NL9900033A

NL9900033A - Acetyl:cholinesterase inhibitor compsns. for trans:dermal application

Info

Publication number: NL9900033A
Application number: NL9900033A
Authority: NL
Inventors: Albert Enz
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 1987-03-04
Filing date: 2003-05-01
Publication date: 2003-07-01
Also published as: NL195081C

Abstract

Pharmaceutical compsns. for systemic transdermal application contg. (1) an aminoethyl-phenyl carbamate of formula (I) as the free base or in the form of a pharmaceutically acceptable acid addition salt with (2) a pharmaceutically acceptable carrier or diluent which is suitable for systemic transdermal administration are new. In (I) R1 = H, lower alkyl, cyclohexyl, allyl or benzyl; R2 = H, CH3, C2H5 or propyl; or NR1R2 = morpholino or piperidine; R3 = H or lower alkyl; R4, R5 = lower alkyl. Of the cpds. of formula (I), (S)-3-(1-di methylamino-ethyl) phenyl N-ethyl-N- methylcarbamate (Ia) and its acid addition salts are new.

Description

FenylcarbamaatPhenyl carbamate

De uitvinding heeft betrekking op een fenylcarbamaat met acetylcholinesterase inhiberende werking.The invention relates to a phenyl carbamate with acetylcholinesterase inhibiting activity.

In het bijzonder heeft de uitvinding betrekking op het (S)-N-ethyl-3-[(l-dimethyl-amino)ethyl]-N-methylfenylcarbamaat met formule 1 van het formuleblad in de vorm van de vrije base of een zuuradditiezout. Zoals men kan zien uit deze formule is het teken van de rotatie van de verbinding met formule 1 in de vorm van de vrije base (-). In de zuuradditiezoutvorm kan het (+) of (-) zijn. Het teken van de rotatie van het waterstof tartraat is bijvoorbeeld (+).In particular, the invention relates to the (S) -N-ethyl-3 - [(1-dimethyl-amino) ethyl] -N-methylphenyl carbamate of formula I of the formula sheet in the form of the free base or an acid addition salt. As can be seen from this formula, the sign of the rotation of the compound of formula 1 is in the form of the free base (-). In the acid addition salt form it can be (+) or (-). For example, the sign of the rotation of the hydrogen tartrate is (+).

De onderhavige uitvinding betreft zowel de vrijebasevorm als de zuuradditiezout-vonnen, onafhankelijk van hun teken voor de rotatie.The present invention relates to both the free base form and the acid addition salt forms, independent of their sign of rotation.

Het racemische mengsel (±)-N-ethyl-3-[(l-dimethylamino)ethyl]-N-methylfenyl-carbamaat in de vorm van het hydrochloride is bekend uit de EP-A 193926, waar het wordt geïdentificeerd als RA7 HC1.The racemic mixture (±) -N-ethyl-3 - [(1-dimethylamino) ethyl] -N-methylphenyl carbamate in the form of the hydrochloride is known from EP-A 193926, where it is identified as RA7 HCl.

Volgens deze publicatie wordt het racemaat in de vorm van de vrije base verkregen door amideren van α-m-hydroxyfenylethyldimethylamine met een overeenkomstig carbamoylhalogenide. De verkregen verbinding en de farmacologisch aanvaardbare zuuradditiezoutcn, die op bekende wijze uit de vrije base kunnen worden bereid, worden genoemd als acetylcholinesteraseinhibitors in het centrale zenuwsysteem.According to this publication, the free base racemate is obtained by amidating α-m-hydroxyphenylethyldimethylamine with a corresponding carbamoyl halide. The resulting compound and the pharmacologically acceptable acid addition salt, which can be prepared in known manner from the free base, are referred to as acetylcholinesterase inhibitors in the central nervous system.

Verrasscnderwijze werd nu gevonden dat het (-)-enantiomeer met formule 1 en de farmacologisch aanvaardbare zuuradditiezoutcn daarvan die hierna worden aangeduid als verbindingen volgens de uitvinding, een bijzonder duidelijke en selectieve remming van het acetylcholinesterase geven.It has now surprisingly been found that the (-) - enantiomer of formula 1 and the pharmacologically acceptable acid addition salt thereof, hereinafter referred to as compounds of the invention, give a particularly clear and selective inhibition of the acetylcholinesterase.

Deze vondst is onverwacht, in het bijzonder omdat niet wordt gemeend dat de dïalkylaminoalkylzijketen, die het optisch actieve centrum bevat, in hoofdzaak verantwoordelijk is voor de acetylcholinesteraseremmcnde werking van de fenylearbamaten.This finding is unexpected, in particular because it is not believed that the di-alkylaminoalkyl side chain containing the optically active center is primarily responsible for the acetylcholinesterase inhibitory activity of the phenylarbamates.

De verbindingen volgens de uitvinding zijn niet eerder specifiek in de literatuur geopenbaard. De vrije base kan uit het racemaat worden bereid door splitsing van de enanliomeren volgens bekende methoden, bijvoorbeeld onder toepassing van di-0,0'-p-toluylwijnsteenzuur. De zuuradditiezoutcn kunnen op bekende wijze uit de vrije base worden bereid. Tot deze zuuradditiezouten behoort bijvoorbeeld het waterstoflartraat.The compounds of the invention have not previously been specifically disclosed in the literature. The free base can be prepared from the racemate by cleaving the enanliomers according to known methods, for example using di-0,0'-p-toluyl tartaric acid. The acid addition salts can be prepared from the free base in a known manner. These acid addition salts include, for example, the hydrogen tartrate.

De verbindingen volgens de uitvinding vertonen een farmacologische werking zoals blijkt uit standaardproeven en zijn derhalve bruikbaar als farmaceutica. Na s.c., i.p. of p.o. toediening aan ratten bereiken ze snel het centrale zenuwsysteem. Ze oefenen een voor het hersengebied selectieve remming uit op de acetylcholinesterase activiteit, waarbij enzymen uit de hippocampus en corticale enzymen sterker worden geremd dan acetylcholinesterase afkomstig uit striatum en pons-medulla. Verder hebben ze een langdurige werking.The compounds of the invention exhibit a pharmacological action as evidenced by standard tests and are therefore useful as pharmaceuticals. Na s.c., i.p. or p.o. administration to rats, they quickly reach the central nervous system. They exert a selective inhibition on acetylcholinesterase activity for the brain region, whereby hippocampal and cortical enzymes are inhibited more strongly than acetylcholinesterase from striatum and punch medulla. They also have a long-lasting effect.

