MXPA99000280A - Dispositivo de prueba o ensayo cromatografico - Google Patents

Abstract

Un dispositivo de prueba o ensayo cromatográfico para la detección y/o determinación de un analito en una muestra de prueba, comprende un miembro de base, y un medio cromatográfico ubicado en o sobre dicho miembro de base, riendo proporcionado el miembro de base con un receptáculo para reciba un aplicador que tiene la muestra aplicada al mismo, y riendo el aplacador movible cuando se ubica en dicho receptáculo entre una primera posición en la cual el aplicador estáfuera del contacto fluido con el medio cromatográfico, y una segunda posición en la cual el aplicador estáen contacto luido con el medio cromatográfico con el fin de aplicar una muestra sobre el aplicador al medio cromatográfico. En una aspecto alternativo, el dispositivo de prueba comprende un miembro de base, y un segundo miembro, al menos uno del miembro de base y el segundo miembro incluyendo un medio cromatográfico, y siendo el segundo miembro movible de manera deslizable con respecto al miembro de base desde una primera posición a una segunda posición.

Description

DISPOSITIVO DE PRUEBA O ENSAYO CROMATOGRAFICO CAMPO DE LA INVENCIÓN Esta invención se refiere a un dispositivo de prueba o ensayo cromatográfico para la detección y/o determinación de un analito en una muestra, y en una modalidad particular se refiere a un dispositivo de ensayo cromatográfico, el cual incorpora un inmunoensayo en un procedimiento conocido como una inmunocromatografía. Esta invención tiene aplicación particular, pero no exclusiva en la detección de analitos en muestras biológicas tales como sangre, orina, muestras fecales y de saliva, y similares.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Las solicitudes de patentes internacionales anteriores Nos. PCT/US922/00425 (WO 92/21977) y PCT/US94/13982 (WO 95/16207) notan quen entre los muchos sistemas analíticos usados para la detección y/o determinación de analitos, particularmente analitos de interés biológico, están los sistemas de ensayo cromatográfico. Entre los analitos de interés biológico frecuentemente ensayados con tales sistemas están: 1 . hormonas, tales como gonadotropina coriónica humana (hCG), frecuentemente ensayada como un marcador de embarazo humano; 2. antígenos, particularmente antígenos específicos para patógenos bacterianos, virales y protozoarios, tales como Streptococcus, virus de hepatitis, Giardia, virus de leucemia felina, virus mosaico de tabaco, Salmonella, y Plasmodium; 3. anticuerpos, particularmente anticuerpos inducidos como un resultado de infección con patógenos, tales como anticuerpos para la bacteria Helicobacter pylori, para virus de inmunodeficiencia humana (HIV) y para virus de inmunodeficiencia felina (FlV); 4. otras proteína, tales como hemoglobina, frecuentemente ensayada en determinaciones de sangre oculta en heces fecales, un indicador temprano de desórdenes gastrointestinales tales como cáncer de colon; 5. enzimas, tales como aspartato amino transferasa, lactato deshidrogenasa, fosfatasa alcalina, y glutamato deshidrogenasa, frecuentemente ensayadas como indicadores de daño de tejido y función fisiológica; 6. medicamentos, tanto medicamentos terapéuticos, tales como antibióticos, tranquilizantes y anticonvulsionantes, y medicamentos ilegales de abuso, tales como cocaína, heroína y mariguana; 7. vitaminas; y 8. contaminantes ambientales, tales como patógenos, herbicidas, pesticidas, residuos tóxicos y similares. Tales sistemas cromatográficos son usados frecuentemente por médicos y técnicos médicos en el campo de la salud, y por profesionales y técnicos ambientales y agrícolas, para diagnóstico en el sitio o punto de cuidado rápido, detección o monitoreo de analitos de interés biológico. También ha aumentado su uso por pacientes por ellos mismos para monitoreo en casa de una variedad de condiciones terapéuticas y desórdenes. Entre los más importantes de tales sistemas cromatográficos se encuentran ios sistemas de "capa fina" en los cuales un solvente se mueve como un solvente a través de un medio absorbente plano, fino. Entre las más importantes de estas pruebas que pueden ser realizadas con tales sistemas de capa fina se encuentran los inmunoensayos, los cuales dependen de la interacción específica entre un antígeno o "hapten" y un anticuerpo correspondiente. El uso de inmunoensayos como un medio para probar la presencia y/o cantidad de moléculas clínicamente importantes ha sido conocido por un tiempo. Como se notó previamente, las técnicas cromatográficas usadas en conjunción con inmunoensayos son conocidas como inmunocromatografía. En general, esta técnica usa una partícula o reactivo de descripción que ha sido enlazado a un anticuerpo para el analito a ser ensayado, formando un conjugado. Este conjugado es mezclado entonces con un espécimen y, si el analito a ser valorado está presente en el espécimen, los anticuerpos enlazados al reactivo de descripción se ligan al analito a ser ensayado, dando con ello una indicación de que el analito a ser ensayado está presente. La partícula o reactivo de descripción puede ser indentificable mediante color, propiedades magnéticas, radioactividad, reactividad específica con otra molécula, u otra propiedad física o química. Las reacciones específicas que son empleadas varían con la naturaleza del analito siendo ensayado y la muestra a ser probada.

