NO130401B

NO130401B -

Info

Publication number: NO130401B
Application number: NO683031A
Authority: NO
Inventors: B Laine; C Vernet
Original assignee: British Petroleum Co
Priority date: 1962-12-31
Filing date: 1968-08-01
Publication date: 1974-08-26

Abstract

Fremgangsmåte ved dyrking av gjær i et. hydrokarbon-medium.Foreliggende oppfinnelse angår en fremgangsmåte ved dyrking av gjær, hvorved rettkjedede hydrokarboner helt eller delvis kan fjernes fra blandinger av disse hydrokarboner med andre hydrokarboner.Det er kjent at aerob dyrking av mikroorganismer på et hydrokarbon-substrat og i nærvær av et vandig næringsmedium, kan foretas under omrøring. Under slike betingelser vil hydrokarbonet være tilstede i den vandige fasen i form av små partikler. Ved slike kjente metoder dannes det dispersjoner i selve gjæringskaret.. Fra Biochemical Engineering, London 1958, side 89, 3. avsnitt er det kjent at det i en hydrokarbon-gjæringsprosess er.fordelaktig å dispergere hydrokarbonet som en emulsjon i det vandige næringsmedium.Procedure for growing yeast in a. The present invention relates to a process for culturing yeast, in which straight-chain hydrocarbons can be completely or partially removed from mixtures of these hydrocarbons with other hydrocarbons. It is known that aerobic cultivation of microorganisms on a hydrocarbon substrate and in the presence of an aqueous nutrient medium, can be made while stirring. Under such conditions, the hydrocarbon will be present in the aqueous phase in the form of small particles. By such known methods dispersions are formed in the fermentation vessel itself. From Biochemical Engineering, London 1958, page 89, 3rd paragraph, it is known that in a hydrocarbon fermentation process it is advantageous to disperse the hydrocarbon as an emulsion in the aqueous nutrient medium.

Description

I samme referanse side 277-278 angis det videre at mikroorganismer kan virke som et emulgeringsmiddel ved ekstraksjon av fermenterings-væsker ved hjelp av oppløsningsmidler. In the same reference, pages 277-278, it is further stated that microorganisms can act as an emulsifier when extracting fermentation liquids using solvents.

Ved foreliggende oppfinnelse dannes det en dispersjbn av utgangsmaterialet og det flytende medium i blanding med en gjær, utenfor gjæringskaret. Ved å foreta dispergeringen utenfor gjæringskaret i nærvær av gjær er det overraskende funnet at fremstillings-hastigheten av gjæren og av avvokset gassolje økes uten å forandre avvoksingsgraden, sammenlignet med vekst- og avvoksingsgraden i fra-vær av tilsatt gjær i det dispergerte medium. In the present invention, a dispersion of the starting material and the liquid medium is formed in a mixture with a yeast, outside the fermentation vessel. By carrying out the dispersion outside the fermentation vessel in the presence of yeast, it has surprisingly been found that the production rate of the yeast and of dewaxed gas oil is increased without changing the dewaxing degree, compared to the growth and dewaxing degree in the absence of added yeast in the dispersed medium.

Ifølge foreliggende oppfinnelse er det således tilveiebragt According to the present invention, it is thus provided

en fremgangsmåte ved dyrking av gjær i nærvær av et hydrokarbon-utgangsmateriale, et vandig næringsmedium og en gass inneholdende fritt oksygen, idet hydrokarbon-utgangsmaterialet er tilstede i gjæringskaret i form av partikler dispergert i den vandige fasen, og denne fremgangsmåte er kjennetegnet ved at hydrokarbon-utgangsmaterialet før innføringen i gjæringskaret dispergeres i det vandige medium i nærvær av gjær til en partikkelstørrelse på høyst 10 mikron. a method for growing yeast in the presence of a hydrocarbon starting material, an aqueous nutrient medium and a gas containing free oxygen, the hydrocarbon starting material being present in the fermentation vessel in the form of particles dispersed in the aqueous phase, and this method is characterized by the hydrocarbon - the starting material before introduction into the fermentation vessel is dispersed in the aqueous medium in the presence of yeast to a particle size of no more than 10 microns.

