NL1010517C2 - Selection of genetically manipulated organisms containing a target DNA sequence comprises using an enoyl-ACP reductase gene as a selectable marker - Google Patents

Selection of genetically manipulated organisms containing a target DNA sequence comprises using an enoyl-ACP reductase gene as a selectable marker Download PDF

Info

Publication number
NL1010517C2
NL1010517C2 NL1010517A NL1010517A NL1010517C2 NL 1010517 C2 NL1010517 C2 NL 1010517C2 NL 1010517 A NL1010517 A NL 1010517A NL 1010517 A NL1010517 A NL 1010517A NL 1010517 C2 NL1010517 C2 NL 1010517C2
Authority
NL
Netherlands
Prior art keywords
enoyl
acp reductase
gene
organism
inhibitor
Prior art date
Application number
NL1010517A
Other languages
Dutch (nl)
Inventor
Antoine Raymond Stuitje
David William Rice
John Bernard Rafferty
Hendrik Johannes Jacob Nijkamp
Original Assignee
Stichting Phytogen
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Stichting Phytogen filed Critical Stichting Phytogen
Priority to NL1010517A priority Critical patent/NL1010517C2/en
Application granted granted Critical
Publication of NL1010517C2 publication Critical patent/NL1010517C2/en

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
    • C12N9/001—Oxidoreductases (1.) acting on the CH-CH group of donors (1.3)

Abstract

Method for selecting genetically manipulated organisms containing a target DNA sequence, where the organisms contain an endogenous enoyl-ACP reductase gene, comprises: (a) introducing a vector containing the target sequence and a second enoyl-ACP reductase gene into host organisms; (b) contacting the organisms with an enoyl-ACP reductase inhibitor that normally reduces the vitality of the organisms; and (c) selecting organisms on the basis of their vitality. Independent claims are also included for the following: (1) a gene construct containing a gene coding for either: (i) an enoyl-ACP reductase; or (ii) a mutated enoyl-ACP reductase with reduced sensitivity to triclosan or a compound capable of competing with triclosan for binding to enoyl-ACP reductase; (2) a compound capable of competing with triclosan for binding to enoyl-ACP reductase.

Description

Werkwijze voor het selecteren op de aanwezigheid van een DNA-volgorde in een genetisch gemanipuleerd organisme, een genconstruct, een verbinding en de toepassing daarvanMethod for selecting for the presence of a DNA sequence in a genetically modified organism, a gene construct, a compound and its use

De onderhavige uitvinding heeft betrekking op een werkwijze voor het selecteren op de de aanwezigheid van een DNA-volgorde in een genetisch gemanipuleerd organisme, waarbij de DNA-volgorde deel uitmaakt van een ingebrachte vector 5 die tevens een eerste gen omvat, waarbij het eerste gen in het organisme tot expressie wordt gebracht, en waarbij het organisme in contact wordt gebracht met een remmer welke de vitaliteit van het organisme vermindert.The present invention relates to a method for selecting for the presence of a DNA sequence in a genetically engineered organism, wherein the DNA sequence is part of an inserted vector which also includes a first gene, the first gene in the organism is expressed, and the organism is contacted with an inhibitor which reduces the vitality of the organism.

Een dergelijke werkwijze is in de biotechnologie 10 algemeen bekend. Zo wordt bijvoorbeeld als het eerste gen een antibiotica-resistentie-gen toegepast, en als remmer een antibioticum waarvoor het organisme in afwezigheid van het antibiotica-resistentie-gen gevoelig is. Hiermee kan op de aanwezigheid van de DNA-volgorde waarvan men eigenlijk de 15 aanwezigheid wenst vast te stellen worden geselecteerd.Such a method is generally known in biotechnology. For example, as the first gene an antibiotic resistance gene is used, and as an inhibitor an antibiotic to which the organism is sensitive in the absence of the antibiotic resistance gene. This makes it possible to select for the presence of the DNA sequence whose presence is actually wished to be determined.

Om de angst voor verspreiding van antibiotica-resis-tentie-genen weg te nemen, is er een grote behoefte aan alternatieve positieve merkers waarmee op de aanwezigheid van een DNA-volgorde in een organisme kan worden geselecteerd.In order to remove the fear of the spread of antibiotic resistance genes, there is a great need for alternative positive markers with which to select for the presence of a DNA sequence in an organism.