Aunque útiles, las técnicas cromatográficas actualmente disponibles que usan tiras de prueba tienen un número de desventajas. Muchas muestras, tales como las muestras fecales, contienen materia particulada que pueden obstaculizar los poros del medio cromatográfico, obstruyendo enormemente el proceso ¡nmunocromatográfico. Otras muestras, tales como sangre, contienen células y componentes coloreados que hacen difícil la lectura de la prueba. Aún si la muestra no crea interferencia, frecuentemente es difícil con los dispositivos de prueba cromatográificos existentes aplicar la muestra al medio cromatográfico de manera que el frente de solvente se mueva uniformemente a través del medio cromatográfico para asegurar que la muestra alcanza el área donde la ligadura va a ocurrir en una manera uniforme, de línea recta. La mayoría de los dispositivos de prueba o ensayo inmunocromatográfico, debido a sus formatos fijos e inflexibles, están limitados en su rango de aplicaciones de diagnóstico. La mayoría solo permiten flujos de líquido unidireccionales y requieren que pre-tratamientos de espécimen o muestra, tales como extracción de antígenos, sean realizadas "fuera del tablero" o antes de la adición al dispositivo de ensayo o prueba. La patente estadounidense No. 5,415,944 (asignada a Quidel Corporation) describe un dispositivo de prueba cerrado, el cual es adaptado para permitir pre-tratamiento "en el tablero", o extracción, de un espécimen sobre una torunda. En este caso, la torunda es insertada en una cámara de extracción, la cual es moldeada como parte del alojamiento del dispositivo de prueba. Los reactivos de extracción son adicionados a la torunda y, después de un periodo de tiempo, el flujo uniderieccional sigue pasivamente conforme migran los reactivos de la cámara a los componentes del pabilo del sistema de prueba inmunocromatográfica encerrados dentro del alojamiento. Las solicitudes de patente internacional Nos. PCT/US92/04425 y PCT/US94/13982 (asignadas a SmithKIine Diagnostics, Inc.) mencionadas antes, describen sistemas de prueba que involucran medios de preparación de muestra o componentes de prueba colocados en los paneles opuestos de un dispositivo de prueba de dos paneles abiertos. En este caso, la prueba solo es iniciada o completada al llevar a los dos paneles opuestos juntos sobre el cierre del dispositivo de prueba. Un objetivo de la presente invención es proporcionar un dispositivo de ensayo o prueba que utiliza un formato de ensayo cromatográfico, más particularmente un formato de ensayo inmunocromatográfico, que sea versátil así como simple y económico de fabricar. En particular, es un objetivo proporcionar un dispositivo de ensayo o prueba que utilice un alojamiento cerrado en asociación con un elmento movible o reubicable que permita la manipulación de flujos de líquido para iniciación, modificación y/o terminación del procedimiento de ensayo.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN De acuerdo con un primer aspecto de la presente invención, se proporciona un dispositivo de prueba o ensayo cromatográfico para la detección y/o determinación de un analito en una muestra de prueba, el cual comprende (a) un miembro de base, y (b) un medio cromatográfico ubicado en o sobre dicho miembro de base, siendo proporcionado dicho miembro de base con un receptáculo para recibir un aplicador que tiene dicha muestra aplicada al mismo, siendo movible dicho aplicador lateralmente cuando se ubica en dicho receptáculo entre una primera posición en la cual dicho aplicador ubicado en dicho receptáculo está fuera del contacto del fluido con dicho medio cromatográfico, y una segunda posición en