NO324411B1 - Anvendelse av isolerte mulitipotente nervestamceller som prolifererer i et kulturmedium for fremstilling av et cellepreparat for a oppna remyelinering av et demyelinert akson in vivo. - Google Patents
Anvendelse av isolerte mulitipotente nervestamceller som prolifererer i et kulturmedium for fremstilling av et cellepreparat for a oppna remyelinering av et demyelinert akson in vivo. Download PDFInfo
- Publication number
- NO324411B1 NO324411B1 NO19951378A NO951378A NO324411B1 NO 324411 B1 NO324411 B1 NO 324411B1 NO 19951378 A NO19951378 A NO 19951378A NO 951378 A NO951378 A NO 951378A NO 324411 B1 NO324411 B1 NO 324411B1
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- cells
- remyelination
- culture medium
- cell
- stem cells
- Prior art date
Links
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 title claims abstract description 118
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 title claims abstract description 11
- 210000003050 axon Anatomy 0.000 title claims description 11
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 title claims description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 8
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 title description 42
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 title 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims abstract description 25
- 210000001178 neural stem cell Anatomy 0.000 claims abstract description 18
- 208000016192 Demyelinating disease Diseases 0.000 claims description 15
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 claims description 13
- 102000009024 Epidermal Growth Factor Human genes 0.000 claims description 12
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 claims description 12
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 claims description 12
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 claims description 6
- 208000008795 neuromyelitis optica Diseases 0.000 claims description 6
- 208000002552 acute disseminated encephalomyelitis Diseases 0.000 claims description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 3
- 208000032194 Acute haemorrhagic leukoencephalitis Diseases 0.000 claims description 2
- 206010010252 Concentric sclerosis Diseases 0.000 claims description 2
- 208000004986 Diffuse Cerebral Sclerosis of Schilder Diseases 0.000 claims description 2
- 206010029240 Neuritis Diseases 0.000 claims description 2
- 206010036105 Polyneuropathy Diseases 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- 201000001119 neuropathy Diseases 0.000 claims description 2
- 230000007823 neuropathy Effects 0.000 claims description 2
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 claims description 2
- 208000019629 polyneuritis Diseases 0.000 claims description 2
- 206010036807 progressive multifocal leukoencephalopathy Diseases 0.000 claims description 2
- 201000002491 encephalomyelitis Diseases 0.000 claims 1
- 208000036546 leukodystrophy Diseases 0.000 claims 1
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 29
- 210000004248 oligodendroglia Anatomy 0.000 abstract description 25
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 abstract description 14
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 abstract description 12
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 abstract description 10
- 102000008730 Nestin Human genes 0.000 abstract description 8
- 108010088225 Nestin Proteins 0.000 abstract description 8
- 210000005055 nestin Anatomy 0.000 abstract description 8
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 abstract description 5
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 abstract description 4
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 210000001130 astrocyte Anatomy 0.000 description 24
- 102000006386 Myelin Proteins Human genes 0.000 description 21
- 108010083674 Myelin Proteins Proteins 0.000 description 21
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 20
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 20
- 210000005012 myelin Anatomy 0.000 description 19
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 14
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 13
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 10
- 206010012305 Demyelination Diseases 0.000 description 9
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 9
- KISWVXRQTGLFGD-UHFFFAOYSA-N 2-[[2-[[6-amino-2-[[2-[[2-[[5-amino-2-[[2-[[1-[2-[[6-amino-2-[(2,5-diamino-5-oxopentanoyl)amino]hexanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)p Chemical compound C1CCN(C(=O)C(CCCN=C(N)N)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(N)CCC(N)=O)C1C(=O)NC(CO)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(=O)NC(CO)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C(=O)NC(CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 KISWVXRQTGLFGD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 101710193519 Glial fibrillary acidic protein Proteins 0.000 description 8
- 210000005046 glial fibrillary acidic protein Anatomy 0.000 description 8
- 102100039289 Glial fibrillary acidic protein Human genes 0.000 description 7
- 102000047918 Myelin Basic Human genes 0.000 description 7
- 101710107068 Myelin basic protein Proteins 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 239000003226 mitogen Substances 0.000 description 7
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 6
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 6
- 108010038512 Platelet-Derived Growth Factor Proteins 0.000 description 5
- 102000010780 Platelet-Derived Growth Factor Human genes 0.000 description 5
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 5
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 5
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 5
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 5
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 5
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 5
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 5
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 4
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 4
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 210000001328 optic nerve Anatomy 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 3
- 102000012288 Phosphopyruvate Hydratase Human genes 0.000 description 3
- 108010022181 Phosphopyruvate Hydratase Proteins 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 102000006747 Transforming Growth Factor alpha Human genes 0.000 description 3
- 101800004564 Transforming growth factor alpha Proteins 0.000 description 3
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 3
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 3
- 230000002518 glial effect Effects 0.000 description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 102000003974 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 2
- 108090000379 Fibroblast growth factor 2 Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 102100026784 Myelin proteolipid protein Human genes 0.000 description 2
- 208000017493 Pelizaeus-Merzbacher disease Diseases 0.000 description 2
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 2
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 2
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 2
- 108010009583 Transforming Growth Factors Proteins 0.000 description 2
- 102000009618 Transforming Growth Factors Human genes 0.000 description 2
- LEBBDRXHHNYZIA-LDUWYPJVSA-N [(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl] n-[(z)-1,3-dihydroxyoctadec-4-en-2-yl]carbamate Chemical compound CCCCCCCCCCCCC\C=C/C(O)C(CO)NC(=O)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LEBBDRXHHNYZIA-LDUWYPJVSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 2
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 2
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 238000003365 immunocytochemistry Methods 0.000 description 2
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 2
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 2
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003963 intermediate filament Anatomy 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 2
- 210000001428 peripheral nervous system Anatomy 0.000 description 2
- 108010055896 polyornithine Proteins 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- KIDHWZJUCRJVML-UHFFFAOYSA-N putrescine Chemical compound NCCCCN KIDHWZJUCRJVML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 2
- 210000004885 white matter Anatomy 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000954 2-hydroxyethyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])O[H] 0.000 description 1
- HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 3-[3-[3,5-dihydroxy-6-methyl-4-(3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]oxydecanoyloxy]decanoic acid;hydrate Chemical compound O.OC1C(OC(CC(=O)OC(CCCCCCC)CC(O)=O)CCCCCCC)OC(C)C(O)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(C)O1 HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 208000022526 Canavan disease Diseases 0.000 description 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 1
