NO139503B - Reagens for bestemmelse av et totale bilirubininnhold i kroppsvaesker paa basis av sulfanilsyre - Google Patents
Reagens for bestemmelse av et totale bilirubininnhold i kroppsvaesker paa basis av sulfanilsyre Download PDFInfo
- Publication number
- NO139503B NO139503B NO74740089A NO740089A NO139503B NO 139503 B NO139503 B NO 139503B NO 74740089 A NO74740089 A NO 74740089A NO 740089 A NO740089 A NO 740089A NO 139503 B NO139503 B NO 139503B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- bilirubin
- reagent
- determination
- serum
- content
- Prior art date
Links
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title claims description 22
- HVBSAKJJOYLTQU-UHFFFAOYSA-N 4-aminobenzenesulfonic acid Chemical compound NC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 HVBSAKJJOYLTQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 16
- 229950000244 sulfanilic acid Drugs 0.000 title claims description 14
- 239000007788 liquid Substances 0.000 title 1
- 238000008050 Total Bilirubin Reagent Methods 0.000 claims description 4
- 229940023964 caffeine and sodium benzoate Drugs 0.000 claims description 4
- JWBPVFVNISJVEM-UHFFFAOYSA-M sodium caffeine benzoate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1.CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N=CN2C JWBPVFVNISJVEM-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 claims description 2
- BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N Bilirubin Chemical compound N1C(=O)C(C)=C(C=C)\C1=C\C1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(\C=C/3C(=C(C=C)C(=O)N\3)C)N2)CCC(O)=O)N1 BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N 0.000 description 44
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 19
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 17
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 14
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 7
- RYYVLZVUVIJVGH-UHFFFAOYSA-N caffeine Chemical compound CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N=CN2C RYYVLZVUVIJVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- LPHGQDQBBGAPDZ-UHFFFAOYSA-N Isocaffeine Natural products CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N(C)C=N2 LPHGQDQBBGAPDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960001948 caffeine Drugs 0.000 description 3
- VJEONQKOZGKCAK-UHFFFAOYSA-N caffeine Natural products CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1C=CN2C VJEONQKOZGKCAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000000664 diazo group Chemical group [N-]=[N+]=[*] 0.000 description 3
- WXMKPNITSTVMEF-UHFFFAOYSA-M sodium benzoate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 WXMKPNITSTVMEF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 235000010234 sodium benzoate Nutrition 0.000 description 3
- 239000004299 sodium benzoate Substances 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 2
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- -1 hydroxylamine compound Chemical class 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000008789 Direct Bilirubin Methods 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000000987 azo dye Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 150000002443 hydroxylamines Chemical class 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 238000005554 pickling Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 229960003885 sodium benzoate Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/72—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood pigments, e.g. haemoglobin, bilirubin or other porphyrins; involving occult blood
- G01N33/728—Bilirubin; including biliverdin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
Bilirubin er et farvestoff i blodet som kan- tilbakeføres
på den naturlige.spaltning av blodlegemér. Den utskilles over, leveren og gallen. Mens små mengder av bilirubin i serum er helt:
normalt, .indikerer større verdier en forstyrrelse av utsondrings-systemet i leveren og gallen. En i lengre tid kjent metode for bestemmelse av bilirubin . i serum er koblingen av denne substans til diazotert sulfanilsyre. Man skiller herved mellom bilirubin som med en gang kan kobles
(= direkte bilirubin), og bilirubin som først må frigis ved hjelp av en akselerator for å kunne tre inn i koblingsreaksjonsn (= indirekte bilirubin). For de "fleste diagnostiske tilfeller er det imidlertid tilstrekkelig å bestemme den totale bilirubin. Man bestemmer altså sammen direkte og indirekte bilirubin, idet man utfører.bestemmelsen i nærvær av en akselerator. En kjent, ofte -anvendt akselerator er en oppløsning av koffein og natriumbenzoat. De hittil vanlige bilirubinbestemmelser har den ulempe at ferdige oppløsninger av diazotert sulfanilsyre bare er holdbare en kort tid. Man må derfor hver gang påny før bestemmelsen, preparere den såkalte diazonløsning; enten ved at man tilsetter en oppløsning av natriumnitritt til en surgjort oppløsning av sulfanilsyre og.lar det således dannede "diazoreagens" innvirke på blandingen av akselerator bg.serum, eller ved at mån først fremstiller i.under-søkelsesrøret en liten mengde av diazoreagenset ved blanding av tilsvarende små mengder av sulfanilsyre og natriumnitrittoppløsning og derefter tilsetter serum og akséierator. I hvert av dissé tilfeller er det nødvendig med minst ett særlig arbeidstrinn (pipettering) for fremstilling av diazoreagenset.
