefatte et rensningstrinn idet man må fjerne urenheter som ellers kunne frembringe skadelige reaksjoner hos pasienter under behandling med cefalosporiner syntetisert fra slike semi-syntetiske cefalosporiner. cephalosporins. It has always been necessary to include a purification step in that one has to remove impurities which could otherwise produce harmful reactions in patients under treatment with cephalosporins synthesized from such semi-synthetic cephalosporins.

, ■ Foreliggende fremgangsmåte unngår nevnte ulemper etter som man nå kan fremstille semi-syntetiske cefalosporinderi-vater uten å bruke 7-aminocefalosporaninsyrer (heri inngår ikke bare den såkalte 7-aminocefalosporaninsyre men også 7-aminodes-acetoksycefalosporaninsyre og andre derivater modifisert i stil-ling 3). Ved å bruke foreliggende fremgangsmåte er det mulig å gå fra cefalosporiner oppnådd direkte ved fermentering eller ved omdannelse av penicilliner, til de forønskede semi-syntetiske cefalosporiner uten en isolering og rensning av de respektive cefalosporaninsyrer." , ■ The present method avoids the aforementioned disadvantages as it is now possible to produce semi-synthetic cephalosporin derivatives without using 7-aminocephalosporanic acids (this includes not only the so-called 7-aminocephalosporanic acid but also 7-aminodes-acetoxycephalosporanic acid and other derivatives modified in position 3). By using the present method, it is possible to go from cephalosporins obtained directly by fermentation or by conversion of penicillins, to the desired semi-synthetic cephalosporins without an isolation and purification of the respective cephalosporanic acids."

Foreliggende fremgangsmåte innbefatter således at man fremstiller som mellomprodukter diacylcefalosporin-derivater med følgende formel: The present method thus includes the preparation as intermediates of diacylcephalosporin derivatives with the following formula:

1 2 1 2

hvor R og X har samme betydning som angitt ovenfor, R er et organisk.radikal som oppstår fra utgangsmaterialet og som kan være Y>n-butyl 4-amino-4-karboksylsyre, fenoksymetyl, 2-pentenyl, pentanyl, heptanyl eller para-hydroksybenzyl, og E er hydrogen eller en beskyttende gruppe for karboksylsyrefunksjonen. where R and X have the same meaning as stated above, R is an organic radical arising from the starting material and which can be Y>n-butyl 4-amino-4-carboxylic acid, phenoxymethyl, 2-pentenyl, pentanyl, heptanyl or para- hydroxybenzyl, and E is hydrogen or a protecting group for the carboxylic acid function.

; Diacylcefalosporin-derivater jned formel (il) er nye forbindelser og som. er meget Verdifulle som mellomprodukter for ; Diacylcephalosporin derivatives of formula (II) are new compounds and which. are very valuable as intermediates for

fremstilling av cefalosporiner. Fremgangsmåten for fremstilling av disse diacylcefalosporin-derivater med formel (il) såvel som fremgangsmåten for deres etterfølgende anvendelse er en del av foreliggende oppfinnelse. manufacture of cephalosporins. The process for producing these diacylcephalosporin derivatives of formula (II) as well as the process for their subsequent use are part of the present invention.

Generelt kan et diacylcefalosporin-derivat med formel (il) fremstilles ved en fremgangsmåte som starter, ut fra et cefalosporin-deriyat med følgende formels In general, a diacylcephalosporin derivative of formula (II) can be prepared by a process starting from a cephalosporin derivative of the following formula

2 2

hvor R og X har samme betydning som angitt ovenfor. where R and X have the same meaning as indicated above.

Disse cefalosporin-derivater med formel (ill) kan fremstilles ved forskjellige fremgangsmåter. Disse fremgangsmåter er f.eks. beskrevet i E.P. Abraham og G.G.F. Newton, advances in Chemotherapy, 2:23, $ M.S. Mannas og A.K. Bose, Synthesis These cephalosporin derivatives of formula (ill) can be prepared by various methods. These methods are e.g. described in E.P. Abraham and G.G.F. Newton, Advances in Chemotherapy, 2:23, $ M.S. Mannas and A.K. Bose, Synthesis

of Penicillin, Cephalosporin C and Analoge, Marcel Dekker, Inc., of Penicillin, Cephalosporin C and Analogues, Marcel Dekker, Inc.,

New York (1969) og R.B.Morin og B.G. Jackson, Fortsehritte Chem. Org. Naturstoffe, 28:3^3 (l970). New York (1969) and R.B. Morin and B.G. Jackson, Continued Chem. Org. Natural Substances, 28:3^3 (l970).

Generelt kan det angis at hvis X er et organisk radikal, så kan cefalosporin-derivater med formel (ill) fremstilles ved fermentering, og et gunstig utgangsmateriale for den foreliggende fremgangsmåte er cefalosporin C, hvor R er et n-butyl 4-amino-4-karboksylsyreradikal med formelen: In general, it can be stated that if X is an organic radical, then cephalosporin derivatives of formula (ill) can be prepared by fermentation, and a favorable starting material for the present method is cephalosporin C, where R is an n-butyl 4-amino-4 -carboxylic acid radical with the formula:

og X er et acetoksydradikal. Videre kan X representere et organisk radikal ført inn i cefalosporinmolekylet på kjent måte ved erstat-ning av acetoksyradikalet. Eksempler på slike radikaler er hydroksyd og pyridylgruppen. Hvis X på den annen side er et hydrogenatom så kan cefalosporinet med formel (ill) fremstilles ved kjemisk eller enzymatisk omdannelse av naturlige cefalosporiner eller ved kjente fremgangsmåter som innbefatter at man utvider tiazolidin- and X is an acetoxide radical. Furthermore, X can represent an organic radical introduced into the cephalosporin molecule in a known manner by replacing the acetoxy radical. Examples of such radicals are hydroxide and the pyridyl group. If, on the other hand, X is a hydrogen atom, then the cephalosporin of formula (ill) can be prepared by chemical or enzymatic conversion of natural cephalosporins or by known methods which include extending thiazolidine-

ringen i det tilsvarende penicillin. Det viktigste eksempel på sistnevnte tilfelle er benzyldesacetoksycefalosporin med formel (ill) hvor R er et radikal med formelen: eller et fenoksymetyldesacetoksycefalosporin med formel (ill) hvor 2 R er et radikal med formelen: the ring in the corresponding penicillin. The most important example of the latter case is a benzyldesacetoxycephalosporin of formula (ill) where R is a radical of the formula: or a phenoxymethyldesacetoxycephalosporin of formula (ill) where 2 R is a radical of the formula:

begge disse cefalosporiner kan brukes som utgangsmateriale for den foreliggende fremgangsmåte. both of these cephalosporins can be used as starting material for the present method.

I et aspekt av foreliggende fremgangsmåte blir cefato-sporin-derivater med formel (ill) omdannet til diacylcefalosporin-derivater med formel (il) ved en acylering på nitrogenatomet i 7-"'acylamidgruppen, Denne omdannelse kan utføres slik det er beskrevet av Cramer og Col. (se F. Cramer og K.O. MumnijBerichte, 48:379 In one aspect of the present process, cefatosporin derivatives of formula (II) are converted to diacylcephalosporin derivatives of formula (II) by acylation on the nitrogen atom of the 7-"' acylamide group. This conversion can be carried out as described by Cramer and Col. (see F. Cramer and K.O. MumnijBerichte, 48:379

(1915) og F. Cramer og K. Baer Berichte, 93:12.32 (1960). Fremgangsmåten har allerede vært anvendt på penicilliner (se I. Busko-Oszczapowicz og J. Cieslak, Roczniki Chemii, 45!lH (l97l)«Mer spesielt kan omdannelsen oppnås ved følgende sekvens av reaksjoner: 1) Beskyttelse av karboksylsyregruppen i et cefalosporin-derivat med formel (ill) med et middel som effektivt beskytter syrefunksjonen under de etterfølgende reaksjonstrinn, men som lett kan fjernes etter at man har utført alle reaksjonene uten å senke cefalosporinaktiviteten. 2) Man omsetter cefalosporin-derivatet med den beskyttede karboksylsyregruppen med et iminohalogenid-dannende middel hvorved man - får fremstilt en beskyttet 7-(acyl-halogenimid)cefalo-sporaninsyre med formelen: (1915) and F. Cramer and K. Baer Berichte, 93:12.32 (1960). The procedure has already been applied to penicillins (see I. Busko-Oszczapowicz and J. Cieslak, Roczniki Chemii, 45!lH (l97l) "More particularly, the conversion can be achieved by the following sequence of reactions: 1) Protection of the carboxylic acid group in a cephalosporin derivative of formula (ill) with an agent which effectively protects the acid function during the subsequent reaction steps, but which can be easily removed after carrying out all the reactions without lowering the cephalosporin activity. 2) The cephalosporin derivative with the protected carboxylic acid group is reacted with an iminohalide-forming agent whereby - a protected 7-(acylhalogenimide)cephalosporanic acid with the formula is produced:

hvor X, R 2og E har samme betydning som angitt ovenfor, og Y representerer et halogenatom. where X, R 2 and E have the same meaning as stated above, and Y represents a halogen atom.

Hvis utgangsmaterialet, d.v.s. cefalosporin-derivatet med formel (ill), i R 2radikalet inneholder reaktive grupper såsom amin eller, karboksylsyrefunksjoner, så må disse beskyttes før iminohalogenid-dannelsen. If the starting material, i.e. the cephalosporin derivative with formula (ill), the R 2 radical contains reactive groups such as amine or carboxylic acid functions, so these must be protected before the iminohalide formation.

3) Man omsetter en forbindelse med formel (Vil) med 3) One reacts a compound with formula (Vil) with

et derivat av en organisk syre med formelen: a derivative of an organic acid with the formula:

Ved denne reaksjon får man fremstilt et diacylcefalosporin-derivat (formel II) med en beskyttet syrefunksjon. This reaction produces a diacylcephalosporin derivative (formula II) with a protected acid function.

Hvis det er ønskelig kan man isolere diacylcefalosporin-derivat et som en fri syre, men det er vanlig at det brukes som et mellomprodukt for syntese av semi-syntetiske cefalosporin-derivatér mens man beholder den beskyttende gruppe på karboksyl-syrefunks jon en. If desired, a diacylcephalosporin derivative can be isolated as a free acid, but it is common for it to be used as an intermediate for the synthesis of semi-synthetic cephalosporin derivatives while retaining the protective group on the carboxylic acid function.

Videre innbefatter foreliggende oppfinnelse en fremgangsmåte for fremstilling av semi-syntetiske céfalosporin-derivater ved åt mari går ut fra mellomprodukter med formel (il), og fremgangsmåter for disses fremstilling ér beskrevet ovenfor. Denne, omdannelse innbefatter følgende reaksjoner: Furthermore, the present invention includes a method for the production of semi-synthetic cephalosporin derivatives starting from intermediates of formula (II), and methods for their production are described above. This transformation includes the following reactions:

k) Eliminering av radikalet k) Elimination of the radical

ved hydrolyse med et selektivt middel som ikke hydrolys erer det innførte radikal og valget av midler vil være avhengig av radikalenes natur. 5) Hydrolyse av den beskyttende gruppe for karboksylsyrefunksjonen, og denne kan utføres ved slutten av foregående reaksjon, hvoretter man utfører en hydrolyse av de beskyttende grupper som måtte finnes på reaktive funksjoner i R^-radikalet hvis slike forefinnes. in the case of hydrolysis with a selective agent that does not hydrolyze the introduced radical and the choice of agents will depend on the nature of the radicals. 5) Hydrolysis of the protective group for the carboxylic acid function, and this can be carried out at the end of the preceding reaction, after which a hydrolysis of the protective groups that may be found on reactive functions in the R^-radical, if any, is carried out.

