NL1009814C2 - Production of N-acylated amino nitriles comprises reacting an amino nitrile with an optionally alpha-substituted phenylacetic or phenoxyacetic acid in the presence of a penicillin G or V acylase - Google Patents
Production of N-acylated amino nitriles comprises reacting an amino nitrile with an optionally alpha-substituted phenylacetic or phenoxyacetic acid in the presence of a penicillin G or V acylase Download PDFInfo
- Publication number
- NL1009814C2 NL1009814C2 NL1009814A NL1009814A NL1009814C2 NL 1009814 C2 NL1009814 C2 NL 1009814C2 NL 1009814 A NL1009814 A NL 1009814A NL 1009814 A NL1009814 A NL 1009814A NL 1009814 C2 NL1009814 C2 NL 1009814C2
- Authority
- NL
- Netherlands
- Prior art keywords
- amino
- salt
- phenyl
- acylated
- nitrile
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/02—Amides, e.g. chloramphenicol or polyamides; Imides or polyimides; Urethanes, i.e. compounds comprising N-C=O structural element or polyurethanes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C255/00—Carboxylic acid nitriles
- C07C255/01—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms
- C07C255/32—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms having cyano groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton containing at least one six-membered aromatic ring
- C07C255/42—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms having cyano groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton containing at least one six-membered aromatic ring the carbon skeleton being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being further bound to other hetero atoms
- C07C255/44—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to acyclic carbon atoms having cyano groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton containing at least one six-membered aromatic ring the carbon skeleton being further substituted by singly-bound nitrogen atoms, not being further bound to other hetero atoms at least one of the singly-bound nitrogen atoms being acylated
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
Abstract
Description
- 1 - PN 9612- 1 - PN 9612
WERKWIJZE VOOR DE BEREIDING VAN EEN N-GEACYLEERD 5 AMINONITRILPROCESS FOR PREPARING AN N-ACYLATED 5-AMINONITRIL
De uitvinding betreft een werkwijze voor de bereiding van een N-geacyleerd aminonitril waarbij een 10 aminonitril of een zout daarvan, wordt geacyleerd met een fenyl- of fenoxy- al dan niet a-gesubstitueerd-azijnzuur of een zout daarvan, in aanwezigheid van een Pen-G of een Pen-V acylase.The invention relates to a process for the preparation of an N-acylated aminonitrile in which an aminonitrile or a salt thereof is acylated with a phenyl or phenoxy- or unsubstituted-acetic acid or a salt thereof, in the presence of a Pen -G or a Pen-V acylase.
Het is bekend dat via chemische N-acylering 15 beschermgroepen aan te brengen zijn. Een nadeel van deze bekende werkwijzen is dat daarbij dure en vervuilende chemicaliën nodig zijn.It is known that protective groups can be applied via chemical N-acylation. A drawback of these known methods is that they require expensive and polluting chemicals.
Verrassenderwijze is het mogelijk gebleken om aminonitrillen enzymatisch te acyleren op de N-20 positie, door een fenyl- of een fenoxy- al dan niet α-gesubstitueerd-azijnzuur of een zout daarvan, toe te passen als acyleringsmiddel en een Pen-G of een Pen-V acylase als enzym. Met behulp van deze werkwijze kon een hoge opbrengst worden gehaald, zonder gebruik te 25 maken van dure en vervuilende chemicaliën. Na de acylering wordt een stabiel aminonitril verkregen waarmee diverse interessante volgreacties kunnen worden uitgevoerd. Een ander voordeel van de werkwijze volgens de uitvinding is dat de aangebrachte beschermgroepen na 30 volgreactie(s) gemakkelijk enzymatisch verwijderd kunnen worden.Surprisingly, it has been found possible to enzymatically acylate amino nitriles at the N-20 position, by using a phenyl or a phenoxy- or unsubstituted α-substituted acetic acid or a salt thereof as an acylating agent and a Pen-G or a Pen-V acylase as an enzyme. With this method, a high yield could be obtained, without using expensive and polluting chemicals. After the acylation, a stable amino nitrile is obtained, with which various interesting follow-up reactions can be carried out. Another advantage of the method according to the invention is that the applied protective groups can be easily enzymatically removed after 30 reaction reaction (s).
De werkwijze volgens de uitvinding is met \ name interessant voor de N-acylering van a-aminonitrillen, aangezien deze eenvoudig toegankelijk 35 zijn via de Strecker reactie. De Strecker reactie is een evenwichtsreactie die bij relatief hoge pH wordt p10 09 8 1 4 - 2 - uitgevoerd, bijvoorbeeld bij een pH tussen 7 en 10. Pen-G en Pen-V acylases worden toegepast bij een pH tussen 6 en 10, het pH optimum ligt in het algemeen tussen 7 en 9. Dit betekent dat in het pH-gebied waarin 5 Pen-G en Pen-V acylases een optimale activiteit bezitten, ook in significante mate de (ongewenste) retro-Strecker-reactie (waarbij aminonitril weer wordt omgezet in de uitgangsproducten (aldehyde, ammoniak en HCN) van de Strecker-reactie) optreedt.The method according to the invention is particularly interesting for the N-acylation of α-amino nitriles, since these are easily accessible via the Strecker reaction. The Strecker reaction is an equilibrium reaction that is carried out at a relatively high pH p10 09 8 1 4 - 2 - for example at a pH between 7 and 10. Pen-G and Pen-V acylases are used at a pH between 6 and 10, the The pH optimum is generally between 7 and 9. This means that in the pH range in which 5 Pen-G and Pen-V acylases have optimal activity, also significantly the (undesired) retro-Strecker reaction (where aminonitrile is converted again into the starting products (aldehyde, ammonia and HCN of the Strecker reaction).