De volgende resultaten illustreren bijvoorbeeld het farmacologische profiel van de verbindingen volgens de uitvinding in vergelijking met de overeenkomstige isomeren en racematen. Verbinding A is de verbinding met formule 1 in de vorm van het waterstof tartraat. Verbinding B is het optische isomeer van dat zout. C duidt op het racemische mengsel van de verbinding met formule 1 en het optische isomeer in de vorm van hel hydrochloride.For example, the following results illustrate the pharmacological profile of the compounds of the invention in comparison with the corresponding isomers and racemates. Compound A is the compound of formula 1 in the form of the hydrogen tartrate. Compound B is the optical isomer of that salt. C denotes the racemic mixture of the compound of formula 1 and the optical isomer in the form of the hydrochloride.

In vitro proevenIn vitro tests

Elektrisch teweeg gebrachte afgifte van 3H-acetylcholine uit coupes van de hippocampus van rattenElectrically induced release of 3 H-acetylcholine from rat hippocampal sections

De elektrisch teweeg gebrachte afgifte van 3H-acetylcholine (3H-ACh) uit coupes uit de hippocampus van ratten vormt een functioneel in vitro model voor het onderzoeken van de presynaptische muscarine-autoreceptor agonisten en antagonisten. Dit model kan ook worden gebruikt als een indirekte methode voor het evalueren van geneesmiddelen die acetylcholinesterase (AChE) remmen. Remmen van de AClrE activiteit leidt tot het accumuleren van endogeen ACh dat dan reageert met presynaptische muscarine-autoreceptor agonisten en antagonisten. Dit model kan ook worden gebruikt als indirekte methode voor het beoordelen van geneesmiddelen die acetylcholinesterase (AChE) remmen. Bet remmen van de AChE activiteit leidt tot de accumulatie van endogeen ACh dat dan reageert met presynaptische muscarine-auloreceptoren en de verdere afgifte van JH-ACh remt.The electrically induced release of 3 H-acetylcholine (3 H-ACh) from rat hippocampal sections forms a functional in vitro model for investigating the presynaptic muscarinic autoreceptor agonists and antagonists. This model can also be used as an indirect method for evaluating drugs that inhibit acetylcholinesterase (AChE). Inhibition of the AClrE activity leads to the accumulation of endogenous ACh which then reacts with presynaptic muscarinic autoreceptor agonists and antagonists. This model can also be used as an indirect method for evaluating drugs that inhibit acetylcholinesterase (AChE). Inhibition of AChE activity leads to the accumulation of endogenous ACh which then reacts with presynaptic muscarinic auloreceptors and inhibits the further release of JH-ACh.

Hippocampuscoupes van ratten (Wistarstam, 180- 200 g) worden geprepareerd door hele hippocampuscoupes op een afstand van 0,3 mm in schijfjes te hakken met een Mcllwain weefsclhakker. Hippocampuscoupes verkregen uit drie ratten worden 30 min bij 23°C geïncubeerd in 6 ml Krebs-Ringer oplossing die 0,1 pCi 3H-choline bevat en worden overgebracht in de superfusiekamer en worden bij 30°C overspoeld metHippocampus sections of rats (Wistar strain, 180-200 g) are prepared by chopping whole hippocampus sections at a distance of 0.3 mm with a Mcllwain weaving chopper. Hippocampal sections obtained from three rats are incubated for 30 min at 23 ° C in 6 ml Krebs-Ringer solution containing 0.1 pCi 3 H-choline and are transferred to the superfusion chamber and are flooded with 30 ° C

Krebsoplossing die 10 μΜ himicholinium-3 bevat in een hoeveelheid van 1,2 ml/min. Het verzamelen van in 5 min verkregen fracties van het superfusaat begint na 60 min overspoelen. Er volgen twee perioden van elektrisch stimuleren (2Hz rechthoekige pulsen van 2 msec, 10 mA, gedurende 2 min) na 70 min (Si) en na 125 min (S2) overspoelen. Te beproeven stoffen worden toegevoegd 30 min voor S2 en zijn in het superfusiemedium aanwezig tot 145 min overspoelen. Aan het einde van het experiment worden de coupes gesolubiliseerd in geconcentreerd mierezuur en wordt het tritiumgehalte bepaald in het superfusaat en de gesolubiliseerde coupes. De tritium uitstroming wordt uitgedrukt als de fractionele snelheid van tritiumuitstroming per min. De elektrisch teweeg gebrachte tritiumuitstroming wordt berekend door aftrekken van de geëxtrapoleerde basis-tritiumuitstroming van de totale tritiumuitstroming gedurende de 2 min elektrische stimulatie en de daarop volgende 13 min en wordt uitgedrukt als percentage van het tritiumgehalte aan het begin van het monsterverzamelen. De invloeden van een geneesmiddel op de door stimulatie teweeg gebrachte tritiumuitstroming worden uitgedrukt in de verhouding S2/S1 Alle experimenten worden in duplo uitgevoerd onder toepassing van een programmeerbaar 12 kanaals superfusiesysteem. Voor de berekening wordt een computerprogramma gebruikt.Krebs solution containing 10 μΜ of himicholinium-3 in an amount of 1.2 ml / min. Collecting fractions of the superfusate obtained in 5 minutes starts after 60 minutes of flooding. Two periods of electrical stimulation follow (2 Hz rectangular pulses of 2 msec, 10 mA, for 2 minutes) after 70 minutes (Si) and after 125 minutes (S2). Test substances are added 30 minutes before S2 and are present in the superfusion medium until they are washed over for 145 minutes. At the end of the experiment, the sections are solubilized in concentrated formic acid and the tritium content is determined in the superfusate and the solubilized sections. The tritium outflow is expressed as the fractional rate of tritium outflow per min. The electrically induced tritium outflow is calculated by subtracting the extrapolated base tritium outflow from the total tritium outflow during the 2 min electrical stimulation and the subsequent 13 min and is expressed as a percentage of the tritium content at the start of the sample collection. The effects of a drug on the stimulation induced tritium outflow are expressed in the ratio S2 / S1. All experiments are performed in duplicate using a programmable 12-channel superfusion system. A computer program is used for the calculation.