Man oppnår på denne måten semi-syntetiske cefalosporin-derivater i form av frie syrer, og disse kan isoleres på kjent måte. Det er også mulig hvis dette er ønskelig, å isolere de semi-syntetiske cefalosporin-derivater som et salt ved en reaksjon med et egnet middel. In this way, semi-synthetic cephalosporin derivatives are obtained in the form of free acids, and these can be isolated in a known manner. It is also possible, if desired, to isolate the semi-synthetic cephalosporin derivatives as a salt by reaction with a suitable agent.

Beskyttelsen av karboksylsyrefunksjonen som ble nevnt i forbindelse med første reaksjon i nevnte sekvens, kan utføres ved en forestring eller at man danner et annet stabilt karboksylsyre-derivat såsom et blandet anhydrid eller hydrazin. Det er i alle tilfelle foretrukket å utføre dette med et middel slik at den til-førte beskyttende gruppe lett kan fjernes ved hydrolyse.Det er også mulig å bruke andre beskyttende grupper som lar seg fjerne under milde betingelser som f.eks. ved katalyse. Det er mest hensiktsmessig å bruke midler som ikke forårsaker en isomerisering av dobbeltbindingen i 3-stillingen til 2-stillingen i cefalosporin-kjernen. The protection of the carboxylic acid function that was mentioned in connection with the first reaction in the aforementioned sequence can be carried out by an esterification or by forming another stable carboxylic acid derivative such as a mixed anhydride or hydrazine. In any case, it is preferred to carry out this with an agent so that the added protective group can be easily removed by hydrolysis. It is also possible to use other protective groups which can be removed under mild conditions such as e.g. by catalysis. It is most convenient to use agents which do not cause an isomerization of the double bond in the 3-position to the 2-position of the cephalosporin core.

En forbindelse med følgende formel: A compound with the following formula:

oppnås i dette trinn hvor R 2 o•g X har samme betydning som angitt ovenfor, og E representerer den beskyttende gruppe på karboksylsyre-funks jonen. is obtained in this step where R 2 o•g X has the same meaning as stated above, and E represents the protecting group on the carboxylic acid function.

Eksempler på beskyttende grupper for karboksylsyrefunksjonen som kan brukes i foreliggende fremgangsmåte og som ligger ;innenfor nevnte gruppe av estere, er f.eks. metyl, t-butyl, 2,2,2-trikloretyl, benzhydryl, trifenylmetyl, p-nitrofenyl, 2,4-dinitro-fenyl, benzyl, p-metoksybenzyl, .3» 5-diraetoksybenzyl, 4,4-dimtætoksy- benzyl, fenacyl eller p-bromfenacylgrupper. Videre kan man bruke også andre beskyttende grupper som er kjent ved syntesen av peptider rent generelt og mer spesielt for syntese av. p<->laktamantibiotika. Examples of protective groups for the carboxylic acid function that can be used in the present method and that lie within the aforementioned group of esters are, for example, methyl, t-butyl, 2,2,2-trichloroethyl, benzhydryl, triphenylmethyl, p-nitrophenyl, 2,4-dinitro-phenyl, benzyl, p-methoxybenzyl, .3»5-diiraethoxybenzyl, 4,4-dimethoxy-benzyl , phenacyl or p-bromophenacyl groups. Furthermore, one can also use other protecting groups which are known for the synthesis of peptides in general and more particularly for the synthesis of p<->lactam antibiotics.

Grupper som inneholder et silisiumatom bundet til organiske radikaler såsom trimetylsilyl eller dimetylsilyl og grupper med følgende generelle formel: Groups containing a silicon atom bound to organic radicals such as trimethylsilyl or dimethylsilyl and groups with the following general formula:

34,5 34.5

hvor R , R og R som kan være de samme eller forskjellige, og hyer representerer alkylgrupper med fra 1 til 3 karbonatpmer og hvor where R , R , and R , which may be the same or different, and hyer represent alkyl groups with from 1 to 3 carbonate pm and where

3 4 5 3 4 5

R^ og R har samme betydning som angitt ovenfor, mens R representerer et cefalosporinresiduum med formel (ill), kan også brukes for å beskytte cefalosporinkarboksylsyrefunksjonen under reaksjonen ifølge foreliggende oppfinnelse. R^ and R have the same meaning as stated above, while R represents a cephalosporin residue of formula (ill), can also be used to protect the cephalosporin carboxylic acid function during the reaction according to the present invention.

Innføringen av disse grupper oppnås ved å omsette cefalosporinet med et silisium-halogenderivat eller med et disilazah. The introduction of these groups is achieved by reacting the cephalosporin with a silicon-halogen derivative or with a disilazah.

.Andre,beskyttende grupper som kan brukes i foreliggende fremgangsmåte kan dannes fra organo-tinnderivater, såsom tri-n-butyltinn, trifenyltinn, tri-n-propyltinn, og mer generelt grupper med følgende formel: .Other, protective groups that can be used in the present method can be formed from organotin derivatives, such as tri-n-butyltin, triphenyltin, tri-n-propyltin, and more generally groups with the following formula:

678 678

hvor R , R og R som kan være like eller forskjellige, hver representerer alkylgrupper med fra 1 til 5 karbonatomer eller aryl-grupper. • De således beskyttede cefalosporin-derivater som kan klassifiseres som estere, kan fremstilles ved å omsette céfalo-sporin-derivater med formel (ill) med et tri-substituert tinn-oksyd, et tri-sub.stituert tinn-hydroksyd eller et tri-substituert tinn-halogen-derivat. where R , R , and R , which may be the same or different, each represent alkyl groups having from 1 to 5 carbon atoms or aryl groups. • The thus protected cephalosporin derivatives which can be classified as esters can be prepared by reacting cephalosporin derivatives of formula (II) with a tri-substituted tin oxide, a tri-substituted tin hydroxide or a tri- substituted tin-halogen deriv.

Et eksempel på en karboksylsyrebeskyttende funksjon- grupper som danner et blandet anhydrid, er acetylgruppen. N,N<*>-di-isopropyl-hydrazingruppen er et eksempel på en beskyttende gruppe som danner et hydrazin. Nevnte beskyttende reaksjon er selvsagt ikke nødvendig når det angjeldende cefalosporin er fremstilt i en egnet beskyttet form, noe som kan opptre både ved cefalosporiner fremstilt ved fermentering, og i slike tilfeller vil det være ønskelig, for å lette ekstråksjonen fra mediet at man omdanner cefalosporinet til et forestret derivat, samt cefalosporiner fremstilt ved en utvidelse av penicillinringen. I dette tilfelle er det mulig å bibeholde den samme beskyttende gruppe som brukes for . omdannelsen,hvis den er stabil under de etterfølgende reaksjoner. An example of a carboxylic acid-protecting functional group that forms a mixed anhydride is the acetyl group. The N,N<*>-di-isopropyl-hydrazine group is an example of a protecting group that forms a hydrazine. Said protective reaction is of course not necessary when the cephalosporin in question is produced in a suitable protected form, which can occur both with cephalosporins produced by fermentation, and in such cases it would be desirable, in order to facilitate extraction from the medium, to convert the cephalosporin into an esterified derivative, as well as cephalosporins produced by an expansion of the penicillin ring. In this case it is possible to retain the same protecting group used for . the transformation, if it is stable during the subsequent reactions.

2 2

Hvis radikalet R i de cefalosporin-derivater*man bruker som utgangsmaterialer, inneholder amin eller karboksylsyrefunksjoner noe som f.eks. er tilfelle i cefalosporin C, så bør de beskyttes før de neste reaksjoner. Beskyttelsen av karboksylsyregruppen kan med fordel utføres samtidig som man beskytter karboksylsyregruppen som er bundet til karbonatomet i 4-stillingen i di-hydrotiazinringen og ved hjelp av samme middel. En beskyttelse , av amingruppen kan oppnås på kjent måte.slik det gjøres i peptid-synteser. Eksempler på egnede beskyttende grupper er trifenylmetyl, o-toluensulfonyl, behzylsulfonyl, o-nitro-benzyl-sulfonyl, t-butoksykarbonyl, 2,2,2-trikloretoksykarbonyl, tri-fluoracetyl og formylgrupper foruten andre grupper. If the radical R in the cephalosporin derivatives* used as starting materials, amine or carboxylic acid functions contain something that e.g. is the case in cephalosporin C, then they should be protected before the next reactions. The protection of the carboxylic acid group can advantageously be carried out at the same time as protecting the carboxylic acid group which is bound to the carbon atom in the 4-position of the dihydrothiazine ring and by means of the same agent. A protection of the amine group can be achieved in a known manner, as is done in peptide syntheses. Examples of suitable protecting groups are triphenylmethyl, o-toluenesulfonyl, behzylsulfonyl, o-nitro-benzyl-sulfonyl, t-butoxycarbonyl, 2,2,2-trichloroethoxycarbonyl, trifluoroacetyl and formyl groups besides other groups.

Cefalosporin-derivater med formel (Xl) som oppnås i dette første trinn, kan omdannes til et iminohalogenid med formel (Vil). Denne omdannelse kan oppnås ved en reaksjon med et imin-dannende halogenmiddel såsom et fosforhalogenid, f.eks. fosfor-oksyklorid, fosforpentaklorid eller fosforpéntabromid. Denne omdannelse bør fortrinnsvis utføres i et vannfritt og inert.organisk oppløsningsmiddel, ettersom iminohalogenider generelt er ustabile i nærVær av vann. Passende oppløsningsmidler er f.eks. klorinerte oppløsningsmidler såsom diklormetan, trikloretylen, dikloretan, triklormetan, aromatiske oppløsningsmidler såsom benzen eller toluen, asykliske eller sykliske etere såsom etyleter, isopropyleter og tet rahydr o furan. Cephalosporin derivatives of formula (Xl) obtained in this first step can be converted to an iminohalide of formula (Vil). This conversion can be achieved by reaction with an imine-forming halogen agent such as a phosphorus halide, e.g. phosphorus oxychloride, phosphorus pentachloride or phosphorus pentabromide. This conversion should preferably be carried out in an anhydrous and inert organic solvent, as imino halides are generally unstable in the presence of water. Suitable solvents are e.g. chlorinated solvents such as dichloromethane, trichloroethylene, dichloroethane, trichloromethane, aromatic solvents such as benzene or toluene, acyclic or cyclic ethers such as ethyl ether, isopropyl ether and tetrahydro furan.

Reaksjonen for fremstilling av et iminohalogenid bør fortrinnsvis skje i nærvær av en protonakseptor. Som protonakseptor bør man vanligvis bruke en base som er oppløselig i reaksjons mediet. Som organiske baser kan man bruke tertiære aminer, dimetylanilin, kinolin og pyridin. Denne protonakseptor blir vanligvis tilsatt reaksjonsmediet før man tilsetter nevnte imino-dannende middel. The reaction for producing an iminohalide should preferably take place in the presence of a proton acceptor. A base that is soluble in the reaction medium should usually be used as a proton acceptor. Tertiary amines, dimethylaniline, quinoline and pyridine can be used as organic bases. This proton acceptor is usually added to the reaction medium before said imino-forming agent is added.

Reaksjonen utføres vanligvis ved temperaturer fra +25 til -6o°C, og man oppnår høyere utbytter hvis reaksjonstempe-raturen ligger i området f ra-10 til -45°C. The reaction is usually carried out at temperatures from +25 to -6o°C, and higher yields are obtained if the reaction temperature is in the range from -10 to -45°C.