10 Verrassenderwijze is gebleken dat wanneer de N- acylering van het aminonitril wordt uitgevoerd bij een pH < 7, bij voorkeur < 6, de mate waarin de retro-Strecker reactie optreedt heel laag is, en, in tegenstelling tot wat uit de literatuur bekend is voor 15 andere verbindingen, bij aminonitrillen een hoge enzymactiviteit van de Pen-G en Pen-V acylases werd waargenomen.Surprisingly, it has been found that when the N-acylation of the aminonitrile is carried out at a pH <7, preferably <6, the degree of the retro-Strecker reaction occurs is very low, and contrary to what is known from the literature for other compounds, with amino nitriles a high enzyme activity of the Pen-G and Pen-V acylases was observed.
Bij voorkeur wordt een, eventueel ring-en/of α-gesubstitueerd, fenylazijnzuur of een zout 20 daarvan in combinatie met een Pen-G acylase, of een, eventueel ring- en/of α-gesubstitueerd, fenoxyazijnzuur of een zout daarvan in combinatie met een Pen-V acylase toegepast.Preferably, an optionally ring and / or α-substituted phenylacetic acid or a salt thereof in combination with a Pen-G acylase, or an optionally ring and / or α-substituted phenoxyacetic acid or a salt thereof in combination with a Pen-V acylase.
De werkwijze volgens de uitvinding vormt 25 voor een aantal aminonitrillen een interessante route om optisch actieve aminonitrillen te maken. Er zijn vrijwel geen goede methoden bekend om optisch actieve aminonitrillen te maken aangezien de nitrillen bij een pH > 6 in het bijzonder > 7 in de regel chemisch 30 instabiel d.w.z. gevoelig voor retro Strecker reactie zijn. Verder zijn aminonitrillen bijzonder racemisatiegevoelig, met name bij hogere pH-waarden. Verrassenderwijze is nu gebleken dat de acylering van een aantal aminonitrillen, bijvoorbeeld a-aryl-a- „100981 4 - 3 - aminonitrillen, enantioselectief verloopt. Bovendien bleek, met name bij aminonitrillen met op de a-plaats een H, afhankelijk van de gekozen pH-waarde het resterende, niet geacyleerde, enantiomeer al dan niet 5 te racemiseren: bij een pH-waarde groter dan 4,in het bijzonder groter dan 5 bleek het resterende enantiomeer al relatief snel te racemiseren waardoor bijvoorbeeld uitgaande van een racemisch mengsel van a-fenyl-a-aminonitril het corresponderende (L)-N-10 fenylacetylderivaat met een opbrengst van meer dan 95% en een enantiomere overmaat van meer dan 97% kon worden verkregen. Daarnaast is gebleken dat bij lagere pH-waarden, bijvoorbeeld bij een pH lager dan 4,5, geen of langzame racemisatie optreedt. In dat geval kan met de 15 werkwijze volgens de uitvinding zowel het L-N-geacyleerde aminonitril als het D- niet geacyleerde aminonitril met hoge enantiomere overmaat, respectievelijk meer dan 95% en meer dan 90%, worden verkregen. Voor de bereiding van L-N-geacyleerd 20 aminonitril wordt bij voorkeur een pH tussen 4,0 enThe method according to the invention forms an interesting route for a number of amino nitriles to make optically active amino nitriles. Virtually no good methods are known for making optically active amino nitriles since the nitriles at a pH> 6 in particular> 7 are generally chemically unstable, i.e. sensitive to retro Strecker reaction. Furthermore, amino nitriles are particularly sensitive to racemization, especially at higher pH values. Surprisingly, it has now been found that the acylation of a number of amino nitriles, for example a-aryl-α-100981-4-amino nitriles, is enantioselective. In addition, especially with amino nitriles with an α-position H, the residual, unacylated, enantiomer may or may not racemize depending on the selected pH value: at a pH value greater than 4, in particular greater Then the residual enantiomer was found to racemize relatively quickly, so that, for example, starting from a racemic mixture of α-phenyl-α-aminonitrile, the corresponding (L) -N-10 phenylacetyl derivative with a yield of more than 95% and an enantiomeric excess of more than 97% could be obtained. In addition, it has been found that at lower pH values, for example at a pH below 4.5, no or slow racemization occurs. In that case, the L-N-acylated aminonitrile and the D- non-acylated aminonitrile with high enantiomeric excess, greater than 95% and greater than 90%, can be obtained by the method according to the invention. For the preparation of L-N-acylated aminonitrile, a pH is preferably adjusted between 4.0 and
7,0, in het bijzonder tussen 4,5 en 6,0 gekozen,· wanneer D-aminonitril wordt beoogd wordt bij voorkeur een pH tussen 2 en 5, in het bijzonder tussen 3 en 4,5 gekozen. Overigens is het in principe ook mogelijk op 25 optisch actief D-N-geacyleerd aminonitril te bereiden I7.0, in particular between 4.5 and 6.0, is chosen, when D-aminonitrile is intended, a pH is preferably chosen between 2 and 5, in particular between 3 and 4.5. Incidentally, it is in principle also possible to prepare optically active D-N-acylated aminonitrile.
door enzymatische hydrolyse van chemisch bereid D,L-N-geacyleerd aminonitril.by enzymatic hydrolysis of chemically prepared D, L-N-acylated aminonitrile.