Gjæren som er tilstede i matestrømmen til gjæringskaret og gjæren som vokser i gjæringskaret kan være den samme, eller de kan være forskjellige. Tilstedeværelse av gjær sammen med dispergert utgangsmateriale minsker partiklenes tilbøyelighet til å agglomerere. The yeast present in the feed stream to the fermenter and the yeast growing in the fermenter may be the same or they may be different. The presence of yeast together with dispersed starting material reduces the tendency of the particles to agglomerate.

Man kan benytte en del av gjæren som utvinnes fra gjæringskaret for fremstilling av matestrømmen. Part of the yeast recovered from the fermentation vessel can be used to produce the feed stream.

Fortrinnsvis blir hele den fra gjæringskaret uttatte produkt-strøm ført til en sentrifuge, i hvilken det utvinnes: (a) en fase som inneholder hovedmengden av den i produktstrømmen værende gjær, (b) en vandig fase som inneholder en liten andel av gjæren, og (c) eventuelt - alt etter hydrokarbon-utgangsmaterialets natur - en hydrokarbonfase. Preferably, the entire product stream withdrawn from the fermentation vessel is taken to a centrifuge, in which: (a) a phase containing the main amount of the yeast in the product stream is recovered, (b) an aqueous phase containing a small proportion of the yeast, and (c) optionally - depending on the nature of the hydrocarbon starting material - a hydrocarbon phase.

Iallfall en del av den vandige fase som inneholder noe av gjæren kan så anvendes som en kontinuerlig fase, i hvilken hydrokarbon-utgangsmaterialet dispergeres. Da operasjonen med dispergering av utgangsmaterialet kan medføre noe destruering av gjæren eller endog av de enkelte celler, er det en fordel å benytte et system i hvilket en del av den gjær som anvendes for å stabilisere dispersjonen'bringes til å passere forbi dispergeringstrinnet, og denne del bør være den andel som (på grunn av de større agglomerater som At least part of the aqueous phase containing some of the yeast can then be used as a continuous phase, in which the hydrocarbon starting material is dispersed. As the operation of dispersing the starting material may entail some destruction of the yeast or even of the individual cells, it is an advantage to use a system in which part of the yeast used to stabilize the dispersion is made to pass past the dispersing step, and this part should be the proportion which (due to the larger agglomerates which

den inneholder) er den del som lettest kan skades. it contains) is the most easily damaged part.

Det kan benyttes en hvilken som helst egnet fremgangsmåte for dispergering av utgangsmaterialet i et flytende medium. Blant egnede metoder kan nevnes bruk av (i) en injektordyse, (ii) bruk av en kolloidmølle, f.eks. en Hurrel-homogenisator. Any suitable method for dispersing the starting material in a liquid medium can be used. Suitable methods include the use of (i) an injector nozzle, (ii) the use of a colloid mill, e.g. a Hurrel homogenizer.

Fortrinnsvis består utgangsmaterialet av et rettkjedet hydrokarbon eller av en blanding av hydrokarboner som inneholder et rettkjedet hydrokarbon. Fortrinnsvis er hydrokarbonet av C-^-typen eller høyere type. Hensiktsmessig kan det benyttes en hydrokarbonfraksjon som er fått fra petroleum. Preferably, the starting material consists of a straight-chain hydrocarbon or of a mixture of hydrocarbons containing a straight-chain hydrocarbon. Preferably, the hydrocarbon is of the C-3 type or higher type. Appropriately, a hydrocarbon fraction obtained from petroleum can be used.

Det er velkjent at visse petroleumfraksjoner, særlig gassoljer, inneholder rettkjedede hydrokarboner, hovedsakelig parafiner som er voksarter og som har en uheldig innflytelse på fraksjonens hellepunkt, dvs. at hvis disse hydrokarboner fjernes helt eller delvis, senkes fraksjonenes hellepunkt. Vanligvis blir vokset fjernet ved utfelling ved tilsetning av oppløsningsmidler, og det voks som opprinnelig fantes i fraksjonen blir da fjernet som sådant, dvs. uten å omdannes til mere verdifulle produkter. It is well known that certain petroleum fractions, especially gas oils, contain straight-chain hydrocarbons, mainly paraffins which are waxes and which have an adverse influence on the fraction's pour point, i.e. if these hydrocarbons are removed in whole or in part, the fraction's pour point is lowered. Usually, the wax is removed by precipitation by the addition of solvents, and the wax that was originally present in the fraction is then removed as such, i.e. without being converted into more valuable products.