Det dannede iminohalogenid blir vanibigvis ikke isolert fra reaksjonsmediet ettersom det er en ustabil forbindelse. Acyleringen blir derfor startet umiddelbart ved hjelp av et passende organisk syrederivat (formel Vill), og dette derivat bør fortrinnsvis være et salt med følgende formels The formed iminohalide is usually not isolated from the reaction medium as it is an unstable compound. The acylation is therefore started immediately with the help of a suitable organic acid derivative (formula Vill), and this derivative should preferably be a salt with the following formula

hvor M representerer et jon. Det er kjent at iminohalogenidacy-1eringsreaksjonen vanligvis skjer mer tilfredsstillende når Mr jonet i den organiske syre (Vill) derivatet (XIV) er et metalljon. Mer spesielt kan man bruke litium, kalium eller natrium, skjønt man også kan bruke ikke-alkaliske metallsalter. where M represents an ion. It is known that the iminohalidoacylation reaction usually takes place more satisfactorily when the Mr ion in the organic acid (Vill) derivative (XIV) is a metal ion. More particularly, lithium, potassium or sodium can be used, although non-alkaline metal salts can also be used.

Det organiske R^-radikal er definert ovenfor; Valg av radikal*er selvsagt avhengig av det forønskede produkt. Som eksempler på radikaler som kan brukes i foreliggénde fremgangsmåte kan nevnes a-aminobenzylradikalet hvor amingruppen er beskyttet med et egnet blokerende middel samt dets derivater substituert i benzenringen med en eller flere substituenter valgt fra.gruppen bestående av hydroksyd, alkoksyd, halogen, amin eller karboksylsyre, aminometylsykloheksylradikalet hvor amingruppen er beskyttet, aminometylsykloheksadienylradikalet hvor amingruppen er beskyttet, 2-tienylradikalét eller 2-tienyl-aminometylradikalet med en beskyttet amingruppe. Hvis der i radikalet er et asymmetrisk karbonatom så kan foreliggende fremgangsmåte anvendes på begge rasemiske og optisk aktive former. The organic R 2 radical is defined above; The choice of radical* naturally depends on the desired product. As examples of radicals that can be used in the present method, mention can be made of the α-aminobenzyl radical where the amine group is protected with a suitable blocking agent as well as its derivatives substituted in the benzene ring with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxide, alkoxide, halogen, amine or carboxylic acid , the aminomethylcyclohexyl radical where the amine group is protected, the aminomethylcyclohexadienyl radical where the amine group is protected, the 2-thienyl radical or the 2-thienyl-aminomethyl radical with a protected amine group. If there is an asymmetric carbon atom in the radical, then the present method can be applied to both racemic and optically active forms.

Som aminbeskyttende gruppe kan man bruke følgendes trifenylmetyl, o-toluensulfonyl, benzylsulfonyl, o-nitro-benzyl-sulf onyl, t-butoksykarbonyl, 2,2,2-triklofetoksykarbonyl, trifluor-acetyl,. formyljl-metyl-2-benzoylvinyl, l-metyl-2-acetylvinyl, 1- metyl-2-etoksykarbonylvinyl og andre beskyttende grupper som er kjent i forbindelse med peptider, mer spesielt i forbindelse med syntese av B-laktamantibiotika. En fjerning av disse beskyttende grupper oppnås på kjent måte og kan vanligvis skje på hensiktsmessig måte nær slutten av de reaksjoner som er nevnt ovenfor, i visse tilfelle samtidig som man fjerner nevnte karboksylsyrebeskyttende gruppe. The following triphenylmethyl, o-toluenesulfonyl, benzylsulfonyl, o-nitro-benzyl-sulfonyl, t-butoxycarbonyl, 2,2,2-triclophetoxycarbonyl, trifluoroacetyl, can be used as an amine protecting group. formylmethyl-2-benzoylvinyl, 1-methyl-2-acetylvinyl, 1-methyl-2-ethoxycarbonylvinyl and other protecting groups known in connection with peptides, more particularly in connection with the synthesis of B-lactam antibiotics. A removal of these protecting groups is achieved in a known manner and can usually take place in an appropriate manner near the end of the reactions mentioned above, in certain cases at the same time as removing said carboxylic acid protecting group.

Den acyleringsreaksjon som er nevnt ovenfor kan vanligvis skje i et inert organisk oppløsningsmiddel, i visse tilfelle av samme type som brukt i den foregående reaksjon. Hvis det er ønskelig kan man imidlertid forandre reaks jonsmediet, f. eks. ved konsentrasjon eller fortynning med andre oppløsningsmidler. Vanligvis skjer reaksjonen ved temperaturer fra +50 til -10°C, og den optimale temperatur i hvert enkelt tilfelle er avhengigav reaksjonshastigheten slik at man unngår en dekomponering av cefalo-sporinkjernen når temperaturen stiger. .Det produkt som oppnås fra acyleringen av cefalo-sporiniminohalogenidet er et diacylcefalosporin med formel (il). The acylation reaction mentioned above can usually take place in an inert organic solvent, in some cases of the same type as used in the preceding reaction. If it is desired, however, one can change the reactive ion medium, e.g. by concentration or dilution with other solvents. Usually the reaction takes place at temperatures from +50 to -10°C, and the optimum temperature in each individual case depends on the reaction rate so as to avoid a decomposition of the cephalosporin core when the temperature rises. The product obtained from the acylation of the cephalosporin iminohalide is a diacylcephalosporin of formula (II).

Hvis det er ønskelig kan dette isoleres fra reaksjonsmediet og renses, men ét kan også opprettholdes i oppløsningen og brukes for fremstilling av;de forønskede semi-syntetiske cefalosporiner etter fjerning av ét eventuelt overskudd av reagenser samt biprodukter. 'Denne fjerning kan vanligvis oppnås ved enkel vasking med vann.eller med en fortynnet vandig oppløsning av en mineralsyre samt ved filtrering. If desired, this can be isolated from the reaction medium and purified, but one can also be maintained in the solution and used for the production of the desired semi-synthetic cephalosporins after removal of any excess reagents and by-products. This removal can usually be achieved by simple washing with water or with a dilute aqueous solution of a mineral acid and by filtration.

Fremgangsmåten for fremstilling av semi-syntetiske cefalosporin-derivater fra diacylcefalosporin-derivater med formel (il), består i ålt vesentlig at man elimerer radikalet (IX) ved hydrolyse med et selektivt middel. Valg av middel er avhengig av R og R - radikalene, slik at radikalet (IX) elimineres samtidig. som man. bibeholder radikalet (x). Vanligvis vil dette valg ikke 1 2 The process for the production of semi-synthetic cephalosporin derivatives from diacylcephalosporin derivatives of formula (II) essentially consists of eliminating the radical (IX) by hydrolysis with a selective agent. The choice of agent depends on the R and R - radicals, so that the radical (IX) is eliminated at the same time. as man. retaining the radical (x). Usually this choice will not 1 2

gi særlige vanskeligheter ettersom R og R -radikalene alltid er av forskjellig kjemisk natur. I de fleste tilfelle hvor R 2-radikalet er en benzyl, fenoksymetyl eller 4-amino-4-karboksylsyre-n-butylgruppe, kan fjerningen skje på flere måter som innbefatter oppvarming, reaksjon^med et reduksjonsmiddel, reaksjon med sekun-dære eller primære aminer eller diaminer samt en reaksjon med en tiofenol eller et fenolderivat. Blant egnede aminer og diaminer present particular difficulties as the R and R radicals are always of different chemical nature. In most cases where the R 2 radical is a benzyl, phenoxymethyl or 4-amino-4-carboxylic acid-n-butyl group, the removal can occur in several ways including heating, reaction with a reducing agent, reaction with secondary or primary amines or diamines as well as a reaction with a thiophenol or a phenol derivative. Among suitable amines and diamines

kan nevnes flere aminer med rette kjeder såsom butylamin, pentylamin, heksylamin, heptylamin, oktylamin etc., flere dialkylamino-alkylenaminer såsom f.eks. dimetylaminoetylamin, dimetylamino-propylamin, dimetylaminobutylamin, sykliske aminer såsom syklo-heksy^lamin etc. Av spesiell interesse blant egnede tiofenoler eller fenolderivater er fenoksyder eller tiofenoksyder, eksempler erhatriumtiofenoksyd og kaliumtiofenoksyd. mention can be made of several amines with straight chains such as butylamine, pentylamine, hexylamine, heptylamine, octylamine etc., several dialkylamino-alkyleneamines such as e.g. dimethylaminoethylamine, dimethylaminopropylamine, dimethylaminobutylamine, cyclic amines such as cyclohexylamine etc. Of particular interest among suitable thiophenols or phenol derivatives are phenoxides or thiophenoxides, examples are sodium thiophenoxide and potassium thiophenoxide.

Den ovennevnte elimeringsreaksjon vil i dei;fleste tilfeller skje tilfredsstillende i et reaksjonsmedium som dannes av et inert oppløsningsmiddel, som f.eks. kan være det samme som ble brukt for fremstilling av diacylcefalosporinene. I denne reaksjon kan man bruke andre oppløsningsmidler også såsom dimetylformamid, aceton, metylisobutylketon og etylacetat. The above-mentioned elimination reaction will in most cases take place satisfactorily in a reaction medium formed by an inert solvent, such as e.g. may be the same as was used for the preparation of the diacylcephalosporins. In this reaction, other solvents can also be used, such as dimethylformamide, acetone, methyl isobutyl ketone and ethyl acetate.

De mest egnede temperaturer for denne eliminerings-reaksjon ligger i området fra -20 til +40°C, og i visse tilfelle bruker man romtemperatur eller svak avkjøling for å holde reaksjonsblandingen på temperaturer fra 0 til +25°C. Den angjeldende temperatur må velges for hvert enkelt tilfelle under hensyntagen til at høyere temperaturer øker reaksjonshastigheten' men at man fra en gitt terskel kan frembringe en nedbrytning av cefalospprinet. Det er ønskelig og i visse tilfelle også mulig å få en eliminering av de beskyttende, grupper som eksisterer i cefalosporinmolekylet samtidig som man.eliminerer gruppen med formel. (IX)»Dette kan f . eks. oppnås når den beskyttende gruppe for karboksylsyrefunksjonen er en fenacylgruppe eller et substituert fenacyl og .når man i'nevnte reaksjon bruker et tiofenolat.. Hvis den beskyttende gruppe ikke er eliminert slik det er nevnt ovenfor, så kan man utføre en påfølgende eliminering av begge de beskyttende grupper på karboksyl.syrefunksjonen eller funk-sjonene. Denne eliminering utføres på vanlig kjent måte. The most suitable temperatures for this elimination reaction lie in the range from -20 to +40°C, and in certain cases room temperature or slight cooling is used to keep the reaction mixture at temperatures from 0 to +25°C. The relevant temperature must be chosen for each individual case, taking into account that higher temperatures increase the reaction rate, but that from a given threshold a breakdown of the cephalosprin can be produced. It is desirable and in certain cases also possible to eliminate the protective groups that exist in the cephalosporin molecule at the same time as eliminating the group by formula. (IX)»This can, for example, e.g. is obtained when the protecting group for the carboxylic acid function is a phenacyl group or a substituted phenacyl and when one uses a thiophenolate in said reaction. If the protecting group is not eliminated as mentioned above, then one can carry out a subsequent elimination of both the protective groups on the carboxylic acid function or functions. This elimination is carried out in a commonly known manner.