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 1
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 1
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 239000004593 Epoxy Substances 0.000 description 1
- 241000483002 Euproctis similis Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 102000053171 Glial Fibrillary Acidic Human genes 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 102000012411 Intermediate Filament Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010061998 Intermediate Filament Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 101710160107 Outer membrane protein A Proteins 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 1
- 102000016202 Proteolipids Human genes 0.000 description 1
- 108010010974 Proteolipids Proteins 0.000 description 1
- 239000005700 Putrescine Substances 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 108700029631 X-Linked Genes Proteins 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N alprazolam Chemical compound C12=CC(Cl)=CC=C2N2C(C)=NN=C2CN=C1C1=CC=CC=C1 VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 230000003376 axonal effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000019522 cellular metabolic process Effects 0.000 description 1
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 1
- VIEXQFHKRAHTQS-UHFFFAOYSA-N chloroselanyl selenohypochlorite Chemical compound Cl[Se][Se]Cl VIEXQFHKRAHTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 1
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000003210 demyelinating effect Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 210000001951 dura mater Anatomy 0.000 description 1
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 230000001973 epigenetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 230000007773 growth pattern Effects 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 230000002631 hypothermal effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 229940125721 immunosuppressive agent Drugs 0.000 description 1
- 229940124589 immunosuppressive drug Drugs 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000012332 laboratory investigation Methods 0.000 description 1
- 210000005240 left ventricle Anatomy 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 210000004373 mandible Anatomy 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004899 motility Effects 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 229940105631 nembutal Drugs 0.000 description 1
- 210000000944 nerve tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000003061 neural cell Anatomy 0.000 description 1
- -1 neural filament (NF) Proteins 0.000 description 1
- 210000003757 neuroblast Anatomy 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 231100000590 oncogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002246 oncogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002856 peripheral neuron Anatomy 0.000 description 1
- 238000000053 physical method Methods 0.000 description 1
- 201000004925 post-vaccinal encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 description 1
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000011808 rodent model Methods 0.000 description 1
- 239000011833 salt mixture Substances 0.000 description 1
- 210000004116 schwann cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003497 sciatic nerve Anatomy 0.000 description 1
- 230000008054 signal transmission Effects 0.000 description 1
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003104 tissue culture media Substances 0.000 description 1
- 210000003371 toe Anatomy 0.000 description 1
- 229950003937 tolonium Drugs 0.000 description 1
- HNONEKILPDHFOL-UHFFFAOYSA-M tolonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=C(C)C(N)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 HNONEKILPDHFOL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001228 trophic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 230000005740 tumor formation Effects 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 238000010792 warming Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/30—Nerves; Brain; Eyes; Corneal cells; Cerebrospinal fluid; Neuronal stem cells; Neuronal precursor cells; Glial cells; Oligodendrocytes; Schwann cells; Astroglia; Astrocytes; Choroid plexus; Spinal cord tissue
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/82—Translation products from oncogenes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0618—Cells of the nervous system
- C12N5/0623—Stem cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
- C12N9/0065—Oxidoreductases (1.) acting on hydrogen peroxide as acceptor (1.11)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2217/00—Genetically modified animals
- A01K2217/05—Animals comprising random inserted nucleic acids (transgenic)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
- C12N2500/05—Inorganic components
- C12N2500/10—Metals; Metal chelators
- C12N2500/20—Transition metals
- C12N2500/24—Iron; Fe chelators; Transferrin
- C12N2500/25—Insulin-transferrin; Insulin-transferrin-selenium
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
- C12N2500/30—Organic components
- C12N2500/46—Amines, e.g. putrescine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
- C12N2500/90—Serum-free medium, which may still contain naturally-sourced components
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/10—Growth factors
- C12N2501/11—Epidermal growth factor [EGF]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/30—Hormones
- C12N2501/38—Hormones with nuclear receptors
- C12N2501/39—Steroid hormones
- C12N2501/392—Sexual steroids
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Neurology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- Virology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Ophthalmology & Optometry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Foreliggende oppfinnelse vedrører anvendelse av isolerte multipotente neuralstamceller som prolifererer i et kulturmedium inneholdende epidermal vekstfaktor TGFa eller TGF(3 for å produsere forløperceller der cellene høstes fra en donor, for fremstilling av et cellepreparat for å oppnå remyelinering av et demyelinert akson in vivo.
Myelin er et cellulært lag dannet av gliaceller som omgir aksoner og aksonale utløpere som forsterker forskjellige elektrokjemiske egenskaper og gir tropisk støtte til neuronene. Myelin blir dannet av Schwannceller i det perifere nervesystemet og av oligodendrocytter i sentralnervesystemet.
Demyelinering av sentrale og perifere neuroner oppstår i et antall patologier og fører til uriktig signaloverføring innenfor nervesystemene. Blant forskjellige demyelinerende sykdommer er multippel sklerose (MS) den mest betydelige.
I både humane demyelinerende sykdommer og i gnagermodeller er det vesentlig bevis for at demyelinerende neuroner har evne til in situ remyelinering. I MS for eksempel ser det ut som om det ofte er sykluser med de- og remyelinering. Lignende observasjoner fra forsøk med gnageres demyelinering fører til den antagelsen som innbefatter at eksogent tilførte celler kan ha evne til remyelinering av demyelinerte aksoner.
Denne metoden har vist seg å være vellykket i et antall eksperimentelle situasjoner.
[Freidman et al., Brain Research, 378:142-146 (1986), Raine, et al., Laboratory Investigation 59:467-474 (1988); Duncan et al., J. of Neurocytology,17:351-360 (1988)] Kildene til cellene i noen av disse eksperimentene innbefatter dissosierte gliacellesuspensjoner dannet fra ryggmargen (Duncan et al., supra). Schwann
cellekulturer dannet fra sciatisk nerve [Bunge et al., 1992, WO 92/03536; Blackmore og Crang, J. Neurol. Sei., 70:207-223 (1995)]; kulturer fra dissosiert nervevev [Blackmore og Crang, Dev. Neurosci. 10:1-11 (1988)], oligodendrocyttforløperceller [Gumpel et al., Dev. Neurosci. 11:132-139 (1989)], 0-2A celler [Wolswijk et al., Development
109:691-608 (1990); Raff et al., Nature 3030:390-396 (1983; hardy et al., Development 111:1061-1880 (1991)], og udødeliggjorte 0-2A cellelinjer, [Almazan og McKay Brain Res. 579:234-245 (1992)].
0-2A celler er gliale forløperceller som in vitro bare gir opphav til oligodendrocytter og type II astrocytter. Celler som immunfarging in vivo forekommer som 0-2A fenotype har blitt vist å remyelinere demyelinerte neuroner in vivo. Godfraind et al., J. Cell Biol. 109:2405-2416 (1989). Injeksjon av et stort antall 0-2A celler er nødvendig for hensiktsmessig remyelinering av alle målneuronene in vivo siden det ser ut som om 0-
2A celler (som andre glialcellepreparater) ikke fortsetter å dele seg in situ. Til tross for at 0-2A forløperceller kan bli dyrket i kultur utgjør den for tiden eneste tilgjengelige isoleringsteknikken ved anvendelse av den optiske nerve som utgangsmateriale. Dette er en kilde som eksisterer i lavt utbytte og krever mange rensningstrinn. Det er en ytterligere ulempe at 0-2A celler isolert ved tilgjengelige prosedyrer bare har evne til et begrenset antall delinger. Raff Science 243:1450-1455 (1989).