De uitvinding heeft tevens betrekking op a-amino-a-aryl-nitrillen, in het bijzonder a-amino-a-H-30 aminonitrillen, met op de N-positie een acylgroep afgeleid van een fenyl- of een fenoxy- al dan niet α-gesubstitueerd-azijnzuur met een e.e. groter dan 90%, in het bijzonder groter dan 95%.The invention also relates to α-amino-α-aryl-nitriles, in particular α-amino-αH-30 amino nitriles, with an acyl group at the N position derived from a phenyl or a phenoxy, whether or not α- substituted acetic acid with an ee greater than 90%, especially greater than 95%.
r B1009 81 4 - 4 -r B1009 81 4 - 4 -
Geschikte aminonitrillen die kunnen worden toegepast in de werkwijze volgens de uitvinding zijn bijvoorbeeld α-aminonitrillen in het bijzonder α-Η-α-aminonitrillen. Zij kunnen worden ingezet als vrije 5 base of als zout. Bij voorkeur wordt het a-aminonitril als zout toegepast omdat het aminonitril als zout stabieler is bij opslag. Het aminonitril kan worden toegepast als zout met elk willekeurig zuur, bijvoorbeeld een mineraal zuur, in het bijzonder HC1, 10 H2S04 of HN03, bij voorkeur H2S04, of een organisch zuur, in het bijzonder een carbonzuur, bijvoorbeeld fenylazijnzuur, of een sulfonzuur, bijvoorbeeld p-tolueensulfonzuur.Suitable amino nitriles which can be used in the method according to the invention are, for example, α-amino nitriles, in particular α-Η-α-amino nitriles. They can be used as a free base or as salt. Preferably, the α-aminonitrile is used as a salt because the aminonitrile as a salt is more stable on storage. The amino nitrile can be used as a salt with any acid, for example a mineral acid, in particular HCl, H 2 SO 4 or HNO 3, preferably H 2 SO 4, or an organic acid, in particular a carboxylic acid, for example phenylacetic acid, or a sulfonic acid, for example p-toluenesulfonic acid.
Geschikte fenyl- of fenoxy- al dan niet 15 α-gesubstitueerde-azijnzuren die kunnen worden toegepast in de werkwijze volgens de uitvinding zijn bijvoorbeeld fenyl- of fenoxy- al dan niet α-gesubstitueerde- azijnzuren met formule 1 20 Ra - R4 O Rj.Suitable phenyl or phenoxy- or unsubstituted-alpha-substituted-acetic acids which can be used in the process according to the invention are, for example, phenyl or phenoxy- or unsubstituted α-substituted acetic acids of formula 1 Ra - R4 O Rj.
co2h 25 met n = 0 of 1co2h 25 with n = 0 or 1
Ri = H, OH, F, Cl, Br, nitro, alkyl of alkoxy met 1-3 C-atomen R2 ....R6 elk onafhankelijk H, OH, F, Cl, Br, N02 30 alkyl» alkoxy met 1-10 C-atomen.R 1 = H, OH, F, Cl, Br, nitro, alkyl or alkoxy with 1-3 C atoms R2 .... R6 each independently H, OH, F, Cl, Br, NO 2 alkyl »alkoxy with 1- 10 C atoms.
Bij voorkeur zijn R2 tot R6 elk gelijk aan H en staat Ri voor H of OH.Preferably R2 to R6 are each equal to H and R1 represents H or OH.
Het fenyl-of fenoxy- al dan niet α-gesubstitueerde- azijnzuur kan als vrij zuur, of alsThe phenyl or phenoxy, whether or not α-substituted-acetic acid, may be used as the free acid, or as
^009 8 1 A^ 009 8 1 A
- 5 - zout met een base worden toegepast. Geschikte basen zijn bijvoorbeeld ammonia en (aard)alkalihydroxiden.- 5 - salt with a base can be used. Suitable bases are, for example, ammonia and (earth) alkali hydroxides.
Bij voorkeur wordt een zout van fenyl- of fenoxy- al dan niet α-gesubstitueerd-azijnzuur toegepast om de 5 oplosbaarheid te verbeteren, in het bijzonder het ammoniumzout van fenylazijnzuur, of het zout van fenylazijnzuur en het te acyleren aminonitril.Preferably, a salt of phenyl or phenoxy, or α-substituted-acetic acid, is used to improve solubility, in particular the ammonium salt of phenylacetic acid, or the salt of phenylacetic acid and the aminonitrile to be acylated.