Bij deze proef remt de proefverbinding A de elektrisch teweeg gebrachte afgifte van 3H-ACh uit hippocampuscoupes met ongeveer 40 % (100 μΜ,Ι, terwijl het racemaat C (100 μΜ) een remming geeft van ongeveer 25%. De remmende effecten van de verbinding A en het racemaat C kunnen worden tegengegaan door atropine. Deze resultaten zijn verenigbaar met een AChE-remmende werking. Verbinding B is in dit model onwerkzaam.In this test, test compound A inhibits the electrically induced release of 3 H-ACh from hippocampal sections by approximately 40% (100 μΜ.Ι, while racemate C (100 μΜ) gives an inhibition of approximately 25%. A and racemate C can be inhibited by atropine These results are compatible with an AChE inhibitory effect Compound B is inactive in this model.

Acelylcholinesteraseremming in verschillende hersengebieden van ratten AChE preparaten van verschillende hersengebieden van ratten (cortex, hippocampus en striatum) worden bij deze proef toegepast en de 1C5() (remmende concentraties in μΜ) worden bepaald. De enzympreparaten worden vooraf geïncubeerd met de inhibitor gedurende 15 min, voordat de bepaling plaatsvindt.Acelylcholinesterase inhibition in different brain regions of rats AChE preparations from different brain regions of rats (cortex, hippocampus and striatum) are used in this test and the 1C5 () (inhibitory concentrations in μΜ) are determined. The enzyme preparations are pre-incubated with the inhibitor for 15 minutes before the determination takes place.

De AChE werking wordt gemeten volgens de methode die is beschreven door Ellman (Arch. Biochem. Biophys. 82, 70,1959). Raltenhersenweefsel wordt gehomogeniseerd in koude fosfaatbuffer, pH 7,3 ( 0,25 mM) die 0,1% Triton X-100 bevat. Na centrifugeren worden afgemeten hoeveelheden van de heldere bovenstaande vloeistof als enzymbron gebruikt. Het enzym wordt vooraf geïncubeerd met verschillende concentraties van de inhibitor. Na verschillende tijdsduren wordt substraat (acetylthiocholinjodide 0,5 mM) toegevoegd en wordt de overgebleven activiteit bepaald.The AChE activity is measured according to the method described by Ellman (Arch. Biochem. Biophys. 82, 70,1959). Ralt brain tissue is homogenized in cold phosphate buffer, pH 7.3 (0.25 mM) containing 0.1% Triton X-100. After centrifugation, measured amounts of the clear supernatant are used as the enzyme source. The enzyme is pre-incubated with various concentrations of the inhibitor. After various time periods, substrate (acetylthiochol iodide 0.5 mM) is added and the remaining activity is determined.

De resultaten zijn vermeld in de volgende tabel A.The results are shown in the following table A.

Zoals men uit deze tabel kan zien is de AChE remming met verbinding A iets beter dan die met racemaat C, terwijl verbinding B significant minder actief is.As can be seen from this table, the AChE inhibition with compound A is slightly better than with racemate C, while compound B is significantly less active.

Acetylcholinestcraseremming ex vivo in vcrschillendehersengcbicdcnvan ratten 30 Min na toediening van verschillende doses van de verbinding A, wordt de AChE activiteit in verschillende hersengebieden van ratten ex vivo gemeten. De methode is zoals hiervoor beschreven. De IC50 waarden die worden gevonden zijn 7 pmol/kg p.o. in striatum, 4 pmol/kg p.o. in hippocampus en 2 pmol/kg p.o. in cortex.Acetylcholine assay inhibition ex vivo in different brains of rats 30 minutes after administration of different doses of compound A, AChE activity in different brain regions of rats is measured ex vivo. The method is as described above. The IC50 values found are 7 pmol / kg p.o. in striatum, 4 pmol / kg p.o. in hippocampus and 2 pmol / kg p.o. in cortex.

De IC50 verkregen na toediening van het racemaat C zijn voor alle onderzochte gebieden ongeveer 2-3 maal hoger. 6 Uren na toediening van de verbinding A (10 pmol/kg p.o.) is de AChEin striatum nog altijd voor 16 % geremd, terwijl op hetzelfde tijdstip de activiteiten in de cortex en de hippocampus 39% respectievelijk 44% zijn geremd.The IC50 obtained after administration of the racemate C are about 2-3 times higher for all the regions examined. 6 hours after administration of the compound A (10 pmol / kg p.o.), the AChEin striatum is still inhibited for 16%, while at the same time the activities in the cortex and the hippocampus are inhibited by 39% and 44% respectively.

In vivo proevenTaste in vivo

Invloed op het dopamine metabolismeInfluence on dopamine metabolism

Mannelijke OFA ratten (150-200 g) werden gebruikt voor zowel acute als subchronische experimenten. De dieren werden onderworpen aan een regime van perioden van 12 uur licht en donker. De dieren werden steeds gedood tussen 11,00 en 13,00 h. De hersens werden onmiddellijk verwijderd, ontleed op ijs volgens de methode van Glowinski en Iversen, J. Neurochcm. 1_3; 655 (1966), bevroren met vast kooldioxyde en de weefselmonsters werden bij -80°C bewaard totdat analyse plaatsvond.Male OFA rats (150-200 g) were used for both acute and subchronic experiments. The animals were subjected to a regime of periods of 12 hours of light and dark. The animals were always killed between 11.00 and 13.00 h. The brain was immediately removed, dissected on ice according to the method of Glowinski and Iversen, J. Neurochcm. 1_3; 655 (1966), frozen with solid carbon dioxide and the tissue samples were stored at -80 ° C until analysis took place.

Dopamine en de metabolieten ervan DOP AC (3,4-dihydroxyfenylazijnzuur) en HVA (homovanillinezuur) worden bepaald in hersenweefselextracten die worden verkregen door de opgeslagen hersenweefselmonsters te homogeniseren in 0,1 N HC1 dat 0,05 mM ascorbinezuur bevat en vervolgens te centrigureren. Er werd striatumweefsel en corticaalweefsel gebruikt.Dopamine and its metabolites DOP AC (3,4-dihydroxyphenylacetic acid) and HVA (homovanillic acid) are determined in brain tissue extracts obtained by homogenizing the stored brain tissue samples in 0.1 N HCl containing 0.05 mM ascorbic acid and then centering them. Striped tissue and cortical tissue were used.