>••-: '1 I 1 tysk'voffentiiggjørelsesskrift 2.016.555 beskrives / anvendelse av en hydroksylaminforbindelse ved bilirubinundersøkelse.
Det fremheves at tilsetning av hydroksylaminsaltet stabiliserer farven på det azobilirubin som dannes ved innvirkning av reagens-oppløsningen, og forhindrer dessuten reaksjon, med ubundet . .bilirubin efter tilsetning av alkali. Det er der. således tale om .en spesiell metode for bestemmelse av det bundne bilirubin, hvor det som reagensoppløsning anvendes en oppløsning med vanlig : sammensetning bestående av koffein, natriumbenzoat, sulfanilsyre og en nitrittoppløsning.
, Det er nå overraskende funnet at man kan innspare minst " én pipettering hvis man blander en akselerator i form av e_n_opp-løsning av koffein og natriumbenzoat, med sulfanilsyren og over-fører denne holdbare blanding ved tilsetning av en dråpe av natriumnitritt-oppløsning i et bruksferdig farvereagens for bestemmelse av det totale bilirubininnhold. Til dette reagens må man bare tilsette det serum som skal undersøkes for å bevirke koblingen av den i serumet tilstedeværende bilirubin til det tilsvarende azofarvestoff. Farveintensiteten av prøven represen-terer et mål for bilirubinspeilet i serumet.
I henhold til oppfinnelsen tilveiebringes et reagens for bestemmelse av det totale bilirubininnhold i kroppsvæsker på basis av sulfanilsyre. Reagenset karakteriseres ved at det foruten sulfanilsyren inneholder den for gjennomføring av bestemmelsen nødvendige tilsetning av koffein og natriumbenzoat som i og for seg kjente akseleratorer i sur, vandig oppløsning.
At denne blandingen er vellykket, er desto mer overraskende da blandingen akseleråtor/natriumnitritt ved tilsetning av sulfanilsyre ikke fører til dannelse av et koblingsdyktig bilirubiri-reagens. Reagenset kan eventuelt inneholde et stabiliseringsmiddel, som i og for seg kjent, f.eks. trietanolamin.
En reagensoppløsning ifølge oppfinnelsen kan f.eks. fremstilles av 0,1-0,3 mol koffein, 0,005-0,02 mol sulfanilsyre, 0,3-0,6 mol natriumbenzoat og eventuelt 0,1-0,3 mol av en fortrinns-vis organisk base, f.eks. trietanolamin, som stabiliseringsmiddel. Disse stoffer bringes i de angitte mengder ved tilsetning av vann til et volum på 1 liter og surgjøres med en mineralsyre, f.eks. en halogenhydrogensyre, fosforsyre eller salpetersyre til en betydelig sur reaksjon...Den tilsatte nitritt-oppløsning kan foreligge i 1-9 molar konsentrasjon.