De fremstilte cefalosporin-derivater kan isoleres på flere måter, f.eks. ved kromatografi, frysetørring, konsentrasjon, • ekstraksjon, forandring av medium, dannelse av, salter eller derivater eller en kombinasjon av to eller flere av disse fremgangsmåter. Man oppnår i alle tilfeller et cefalosporin med formel (i). The produced cephalosporin derivatives can be isolated in several ways, e.g. by chromatography, freeze-drying, concentration, • extraction, change of medium, formation of, salts or derivatives or a combination of two or more of these methods. In all cases, a cephalosporin of formula (i) is obtained.

De følgende eksempler illustrerer oppfinnelsen. The following examples illustrate the invention.

Eksempel 1. Example 1.

Fremstilling av fehacylester av 7-^N- (N'karbobenzyloksy)-D-2'-amino-2'-fenyl-acetyl7-fenylacetamido-3-metyl-3-cefem-4-' karboksylsyre. Preparation of fehacyl ester of 7-^N-(N'carbobenzyloxy)-D-2'-amino-2'-phenyl-acetyl-7-phenylacetamido-3-methyl-3-cephem-4-' carboxylic acid.

; Til en suspensjon av. 7-fenylacetamid-3-metyl-3-cefem-4-karboksylsyre (lOg, 0,030 mol) i 150 ml tørr dimetylformamid ble det raskt tilsatt under omrøring 6,05 g fenacylbromid fulgt av tilsetning av 3,1 g trietylamin. Blandingen ble kokt i 1 time ved 25°C. Blandingen ble helt over i 800 ml iskaldt vann under sterk røring, og ble så ekstrahert med 150 ml etylacetat idet man justerte pH i den vandige fase til 1,5 fer man skilte lagene.. Ekstraksjonen ble gjentatt, og de organiske ekstrakter slått sammen og vasket med 60 ml vann. ; To a suspension of. 7-Phenylacetamide-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid (10g, 0.030 mol) in 150 ml of dry dimethylformamide was quickly added with stirring 6.05 g of phenacyl bromide followed by the addition of 3.1 g of triethylamine. The mixture was boiled for 1 hour at 25°C. The mixture was poured into 800 ml of ice-cold water with vigorous stirring, and was then extracted with 150 ml of ethyl acetate, adjusting the pH of the aqueous phase to 1.5 until the layers were separated. The extraction was repeated, and the organic extracts combined and washed with 60 ml of water.

Det organiske ekstrakt ble tørket med vannfritt natriumsulfat og fordampet til tørrhet i en roterende■fordamper under redusert trykk. The organic extract was dried with anhydrous sodium sulfate and evaporated to dryness in a rotary evaporator under reduced pressure.

Residuumet ble oppløst i 100 inl etanol-fri og tørr kloroform. Under røring ved 25°C ble det tilsatt 9»7 g tørr pyridin. Blandingen ble avkjølt til -5°C og ved denne temperatur ble det tilsatt 6,5 g finmalt fosforpentaklorid. Blandingen ble rørt - il time ved -5°C og vasket raskt og. suksessivt med en 0,IN natrium-karbonatoppløsning, samt en mettet vandig oppløsning av natriumklorid. Blandingen ble så tørket over silisiumdioksydgel og av-helt. Under røring og mens man holdt temperaturen på 30°C ble det tilsatt 9«7 g kalium D-(-N-karbobenzyloksy)aminofenylacetat i løpet av 30 minutter. Røringen ble så fortsatt i 15 timer ved 25°C. The residue was dissolved in 100 inl of ethanol-free and dry chloroform. While stirring at 25°C, 9.7 g of dry pyridine were added. The mixture was cooled to -5°C and at this temperature 6.5 g of finely ground phosphorus pentachloride was added. The mixture was stirred for -1 hour at -5°C and washed rapidly and. successively with a 0.IN sodium carbonate solution, as well as a saturated aqueous solution of sodium chloride. The mixture was then dried over silica gel and completely. While stirring and while maintaining the temperature at 30°C, 9.7 g of potassium D-(-N-carbobenzyloxy)aminophenylacetate were added over the course of 30 minutes. Stirring was then continued for 15 hours at 25°C.

Vaskin ble utført "raskt først med en 0,5N saltsyre-oppløsning og så med en mettet vandig oppløsning av natriumklorid. Oppløsningen ble så tørket over silisiumdioksydgel og konsentrert til h0 ml under redusert trykk. Washing was carried out rapidly first with a 0.5N hydrochloric acid solution and then with a saturated aqueous solution of sodium chloride. The solution was then dried over silica gel and concentrated to 0 ml under reduced pressure.

Den konsentrerte oppløsning ble ført gjennom en kroma-tografikolonne inneholdende 50 g silisiumdioksydgel* Oppløsningen ble eluert méd. en blanding av kloroform og etylacetat (8:2) (<V>/v). Tynnsjiktkromatografi av de eluerte fraksjnner viste at det for-ønskede produkt ble funnet i første fraksjon som så ble oppsamlet. The concentrated solution was passed through a chromatography column containing 50 g of silica gel. The solution was eluted with a mixture of chloroform and ethyl acetate (8:2) (<V>/v). Thin layer chromatography of the eluted fractions showed that the desired product was found in the first fraction which was then collected.

Nevnte fraksjon ble fordampet i en roterende fordamper til nesten tørrhet under redusert trykk, hvoretter det ble oppløst i litt kloroform og utfelt med petroleter. Said fraction was evaporated in a rotary evaporator to near dryness under reduced pressure, after which it was dissolved in a little chloroform and precipitated with petroleum ether.

Det utfelte bunnfall veiet 11,4 g (53$ av det teoretiske). The precipitate weighed 11.4 g (53% of the theoretical).

Elementæranalyse tilsvarende C^QH^^OgN^S: Elemental analysis corresponding to C^QH^^OgN^S:

C '69,93$ H 4,91$ N 5,85$ ., Funnet: C 70,12$ H 5,04$ N 3,73$ C '69.93$ H 4.91$ N 5.85$ ., Found: C 70.12$ H 5.04$ N 3.73$

Eksempel 2.Example 2.

Fremstilling av 2,2,2-trikloretylesteren av 7^N-(N'-2" , 2M-2'»-trikloretoksy-karbonyl)-D-2<1->aminp-2'-fenylacetyl7-fenoksy-acetamid- 3- metyl- 3- cefem- 4- karboksylsyre. Preparation of the 2,2,2-trichloroethyl ester of 7^N-(N'-2", 2M-2'"-trichloroethoxy-carbonyl)-D-2<1->aminop-2'-phenylacetyl-7-phenoxy-acetamide- 3- methyl- 3- cephem- 4- carboxylic acid.

7-fenoksyacetamid-3-metyl-3-cefem-4-karboksylsyre (10,44 g, 0,030 mol) ble suspendert i 250 ml metylenklorid. Under røring ble det tilsatt en suspensjon av 3,6 g pyridinhydroklorid 7-Phenoxyacetamide-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid (10.44 g, 0.030 mol) was suspended in 250 mL of methylene chloride. A suspension of 3.6 g of pyridine hydrochloride was added while stirring

i 20 ml ffietylenklorid. Røring ble fortsatt i 5 minutter samtidig in 20 ml of ethylene chloride. Stirring was continued for 5 minutes at a time

som man dråpevis tilsatte 4,55 g 2,2,2-trikloretanol i 15 ml metylenklorid. Etter at tilsetningen var ferdig ble oppløsningen raskt av-kjølt til 15°C, og ved denne temperatur ble det tilsatt to which 4.55 g of 2,2,2-trichloroethanol in 15 ml of methylene chloride were added dropwise. After the addition was finished, the solution was quickly cooled to 15°C, and at this temperature it was added

6,2 g disykloheksylkarbodiimid i 30 ml metylenklorid. Røring ble i fortsatt i 15 timer ved 15°C og uoppløselig reaksjonsbiprodukter :~---~ r ble frafiltrert. Filtratet ble fordampet til tørrhet under redusert trykk i en roterende fordamper. Det faste residuum ble opp-;løst i etylacetat og vasket suksessivt med en vandig 6,IN saltsyre-oppløsning dg så "med en vandig 5$ natriumbikarbonatoppløsning. 6.2 g of dicyclohexylcarbodiimide in 30 ml of methylene chloride. Stirring was continued for 15 hours at 15°C and insoluble reaction by-products were filtered off. The filtrate was evaporated to dryness under reduced pressure in a rotary evaporator. The solid residue was dissolved in ethyl acetate and washed successively with an aqueous 6.N hydrochloric acid solution and then with an aqueous 5N sodium bicarbonate solution.

Oppløsningen ble tørket over silisiumdioksydgel og så fordampet The solution was dried over silica gel and then evaporated

til tørrhet under redusert trykk i en roterende fordamper. to dryness under reduced pressure in a rotary evaporator.

Det faste residuum ble oppløst i 100 ml tørr benken The solid residue was dissolved in 100 ml of dry bench

og avkjølt til 0°C. Etter røring i 48 timer teéd temperaturer mellom 0 og- +5 oC fikk man et fast residium som ble utskilt fra oppløsningen ved filtrering og kastet etter å hg, blitt identifi- and cooled to 0°C. After stirring for 48 hours at temperatures between 0 and - +5 oC, a solid residue was obtained which was separated from the solution by filtration and discarded after hg, was identified

sert som urenheter. regarded as impurities.

Filtratet ble avkjølt til 0°C og tilsatt 10,8 ml tørr pyridin. Blandingen ble så avkjølt til -2°C og man tilsatte en oppløsning av 7,6 g fosforpentaklorid i 70 ml tørr benzen samtidig som.temperaturen ble holdt under 0°C. Ved samme temperatur ble røringen fortsatt i 2 timer, og uoppløselige urenheter ble frafiltrert. Blandingen ble vasket raskt og suksessivt med en vandig oppløsning mettet med natriumklorid, en vandig 5$ natriumbikarbonat-oppløsning og så med vann, hvoretter den ble tørket over natrium- The filtrate was cooled to 0°C and 10.8 ml of dry pyridine was added. The mixture was then cooled to -2°C and a solution of 7.6 g of phosphorus pentachloride in 70 ml of dry benzene was added while the temperature was kept below 0°C. At the same temperature, stirring was continued for 2 hours, and insoluble impurities were filtered off. The mixture was washed rapidly and successively with an aqueous solution saturated with sodium chloride, an aqueous 5% sodium bicarbonate solution and then with water, after which it was dried over sodium

sulfat.... sulfate...

Den tørr benzenoppløsningen ble helt over i én kolbe og under røring ved 25°C langsomt tilsatt kalium D-(N-2'2,2t<->tfikloretoksykarbonyl)-2-aminofenylacetat. Det hele ble holdt på 50°C i 1 time og så langsomt avkjølt til romtemperatur. Etter 15 timer ble uoppløselige urenheter frafiltrert, mens filtratet ble konsentrert under redusert trykk i en roterende fordamper til et volum på 60 ml. The dry benzene solution was poured into one flask and, while stirring at 25°C, potassium D-(N-2'2,2t<->tfichloroethoxycarbonyl)-2-aminophenylacetate was slowly added. The whole thing was kept at 50°C for 1 hour and then slowly cooled to room temperature. After 15 hours, insoluble impurities were filtered off, while the filtrate was concentrated under reduced pressure in a rotary evaporator to a volume of 60 ml.

Den konsentrerte oppløsning ble ført gjennom en kroma-tografikolonne inneholdende 50 g silisiumdioksydgel. Det ble så utført en eluering med en blanding bestående av benzen og etylacetat (9:l) (V/v). Tynnsjiktkromatografi av eluatene viste at det forønskede produkt ble funnet i de første fraksjoner. The concentrated solution was passed through a chromatography column containing 50 g of silica gel. An elution was then carried out with a mixture consisting of benzene and ethyl acetate (9:1) (V/v). Thin layer chromatography of the eluates showed that the desired product was found in the first fractions.