De bepaling van de metabolieten vindt plaats met hetzij de gaschromatografie/ massafraginentografie (GCMS) techniek, zoals beschreven door Karoum et al., J. Neurochem. 25, 653 (1975), en door Catabeni et al., Science) .178, 166 (1972) of met de iluorometrische methode zoals beschreven door Waldmeier en Maitre, Analyt. Biochem. 5J_, 474 (1973). Voor de GCMS methode worden weefselextracten bereid door bekende hoeveelheden gedeutereerde monoaminen en hun respectieve metabolieten als inwendige standaards toe te voegen.The metabolites are determined by either gas chromatography / mass fragmentinography (GCMS) technique, as described by Karoum et al., J. Neurochem. 25, 653 (1975), and by Catabeni et al., Science) .178, 166 (1972) or by the iluorometric method as described by Waldmeier and Maitre, Analyt. Biochem. 5, 474 (1973). For the GCMS method, tissue extracts are prepared by adding known amounts of deuterated monoamines and their respective metabolites as internal standards.

Het dopaminemetabolisme in striatum wordt verhoogd na toediening van de verbindingen A en B en het racemaat C (deze eigenschap is een gevolg van de acetylcholineaccumulatie teweeg gebracht door deze verbindingen.Verbinding A is echter meer actief dan de verbinding B en het racemaat C bij het verhogen van de dopaminemetabolietenconcentratie in striatum.The dopamine metabolism in striatum is increased after administration of the compounds A and B and the racemate C (this property is a consequence of the acetylcholine accumulation induced by these compounds. However, compound A is more active than compound B and racemate C on increasing of the dopamine metabolite concentration in striatum.

Muscarineachtige en nicotincachtige effecten op hersenglucoseverbruikMuscarinic and nicotinc-like effects on brain glucose consumption

Wijzigingen in de functionele activiteit van het CNS zijn geassocieerd met een gewijzigd dcoxyglucose (DOG) verbruik in de hersenen dat gelijktijdig zichtbaar kan worden gemaakt in verschillende bersengebieden door gebruik te maken van de autoradiografische methode van Sokoloff et al., J. Neurochem. 28, 897 (1977). De toediening van cholinergischc geneesmiddelen, hetzij rechtstreeks (muscarine-agonisten) of indirekt (accumulatie van acetylcholine) induceert in dit model een karakteristiek "fingerprint" patroon door wijziging van het regionale glucose-nietabolismc.Changes in the functional activity of the CNS are associated with altered dcoxyglucose (DOG) consumption in the brain that can be simultaneously visualized in different areas of the brain using the autoradiographic method of Sokoloff et al., J. Neurochem. 28, 897 (1977). The administration of cholinergic drugs, either directly (muscarinic agonists) or indirectly (accumulation of acetylcholine) in this model induces a characteristic "fingerprint" pattern by altering the regional glucose nonabolism.

Er worden mannelijke Wistarratten (150-200 g) gebruikt. Geneesmiddelen worden aan de dieren toegediend in verschillende doses en langs verschillende wegen (i.v., p.o., i.p.). f!4C]-2-deoxyglucose ( 125 pC/kg) wordt geïnjecteerd 45 min voordat de dieren worden gedood. De hersenen worden onmiddellijk verwijderd, ingevroren bij -80°C en vervolgens in schijfjes met een dikte van 20 μπη gesneden. De optische dichtheden van de radiografische beelden worden gemeten volgens een modificatie van Sokolof et al.Male Wistar rats (150-200 g) are used. Drugs are administered to the animals in different doses and by different routes (i.v., p.o., i.p.). 4C] -2-deoxyglucose (125 pC / kg) is injected 45 minutes before the animals are killed. The brain is immediately removed, frozen at -80 ° C and then cut into slices with a thickness of 20 μπη. The optical densities of the radiographic images are measured according to a modification of Sokolof et al.

Na p.o. toediening van de verbindingen A en B (7,5 pmol/kg) worden significante veranderingen in het DOG verbruik in verschillende hersengebieden van ratten waargenomen. Gedurende de eerste 30 min is het effect van de verbinding A sterker dan dat van verbinding B. De duidelijkste wijzigingen worden gevonden in de visuele gebieden en anteroventrale thalamus en ook in de laterale habenula mueleus.After p.o. administration of compounds A and B (7.5 pmol / kg), significant changes in DOG consumption in different brain regions of rats are observed. During the first 30 minutes, the effect of compound A is stronger than that of compound B. The clearest changes are found in the visual areas and anteroventral thalamus and also in the lateral habenula mueleus.

Acetylcholineniveau's in verschillende hersengebieden van rattenAcetylcholine levels in different brain areas of rats

De effecten van de verbindingen A en B en het racemaat C als AChE inhibitors in vivo wordt bepaald door de ACh niveau's in verschillende gebieden van rattehersenen te meten op verschillende tijdstippen na toediening van het geneesmiddel.The effects of the compounds A and B and the racemate C as AChE inhibitors in vivo is determined by measuring the ACh levels in different areas of rat brain at different times after drug administration.

Er worden OFA ratten (200-230 g) gebruikt. De dieren worden gedood door op de kop gefocusseerde microgolfstraling (6 kW werkvermogen. 2450 Mhz, bestralingstijd 1.7 sec, Puescher Mikrowellen-Energietechnik, Bremen). De hersenen worden verwijderd en ontleed volgens Glowinski en 1 versen (1966) en bij -70°C bewaard totdat analyse plaatsvindt. De hcrscngedeelten worden gehomogeniseerd in 0.1 M perchloor-zuur dat inwendige gedeutereerde standaards van ACh-d4 en Ch(choline)-d4 bevat. Na centrifugeren worden endogeen ACh en Ch tezamen met hun gedeutereerde varianten geëxtraheerd met dipicrylamine (2,2',4,4',6,6'-hexanitrodifenylamine) in dichloor-methaan als ionenparen. De Ch delen worden omgezet in derivaten met propionyl-chloride en het verkregen mengsel van ACh en propylcholinederivaten wordt gedemethyleerd met natriumbenzeenthiolaat en geanalyseerd doormiddel van massafragmentografie volgens Jenden el al. Anal. Biochem., 55, 438-448. (1973).OFA rats (200-230 g) are used. The animals are killed by up-focused microwave radiation (6 kW working capacity. 2450 Mhz, irradiation time 1.7 sec, Puescher Mikrowellen-Energietechnik, Bremen). The brains are removed and dissected according to Glowinski and 1 verse (1966) and stored at -70 ° C until analysis takes place. The portion of halogenate is homogenized in 0.1 M perchloric acid containing internally deuterated standards of ACh-d4 and Ch (choline) -d4. After centrifugation, endogenous ACh and Ch together with their deuterated variants are extracted with dipicrylamine (2.2 ', 4.4', 6,6'-hexanitrodiphenylamine) in dichloromethane as ion pairs. The Ch parts are converted to propionyl chloride derivatives and the resulting mixture of ACh and propylcholine derivatives is demethylated with sodium benzene thiolate and analyzed by mass fragmentography according to Jenden el al. Anal. Biochem., 55, 438-448. (1973).