De petroleumfraksjoner som koker lavere enn gassoljene, The petroleum fractions that boil lower than the gas oils,

f.eks. tunge naftener og kerosin, inneholder også rettkjedede hydrokarboner som har potensiell verdi for omdannelse til andre produkter, men hittil er i sin alminnelighet utnyttelsen av disse hydrokarboner blitt vanskeliggjort derved at de måtte fjernes fra de petroleumfraksjoner hvori de inneholdtes før de kunne omdannes til andre produkter. e.g. heavy naphthenes and kerosene, also contain straight-chain hydrocarbons that have potential value for conversion into other products, but up until now the utilization of these hydrocarbons has generally been made difficult by the fact that they had to be removed from the petroleum fractions in which they were contained before they could be converted into other products.

Dyrkingen foretas således i nærvær av en petroleumfraksjon Cultivation is thus carried out in the presence of a petroleum fraction

som for én del består av rettkjedede hydrokarboner og som fortrinnsvis har en midlere molekylvekt svarende til minst 10 karbonatomer pr. molekyl, i nærvær av et vandig næringsmedium, og i nærvær av en gass som inneholder fritt oksygen. Fra blandingen fraskilles deretter for det ene gjæren og for det annet en petroleumfraksjon som inneholder en nedsatt mengde av rettkjedede hydrokarboner, eller som er befridd for nevnte rettkjedede hydrokarboner. which for one part consists of straight-chain hydrocarbons and which preferably has an average molecular weight corresponding to at least 10 carbon atoms per molecule, in the presence of an aqueous nutrient medium, and in the presence of a gas containing free oxygen. From the mixture, on the one hand, the yeast and, on the other hand, a petroleum fraction containing a reduced amount of straight-chain hydrocarbons, or which is freed from said straight-chain hydrocarbons, are then separated.

Fremgangsmåten er av særlig verdi i forbindelse med behandling av petroleum-gassoljefraksjoner som inneholder rettkjedede hydrokarboner i form av voks, da man ved'fremgangsmåten får en gassolje som har forbedret hellepunkt, samtidig som vokset omdannes til et verdifullt produkt. The method is of particular value in connection with the treatment of petroleum-gas oil fractions which contain straight-chain hydrocarbons in the form of wax, as the method yields a gas oil with an improved pour point, while the wax is converted into a valuable product.

Som regel vil de rettkjedede hydrokarboner være tilstede As a rule, the straight-chain hydrocarbons will be present

i utgangsmaterialer i form av parafiner, men de kan også være tilstede i form av olefiner. Det kan også nyttes en blanding som inneholder både rettkjedede parafiner og olefiner. in starting materials in the form of paraffins, but they can also be present in the form of olefins. A mixture containing both straight-chain paraffins and olefins can also be used.

Når man dyrker gjæren i nærvær av de foran beskrevne utgangsmaterialer under betingelser som begunstiger veksten av gjæren på bekostning av de rettkjedede hydrokarboner-, blir de andre hydrokarboner, f.eks. isoparafiner, naftener og aromatiske- hydrokarboner ikke metåbolisert,,eller i det høyeste er den mengde som metaboliser-es bare meget liten. When the yeast is cultivated in the presence of the starting materials described above under conditions which favor the growth of the yeast at the expense of the straight-chain hydrocarbons, the other hydrocarbons, e.g. isoparaffins, naphthenes and aromatic hydrocarbons not metabolised, or at most the amount that is metabolised is only very small.