For in vivo remyelinering vil det være fordelaktig å injisere bare et lite antall celler som kan bli delt, migrere til hensiktsmessige mål og differensierer in situ. Det er blitt vist at tilstedeværelse av type I astrocytter er viktig for at remyelinering oppstår med eksogent tilsatte oligodendrocytter. Anvendelse av oligodendrocyttforløpere så som 0-2A celler krever at type I astrocytter også blir injisert, eller alternativt at blodplateavledet vekstfaktor (PDGF) blir gitt til de remyelinerende cellene. PDGF er et potent mitogen for 0-2A forløperen og blir utskilt fra type I astrocytter.
Ubearbeidete cellepreparater og suspensjoner er ikke foretrukket som eksogene kilder for remyelinerende celler på grunn av at de inneholder et ikke forutsigbart antall celler samt store antall både neurale og ikke-neurale celletyper og dette gjør reproduserbarheten til fremgangsmåten vanskelig. Det er også vanskelig å oppnå et egnet antall celler fra disse preparatene.
Transformerte 0-2A cellelinjer er ikke egnet for transplantasjon på grunn av det faktum at transformasjonsprosessen fører til en genetisk (onkogen) kontrollert celledeling i forhold til primære cellelinjer eller neurale stam- eller forløperceller hvor reguleringen av delingen er på et epigenetisk nivå. Ytterligere potensielle problemer innbefatter at cellelinjene er ustabile over lange tidsperioder og viser sviktende differensieirngsmønster og responser overfor vekstfaktorer. Goldman Trends Neuro. Sei. 15:359-362(1992).
Det eksisterer derfor et behov for en pålitelig cellekilde for remyelinerende terapi. Celledeling i slike celler fra en slik kilde er fortrinnsvis epigenetisk regulert og et egnet antall celler kan effektivt bli fremstilt i tilstrekkelig antall for å tilveiebringe remyelinering. Cellene bør være egnet for autograft, xenograft og allograft uten bekymring for tumordannelse.
Det er derfor en hensikt ifølge oppfinnelsen å tilveiebringe en pålitelig kilde for epigenetiske regulerte celler for transplantasjon som har evne til differensiering til oligodendrocytter.
Foreliggende oppfinnelse angår således avendelse av isolerte multipotente neuralstamceller som prolifererer i et kulturmedium inneholdende epidermal vekstfaktor. TGFa eller TGF(3 for å produsere forløperceller der cellene høstes fra en donor, for fremstilling av et cellepreparat for å oppnå remyelinering av et demyelinert akson in vivo.
I en foretrukken utførelsesform inneholder kulturmediet epidermal vekstfaktor.
I en annen utførelsesform er forløpercellene i neurosfærer.
Disse og andre hensikter og trekk ifølge oppfinnelsen vil fremkomme for fagfolk innenfor dette området ut fra den følgende detaljerte beskrivelsen og kravene sett i sammenheng med figurene.
Ingen av de angitte referansene antas å beskrive foreliggende oppfinnelse slik den krever, og antas ikke å være kjent teknikk. Motholdene er gitt som bakgrunnsinformasjon.
Definisjoner
Betegnelsen "stamcelle" angir en udifferensiert celle med evne til å proliferere og gi opphav til flere stamceller som har evne til å danne et stort antall forløperceller som igjen kan gi opphav til differensierte, eller differensierbare datterceller.
Betegnelsen "neural stamcelle" (NSC) refererer til stamceller og avkommet derav innbefatter under hensiktsmessige dyrkningsbetingelser både gliaceller og neuronal forløperceller.
Betegnelsen "forløper celler" refererer til udifferensierte celler, avledet fra neuralstamceller og avkommet derav kan under hensiktsmessige betingelser innbefatte gliaceller og/eller neuronal forløperceller.
Betegnelsen "oligodendrocytt" refererer til en differensiert gliacelle som danner myelinet som omgir aksoner i sentralnervesystemet (CNS). Oligodendrocytter er av fenotype galaktocerebrosid (+), myelin basisk protein (+) og glial fibrillært surt protein
(-) [Gal C(+), MBP(+), GFAP(-)].
Betegnelsen "type I astrocytt" refererer til en differensiert gliacelletype med en flat protoplasma/fibroblastliknende morfologi som er GFAP(+), Gal C(-) og MBP(-).
Betegnelsen "type II astrocytt" refererer til en differensiert gliacelle som utviser en stellatprosess som har morfologien til fenotypen (GFAP(+), Gal C(-), og MBP(-).
Betegnelsen "neuronal forløperceller" refererer til celler som danner datterceller som under hensiktsmessige betingelser blir eller gir opphav til neuroner.
Betegnelsen "oligodendrocyttforløperceller" refererer til celler som gir opphav til oligodendrocytter. Oligodendrocyttforløperceller kan ha fenotypen AsB5(+), 04(+)/Gal C(-), MBP(-) og GFAP (-) [men er ikke begrenset til denne fenotypen].
Betegnelsen "neurosfære" refererer til en sammenhopning av celler avledet fra neuralstamceller og dyrket in vitro. I hverfall noen av cellene er av fenotypen nestin (+). Sammenhopningen består av stamceller og/eller forløperceller og kan men trenger ikke å innbefatte differensierte celler.
Betegnelsen "forløperceller" refererer til levende celler som er avledet fra neuralstamceller proliferert i et kulturmedium inneholdende en vekstfaktor, og innbefatter både forløper- og stamceller. Forløpercellene blir vanligvis dyrket i form av neurosfærer, men kan utvise forskjellige vekstmønstre avhengig av kulturbetingelsene.
Betegnelsen "vekstfaktor" refererer til et protein eller peptid som har en vekst eller trofisk effekt.
Betegnelsen "donor" refererer til mennesket eller dyret som er kilden for neuralstamcellene anvendt ifølge foreliggende oppfinnelse.
Betegnelsen "høsting" refererer til en hvilken som helst fremgangsmåte anvendt for å fremskaffe prolifererte celler i en form egnet for injeksjon eller transplantasjon. Betegnelsen "mottaker" refererer til mennesket eller dyret som har demyelinerte aksoner og hvori forløpercellene eller oligodendrocyttene avledet fra forløpercellene blir transplantert eller injisert.
Figur 1 angir bare en enkelt forløpercelle for oligodendendrocytter og type II astrocytter. Forskjelllige rapporter viser at det kan være mange forløperceller for disse differensierte fenotypene. Goldman, TINS 15:359-262 (1992). Et viktig aspekt av diagrammet er at neuralstamcellene er unike fordi de er de eneste stamcellene som har evne til å gi opphav til både neuroner og gliaceller in vitro.
Fenotypiske karaktertrekk
Neuralstamcellene (NSC) er blitt rapportert og deres potensielle anvendelse beskrevet.
(Reynolds og Weiss, Science 255:1707 (1992)). NSC har blitt vist å gi opphav til minst tre gliafenotyper, inkludert oligodendrocytter og type I og II astrocytter. NSC gir også opphav til neuroblaster. (Reynolds og Weiss, Restorative Neurology & Neuroscience 4:208 (1992)).