Reagenset ifølge oppfinnelsen for bestemmelse av bilirubin har den fordel at man ved siden av pipetteringen av serum bare trenger
en avmålt mengde av reagenset, da nitritt-oppløsningen kan til-. settes fra en dråpeflaske. De herved mulige forskjeller i dråpe-størrelsen har bare en neglisjerbar innvirkning på resultatet. Anvendelse av reagenset betyr derfor en vesentlig tids-besparelse bg en usedvanlig stor økning av nøyaktigheten. ,"\ - Presisjonen er her tre ganger .større enn ved de hittil vanlige , bestemmelsesmetoder. Dette kommer til uttrykk ved den.relative standardavvikelse (variasjonskoeffisient) på ± 0,60%.for frem-gangsmåten ifølge oppfinnelsen, mens \ deri ved den vanlige fremgangs-måte utgjør ± 2,0% tii ± 3,0%. 1 v'\
Dessuten er det mulig å ha reagenset allerede i avmålt mengde i en flaske eller kolbe, så at brukeren bare må tilsette en dråpe av nitritt-oppløsningen, og innpipettere serum som skal undersøkes. Anvendelsen av dette reagens i analyseautomater betyr likeledes en vesentlig forenkling av innretningen for bestemmelse av bilirubin. Kålibreringskurven forløper rettlinjet inntil over.
20 mg bilirubin pr. 100 ml serum.
Eksempel
For å fremstille bilirubinreagenset ifølge oppfinnelsen - - tilsetter man 0,25 mol saltsyre til 0,2 mol koffein, 0,014 mol sulfanilsyre, 0,42 mol natriumbenzoat og 0,175 mol trietanolamin som oppløses i vann til 1 liter. I tillegg tilbereder man en 8,7-molar natriumnitritt-oppløsning.
Gjennomføringen av analysen forløper som følger:
2,0 ml bilirubinreagens blandes med 1 dråpe (0,05 ml) natriumnitritt-oppløsning og tilsettes nøyaktig 0,2 ml serum.
Blindverdiprøvén for eliminering av egenfarven og en eventuell.uklarhet av serum, er sammensatt av 2,0 ml bilirubinreagens og 0,2 ml serum uten natriumnitrittoppløsning. Den aktuelle prøve blir målt mot blindverdien av serum i fotometer ved Hg 546 i løpet av 3 minutter efter tilsetning av serum.
For å beregne bilirubininnholdet multipliseres den målte ekstinksjon med den eksperimentelt fundne faktor 13,2.
Resultatet gir bilirubinspeilet i mg/100 ml serum.
Beregningseksempel: ekstinksjon = 0,128
0,128 • 13,2 = 1,69 mg/bilirubin/100 ml serum.
Claims (1)
1. Reagens for bestemmelse av det totale bilirubininnhold i kroppsvæsker på basis av sulfanilsyre, k ar å k t e r i s e r t ved at det foruten sulfanilsyren inneholder den.for gjennomføring av bestemmelsen nødvendige tilsetning av koffein og natriumbenzoat som i og for seg kjente akseleratorer i sur, vandig oppløsning.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE2301687A DE2301687A1 (de) | 1973-01-13 | 1973-01-13 | Verfahren zur bestimmung des gesamtbilirubins in koerperfluessigkeiten |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO740089L NO740089L (no) | 1974-07-16 |
| NO139503B true NO139503B (no) | 1978-12-11 |
| NO139503C NO139503C (no) | 1979-03-21 |
Family
ID=5868966
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO740089A NO139503C (no) | 1973-01-13 | 1974-01-11 | Reagens for bestemmelse av et totale bilirubininnhold i kroppsvaesker paa basis av sulfanilsyre |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| AT (1) | AT330366B (no) |
| BE (1) | BE809672A (no) |
| CH (1) | CH590477A5 (no) |
| DE (1) | DE2301687A1 (no) |
| ES (1) | ES422249A1 (no) |
| FI (1) | FI55912C (no) |
| FR (1) | FR2325044A1 (no) |
| IT (1) | IT1015804B (no) |
| NL (1) | NL7400394A (no) |
| NO (1) | NO139503C (no) |