In een voorkeursuitvoeringsvorm wordt een zout van een aminonitril met een zuur, als 10 geconcentreerde oplossing in contact gebracht met een geconcentreerde oplossing van een zout van fenyl- of fenoxy- al dan niet α-gesubstitueerd-azijnzuur met een base, en wordt vervolgens de enzymreactie gestart. Het maakt daarbij niet uit of de aminonitriloplossing wordt 15 toegevoegd aan de fenyl- of fenoxy- al dan niet a-gesubstitueerd-azijnzuuroplossing, of omgekeerd, of beide oplossingen tegelijk worden toegevoegd.In a preferred embodiment, a salt of an amino nitrile with an acid, as a concentrated solution, is contacted with a concentrated solution of a salt of phenyl or phenoxy- or unsubstituted-acetic acid with a base, and then the enzyme reaction started. It does not matter whether the aminonitrile solution is added to the phenyl or phenoxy- or unsubstituted-acetic acid solution, or vice versa, or both solutions are added simultaneously.
Als enzymen worden in de werkwijze volgens de uitvinding Pen-G of Pen-V acylases toegepast.Pen-G or Pen-V acylases are used as enzymes in the method according to the invention.
20 Dergelijke enzymen zijn bijvoorbeeld bekend onder de algemene aanduiding penicilline amidase of penicilline acylase en zijn bijvoorbeeld beschreven in J.G. Shewale et. al. Process Biochemistry, Augustus 1989 p. 146-154 en in J.G. Shewale et. al. Process Biochemistry 25 International, Juni 1990, p. 97-103. Voorbeelden van geschikte enzymen zijn enzymen afgeleid vanSuch enzymes are known, for example, under the general designation penicillin amidase or penicillin acylase and are described, for example, in J.G. Shewale et. al. Process Biochemistry, August 1989 p. 146-154 and in J.G. Shewale et. al. Process Biochemistry 25 International, June 1990, p. 97-103. Examples of suitable enzymes are enzymes derived from
Acetobacter, in het bijzonder Acetobacter pasteurianum. Ξ &gromonag, Alcaliaenes. in het bijzonder Alcaliaenes t faecalis, Aohanocladium. Bacillus sp.. in het bijzonder ' 30 Bacillus meaaterium. Cephalosporium. Escherichia, in z het bijzonder Escherichia coll. Flavobacterium.Acetobacter, in particular Acetobacter pasteurianum. & Gromonag, Alcaliaenes. in particular Alcaliaenes t faecalis, Aohanocladium. Bacillus sp., In particular 'Bacillus meaaterium. Cephalosporium. Escherichia, in particular Escherichia coll. Flavobacterium.
Fusarium. in het bijzonder Fusarium oxysporum en -Fusarium. in particular Fusarium oxysporum and -
Fusariwn Solani, Kluyvera, WycQplana, Protaminobacter.Fusariwn Solani, Kluyvera, WycQplana, Protaminobacter.
EXQteus, in het bijzonder Proteus rettoari. Pseudomonas IEXQteus, in particular Proteus rettoari. Pseudomonas I
35 en Xanthomonas. in het bijzonder Xanthomonas citrii.35 and Xanthomonas. in particular Xanthomonas citrii.
¢1009814 - 6 -¢ 1009814 - 6 -
Bij voorkeur wordt een geïmmobiliseerd enzym toegepast, aangezien het enzym dan eenvoudig afgescheiden en hergebruikt kan worden.An immobilized enzyme is preferably used, since the enzyme can then be easily separated and reused.
Van de geïmmobiliseerde enzymen die 5 commerciëel verkrijgbaar zijn, zijn bijvoorbeeld bijzonder geschikt gebleken het Escherichia coli enzym van Boehringer Mannheim GmbH dat onder de naam Enzygel^ commerciëel verkrijgbaar is, het geïmmobiliseerde Penicilline-G acylase van Recordati en het 10 geïmmobiliseerde Penicilline-G acylase van PharmaFor example, among the immobilized enzymes commercially available, the Escherichia coli enzyme from Boehringer Mannheim GmbH, which is commercially available under the name of Enzygel, the Immobilized Penicillin-G acylase from Recordati and the immobilized Penicillin-G acylase from Pharma
Biotechnology Hannover. Daarnaast kunnen enzymen ook als gecrosslinkte enzymkristallen worden ingezet (CLEC's™).Biotechnology Hanover. In addition, enzymes can also be used as cross-linked enzyme crystals (CLECs ™).
Het verkregen aminonitril kan vervolgens op 15 bekende wijze worden omgezet in het/de overeenkomstige aminozuuramide, aminozuur of aminozure ester. Het verkregen aminonitril kan bijvoorbeeld vervolgens desgewenst op bekende wijze worden omgezet in het overeenkomstige aminozuur, bijvoorbeeld door 20 behandeling met een sterk zuur, bijvoorbeeld een mineraal zuur, in het bijzonder HC1, H2S04 of HN03, of een organisch zuur, bijvoorbeeld een sulfonzuur. Bij behandeling van L-N-acyl-a-aminonitrillen met een sterk zuur kan gedeeltelijke racemisatie optreden.The resulting amino nitrile can then be converted into the corresponding amino acid amide, amino acid or amino acid ester in a known manner. For example, the resulting amino nitrile can then, if desired, be converted in known manner to the corresponding amino acid, for example by treatment with a strong acid, for example a mineral acid, in particular HCl, H2SO4 or HNO3, or an organic acid, for example a sulfonic acid. Partial racemization may occur with treatment of L-N-acyl-α-amino nitriles with a strong acid.