Een enkele toediening van 25 pmol/kg p.o. verhoogt de ACh concentraties in striatum, cortex en hippocampus. Het maximale effect wordt bereikt ongeveer 30 min na orale toediening en neemt af gedurende de volgende 3-4 uren. In de cortex en de hypocampus zijn de ACh niveau's na 4 uur nog altijd significant hoger in vergelijking met de vergelijkingsmonsters. De effecten zijn afin ankelijk van de dosis. De invloed van verbinding B is significant geringer dan die welke wordt teweeg gebracht door het racemaat C en de invloed van racemaat C is significant zwakker dan die welke wordt geweeg gebracht door verbinding A.A single administration of 25 pmol / kg p.o. increases the ACh concentrations in striatum, cortex and hippocampus. The maximum effect is achieved approximately 30 minutes after oral administration and decreases over the next 3-4 hours. In the cortex and the hypocampus, the ACh levels are still significantly higher after 4 hours compared to the comparison samples. The effects depend on the dose. The influence of compound B is significantly less than that brought about by racemate C and the influence of racemate C is significantly weaker than that caused by compound A.

Voorts worden de verbindingen volgens de uitvinding aangeduid als goed verdraag-baar en oraal werkzaam en ze hebben een lange werkingsduur, bijvoorbeeld bij de bovengenoemde en andere standaardproeven.Furthermore, the compounds of the invention are referred to as highly tolerable and orally active and have a long duration of action, for example in the above and other standard tests.

De verbindingen volgens de uitvinding zijn derhalve bruikbaar voor de behandeling van dimentia senilis, ziekte van Alzheimer, chorea van Huntington, tardieve dyskinesie, hyperkinesie, manie, acute verwarringsverschijnselen, Down-syndroom en Friedrich-ataxie.The compounds of the invention are therefore useful for the treatment of seniment dimentia, Alzheimer's disease, Huntington's chorea, tardive dyskinesia, hyperkinesia, mania, acute confusion symptoms, Down syndrome and Friedrich ataxia.

Een voorgeschreven dagelijkse dosis ligt in het traject van ongeveer 0,1 tot ongeveer 25 mg , bijvoorbeeld ongeveer 0,1 tot ongeveer 5 mg van een verbinding volgens de uitvinding, tezamen met vaste of vloeibare dragers of verdunningsmiddelen.A prescribed daily dose is in the range of about 0.1 to about 25 mg, for example about 0.1 to about 5 mg of a compound of the invention, together with solid or liquid carriers or diluents.

In overeenstemming met het voorgaande wordt volgens de onderhavige uitvinding ook voorzien in een verbinding volgens de uitvinding ten gebruike als farmaceuti-cum,bijvoorbeeld voor de behandeling van dementia senilis, ziekte van Alzheimer, Huntington-chorea, tardieve dyskinesie , hyperkinesie, manie, acute verwardheid, Down-syndroom en Friedrich-ataxie.In accordance with the foregoing, the present invention also provides a compound of the invention for use as a pharmaceutical, for example for the treatment of senement dementia, Alzheimer's disease, Huntington's chorea, tardive dyskinesia, hyperkinesia, mania, acute confusion , Down syndrome and Friedrich ataxia.

De uitvinding heeft verder betrekking op een farmaceutisch preparaat dat een verbinding volgens de uitvinding omvat in associatie met tenminste één farmaceutische drager of verdunningsmiddcl. Dergelijke preparaten kunnen op conventionele wijze worden bereid.The invention further relates to a pharmaceutical composition comprising a compound of the invention in association with at least one pharmaceutical carrier or diluent. Such compositions can be prepared in a conventional manner.

In de volgende voorbeelden zijn de temperaturen niet gecorrigeerd en opgegeven in °C.In the following examples, the temperatures are uncorrected and specified in ° C.

Voorbeeld I: (S)-N-ethyl-3-[( 1 -dimethylamino)ethyl]-N-ethylfenylcarbamaat 130 g (±)-N-Ethyl-3-[(l-dimethylamino)ethyl-N-methylfenylcarbamaat en 210 g (+)-di-0,0'-p-toIuyIwijnsteenzuur monohydraat worden onder verwarming opgelost in 1,3 1 methanol/water (2:1) Met zout dat precipiteert na afkoelen wordt gefiltreerd en drie maal herkristalliseerd uit methanol/water (2:1). Het (S)-enantiomeer wordt vrijgemaakt door verdelen tussen IN NaOH en ether. |a]o20 = -32,Γ (c= 5 in ethanol).Example I: (S) -N-ethyl-3 - [(1-dimethylamino) ethyl] -N-ethylphenyl carbamate 130 g (±) -N-Ethyl-3 - [(1-dimethylamino) ethyl N-methylphenyl carbamate and 210 g (+) - di-0,0'-p-tartaric tartaric acid monohydrate is dissolved under heating in 1.3 l of methanol / water (2: 1) Filtered with salt which precipitates after cooling and recrystallized three times from methanol / water ( 2: 1). The (S) -enantiomer is released by partitioning between 1N NaOH and ether. [α] 20 D = -32.0 (c = 5 in ethanol).

Het waterstof tartraat van de in de titel genoemde verbinding (uit ethanol) smelt bij 123-125°C. la]D20 = +4,7° (c= 5 in ethanol).The hydrogen tartrate of the title compound (from ethanol) melts at 123-125 ° C. 1a] D 2 O = + 4.7 ° (c = 5 in ethanol).