la cual dicho aplicador ubicado en dicho receptáculo está en contacto fluido con dicho medio cromatográfico con el fin de aplicar una muestra en dicho aplicador a dicho medio cromatográfico. En otro aspecto, la presente invención proporciona un dispositivo de prueba o ensayo cromatográfico para la detección y/o determinación de un analito en una muestra de prueba, el cual comprende (a) un miembro de base, y (b) un segundo miembro, al menos uno de dicho miembro de base y dicho segundo miembro incluyendo un medio cromatográfico, y dicho segundo miembro siendo movible lateralmente con respecto al miembro de base desde una primera posición a una segunda posición, en donde en dicha primera posición una muestra a ser ensayada aplicada a uno de dichos miembros de base y segundo está fuera del contacto fluido con dicho medio cromatográfico, y en dicha segunda posición dicha muestra en contacto fluido con dicho medio cromatográfico. Todavía en otro aspecto, la presente invención proporciona un dispositivo de prueba o ensayo cromatográfico para la detección y/o determinación de un analito en una muestra, el cual comprende: (a) un miembro de base, y (b) un segundo miembro, al menos uno de dicho miembro de base y dicho segundo miembro incluyendo un medio cromatográfico, y dicho segundo miembro siendo movible lateralmente con respecto al miembro de base desde una primera posición a una segunda posición, en donde en dicha primera posición una parte del ensayo de una muestra que usa dicho miembro cromatográfico es habilitada, y en dicha segunda posición otra parte del ensayo de dicha muestra que usa dicho medio cromatográfico es habilitada. De preferencia, en cada uno de los aspectos anteriores, el dispositivo de la invención es un dispostivio de ensayo inmunocromatográfico, el cual incluye un medio inmunocromatográfico. La presente invención también se extiende a un método para la detección y/o determinación de un analito en una muestra, caracterizado porque un dispositivo de prueba o ensayo cromatográfico como se describió ampliamente antes, es usado en el método. A lo largo de esta especificación y las reivindicaciones que sigue, a menos que el contexto lo requiera de otra manera, la palabra "comprenden", o variaciones tales como "comprende" o "comprendiendo", se entenderá como que implica la inclusión de un entero declarado o grupo de enteros pero no la exclusión de cualquier otro entero o grupo de enteros.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere particularmente a sistemas de prueba inmunocromatográfica, pero no debe ser vista como confinada a estos sistemas. Los sistemas de prueba inmunocromatográficos consisten típicamente de un montaje de alguno o todos los siguientes componentes: - un alojamiento de prueba con puertos para adición de espécimen y/o reactivos, o el cual actúa como una ventana para la lectura de un resultado de prueba. - un miembro receptor de muestra, por ejemplo, una matriz absorbente. Este componente también puede efectuar algún pre-tratamiento de muestra (por ejemplo, extracción) o alguna separación física, tal como separar plasma sanguíneo de glóbulos rojos. - un cojín de conjugado el cual contiene una marca o etiqueta identificable conjugada con un compañero de ligadura específica para el analito de interés. - una fase sólida conductora líquida (por ejemplo, nitrocelulosa, nylon, etc.) para, sobre o en la cual se inmoviliza un segundo compañero de ligadura específica del analito. - un material absorbente líquido para actuar como un espécimen y pileta de reactivo. - otras membranas conductoras, cojines de reactivos o soportes según se requiera para la aplicación particular.