20 Volgens de onderhavige uitvinding kan dit worden bereikt doordat het organisme een tweede, endogeen gen bezit dat codeert voor een enoyl-ACP reductase, welke reductase een vitale rol speelt in het organisme en remming door de remmer de vitaliteit van het organisme aantast, en 25 a) als de remmer een remmer van de activiteit van enoyl-ACP reductase wordt toegepast; b) als het eerste eiwit, waarvoor het eerste gen codeert, een eiwit wordt toegepast dat een met enoyl-ACP reductase overeenkomende functionele activiteit bezit; en 30 c) op de vitaliteit van het organisme wordt geselec teerd.According to the present invention, this can be achieved in that the organism has a second, endogenous gene encoding an enoyl-ACP reductase, which reductase plays a vital role in the organism and inhibition by the inhibitor affects the vitality of the organism, and a) when the inhibitor is used an inhibitor of the activity of enoyl-ACP reductase; b) when the first protein encoded by the first gene, a protein is used which has a functional activity corresponding to enoyl-ACP reductase; and 30 (c) is selected for the vitality of the organism.

Verrassenderwijs is gevonden dat enoyl-ACP reductase, onder de vele enzymen die in een organisme aanwezig zijn, uitstekend geschikt is om te worden geremd voor het verminde- 1010517 2 ren van de vitaliteit terwijl het eerste gen dat tot expressie wordt gebracht als positieve merker kan fungeren. In de onderhavige aanvrage wordt onder de uitdrukking "vitaliteit vermindert" verstaan het in hoofdzaak stilzetten van celde-5 ling of zelfs doden van het organisme. Onder een vector wordt elk op in het vak bekende wijze door genetische manipulatie en/of synthese vervaardigd nucleinezuurconstruct verstaan dat door transformatie, zoals transductie of transfectie, in een organisme kan worden gebracht en tot expressie kan worden 10 gebracht. Hierbij wordt tevens een construct omvat dat na tussenkomst van een reverse-transcriptase in situ in het organisme wordt gevormd. De DNA-volgorde zal voor veel toepassingen zelf een gen bevatten waarvan wordt gewenst dat dit in het organisme tot expressie kan worden gebracht.Surprisingly, it has been found that, among the many enzymes present in an organism, enoyl-ACP reductase is excellently suited to be inhibited for decreasing vitality while the first gene expressed as a positive marker can be act. In the present application, the term "vitality decreases" is meant to substantially halt cell division or even killing of the organism. By vector is meant any nucleic acid construct prepared in the art by genetic engineering and / or synthesis, which can be introduced and expressed in an organism by transformation, such as transduction or transfection. This also includes a construct that is formed in situ in the organism after the intervention of a reverse transcriptase. For many applications, the DNA sequence will itself contain a gene that is desired to be expressed in the organism.

15 Volgens een eerste uitvoeringsvorm codeert het eerste gen voor enoyl-ACP reductase en het eerste gen wordt zodanig tot expressie gebracht dat het door het eerste gen geproduceerde enoyl-ACP reductase geschikt in een ten minste 2 keer, bij voorkeur ten minste 10 keer, en met meer voorkeur 20 ten minste 25 keer hogere concentratie aanwezig is in vergelijking met het endogene enoyl-ACP reductase.According to a first embodiment, the first gene encodes enoyl-ACP reductase and the first gene is expressed such that the enoyl-ACP reductase produced by the first gene is suitably in at least 2 times, preferably at least 10 times, and more preferably at least 25 times higher concentration is present compared to the endogenous enoyl-ACP reductase.

Op deze wijze kan het gebruik van niet-eigen genen worden vermeden.In this way, the use of non-own genes can be avoided.

Volgens een alternatieve uitvoeringsvorm wordt als 25 het eerste gen een gemuteerd gen voor enoyl-ACP reductase toegepast, en het eerste eiwit een verlaagde gevoeligheid bezit voor de remmer.According to an alternative embodiment, a mutated gene for enoyl-ACP reductase is used as the first gene, and the first protein has a reduced sensitivity to the inhibitor.

Voor een dergelijk gemuteerd gen is geen verhoogde expressie (dat wil zeggen van dit ingebrachte gen) noodzake-30 lijk en zijn eventuele nadelige gevolgen van een verhoogde enoyl-ACP reductase-activiteit bij de gastheer minimaal. Datzelfde is ook het geval bij eventuele ongewenste verspreiding.For such a mutated gene, no increased expression (ie, of this introduced gene) is necessary and any adverse effects of increased enoyl-ACP reductase activity in the host are minimal. The same is also the case with any unwanted spread.