De første fraksjoner ble så fordampet nesten til tørr-het i en roterende fordamper og ble så behandlet med en mindre mengde etyleter som fremmet utkrystalliseringen. Krystallene ble frafiltrert bg vasket med en mindre mengde etyleter. The first fractions were then evaporated almost to dryness in a rotary evaporator and then treated with a small amount of ethyl ether which promoted the crystallization. The crystals were filtered off bg washed with a small amount of ethyl ether.

De dannede krystaller veide 10,8 g (46$ av det teoretiske). ,. The crystals formed weighed 10.8 g (46% of the theoretical). ,.

Elementæranalyse tilsvarende Cg^Hg^OgN^S Cl^ C44,19$ H 3,20$ N 5,33$ Elemental analysis corresponding to Cg^Hg^OgN^S Cl^ C44.19$ H 3.20$ N 5.33$

Funnet: C44,27$. H 3,30$ N 5,36$. Found: C44.27$. H $3.30 N $5.36.

Eksempel 3. Example 3.

Fremstilling av dibenzhydrylesteren av 7-/N-(tiofen-2"-acetyl)-D-5,-(N-2'•',2!,,j2" ,-trikloretoksykarbonyl)-amino-5*-karboksyl-yaleramidoj5-?acetoksymetyl-3-cef em-4^-karboksylsyre. Preparation of the dibenzhydryl ester of 7-[N-(thiophene-2"-acetyl)-D-5,-(N-2'•',2!,,j2" ,-trichloroethoxycarbonyl)-amino-5*-carboxyl-yaleramidoj5 -?acetoxymethyl-3-cef em-4^-carboxylic acid.

Natrium 7-(Dt5<1>-amino-5'-karboksyvaleramido)-3-acetoksy-metyl-3-cefem-4-karboksylat (17,5 St 0,030 mol) ble suspendert i 250 ml vannfri metanol. Under røring ble det dråpevis tilsatt 57,5 ml metanolisk oppløsning av 1,5N hydrogenklorid under en vannfri atmosfære og under avkjøling slik at temperaturen holdt seg på 25°C. Réaksjonsblahdingen ble fordampet til tørrhet under redusert trykk. Residuumet ble oppløst i 350 ml tørr dimetylformamid og i løpet av 20 minutter ble 34 g difenyldiazometan tilsatt under røring ved 20°C. Etter at tilsetningen var ferdig ble blandingen fordampet under redusert trykk, residuumet ble behandlet med en mindre mengde etylalkohol og fordampet hvorved man fikk et Sodium 7-(Dt5<1>-amino-5'-carboxyvaleramido)-3-acetoxy-methyl-3-cephem-4-carboxylate (17.5 St 0.030 mol) was suspended in 250 ml of anhydrous methanol. While stirring, 57.5 ml of methanolic solution of 1.5N hydrogen chloride was added dropwise under an anhydrous atmosphere and during cooling so that the temperature remained at 25°C. The reaction mixture was evaporated to dryness under reduced pressure. The residue was dissolved in 350 ml of dry dimethylformamide and during 20 minutes 34 g of diphenyldiazomethane were added with stirring at 20°C. After the addition was complete, the mixture was evaporated under reduced pressure, the residue was treated with a small amount of ethyl alcohol and evaporated to give a

blekt gult skum. pale yellow foam.

Nevnteskum,ble oppløst i 60 ml tetrahydrofuran. Said foam was dissolved in 60 ml of tetrahydrofuran.

Oppløsningen bie avkjølt til -5°C og langsomt tilsatt en oppløs-ning av 8,5 g 2j2,2-trikloretylklorformat i 40 ml dioksan. Etter The solution was cooled to -5°C and a solution of 8.5 g of 2,2-trichloroethylchloroformate in 40 ml of dioxane was slowly added. After

1 time ved -5°C ble oppløsningen vasket suksessivt med en vandig 1 hour at -5°C, the solution was washed successively with an aq

5$ natriumbikarbonatoppløsning, en vandig 5$ saltsyreoppløsning og 5$ sodium bicarbonate solution, an aqueous 5$ hydrochloric acid solution and

med vann inntil man fikk nøytralitet. Den vaskede organiske fase ble tørket over vannfritt natriumsulfat og fordampet til tørrhet. WJ tD€ft resulterende viskøse ol jeaktige residuum ble oppløst i 600 ml ' with water until neutrality was achieved. The washed organic phase was dried over anhydrous sodium sulfate and evaporated to dryness. WJ tD€ft resulting viscous oily residue was dissolved in 600 ml '

tørr benzen. 25 ml vannfri pyridin ble så tilsatt. Den fremstilte blanding ble avkjølt til -20°C og under en inert og Vannfri atmosfære' ble det i løpet av 15 minutter tilsatt en oppløsning av 15,6g dry benzene. 25 ml of anhydrous pyridine was then added. The prepared mixture was cooled to -20°C and under an inert and water-free atmosphere a solution of 15.6g was added within 15 minutes

fosforpentaklorid i 200 ml tørr benzen. Man lot temperaturen stige riT.^,.^-,„.. 0 , til -12 C og holdt temperaturen på denne verdi i 1 time. De uopp-løselige urenngter ble så frafiltrert. Benzenoppløsningen ble vasket raskt og suksessivt med en vandig oppløsning mettet méd phosphorus pentachloride in 200 ml of dry benzene. The temperature was allowed to rise riT.^,.^-,„.. 0 , to -12 C and the temperature was kept at this value for 1 hour. The insoluble impurities were then filtered off. The benzene solution was washed rapidly and successively with an aqueous solution saturated with

natriumkiorid, en vandig 5$ natriumbikarbonatoppløsning og ble så vasket ytterligere med en mettet vandig oppløsning av natriumkiorid og så tørket over silisiumdioksydgel. sodium chloride, an aqueous 5% sodium bicarbonate solution and was then further washed with a saturated aqueous solution of sodium chloride and then dried over silica gel.

?Deh fremstilte oppløsning ble tilsatt 4,5 g kalium-tiofen-2-acetat under røring og ved 30°C. Den ble så rørt i 15 timer ved samme:temperatur og vasket suksessivt med' snnvandig 0,5N' saltsyreoppløsning, vandig 5$ natriumbikarbonatoppløsning og en vandig oppløsning mettet med natriumkiorid. Reaksjonsblandingen ble så tørket over silisiumdioksydgel og konsentrert under redusert trykk til et volum på 100 ml. 4.5 g of potassium thiophene-2-acetate were added to the solution prepared with stirring and at 30°C. It was then stirred for 15 hours at the same temperature and washed successively with aqueous 0.5N hydrochloric acid solution, aqueous 5N sodium bicarbonate solution and an aqueous solution saturated with sodium chloride. The reaction mixture was then dried over silica gel and concentrated under reduced pressure to a volume of 100 ml.

Den konsentrerte oppløsning ble ført gjennom en kro-mat ografikolonne inneholdende 50 g silisiumdioksydgel. Det ble utført en elueririg med en blanding av benzen og etylacetat (9:l) The concentrated solution was passed through a chromatography column containing 50 g of silica gel. An elution run was carried out with a mixture of benzene and ethyl acetate (9:1)

(V/v).. Tynnsjiktkromatografi av de eluerte fraksjoner viste at det forønskede produkt ble funnet i første fraksjon. 1 Nevnte fraksjon ble fordampet i en roterende fordamper inntil man fikk et lite volum og krystallisering begynte ved avkjøling./•Krystallene ble oppsamlet ved filtrering og vasket med iskald benzen. (V/v).. Thin layer chromatography of the eluted fractions showed that the desired product was found in the first fraction. 1 Said fraction was evaporated in a rotary evaporator until a small volume was obtained and crystallization began on cooling./•The crystals were collected by filtration and washed with ice-cold benzene.

De dannede krystaller veide 8,7 g (28,0$ av det teoretiske),. The crystals formed weighed 8.7 g ($28.0 of the theoretical).

Elementæranalyse tilsvarende C^^H^^O^^N^SgCl^: Elemental analysis corresponding to C^^H^^O^^N^SgCl^:

G 58,48$ H 4,43$ N 4,01$ G $58.48 H $4.43 N $4.01

Funnet: C 58,00$ H 4,53$ N 4,12$ Found: C 58.00$ H 4.53$ N 4.12$

Eksempel 4, Example 4,

Fremstilling av 7^N- (NJ - trif enylmetyl)-D-2 • -amino-2 ' -f enyl-acetyl7- fenylacetamido- 3- metyl- 3- cefem- 4- karboksylsyre. Preparation of 7^N-(NJ-triphenylmethyl)-D-2•-amino-2'-phenyl-acetyl-7-phenylacetamido-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid.

10 g (0,030 mol) 7-fenylacetåmido-3-metyl-3-cefem-4-karboksylsyre ble utrørt med 50 ml vannfri metylenklorid. 3,8 ml dimetylanilin og 4,25 ml trietylamin ble tilsatt. Under røring 10 g (0.030 mol) of 7-phenylacetamido-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid was stirred with 50 ml of anhydrous methylene chloride. 3.8 ml of dimethylaniline and 4.25 ml of triethylamine were added. Under stirring

og avkjøling samtidig som temperaturen ble holdt mellom 18 og 22°C ble det tilsatt 7,2 ml dimetyldiklorsilan. Røringen ble fortsatt i 40 minutter Ved 20°C. Blandingen ble så avkjølt til -60°C i løpet av 15 minutter, hvoretter man tilsatte en oppløsning av 6,5 S fosforpentaklorid i 80 ml metylenklorid. Man lot så temperaturen stige til -40°C og tilsatte 12,5 ml dimetylformamid, Røringen ble så fortsatt i 2 timer ved -40°C. and cooling while keeping the temperature between 18 and 22°C, 7.2 ml of dimethyldichlorosilane was added. Stirring was continued for 40 minutes at 20°C. The mixture was then cooled to -60°C over 15 minutes, after which a solution of 6.5 S phosphorus pentachloride in 80 ml of methylene chloride was added. The temperature was then allowed to rise to -40°C and 12.5 ml of dimethylformamide was added. Stirring was then continued for 2 hours at -40°C.

Etter oppvarming til +30°C foretok man en rask tilsetning av 14,8 g kalium D-N-trifenylmetyl-2-fenyl-2-aminoacetat. Oppløsningen ble holdt på +40°C i 30 minutter, og så avkjølt til +25 o C og rørt ved denne temperatur i 4 1 timer. Uoppløselige'urenheter ble frafiltrert og man tilsatte 50 ml vann. " Blandingen av de to faser ble,rørt i 1 time samtidig som man tilsatte en mettet oppløsning av natriumbikarbonat slik at mari fikk en pH på 3,5.' Det organiske lag ble utskilt, og det vandige lag ekstrahert to ganger med metylenklorid. De organiske ekstrakter ble tilsatt det utskilte organiske låg. De samlede organiske lag ble vasket med en mettet vandig oppløsning av natriumkiorid og så tørket ©ver vannfritt magnesiumsulfat. De ble så konsentrert under redusert trykk i en roterende fordamper til et volum på 60 ml. After heating to +30°C, a rapid addition of 14.8 g of potassium D-N-triphenylmethyl-2-phenyl-2-aminoacetate was made. The solution was kept at +40°C for 30 minutes, and then cooled to +25°C and stirred at this temperature for 41 hours. Insoluble impurities were filtered off and 50 ml of water was added. The mixture of the two phases was stirred for 1 hour while a saturated solution of sodium bicarbonate was added so that the mixture obtained a pH of 3.5. The organic layer was separated, and the aqueous layer was extracted twice with methylene chloride. The organic extracts were added to the separated organic layer. The combined organic layers were washed with a saturated aqueous solution of sodium chloride and then dried over anhydrous magnesium sulfate. They were then concentrated under reduced pressure in a rotary evaporator to a volume of 60 ml.

