MXPA99004419A - Metodos y composiciones para estimular el crecimiento de neuritas - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a métodos y composiciones farmacéuticas para estimular el crecimiento de neuritas en células nerviosas. Las composiciones comprenden una cantidad neurotrófica de un compuesto y un factor neurotrófico, tal como factor de crecimiento nervioso (NGF). Los métodos comprenden el tratamiento de células nerviosas con las composiciones anteriores o composiciones que comprenden el compuesto sin factor neurotrópico. Los métodos de esta invención pueden ser utilizados para promover la reparación de daño neuronal causado por enfermedad o trauma físico.

Description

MÉTODOS Y COMPOSICIONES PARA ESTIMULAR EL CRECIMIENTO DE NEURITAS CAMPO TÉCNICO DE LA INVENCIÓN La presente invención se relaciona con métodos y composiciones farmacéuticas para la estimulación del crecimiento de neuritas en células nerviosas. Las composiciones comprenden una cantidad neurotrófica de un compuesto y un factor neurotrófico, tal como el factor de crecimiento de nervios (NGF) . Los métodos comprenden tratar las células nerviosas con las composiciones anteriores o las composiciones que comprenden el compuesto sin un factor neurotrópico . Los métodos de esta invención pueden ser utilizados para promover la reparación de daño neuronal causado por una enfermedad o un trauma fisico.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Las enfermedades neurológicas están asociadas con la muerte o el daño de las células neuronales. La pérdida de neuronas dopaminérgicas en la sustancia negra es la causa etiológica de la enfermedad de Parkinson. Aunque el mecanismo molecular en la neurodegeneración en' la enfermedad de Alzheimer todavía no está establecido, es claro que la inflamación del cerebro y la deposición de proteínas beta-amiloides y otros de tales agentes puede P799 inhibir la supervivencia de neuronas y mitigar el crecimiento de neuritas utilizado para la comunicación entre neuronas. En pacientes que sufren de isquemia cerebral o daño en la médula espinal, se observa muerte celular neuronal extensiva. Corrientemente, no existen tratamientos satisfactorios para estas enfermedades. El tratamiento típico de las enfermedades neurológicas involucran drogas capaces de inhibir la muerte de las células neuronales. Una aproximación más reciente involucra la promoción de regeneración de nervios al promover mayor crecimiento de neuritas . El mayor crecimiento de neuritas, que es crítico para la_ supervivencia de las neuronas, es estimulado in vitro por medio de factores de crecimiento de los nervios (NGF) . Por ejemplo, el factor neurotrófico derivado de la línea de células glial (GDNF) demuestra actividad neurotrófica tanto, in vivo como in vitro, y está siendo actualmente investigado para el tratamiento para la enfermedad de Parkinson. Los factores de crecimiento de insulina y similares de insulina han mostrado estimular el crecimiento de neuritas en células de feocromocitoma de rata PC12 y en neuronas del sistema simpático y sensoriales cultivadas [Recio-Pinto et al., J. Neurosci., 6, pp . 1211-1219 (1986) ] . Los factores de crecimiento de insulina y similar a insulina también estimulan la regeneración de los P799 nervios motores dañados in vivo e in vitro [Near et al., PNAS, pp. 89, 11716-11720 (1992); y Edbladh et al., Brain Res. , 641, pp. 76-82 (1994)]. Similarmente, el factor de crecimiento de los fibroblastos (FGF) estimula la proliferación neural [D. Gospodarowizc et al., Cell Differ. , 19, p. 1 (1986)] y el crecimiento [M. A. Walter et al., Lymphokiune Cvtokine Res . , 12, p. 135 (1993)]. Existen, sin embargo, varias desventajas asociadas con el uso de los factores de crecimiento de los nervios para el tratamiento de enfermedades neurológicas. Ellas no cruzan fácilmente la barrera sangre-cerebro. Ellos son inestables en plasma. Ellos tiene pobres propiedades de suministro de droga. Recientemente, moléculas pequeñas han demostrado estimular el mayor crecimiento de neuritas in vivo. En individuos que sufren de una enfermedad neurológica, esta estimulación del mayor crecimiento de neuritas protegen las neuronas de una degeneración adicional, y acelera la regeneración de las células nerviosas. Por ejemplo, el estrógeno ha demostrado promover el crecimiento de axones y dendritas, que son neuritas enviadas por las células nerviosas para comunicarse en una con la otra en un cerebro adulto desarrollado o dañado [(C. Dominique Toran-Allerand et al., J. Steroid Biochem. Mol. Biol., 56, pp . 169-78 (1996); y B. S. McE en et al., Brain Res. Dev. Brain. Res., P799 87, pp. 91-95 (1995)]. El progreso de la enfermedad de Alzheimer es disminuido en las mujeres que toman estrógeno. El estrógeno hipotéticamente complementa el NGF y otras neurotrofinas y ayuda de esta forma a la diferenciación y la supervivencia de las neuronas. El tacrolimus, una droga in unosupresiva, ha demostrado actuar sinérgicamente con el NGF en la estimulación del crecimiento adicional de neuritas en células PC12 así como también en ganglios sensoriales [Lyons et al., PNAS, 91, p . 3191-3195 (1994)]. Este compuesto también ha mostrado ser neuroprotector en isquemia cerebral focal (J. Sharkey and S. P. Butcher, Nature, 371, pp. 336-339 (1994)] e incrementar la proporción de regeneración axonal en nervios ciáticos dañados [Gold et al., J. Neurosci., 15, pp . 7509-16 (1995) ] . Aunque una amplia variedad de desórdenes degenerativos neurológicos puede ser tratado mediante la estimulación del crecimiento adicional de neuritas, existen relativamente pocos agentes conocidos que posean estas propiedades. Así, subsiste una gran necesidad de compuestos y composiciones farmacéuticamente aceptables que tengan la capacidad de estimular el crecimiento adicional de neuritas en pacientes.