Og videre - til forskjell fra vanlige kjemiske prosesser And further - unlike normal chemical processes

som følger massevirkningsloven - blir den mengde pr. tidsenhet, med hvilken rettkjedede hydrokarboner fjernes, ikke nedsatt i noen vesentlig grad, ettersom innholdet av disse hydrokarboner i den samlede hydrokarbonblanding avtar (unntatt, naturligvis, i de aller siste trinn av fjernelsen). Den prosentvise omdannelse av rettkjedede hydrokarboner kan derfor, hvis det ønskes, holdes på en verdi i nærheten av 100% uten at det derfor behøves noen urimelig langvarig kontakttid for å oppnå små økninger av den nevnte verdi. Dessuten kan en slik høy prosentvis omdannelse oppnås i kontinuerlig drift uten at man behøver å gripe til noen lang reaksjonsbane. which follows the law of mass action - the quantity per unit of time, with which straight-chain hydrocarbons are removed, not reduced to any significant extent, as the content of these hydrocarbons in the overall hydrocarbon mixture decreases (except, of course, in the very last stages of removal). The percentage conversion of straight chain hydrocarbons can therefore, if desired, be kept at a value close to 100% without therefore requiring any unreasonably long contact time to achieve small increases in said value. Moreover, such a high percentage conversion can be achieved in continuous operation without having to resort to any long reaction path.

Hvis denne fremgangsmåte anvendes under betingelser som begrenser metabolismen av de rettkjedede hydrokarboner, er det mulig å arbeide slik at bare en ønsket proporsjon av disse hydrokarboner blir fjernet. If this method is used under conditions that limit the metabolism of the straight-chain hydrocarbons, it is possible to work so that only a desired proportion of these hydrocarbons is removed.

Blant egnede utgangsmaterialer for fremgangsmåten i henhold til oppfinnelsen kan nevnes kerosen, gassoljer og smøreoljer; disse kan være uraffinerte eller være blitt underkastet en eller annen raffineringsbehandling, men bør inneholde en viss mengde rettkjedede hydrokarboner. En egnet petroleumfraksjon .vil inneholde 3-^5 vekt-% rettkjedede hydrokarboner. Suitable starting materials for the method according to the invention include kerosene, gas oils and lubricating oils; these may be unrefined or have undergone some refining treatment, but should contain some amount of straight chain hydrocarbons. A suitable petroleum fraction will contain 3-5% by weight of straight-chain hydrocarbons.

Fortrinnsvis benyttes det en gjær av .familien Cryptococca-ceae, spesielt av underfamilien Cryptococcoideae' , men hvis det ønskes kan man anvende f.eks. ascosporogene gjærarter av familien Saccharomycetoideae. Foretrukne arter av familien Cryptococcoideae er Torulopsis' (også kalt Torula.) og Candida. Foretrukne gjærstammer er de nedennevnte hvor det angis spesifikke stammer som er identi-fisert ved de angivelser som benyttes av Centraal Bureau voor Preferably, a yeast of the family Cryptococca-ceae is used, especially of the subfamily Cryptococcoideae', but if desired, one can use e.g. ascosporogenous yeast species of the family Saccharomycetoideae. Preferred species of the family Cryptococcoideae are Torulopsis' (also called Torula.) and Candida. Preferred yeast strains are those listed below where specific strains are indicated which are identified by the indications used by the Centraal Bureau voor

Schimmel-culture, Baarn, Holland: Schimmel-culture, Baarn, Holland:

Blant de ovennevnte foretrekkes spesielt Candida lipolytica. Et egnet næringsmedium for gjæren har sammensetningen: Among the above, Candida lipolytica is particularly preferred. A suitable nutrient medium for the yeast has the following composition:

Når gjærarter dyrkes under anvendelse av hydrokarbonfrak-sjoner som utgangs- eller matestoff, vokser de under-tiden bare med vanskelighet, og det kan være nødvendig å benytte et inokulum av en gjær som på forhånd er blitt tilvennet eller tilpasset for å vokse på den hydrokarbonfraksjon som det er beregnet på å benyttes i forbindelse med. Ennvidere er det mulig at gjær, selv om de er blitt dyrket i nærvær av et vandig mineralstoffholdig medium som inneholder de passende næringselementer, kan vokse bare med vanskelighet, fordi hydrokarbonfraksjonen ikke inneholder de vekstfaktorer som forefinnes i karbohydrat-utgangsmaterialer med mindre disse vekstfaktorer blir tilsatt. When yeast species are grown using hydrocarbon fractions as starting or feed material, they sometimes grow only with difficulty, and it may be necessary to use an inoculum of a yeast that has been previously acclimated or adapted to grow on that hydrocarbon fraction with which it is intended to be used. Furthermore, it is possible that yeasts, even if grown in the presence of an aqueous mineral-containing medium containing the appropriate nutrient elements, can grow only with difficulty, because the hydrocarbon fraction does not contain the growth factors present in carbohydrate starting materials unless these growth factors are added .