| SE (1) | SE414971B (no) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4412005A (en) * | 1979-10-25 | 1983-10-25 | Eastman Kodak Company | Determination of total bilirubin |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3652222A (en) * | 1969-04-07 | 1972-03-28 | American Monitor Corp | Bilirubin assay |
-
1973
- 1973-01-13 DE DE2301687A patent/DE2301687A1/de active Pending
- 1973-12-18 FI FI3897/73A patent/FI55912C/fi active
-
1974
- 1974-01-02 AT AT874*BA patent/AT330366B/de not_active IP Right Cessation
- 1974-01-11 SE SE7400396A patent/SE414971B/xx unknown
- 1974-01-11 NL NL7400394A patent/NL7400394A/xx not_active Application Discontinuation
- 1974-01-11 FR FR7401025A patent/FR2325044A1/fr active Granted
- 1974-01-11 NO NO740089A patent/NO139503C/no unknown
- 1974-01-11 IT IT47661/74A patent/IT1015804B/it active
- 1974-01-11 CH CH38374A patent/CH590477A5/xx not_active IP Right Cessation
- 1974-01-11 BE BE139752A patent/BE809672A/xx unknown
- 1974-01-12 ES ES422249A patent/ES422249A1/es not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NO740089L (no) | 1974-07-16 |
| FR2325044A1 (fr) | 1977-04-15 |
| NO139503C (no) | 1979-03-21 |
| ES422249A1 (es) | 1976-04-01 |
| FR2325044B1 (no) | 1978-03-24 |
| FI55912C (fi) | 1979-10-10 |
| DE2301687A1 (de) | 1974-07-18 |
| BE809672A (fr) | 1974-07-11 |
| CH590477A5 (no) | 1977-08-15 |
| AT330366B (de) | 1976-06-25 |
| ATA874A (de) | 1975-09-15 |
| NL7400394A (no) | 1974-07-16 |
| SE414971B (sv) | 1980-08-25 |
| IT1015804B (it) | 1977-05-20 |
| FI55912B (fi) | 1979-06-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Frings et al. | Improved determination of total serum lipids by the sulfo-phospho-vanillin reaction | |
| Robertson et al. | Calcium measurements in serum and plasma—total and ionized | |
| EP1303746B2 (en) | Analysis method and cuvette therefor | |
| US3934977A (en) | Reagent and method for determining total calcium in body fluids | |
| Momose et al. | Organic analysis—XXIII: Determination of blood sugar and urine sugar with 3: 6-dinitrophthalic acid | |
| Jorpes | The colorimetric determination of histidine | |
| US4448889A (en) | Fluid analysis | |
| Fales | Reproducible Periodate Oxidation Method for Determination of Glycogen End-Groups | |
| US4119401A (en) | Total bilirubin assay | |
| US6326208B1 (en) | Assay for total and direct bilirubin | |
| Novozamsky et al. | Automated determination of trace amounts of phosphate in soil extracts using malachite green | |
| CN109580505B (zh) | 一种稳定剂组合物 | |
| US4529708A (en) | Assay for the determination of creatinine | |
| NO139503B (no) | Reagens for bestemmelse av et totale bilirubininnhold i kroppsvaesker paa basis av sulfanilsyre | |
| US4211531A (en) | Colorimetric cholesterol assay | |
| Brückner | Estimation of the direct and total bilirubin in serum investigations and observations by a modified method | |
| US3649198A (en) | Diagnostic method for the determination of uric acid in blood | |
| SU416969A3 (no) | ||
| US4030885A (en) | Bilirubin determination | |
| US4965210A (en) | Stable reagent for determining bilirubin in serum and method of preparation | |
| Salter et al. | Serum'hormonal'iodine in relation to thyroid function and treatment with adrenocorticotrophic hormone (ACTH) | |
| White et al. | Photometric studies on the diazo reaction for serum bilirubin | |
| GB2068541A (en) | Determination of chloride in serum | |
| Athanail et al. | Simplified colorimetric method for true blood glucose | |
| Bradbury | A simplified method for the estimation of sodium |