Neuralstamcellene kan bli isolert og dyrket ifølge fremgangsmåten til Reynolds og Weiss (supra). Stamceller som responderer på epidermal vekstfaktor (EGF) induseres, når de dyres i et definert serumfritt medium, og i nærvær av et mitogen så som EGF eller lignende, til å dele seg og gi opphav til en samrnenhopning av udifferensierte celler. Sammenhopningen av cellene er ikke immunreaktive for GFAP, neuralfilament (NF), neuronspesifikk enolase (NSE) eller MBP. Forløpercellene innenfor sammenhopningen er immunreaktive for nestin, et mellomliggende filamentprotein som finnes i udifferensierte CNS-celler. Nestinmarkøren ble karakterisert av Lehndahl et al., Cell 60:585-595 (1990) og er inkorporert heri som referanse. Ingen av de modne fenotypene assosiert med de fire celletypene som kan bli differensiert fra avkommet til forløpercellene har nestinfenotypen.
Ved fortsatt tilstedeværelse av et mitogen så som EGF eller lignende fortsetter forløpercellene innenfor neurosfærene å dele seg og resulterer i en økning i størrelse på neurosfæren og antall udifferensierte celler [nestin(+), GFAP(-), NF(-), NSE(-), MBP(-)]- På dette stadium er cellene ikke-adherente og danner fritt-flytende sammenhopninger som er karakteristisk for neurosfærer. Dyrkningsbetingelsene kan derimot bli variert slik at til tross for at forløpercellene fortsatt uttrykker nestinfenotypen så danner de ikke de karakteristiske neurosfærene. Etter fjerning av mitogenet adhererer cellene til substratet (poly-ornithin-behandlet plast eller glass), blir flate og begynner å differensiere til neuroner og gliaceller. På dette stadiet kan kulturmediet inneholde serum så som 0,5-1,0% føtalt bovint serum (FBS). I løpet av 2-3 dager begynner de fleste eller alle forløpercellene å miste immunoreaktivitet for nestin og begynner å uttrykke intermediære filamenter spesifikke for neuroner eller for astrocytter som vist ved immunoreaktiviteten mot henholdsvis NFL eller GFAP. I tillegg begynner et stort antall av cellene som ikke uttrykker noen av disse mellomliggende filamentmarkørene å uttrykke markører spesifikke for oligodendrocytter på en korrekt temporal måte. Cellene blir først immunreaktive for 04 (et celleoverflateantigen), galaktocerebrosid (Gal C, et myelin glykolipid) og til slutt myelin basisk protein (MBP). Disse cellene har også en karakteristisk oligodendrocyttmorfologi. Denne informasjonen betraktet i lys av oligodendrocyttforløpercellene identifisert av Raff, gir opphav til mange mulige cellelinjeslektskap. (Se figur 1).
Fremstilling av neurosfærer
Neurosfærer kan bli dannet fra forskjellige vev inkludert voksent eller føtalt neuralvev fra mennesker eller dyr. Individuelle stamceller blir dannet fra dissosiasjon av neuralvevet. Dissosiasjonen kan bli oppnådd ved anvendelse av en hvilken som helst kjent prosedyre, inkludert behandling med enzymer så som trypsin, kollagenase og lignende, eller ved anvendelse av fysiske metoder for dissosiasjon så som med et butt instrument. Dissosiasjon av føtale celler kan bli utført i vevskulturmedium, mens et foretrukket medium for dissosiasjonen av voksne celler er artifisiell cerebral spinalvæske (aCSF). Vanlig aCSF inneholder 124 mM NaCl, 5 mM KC1,1,3 med mer MgCl2,2 mM CaCl2,26 mM NaHC03 og 10 mM D-glukose. Lav Ca^ aCSF inneholder samme ingredienser med unntakelse av MgCl2 i en konsentrasjon på 3,2 mM og CaCl2 ved en konsentrasjon på 0,1 mM.
De individuelle cellene kan bli plassert i et hvilket som helst kjent kulturmedium som kan understøtte celleveksten og proliferasjonen, inkludert MEM, DMEM, RPMI, F-12 og lignende, inneholdende tilsetningsmidler som er nødvendige for cellulær metabolisme så som glutamin og andre aminosyrer, vitaminer, mineraler og nyttige proteiner så som transferrin og lignende. Mediet kan også inneholde antibiotika for å forhindre kontaminering av gjær, bakterier og sopp så som penicillin, streptomycin, gentamicin og lignende. De dissosierte cellene danner neurosfærer i nærvær av et mitogen så som EGF eller lignende.
Differensiering av gliaceller fra neurosfærer
Astrocytter og oligodendrocytter kan bli differensiert fra forløperceller til neurosfærer ved å plassere neurosfærene i et medium inneholdende 1% føtalt bovint serum i fravær av et mitogen, så som EGF eller lignende, i omtrent 3-4 dager på poly-ornithin behandlet glass eller plast. Disse cellene kan deretter bli opprettholdt i kultur i en egnet tidsperiode for å danne et stort antall differensierte celler. Kulturene kan deretter bli renset til en enkelt celletype ved anvendelse av en hvilken som helst av de kjente fremgangsmåtene innenfor fagområdet for rensing av spesifikke gliacellepopulasjoner. Noen foretrukne metoder i dette henseendet er de immunologiske metodene til Wolswijk et al., Development 109:691-698 (1990) og de til Franklin et al., Neurocytology 20:420-430 (1991).
Anvendelse av differensierte celler
Differensierte celler i form av oligodendrocytter som er avledet fra forløpercellene kan bli injisert inn i demyelinerte målområder hos mottakeren. Hensiktsmessige mengder av type I astrocytter kan også bli injisert. Type I astrocytter er kjent for å utskille PDGF som fremmer både migrering og celledelingen hos oligodendrocytter. [Nobel et al., Nature 333:560-562 (1988); Richardson et al, Cell, 53:309-319 (1988)].
Anvendelse av ikke-differensierte forløperceller
Hcke-differensierte forløperceller er foretrukket for celler til behandling av demyelinerende sykdommer. Neurosfærer dyrket i nærvær av EGF kan bli dissosiert for å oppnå individuelle forløperceller som deretter blir plassert i injeksjonsmediet og injisert direkte inn i den demyelinerte målregionen. Astrocytter kan fremme remyelinering i forskjellige paradigmer. I tilfeller hvor oligodendrocyttproliferasjonen er viktig kan evnen som forløpercellene har til å gi opphav til type I astrocytter være nyttig. I en annen situasjon kan PDGF bli applisert topisk under transplantasjonen, så vel som ved gjentatte doser til implanteirngsetet deretter.