Veksten av den anvendte gjær fremmes hvis det til dyrkings-mediumet tilsettes en meget liten mengde gjærekstrakt (et industrielt produkt som er rikt på B-vitaminer og er oppnådd ved hydrolyse av gjær) eller mere generelt vitaminer av gruppen B og/eller biotin. The growth of the yeast used is promoted if a very small amount of yeast extract (an industrial product rich in B vitamins and obtained by hydrolysis of yeast) or more generally vitamins of the B group and/or biotin is added to the culture medium.

Tilsetningsmengden er fortrinnsvis av størrelsesordenen 25 deler pr. million deler, beregnet på det vandige fermenteringsmedium. Den The amount of addition is preferably of the order of 25 parts per parts per million, calculated on the aqueous fermentation medium. It

kan være større eller'mindre, alt etter de valgte vekstbetingelser. can be larger or smaller, depending on the chosen growth conditions.

Gjærens vekst skjer på bekostning av utgangsmaterialfrak-sjonen under mellomdannelse av stoffer som har en sur funksjon, hovedsakelig fettsyrer, på en slik måte at det vandige mineralmediums pH etter hvert synker. Hvis dette ikke korrigeres, vil veksten stanse forholdsvis snart, og gjærens konsentrasjon i mediumet, dvs. eelle-tettheten, tiltar ikke lenger, slik at det er nådd en såkalt stasjo-nær fase. The growth of the yeast takes place at the expense of the starting material fraction during intermediate formation of substances that have an acidic function, mainly fatty acids, in such a way that the pH of the aqueous mineral medium gradually decreases. If this is not corrected, growth will stop relatively soon, and the yeast's concentration in the medium, i.e. the eelle density, will no longer increase, so that a so-called near-stationary phase has been reached.

Fortrinnsvis blir derfor det vandige næringsmedium holdt Preferably, therefore, the aqueous nutrient medium is kept

på en ønsket pH-verdi ved trinnvis eller kontinuerlig tilføring av et vandig medium som har høy pH-verdi. Vanligvis, og spesielt hvis det anvendes Candida lipolytica, blir pH-verdien i næringsmediumet holdt innenfor området 3_6, fortrinnsvis mellom ^ og 5- Blant egnede alkaliske stoffer som kan tilsettes til vekstblandingen kan nevnes natriumhydroksyd, kaliumhydroksyd, dinatriumhydrogenfosfat og ammoniakk, enten i fri tilstand eller i vandig oppløsning. at a desired pH value by stepwise or continuous addition of an aqueous medium that has a high pH value. Generally, and especially if Candida lipolytica is used, the pH value in the nutrient medium is kept within the range 3_6, preferably between ^ and 5- Among suitable alkaline substances that can be added to the growth mixture, mention can be made of sodium hydroxide, potassium hydroxide, disodium hydrogen phosphate and ammonia, either in the free state or in aqueous solution.

Vekstblandingens optimale temperatur vil variere etter den anvendte gjærtype, og som regel ligge i området 25~35°C. Når det arbeides med Candida lipolytica er det foretrukne temperaturområde 28-32°C. The growth mixture's optimum temperature will vary according to the type of yeast used, and is usually in the range of 25~35°C. When working with Candida lipolytica, the preferred temperature range is 28-32°C.

Opptagelse av oksygen ér nødvendig for gjærens vekst. Oksygenet blir som regel tilført i form av luft..For å vedlikeholde den raske vekst av gjæren bør luften tilføres i form av findelte bobler under omrøring. Luften kan tilføres gjennom en sintret over-flate, men man kan også benytte det såkalte "hvirvel-luftesystem". The uptake of oxygen is necessary for the growth of the yeast. The oxygen is usually supplied in the form of air. To maintain the rapid growth of the yeast, the air should be supplied in the form of finely divided bubbles while stirring. The air can be supplied through a sintered surface, but the so-called "vortex air system" can also be used.