En los diversos dispositivos de la presente invención, el miembro de base y el segundo miembro (donde esté presente) pueden hacerse de cualquier material adecuado incluyendo, por ejemplo, materiales plásticos tales como policarbonato, polietileno, Mylar, vinilo, celofán y poliestireno, así como cartón grueso a prueba de agua o resistente al agua o material similar. De preferencia, los miembros de base y segundo están hechos de cartón grueso laminado que es suficientemente impermeable a la humedad para contener los líquidos involucrados en el desempeño del ensayo realizado por el dispositivo. De manera alternativa, los miembros de base y segundo pueden hacerse de un plástico que sea impermeable a la humedad, tal como plástico de policarboato conocido como Lexan, cloruro de polivinilo, polipropileno, polietileno, poliestireno y similares. De preferencia, el miembro de base del dispositivo de la presente invención comprende paneles superior e inferior los cuales se unen para formar un alojamiento de prueba. En el primer aspecto como se describió ampliamente antes, el receptáculo para recibir un aplicador tal como una torunda, "dipstick" u otro dispositivo de recolección de muestra o espécimen se proporciona convenientemente en un panel inferior del miembro de base con el medio cromatográfico estando unido a ya sea el lado superior del panel inferior o el lado inferior del panel superior del miembro de base. Donde el dispositivo de esta invención comprende un miembro de base y un segundo miembro, el cual es movible con respecto al miembro de base, el miembro de base comprende preferiblemente paneles superior e inferior, los cuales generalmente son de forma cuadrada o rectangular y las cuales están unidas a lo largo de los bordes longitudinales opuestos, con el fin de formar un alojamiento de prueba. De preferencia, el segundo miembro comprende entonces un miembro plano generalmente cuadrado o rectangular, el cual es recibido dentro, y es movible de manera deslizable dentro, el alojamiento de prueba entre los paneles supepor e inferior. El medio cromatográfico en el dispositivo es típicamente una tira substancialmente plana, aunque no es requerido en todas las aplicaciones. Normalmente, el medio cromatográfico comprende una fase sólida el cual generalmente es de forma rectangular teniendo un primer y segundo extremo. A io largo de esta descripción, el término "primero extremo" se refiere al extremo en el cual el líquido es aplicado primero al medio cromatográfico y el término "segundo extremo" se aplica al extremo opuesto del medio cromatográfico. El líquido aplicado a o cerca del primer extremo de la fase sólida del medio cromatográfico puede ser, pero no necesariamente, una muestra o una muestra tratada. La fase sólida del medio cromatográfico está compuesto de un material absorbente o poroso adecuado como un medio para cromatografía de capa fina de analito y conjugados analito-anticuerpo, tales como nitrocelulosa, nylon, rayón, celuosa, papel, sílice o materiales sintéticos no tejidos o porosos. Este medio cromatográfico puede ser pretratado o modificado según sea necesario. Normalmente, este medio cromatográfico es translúcido, de manera que las zonas coloreadas que aparecen en el puede ser vista desde cualquier lado. En un número de dispositivos de acuerdo a la presente invención, los absorbedores están en contacto operable con uno o ambos extremos del medio cromatográfico. Tales absorbedores pueden hacerse de cualquier material adecuado que mantenga un líquido, particularmente un líquido acuoso, de manera suficiente que el líquido pueda ser arrastrado a través del medio cromatográfico y acumulado en el absorbedor. Normalmente, los materiales para tales absorbedores incluyen, pero no están limitados a, papel filtro. Una descripción adicional de elementos comunes para dispositivos de acuerdo a la presente invención para el desempeño de ensayos o pruebas cromatográficas está de manera completa en las solicitudes de patente internacional Nos. PCT/US92/04425 y PCT/US94/13982 mencionadas antes, los contenidos de las cuales se incorporan en la presente por referencia. En un primer aspecto, la presente invención proporciona un dispositivo el cual comprende un miembro de base, el cual es