Volgens een voorkeursuitvoering wordt als een remmer 35 een verbinding toegepast welke de binding van Triclosan aan enoyl-ACP reductase remt.According to a preferred embodiment, a compound is used as an inhibitor which inhibits the binding of Triclosan to enoyl-ACP reductase.

Dergelijke verbindingen, waaronder in de onderhavige aanvrage ook Triclosan zelf wordt gerekend, zijn zeer geschikt als de remmer. Binding kan op in het vak welbekende 1010517 3 wijze worden vastgesteld, bijvoorbeeld onder gebruikmaking van radioactieve analoga, zoals die met 14C. De binding wordt, bij equimolaire concentraties verbinding en remmer, geschikt met ten minste 10%, bij voorkeur met ten minste 50%, met meer 5 voorkeur ten minste 80% en met de meeste voorkeur ten minste 95% geremd.Such compounds, which also include Triclosan itself in the present application, are very suitable as the inhibitor. Binding can be determined in a manner well known in the art, for example, using radioactive analogs, such as those with 14C. The bond, at equimolar compound and inhibitor concentrations, is suitably inhibited by at least 10%, preferably by at least 50%, more preferably at least 80%, and most preferably at least 95%.

Bij voorkeur wordt als het organisme een organisme toegepast gekozen uit een bacterie, gist, schimmel of plant.Preferably, the organism used is an organism selected from a bacterium, yeast, fungus or plant.

Voor deze categorie organismen, met name gist, 10 schimmel en plant geldt dat de behoefte aan een niet op antibioticum gebaseerde positieve merker zeer groot is. Aanvraagster heeft gevonden dat een grote verscheidenheid aan planten zeer gevoelig is voor Triclosan, zoals de zandraket (Arabidopsis thaliana), koolzaad (Brassica napis), tabak 15 (Nicotina tabacum), tomaat en petunia. Van de eerste drie is door aanvraagster experimenteel aangetoond dat het enoyl-ACP reductase door Triclosan wordt geremd.For this category of organisms, in particular yeast, fungus and plant, the need for a non-antibiotic-based positive marker is very great. The applicant has found that a wide variety of plants are very sensitive to Triclosan, such as the sand rocket (Arabidopsis thaliana), rapeseed (Brassica napis), tobacco 15 (Nicotina tabacum), tomato and petunia. Of the first three, the applicant has shown experimentally that the enoyl-ACP reductase is inhibited by Triclosan.

De uitvinding heeft verder betrekking op het toepassen van een gen dat codeert voor een eiwit met een functione-20 le activiteit die overeenkomt met die van enoyl-ACP reductase, voor het selecteren op de aanwezigheid van een niet voor enoyl-ACP reductase coderende DNA-volgorde in een met een vector getransformeerd organisme, waarbij de te detecteren DNA-volgorde en het gen deel uitmaken van de vector 25 waarmee het organisme wordt getransformeerd. De DNA-volgorde is een niet met het gen homologe volgorde en codeert niet voor een eiwit met een functionele activiteit die overeenkomt met die van enoyl-ACP reductase.The invention further relates to the use of a gene encoding a protein with a functional activity corresponding to that of enoyl-ACP reductase, for selecting for the presence of a DNA encoding non-enoyl-ACP reductase. sequence in a vector-transformed organism, the DNA sequence to be detected and the gene being part of the vector transforming the organism. The DNA sequence is a non-gene homologous sequence and does not encode a protein with a functional activity similar to that of enoyl-ACP reductase.

De uitvinding heeft tevens betrekking op een gencon-30 struct dat een gen omvat dat codeert voor i) enoyl-ACP reductase of ii) een gemuteerd enoyl-ACP reductase met verlaagde gevoeligheid voor remming door a) Triclosan of b) een verbinding welke met Triclosan kan concurreren om de binding aan 35 enoyl-ACP reductase.The invention also relates to a gene construct comprising a gene encoding i) enoyl-ACP reductase or ii) a mutated enoyl-ACP reductase with reduced susceptibility to inhibition by a) Triclosan or b) a compound containing Triclosan can compete for binding to 35 enoyl-ACP reductase.

Een dergelijk genconstruct kan worden toegepast bij de werkwijze volgens de uitvinding. Het gen bevindt zich daarbij onder controle van een in de gewenste gastheer werkzame promotor.Such a gene construct can be used in the method according to the invention. The gene is thereby under the control of a promoter active in the desired host.