P799 SUMARIO DE LA INVENCIÓN Los solicitantes han resuelto el anterior problema al descubrir que los compuestos inventados por uno de los solicitantes para uso en el reversamiento de la resistencia multidroga previamente también sorprendente e inesperadamente poseen actividad neurotrópica . Estos derivados de aminoácido son descritos en la patente estadounidense 5,543,423. Estos compuestos estimulan el mayor crecimiento de neuritas en la presencia de NGF exógenos o endógenos. Las composiciones descritas aquí comprenden un compuesto proveniente del género descrito anteriormente y un factor de crecimiento neuronal. Los métodos para estimular el mayor crecimiento de neuritas descrito aquí emplea los anteriores derivados de aminoácido bien sea solos o en combinación con el factor de crecimiento neuronal. Los métodos son utilizados en el tratamiento de daño nervioso causado por varias enfermedades neurológicas y traumas físicos y también en regeneración de nervios ex vivo.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden tres componentes . El primer componente es un compuesto que tiene la fórmula (I) : P799 y derivados farmacéuticamente aceptables de este, en donde RL, B y D son independientemente seleccionados de hidrógeno, Ar, alquilo (C1-C6) recto o ramificado, alquenilo o alquinilo (C2-C6) recto o ramificado, alquilo (C1-C6) recto o ramificado sustituido con cicloalquilo (C5-C7), alquenilo o alquinilo recto o ramificado (C3-C6) sustituido con cicloalquilo (C5-C7), alquilo recto o ramificado (C1-C6) sustituido con cicloalquenilo (C5-C7), alquenilo o alquinilo recto o ramificado (C3-C6) sustituido con cicloalquenilo (C5-C7), alquilo recto o ramificado (Cl-C6) sustituido con Ar, o alquenilo o alquinilo recto o ramificado (C3-C6) sustituido con Ar; cuando Rx no es hidrógeno . Cualquiera de los grupos CH2 en las cadenas alquilo es de R1# B y D está opcionalmente reemplazado por un heteroátomo seleccionado de 0, S, SO, S02, y NR; en donde R es hidrógeno, alquilo recto o ramificado (C1-C6), alquenilo o alquinilo recto o ramificado (C3-C4) , o alquilo puente (C1-C4) . El alquilo puente (C1-C4) , junto con átomo de nitrógeno y carbono de dicha cadena que contiene heteroátomo, forman un anillo. Ese anillo puede también estar opcionalmente fusionado a un grupo Ar. Preferiblemente, B and D son independientemente seleccionados de H, 3-Pyr- (CH2) 3-, 4-Pyr- (CH2) _- , 3-Im- (CH2)2-/ y Ph-(CH2}2-. Ri es preferiblemente seleccionado de CH3-, PhCH2-, 4-Cl-PhCH2-, 4-F-PhCH2-, 4-PyCH2-, y 1H-Im-CH2-. Cada Ar es independientemente seleccionada de fenilo, 1-naftilo, 2-naftilo, indenilo, azulenilo, fluorenilo y antracenilo, 2-furilo, 3-furilo, 2-tienilo, 3-tienilo, 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, pirrolilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, piraxolilo, 2-pirazolinilo, pirazolidinilo, isoxazolilo, isotriazolilo, 1, 2 , 3-oxadiazolilo, 1, 2 , 3-triazolilo, 1, 3 , 4-tiadiazolilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, 1, 3 , 5-triazinilo, 1, 3 , 5-tritianilo, indolizinilo, indolilo, isoindolilo, 3H-indolilo, indolinilo, benzo [b] furanilo, benzo [b] tiofenilo, iH-indazolilo, benzimidazolilo, benztiazolilo, purinilo, 4H-quinolizinilo, quinolinilo, 1,2,3, 4-tetrahidro-isoquinolinilo, isoquinolinilo, 1,2,3, 4-tetrahidro-isoquinolinilo, cinnolinilo, eftalazinilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, 1, 8-naftiridinilo, pteridinilo, carbazolilo, acridinilo, fenazinilo, fenotiazinilo o fenoxazinilo . Los grupos Ar de esta invención son fenilo, 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, imidazolilo, indolilo, isoindolilq, quinolinilo, isoquinolinilo, 1 , 2 , 3 , 4-tetrahidroisoquinolinilo, y 1,2,3,4-tetrahidroquinolinilo . Cualquier Ar puede ser opcionalmente sustituido con uno a tres sustituyentes independientemente seleccionados de halógeno, hidroxilo, nitro, -S03H, trifluorometilo, trifluorometoxi, alquilo recto o ramificado (C1-C6) , O- ( alquilo recto o ramificado (C1-C6) ) , O-benzilo, O-fenilo, 1, 2-metilenodioxi, - R5R6, carboxilo, N- (alquilo recto o ramificado (C1-C6) ) , N- (alquenilo recto o ramificado (C3-C5)) carboxamide, N,N-di- (alquilo recto o ramificado (C1-C6) ) , N,N-di- (alquenilo recto o ramificado (C3-C5)), carboxamida, morfolinilo, piperidinilo, 0-M, CH2- (CH2) q-M, 0-(CH2)q-M, (CH2)q-0-M, o CH=CH-M. R5 y R6 son independientemente seleccionados de hidrógeno, alquilo recto o ramificado (C1-C6) , alquenilo recto o ramificado (C2-C6) o alquinilo o benzilo. Alternativamente, R5 y Re pueden ser tomados juntos para formar un anillo heterocíclico de 5-7 miembros. M es seleccionado de 4-metoxifenilo, 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, pirazilo, quinolilo, 3 , 5-dimetilisoxazoilo, 2-metiltioazoilo, tiazoilo, 2-tienilo, 3-tienilo, 4-tienilo o pirimidilo; y q es 0-2. Los sustituyentes Ar preferidos son halógeno, hidroxilo, nitro, -S03H, trifluorometilo, alquilo recto o ramificado (C1-C6), O- (alquilo recto o ramificado (C1-C6) y -NR5R6 - El componente J en la fórmula (I) es seleccionado de alquilo recto o ramificado (C1-C6) , alquenilo o alquinilo recto o ramificado (C3-C6), alquilo recto o ramificado (C1-C6) sustituido con Ar, alquenilo o alquinilo recto o ramificado (C3-C6) sustituido con Ar, o ciclohexil etilo. Preferiblemente J es metilo. K es seleccionado de alquilo recto o ramificado (C1-C6) , alquilo recto o ramificado (C1-C6) sustituido con Ar, alquenilo o alquinilo recto o ramificado (C2-C6) , o alquenilo o alquinilo recto o ramificado (C3-C6) sustituido con Ar. Preferiblemente, K es seleccionado de fenilmetilo, 4-cloro-fenilmetilo e isopropilo. Alternativamente, J y K son tomados juntos con átomos de nitrógeno y carbono a los cuales ellos están respectivamente unidos para formar un anillo heterocíclico de 5-7 miembros que puede contener un heteroátomo seleccionado de O, S, SO y S02; X es seleccionado de Ar, -O ^, o -NR3R4; en donde R, tiene la misma definición que R. R, R. independientemente tienen las mismas definiciones de B y D. Alternativamente, R3 y R4 pueden ser tomados juntos para formar un anillo alifático o aromático heterocíclico de 5-7 miembros. Preferiblemente, X es 3 , 4, 5-trimetoxifenilo.

El componente m es 0 o 1, preferiblemente 0. Los compuestos de esta invención incluyen todos los isómeros ópticos y racémicos. Un "derivado farmacéuticamente aceptable", como se utiliza aquí, denota cualquier sal farmacéuticamente aceptable, éster, o sal de tal éster, de un compuesto de esta invención o cualquier otro compuesto que, al administrarse a un paciente, es capaz de suministrar (directa o indirectamente) un compuesto de esta invención, o un-metabolito o residuo de este, caracterizado por la capacidad para promover o aumentar el mayor crecimiento de neuritas . De acuerdo con una modalidad preferida, las composiciones farmacéuticas de la presente invención comprenden un compuesto que tiene la fórmula (II) : y derivados farmacéuticamente aceptables de este, en donde J y K son independientemente seleccionados de alquilo recto o ramificado (C1-C6) , o alquilo recto o ramificado (C1-C6) sustituido con Ar; y w es 1 o 2. Otra composición farmacéutica preferida de la presente invención comprende un compuesto de fórmula (I) , en donde al menos uno de los B o D está representado por la fórmula - (CH2) r-Z- (CH2) s-Ar, en donde cada Z está independientemente seleccionado de 0, S, SO, S02 o NR; y R es seleccionado de hidrógeno, alquilo recto o ramificado (C1-C4), alquenilo o alquinilo recto o ramificado (C3-C4) y alquilo de puente (C1-C4) en donde se forma un puente entre el nitrógeno y el grupo Ar. Otra modalidad preferida de estas composiciones comprende un compuesto que tiene la fórmula (III) : y derivados farmacéuticamente aceptables de este, en donde J y K son independientemente seleccionados de alquilo recto o ramificado (C1-C6) , o alquilo recto o ramificado (C1-C6) sustituido con Ar; y w es 1 o 2. La tabla 1 suministra ejemplos de compuestos preferidos de esta invención.