Den konsentrerte oppløsning ble ført gjennom én kro-matografikolonne inneholdende 45 g silisiumdioksydgel. Eluering med en blanding av metylenklorid og etylacetat (2:l) (<V>/v) ble så utført. Tynnsjiktkromatografi av de eluerte fraksjoner, viste The concentrated solution was passed through one chromatography column containing 45 g of silica gel. Elution with a mixture of methylene chloride and ethyl acetate (2:1) (<V>/v) was then carried out. Thin layer chromatography of the eluted fractions, showed

at det forønskede produkt ble funnet i første fraksjon. that the desired product was found in the first fraction.

Produktet ble innvunnet fra den eluerte oppløsning ved frysetørring, og de faste stoffer oppnådd på denne måten veide 7,8 g (37$ av det teoretiske). The product was recovered from the eluted solution by freeze-drying, and the solids thus obtained weighed 7.8 g (37% of theory).

.Elementæranalyse tilsvarende C^^ L^ O,-N^S: .Elementary analysis corresponding to C^^ L^ O,-N^S:

<;>C 72,96$ H 5,27$ N 5,94$ <;>C $72.96 H $5.27 N $5.94

Funnet» C 73,^$ H 5,34$ N 6,00$. : , Found» C 73.^$ H 5.34$ N 6.00$. : ,

Eksempel 5. Example 5.

Fremstilling av p-nitrobenizylesteren av 7-/N- (N1 -2", 2n , 2rt-tri-kloretoksykarbonyl)D*2 »-fenyl-2•-amino-acetyl7-fenoksyacetamid-3- cefem- 4- karboksylsyre. Preparation of the p-nitrobenizyl ester of 7-/N-(N1-2", 2n, 2rt-tri-chloroethoxycarbonyl)D*2»-phenyl-2•-amino-acetyl7-phenoxyacetamide-3-cephem-4-carboxylic acid.

10,44 g (0,030 mol) 7-fenoksyacetamido-3-metyl-3-cefem-4-karbdksylsyre ble suspendert i 100 ml tørr dimetylformamid. , Under røring tilsatte man 6,9 g p-nitrobenzylbromid og 4,2 ml trietylamin. Blandingen ble rørt. i 15 timer ved 30°C. Man tilsatte deretter 300 ml etylacetat, vasket det hele med vandig natriumbikarbonåtoppiøsning og fire ganger med vann. Blandingen ble så tørket over silisiumdioksydgel og fordampet til tørrhet under redusert trykk i en roterende fordamper. Man oppnådde et amorft gult fast stoff som ble oppløst i 100 ml etylacetat. Den oppnådde oppløsningen ble vasket to ganger med vann, tørket over silisiumdioksydgel og videre fordampet til tørrhet under redusert trykk". Det oppnådde faste stoff ble behandlet med en mindre mengde etyleter. Etyleterén ble utskilt ved filtrering, og en gjenværende mengde ble fordampet under redusert trykk. 10.44 g (0.030 mol) of 7-phenoxyacetamido-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid was suspended in 100 ml of dry dimethylformamide. , While stirring, 6.9 g of p-nitrobenzyl bromide and 4.2 ml of triethylamine were added. The mixture was stirred. for 15 hours at 30°C. 300 ml of ethyl acetate were then added, the whole was washed with aqueous sodium bicarbonate solution and four times with water. The mixture was then dried over silica gel and evaporated to dryness under reduced pressure in a rotary evaporator. An amorphous yellow solid was obtained which was dissolved in 100 ml of ethyl acetate. The obtained solution was washed twice with water, dried over silica gel and further evaporated to dryness under reduced pressure". The obtained solid was treated with a small amount of ethyl ether. The ethyl ether was separated by filtration, and a remaining amount was evaporated under reduced pressure .

Det resulterende krystallinske faste stoff ble oppløst 1 100 ml alkoholfri og tørr kloroform. Man tilsatte 10,2 ml tørr pyridin under avkjøling til -20°C. I løpet av 15 minutter ble så 7,95 g finmalt fosforpentaklorid tilsatt. Røring ble fortsatt i 2 timer ved -20°C.. De faste urenheter ble frafiltrert, vasket raskt og suksessivt med.en mettet vandig oppløsning av natriumkiorid, vandig 5$ natriumbikarbonåtoppiøsning og videre med en mettet vandig oppløsning av natriumkiorid. Oppløsningen ble så tørket over silisiumdioksydgel, The resulting crystalline solid was dissolved in 1100 ml of alcohol-free and dry chloroform. 10.2 ml of dry pyridine were added while cooling to -20°C. During 15 minutes, 7.95 g of finely ground phosphorus pentachloride was then added. Stirring was continued for 2 hours at -20°C. The solid impurities were filtered off, washed rapidly and successively with a saturated aqueous solution of sodium chloride, aqueous 5% sodium bicarbonate solution and further with a saturated aqueous solution of sodium chloride. The solution was then dried over silica gel,

12,4 g kalium N-(2',2<f>,2'-trikbretoksykarbonyl)-2-fenyl-2-aminoracetat ble tilsatt ved romtemperatur. Oppløsningen ble oppvarmet til 45°C og rørt i 1 time. Den ble så avkjølt og vasket med vandig IN saltsyreoppløsning og en vandig 5$ natrium-bikarbonåtoppiøsning. Den ble så tørket over silisiumdioksydgel, de uoppløselige urenheter ble fjernet ved filtrering sammen med nevnte silisiumdioksydgel. Oppløsningen ble så konsentrert under 12.4 g of potassium N-(2',2<f>,2'-tribrethoxycarbonyl)-2-phenyl-2-aminoacetate was added at room temperature. The solution was heated to 45°C and stirred for 1 hour. It was then cooled and washed with aqueous 1N hydrochloric acid solution and an aqueous 5% sodium bicarbonate solution. It was then dried over silica gel, the insoluble impurities were removed by filtration together with said silica gel. The solution was then concentrated under

redusert trykk på et volum på 40 ml. reduced pressure on a volume of 40 ml.

Den konsentrerte oppløsning ble ført gjennom en kromatografisk kolonne inneholdende 50 g silisiumdioksydgel. Det ble så utført, en eluering med en blanding av benzen og etylacetat (9»l) The concentrated solution was passed through a chromatographic column containing 50 g of silica gel. It was then carried out, an elution with a mixture of benzene and ethyl acetate (9»l)

(<V>/v). Tynnsjiktkromatografi av de eluerte fraksjoner viste at det*5forønskede produkt ble funnet i de første fraksjonene. (<V>/v). Thin layer chromatography of the eluted fractions showed that the desired product was found in the first fractions.

Produktet ble innvunnet fra den eluerte oppløsningen ved frysetørking, og man fikk i alt 7»3g (33$ av det teoretiske). The product was recovered from the eluted solution by freeze-drying, and a total of 7.3g (33$ of the theoretical) was obtained.

Elementæranalyse tilsvarende C^H^<O>^<qN>^<S>^3 Elemental analysis corresponding to C^H^<O>^<qN>^<S>^3

C. 51,56$ H3,69$ -N 7,07$ C. 51.56$ H3.69$ -N 7.07$

Funnet» C 51,15$ H 3,55$ N 7,11$ Found» C 51.15$ H 3.55$ N 7.11$

Eksempel 6..... Fremstilling av 7-(N-karbobenzyloksy)-2.'-amino-2 '-f enylacetamido-3- metyl- 3- cefem- 4- karboksylsyre. Example 6..... Preparation of 7-(N-carbobenzyloxy)-2,'-amino-2'-phenylacetamido-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid.

Fenacylesteren av 7-^N-(N,-karhobenzyloksy)-2' - amino-2•-fenylacétyl7-fenylacetamido-3-metyl-3-cefem-4-karboksylsyre (10,8 g, 0,015 mol) ble suspendert i 40 ml dimetylformamid. Under røring ved romtemperatur ble det så tilsatt en oppløsning av 3,95 S natriumtiofenoksyd i 15 ml dimetylformamid. Røring ble fortsatt i 1 time ved 20°C. Blandingen ble så ekstrahert med 0,IN natriumkarbonatoppløsning. Ekstraktet ble surgjort til pH 2 med saltsyre og igjen ekstrahert med fire 50 ml porsjoner av etylacetat. Ekstraktet ble tørket over silisiumdioksydgel og konsentrert under redusert trykk til et volum på 25 ml. Ved tilsetning av etyleter og ved avkjøling fikk man utfelt et hvitt fast stoff som ble fraskilt ved filtrering. The phenacyl ester of 7-^N-(N,-carbobenzyloxy)-2'-amino-2•-phenylacetyl-7-phenylacetamido-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid (10.8 g, 0.015 mol) was suspended in 40 ml of dimethylformamide. With stirring at room temperature, a solution of 3.95 S sodium thiophenoxide in 15 ml of dimethylformamide was then added. Stirring was continued for 1 hour at 20°C. The mixture was then extracted with 0.1N sodium carbonate solution. The extract was acidified to pH 2 with hydrochloric acid and again extracted with four 50 ml portions of ethyl acetate. The extract was dried over silica gel and concentrated under reduced pressure to a volume of 25 ml. On addition of ethyl ether and on cooling, a white solid was precipitated which was separated by filtration.

Det oppnådde produkt veide 3,5 g (48,5$ av det teoretiske) . • The product obtained weighed 3.5 g ($48.5 of the theoretical). •

Elementæranalyse tilsvarende<G>^H<g>^O^N^<S>t Elemental analysis corresponding to<G>^H<g>^O^N^<S>t

/ 0.59,86$ H 4,81$ N 8,73$ / 0.59.86$ H 4.81$ N 8.73$

Funnet: C 59,70$ H 4,68$ N 8,67$ Found: C 59.70$ H 4.68$ N 8.67$

Eksempel 7. Example 7.

Fremstilling av 2,2,2-trikloretylesteren av 7-N-(N»-2n,2%2"-triklpretoksykarbonyl)-D-2'-amino-2,-fenylacetamido-3-métyl-3-cefem- 4- karboksylsyre. Preparation of the 2,2,2-trichloroethyl ester of 7-N-(N»-2n,2%2"-triclprethoxycarbonyl)-D-2'-amino-2,-phenylacetamido-3-methyl-3-cephem-4- carboxylic acid.

. 2,2,2rtrikloretylesteren av 7-^N-(N•-2",2",2"-tri-kloretoksykarbonyl)-D-2'-amino-2•-fenylacétamido7-fenoksyacet-åmido-3-metylr3-cefem-4-karboksylsyre (7,88 g, 0,010 mol) ble . The 2,2,2-trichloroethyl ester of 7-^N-(N•-2",2",2"-trichloroethoxycarbonyl)-D-2'-amino-2•-phenylacetamido7-phenoxyacetamido-3-methyl-3-cephem -4-carboxylic acid (7.88 g, 0.010 mol) was

suspendert i 200 ml tørr benzen. Suspensjonen ble under røring og ved 25°C dråpevis tilsatt 1,26 ml sykloheksylamin. Røringen ble fortsatt i 1 time ved 25°C. Blandingen ble vasket med en vandig 0,1N saltsyreoppløsning og så med en mettet vandig oppløsning av natriumkiorid. Oppløsningen ble så tørket over vannfritt magnesiumsulfat og filtrert. Den ble konsentrert i en roterende fordamper under redusert trykk til et volum på 50 ml. suspended in 200 ml of dry benzene. 1.26 ml of cyclohexylamine was added dropwise to the suspension while stirring and at 25°C. Stirring was continued for 1 hour at 25°C. The mixture was washed with an aqueous 0.1N hydrochloric acid solution and then with a saturated aqueous solution of sodium chloride. The solution was then dried over anhydrous magnesium sulfate and filtered. It was concentrated in a rotary evaporator under reduced pressure to a volume of 50 ml.