1010517 41010517 4

Tenslotte heeft de uitvinding betrekking op een verbinding welke in staat is tot competitie met Triclosan om binding aan enoyl-ACP reductase, welke verbinding geen Triclosan is.Finally, the invention relates to a compound capable of competing with Triclosan for binding to enoyl-ACP reductase, which compound is not Triclosan.

5 Dergelijke verbindingen zijn geschikt als alterna tieven voor Triclosan. Zo kan bijvoorbeeld Triclosan van een sulfonaatgroep of tweede hydroxylgroep worden voorzien waardoor de wateroplosbaarheid wordt verhoogd. De uitvinding heeft derhalve ook betrekking op de toepassing van de verbin-10 ding als remmer bij de werkwijze volgens de uitvinding.Such compounds are suitable as alternatives to Triclosan. For example, Triclosan can be provided with a sulfonate group or second hydroxyl group, thereby increasing the water solubility. The invention therefore also relates to the use of the compound as an inhibitor in the method according to the invention.

10105171010517

Claims (9)

1. Werkwijze voor het selecteren op de aanwezigheid van een DNA-volgorde in een genetisch gemanipuleerd organisme, waarbij de DNA-volgorde deel uitmaakt van een ingebrachte vector die tevens een eerste gen omvat, waarbij het eerste 5 gen in het organisme tot expressie wordt gebracht, en waarbij het organisme in contact wordt gebracht met een remmer welke de vitaliteit van het organisme vermindert, met het kenmerk, dat het organisme een tweede, endogeen gen bezit dat codeert voor een enoyl-ACP reductase, welke reductase een vitale rol 10 speelt in het organisme en remming door de remmer de vitaliteit van het organisme aantast, en a) als de remmer een remmer van de activiteit van enoyl-ACP reductase wordt toegepast; b) als het eerste gen een gen wordt toegepast dat 15 codeert voor een eiwit dat een functionele activiteit bezit die overeenkomt met die van enoyl-ACP reductase; en c) op de vitaliteit van het organisme wordt geselecteerd.A method for selecting for the presence of a DNA sequence in a genetically engineered organism, wherein the DNA sequence is part of an inserted vector which also includes a first gene, wherein the first 5 gene is expressed in the organism , and wherein the organism is contacted with an inhibitor which reduces the vitality of the organism, characterized in that the organism has a second, endogenous gene encoding an enoyl-ACP reductase, which reductase plays a vital role in the organism and inhibition by the inhibitor affects the vitality of the organism, and a) when the inhibitor is used an inhibitor of the activity of enoyl-ACP reductase; b) when the first gene is used, a gene encoding a protein having a functional activity similar to that of enoyl-ACP reductase; and (c) is selected for the vitality of the organism. 2. Werkwijze volgens conclusie 1, met het kenmerk, 20 dat het eerste gen voor enoyl-ACP reductase codeert en het eerste gen zodanig tot expressie wordt gebracht dat het door het eerste gen geproduceerde enoyl-ACP reductase geschikt in een ten minste 2 keer, bij voorkeur ten minste 10 keer, en met meer voorkeur ten minste 25 keer hogere concentratie 25 aanwezig is in vergelijking met het endogene enoyl-ACP reductase .2. A method according to claim 1, characterized in that the first gene encodes enoyl-ACP reductase and the first gene is expressed in such a way that the enoyl-ACP reductase produced by the first gene is arranged in at least 2 times, preferably at least 10 times, and more preferably at least 25 times higher concentration is present as compared to the endogenous enoyl-ACP reductase. 3. Werkwijze volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat als het eerste gen een gemuteerd gen voor enoyl-ACP reductase wordt toegepast, en het eerste eiwit een verlaagde 30 gevoeligheid bezit voor de remmer.3. A method according to claim 1, characterized in that as the first gene a mutated gene for enoyl-ACP reductase is used, and the first protein has a reduced sensitivity to the inhibitor. 4. Werkwijze volgens één der voorgaande conclusies, met het kenmerk, dat als een remmer een verbinding wordt toegepast welke de binding van Triclosan aan enoyl-ACP reductase remt.A method according to any one of the preceding claims, characterized in that as an inhibitor a compound is used which inhibits the binding of Triclosan to enoyl-ACP reductase. 5. Werkwijze volgens één der voorgaande conclusies, met het kenmerk, dat als het organisme een organisme wordt 1 01 05 1 ? 1 « toegepast gekozen uit een bacterie, gist, schimmel of plant.Method according to any one of the preceding claims, characterized in that when the organism becomes an organism 1 01 05 1? 1 «applied selected from a bacterium, yeast, fungus or plant. 6. Toepassing van een gen dat codeert voor een eiwit met een functionele activiteit die overeenkomt met die van enoyl-ACP reductase, voor het selecteren op de aanwezigheid 5 van een niet voor enoyl-ACP reductase coderende DNA-volgorde in een met een vector getransformeerd organisme, waarbij de te detecteren DNA-volgorde en het gen deel uitmaken van de vector waarmee het organisme wordt getransformeerd.6. Use of a gene encoding a protein with a functional activity corresponding to that of enoyl-ACP reductase, for selecting for the presence of a DNA sequence not encoding enoyl-ACP reductase in a vector transformed with a vector organism, where the DNA sequence to be detected and the gene are part of the vector with which the organism is transformed. 7. Genconstruct dat een gen omvat dat codeert voor 10 i) enoyl-ACP reductase of ii) een gemuteerd enoyl-ACP reductase met verlaagde gevoeligheid voor remming door a) Triclosan of b) een verbinding welke met Triclosan kan concurreren om de binding aan enoyl-ACP reductase.A gene construct comprising a gene encoding 10 i) enoyl-ACP reductase or ii) a mutated enoyl-ACP reductase with reduced susceptibility to inhibition by a) Triclosan or b) a compound that can compete with Triclosan for binding to enoyl -ACP reductase. 8. Verbinding welke in staat is tot competitie met Triclosan om binding aan enoyl-ACP reductase, welke verbinding geen Triclosan is.8. A compound capable of competing with Triclosan for binding to enoyl-ACP reductase, which compound is not Triclosan. 9. Toepassing van de verbinding volgens conclusie 8 als remmer bij de werkwijze volgens een van de conclusies 1 20 tot 5. 101 0517Use of the compound according to claim 8 as an inhibitor in the method according to any one of claims 1 to 5. 101 0517
NL1010517A 1998-11-10 1998-11-10 Selection of genetically manipulated organisms containing a target DNA sequence comprises using an enoyl-ACP reductase gene as a selectable marker NL1010517C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
NL1010517A NL1010517C2 (en) 1998-11-10 1998-11-10 Selection of genetically manipulated organisms containing a target DNA sequence comprises using an enoyl-ACP reductase gene as a selectable marker