P799 TABLA I 99 Si las sales farmacéuticamente aceptables de los .compuestos son utilizadas, aquellas sales son preferiblemente derivadas de ácidos y bases inorgánicas y orgánicas . Incluidas entre tales sales acidas están las siguientes: acetato, adipato, alginato, aspartato, benzoato, benzenosulfonato, bisulfato, butirato, citrato, canforato, canforsulfonato, ciclopentanopropionato, digluconato, dodecilsulfato, etanosulfonato, fumarato, glucoheptanoato, glicerofosfato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, hidrocloruro, hidrobromuro hidroyoduro, 2-hidroxietanosulfonato, lactato, maleato, metanosulfonato, 2-naf alenosulfonato, nicotinato, oxalato, pamoato, pectinato, persulfato, 3-fenil-propionato, picrato, pivalato, propionato, succinato, tartrato, tiocianato, tocilato y undecanoato. Las sales base incluyen sales de amonio, sales de metal alcalino, tales como sales de sodio y potasio, sales de metal alcalinotérreo, tales como sales de calcio y magnesio, sales con bases orgánicas, tales como sales diciclohexilamina, N-metil-D-glucamina, y sales con aminoácidos tales como alginina, lisina, y así sucesivamente. También, los grupos que contienen nitrógeno básico pueden ser cuaternarizados con tales agentes como haluros de alquilos bajos, tales como metilo, etilo, propilo, y butilcloruro, bromuros y yoduros; dialquilsulfatos, tales como dimetilo, dietilo, dibutilo y P799 diamilsulfatos, haluros de cadena larga tales como decilo, laurilo, miristilo y estearilcloruros , bromuros y yoduros, aralquilhaluros, tales como bromuros de benzilo y fenetilo y otros. Agua o productos dispersables o solubles en aceite son obtenidos por medio de éste. Los compuestos utilizados en las composiciones y métodos de esta invención pueden ser también modificados por medio de las funcionalidades apropiadas de la parte final para mejorar las propiedades biológicas selectivas. Tales modificaciones son conocidas en la técnica e incluyen aquellas que incrementan la penetración biológica en un sistema biológico dado (por ejemplo, sangre, sistema linfático, sistema nervioso central) , incrementan la disponibilidad oral, incrementa la solubilidad para permitir la administración por medio de inyección, alteran el metabolismo y alteran la proporción de excreción. El segundo componente en cada una de las composiciones farmacéuticas descritas anteriormente son un factor neurotrófico. El término "factor neurotrófico", como se utiliza aquí, se refiere a compuestos que son capaces de estimular el crecimiento o proliferación de tejido nervioso. Como se utiliza en esta solicitud, el término "factor neurotrófico" excluye los compuestos descritos aquí . Numerosos factores neurotróficos se han P799 identificado en la técnica y cualquiera de aquellos factores puede ser utilizada en las composiciones de esta invención. Estos factores neurotróficos incluyen, pero no están limitados a, factor de crecimiento nervioso (NGF) , factor de crecimiento de insulina (IGF-1) y sus derivados truncados activos tales como gIGF-1, factor de crecimiento de fibroblastos ácido y básico (aFGF y bFGF, respectivamente) , factores de crecimiento derivados de plaquetas (PDGF) , factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF) , factores neurotróficos ciliares (CNTF) , factor neurotrófico derivado de líneas de células glial (GDNF) , neurotrofina-3 (NT-3) y neurotrofina 4/5 (NT-4/5). El factor neurotrófico más preferido en las composiciones de esta invención es el NGF. El tercer componente de las composiciones farmacéuticamente aceptables de esta invención es un portador farmacéuticamente aceptable. Los portadores farmacéuticamente aceptables que pueden ser utilizados en estas composiciones farmacéuticas incluyen, pero no están limitados a, intercambiadores de iones, alumina, estearato de aluminio, lecitina, sero proteínas, tales como sero albúmina humana, sustancias amortiguadoras tales como fosfatos, glicina, ácido sórbico, sorbato de potasio, mezclas de glicérido parcial de ácidos grasos vegetales saturados, agua, sales de electrolitos, tales como sulfato P799 de protamina, fosfato ácido de disodio, fosfato ácido de potasio, cloruro de sodio, sales de zinc, sílice coloidal, trisilicato de magnesio, polivinilpirrolidona, sustancias basadas en celulosa, polietilenglicol, carboximetilcelulosa de sodio, poliacrilatos, ceras, polímeros de bloque polietileno-polioxipropileno, polietilenglicol y grasa de lana. Las composiciones de la presente invención pueden ser administradas oralmente, parenteralmente, por medio de inhalación por rociado, tópicamente, rectalmente, nasalmente, bucalmente, vaginalmente o por vía de un reservorio implantado. El término "parenteral" como se utiliza aquí incluye inyección subcutánea, intravenosa, intramuscular, intraarticular, intrasinobial, intraesternal, intratecal, intrahepática, intralesional e intracraneal o técnicas de infusión. Preferiblemente, las composiciones son administradas oralmente, intraperitoneal o intravenosamente. Las formas inyectables estériles de las composiciones de esta invención pueden ser acuosas o una suspensión oleaginosa. Estas suspensiones pueden ser formuladas de acuerdo con las técnicas conocidas en el arte utilizando agentes de dispersión o humedecimiento adecuados y agentes de suspensión. La preparación inyectable estéril también puede ser una solución inyectable estéril o una P799 suspensión en un diluyente o solvente no tóxico parenteralmente aceptable, por ejemplo como una solución en 1, 3 -butanodiol . Entre los vehículos aceptables y los solventes que pueden ser empleados se encuentran el agua, la solución de ringer y la solución de cloruro de sodio isotónica. Además, los aceites estériles fijados son convencionalmente empleados como un medio solvente o de suspensión. Para este propósito, cualquier aceite blando fijado puede ser empleado incluyendo mono o diglicéridos sintéticos. Los ácidos grasos , tales como el ácido oleico y sus derivados glicéridos son útiles en la preparación de inyectables como son los aceites naturales farmacéuticamente aceptables, tales como el aceite de oliva o el aceite de castor, especialmente en sus versiones polioxietiladas . Estas soluciones de aceite o suspensiones pueden también contener un diluyente de alcohol de cadena larga o dispersante, tal como Ph. Helv o alcohol similar. Las composiciones farmacéuticas de esta invención pueden ser oralmente administradas en cualquier forma de dosis oralmente aceptable que incluye, pero no está limita a, cápsulas, tabletas, suspensiones o soluciones acuosas. En el caso de tabletas para uso oral, los portadores que son comúnmente utilizados incluyen lactosa y almidón de maíz. Los agentes lubricantes, tales como el estearato de magnesio, también son típicamente agregados. Para la P799 administración oral en la forma de cápsulas, los diluyentes útiles incluyen lactosa y almidón de maíz seco. Cuando las suspensiones acuosas son requeridas para uso oral, el ingrediente activo es combinado con agentes emulsificantes y de suspensión. Si se desea, también pueden ser agregados ciertos agentes endulzantes de sabor o colorantes. Alternativamente, las composiciones farmacéuticas de esta invención pueden ser administradas en forma de supositorios para administración rectal. Estos pueden ser preparados mediante la mezcla del agente con un excipiente no irritante adecuado que es sólido a temperatura ambiente pero líquido a la temperatura rectal y por lo tanto se fundirá en el recto para liberar la droga. Tales materiales incluyen manteca de cacao, cera de abejas y polietilenglicoles . Las composiciones farmacéuticas de esta invención pueden también ser administradas tópicamente, especialmente cuando el objetivo del tratamiento incluye áreas u órganos fácilmente accesibles para la aplicación tópica, que incluyen enfermedades de los ojos, la piel, o el tracto intestinal bajo. Las formulaciones tópicas adecuadas son fácilmente preparadas para cada una de estas áreas u órganos . La aplicación tópica para el tracto intestinal bajo se puede efectuar en una formulación de supositorio P799 rectal (ver anteriormente) o en una formulación de enema adecuada. También se pueden utilizar compresas transdér icas tópicas. Para aplicaciones tópicas, las composiciones farmacéuticas pueden ser formuladas en un ungüento adecuado que contiene el componente activo suspendido o disuelto en uno o más portadores. Los portadores para administración tópica de los compuestos de esta invención incluyen, pero no están limitados a, aceite mineral, petrolato líquido, petrolato blanco, propilenglicol, polioxietileno, compuesto de polioxipropileno, cera y agua emulsificante. Alternativamente, las composiciones farmacéuticas pueden ser formuladas en una loción o en una crema adecuada que contiene los componentes activos suspendidos o disueltos en uno o más portadores farmacéuticamente aceptables . Los portadores adecuados incluyen, pero no están limitados a, aceite mineral, monoestearato de sorbitán, polisorbato 60, ceras de cetilésteres, cetearil alcohol, 2-octildodecanol, benzilalcohol y agua. Para uso oftálmico, las composiciones farmacéuticas pueden ser formuladas como suspensiones micronizadas en soluciones isotónicas, salinas estériles con pH ajustado, o, preferiblemente como soluciones en medio salino estéril isotónico con pH ajustado, o con o sin un preservativo tal como el cloruro de benzilalconio.

P799 Alternativamente, para usos oftalmológicos, las composiciones farmacéuticas pueden ser formuladas en un ungüento tal como petrolato. Las composiciones farmacéuticas de esta invención pueden también ser administradas por medio de un aerosol nasal o inhalación. Tales composiciones son preparadas de acuerdo con técnicas bien conocidas en el arte de la formulación farmacéutica y pueden ser preparadas como soluciones en medio salino, empleando benzilalcohol u otros preservativos adecuados, promotores de absorción para mejorar la biodisponibilidad, fluorocarburos, y/o otros agentes solubilizantes o dispersantes. La cantidad de ambos, el compuesto y el factor neurotrófico que pueden ser combinados con los materiales portadores para producir una forma de dosis simple variará dependiendo del huésped tratado, el modo particular de administración. Los dos ingredientes activos de las composiciones farmacéuticas de esta invención actúan sinérgicamente para estimular el mayor crecimiento de neuritas. Por lo tanto, la cantidad de factor neurotrófico en tales composiciones será menor que la requerida en una monoterapia que utiliza solo ese factor. Preferiblemente, las composiciones deben ser formuladas de tal forma que las dosis entre 0,01 - 100 mg/kg por peso de cuerpo/día del compuesto pueden ser administradas y una dosis entre 0,01 - P799 100 µg/kg de peso de cuerpo/día de el neurotrófico puede ser administrada a un paciente que recibe estas composiciones. Se debe también entender que un régimen de dosis y tratamiento específico para cualquier paciente particular dependerá de una variedad de factores, que incluyen la actividad del compuesto específico empleado, la edad, el peso del cuerpo, la salud general, el sexo, la dieta, el tiempo de administración, la proporción de excreción, la combinación de drogas y el juzgamiento del médico tratante y la severidad de la enfermedad particular que está siendo tratada. La cantidad de ingredientes activos también dependerá del compuesto particular y el factor neurotrófico en la composición. De acuerdo con otra modalidad, esta invención suministra métodos para estimular el mayor crecimiento de neuritas, en un aspecto de esta modalidad, el método es utilizado para estimular mayor crecimiento de neuritas en un paciente y es logrado mediante la administración al paciente de una composición farmacéuticamente aceptable que comprende cualquiera de los compuestos descritos anteriormente y un portador farmacéuticamente aceptable. La cantidad de compuesto utilizada en estos métodos está entre 0,01 y 100 mg/kg de peso de cuerpo/día. En otro aspecto de esta modalidad, el método es utilizado para estimular el crecimiento nervioso ex vivo .

P799 Para este aspecto los compuestos descritos anteriormente pueden ser aplicados directamente a las células nerviosas en cultivo. Este aspecto de la invención es útil para regeneración de nervios ex vivo. De acuerdo con una modalidad alternativa, el método para la estimulación del mayor crecimiento de neuritas comprende el paso adicional de tratar un paciente o células nerviosas ex vivo en cultivo con un factor neurotrófico, tal como aquel contenido en las composiciones farmacéuticas de esta invención descritas anteriormente. Esta modalidad incluye la administración del compuesto y el agente neurotrófico en una forma de dosis simple o en formas de dosis múltiples separadas cuando ellas deben ser administradas a un paciente. Si las formas de dosis separadas son utilizadas, ellas pueden ser administradas concurrentemente, consecutivamente o en menos de aproximadamente 5 horas una de la otra. Los métodos y composiciones de esta invención pueden ser utilizados para tratar daños nerviosos causados por una amplia variedad de enfermedades o traumas físicos. Estos incluyen, pero no están limitados a, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, ALS, esclerosis múltiple, apoplejía e isquemia asociada con apoplejía, paropatía neural, otras enfermedades degenerativas neurales , enfermedades neuro otoras , presión ciática, neuropatía periférica, P799 neuropatía particularmente asociada con diabetes, enfermedades de la médula espinal y presión del nervio facial . Con el fin de que la invención descrita aquí pueda ser más completamente entendida, los siguientes ejemplos se establecen. Se debe entender que estos ejemplos tienen propósitos solo ilustrativos y no están construidos como limitantes de esta invención de ninguna manera.