Den konsentrerte oppløsning ble ført gjennom en kromatografisk kolonne inneholdende 40 g silisiumdioksydgel. Det ble så utført en eluering med en blanding av benzen og etylacetat.(9»1) The concentrated solution was passed through a chromatographic column containing 40 g of silica gel. An elution was then carried out with a mixture of benzene and ethyl acetate.(9»1)

(v/v). Tynnsjiktkromatografi av fraksjonene viste at det for-ønskede produkt ble funnet i de første fraksjoner. (v/v). Thin layer chromatography of the fractions showed that the desired product was found in the first fractions.

Produktet ble innvunnet fra de eluerte oppløsninger ved frysetørking, og det faste stoff veide 2,lg. (32$ av det teoretiske) . The product was recovered from the eluted solutions by freeze-drying, and the solid weighed 2.lg. (32$ of the theoretical) .

Elementæranalyse tilsvarende Cg^H^O^N^S Clg Elemental analysis corresponding to Cg^H^O^N^S Clg

C 38,56$ H 2,93$ N 6,42$ C $38.56 H $2.93 N $6.42

Funnet» C 38,61$ H 3,H$ N 6,36$ Found» C 38.61$ H 3.H$ N 6.36$

Eksempel 8.Example 8.

Fremstilling av natrium 7-N-tiof en-2 *-acetamido-3-acetoksymetyl-3- cefem- 4- karboksvlsyre.. Preparation of sodium 7-N-thiophene-2*-acetamido-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylic acid..

14,7 g (0,0l4 mol) dibenzhydryldiesteren av 7-/N-(tiofen-2»-acetyl)-D-5,-(N,-2,«•,2» »,,2» »-trikloretoksy-karbo-nyl)-amino-5 '-karboksyl-valeramid7-3,-cef em-4-karboksylsyre ble opp-løst i 50 ml 90$ eddiksyre ved romtemperatur. 14.7 g (0.014 mol) of the dibenzhydryl diester of 7-[N-(thiophene-2»-acetyl)-D-5,-(N,-2,«•,2» »,,2» »-trichloroethoxy -carbonyl)-amino-5'-carboxyl-valeramide 7-3,-cef-4-carboxylic acid was dissolved in 50 ml of 90% acetic acid at room temperature.

Etter avkjøling til 5°C ble det tilsatt 1,37 é sink-støv. Etter røring i 2 timer ved 5 C ble det ytterligere tilsatt 10 ml 90$ eddiksyre. Blandingen ble så filtrert, og filteret ble vasket med eddiksyre. Oppløsningen ble så konsentrert i en roterende fordamper under redusert trykk til man fikk et oljeaktig residuum, og dette ble oppløst i 40 ml trifluoreddiksyre. Man tilsatte så 12 ml anisol. Etter røring i 20 minutter ved romtemperatur ble oppløsningen fordampet under redusert trykk, Résiduumet ble opp-løst i 100 ml etylacetat og vasket suksessivt med vandig oppløsning av 5$ natriumbikarbonat og med en vandig oppløsning mettet med natriumkiorid.. After cooling to 5°C, 1.37 parts of zinc dust were added. After stirring for 2 hours at 5°C, a further 10 ml of 90% acetic acid was added. The mixture was then filtered, and the filter was washed with acetic acid. The solution was then concentrated in a rotary evaporator under reduced pressure until an oily residue was obtained, and this was dissolved in 40 ml of trifluoroacetic acid. 12 ml of anisole were then added. After stirring for 20 minutes at room temperature, the solution was evaporated under reduced pressure. The residue was dissolved in 100 ml of ethyl acetate and washed successively with an aqueous solution of 5% sodium bicarbonate and with an aqueous solution saturated with sodium chloride.

Den resulterende oppløsning ble tørket over natrium sulfat, hvoretter man langsomt ved 5°C tilsatte en oppløsning av 2,8g natrium 2-etyl-heksanoat i 20 ml etylacetat. Blandingen ble konsentrert under redusert trykk til et volum på 40 ml og produktet ble utfelt med petroleter. Produktet ble frafiltrert og vasket med etyleter. The resulting solution was dried over sodium sulfate, after which a solution of 2.8 g of sodium 2-ethyl hexanoate in 20 ml of ethyl acetate was slowly added at 5°C. The mixture was concentrated under reduced pressure to a volume of 40 ml and the product was precipitated with petroleum ether. The product was filtered off and washed with ethyl ether.

Produktet veiet 3,4 g (58$ av det teoretiske). Elementæranalyse tilsvarende C^H^O^N^SgNa The product weighed 3.4 g ($58 of the theoretical). Elemental analysis corresponding to C^H^O^N^SgNa

C 45,93$ H3,61$ N 6,70$ C $45.93 H $3.61 N $6.70

Funnet: C 45,78$ H 3,53$ N 6,56$ Found: C 45.78$ H 3.53$ N 6.56$

Eksempel 9. Example 9.

Fremstilling av p-bromfenacylesteren av 7-(N-trifenyl-metyl)-D- 21- amino- 2'- fenylacetamido- 3- metyl- 3- cefem- 4- karboksylsyre. 7,08 g (0,010 mol) 7-/N-(N,-trifenylmetyl)-D-2l<->amino-2•-fenylacetyl7-fenylacetamido-3-metyl-3-cefem-karboksylsyre ble suspendert i 50 ml dimetylformamid. Man tilsatte deretter 2 ml trietylamin og 2,8g p-bromfenacylbromid, og blandingen ble oppvarmet til 40°C og rørt i 15 timer. Etter avkjøling til 20°C.ble blandingen fortynnet med 40 ml benzen og vasket med vann flere ganger. Etter tørking over silisiumdioksydgel og avkjøling Preparation of the p-bromophenacyl ester of 7-(N-triphenyl-methyl)-D-21-amino-2'-phenylacetamido-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid. 7.08 g (0.010 mol) of 7-(N-(N,-triphenylmethyl)-D-2l<->amino-2•-phenylacetyl7-phenylacetamido-3-methyl-3-cephem-carboxylic acid was suspended in 50 ml of dimethylformamide . 2 ml of triethylamine and 2.8 g of p-bromophenacyl bromide were then added, and the mixture was heated to 40°C and stirred for 15 hours. After cooling to 20°C, the mixture was diluted with 40 ml of benzene and washed with water several times. After drying over silica gel and cooling

o o

til 5 C ble det tilsatt en oppløsning av 1,25 ml 3-dimetylamino-propylamin i 6 ml benzen. Etter røring i 4 timer ved 5°C ble opp-løsningen vasket suksessivt med en vandig oppløsning mettet med natriumkiorid, så med en vandig oppløsning av IN saltsyre og så med en vandig oppløsning av 5$ natriumbikarbonat. Oppløsningen ble tørket over silisiumdioksydgel og fordampet under redusert trykk. Residuumet ble oppløst i 50 ml etylacetat og produktet ble utfelt med, petroleter, frafiltrert og vasket med etyleter. to 5 C, a solution of 1.25 ml of 3-dimethylaminopropylamine in 6 ml of benzene was added. After stirring for 4 hours at 5°C, the solution was washed successively with an aqueous solution saturated with sodium chloride, then with an aqueous solution of 1N hydrochloric acid, and then with an aqueous solution of 5% sodium bicarbonate. The solution was dried over silica gel and evaporated under reduced pressure. The residue was dissolved in 50 ml of ethyl acetate and the product was precipitated with petroleum ether, filtered off and washed with ethyl ether.

Det oppnådde produkt veiet 4,8g (6l$ av det teoretiske ) . The product obtained weighed 4.8g (6l$ of the theoretical).

Elementæranalyse tilsvarende C^^H^^O^N^.S Br: Elemental analysis corresponding to C^^H^^O^N^.S Br:

C 65,65$ H 4,61$ N 5,34$ C 65.65$ H 4.61$ N 5.34$

Funnet: C 66,08% H 4,71$ N 5,40$ Found: C 66.08% H 4.71$ N 5.40$

Eksempel 10. Example 10.

Fremstilling av 7-(D-2-amino-2-fenyl-acetamido)-3-metyl-3-cefem-karboksylsyre. Preparation of 7-(D-2-amino-2-phenyl-acetamido)-3-methyl-3-cephem-carboxylic acid.

11,9 g (0,015 mol) p-nitrobenzylesteren av 7-/N-(N,-2",2",2"-trikloretoksykarbonyl)-D-2•-fenyl-2•-amino-acetyl7-fenoksyacetamido-3-metyl-3-cefem-4-karboksylsyre ble oppløst i 11.9 g (0.015 mol) of the p-nitrobenzyl ester of 7-/N-(N,-2",2",2"-trichloroethoxycarbonyl)-D-2•-phenyl-2•-amino-acetyl7-phenoxyacetamido-3 -methyl-3-cephem-4-carboxylic acid was dissolved in

40 ml tørr kloroform. Under røring ved 25°C ble det tilsatt en 40 ml dry chloroform. While stirring at 25°C, a

oppløsning av 1,5 nil n-butylamin i 5 ml kloroform. Blandingen bie rørt i 1 time ved 25°C. Den ble så suksessivt vasket med en vandig oppløsning av 0,5N saltsyre og en mettet vandig oppløsning av natriumkiorid. -Den ble så tørket over magnesiumsulfat og fordampet under redusert trykk. Residuumet ble oppløst i 15 nil benzen. solution of 1.5 nil n-butylamine in 5 ml of chloroform. The mixture was stirred for 1 hour at 25°C. It was then successively washed with an aqueous solution of 0.5N hydrochloric acid and a saturated aqueous solution of sodium chloride. -It was then dried over magnesium sulfate and evaporated under reduced pressure. The residue was dissolved in 15 nil of benzene.

Oppløsningen ble så ført gjennom en kromatografisk kolonne inneholdende 80 g silisiumdioksydgel. Den ble eluert med en blanding av benzen og etylacetat (9 sl) (<V>/v). Tynnsjiktkromatografi av de eluerte fraksjoner viste at det forønskede produkt var i de første fraksjoner. Disse ble så frysetørket. Det fryse-tørkede produkt ble suspendert i 15 ml dioksan inneholdende 1,5 ml vann. Ved" rdmtemperatur tilsatte man så 6,9 g sinkstøv og 7 ml konsentrert saltsyre. Blandingen ble rørt i to timer ved romtemperatur og så filtrert. Den ble deretter konsentrert under redusert trykk i en roterende fordamper, Residuumet ble oppløst i 14 ml vann. Oppløsningen ble avkjølt til 10°C og man tilsatte trietylamin dråpevis inntil man fikk en pH-v er di på 3»7«200 ml kald aceton ble så tilsatt og røringen fortsatt i to timer ved 0°C. Suspensjonen ble filtrert og vasket med aceton. The solution was then passed through a chromatographic column containing 80 g of silica gel. It was eluted with a mixture of benzene and ethyl acetate (9 sl) (<V>/v). Thin layer chromatography of the eluted fractions showed that the desired product was in the first fractions. These were then freeze-dried. The freeze-dried product was suspended in 15 ml of dioxane containing 1.5 ml of water. At room temperature, 6.9 g of zinc dust and 7 ml of concentrated hydrochloric acid were then added. The mixture was stirred for two hours at room temperature and then filtered. It was then concentrated under reduced pressure in a rotary evaporator. The residue was dissolved in 14 ml of water. The solution was cooled to 10°C and triethylamine was added dropwise until a pH-v was obtained of 3»7«200 ml of cold acetone was then added and the stirring continued for two hours at 0°C. The suspension was filtered and washed with acetone .