De onderhavige uitvinding heeft verder betrekking op de systemische transdennalc toediening van de fenylearbamaten met de formule Γ waarin R1 voorstelt waterstof, lagere alkyl, cyclohexyl, allyl of benzyl, R2 voorstelt waterstof, methyl, ethyl of propyl, of R1 en R2 tezamen met de stikstof waaraan ze zijn verbonden een morfolino- of piperidinorest vormen, R3 voorstel! waterstof of lager alkyl, R4 en R5 gelijk of verschillend zijn en elk een lagere alkylgroep voorstellen waarbij de dialkylaminoalkylgroep zich in de meta- , ortho- of parastand bevindt, in de vorm van de vrije base of van een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout.The present invention further relates to the systemic transdennal administration of the phenylarbamates of the formula Γ wherein R1 represents hydrogen, lower alkyl, cyclohexyl, allyl or benzyl, R2 represents hydrogen, methyl, ethyl or propyl, or R1 and R2 together with the nitrogen to which they are attached form a morpholino or piperidino residue, R3 proposal! hydrogen or lower alkyl, R 4 and R 5 are the same or different and each represents a lower alkyl group wherein the dialkylaminoalkyl group is in the meta, ortho or para position, in the form of the free base or of a pharmaceutically acceptable acid addition salt.

De verbindingen met formule Γ en hun farmaceutisch aanvaardbare zuuradditie-zouten alsmede hun bereiding en hun gebruik als acetylcholinestcraseinhibitors zijn bekend uit de bovengenoemde EP-A 193926.The compounds of formula I and their pharmaceutically acceptable acid addition salts as well as their preparation and their use as acetylcholine estrase inhibitors are known from the aforementioned EP-A 193926.

De verbindingen met formule 1' omvatten bijvoorbeeld de bovengenoemde verbinding A en het racemaat C.The compounds of formula 1 'include, for example, the aforementioned compound A and the racemate C.

Er werd nu verrassenderwijze gevonden dat de verbindingen met formule 1' in de vorm van de vrije base of van een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout, die hierna worden aangeduid als verbindingen voor toediening volgens de uitvinding, een uitzonderlijk goede penetratie van de huid te zien geven als ze percutaan worden toegediend.It has now surprisingly been found that the compounds of formula 1 'in the form of the free base or of a pharmaceutically acceptable acid addition salt, hereinafter referred to as compounds for administration according to the invention, exhibit exceptionally good penetration of the skin when they administered percutaneously.

De penetratie door de huid van de verbindingen voor toediening volgens de uitvinding kan worden waargenomen bij standaard in vitro- of in vivo-proeven.The penetration through the skin of the compounds for administration according to the invention can be observed in standard in vitro or in vivo tests.

Een in vitro-proef is de algemeen bekende diffusieproef die kan worden uitgevoerd volgens de principes vermeld in GB 2098865A en door T.J. Franz in J. Invest. Dermatol. (1975) 64, 194-195. Oplossingen die de actieve verbinding in niet gemerkte of radioactief gemerkte vorm bevatten worden aangebracht op één zijde van geïsoleerde stukjes van intact zijnde mensenhuid of rattenhuid zonder haren met een oppervlak van ongeveer 2 cm2. De andere zijde van de huid is in contact met fysiologische zoutoplossing. De hoeveelheid actief middel in de zoutoplossing wordt op conventionele wijze gemeten, bijvoorbeeld door middel van HPLC of spectrofotomelrische technieken, of door bepaling van de radioactiviteit.An in vitro test is the well-known diffusion test that can be performed according to the principles stated in GB 2098865A and by T.J. Franz in J. Invest. Dermatol. (1975) 64, 194-195. Solutions containing the active compound in unlabelled or radiolabeled form are applied to one side of isolated pieces of intact human skin or rat skin without hair with an area of about 2 cm 2. The other side of the skin is in contact with physiological saline. The amount of active agent in the saline is measured in a conventional manner, for example by HPLC or spectrophotometric techniques, or by determination of the radioactivity.

Bij deze proeven onder toepassing van ratte- huid werden bijvoorbeeld de volgende penetratiesnelheden gevonden: hiervoor gedefinieerde verbinding A: 23,6 ± 14,9 %For example, in these rat skin tests, the following penetration rates were found: Compound A defined above: 23.6 ± 14.9%

Verbinding met de formule 1 in de vorm van de vrije base: 28,0 ± 8,2 %Compound of the formula 1 in the form of the free base: 28.0 ± 8.2%

Bovendien werd gevonden dat transdermale toediening van de verbindingen voor toediening volgens de uitvinding een langdurige en constante remming geeft van de acetylcholinesterase werkzaamheid zoals wordt aangetoond met standaardproeven, met een langzaam intreden van de werking wat bijzonder gunstig is in verband met de tolereerbaarheid van deze verbindingenMoreover, it was found that transdermal administration of the compounds for administration according to the invention gives a long-term and constant inhibition of the acetylcholinesterase activity as demonstrated by standard tests, with a slow onset of action which is particularly favorable in view of the tolerability of these compounds

De acetylcholinesteraseremming in verschillende hersengebieden van ratten ex vivo is bijvoorbeeld gemeten na transdermale toediening van de verbindingen voor toediening volgens de uitvinding en vergeleken met de remming die wordt verkregen na toediening via andere routes.For example, the acetylcholinesterase inhibition in different brain regions of rats ex vivo has been measured after transdermal administration of the compounds for administration according to the invention and compared to the inhibition obtained after administration via other routes.

De verbindingen worden opgelost in of verdund met n-heptaan tot een concentratie van 1 of 3 mg/20 μΐ. Van mannelijke ratten (OFA stam, ca. 250 g) wordt de nek uitgeschoren en de oplossing wordt met een micropipet op de huid gebracht. De plaats van opbrengen wordt onmiddellijk afgedekt met een dunne plastic foelie en een pleister. Het dier kan niet aan de pleister komen. Op verschillende tijden na het toedienen worden de dieren gedood door ze te onthoofden en wordt de overgebleven AChE activiteit gemeten.The compounds are dissolved in or diluted with n-heptane to a concentration of 1 or 3 mg / 20 μΐ. Male rats (OFA strain, approx. 250 g) are shaved and the solution is applied to the skin with a micropipette. The application site is immediately covered with a thin plastic film and a plaster. The animal cannot touch the patch. At various times after administration, the animals are killed by beheading them and the remaining AChE activity is measured.

Transdermale toediening van de hiervoor gedefinieerde verbinding A bracht bijvoorbeeld een langdurige, van de dosis afhankelijke remming van de AChE activiteit teweeg. In tegenstelling tot het snelle optreden van het effect na hetzij orale of subcutane toediening (maximaal 15 respectievelijk 30 min) trad de AChE remming langzaam op na toediening langs deze weg (max. >2 uren) zonder de selectieve AChE remming van hel hersengebied te beïnvloeden.For example, transdermal administration of the aforementioned compound A induced a prolonged dose-dependent inhibition of AChE activity. In contrast to the rapid occurrence of the effect after either oral or subcutaneous administration (maximum 15 and 30 minutes respectively), AChE inhibition occurred slowly after this route (max.> 2 hours) without affecting the selective AChE inhibition of the brain region .