EJEMPLOS Métodos Generales Espectros de resonancia magnética nuclear de protones (H NMR) fueron registrados a 500 MHZ en un Bruker AMX 500. Los cambios químicos son reportados en partes por millón (d) con relación a Me4Si (8 0,0) . La cromatografía líquida analítica de alto desempeño fue empleada en un cromatógrafo líquido Waters 600E o en un Hewlett Packard 1050.

Ejemplo 1 1 , 5-Di (piridin-4-ilo) -pent-1, 4-dien-3-ona (Compuesto 1): A una solución de 1,3-acetona ácido dicarboxílico (21,0 g, 0,144 mmol) en etanol absoluto (200 mL) fue agregado en forma de gotas 4-piridina carboxaldehído (30,8 g, 0,288 mmol) . La evolución gaseosa ocurrió a través de P799 toda la adición. Después de agitar a temperatura ambiente por 2 horas, la reacción fue tratada con ácido clorhídrico concentrado (100 mL) y calentado a 80° C, tiempo durante el cual se formó lentamente un precipitado amarillo. Unos 500 mL adicionales de etanol fueron agregados para permitir el agitamiento de la suspensión. Después de 1 hora a 80°C, el precipitado fue recogido mediante filtración, lavado con etanol y secado bajo vacío para proporcionar el producto deseado como un sólido amarillo. La sal dehidrocloruro resultante fue recristalizada a partir de cloruro de metileno para proveer un compuesto 1 puro.

Ejemplo 2 1 , 5-Di (piridin-4-ilo) -pentan-3-ona (Compuesto 2): A una mezcla pastosa (slurry) del Compuesto 1 (21,3 g, 67,4 mmol) en 1,4-dioxano (40 mL) fue agregada trietilamina (48,1 mL, 0,346 mol), ácido fórmico (6,54 mL, 0,145 mol) y 19% de paladio en carbón (0,7 g) y la mezcla resultante calentada a reflujo. Después de calentar a reflujo por 1 hora, la reacción fue enfriada a temperatura ambiente, filtrada y concentrada en vacío. El residuo resultante fue cromatografiado sobre gel de sílice (elución con 5% metanol/cloruro de metileno) para proporcionar el material deseado.

P799 Ejemplo 3 (4-fluorobenzilo) - (3-piridin-4-ilo) -1- (2-piridin-4-ilo) -etilo) ropilo) amina (compuesto 3): A una redoma equipada con una trampa Dean-Stark, fue agregado compuesto 2 (12,46 g, 51,91 mmol), 4-fluorobenzilamina (5,93 mL, 51,91 mol) y benceno (50 mL) y la mezcla resultante fue calentada a reflujo. Después de la recolección de 930 µL de agua, la mezcla de reacción fue enfriada y concentrada. El residuo fue tomado en etanol (50 mL) y agregado a una mezcla pastosa de borohidruro de sodio (2,96 g, 77,8 mmol) y agitado durante 1 hora. La mezcla de reacción fue enfriada y concentrada. El residuo fue tomado en agua, acidificado a un pH de 3,0 con 6 N ácido clorhídrico. La fase acuosa fue lavada con etilo acetato (2x) . La fase acuosa fue hecha básica con hidróxido de sodio a un pH de 10 y el producto extraído con cloruro de metileno (2x) . Los orgánicos fueron combinados, lavados con salmuera, secados sobre sulfato de magnesio anhidro, filtrados y concentrados en vacío. La cromatografía del residuo sobre gel de sílice (elución con 5% metanol/cloruro de metileno) proporcionó el compuesto 3.

P799 Ejemplo 4 (S) -N- (4-Fluorobenzil) -2- (N-metil-N-tert-butiIcarbamoilo) amino-3-fenil-N- (3- (piridin-4-ilo) ropil) ropionamida (compuesto 4): A una solución de compuesto 3 (550 mg, 1,66 mmol) y (L) -BOC-N-metil-fenilalanina (700 mg, 2,5 mmol) en cloruro de metileno (4,0 mL) conteniendo diisopropiletilamina (300 µL, 1,72 mmol), fue agregado (3-dimetilaminopropilo) -3-etil-carbodiimida hidrocloruro (480 mg, 2,5 mmol) y la reacción dejada en agitación durante 48 horas. La reacción fue diluida con etil acetato y agua. Las capas fueron separadas y la fase acuosa re-extraída con etil acetato. Los orgánicos fueron combinados, lavados con bicarbonato de sodio saturado, agua y salmuera, secados sobre sulfato de magnesio anhidro, filtrados y concentrados en vacío. La cromatografía del residuo sobre gel de sílice (elución con 5% metanol/cloruro de metileno) produjo el compuesto 4.

Ejemplo 5 (S) -N- (4-Fluorobenzil) -2-metilamino-3-fenil-N- (3- (piridin-4-ilo) -1- (2- (piridin-4-ilo) -etil) ropil) propionamida (compuesto 5) : El compuesto 4 fue disuelto en cloruro de metileno (10 mL) y tratado con ácido trifluoroacético (4,0 P799 mL) . Después de agitar a temperatura ambiente durante 1,5 horas, la reacción fue concentrada en vacío. El residuo fue neutralizado con carbonato de potasio saturado y extraído con etil acetato (2x) . Los extractos fueron combinados, lavados con agua, secados sobre sulfato de magnesio anhidro, filtrados y concentrados en vacío para proveer el compuesto 5.

Ej emplo 6 (S) -N- (4-fluorobenzil) -2- (metil- (2-oxo-2- (3,4,5-trimetoxifenil) acetil) amino) -3-fenil-N- (3 (piridin-4-ilo) -1- (2- (piridin-4-ilo) -etil) ropil) ropionamida (compuesto 6): A una solución de compuesto 5 (500 mg, 0,98 mmol) y ácido 3 , 4, 5-trimetoxibenziolfórmico (294 mg, 1,22 mmol) en cloruro de etileno (4,0 mL) conteniendo N,N-dimetil-formamida (0,4 mL) fue agregado (3-dimetilaminopropil) -3-etilcarbodiimida hidrocloruro (235 mg, 1,22 mmol) y la reacción fue dejada agitar durante 24 horas. La reacción fue diluida con etil acetato y agua. Las capas fueron separadas y la fase acuosa re-extraída con etil acetato. Los orgánicos fueron combinados, lavados con bicarbonato de sodio saturado, agua y salmuera, secados sobre sulfato de magnesio anhidro, filtrados y concentrados en vacío. El residuo fue cromatografiado sobre gel de sílice (elución con 5% metanol/cloruro de metileno) produjo el producto P799 deseado. 1H NMR como una mezcla de rotómeros (500 MHz, CDC13) d 8,48-8,44 (m) , 8,38 (dd) , 7,36-7,33 (m) , 7,28-7,18 (m) , 7,13-7,02 (m) , 6,97-6,87 (m) , 6,58 (d) , 6,00 (dt) , 5,81 (t), 4,97 (br, s), 4,81 (d) , 4,23-4,16 (m) , 3,93 (s), 3,90 (s) 3,85 (s) , 3,76 (s) , 3,59 (dd) , 3,28 (dd) , 3,20 (s), 3,15 (s), 3,04-2,96 (m) , 3,02 (s) , 3,01 (s) , 2,94 (dd) , 2,63 (dt) , 2,53-2,37 (m) , 1,92-1,78 (m) , 1,72-1,62 (m) , 1,52-1,42 (m) .

Ej emplo 7 (S) -N-Benzil-2- (metil- (2-oxo-2- (3,4, 5-trimetoxifenil) acetil) amino) -3-fenil-N- (3- (piridin-4-ilo) -1- (2-piridin -4-ilo-etil) ropil) ropionamida (Compuesto 7): El compuesto 7 fue preparado de acuerdo a los protocolos de los ejemplos 3-6, mediante el reemplazo de 4-flurobenzilamina con benzilamina. H NMR como una mezcla de rotómeros (500 MHz, CDC13) d 8,48 (dd) , 8,53 (dd) , 8,43 (dd) , 8,35 (dd) , 7,38 (d) , 7,30-7,18 (m) , 7,17-7,02 (m) , 6,93 (s), 6,89 (d) , 6,54 (d) , 6.03 (dd) , 5,86 (t) , 5,08 (br, d) , 4,88 (d) , 4,32-4,18 (m) , 3,95 (s) , 3,89 (s) , 3,89 (s) , 3,73 (s), 3,63 (dd) , 3,23-3,19 (m) , 3,09 (dd) , 3,05 (s), 3,03 (s), 2,97 (dd) , 2,63 (dt) , 2,57-2,37 (m) , 2,24 (dt) , 2,06 (m) , 1,95-1,76 (m) , 1,74-1,63 (m) , 1,54-1,44 (m) .