Det faste produkt ble oppløst i 80 ml vann, og suspensjonen ble holdt på 65°C i 20 minutter. Den ble så avkjølt til 10°C og filtrert. Den ble deretter vasket med en mindre mengde vann. The solid product was dissolved in 80 ml of water, and the suspension was kept at 65°C for 20 minutes. It was then cooled to 10°C and filtered. It was then washed with a small amount of water.

.Det oppnådde produkt veide 11,5 g.. (21$ av det teoretiske). Identiteten av dette produkt med 7-(D-2-amino-fenyl-acetamido)-3-metyl-3-cefem-4-karboksylsyremonohydrat ble påvist .The product obtained weighed 11.5 g.. (21$ of the theoretical). The identity of this product with 7-(D-2-amino-phenyl-acetamido)-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid monohydrate was demonstrated

ved infrarødt spektrum, ved bedømmelse av vanninnholdet og ved tynnsjiktkromatografi hvor man sammenliknet med en eutentisk stand-ard. by infrared spectrum, by assessing the water content and by thin-layer chromatography where comparison was made with an authentic standard.

Eksempel 11. Fremstilling av 7-(D-2-amino-2-fenylacetamido)-3-metyl-3-cefem-karboksylsyre. Example 11. Preparation of 7-(D-2-amino-2-phenylacetamido)-3-methyl-3-cephem-carboxylic acid.

10 g (0,030 mol) 7-fenylacetamido-3-metyl-3-cefem-4-karboksylsyre ble suspendert i 100 ml vannfri kloroform, og man tilsatte 3»8 ml dimetylanilin og 4,25 ml trietylamin. Under røring og avkjøling ble det tilsatt 7»2 ml dimetyldikiorsilan mens temperaturen ble holdt på 20°C. Røringen ble fortsatt i 40 minut ter ved samme temperatur. Oppløsningen ble så avkjølt til -60°C og i løpet av 15 minutter ble det så tilsatt 6,5 g finmalt fosforpentaklorid. Under tilsetningen steg temperaturen til -38°C og 12,5 ml dimetylanilin ble så tilsatt. Røring ble fortsatt i 2 timer.ved -38°C. 10 g (0.030 mol) of 7-phenylacetamido-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid were suspended in 100 ml of anhydrous chloroform, and 3.8 ml of dimethylaniline and 4.25 ml of triethylamine were added. While stirring and cooling, 7.2 ml of dimethyldicorsilane were added while the temperature was kept at 20°C. Stirring was continued for 40 minutes at the same temperature. The solution was then cooled to -60°C and within 15 minutes 6.5 g of finely ground phosphorus pentachloride was added. During the addition the temperature rose to -38°C and 12.5 ml of dimethylaniline was then added. Stirring was continued for 2 hours at -38°C.

Blandingen ble oppvarmet til +20°C og man tilsatte 12,4 g kalium N-(2\ 2',2'-trikloretoksykarbonyl)-2-f©nyl-2-amino-acetat. Den resulterende blanding ble oppvarmet til +30°C og rørt i 30 minutter. Etter avkjøling til +10°C ble røringen fortsatt i 14 timer. The mixture was heated to +20°C and 12.4 g of potassium N-(2\2',2'-trichloroethoxycarbonyl)-2-phenyl-2-amino-acetate were added. The resulting mixture was heated to +30°C and stirred for 30 minutes. After cooling to +10°C, stirring was continued for 14 hours.

■$. vr - Den resulterende oppløsning ble frafiltrert for å ut-' skille faste urenheter. En oppløsning av 3i8g natriumtiofenoksyd i 30 ml dimetylformamid ble dråpevis tilsatt samtidig som temperaturen ble holdt på 10°C. Røring ble fortsatt i 30 minutter hvoretter man tilsatte 20 ml vann i løpet av 30 minutter. 2 g natriumbikarbonat ble tilsatt, det vandige lag utskilt og det organiske lag vasket med en vandig oppløsning av 0,5N saltsyre og så med en mettet vandig oppløsning av natriumkiorid. Oppløsningen ble tørket over natriumsulfat og konsentrert under redusert trykk inntil et volum på 40 ml. ■$. vr - The resulting solution was filtered off to separate solid impurities. A solution of 318g of sodium thiophenoxide in 30 ml of dimethylformamide was added dropwise while maintaining the temperature at 10°C. Stirring was continued for 30 minutes, after which 20 ml of water was added over the course of 30 minutes. 2 g of sodium bicarbonate was added, the aqueous layer separated and the organic layer washed with an aqueous solution of 0.5N hydrochloric acid and then with a saturated aqueous solution of sodium chloride. The solution was dried over sodium sulfate and concentrated under reduced pressure to a volume of 40 ml.

Den konsentrerte oppløsning ble ført gjennom en kromatografisk kolonne inneholdende 80 g silisiumdioksydgel. Deft ble så eluert med en blanding av kloroform og etylacetat i forhold på 8:2 pr. volum, og de fraksjoner som inneholdt det forønskede produkt ble isolert etter identifikasjon ved tynnsjiktkromatografi. De utskilte fraksjoner ble fordampet under redusert trykk. Det resulterende faste residuum ble oppløst i 200 ml maursyre med en konsentrasjon på 90$. Oppløsningen ble avkjølt til 5°C. Under røring ble det så tilsatt 1,9 g sinkstøv. Oppløsningen ble rørt i 45 minutter ved 5°C og så filtrert. Oppløsningen ble fordampet under redusert trykk, residuumet oppløst i benzen og igjen fordampet til tørrhet. Residuumet ble oppløst i 20 ml vann og trietylamin ble dråpevis tilsatt inntil man fikk en pH-verdi på 3,7. Videre opparbeiding er som angitt i siste del av eks. 10. Man fikk et produkt med totalt utbytte på 18$. The concentrated solution was passed through a chromatographic column containing 80 g of silica gel. Deft was then eluted with a mixture of chloroform and ethyl acetate in a ratio of 8:2 per volume, and the fractions containing the desired product were isolated after identification by thin-layer chromatography. The separated fractions were evaporated under reduced pressure. The resulting solid residue was dissolved in 200 ml of formic acid with a concentration of 90%. The solution was cooled to 5°C. While stirring, 1.9 g of zinc dust was then added. The solution was stirred for 45 minutes at 5°C and then filtered. The solution was evaporated under reduced pressure, the residue dissolved in benzene and again evaporated to dryness. The residue was dissolved in 20 ml of water and triethylamine was added dropwise until a pH value of 3.7 was obtained. Further processing is as indicated in the last part of ex. 10. A product was obtained with a total yield of $18.

Claims

1. Process for the production of new intermediates for the production of semi-synthetic cephalosporins and derivatives thereof with the following general formula:

where R"*" is an organic radical different from n-butyl 4-amino-4-carboxylic acid, and which may contain alkyl, aryl, aralkyl or heterocyclic groups, which may further contain one or more substituents such as amine, hydroxide or alkoxide functions, 2 halogen atoms or other groups, R is an organic radical which comes from the substrate used and which is selected from the group consisting of n-butyl 4-amino-4-carboxylic acid, benzyl, phenoxymethyl, 2-pentenyl, pentanyl, heptanyl or p-hydroxybeijyl, and X is a hydrogen atom or an organic radical which can be a hydroxide, acyloxy, heterocyclooxide or amine residue, and where E can be a hydrogen atom or a protecting group for the carboxylic acid function, characterized by acylating the nitrogen atom in the 7-acylamide group in a cephalosporin derivative with the following general formula: 2 where R and X have the same meaning as stated above, or a derivative of said compound with a protected carboxylic acid function.;2. Method according to claim 1, characterized by the fact that the acylation of the nitrogen atom in the 7-acylamide group is achieved by reacting an organic acid derivative with the following formula: where R^- has the same meaning as stated above, with an iminhalo- genide derivative of cephalosporin or a derivative of such a cephalosporin with a protected amine or carboxylic acid function.;3. Method according to each of claims 1 to 2, characterized in that the carboxylic acid function in the cephalosporin derivative is protected with. methyl, t-butyl, 2,2,2-trichloroethyl, benzhydryl, triphenylmethyl, p-nitrophenyl, 2,4-dinitro-phenyl, benzyl, p-methoxybenzyl, 3,5-dimethoxybenzyl, k■,4-dimethoxy-benzyl , phenacyl, p-bromophenacyl, trimethylsilyl, dimethylsilyl, tri- n-butyltin, triphenyltin, tri-n-propyltin, acetyl or N,N'- - di-isopropyl-hydrazine. k. Process according to each of claims 1, 2 or 3, where E represents a hydrogen atom, characterized in that the protective group for the carboxylic acid function is removed after said acylation. 5. Method according to claim 2, characterized v e d that ^e;ttf. The cephalosporin-imine halide derivative used is prepared by reacting the cephalosporin derivative with an imine-forming halogenated compound.;6. Procedure according to claim 5, character! s e r, t in that the imine-forming halogenated compound is a phosphorus halide.; 7" Method according to each of claims 5 to 6, characterized in that the formation of the imine halide is achieved in the presence of a proton acceptor.; 8.. Method according to claim 2, characterized in that the organic acid derivative is a salt with the following formula. ;where M .represents a metal atom.;9. Method according to claim 8, characterized in that M represents an alkali metal selected from the group consisting of sodium, potassium or lithium.; 10. - Process according to claim 1, characterized in that R represents a radical selected from the group consisting of an α-aminobenzyl radical with a protected amine group optionally substituted in the benzene ring, with one or more substituents selected from hydroxide, alkoxide, halogen, amine or carboxylic acid , an aminomethylcyclohexadienyl radical with a protected amine group, an aminomethylcyclohexyl radical with the amine group protected, a 2-thienyl radical or an aminomethyl-2-thienyl radical with the amine group protected.;11. Process for the production of semi-synthetic cephalosporins or derivatives with the following general formula: where R* and X have the same meaning as stated above, and A can be hydrogen, an alkali metal or alkaline earth metal or an ammonium group optionally substituted with organic radicals, character characterized by selectively deacylating one of the intermediates according to each of the aforementioned claims.

12. Method according to claim 11, character! s ert in that the selective deacylation is followed by a cleavage of the protecting group for the carboxylic acid function, one removal of the protecting group for the amine function, after which the semi-synthetic cephalosporin derivative produced is isolated.

13. v Method according to each of claims 11 to 12, characterized in that the isolation of the semi-syri- thetic cephalosporin derivatives are obtained by chromatography, by freeze-drying, by concentration, extraction, change of medium, formation of salts or by a combination of two or more of these methods.

14. Process according to each of claims 11 or 12, characterized in that the said deacylation is obtained by means of one of the following methods: heating, reaction with a reducing agent, reaction with an amine or a primary -- or secondary diamine or, triamine , a reaction with a phenol derivative or a thiophenol derivative.

15. Method according to claim 13, characterized in that the deacylating agent used. is selected from the group consisting of butylamine, pentylamine, hexylamine, heptylamine. octylamine, cyclohexylamine, sodium thiophenoxide and potassium thiophenoxide.