proporcionado con un receptáculo para recibir un aplicador que tiene una muestra de prueba aplicada al mismo. De manera adecuada, tal receptáculo es formado como un pozo alargado en el miembro de base con forma para aceptar una torunda, "dipstick" o dispositivo de recolección similar teniendo una muestra de prueba aplicada al mismo. El pozo alargado es construido de manera adecuada de manera que el aplicado o dispositivo de recolección pueda ser recibido dentro del pozo alargado en una primera posición fuera del contacto líquido con el medio cromatográfico del dispositivo de prueba, y en esta primera posición ia muestra de prueba en el aplicador o dispositivo de recolección puede ser tratado con la extracción apropiada u otros reactivos antes de que el aplicado o dispositivo de recolección siendo movido dentro del pozo alargado a una segunda posición, en la cual está en contacto líquido con el medio cromatográfico, con el fin de aplicar la muestra de prueba al medio cromatográfico. En modalidades particulares, el miembro de base en el dispositivo de la presente invención puede comprender paneles separados superior e inferor, con el medio cromatográfico siendo unido al panel superior y el panel inferior siendo formado con un pozo alargado integral, por ejemplo mediante vacío que forma el panel inferior desde un material plástico adecuado, tal como cloruro de polivinilo. De manera alternativa, el panel inferior puede ser formado de un cartón grueso o plástico adecuado con una abertura perforada que define un pozo alargado adecuado, con una cubierta flexible de membrana impermeable al fluido siendo provista sobre el orificio perforado con el fin de definir el pozo alargado. Un dispositivo preferido de acuerdo con este aspecto de la invención es descrito de manera más completa con referencia a las Figuras 1 y 2 más adelante.

En otros aspectos de la presente invención, como se describió ampliamente antes, el dispositivo comprende un miembro de base y un segundo miembro que es movible con respecto al miembro de base desde una primera a una segunda posición. De preferencia, este movimiento es un movimiento deslizante del segundo miembro con respecto a un alojamiento de prueba, el cual comprende un miembro de base como se discutió ampliamente antes. De preferencia, también el miembro de base proporciona un alojamiento alargado y el segundo miembro es un miembro alargado el cual es movible de manera deslizable entre las posiciones primera y segunda dentro de este alojamiento. Modalidades particulares de estos aspectos de la presente invención son descritos con detalle en las Figuras 3-8 más adelante.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS Varias características de un número de modalidades de la presente invención son ilustradas a manera de ejemplo en los dibujos acompañantes, los cuales son incluidos a manera de ilustración, y no limitación de esta invención. En los dibujos acompañantes: La Figura 1 comprende (a) una vista de plano y (b) una vista transversal de un dispositivo de prueba o ensayo cromatográfico de acuerdo con un primer aspecto de la presente invención. La Figura 2 es una vista esquemática de una modalidad alternativa del miembro de base del dispositivo de la Figura 1 .

La Figura 3 comprende (a) unas vistas de plano y (c) elevaciones laterales de un dispositivo de prueba o ensayo cromatográfico de acuerdo con un segundo aspecto de la presente invención. La Figura 4 comprende una serie de vistas de plano de otrlidad de un dispositivo de acuerdo con el segundo aspecto de la invención. La Figura 5 comprende (a) vistas de plano y (c), (d) elevaciones laterales de un dispositivo de prueba o ensayo cromatográico de acuerdo con un tercer aspecto de la presente invención. La Figura 6 muestra vistas de plano de otra modalidad de un dispositivo de acuerdo con el tercer aspecto de la invención. La Figura 7 muestra una modalidad adicional de un dispositivo de prueba o ensayo cromatográfico de acuerdo con esta invención, el cual es particularmente adecuado para procedimientos de ensayo de antígeno, los cuales usan sangre como el espécimen de prueba. La Figura 8 muestra diagramáticamente todavía otra modalidad de un dispositivo de prueba o ensayo de acuerdo con esta invención.