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
NL1010517A NL1010517C2 (en) 1998-11-10 1998-11-10 Selection of genetically manipulated organisms containing a target DNA sequence comprises using an enoyl-ACP reductase gene as a selectable marker
NL1010517 1998-11-10

Publications (1)

Publication Number Publication Date
NL1010517C2 true NL1010517C2 (en) 2000-05-11

Family

ID=19768110

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NL1010517A NL1010517C2 (en) 1998-11-10 1998-11-10 Selection of genetically manipulated organisms containing a target DNA sequence comprises using an enoyl-ACP reductase gene as a selectable marker

Country Status (1)

Country Link
NL (1) NL1010517C2 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009011651A1 (en) * 2007-07-16 2009-01-22 Rvc Enterprise Mutually suppressive gene/inhibitor combinations for non-antibiotic selection of recombinant strains

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0140504A1 (en) * 1983-08-15 1985-05-08 Sandoz Ag Novel plasmid vector
EP0826774A2 (en) * 1996-08-28 1998-03-04 Smithkline Beecham Corporation Staphylococcal Fab I enoyl-ACP reductase
WO1998042827A2 (en) * 1997-03-21 1998-10-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Gene encoding oxalate decarboxylase from aspergillus phoenicis
WO1998048023A1 (en) * 1997-04-18 1998-10-29 Mogen International Nv Selection marker

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0140504A1 (en) * 1983-08-15 1985-05-08 Sandoz Ag Novel plasmid vector
EP0826774A2 (en) * 1996-08-28 1998-03-04 Smithkline Beecham Corporation Staphylococcal Fab I enoyl-ACP reductase
WO1998042827A2 (en) * 1997-03-21 1998-10-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Gene encoding oxalate decarboxylase from aspergillus phoenicis
WO1998048023A1 (en) * 1997-04-18 1998-10-29 Mogen International Nv Selection marker