Det ble funnet at ved bruk av gjær av stammen Canida lipolytica og lufting ved "hvirvel-luftesystem" får man en hurtig vekst, slik at generasjonstiden ligger i området 2-5 timer og-at cellekon-sentrasjonen økes til opp til de.12 dobbelte i•løpet av to dager. It was found that by using yeast of the strain Canida lipolytica and aeration by a "whirlpool aeration system" rapid growth is obtained, so that the generation time is in the range of 2-5 hours and that the cell concentration is increased to up to 12 times in•the course of two days.

Ved porsjonsdrift vil gjæren som regel vokse med langsom økning av celletettheten til å begynne med. (Denne vekstperiode er blitt kalt "hvile-fasen"). Deretter vil veksthastigheten tilta (den "eksponentielle-fase") og tilslutt bli konstant (den "stasjonære fase" ). In batch operation, the yeast will usually grow with a slow increase in cell density at first. (This growth period has been called the "resting phase"). Then the growth rate will increase (the "exponential phase") and finally become constant (the "stationary phase").

Som regel vil-man ta ut en gjærporsjon til bruk for starting av den neste driftsporsjon før den eksponentielle fase avsluttes. As a rule, a yeast portion will be taken out for use for starting the next operating portion before the exponential phase ends.

Vekstoperasjonen blir som regel stoppet før avslutningen The growth operation is usually stopped before the end

av den stasjonære fase. På dette trinn blir gjæren som regel skilt fra hovedmengden av vandig næringsmedium og fra hovedmengden av ikke-forbrukt utgangsmaterialfraksjon. of the stationary phase. At this stage, the yeast is usually separated from the main amount of aqueous nutrient medium and from the main amount of non-consumed starting material fraction.

Hvis det ønskes kan gjæren underkastes autolyse før produktet renses videre. If desired, the yeast can be subjected to autolysis before the product is purified further.

I en metode for behandling av produktet blir først hovedmengden av den kontinuerlige vandige fase skilt fra, fortrinnsvis ved sentrifugering eller dekantering. Den fraskilte, vandige fase vil som regel inneholde en større,konsentrasjon av ikke-nærende ioner enn det kan tåles i den strøm som skal føres tilbake i driften, og hvis dette er tilfellet, kan bare en andel av den fraskilte, vandige fase bli sirkulert tilbake. Som regel vil man kunne fra-skille ca. 96 vekt-% av den i produktet tilstedeværende vandige fase, og av denne blir ca. 20 vekt-% kastet. Tilbakesirkuleringsstrømmen oppfriskes med de nødvendige mengder næringsstoffer og returneres til gjæringskaret; om det ønskes kan oppfriskningsstoffene føres til gjæringskaret i form av særskilte strømmer. In a method for treating the product, the bulk of the continuous aqueous phase is first separated, preferably by centrifugation or decantation. As a rule, the separated aqueous phase will contain a greater concentration of non-nutritive ions than can be tolerated in the flow to be fed back into the operation, and if this is the case, only a proportion of the separated aqueous phase can be circulated back. As a rule, you will be able to separate approx. 96% by weight of the aqueous phase present in the product, of which approx. 20% by weight discarded. The recirculation stream is refreshed with the necessary amounts of nutrients and returned to the fermentation vessel; if desired, the refreshing substances can be fed to the fermentation vessel in the form of separate streams.

Ved sentrifugering av produktet fra gjæringskaret utvinnes hensiktsmessig tre fraksjoner, som regnet i rekkefølge med stigende' tetthet er følgende: When centrifuging the product from the fermentation vessel, three fractions are expediently recovered, which, calculated in order of increasing density, are the following:

(i) en oljefase som inneholder gjærceller, (i) an oil phase containing yeast cells,

(ii) en vandig fase som inneholder spor av olje og gjær, (iii) en gjær-"krem" som består av gjær hvor noe olje er (ii) an aqueous phase containing traces of oil and yeast, (iii) a yeast "cream" consisting of yeast in which some oil is

bundet til cellene sammen med vandig fase. bound to the cells together with aqueous phase.