P799 Ejemplo 8 (S) -N- (4-Clorobenzil) -2 ~ (metil- (2-oxo-2- (3,4,5-trimetoxifenil) acetil) amino) -3-fenil-N- (3- (piridin-4-ilo) -1- (2- (piridin-4-ilo) etil) ropil) propionamida (Compuesto 8): El compuesto 8 fue preparado de acuerdo a los protocolos de los ejemplos 3-6, mediante el reemplazo de 4-flurobenzilamina con 4-clorobenzilamina. H NMR como una mezcla de rotómeros (500 MHz, CDC13) d 8,49 (dt) , 8,45 (dd) , 8,40 (dd) , 7,69 (d) , 7,31-7,14 (m) , 7,12 (s) , 7,08-7,03 ( ) , 6,98 (s), 6,94-6,91 (m) , 6,85 (d) , 6,02 (dd) , 5,79 (t), 4,99 (br, d) , 4,83 (d) , 4,22-4,16 (m) , 3,96 (m) , 3,91 (s), 3,88 (s), 3,87 (s) , 3,81(s), 3,78 (s) , 3,61 (dd) , 3,33 (dd) , 3,21 (s) , 3,17 (s), 3,04 (s), 3,03 (s), 3,03-3,00 (m) , 2,95 (dd) , 2,65 (dt) , 2,56-2,40 (m) , 2,28 (dt) , 1,90-1,80 ( ) , 1,75-1,66 (m) , 1,52-1,43 (m) .

Ejemplo 9 (S) -N-Benzil-3- ( 4-clorofencil) -2- (metil- (2-oxo-2- (3,4,5-trimetoxifenil) acetil) amino) -N- (3- (piridin-4-ilo) -1- (2- (piridin-4-ilo) etil)propil)propionamida (Compuesto 8): El compuesto 9 fue preparado de acuerdo a los protocolos de los ejemplos 3-6, mediante el reemplazo de 4-flurobenzilamina con benzilamina y (L) -BOC-N- etilfenilalaniña con (L) -BOC-N-metil-4-clorofenilananina. XH NMR co o una mezcla de rotómeros (500 MHz, CDCl3) d 8,48 P799 (dd) , 8,45 (dt) , 8,38 (dd) , 7,32-6,87 (m) , 6,58 (d) , 5,94 (dd) , 5,78 (t) , 5,05 (br, d) , 4,83 (d) , 4,26 (dd) , 4,15 (m) , 3,97 (s), 3,89 (s), 3,86 (s), 3,75 (s), 3,57 (dd) , 3,20 (s), 3,15 (s), 3,15-3,09 (m) , 3.05-2,96 (m) , 3,01 (s), 3,00 (s), 2,91 (dd) , 2,65-2,38 (m) , 2,26 (dt), 1,94-1,47 (m) .

Ejemplo 10 (S) -2- (metil- (2-oxo-2- (3,4, 5-trimetoxifenil) acetil) -amino) -3-fenil-N- ( 4-fenilbutil ) -N- í (piridin-4-ilo) -metil] propionamida Compuesto 10 : El compuesto 10 fue preparado de acuerdo a los protocolos de los ejemplos 3-6, mediante el reemplazo de 4-flurobenzilamina con 4-fenilbutilamina y el compuesto 2 con 4-piridinacarboxaldehído . XH NMR como una mezcla de rotómeros (500 MHz, CDCl3) d 8,49 (dd) , 8,42 (dd) , 7,30-7,23 (m) , 7,18-7,11 (m) , 7,11 (s), 7,10 (s), 6,90 (d) , 6,77 (d) , ,88 (t), 5,60 (dd) , 4,85 (d) , 4,50 (d) , 4,28 (d) , 3,93 (s), 3,83 (s) , 3,81 (s) , 3,80 (s) , 3,65-3,50 (m) , 3,37 (m) , 3,20-3,15 (m) , 3,08-3,06 (m) , 3,06 (s), 3,05 (s), 2,92 (dd) , 2,60 (m) , 2,54 (m) , 1,60-1,48 (m) , 1,38-1,28 (m) .

Ejemplo 11 1, 7-Di- (piridin-4-ilo) -heptan-4-ona (Compuesto 8) : A una solución de 1, 7-Di (piridin-4-ilo)heptan-4- P799 ?u?»??>'?^iW*^;'.'"~:^".;r¿tW?*a»s?w<»»»to' ol (4,1 g, 15,2 mmol) en cloruro de metileno (50 mL) a 0°C, fue agregado bromuro de potasio (180 mg) y 2,2,6,6,-tetrametil-1-piperidiniloxi , radical libre (71 mg) . A la mezcla resultante fue agregada en forma de gotas una solución de bicarbonato de sodio (510 mg) en hipoclorito de sodio (65 mL) . Después de la adición fue terminada, la mezcla de la reacción fue calentada a temperatura ambiente y agitada durante unos 30 minutos. La mezcla fue diluida con etil acetato y agua. Las capas fueron separadas y la fase acuosa re-extraída con etil acetato. Los orgánicos fueron combinados, lavados con agua y salmuera, secados sobre sulfato de magnesio anhidro, filtrados y concentrados en vacío. La cromatografía del residuo sobre gel de sílice (elución con 5% metanol/cloruro de metileno) produjo el Compuesto 11.

Ejemplo 12 (S) -N-Benzil-2- (metil- (2-oxo-2- (3,4,5-trimetoxifenil) acetil) amino) -3-fenil-N- (3- (piridin-4-ilo) -1- ( 2- (piridin-4-ilo) -propil) butil) propionamida (Compuesto 12) : El compuesto 12 fue preparado de acuerdo a los protocolos de los ejemplos 3-6, mediante el reemplazo de 4- fluorobenzilamina con benzilamina y el compuesto 2 con el compuesto 11. H NMR como una mezcla de rotómeros (500 MHz, P799 CDC13) d 8,43-8,38 (m) , 8,30 (m) , 8,16 (m) , 7,53-7-45 (m) , 7,34 (m) , 7,32 (m) , 7,26-7,22 ( ) , 7,19-7,07 (m) , 7,00- 6,83 (m) , 5,89 (dd) , 5,72 (t), 4,90 (d) , 4,72 (d) , 4,10 (d) , 4,00 (d) , 3,93 (s), 3,91 (s), 3,85 (s), 3,74 (s) , 3,52 (dd) , 3,16-3,10 (m) , 3,04 (s), 2,99 (dd) , 2,93 (s), 2,84 (dd) , 2,67-2,38 (m) , 2,30 (m) , 2,22 (m) , 1,63-1,12 (m) , 0,94 (m) .

Ejemplo 13 Metil- (3-piridin-4-ilo) -1- (2- (piridin-4-ilo) -etil) -propil) amina Compuesto 13: A una mezcla pastosa (slurry) de hidrocloruro metilamina (1,7 g, 25,4 mmol) y acetato de sodio (2.5g, 30,48 mmol) en metanol (20 mL) fue agregada una solución del compuesto 2 (1,21 g, 5,08 mmol) en metanol (5 mL) y calentada a 80° C. Después de una hora a 80° C, la reacción fue enfriada a temperatura ambiente y concentrada en vacío. El residuo fue tomado en cloruro de metileno y 2N hidróxido de sodio. Las capas fueron separadas y la fase orgánica fue lavada con salmuera, secada sobre sulfato de magnesio anhidro, filtrada y concentrada en vacío para producir el Compuesto 13.

P799 Ejemplo 14 (S) -N-Meti1-2- (metil- (2-oxo-2- (3,4,5-trimetoxi fenil) acetil) amino) -3-fenil-N- (3- (piridin-4-ilo) -1- (2- (piridin-4-ilo) -etil) propil) propionato (Compuesto 14): El compuesto 14 fue preparado de acuerdo a los protocolos de los ejemplos 4-6, mediante el reemplazo del Compuesto 3 con el Compuesto 13. 1H NMR como una mezcla de rotómeros (500 MHz, CDCl3) d 8,50-8,46 (m) , 8,37 (d) , 7,32-7,26 (m) ,7,21-7,16 (m) , 7,10-7,06 (m) , 6,97 (dd) , 6,93 "(d) , 5,93 (d) , 5,54 (t), 4,72 (br, s), 4,17(m), 3,94 (s), 3,92 (s), 3,84 (s), 3,82 (s), 3,51 (dd) , 3,38 (dd) , 3,29 (s), 3,11 (dd) , 3.06 (s), 3,00 (s), 2,97 (dd) , 2,86 (s), 2,82 (s), 2,49 (m) , 2,37-2,23 (m) , 2,17-1,98 (m) , 1,85-1,55 (m) .