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BERGLER, H. ET AL.: "Protein EnvM is the NADH-dependent Enoyl-ACP reductase (FabI) of E. coli", J. BIOL. CHEM., vol. 269, no. 8, 25 February 1994 (1994-02-25), pages 5493 - 5496, XP002108568 *
HEATH R.J.: "Broad spectrum antimicrobial biocides target the FabI component of fatty acid synthesis", J. BIOL. CHEM., vol. 273, no. 46, 13 November 1998 (1998-11-13), pages 31316 - 30320, XP002108571 *
IRDANI T.: "Construction of a new vector coferring methtrexate resistance in Nicotiana tabacum plants.", PLANT MOL. BIOL., vol. 37, August 1998 (1998-08-01), pages 1079 - 1084, XP002108570 *
KATER M.M.: "The use of a habrid genetic system to study the functional relationship between prokaryotic and plant multi-enzyme fatty acid synthetase complexes.", PLANT MOL. BIOL., vol. 25, 1994, pages 771 - 790, XP002108569 *
MCMURRY L.M. ET AL.: "Triclosan targets lipid synthesis", NATURE, vol. 394, 6 August 1998 (1998-08-06), pages 531 - 532, XP002108567 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009011651A1 (en) * 2007-07-16 2009-01-22 Rvc Enterprise Mutually suppressive gene/inhibitor combinations for non-antibiotic selection of recombinant strains

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Daniell et al. Multigene engineering: dawn of an exciting new era in biotechnology
Yoder Parasitic plant responses to host plant signals: a model for subterranean plant–plant interactions
Broin et al. The plastidic 2-cysteine peroxiredoxin is a target for a thioredoxin involved in the protection of the photosynthetic apparatus against oxidative damage
Kapri-Pardes et al. The thylakoid lumen protease Deg1 is involved in the repair of photosystem II from photoinhibition in Arabidopsis
Bergmüller et al. Characterization of an Arabidopsis mutant deficient in γ-tocopherol methyltransferase
Karpinska et al. A novel superoxide dismutase with a high isoelectric point in higher plants. Expression, regulation, and protein localization
Millar et al. Mitochondrial cytochrome c oxidase and succinate dehydrogenase complexes contain plant specific subunits
Mehes-Smith et al. Coping mechanisms of plants to metal contaminated soil
Patron et al. A tertiary plastid uses genes from two endosymbionts
Tsakraklides et al. Sulfate reduction is increased in transgenic Arabidopsis thaliana expressing 5′‐adenylylsulfate reductase from Pseudomonas aeruginosa
Mimura et al. Arabidopsis TH2 encodes the orphan enzyme thiamin monophosphate phosphatase
Meurer et al. A peptide chain release factor 2 affects the stability of UGA-containing transcripts in Arabidopsis chloroplasts
Li et al. Deletion of the carboxyl-terminal region of 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid synthase, a key protein in the biosynthesis of ethylene, results in catalytically hyperactive, monomeric enzyme.
Tomscha et al. Phosphatase under-producer mutants have altered phosphorus relations
Bollenbach et al. The RNA-binding proteins CSP41a and CSP41b may regulate transcription and translation of chloroplast-encoded RNAs in Arabidopsis
Greene et al. Maize endosperm ADP–glucose pyrophosphorylase SHRUNKEN2 and BRITTLE2 subunit interactions
HRP20010215A2 (en) Genes of the 1-desoxy-d-xylulose biosynthetic pathway
DE69923628T2 (en) 3,4-dihydroxy-2-butanone 4-phosphate synthase
NL1010517C2 (en) Selection of genetically manipulated organisms containing a target DNA sequence comprises using an enoyl-ACP reductase gene as a selectable marker
Peterson et al. Leaf-targeted phytochelatin synthase in Arabidopsis thaliana
Shinohara Root meristem growth factor RGF, a sulfated peptide hormone in plants
Hejgaard et al. Serpins of oat (Avena sativa) grain with distinct reactive centres and inhibitory specificity
US20050055746A1 (en) Method for increasing protein content in plant cells
Rouhier et al. Enhancement of poplar glutaredoxin expression by optimization of the cDNA sequence
Weerakoon Genetic engineering for metal and metalloid detoxification

Legal Events

Date Code Title Description
PD2B A search report has been drawn up
VD1 Lapsed due to non-payment of the annual fee

Effective date: 20030601