De resultaten zijn weergegeven in de volgende tabel B. 24 Uur na de transdermale toediening, was de AChE activiteit nog altijd geremd in de centrale en periferale gebieden. Na dezelfde tijd had dc oraal toegediende verbinding A geen effect (meer) op het enzym, terwijl na de s.c. toediening slechts het enzym in hel hart significant was geremd.The results are shown in the following Table B. 24 hours after transdermal administration, the AChE activity was still inhibited in the central and peripheral regions. After the same time, the orally administered compound A had no effect (anymore) on the enzyme, while after the s.c. administration only the enzyme in the heart was significantly inhibited.

Vergelijkingswaarden (pmol/mg x min. ± SD n-15)Comparison values (pmol / mg x min. ± SD n-15)

Cortex :4,67 ±0,30 Striatum :33,8 ±3,08 Hart :2,27 ±0,39Cortex: 4.67 ± 0.30 Striatum: 33.8 ± 3.08 Heart: 2.27 ± 0.39

Hippocampus : 4,42 ± 0,30 Pons/Medul1a :7,98±0,36 Bloed .311,4 ±44,2Hippocampus: 4.42 ± 0.30 Pons / Medul1a: 7.98 ± 0.36 Blood. 3111.4 ± 44.2

Volgens een ander aspect van de onderhavige uitvinding wordt derhalve voorzien in een farmaceutisch preparaat voor systemische, transdermale toediening, omvattende een verbinding met de formule Γ in de vorm van de vrije base of een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout, in associatie met een farmaceutische drager of verdunningsmiddel dat geschikt is voor systemische transdermale toediening.According to another aspect of the present invention, there is thus provided a pharmaceutical preparation for systemic, transdermal administration, comprising a compound of the formula Γ in the form of the free base or a pharmaceutically acceptable acid addition salt, in association with a pharmaceutical carrier or diluent which is suitable for systemic transdermal administration.

Volgens een verder aspect van de onderhavige uitvinding wordt voorzien in het gebruik van een verbinding met de formule 1' in de vorm van de vrije base of een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout als actief middel bij de bereiding van een farmaceutisch preparaat dat geschikt is voor systemische transdermale toediening.According to a further aspect of the present invention, there is provided the use of a compound of the formula 1 'in the form of the free base or a pharmaceutically acceptable acid addition salt as active agent in the preparation of a pharmaceutical composition suitable for systemic transdermal administration. .

De actieve middelen kunnen worden toegediend in elke conventionele vloeibare of vaste transdermale farmaceutische samenstelling, bijvoorbeeld zoals beschreven in Remington's Pharmaceutical Sciences 16e editie (1980; Mack) 1248-1253; Sucker, Fuchs en Spieser, Pharmazeutische Technologie le editie, (1978; Springer) blz. 650-665 en in GB 2098865 A naar de inhoud waarvan als referentie wordt verwezen.The active agents can be administered in any conventional liquid or solid transdermal pharmaceutical composition, for example as described in Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition (1980; Mack) 1248-1253; Sucker, Fuchs and Spieser, Pharmazeutische Technologie le edition, (1978; Springer) pp. 650-665 and in GB 2098865 A to the content of which reference is made.

Geschikt heeft het preparaat de vorm van een visceuze vloeistof, zalf of een vast reservoir of matrix. Bijvoorbeeld wordt het actieve middel door en door gedispergeerd in een vast reservoir of matrix vervaardigd uit een gel of een vast polymeer, bijvoorbeeld een hydrofiel polymeer zoals beschreven in de EP-A 155229.Suitably the composition is in the form of a viscous liquid, ointment or a solid reservoir or matrix. For example, the active agent is thoroughly dispersed in a solid reservoir or matrix made of a gel or a solid polymer, for example a hydrophilic polymer as described in EP-A 155229.

Het actieve middel kan (ook) worden opgenomen in een pleister.The active agent can (also) be included in a patch.

De preparaten voor transdermale toediening kunnen ongeveer 1 tot ongeveer 20 gew.% actief middel met formule Γ bevatten in de vorm van de vrije base of van een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout.The compositions for transdermal administration may contain from about 1% to about 20% by weight of active agent of Formula in in the form of the free base or of a pharmaceutically acceptable acid addition salt.

De farmaceutische preparaten voor transdermale toediening kunnen worden gebruikt voor dezelfde indicaties als (die) voor orale of intraveneuze toediening. De hoeveelheid farmaceutisch actief middel dat moet worden toegediend zal individueel afhangen van de afgiftekarakleristiek van dc fannceutischc preparaten, dc penetratiesnelheïd van het geneesmiddel die is waargenomen bij in vitro en in vivo proeven, de sterkte van het actieve middel, dc grootte van het contactoppervlak van de huid, het gedeelte van het lichaam waarop de eenheid wordt aangebracht en de tijdsduur van de werking die nodig is. De hoeveelheid actief middel en het oppervlak van het farmaceutische preparaat, enz., kan worden bepaald door middel van routineproeven betreffende de biobeschik-baarheid, waarbij de bloednivcau's van actieve stoffen worden vergeleken na toediening van de actieve stof in een farmaceutisch preparaat volgens de uitvinding op de in tact zijnde huid en de bloedniveau's van de actieve stof waargenomen na orale of intraveneuze toediening van een therapeutisch werkzame dosis van de farmacologisch actieve stof.The pharmaceutical preparations for transdermal administration can be used for the same indications as (those) for oral or intravenous administration. The amount of pharmaceutically active agent to be administered will depend individually on the release characteristics of the pharmaceutical compositions, the drug penetration rate observed in in vitro and in vivo tests, the strength of the active agent, the size of the contact surface of the drug. skin, the part of the body to which the unit is applied and the duration of action that is required. The amount of active agent and the surface area of the pharmaceutical composition, etc., can be determined by routine bioavailability tests, comparing the blood levels of active substances after administration of the active substance in a pharmaceutical composition according to the invention on the skin in contact and the blood levels of the active substance observed after oral or intravenous administration of a therapeutically effective dose of the pharmacologically active substance.