25 Behandeling met een zuur van het niet N-beschermde a-aminonitril geeft a-aminozuuramides en a-aminozuren zonder racemisatie.Acid treatment of the unN-protected α-amino nitrile gives α-amino acid amides and α-amino acids without racemization.
De uitvinding zal nu worden toegelicht aan de hand van de voorbeelden zonder evenwel daardoor te 30 worden beperkt.The invention will now be elucidated on the basis of the examples without, however, being limited thereby.
VoorbeeldenExamples
Assemblase™ is een geïmmobiliseerde Escherichia coli v ; . penicilline acylase uit E. coli ATCC 1105, zoals *100981 4 - 7 - beschreven in WO-A-97/04086. De immobilisatie is uitgevoerd als beschreven in EP-A-222462, waarbij gelatine en chitosan als gelerend agens en glutaaraldehyde als crosslinker zijn gebruikt.Assemblase ™ is an immobilized Escherichia coli v; . penicillin acylase from E. coli ATCC 1105, such as * 100981 4 - 7 - described in WO-A-97/04086. The immobilization was performed as described in EP-A-222462 using gelatin and chitosan as a gelling agent and glutaraldehyde as a crosslinker.
5 De uiteindelijke activiteit van de5 The final activity of the
Escherichia coli penicilline acylase wordt bepaald door de hoeveelheid enzym die aan de geactiveerde bolletjes is toegevoegd en bedroeg 3 ASU/g drooggewicht waarbij l ASU (Amoxicilline Synthese Unit) is gedefinieerd als de 10 hoeveelheid enzym die per uur 1 g Amoxicilline.3H20 genereert uit 6-aminopenicillaanzuur en de methylester van p-hydroxyfenylglycine (bij 20°C); 6,5% 6-aminopenicellaanzuur en 6,5% methylester van p-hydroxyfenylglycine).Escherichia coli penicillin acylase is determined by the amount of enzyme added to the activated beads and amounted to 3 ASU / g dry weight where 1 ASU (Amoxicillin Synthesis Unit) is defined as the 10 amount of enzyme that generates 1 g Amoxicillin.3H20 per hour from 6 aminopenicillanic acid and the methyl ester of p-hydroxyphenylglycine (at 20 ° C); 6.5% 6-aminopenicellanic acid and 6.5% methyl ester of p-hydroxyphenylglycine).
1515
Voorbeeld I: Ammonium fenylacetaatExample I: Ammonium phenyl acetate
Aan een oplossing van 69,1 g (0,50 mol) fenylazijnzuur in 200 ml aceton werd 34 g (37,4 ml; 20 0,50 mol) 25% waterige ammonia toegedruppeld gedurende 5 minuten. Er ontstond een witte suspensie, welke 30 minuten werd geroerd. De witte vaste stof werd gefiltreerd, gewassen met 2 x 50 ml aceton en gedroogd tot constant gewicht.To a solution of 69.1 g (0.50 mol) phenylacetic acid in 200 ml acetone, 34 g (37.4 ml; 0.50 mol) 25% aqueous ammonia was added dropwise over 5 minutes. A white suspension was formed, which was stirred for 30 minutes. The white solid was filtered, washed with 2 x 50 ml of acetone and dried to constant weight.
25 Opbrengst: 75,0 g (98%).Yield: 75.0 g (98%).
Voorbeeld II: L-2-fenyl-2-(fenylacetamido)-acetonitrilExample II: L-2-phenyl-2- (phenylacetamido) -acetonitrile
34,8 g (0,225 mol) ammonium fenylacetaat I34.8 g (0.225 mol) ammonium phenyl acetate I.
30 werd opgelost in 750 ml water. M.b.v. 6,8 g geconcentreerd (96%) zwavelzuur werd de pH op 4,04 ~ gebracht; T=22 °C. Daarna werd direkt 30,0g(0,225 1 mol) (D,L) 2-amino-2-fenyl-acetonitril toegevoegd en werd de pH m.b.v. 3,9 g 25% waterige ammonia op 5,20 »10098 14 - 8 - gebracht. Aan de resulterende heldere oplossing werd 50 g Assemblase™ toegevoegd. De pH werd op 5,2 gehouden d.m.v. titratie met 20% waterige H2S04. Na 5 minuten ontstond er een witte vaste stof. Na 15 uur werd de 5 vaste stof afgefiltreerd (= Assemblase™ + het gevormde N-fenylacetyl aminonitril). De vaste stof werd gesuspendeerd in 100 ml water en de pH werd onder roeren m.b.v. H2S04 ingesteld op 2,0. Vervolgens werd de vaste stof opnieuw gefiltreerd, gewassen met 3 x 50 ml 10 water, en gesuspendeerd in 500 ml methanol. Assemblase™ werd gefiltreerd en nagewassen met 3 x 50 ml methanol. De gecombineerde methanolische filtraten werden ingedampt (T < 30 °C).30 was dissolved in 750 ml of water. Using 6.8 g of concentrated (96%) sulfuric acid was adjusted to pH 4.04; T = 22 ° C. Then, 30.0g (0.225L mol) (D, L) 2-amino-2-phenyl-acetonitrile was added immediately and the pH was adjusted using 3.9 g of 25% aqueous ammonia are brought to 5.20 in 10098 14-8. 50 g of Assemblase ™ was added to the resulting clear solution. The pH was kept at 5.2 by means of titration with 20% aqueous H 2 SO 4. A white solid formed after 5 minutes. After 15 hours, the solid was filtered off (= Assemblase ™ + the N-phenylacetyl aminonitrile formed). The solid was suspended in 100 ml of water and the pH was adjusted with stirring using H2SO4 set to 2.0. Then the solid was filtered again, washed with 3 x 50 ml of water, and suspended in 500 ml of methanol. Assemblase ™ was filtered and rinsed with 3 x 50 ml methanol. The combined methanolic filtrates were evaporated (T <30 ° C).