Injeksjon av forløperceller i remyelineirngsterapi tilveiebringer en kilde for umodne type I astrocytter ved implanteirngssetet. Dette er et signifikant trekk på grunn av at umodne astrocytter (i motsetning til modne astrocytter) har et antall spesifikke karaktertrekk som gjør dem spesielt egnede for remyelineirngsterapi. For det første er umodne, i motsetning til modne, type I astrocytter kjent for å migrere bort fra implanteirngssetet [Lindsay et al., Neurosci. 12:513-530 (1984)] når disse implanteres inn i en moden mottaker og blir assosiert med blodårene i mottakerens CNS [Silver et al., WO 91/06631 (1991)]. Dette er i det minste delvis forårsaket av det faktum at umodne astrocytter i seg selv er mer motile enn modne astrocytter. [Duffy et al., Exp Cell Res. 139-145-157 (1982), tabell VII]. Type I astrocytter som differensierer ved eller nære ved forløpercelleimplanteringssetet bør ha maksimal motilitet og derved optimalisere muligheten for oligodendrocyttvekst og deling ved seter som er langt fra implantatet. Lokalisering av astrocyttene nær blodårene er også viktig ut fra et terapeutisk standpunkt på grunn av at (i det minst i MS) de fleste plakkene har et nært anatomisk slektskap med en eller flere vener.
Et annet karaktertrekk til umodne astrocytter som gjør dem spesielt egnede for remyelineringsterapi er at de gjennomgår en mindre grad av celledød enn modne type I astrocytter. (Silver et al., SUPRA).
Implantering
En hvilken som helst egnet fremgangsmåte for implantering av forløpercellene nær demyelinerte mål kan bli anvendt slik at cellene kan bli assosiert med demyelinerte aksoner. Gliaceller er motile og er kjent for å migrere til, langs og tvers over deres neuranale mål for derved å muliggjøre avstand til injeksjonene. En injeksjonsmetode eksemplifisert ved de som blir anvendt av Duncan et al. J. Neurocytology, 17:351-361
(1988), inkorporert heri som referanse, og oppskalert og modifisert for anvendelse i mennesker er foretrukket. Metodene beskrevet av Gage et al., US-PS 5.082.670, inkorporert heri som referanse, for injeksjon av cellesuspensjoner så som fibroblaster inn i CNS kan også bli anvendt for injeksjon av forløpercellene. Ytterligere metoder finnes i Neural Grafting in the Mammalian CNS, Bjorklund og Stenevi, red., (1985), inkorporert heri som referanse.
Autografter
Det kan i noen tilfeller være mulig å fremstille forløperceller fra mottakerens eget nervesystem (for eksempel i tilfeller av tumorfjerningsbiopsier osv.). I slike tilfeller kan forløpercellene bli dannet fra dissosierte vev og dyrket i kultur i nærvær av et mitogen så som EGF eller lignende, eller basisk fibroblastvekstfaktor (bFGF). Ved egnet formering av celleantallet kan forløpercellene bli høstet og gjort klare for direkte injeksjon i mottakerens CNS. Når det gjelder demyelinerende sykdommer med et genetisk grunnlag som direkte påvirker evnen som myelindannende celler har til å myelinere aksoner, vil det generelt ikke være nyttig å remyelinere ved anvendelse av mottakercellene eller donorcellene dersom ikke cellene er blitt modifisert på en måte for å sikre at skaden ikke vil forsette (for eksempel genetisk modifisering av cellene for å helbrede demyelineringsskaden).
Xeno- eller allografter kan kreve anvendelse av immunsuppressive teknikker eller induksjon av toleranse hos verten for å sikre en vedvarende remyelinering. Lokal immunsuppresjon er beskrevet av Gruber, Transplantation 54:1-11 (1992), inkorporert som referanse. Rossini US-PS 5.026.365 beskriver innkapslingsmetoden egnet for lokal immunsuppresjon. Generelle oversikter og sitater for anvendelse av rekombinante metoder for å redusere antigenisiteten til donorcellene er beskrevet av Gruber (ovenfor). Eksempelvise metoder for reduksjon av immunogenisiteten til transplantater ved overflatemodifisering er beskrevet av Faustman WO 92/04022 (1992).
Xenografter
Foreliggende oppfinnelse muliggjør anvendelse av forløperceller dannet fra donorvev som er xenogeneisk for verten. På grunn av CNS er et noe immunpriviligert sete, er immunresponsen betraktelig mindre for xenografter enn eller i kroppen. For at xenograftene skal bli vellykkede er det foretrukket at en fremgangsmåte for redusering eller eliminering av immunresponsen mot implantert vev anvendes. Mottakerene vil derfor ofte være immunsupprimert, enten gjennom anvendelse av immunsuppresive medikamenter så som cyklosporin, eller ved lokal immunsuppresjonstrategier som anvender lokalt påførte immunsuppressive midler. Alternativt kan immunogenisiteten til transplantatet bli redusert ved å danne forløperceller fra en donor med redusert antigenisitet, så som transgene dyr som har endrede eller deleterte MHC antigner.
Allograft
Transplantasjon av forløperceller dannet fra vev som er allogene i forhold til mottakeren vil som oftest kreve vevstyping i et forsøk på å komme nærmest vevstypen til mottakeren. Alderen på donorcellen og alderen til mottakeren er blitt demonstrert å være viktige faktorer når det gjelder å forbedre muligheten for neuronal transplantatoverlevelse. Effektiviteten til transplantasjonen blir redusert med økende alder på mottakercellene. Transplantatet blir letter akseptert av yngre mottakere sammenlignet med eldre mottakere. Disse to faktorene antas å være like viktige for gliatransplantatoverlevelse som der er for neuronaltransplantatoverlevelse.
Implantering i mennesker
Områder med demyelinering hos mennesker er generelt assosiert med plakklignende strukturer. Plakk kan bli visualisert ved magnetisk resonans billeddannelse. Tilgjengelige plakk er målområdene for injeksjon NSC. Standardstereotaktiske néurokirargiske metoder blir anvendt for å injisere cellesuspensjoner, både inn i hjernen og ryggmargen.
Remyelinering ved injeksjonen av forløpercellene er et nyttig terapeutisk middel i mange tilstander med demyelinering. Det er også å bemerke at i noen tilfeller vil remyelinring ved forløpercellene ikke resultere i permanent remyelinering, og gjentatte injeksjoner vil være nødvendig. Slike terapeutiske metoder er fordelaktige i forhold til å la tilstanden forbli ubehandlet og kan spare mottakerens liv.
En liste over humane demyelinerende sykdommer hvor celler anvendes ifølge foreliggende oppfinnelse er som følger: disseminert perivenøs enkefalomyelitt, multippel sklerose (Charot og Marburg typer), neuromyelitis optica, konsentrisk sklerosis, akkutt disseminert enkefalomyelitt, postenkefalomyelitt, postvaksinell enkefalomuelitt, akutt hemorrhagisk leukoenkefalopati, progressiv multifokal leukoenkefalopati, idiopatisk polyneuritt, difterisk neuropati, Pelizaeus-Merzbacher sykdom, neuromyelitt optika, diffus cerebral sklerose, sentral pontine myelinosis, spongiform leukodystrofi (Alexander type).
Eksempler
Eksempel 1
Forming av forløperceller for transplantasjon
Embryo dag 15 (El5) Sprague Dawley rotter blir avlivet og hjernen og striata blir fjernet ved anvendelse av steril prosedyre. Vevet blir mekanisk dissosiert med en flammebehandlet Pasteur pipette i serumfritt medium bestående av en 1:1 blanding av Dulbeccos modifiserte Eale's medium (DMEM) og F-12 næringsblanding (Gibco). Cellene blir sentrifugert ved 800 rpm i 5 minutter, supernatanten suget av og cellene resuspendert i DMEM/F-12 medium for telling.