Etter utvinning av fraksjonen (ii) blir fraksjonen (iii) eller en blanding av fraksjonene (i) og (iii) blandet med en vandig oppløsning av et overflateaktivt stoff. After extraction of fraction (ii), fraction (iii) or a mixture of fractions (i) and (iii) is mixed with an aqueous solution of a surfactant.

Formålet med denne behandling er å skille oljen fra gjær-cellene, idet oljen synes å være bundet til cellene ved adsorpsjon. The purpose of this treatment is to separate the oil from the yeast cells, as the oil appears to be bound to the cells by adsorption.

Det kan være fordelaktig å anvende et spiselig overflateaktivt stoff, f.eks. en sakkaroseester, hvilket gjør det mulig å minske den etterfølgende vasking for fra gjæren å fjerne et overflateaktivt middel som ikke er spiselig. It can be advantageous to use an edible surfactant, e.g. a sucrose ester, which makes it possible to reduce the subsequent washing to remove from the yeast a surfactant which is not edible.

Den på denne måte dannede emulsjon brytes ved sentrifugering ned, slik at man får tre fraksjoner: The emulsion formed in this way is broken down by centrifugation, so that three fractions are obtained:

(iv) en oljefase, (iv) an oil phase,

(v) en vandig fase som inneholder overflateaktivt stoff, hvilken fase sirkuleres tilbake for behandling av fraksjonene (i) og (iii), og (vi) en gjær-"krem" som består av gjær som fremdeles er forurenset av olje, sammen med en vandig fase som inneholder overflateaktivt stoff. (v) an aqueous phase containing surfactant, which phase is recirculated for treatment of fractions (i) and (iii), and (vi) a yeast "cream" consisting of yeast still contaminated with oil, together with an aqueous phase containing surfactant.

For i mest mulig grad å nedsette forbruket av overflateaktivt In order to reduce the consumption of surfactants as much as possible

stoff blir vaskevannet som inneholder dette sirkulert tilbake. fabric, the wash water containing this is circulated back.

Fraksjonen (vi) kan behandles videre ved avvekslende vasking med overflateaktiv oppløsning og sentrifugering, inntil gjæren har fått et ønsket, lavt innhold av olje. Gjær-"kremen" som nå består av gjær og overflateaktiv, vandig oppløsning kan nå vaskes med vann og deretter sentrifugeres igjen. Hvis det ønskes kan denne gjær-"krem" vaskes to eller flere ganger. Om det ønskes kan et eller flere av disse vaskevann (dog helst ikke det siste) utgjøres av saltvann (f.eks. havvann); fortrinnsvis foregår den siste vasking med bløtt vann. For å spare på det bløte vann som behøves i prosessen, blir alt det bløte vann som kommer fra den siste vaskeoperasjon anvendt til fremstillingen av næringsstoffoppløsningen for fermenteringen, hvor det trenges ved vaskingen med oppløsningen av overflateaktivt stoff, og resten ledes til det anvendte saltvann i den hensikt å nedsette dettes saltkonsentrasjon. Tilslutt kan gjæren tørkes under slike betingelser at den blir egnet til å brukes som næringsmiddel. The fraction (vi) can be further processed by alternating washing with surface-active solution and centrifugation, until the yeast has obtained the desired, low content of oil. The yeast "cream" which now consists of yeast and surfactant, aqueous solution can now be washed with water and then centrifuged again. If desired, this yeast "cream" can be washed two or more times. If desired, one or more of these washing waters (though preferably not the last one) can consist of salt water (e.g. seawater); preferably the last washing takes place with soft water. In order to save on the soft water needed in the process, all the soft water that comes from the last washing operation is used for the production of the nutrient solution for the fermentation, where it is needed during the washing with the solution of surfactant, and the rest is led to the salt water used in the purpose of reducing its salt concentration. Finally, the yeast can be dried under such conditions that it becomes suitable for use as food.

Prosessens trinn kan utføres fullstendig satsvis, men om det ønskes kan et eller flere av trinnene også utføres i kontinuerlig drift. The steps of the process can be carried out completely in batches, but if desired, one or more of the steps can also be carried out in continuous operation.