Opbrengst: 54,6 g (97%) L-2-fenyl-2-(fenylacetamido)-15 acetonitril met e.e.L = 98%Yield: 54.6 g (97%) of L-2-phenyl-2- (phenylacetamido) -15 acetonitrile with e.e.L = 98%
Voorbeeld III: L-2-gederivatiseerde-2-(fenylacetamido)-acetonitril verbindingen 20 De enzymatische reactie werd uitgevoerd met een aantal D,L-a-aminonitrillen, als HC1 zout, zoals beschreven in voorbeeld II (pH = 5,2). De opbrengsten aan geïsoleerde N-fenylacetyl-derivaten waren 90-98%.Example III: L-2-derivatized-2- (phenylacetamido) -acetonitrile compounds. The enzymatic reaction was carried out with a number of D, L-α-amino nitriles, as HCl salt, as described in Example II (pH = 5.2). Yields of isolated N-phenylacetyl derivatives were 90-98%.
De enantiomere overmaten staan weergegeven in tabel 1.The enantiomeric excesses are shown in Table 1.
2525
R C = N ( 0 J C0,H R C = NR C = N (0 J C0, H R C = N
V ^—. YV ^ -. Y.
H2N Assemblase™ HNH2N Assemblase ™ HN
\\
pH = 5,2 > = OpH = 5.2> = O
30 ^00981 4 - 9 -30 ^ 00981 4 - 9 -
Tabel 1: Enantioraere overmaat (e.e.J van 2-gesubstitueerde-2-(fenylacetamido) acetonitril verbindingen, bereid door reactie van (D,L)-a-aminonitrillen met fenylazijnzuur o.i.v. Assemblase™.Table 1: Enantioraere excess (e.e.J. of 2-substituted-2- (phenylacetamido) acetonitrile compounds prepared by reacting (D, L) -a-aminonitriles with phenylacetic acid on Assemblase ™.
5 IR e.e.L (%) fenyl 98 p-chloorfenyl > 99 benzyl < 10 m-methoxybenzyl < 10 isopropyl < 10 fenylethyl < 105 IR e.e.L (%) phenyl 98 p-chlorophenyl> 99 benzyl <10 m-methoxybenzyl <10 isopropyl <10 phenylethyl <10
Voorbeeld IV: D-2-amino-2-fenyl-acetonitril 10 1,53 g (0,010 mol) ammonium fenylacetaat werd opgelost in 50 ml water, en de pH werd op 4,0 gebracht m.b.v. H2S04. Er werd 1,32 g 0.010 mol (D,L)-2-amino-2-fenyl-acetonitril toegevoegd. Vervolgens werd de pH verlaagd van 4,6 naar 4,0 m.b.v. H2S04 en werd 15 24 g Assemblase™ toegevoegd. Na 24 uur werd de vaste stof afgefiltreerd en opgewerkt zoals beschreven in voorbeeld II. Het gevormde L-2-fenyl-2-(fenylacetamido)-acetonitril was zuiver (zuiverheid: 99%; e.e.L = 98%). De pH van de moederloog werd op 2,0 20 gebracht m.b.v. H2S04, waarna werd geëxtraheerd met 3 x 50 ml dichloormethaan. De waterige fase werd ingedampt " tot een witte vaste stof. M.b.v. chirale HPLC werd deExample IV: D-2-amino-2-phenyl-acetonitrile 1.53 g (0.010 mol) ammonium phenyl acetate was dissolved in 50 ml water, and the pH was adjusted to 4.0 using H2SO4. 1.32 g of 0.010 mol (D, L) -2-amino-2-phenyl-acetonitrile was added. Then the pH was lowered from 4.6 to 4.0 using H 2 SO 4 and 24 g of Assemblase ™ was added. After 24 hours, the solid was filtered off and worked up as described in Example II. The L-2-phenyl-2- (phenylacetamido) -acetonitrile formed was pure (purity: 99%; e.e.L = 98%). The pH of the mother liquor was adjusted to 2.0 using H 2 SO 4, then extracted with 3 x 50 ml dichloromethane. The aqueous phase was evaporated to a white solid. By means of chiral HPLC, the
enantiomere overmaat van het gevormde 2-amino-2-fenyl- Tenantiomeric excess of the 2-amino-2-phenyl-T formed
p1 0 0 9 8 1 4 - 10 - acetonitril.^H2S04 zout bepaald: e.e.D = 93%.p1 0 0 9 8 1 4 - 10 - acetonitrile. ^ H 2 SO 4 salt determined: e.e.D = 93%.