Cellene blir suspendert i et serumfritt medium bestående av DMEM/F-12 (1:1) inkludert glukose (0.6%), glutamin (2 um), natriumbikarbonat (3 med mer)og HEPES (4-[2-hydroksyetyl]-l-piperazinetansulfonsyre) buffer (5 med mer) alle fra Sigma med unntagelse av glutamin (Gibco)). En definert hormonblanding og saltblanding (Sigma) som innbefatter insulin (25 ug/ml), transferrin (100 u/ml), progesteron (20 nM), putrescin (60 um) og selenklorid (30 nM) blir anvendt i stedet for serum. I tillegg inneholder mediet 16-20 ng/ml EGF (renset fra underkjeve fra mus, Collaborative Research) eller TGFa (human rekombinant, Gibco). Cellene blir sådd ut i en T25 kulturflaske og oppbevart i en inkubator ved 37°C, 100% luftfuktighet, 95% luft/5% CO2. Cellene proliferer i 3-4 dager og forårsaket av mangel på substrat, løsner fra flaskebunnen og fortsetter å proliferere i suspensjonen og danner sammenhopninger av udifferensierte forløperceller kjent som neurosfærer.
Etter 6-8 dager in vitro (DIV) blir neurosfærene fjernet, sentrifugert ved 400 rpm i 2-5 minutter og pelleten mekanisk dissosiert til individuelle celler med en flammebehandlet glass pasteur pipette. Cellene blir sådd ut på ny i vekstmedium hvor proliferasjon av stamcellene og dannelsen av nye neurosfærer på ny blir initiert. Denne prosedyren blir gjentatt hver uke og resulterer i en logaritmisk økning i antall levedyktige celler for hver passasje. Prosedyren blir gjentatt helt til det ønskede antall forløperceller er oppnådd.
Eksempel 2
Remyelinering av myelinreduserte rotter
Avkom fra første dags postnatalmyelinreduserte rotter blir bedøvet ved anvendelse av is for å danne hypotermi. Myelin reduksjon er en X-koblet egenskap og dermed er bare halvparten av hannene i all kull påvirket. Derfor er det bare hannene som blir anvendt i disse studiene. Når de er bedøvet blir et lite rostral-til caudal innsnitt dannet på nivået med lumbar forstørring. Muskel- og bindevevet blir fjernet for å eksponere den vertebrale lamina. Ved anvendelse av en fin rottetann pinsett blir en lamina ved lumbar forstørringen fjernet og et lite kutt blir i laget i dura mater for å eksponere ryggmargen.
En stereotaktisk innretning som holder en glasspipette blir anvendt for å inisiere en 1 ul alikvot av cellesuspensjonen (omtrent 50.000 celler/ul) beskrevet ovenfor. Suspensjonen blir sakte injisert på ett sted (til tross for at flere kan bli utført) i dorsal kolonne av ryggmargen. Som kontroller blir noen av dyrene narre-injisert med sterilt saltvann. Dyrene blir merket ved klipping av enten tær eller ører for å skjelne mellom de eksperimentelle gruppene. Etter injeksjon av cellesuspensjonen blir såret lukket ved anvendelse av sting eller klemmer av rustfritt stål og dyrene blir restituert ved oppvarming på et kirurgisk varmeteppe og deretter brakt tilbake til deres mødre.
Dyrene far overleve i 3 uker etter injeksjonen og blir deretter sterkt bedøvet med nembutal (150 mg/kg) og perfusert gjennom venstre ventrikkel. Vevene blir deretter dissekert fra dyret og fiksert i 1-3 dager med 4% paraformaldehyd i PBS og 95% etanol/5% eddiksyre og deretter bearbeidet for epoksyinnstøpning. En mikron plastsnitt blir skåret med et ultramikrotom og varmeforseglet på glassmikroskopbiter og enten farget med alkalisk toluidin blå (en histologisk farge for myelin) eller bearbeidet for immuncytokjemi for hovedmyelinproteiner. På grunn av at ryggmargen til myelinreduserte rotter nesten fullstendig mangler myelin vil myelin dannet ved eller nære ved injeksjonssetet være oppnådd fra implanterte celler. Det er mulig at injeksjonsprosessen kan føre til introduksjon av Schwan celler (myelinerende celler til det perifere nervesystemet) i ryggmargen. Disse cellene har evne til å danne myelin innenfor sentralnervesystemet, men kan lett bli skjelnet fra oligodendrocytter ved anvendelse av enten lysmikroskopi eller immuncytokjemi for CNS myelinelementer. Som angitt ovenfor er det vanligvis en liten mengde CNS myelin i ryggmargen hos myelinredusert rotte. Dette myelinet kan bli sjelnet fra normalt donormyelin basert på mutasjon innenfor genet for hoved CNS myelinprotein, proteolipidprotein (PLP).
Myelinet hos muelinreduserte rotter er ikke imunreaktivt for PLP, men det er donormyelin.
Myelinerte aksoner finnes ikke bare ved injeksjonsseter, men også i ved siden av liggende vertebraldeler som indikerer at de injiserte forløpercellene både migrerer bort fra injeksjonsstedet og differensierer til oligodendrocytter for å danne myelin.
Eksempel 3
Remyelinering i human neuromyelitis optika
Neuromyelitis optika er en tilstand som involverer demyelinering av hovedsakelig ryggmargen og den optiske nerve. Begynnelsen er vanligvis akutt og i 50% av tilfellene inntrer døden i løpet av måneder. Alvorligheten av demyelineringen samt lesjonssetene kan bli bekreftet ved magnetisk resonans billeddannelse (MRI).
Forløpercellene blir dannet fra føtalt humant vev ifølge fremgangsmåten beskrevet i eksempel 1. Cellene blir injisert stereotaktisk i den hvite substansen i ryggmargen i nærheten av plakk visualisert ved MRI. Celler blir også injisert rundt den optiske nerven om nødvendig. Boosterinjeksjoner kan bli utført etter behov.
Eksempel 4
Remyelinering i human Plizaeus-Merzbacher sykdom Pelizaeus-Merzbacher sykdom er en tilstand som involverer demyelinering av CNS. Alvorlighetsgraden til demyelineringen samt lesjonssetene kan bli bekreftet ved magnetisk resonansbilleddannelse (MRI).
Forløperceller blir dannet fra føtalt humant vev ifølge fremgangsmåten beskrevet i eksempel 1. Cellene blir stereotaktisk injisert i den hvite substansen til ryggmargen i nærheten av plakk visualisert ved MRI. Celler blir også injisert rundt den optiske nerven etter behov. Boosterinjeksjoner kan bli utført etter behov.
Claims (5)
1.
Anvendelse av isolerte multipotente neuralstamceller som prolifererer i et kulturmedium inneholdende epidermal vekstfaktor TGFcc eller TGFp for å produsere forløperceller der cellene høstes fra en donor, for fremstilling av et cellepreparat for å oppnå remyelinering av et demyelinert akson in vivo.
2.