Haciendo referencia primero a la Figura 1 , se muestra un dispositivo de prueba o ensayo en el cual un aplicador, particularmente un dispositivo de recolección de espécimen, tal como una torunda o dipstick, cuando se inserta completamente, efectúa un puente conductor de líquido entre el aplicador un una tira de prueba cromatográfica, particularmente una tira de prueba inmunocromatográfica, iniciando con ello el desarrollo de la prueba. La Figura 1 a es una vista de plano de un dispositivo de prueba de este tipo, el cual comprende un miembro de base 1 consistiendo de paneles superior e inferior que forman un dispositivo de prueba, alojando y conteniendo una ventana 2 para la lectura del resultado de la prueba. El alojamiento también contiene una abertura 3 en el panel superior del mismo para la inserción de una torunda, dipstick u otro dispositivo de recolección de espécimen. Una tira de prueba inmunocromatográfica 5 está ubicada en el lado inferior del panel superior del miembro de base 1 y está cubierta por una barrera protectora 6 que deja expuesto un primer extremo 8 de la tira de prueba 5. Un pozo alargado o depósito de reactivo 4 es formado en el panel inferior del miembro de base 1 . La Figura 1 b muestra una sección transversal a lo largo de la línea A-A del dispositivo de la Figura 1 a, con una torunda 7 completamente insertada en el pozo o depósito de reactivo 4 del dispositivo. El dispositivo de prueba cerrado mostrado en las Figura 1 a y 1 b comprende un alojamiento de dispositivo de prueba comprendiendo el panel superior, el cual aloja o acomoda la tira de prueba inmunocromatográfica 5 encerrada por completo excepto por su primer extremo u origen 8 por la barrera protectora impermeable a líquido 6. El panel inferior del alojamiento de dispositivo de prueba tiene un pozo alargado adaptado para recibir una torunda, dipstick u otro dispositivo de recolección de espécimen vía la abertura 3 en el alojamiento. El pozo alargado puede recibir reactivos, vía la abertura 3, antes, durante o después de la inserción de la torunda, dipstick u otro dispositivo de recolección de espécimen. Alternativamente, el pozo alargado puede actuar como depósito de reactivo al tener reactivos apropiados pre-empacados dentro del pozo por medio de empaques flexibles y sellos frágiles. En esta alternativa, la inserción de la torunda, dipstick u otro dispositivo de recolección de espécimen en el pozo alargado rompería el o los sellos, exponiendo de esta manera el dispositivo de recolección de espécimen al o los reactivos. En muchos caos, es benéfico exponer una muestra en un dispositivo de recolección de espécimen al o los reactivos apropiados durante algún periodo de tiempo antes de la iniciación del desarrollo de la prueba, por ejemplo, para efectuar la solubilización o extracción de antígenos diagnósticamente significativos. El dispositivo de prueba mostrado en las figuras 1 a y b es diseñado de manera que la inserción parcial del dispositivo de recolección de espécimen 7 en el pozo alargado 4 ubica el dispositivo 7 en una primera posición que permite la adición de reactivo a la muestra de prueba sin la iniciación del desarrollo de la prueba. Después de permitir un tiempo para la extracción/solubilización de antígenos en la muestra, la inserción completa del dispositivo 7 a una segunda posición como se muestra en la Figura 1 b establece entonces contacto líquido entre el dispositivo 7 y el primer extremo u origen 8 de la tira de prueba inmunocromatográfica 5. El desarrollo de la prueba es iniciado de esta manera y continua hasta la supresión de reactivo o espécimen, o hasta que el contacto líquido es interrumpido por retiro parcial (o completo) del dispositivo 7.