Voorbeeld V: L-fenylglycine 5 1,0 g L-2-fenyl-2-(fenylacetamido)- acetonitril (e.e.L = 98%) werd gesuspendeerd in een mengsel van 10 g water en 10 g geconcentreerd zoutzuur. De oplossing werd 18 uur geroerd bij T = 90 °C. M.b.v. HPLC en NMR werd aangetoond dat er volledige hydrolyse 10 naar fenylglycine had plaatsgevonden (uitgangsstof + bijproducten < 2%); m.b.v. chirale HPLC werd de enantiomere overmaat bepaald: e.e.L = 61%.Example V: L-phenylglycine 5 1.0 g of L-2-phenyl-2- (phenylacetamido) acetonitrile (e.e.L = 98%) was suspended in a mixture of 10 g of water and 10 g of concentrated hydrochloric acid. The solution was stirred at T = 90 ° C for 18 hours. Using HPLC and NMR showed complete hydrolysis to phenylglycine (starting material + by-products <2%); using chiral HPLC, the enantiomeric excess was determined: e.e.L = 61%.
Voorbeeld VI: D-fenylglycine 15 1,0 g D-2-amino-2-fenyl-acetonitril (e.e.D = 93%) werd opgelost in een mengsel van 10 g water en 10 g geconcentreerd zoutzuur. De oplossing werd 18 uur geroerd bij T = 90 °C. M.b.v. HPLC en NMR werd 20 aangetoond dat er volledige hydrolyse naar fenylglycine had plaatsgevonden (uitgangsstof + bijproducten < 2%); m.b.v. chirale HPLC werd de enantiomere overmaat bepaald: e.e.D = 93%.Example VI: D-phenylglycine 1.0 g of D-2-amino-2-phenyl-acetonitrile (e.e.D = 93%) was dissolved in a mixture of 10 g of water and 10 g of concentrated hydrochloric acid. The solution was stirred at T = 90 ° C for 18 hours. Using HPLC and NMR showed complete hydrolysis to phenylglycine (starting material + by-products <2%); using chiral HPLC, the enantiomeric excess was determined: e.e.D = 93%.
P}P0981 4P} P0981 4
Claims (13)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NL1009814A NL1009814C2 (en) | 1998-08-06 | 1998-08-06 | Production of N-acylated amino nitriles comprises reacting an amino nitrile with an optionally alpha-substituted phenylacetic or phenoxyacetic acid in the presence of a penicillin G or V acylase |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NL1009814 | 1998-08-06 | ||
| NL1009814A NL1009814C2 (en) | 1998-08-06 | 1998-08-06 | Production of N-acylated amino nitriles comprises reacting an amino nitrile with an optionally alpha-substituted phenylacetic or phenoxyacetic acid in the presence of a penicillin G or V acylase |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NL1009814C2 true NL1009814C2 (en) | 2000-02-08 |
Family
ID=19767615
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NL1009814A NL1009814C2 (en) | 1998-08-06 | 1998-08-06 | Production of N-acylated amino nitriles comprises reacting an amino nitrile with an optionally alpha-substituted phenylacetic or phenoxyacetic acid in the presence of a penicillin G or V acylase |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| NL (1) | NL1009814C2 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002020820A1 (en) * | 2000-09-08 | 2002-03-14 | Dsm N.V. | Method for the preparation of enantiomerically enriched amines |
| WO2002020821A2 (en) * | 2000-09-08 | 2002-03-14 | Dsm N.V. | Process for the preparation of enantiomerically enriched amines |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0141223A1 (en) * | 1983-09-27 | 1985-05-15 | Hoechst Aktiengesellschaft | Method for the production of an immobilized acylase and its use |
| EP0222462A1 (en) * | 1985-11-15 | 1987-05-20 | Gist-Brocades N.V. | Novel immobilized biocatalysts and their preparation and use |
| EP0351382A2 (en) * | 1988-07-12 | 1990-01-17 | Ministero Dell' Universita' E Della Ricerca Scientifica E Tecnologica | Process for the synthesis of optically active aminoacids |
| US5057607A (en) * | 1990-06-08 | 1991-10-15 | Eli Lilly And Company | Enantiomerically selective biocatalyzed acylation |
| WO1994002628A1 (en) * | 1992-07-17 | 1994-02-03 | Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. | Enzymatic resolution of a racemic mixture of stereospecific gaba-t inhibitors |
| EP0652229A2 (en) * | 1993-10-05 | 1995-05-10 | ISAGRO S.p.A. | Oligopeptides with fungicidal activity |
| WO1997004086A1 (en) * | 1995-07-18 | 1997-02-06 | Gist-Brocades B.V. | An improved immobilized penicillin g acylase |
-
1998
- 1998-08-06 NL NL1009814A patent/NL1009814C2/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0141223A1 (en) * | 1983-09-27 | 1985-05-15 | Hoechst Aktiengesellschaft | Method for the production of an immobilized acylase and its use |
| EP0222462A1 (en) * | 1985-11-15 | 1987-05-20 | Gist-Brocades N.V. | Novel immobilized biocatalysts and their preparation and use |