Anvendelse ifølge krav 1, der kulturmediet inneholder epidermal vekstfaktor.
3.
Anvendelse ifølge krav 1, der forløpercellene er i neurosfærer.
4.
Anvendelse ifølge krav 1 eller 2, der remyelinering effektueres hos en pasient som har en demyelinerende sykdom.
5.
Anvendelse ifølge krav 4 der sykdommen er valgt fra gruppen bestående av multippel sklerose, disseminert perivenøs enkefalomyelitt, neuromyelitis optika, konsentrisk sklerose, akutt disseminert enkefalomyelitides, post enkefalomyelitt, akutt hemorragisk leukoenkefalopati, progressiv multifokal leukoenkefalopati, idiopatisk polyneuritt, difterisk neuropati Pelizaeus-Merzbauer sykdom, neuromyelitis optika, diffus cerebral sklerose, sentral pontine myelinosis og leukodystrofi.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US96181392A | 1992-10-16 | 1992-10-16 | |
| PCT/CA1993/000428 WO1994009119A1 (en) | 1992-10-16 | 1993-10-15 | Remyelination using neural stem cells |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO951378L NO951378L (no) | 1995-04-07 |
| NO951378D0 NO951378D0 (no) | 1995-04-07 |
| NO324411B1 true NO324411B1 (no) | 2007-10-08 |
Family
ID=25505054
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO19951378A NO324411B1 (no) | 1992-10-16 | 1995-04-07 | Anvendelse av isolerte mulitipotente nervestamceller som prolifererer i et kulturmedium for fremstilling av et cellepreparat for a oppna remyelinering av et demyelinert akson in vivo. |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0664832B1 (no) |
| JP (1) | JPH08502172A (no) |
| KR (1) | KR950703639A (no) |
| AT (1) | ATE221117T1 (no) |
| AU (1) | AU683023B2 (no) |
| CA (1) | CA2147162C (no) |
| DE (1) | DE69332147T2 (no) |
| DK (1) | DK0664832T3 (no) |
| ES (1) | ES2180547T3 (no) |
| FI (1) | FI951677A (no) |
| NO (1) | NO324411B1 (no) |
| PT (1) | PT664832E (no) |
| WO (1) | WO1994009119A1 (no) |
Families Citing this family (43)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5849553A (en) * | 1992-07-27 | 1998-12-15 | California Institute Of Technology | Mammalian multipotent neural stem cells |
| US5928947A (en) * | 1992-07-27 | 1999-07-27 | California Institute Of Technology | Mammalian multipotent neural stem cells |
| US6001654A (en) * | 1994-01-28 | 1999-12-14 | California Institute Of Technology | Methods for differentiating neural stem cells to neurons or smooth muscle cells using TGT-β super family growth factors |
| AU3338595A (en) * | 1994-07-29 | 1996-03-04 | Dalhousie University | Propagation and inducible differentiation of human fetal central nervous system progenitor cells |
| GB9422643D0 (en) * | 1994-11-08 | 1995-01-04 | Stringer Bradley M J | Neural cell lines |
| CN1170435A (zh) * | 1994-11-14 | 1998-01-14 | 纽罗斯菲里斯控股有限公司 | 神经干细胞增殖的调节 |
| US6969608B1 (en) | 1996-08-26 | 2005-11-29 | Mcgill University | Pharmaceuticals containing multipotential precursor cells from tissues containing sensory receptors |
| US6787355B1 (en) | 1996-08-26 | 2004-09-07 | Mcgill University | Multipotent neural stem cells from peripheral tissues and uses thereof |
| US6713247B1 (en) | 1996-09-03 | 2004-03-30 | Signal Pharmaceuticials, Inc. | Human CNS cell lines and methods of use therefor |
| CA2216439A1 (en) * | 1996-09-25 | 1998-03-25 | Derek Van Der Kooy | Pharmaceuticals containing retinal stem cells |
| US20020123143A1 (en) | 1997-08-22 | 2002-09-05 | Jean Toma | Multipotent stem cells from peripheral tissues and uses thereof |
| US5968829A (en) * | 1997-09-05 | 1999-10-19 | Cytotherapeutics, Inc. | Human CNS neural stem cells |
| US8263402B1 (en) * | 1998-10-19 | 2012-09-11 | Cornell Research Foundation, Inc. | Method for isolating and purifying oligodendrocytes and oligodendrocyte progenitor cells |
| US6238922B1 (en) * | 1999-02-26 | 2001-05-29 | Stemcells, Inc. | Use of collagenase in the preparation of neural stem cell cultures |
| WO2001053503A1 (en) | 2000-01-18 | 2001-07-26 | Cornell Research Foundation, Inc. | Neural progenitor cells from hippocampal tissue and a method for isolating and purifying them |
| US7544509B2 (en) | 2000-01-24 | 2009-06-09 | Mcgill University | Method for preparing stem cell preparations |
| JP2003521910A (ja) | 2000-02-11 | 2003-07-22 | ザ スキーペンズ アイ リサーチ インスティテュート インコーポレイテッド | 網膜幹細胞の分離及び移植 |
| US6683108B1 (en) | 2000-03-30 | 2004-01-27 | Curis, Inc. | Agonists of hedgehog signaling pathways and uses related thereto |
| US7115653B2 (en) | 2000-03-30 | 2006-10-03 | Curis, Inc. | Small organic molecule regulators of cell proliferation |
| US8852937B2 (en) | 2000-03-30 | 2014-10-07 | Curis, Inc. | Small organic molecule regulators of cell proliferation |
| US6613798B1 (en) | 2000-03-30 | 2003-09-02 | Curis, Inc. | Small organic molecule regulators of cell proliferation |
| AU2001283504A1 (en) * | 2000-07-27 | 2002-02-13 | The Mclean Hospital Corporation | Cell implantation therapy for neurological diseases or disorders |
| US6908732B2 (en) | 2000-10-13 | 2005-06-21 | President & Fellows Of Harvard College | Compounds and methods for regulating cell differentiation |
| JP2002204691A (ja) * | 2001-01-09 | 2002-07-23 | Japan Science & Technology Corp | 神経細胞再髄鞘化のための移植用細胞キット |
| WO2002069975A1 (en) * | 2001-03-02 | 2002-09-12 | Stem Cell Therapeutics Inc. | Use of estrogen to induce neural stem cell increase |
| JP3993560B2 (ja) * | 2001-08-30 | 2007-10-17 | ステム セル セラピューティクス インコーポレイテッド | 神経幹細胞の分化およびその治療用途 |
| EP1430114B1 (en) | 2001-09-14 | 2012-01-18 | Stem Cell Therapeutics Inc. | Prolactin induced increase in neural stem cell numbers and therapeutical use thereof |
| WO2003027247A2 (en) | 2001-09-24 | 2003-04-03 | Sangamo Biosciences, Inc. | Modulation of stem cells using zinc finger proteins |
| US20050019910A1 (en) * | 2001-12-13 | 2005-01-27 | Mutsumi Takagi | Human cell culture medium and culture method |
| US7687505B2 (en) * | 2002-01-14 | 2010-03-30 | Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Use of modified pyrimidine compounds to promote stem cell migration and proliferation |
| ATE404200T1 (de) | 2002-04-22 | 2008-08-15 | Univ Johns Hopkins Med | Modulatoren von hedgehog signalpfaden, zusammensetzungen und verwandte verwendungen |