Ejemplo 15 (S) -N-Metil-2- (metil- (2-oxo-2- (3,4,5-trimetoxifenil ) acetil ) amino) -3-fenil-N- (3- (piridin-4-ilo) - 1- (2- (piridin-4-ilo) -propil ) butil ) propionamida (Compuesto ) : El compuesto 15 fue preparado de acuerdo a los protocolos de los ejemplos 13 y 14, mediante el reemplazo del Compuesto 2 con el Compuesto 11. H NMR como una mezcla de rotómeros (500 MHz, CDC13) 8 8,44-8,38 (m) , 8,37-8,30 (m) , 7,50-7,43 (m) , 7,38-7,08 (m) , 7,04 (s), 7,03-6,98 (m) , 6,90-6,86 (m) , 5,83 (dd) , 5,74 (t), 4,75 (t) , 4,65 P799 (m) , 3,94-3,93 (m) , 3,92 (s), 3,90 (s), 3,84 (s), 3,44 (dd) , 3,32 (dd) , 3,20 (s) , 3,01 (dd) , 2,95 (s) , 2,91 (s) , 2,87 (dd) , 2,59 (s), 2,58-2,37 ( ) , 1,68-1,00 (m) .

Ejemplo 16 (S) -4-Meti 1-2- (metil- (2 -oxo-2- (3,4,5-trimetoxifenil) acetil ) amino) ácido pentanoico benzil (3- (piridin-4-ilo) -1- (2-piridin-4-ilo)etil) ropilamida (Compuesto 16) : El compuesto 16 fue preparado de acuerdo a los protocolos de los ejemplos 3-6, mediante el reemplazo de 4-fluorobenzilamina con benzilamina y (L) -BOC-N-metilfenilalanina con (s) -BOC-N-metil-leucina .

Ejemplo 17 (S) -4-Metil-2- (metil- (2-oxo-2- (3,4,5-trimetoxifenil) acetil) amino) ácido pentanoico fluorobenzil ( 3-piridin-4-ilo-l- (2-piridin-4-ilo-etilo) ropil) amida (Compuesto 14) : El compuesto 17 fue preparado de acuerdo a los protocolos de los ejemplos 4-6, mediante el reemplazo de (L) -Boc-N-metilfenilalamina con (S) -Boc-N-metil-leucina. XH NMR como una mezcla de rotómeros (500 MHz, CDC13) d 8,48 (m) , 8,45 (d) , 7,32 (m) , 7,18 (s), 7,12 (s), 7,09-6,92 (m) , 6,84 (d) , 5,72 (dd) , 5,48 (dd) , 4,99 (br, d) , 4,68 (d) , P799 4,42 (d) , 4,36 (d) , 4,29 (m) , 3,94 (s), 3,91 (s), 3,87 (s), 3,83 (s), 2,96 (s) , 2,92 (s), 2,69 (dt) , 2.62-2,55 (m) , 2,52-2,44 (m) , 1,12-1,73 (m) , 1 , 63-1 , 57 (m) , 1,48-1,39 (m) , 1,23 (m) , 1,03 (t), 0,90 (d) , 0,69 (d) .

Ejemplo 18 (S) -4 -Meti1-2- (metil- (2-oxo-2- (3,4,5-trimetoxifenil) acetil) amino) ácido pentanoico clorobenzil (3-piridin-4-ilo-l- (2-piridin-4-ilo-etil) ropil ) amida) (Compuesto 18) : El compuesto 18 fue preparado de acuerdo a los protocolos de los ejemplos 3-6, mediante el reemplazo de 4-flurobenzilamina con 4-clorobenzilamina y (L) -Boc-N-metilfenilalanina y (L) -Boc-N-metilfenilalanina con (S)- Boc-N-metilleucina . H NMR como una mezcla de rotómeros (500 MHz, CDC13) d 8,50 (m) , 8,47 (d) , 7,38 (d) , 7,30-7,26 (m) , 7,19 (s), 7,13 (s), 7,10 (d) , 7,04 (d) , 6,98 (d) , 6,84 (d) , 5,73 (dd) , 5,47 (dd) , 5,03 (br, d) , 4,69 (d) , 4,42 (d), 4,36 (d) , 4,31 (m) , 3,95 (s), 3,93 (s), 3,88 (s), 3,84 (s), 2,97 (s), 2,94 (s), 2,70 (dt), 2,63-2,43 (m) , 2,12- 1,56 (m) , 1,48-140 (m) , 1,25 (m) , 1,04 (t), 0,91 (d) , 0,70 (d) .

P799 Ejemplo 19 (S) -N- (4-fluorobenzíl) -3- (4-clorofenil) -2- (metil- (2-oxo-2-(3,4, 5-trimetoxi fenil ) acetil) amino) -N- (3-piridin-4-ilo-l-(2-piridin-4-ilo-etilo)propil) propionamida (Compuesto 19) : El compuesto 19 fue preparado de acuerdo a los protocolos de los ejemplos 4-6, mediante el reemplazo de (L) -Boc-N-metilfenilalanina con (L) -Boc-N-metil-4-clorofenillalanina . H NMR como una mezcla de rotómeros (500 MHz, CDC13) d 8,49-8,41 (m) , 7,34 (s), 7,28-7,20 (m) , 7,10-6,90 (m) , 6,64 (d) , 5,92 (d) , 5,74 ( ), 4,95 (br, d) , 4,74 (d) , 4,24-4,13 (m) , 3,94 (s) , 3,90 (s) , 3,86 (s) , 3,77 (s) , 3,54(dd), 3,23-3,17 (m) , 2,99 (s), 2,90 (d) , 2,63 (dt) , 2,59-2,37 (m) , 2,28 (dt), 1,94-1,70 (m) , 1,57-1,47 (m) .

Ejemplo 20 (4-Clorobenzil) - (3-imidazol-l-iIo-propil) amina (Compuesto ) : A una solución de 1- (3-amino-propil) imidazola (2,1 g, 16,8 mmol), diisopropil-etilamina (3,5 mL, 20,0 mmol) y 4-N, N-dimetil-aminopiridina (200g,l,7 mmol) en cloruro de metileno (15 mL) a 0o C fue agregado en forma de gotas 4-clorobenzoilo-cloruro (2,1 mL, 16,8 mmol). La reacción fue dejada calentar entonces a temperatura ambiente. Después de 5 horas, la reacción fue diluida con P799 cloruro de metileno, lavada con ÍN hidróxido de sodio, salmuera, secada sobre sulfato de magnesio anhidro, filtrada y concentrada en vacío para proveer un sólido blanco. Este material fue lavado con éter dietilo para proveer N- (3-imidazol-l-ilo-propil) -4-clorobenzamida . A una mezcla pastosa de la misma anterior (1,58 g, 6,0 mmol) en tetrahidrofurano (30 mL) fue agregada lentamente hidruro aluminio de litio (456 mg, 12,0 mmol) a lo cual la reacción se convirtió en exotérmica. La mezcla fue calentada a 80° C, agitada por 1 hora, enfriada a 0o C y templada mediante la adición de agua (0,5 mL) , hidróxido de sodio al 15% (0,5 mL) y 1,5 mL adicionales de agua. La reacción fue diluida con etil acetato, secada sobre sulfato de magnesio anhidro, filtrada y concentrada en vacío para proveer el Compuesto 20.

Ejemplo 21 (S) -N- (4-clorobenzil) -N- ( 3-imidazol-l-ilo-propil ) -2- (metil-oeo-2- (3,4,5 trimetoxi fenil ) acetil) amino) -3-fenilpropionamida (Compuesto 21) : El compuesto 21 fue preparado de acuerdo a los protocolos de los ejemplos 4-6, mediante el reemplazo del compuesto 3 con el compuesto 20. 1H NMR como una mezcla de rotómeros (500 MHz, CDC13) d 8,48 (m) , 7,44 (br, s), 7,37 (br, s), 7,30-7,16 (m) , 7,10-7,02 (m) , 6,95 (d) , 6,83 (m) , P799 ,78 (t) , 5,72 (t), 4,77 (d) , 4,57 (d) , 4,26 (dd) , 3,94 (m) , 3,93 (s), 3,88-3,77 (m) , 3,80 (s), ' 3,48 (dt) , 3,42- 3,33 (m) , 3,19-3,14 (m) , 3,13 (s), 3,12(s),, 3,13-2,97 ( ) , 2,89 (t) , 2,80 (m) , 2,74 (t), 2,65 (m) , 2,08-1,98 (m) , 1,90 (m) , 1-, 80-1, 60 (m) .

Ejemplo 22 N- (lH-Imidazol-2-ilo-metil) -N- (1-fenetil-3-fenil-propil) mina) (Compuesto 22): A una solución de 1, 5-Dimetilpentan-3-ona (5,26 g, 22,1 mmol), acetato de amonio (8,52 g, 110,5 mmol) y acetato de sodio (9,06 g, 110,5 mmol) en etanol (80 mL) fue agregada una solución de cianoborohidruro de sodio (1,67 g, 26,52 mmol) en metanol (20 mL) y la reacción calentada a reflujo. Después de agitar en reflujo durante 30 minutos, la reacción fue enfriada y concentrada hasta la sequedad. El residuo fue dividido entre cloruro de metileno y 2N hidróxido de sodio. La fase orgánica fue separada, lavada con salmuera, secada sobre sulfato de magnesio anhidro, filtrada y concentrada en vacío. La cromatografía del residuo en gel de Sílice (elución con 2-5% metanol/cloruro de metileno) produjo N- (1-fenetil-3-fenil-propil) amina . A una solución de la amina anterior (2,1 g, 8,82 mmol) y la reacción calentada a 50° C. Después de agitar durante 2 horas, la solución homogénea resultante fue tratada con P799 borohidruro de sodio (400 mg, 10,58 mmol) y dejada en agitación durante la noche. La reacción fue concentrada hasta la sequedad y el residuo fue dividido entre cloruro de metileno y 2N hidróxido de sodio. La fase orgánica fue separada, lavada con salmuera, secada sobre sulfato de magnesio anhidro, filtrada y concentrada en vacío. La cromatografía del residuo en gel de sílice (elución con 5% metanol/cloruro de metileno) produjo en compuesto 22.