Følgende eksempel illustrerer foreliggende oppfinnelse. The following example illustrates the present invention.

Eksempel Example

Dispergering av gassolje i et mineralsk medium ble utført i en kolloidmølle av typen "Seila microdisperser" i hvilken skjæreffek-ten blir bevirket av to systemer som er montert på samme rotasjons-akse, dvs. : Dispersion of gas oil in a mineral medium was carried out in a colloid mill of the "Seila microdisperser" type in which the cutting effect is caused by two systems mounted on the same axis of rotation, i.e.:

skjæring ved hjelp av tannhjul, cutting using gears,

skjæring ved hjelp av to koniske flater. cutting using two conical surfaces.

Apparatets utløp var forbundet med gjæringskaret ved hjelp av et fleksibelt rør. For å stabilisere den dannede emulsjon ble en mengde dyrkningsvæske, svarende til ca. 5% av emulsjonens volum og inneholdende 8-9 g/liter av gjær, injisert i det flytende materiale, ved innløpet til kolloidmøllen. The outlet of the apparatus was connected to the fermentation vessel by means of a flexible pipe. To stabilize the emulsion formed, a quantity of culture liquid, corresponding to approx. 5% of the emulsion's volume and containing 8-9 g/litre of yeast, injected into the liquid material, at the inlet to the colloid mill.

Røreren i gjæringskaret roterte med 1000 omdr./minutt og gjæringskaret hadde en kapasitet på 3 liter. Det var utstyrt med et tappesystem og en pumpe. The stirrer in the fermentation vessel rotated at 1000 rpm and the fermentation vessel had a capacity of 3 litres. It was equipped with a drain system and a pump.

pH-verdien ble kontrollert ved hjelp av elektroder og et automatisk potensiometer. The pH value was controlled using electrodes and an automatic potentiometer.

De anvendte materialer var: The materials used were:

Gjær - Candida lipolytica Yeast - Candida lipolytica

Gassolje - Tung gassolje, hellepunkt +17°C Gas oil - Heavy gas oil, pour point +17°C

n-pårafininnhold 12% n-petroleum content 12%

Medium - vandig mineral-næringsmedium Medium - aqueous mineral nutrient medium

Luft - filtrert og komprimert. Air - filtered and compressed.

Por å vise betydningen av kolloidmøllen og stabiliseringen av dispersjonen ved hjelp av gjær ble det utført følgende forsøk: In order to show the importance of the colloid mill and the stabilization of the dispersion by means of yeast, the following experiments were carried out:

1. dyrking på gassolje uten forutgående dispergering, 1. cultivation on gas oil without prior dispersion,

2. dyrking på gassolje med forutgående dispergering ved hjelp av kolloidmølle, men uten stabilisering med gjær, 3. dyrking på gassolje med dispergering og stabilisering ved tilbakesirkulering av noe produktgjær til innløpet av kolloidmøllen. 2. Cultivation on gas oil with prior dispersion using a colloid mill, but without stabilization with yeast, 3. Cultivation on gas oil with dispersion and stabilization by recirculation of some product yeast to the inlet of the colloid mill.

Det sees at anvendelse av kolloidmøllen gir en emulsjon It is seen that application of the colloid mill gives an emulsion

som er tilstrekkelig dispergert til å øke celletettheten i betydelig grad. which is sufficiently dispersed to significantly increase cell density.

Tilstedeværelse av gjær i emulsjonen bevirker at den høye dispergeringsgrad vedlikeholdes, og forbedrer i betydelig grad gjærens vekst. The presence of yeast in the emulsion causes the high degree of dispersion to be maintained, and significantly improves the growth of the yeast.

Claims

Method for growing yeast in the presence of a hydrocarbon starting material, an aqueous nutrient medium and a gas containing free oxygen, the hydrocarbon starting material being present in the fermentation vessel in the form of particles dispersed in the aqueous phase, characterized in that the hydrocarbon starting material before introduction into the fermentation vessel is dispersed in the aqueous medium in the presence of yeast to a particle size of no more than 10 microns.