| CA2492542A1 (en) * | 2002-07-30 | 2004-02-05 | Stem Cell Therapeutics Inc. | Oligodendrocyte production from multipotent neural stem cells |
| WO2004053084A2 (en) | 2002-12-09 | 2004-06-24 | The Mclean Hospital Corporation | Dopaminergic neurons differentiated from embryonic cells for treating neurodegenerative diseases |
| ATE493504T1 (de) | 2003-09-12 | 2011-01-15 | Stemcell Technologies Inc | Test für neurale koloniebildung |
| CA2556266A1 (en) | 2004-02-13 | 2005-08-25 | Stem Cell Therapeutics Corp. | Use of luteinizing hormone (lh), and chorionic gonadotropin (hcg) for proliferation of neural stem cells and neurogenesis |
| GB0509748D0 (en) * | 2005-05-13 | 2005-06-22 | Univ Glasgow | Materials and methods relating to cell based therapies |
| AU2006297041A1 (en) | 2005-09-27 | 2007-04-05 | Stem Cell Therapeutics Corp. | Oligodendrocyte precursor cell proliferation regulated by prolactin |
| WO2007106986A1 (en) | 2006-03-17 | 2007-09-27 | Stem Cell Therapeutics Corp. | Dosing regimes for lh or hcg and epo for treatment of neurological disorders |
| US20110218176A1 (en) | 2006-11-01 | 2011-09-08 | Barbara Brooke Jennings-Spring | Compounds, methods, and treatments for abnormal signaling pathways for prenatal and postnatal development |
| EP3187581A1 (en) | 2008-12-23 | 2017-07-05 | BOCO Silicon Valley, Inc. | Target populations of oligodendrocyte precursor cells and methods of making and using same |
| EP2380972B1 (en) | 2010-04-19 | 2012-09-19 | Technische Universität Dresden | Methods and compositions for the expansion of somatic stem cells and progenitor cells |
| US10758572B2 (en) | 2012-02-17 | 2020-09-01 | The Schepens Eye Research Institute | Phenotype profile of human retinal progenitor cells |
| WO2017172976A1 (en) * | 2016-03-29 | 2017-10-05 | The Regents Of The University Of California | Methods for promoting oligodendrocyte regeneration and remyelination |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1991002003A1 (en) * | 1989-08-04 | 1991-02-21 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods and compositions; purified preparation of neural progenitor regulatory factor |
| WO1991009936A1 (en) * | 1989-12-26 | 1991-07-11 | Hana Biologics, Inc. | Proliferated neuron progenitor cell product and process |
| ES2198404T5 (es) * | 1991-07-08 | 2008-05-01 | Neurospheres Holdings Ltd. | Celulas progenitoras neurales que responden a factor de crecimiento y que se pueden hacer proliferar in vitro. |
-
1993
- 1993-10-15 CA CA002147162A patent/CA2147162C/en not_active Expired - Fee Related
- 1993-10-15 EP EP93922482A patent/EP0664832B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-10-15 DK DK93922482T patent/DK0664832T3/da active
- 1993-10-15 WO PCT/CA1993/000428 patent/WO1994009119A1/en active IP Right Grant
- 1993-10-15 KR KR1019950701392A patent/KR950703639A/ko not_active Application Discontinuation
- 1993-10-15 AU AU51474/93A patent/AU683023B2/en not_active Ceased
- 1993-10-15 PT PT93922482T patent/PT664832E/pt unknown
- 1993-10-15 AT AT93922482T patent/ATE221117T1/de active
- 1993-10-15 ES ES93922482T patent/ES2180547T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1993-10-15 DE DE69332147T patent/DE69332147T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1993-10-15 JP JP6509473A patent/JPH08502172A/ja active Pending
-
1995
- 1995-04-07 FI FI951677A patent/FI951677A/fi unknown
- 1995-04-07 NO NO19951378A patent/NO324411B1/no unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH08502172A (ja) | 1996-03-12 |
| WO1994009119A1 (en) | 1994-04-28 |
| ES2180547T3 (es) | 2003-02-16 |
| EP0664832A1 (en) | 1995-08-02 |
| AU683023B2 (en) | 1997-10-30 |
| CA2147162A1 (en) | 1994-04-28 |
| PT664832E (pt) | 2002-12-31 |
| DE69332147D1 (de) | 2002-08-29 |
| DE69332147T2 (de) | 2002-12-12 |
| AU5147493A (en) | 1994-05-09 |
| NO951378L (no) | 1995-04-07 |
| ATE221117T1 (de) | 2002-08-15 |
| KR950703639A (ko) | 1995-09-20 |
| DK0664832T3 (da) | 2002-11-11 |
| EP0664832B1 (en) | 2002-07-24 |
| FI951677A0 (fi) | 1995-04-07 |
| NO951378D0 (no) | 1995-04-07 |
| FI951677A (fi) | 1995-04-07 |
| CA2147162C (en) | 2002-04-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU683023B2 (en) | Remyelination using neural stem cells | |
| EP0594669B9 (en) | Growth factor-responsive neural progenitor cells which can be proliferated in vitro. | |
| JP4023822B2 (ja) | ドーパミン作動性細胞のインビトロ誘導 | |
| AU716811B2 (en) | Regulation of neural stem cell proliferation | |
| ES2194016T5 (es) | Factores biologicos y celulas germinales neurales. | |
| Lachapelle et al. | Transplantation of CNS fragments into the brain of shiverer mutant mice: Extensive myelination by implanted oligodendrocytes: I. Immunohistochemical studies | |
| EP1261357B1 (en) | Isolation and transplantation of retinal stem cells | |
| US20020098585A1 (en) | Hypoxia-mediated neurogenesis | |
| AU2001234998A1 (en) | Isolation and transplantation of retinal stem cells | |
| Sakaguchi et al. | Transplantation of neural progenitor cells into the developing retina of the Brazilian opossum: an in vivo system for studying stem/progenitor cell plasticity | |
| WO1991009936A1 (en) | Proliferated neuron progenitor cell product and process | |
| WO2001076507A2 (en) | Use of oxygen carriers to improve grafted cell survival in neural transplantation | |
| Madarász et al. | In vitro formation of type 2 astrocytes derived from postnatal rat hypothalamus or cerebral cortex | |
| Hammang et al. | Transplantation of epidermal growth factor-responsive neural stem cell progeny into the murine central nervous system | |
| WO1999055838A1 (en) | Compositions and methods for the characterization and transplantation of mammalian retinal stem cells | |
| CA2399589A1 (en) | Novel growth factor-responsive progenitor cells which can be proliferated in vitro | |
| Dobrenis | Preparation of fetal rat hindbrain neuronal cultures and effects of an astrocyte-derived trophic factor | |
| MXPA97003493A (en) | In vitro induction of dopaminergi cells |