Ejemplo 23 (S) -N- (l-H-Imidazol-2-ilo-metil) -2- (metil- (2-oxo-2- (3,4,5-trimetoxifenil) acetil) amino) -N- ( 1-fenetil-3-fenil-propil) 3-fenil-propionamida (Compuesto 23): El Compuesto 23 fue preparado de acuerdo a los protocolos de los ejemplos 4,6, mediante el reemplazo del Compuesto 3 con el Compuesto 22. 1H NMR como una mezcla de rotómeros (500 MHz, CDC13) d 7,40-7,00 (m) , 6,95-6,87 (m) , 5,95 (t), 5,69 (t) , 4,66(d), 4,46 (d) , 4,12 (m) , 3,94 (s), 3,92 (s), 3,82 (s) , 3,81 (s), 3,80 (s), 3,47 (s), 3,43 (dd) , 3,34 (dd) , 3,22 (s) , 3,15 (s) , 3,03 (dd) , 3,00 (s) , 2,60 (dt) , 2,45-2,22 (m) , 1,80-1,78 (m) .

Ejemplo 24 Con el fin de determinar directamente la actividad neurotrófica de los compuestos descritos en esta P799 invención, el ensayo de mayor crecimiento de neuritas fue llevado a cabo con células de feocromocitoma PC12 como se describe por Lyons et al. (1994) . Las células PC12 son mantenidas a 372 y 5% de C02 en un medio Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) suplementado con 10% de cera de caballo inactivada con calor, 5% de cera bovina fetal inactivada con calor (FBS) , y 1% de glutamato. Las células son entonces puestas en un plato a razón de 105 por pozo en platos de 96 pozos recubiertos con 5 µg/cm2 de colágeno de cola de rata y permitiéndoles unirse durante toda la noche. El medio es entonces reemplazado con DMEN, 2% de cera de caballo inactivada con calor, 1% de glutamato, 1-5 ng/ml de NGF (Sigma) y variando las concentraciones del compuesto (0,1 nM- 10 nM) . El cultivo de control para antecedentes es administrado con 105 ng/ml de NGF solo sin compuesto. Los cultivos de control positivo son administrados con alta concentración de NGF (50 ng/ml) . Los compuestos descritos en esta invención a uí originan un incremento significativo en el mayor crecimiento de neuritas sobre los cultivos de control de antecedente . Mientras que en lo anterior se ha presentado un número de modalidades de esta invención, es evidente que mi construcción básica puede ser alterada o adicionada con P799 otras modalidades las cuales utilizan los métodos de esta invención. Por lo tanto, se apreciará que el alcance de esta invención debe ser definido por las reivindicaciones finales de esta en lugar de las modalidades específicas que han sido presentadas anteriormente por medio de los ejemplos .

P799

Claims (26)

REIVINDICACIONES

1. Una composición farmacéuticamente aceptable que comprende : a) una cantidad neurotrófica de un compuesto que tiene la fórmula (I) : y derivados farmacéuticamente aceptables de este, en donde: R1, B y D son independientemente: hidrógeno, Ar, alquilo (C1-C6) recto o ramificado, alquenilo o alquinilo (C2-C6) recto o ramificado, alquilo (C1-C6) recto o ramificado sustituido con cicloalquilo (C5-C7), alquenilo o alquinilo recto o ramificado (C3-C6) sustituido con cicloalquilo (C5-C7), alquilo recto o ramificado (C1-C6) sustituido con cicloalquenilo (C5-C7), alquenilo o alquinilo recto o ramificado (C3-C6) sustituido con cicloalquenilo (C5-C7), alquilo recto o ramificado (C1-C6) sustituido con Ar, alquenilo o alquinilo recto o ramificado (C3-C6) sustituido con Ar; dado que R1 no es hidrógeno ni alquilo recto o ramificado (C1-C6) ; y en donde cualquiera de los grupos CH2 de dichas P799 cadenas alquilo en R? , B y D es opcionalmente reemplazado por O, S, SO, S02, o NR; en donde R es hidrógeno, alquilo recto o ramificado (C1-C6), alquenilo o alquinilo recto o ramificado (C3-C4), o alquilo puente (C1-C4) . El alquilo puente (C1-C4), junto con el nitrógeno y un átomo de carbono de dicha cadena alquilo para formar un anillo, y en donde dicho anillo es opcionalmente fusionado a un Ar; en donde cada Ar es independientemente seleccionada de fenilo, 1-naftilo, 2-naftilo, indenilo, azulenilo, fluorenilo, antracenilo, 2-furilo, 3-furilo, 2-tienilo, 3-tienilo, 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, pirrolilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, piraxolilo, 2-pirazolinilo , pirazolidinilo, isoxazolilo, isotriazolilo, 1, 2, 3-oxadiazolilo, 1 , 2 , 3-triazolilo, 1, 3 , 4-tiadiazolilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, 1, 3 , 5-triazinilo, 1, 3 , 5-tritianilo, indolizinilo, indolilo, isoindolilo, 3H-indolilo, indolinilo, benzo [b] furanilo, benzo [b] tiofenilo, lH-indazolilo, benzimidazolilo, benztiazolilo, purinilo, 4H-quinolizinilo, quinolinilo, 1,2,3, 4-tetrahidro-isoquinolinilo, isoquinolinilo, 1,2,3, 4-tetrahidro-isoquinolinilo, cinnolinilo, ftalazinilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, 1, 8-naftiridinilo, pteridinilo, carbazolilo, acridinilo, fenazinilo, fenotiazinilo y fenoxazinilo; y P799 en donde cada Ar es opcionalmente e independientemente sustituido con uno a tres sustituyentes independientemente seleccionados de hidrógeno, halógeno, hidroxilo, nitro, -S03H, trifluorometilo, trifluorometoxi, alquilo recto o ramificado (C1-C6), 0- (alquilo recto o ramificado (C1-C6) ) , 0-benzilo, 0-fenilo, 1,2-metilenodioxi, -NR5R6, carboxilo, N- (alquilo recto o ramificado (C1-C6)), N- (alquenilo recto o ramificado (C3-C5)) carboxamida, N, N-di- (alquilo recto o ramificado (Cl-C6) ) , N, N-di- (alquenilo recto o ramificado (C3-C5)), carboxamida, morfolinilo, piperidinilo, 0-M, CH2- (CH2) q-M, 0-(CH2)q-M, (CH2)q-0-M, y CH=CH-M; en donde R5 y R6 son independientemente seleccionados del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo recto o ramificado (C1-C6) , alquenilo o alquinilo recto o ramificado (C2-C6) , benzilo o R5 y R6 son puestos juntos para formar un anillo heterocíclico de 5-7 miembros ; M es seleccionado del grupo que consiste de 4-metoxifenilo, 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, pirazilo, quinolilo, 3 , 5-dimetilisoxazoilo, 2-metiltioazoilo, tiazoilo, 2-tienilo, 3-tienilo, 4-tienilo y pirimidilo; y q es 0-2; J es seleccionado del grupo que consiste de alquilo recto o ramificado (C1-C6), alquenilo o alquinilo recto o ramificado (C3-C6) , alquilo recto o ramificado (Cl- P799 C6) sustituido con Ar, alquenilo o alquinilo recto o ramificado (C3-C6) sustituido con Ar, y ciclohexilmetilo; K es seleccionado del grupo que consiste de alquilo recto o ramificado (C1-C6) , alquilo recto o ramificado (C1-C6) sustituido con Ar, alquenilo o alquinilo recto o ramificado (C2-C6), o alquenilo o alquinilo recto o ramificado (C3-C6) sustituido con Ar; J y K son tomados juntos con los átomos de nitrógeno y carbono a los cuales ellos están respectivamente unidos para formar un anillo heterocíclico de 5-7 miembros que puede contener un heteroátomo seleccionado de O, S, SO y SO^; X es seleccionado del grupo que consiste de Ar, -OR2, y -NR3R4; en donde R2 tiene la misma definición que R1; R3 y R4 independientemente tienen las mismas definiciones de B y D; o R3 y R4 pueden ser tomados juntos para formar un anillo alifático o aromático heterocíclico de 5-7 miembros; y m es 0 o 1; b) un factor neurotrópico ; y c) un portador farmacéuticamente adecuado. 2. La composición farmacéuticamente aceptable de acuerdo con la reivindicación 1, en donde dicho compuesto tiene la fórmula: P799 en donde : J y K son independientemente de alquilo recto o ramificado (C1-C6) , o alquilo recto o ramificado (C1-C6) sustituido con Ar; y w es 1 ó

2.

3. Una composición farmacéuticamente aceptable de acuerdo a la reivindicación 1, en donde al menos uno de los B o D es independientemente representado por la fórmula - (CH2)r-Z- (CH2)s-Ar, en donde: r es 1-4; s es 0-1; y cada Z está independientemente seleccionado del grupo que consiste de O, S, SO, S02 y NR; donde R es seleccionado de hidrógeno, alquilo recto o ramificado (Cl-C4), alquenilo o alquinilo recto o ramificado (C3-C4) y alquilo de puente (C1-C4) en donde se forma un puente entre el nitrógeno y el grupo Ar.