Gegeven de dagelijkse dosis van een geneesmiddel voor orale toediening, zal de keuze van een geschikte hoeveelheid geneesmiddel die moet worden opgenomen in een transdennaal preparaat volgens de uitvinding afhangen van de farmacokinetische eigenschappen van de actieve stof, waaronder het effect in het begin; de hoeveelheid geneesmiddel die door de huid kan worden geabsorbeerd uit de betreffende matrix voor een gegeven oppervlak waarop het wordt aangebracht en in een gegeven tijd; en de tijd gedurende welke het preparaat moet worden aangebracht. Zo kan een geneesmiddel dat een hoog effect heeft in het begin een betrekkelijk lage hoeveelheid in het transdermale preparaat vereisen in vergelijking met de orale dagelijkse dosis, omdat het begineffect zal worden vermeden. Anderzijds wordt in het algemeen maximaal slechts ongeveer 50% van het geneesmiddel in de matrix in een periode van 3 dagen door de huid heen afgegeven.Given the daily dose of a medicament for oral administration, the choice of a suitable amount of medicament to be included in a transdenal composition according to the invention will depend on the pharmacokinetic properties of the active substance, including the initial effect; the amount of drug that can be absorbed through the skin from the relevant matrix for a given surface on which it is applied and in a given time; and the time during which the preparation must be applied. For example, a drug having a high initial effect may require a relatively low amount in the transdermal preparation compared to the oral daily dose, since the initial effect will be avoided. On the other hand, generally only a maximum of about 50% of the drug in the matrix is released through the skin over a 3-day period.

De farmaceutische preparaten volgens de uitvinding hebben in het algemeen bijvoorbeeld een werkzaam contactoppervlak van het geneesmiddelreservoir op de huid van ongeveer 1 tot ongeveer 50 cm en bij voorkeur ongeveer 2 tot 20 cm en zijn bestemd om te worden aangebracht gedurende 1-7 dagen cn bij voorkeur 1-3 dagen.The pharmaceutical compositions according to the invention generally have, for example, an effective contact surface of the drug reservoir on the skin of about 1 to about 50 cm and preferably about 2 to 20 cm and are intended to be applied for 1-7 days and preferably 1-3 days.

Verbinding A kan bijvoorbeeld worden toegediend in een dosis van 10 mg in een pleister van circa 10 cm2 waarbij elke drie dagen een pleister wordt aangebracht.Compound A can be administered, for example, at a dose of 10 mg in a patch of approximately 10 cm 2 with a patch applied every three days.

Het volgende voorbeeld illustreert de uitvinding.The following example illustrates the invention.

Voorbeeld II: Bereiding van een transdennaal preparaat dat een hydrofiel polymeer omvatExample II: Preparation of a transdenal preparation comprising a hydrophilic polymer

SamenstellingComposition

Verbinding met formule V, bijv. verbinding A 20%Compound of formula V, e.g. compound A 20%

Hydrofiel polymeer, bijv. Eudragit E 100*f 30%Hydrophilic polymer, e.g. Eudragit E 100 * 30%

Niet zwclbaar acrylaatpolymecr, bijv. Durotack 280-2416**) 44%Non-swellable acrylic polymer, e.g. Durotack 280-2416 **) 44%

Weekmaker, bijv. Brij 97***^ 6% *’ : Geregistreerd handelsmerk, verkrijgbaar bij Rohm, Darmstadt, W-Duitsland **} : Geregistreerd handelsmerk, verkrijgbaar bij Delft National Chemie Zutphen,Plasticizer, eg Brij 97 *** ^ 6% * ": Registered trademark, available at Rohm, Darmstadt, W-Germany **}: Registered trademark, available at Delft National Chemie Zutphen,

Nederland ***) : Geregistreerd handelsmerk, verkrijgbaar bij Atlas Chemie W-Duitsland.Netherlands ***): Registered trademark, available from Atlas Chemie W-Germany.

De componenten worden toegevoegd aan aceton of ethanol of een ander geschikt vluchtig organisch oplosmiddel en gemengd tot een visceuze massa. De massa wordt met een conventioneel apparaat uitgespreid boven op een gealuminiseerde polyesterfoelie (dikte 23 μ) onder vorming van een laag met een dikte in natte toestand van 0,2 mm. Men laat de laag bij kamertemperatuur gedurende 4 tot 6 uur drogen.The components are added to acetone or ethanol or another suitable volatile organic solvent and mixed to a viscous mass. The mass is spread with a conventional device on top of an aluminized polyester film (thickness 23 μ) to form a layer with a thickness in the wet state of 0.2 mm. The layer is allowed to dry at room temperature for 4 to 6 hours.

22

Daarna wordt de aluminiumfoelie tot pleisters met een oppervlak van ongeveer 10 cm gesneden.The aluminum foil is then cut into plasters with a surface of approximately 10 cm.

Claims

A phenyl carbamate with acetylcholinesterase inhibitory activity characterized by formula 1 of the formula sheet designated by (S) -N-ethyl-3 - [(1-dimethyl-amino) elhyl] -N-melhylphenyl carbamate, in the form of the free base or of an acid addition salt.

A phenyl carbamate according to claim 1 which is the hydrogen tartrate of the (S) -N-ethyl-3 - [(1-dimethylamino) ethyl] -N-methylphenyl carbamate.

Phenyl carbamate according to claim 1 or 2 in pharmaceutically acceptable form for use as a pharmaceutical.

Phenyl carbamate according to claim 1 or 2 in pharmaceutically acceptable form for use in the treatment of dementia senilis.

A phenyl carbamate according to claim 1 or 2 in pharmaceutically acceptable form for use in the treatment of Alzheimer's disease.

Phenyl carbamate according to claim 1 or 2 in pharmaceutically acceptable form for use in the treatment of Huntington's chorea, tardive dyskinesic, hyperkinesia, mania, acute confusion, Down syndrome or Friedrich ataxia.

A pharmaceutical composition comprising a compound according to claim 1 or 2 in pharmaceutically acceptable form, in association with a pharmaceutical carrier or diluent.

Process for the preparation of (S) -N-ethyl-3 - [(1-dimethylamino) ethyl] -N-methylphenyl carbamate of formula 1 in the form of the free base or of an acid addition salt, comprising the step of separating the enantiomers from the corresponding racemate and recovering the resulting compound of formula 1 in the form of the free base or the acid addition salt.