| EP0351382A2 (en) * | 1988-07-12 | 1990-01-17 | Ministero Dell' Universita' E Della Ricerca Scientifica E Tecnologica | Process for the synthesis of optically active aminoacids |
| US5057607A (en) * | 1990-06-08 | 1991-10-15 | Eli Lilly And Company | Enantiomerically selective biocatalyzed acylation |
| WO1994002628A1 (en) * | 1992-07-17 | 1994-02-03 | Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. | Enzymatic resolution of a racemic mixture of stereospecific gaba-t inhibitors |
| EP0652229A2 (en) * | 1993-10-05 | 1995-05-10 | ISAGRO S.p.A. | Oligopeptides with fungicidal activity |
| WO1997004086A1 (en) * | 1995-07-18 | 1997-02-06 | Gist-Brocades B.V. | An improved immobilized penicillin g acylase |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| A. BOSSI ET AL.: "Production of D-Phenylglycine from racemic (D,L)-Phenylglycine via isoelectrically-trapped penicillin G acylase", BIOTECHNOLOGY AND BIOENGINEERING, vol. 60, no. 4, 20 November 1998 (1998-11-20), Wiley, ny, us, pages 454 - 461, XP002099762 * |
| H. WALDMANN: "A new access to chiral 2-Furylcarbinols by enantioselective hydrolysis with penicillin acylase", TETRAHEDRON LETTERS, vol. 30, no. 23, 1989, Maxwell Macmillan plc, UK, pages 3057 - 3058, XP002099761 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002020820A1 (en) * | 2000-09-08 | 2002-03-14 | Dsm N.V. | Method for the preparation of enantiomerically enriched amines |
| WO2002020821A2 (en) * | 2000-09-08 | 2002-03-14 | Dsm N.V. | Process for the preparation of enantiomerically enriched amines |
| WO2002020821A3 (en) * | 2000-09-08 | 2002-08-08 | Dsm Nv | Process for the preparation of enantiomerically enriched amines |
| US6897058B2 (en) | 2000-09-08 | 2005-05-24 | Dsm Ip Assets B.V. | Method for the preparation of enantiomerically enriched amines |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0537255B1 (en) | Process for preparation of beta-lactams | |
| US6048708A (en) | Process for preparation of β-lactams at constantly high concentration of reactants | |
| KR100455252B1 (en) | Process for the preparation of an antibiotic | |
| US4389489A (en) | Optically pure heterocyclic aminoacid compounds, a process for their use for the synthesis of medicaments | |
| NL1009814C2 (en) | Production of N-acylated amino nitriles comprises reacting an amino nitrile with an optionally alpha-substituted phenylacetic or phenoxyacetic acid in the presence of a penicillin G or V acylase | |
| CA2168923C (en) | Process for the enzymatic synthesis of .beta.-lactam antibiotics in the presence of an enzyme inhibitor | |
| NL1010506C2 (en) | Production of beta-lactam antibiotics comprises enzyme-catalysed acylation with new D-p-hydroxyphenylglycinamide derivatives | |
| JPS62143698A (en) | Method for splitting and purifying n-phenylacetylamino compound | |
| US5753458A (en) | Acylation method for penicillins and cephalosporins | |
| CA2480301A1 (en) | Process for preparing optically active beta-aminocarboxylic acids from racemic n-acylated beta-aminocarboxylic acids | |
| KR100924241B1 (en) | Enzymatic method for the enantiomeric resolution of amino acids | |
| JP3756541B2 (en) | Process for producing optically active α-substituted α-hydroxyacetic acid | |
| BE1009071A3 (en) | PROCESS FOR PRODUCING A beta-lactam drug. | |
| WO2010019469A2 (en) | Preparation of (s)-2-aminobutyric acid | |
| JP2674078B2 (en) | Process for producing D-α-amino acid | |
| WO2002020821A2 (en) | Process for the preparation of enantiomerically enriched amines | |
| WO1999031109A1 (en) | COMPLEXES OF ss-LACTAM ANTIBIOTICS AND 1-NAPHTHOL | |
| BE1009070A3 (en) | PROCESS FOR THE EXTRACTION OF A beta-lactam drug. | |
| JP2000512860A (en) | How to prepare β-lactam antibiotics | |
| NL1013402C2 (en) | Method for the preparation of a beta-lactam antibiotic. | |
| US20060172393A1 (en) | Process for producing optically active alpha -methylcysteine derivative | |
| JP2674076B2 (en) | Method for producing D-α-amino acid | |
| WO2022195603A1 (en) | A ONE STEP PROCESS FOR THE ENZYMATIC SYNTHESIS OF SEMISYNTHETIC β-LACTAM ANTIBIOTICS | |
| JP2009278914A (en) | Method for producing optically active aromatic amino acid and optically active aromatic amino acid amide | |
| WO1998056945A1 (en) | PROCESS FOR ENZYMATICALLY PREPARING A β-LACTAM ANTIBIOTIC AND THIS ANTIBIOTIC |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD2B | A search report has been drawn up | ||
| VD1 | Lapsed due to non-payment of the annual fee |
Effective date: 20030301 |