4. La composición farmacéuticamente aceptable de acuerdo con la reivindicación 3, en donde dicho compuesto tiene la fórmula: P799 en donde J y K son independientemente seleccionados de alquilo recto o ramificado (C1-C6) , o alquilo recto o ramificado (C1-C6) sustituido con Ar; y w es 1 o 2.

5. La composición farmacéuticamente aceptable de acuerdo con la reivindicación 1, en donde: cada Ar es independientemente seleccionado de fenilo, 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, imidazolilo, indolilo, isoindolilo, quinolinilo, isoquinolinilo, 1, 2 , 3 , 4-tetrahidroisoquinolinilo, o 1,2,3,4-tetrahidroquinolinilo; y cada Ar opcionalmente e independientemente contiene de 1 a 3 sustituyentes independientemente seleccionados de hidroxilo, nitro, trifluorometilo, alquilo recto o ramificado (C1-C6), O- (alquilo recto o ramificado (C1-C6) ) , halógeno, SO.H, o -NR3R4.

6. la composición farmacéuticamente aceptable de acuerdo a la reivindicación 2, en donde dicho compuesto es seleccionado de cualquiera de los compuestos 6-10, 12, 14-19, 21 o 23, como se definió en la tabla I a continuación : P799 TABLA I 99

7. La composición farmacéuticamente aceptable de acuerdo con la reivindicación 6 seleccionada de: (S) -N-Metil-2- (metil- (2-oxo-2- (3, 4, 5-trimetoxifenil) acetil) amino) -3-fenil-N- (3-piridin-4-il-l- (2-piridin-4-il-etil)propil)propionamida (compuesto 7); (S) -N-Metil-2- (metil- (2-oxo-2- (3, 4, 5-trimetoxfenil) acetil) amino) -3-fenil-N- (3-piridin-3-il-l-(2-piridin-3-il-propil)butil) propionamide (compuesto 8); (S) -N-Metil-2-metil- (2-oxo-2- (3, 4, 5-trimetoxifenil) acetil ) amino) -3- (4-cloro-fenil) -N- (3-piridin-4-il-l- (2-piridin-4-il-etil)propil)propionamida; o (S) -N-Metil-2- (metil- (2-oxo-2- (3,4,5-trimetoxifenil) acetil) amino) -3- (4-cloro-fenil) -N- (3-piridin-3-il-l- ( 2 -piridin-3-il-propil) butil) propionamida.

8. La composición farmacéuticamente aceptable de acuerdo a la reivindicación 1 en donde dicho factor neurotrófico es seleccionado del factor de crecimiento nervioso (NGF) , factor de crecimiento de insulina (IGF) y sus derivados truncados activos, factor de crecimiento de fibroblastos ácidos (aFGF) , factor de crecimiento de fibroblastos básico (bFGF) , factores de crecimiento derivados de plaquetas (PDGF), factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF) , factores neurotrópicos ciliares (CNTF) , factor neurotrópico derivado de células glial (GDNF) , neurotrofina-3 (NT-3) y neurotrofina 4/5 (NT-4/5). P799

9. La composición farmacéuticamente aceptable de acuerdo a la reivindicación 8, en donde dicho factor neurotrófico es el factor de crecimiento nervioso (NGF) .

10. Un método para estimular el crecimiento de neuritas en un paciente o en una célula nerviosa ex vivo que comprende el paso de administrar a dicho paciente o dicho nervio una cantidad neurotrófica de un compuesto que tiene la fórmula (I) : y derivados farmacéuticamente aceptables de estos en donde: R1( B, D, J, K, X y m son definidos como en la reivindicación 1.

11. El método de acuerdo a la reivindicación 10, en donde dicho compuesto tiene la fórmula: en donde : J, K y w son como se definió en la reivindicación

12. El método de acuerdo a la reivindicación 10,

P799 en donde al menos uno de B o D es independientemente representado por la fórmula - (CH2) r- (Z) - (CH2) s-Ar, en donde: r, s y Z se definen como en la reivindicación 3. 13. El método de acuerdo a la reivindicación 12, en donde dicho compuesto tiene la fórmula: en donde : J, K y son como se definió en la reivindicación

14. El método de acuerdo a la reivindicación 10, en donde : cada Ar es independientemente seleccionado de fenilo, 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, imidazolilo, indolilo, isoindolilo, quinolinilo, isoquinolinilo, 1, 2 , 3 , 4-tetrahidroisoquinolinilo, o 1,2,3,4-tetrahidroquinolinilo; y cada Ar opcionalmente e independientemente contiene de 1 a 3 sustituyentes independientemente seleccionados de hidroxilo, nitro, trifluorometilo, alquilo recto o_ ramificado (C1-C6) , O- (alquilo recto o ramificado (C1-C6)), halógeno, SO.H, o -NR3R4.

15. El método de acuerdo a la reivindicación 11, P799 en donde dicho compuesto es seleccionado de cualquiera de los compuestos 6-10, 12, 14-19, 21 o 23, como se definió en la tabla I .

16. El método de acuerdo a la reivindicación 15, en donde dicho compuesto es seleccionado de: (S) -N-Metil-2- (metil- (2-oxo-2- (3,4,5-trimetoxifenil) acetil) amino) -3-fenil-N- (3-piridin-4-il-l- (2-piridin-4-il-etil) ropil) propionamida (compuesto 7); (S) -N-Metil-2- (metil- (2-oxo-2- (3, 4, 5-trime oxfenil) acetil) amino) -3-fenil-N- (3-piridin-3-il-l-(2-piridin-3-il-propil)butil) ropionamide (compuesto 8); (S) -N-Metil-2-metil- (2-oxo-2- (3,4,5-trimetoxi fenil) acetil) amino) -3- (4-cloro-fenil) -N- (3-piridin-4-il-l- ( 2 -piridin-4-il-etil) propil) ropionamida; o (S) -N-Metil-2- (metil- (2-oxo-2- (3,4,5-trimetoxifenil) acetil) amino) -3- (4-cloro- fenil) -N- (3-piridin-3-il-l- ( 2 -piridin-3-il-propil) butil) ropionamida.

17. El método de acuerdo a una cualquiera de las reivindicaciones 10-16, en donde dicho compuesto es administrado a un paciente y es formulado junto con un portador farmacéuticamente aceptable en una composición farmacéuticamente aceptable.

18. El método de acuerdo a la reivindicación 17, en donde dicho método es utilizado para tratar un paciente que sufre de enfermedad de Alzheimer, enfermedad de P799 Parkinson, ALS, esclerosis múltiple, apoplejía e isquemia asociada con apoplejía, paropatía neural, otras enfermedades degenerativas neurales, enfermedades neuromotoras, presión ciática, neuropatía periferal, neuropatía diabética, daño de la médula espinal o presión del nervio facial.

19. El método de acuerdo a la reivindicación 18, que comprende el paso adicional de administrar a dicho paciente un factor neurotrófico, en donde el factor neurotrófico se formula junto con el compuesto para formar una forma de dosis simple o el factor neurotrófico y el compuesto se administran en forma de dosis separados.

20. El método de acuerdo a la reivindicación 19, en donde dicho factor neurotrófico es seleccionado de factor de crecimiento nervioso (NGF) , factor de crecimiento de insulina (IGF) y derivados truncados activos de este, factor de crecimiento de fibroblastos ácidos (aFGF) , factor de crecimiento de fibroblastos básico (bFGF) , factores de crecimiento derivados de plaquetas (PDGF) , factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF) , factores neurotrópicos ciliares (CNTF) , factor neurotrópico derivado de células glial (GDNF), neurotrofina-3 (NT-3) y neurotrofina 4/5 (NT-4/5) .

21. El método de acuerdo a la reivindicación 20, en donde dicho factor neurotrófico es factor de crecimiento P799 nervioso (NGF) .

22. El método de acuerdo a cualquiera de las reivindicaciones 18-21, en donde dicho paciente está sufriendo de diabetes asociada con neuropatía periferal.

23. El método de acuerdo a cualquiera de las reivindicaciones 10-16, en donde dicho método es utilizado para estimular regeneración nerviosa ex vivo .

24. El método de acuerdo a la reivindicación 23, que comprende el paso adicional de poner en contacto dicha célula nerviosa con un factor neurotrófico.

25. El método de acuerdo a la reivindicación 24, en donde dicho factor neurotrófico es seleccionado de factor de crecimiento nervioso (NGF) , factor de crecimiento de insulina (IGF) y derivados truncados activos de este, factor de crecimiento de fibroblastos ácidos (aFGF) , factor de crecimiento de fibroblastos básico (bFGF) , factores de crecimiento derivados de plaquetas (PDGF) , factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF) , factores neurotrópicos ciliares (CNTF) , factor neurotrópico derivado de células glial (GDNF), neurotrofina-3 (NT-3) y neurotrofina 4/5 (NT-4/5) .

26. El método de acuerdo a la reivindicación 25, en donde dicho factor neurotrófico es factor de crecimiento nervioso (NGF) . P799