La Figura 2 muestra un diseño alternativo del miembro de base del dispositivo de la Figura 1 . En el dispositivo alternativo, el alojamiento comprende paneles superior e inferior 21 y 26, respectivamente. Como se muestra en ia Figura 2(a), el panel superior 21 tiene una "puerta" engoznada 24 para la inserción de una torunda, dipstick u otro dispositivo de recolección de espécimen y para la adición de reactivo(s), junto con una ventana 25 para la lectura de ios resultados de la prueba. La Figura 2(b) muestra el lado inferior del panel superior 21 , el cual tiene fijo al mismo una tira de prueba inmunocromatográfica con todo excepto su primer extremo receptor de muestra u origen 22 protegido por una barrera protectora impermeable a la humedad 23. El panel superior 21 está hecho de preferencia de cartón grueso laminado o plástico, y es diseñado para ser producido en masa mediante cortado con colorante e impresión, con asentamiento de componentes mediante un proceso de montaje completamente automatizado, de lata velocidad. La Figura 2(c) muestra el panel inferior 26, con el pozo alargado integral 27. Este panel inferior es formado de preferencia a vacío a partir de un material plástico adecuado, tal como cloruro de polivinilo. De manera alternativa, puede usarse un cartón grueso laminado o panel plástico, con un orificio perforado definiendo un pozo alargado adecuado, y una membrana flexible impermeable a la humedad cubriendo el orificio perforado para formar el pozo alargado. Como se describió previamente, el pozo alargado también puede ser adaptado para alojar reactivo(s) pre-empacado(s) de manera que la inserción de un dispositivo de recolección de espécimen libera los reactivos para la muestra en el dispositivo de recolección de espécimen. El montaje del dispositivo mostrado en la Figura 2 consistiría para ligar el panel superior al panel Inferior. El panel inferior sería formado de preferencia in situ y ligado al panel superior usando una máquina de forma/relleno/sello completamente automatizada, como se usa para empacado de burbuja muchos productos de consumidor producidos en masa, no costosos. En las modalidades de la invención mostradas en las Figura 3-8, los componentes de un dispositivo de prueba cerrado son movibles con respecto unos a otros, de manera que pueden ser recolocados durante el curso de una prueba (incluyendo para iniciación y en ia terminación) con el fin de manipular o controlar la aplicación de una muestra de prueba y varios flujos líquidos, y de ahí el desarrollo de la prueba. De acuerdo a esto, el dispositivo de la presente invención, al permitir el control de flujo a través del reposicionamiento de componentes dentro de un dispositivo de prueba cerrado, permite que un amplio rango de procedimientos de prueba sea simple y completado eficientemente. La Figura 3 ilustra un dispositivo de prueba o ensayo cerrado que utiliza un periodo de pre-incubación estática de la muestra con conjugado antes del comienzo del flujo de reactivo y captura en un medio cromatográfico. La Figura 3(a) muestra un dispositivo de prueba cerrado comprendiendo un alojamiento o miembro de base que incluye un panel superior 37, el cual incluye un puerto de adición de muestra 31 junto con una ventana 34 para leer los resultados del ensayo o prueba. El alojamiento o miembro de base también comprende un panel inferior 38 como se muestra en la Figura 3(b)(¡¡). Un segundo miembro en la forma de elemento movible 36 es formado como un panel deslizante movible desde una priemra posición a una segunda posición con respecto al miembro de base. La Figura 3(b)(i) muestra el lado inferior del panel superior 37 y muestra el cojín de conjugado 32 fijo al lado inferior del panel superior 37 por abajo del puerto de adición de muestra 31 , junto con un cojín absorbente 35. La tira de prueba inmunocromatográfica 33 se fija al segundo miembro 36, el cual es movible desde una primera posición (líneas sólidas) a la segunda posición (líneas interrumpidas). La Figura 3(c)(i) es una elevación lateral del dispositivo de la Figura 3a con los componentes en la primera posición. La muestra es adicionada al cojín de conjugado 32 a través del puerto 31 y reconstituye el conjugado. Ningún flujo es posible de manera que puede tener lugar un paso de pre-incubación entre el conjugado y el analito en la muestra. La Figura 3(c)(ii) muestra el componente del dispositivo en la segunda posición, en la cual el segundo miembro movible 36 ha sido movido, de manera que el origen de la tira de prueba inmunocromatográfica 33 está en contacto líquido con la mezcla muestra/conjugado en el cojín de conjugado 32. El flujo de reactivo y el desarrollo de la prueba puede tener lugar ahora, vía la tira de prueba inmunocromatográfica 33 (la cual incorporará una banda de captura) al absorbente 35.

Como se describió antes, los diseños preferidos en este aspecto de la presente invención usan un miembro de base o alojamiento de tres paneles, en el cual el panel superior e inferior están unidos en tal manera para controlar y guiar un panel intermedio movible o segundo miembro. Los componentes de prueba pueden ser fijados a cualquiera de los paneles en cualquier manera requerida para cumplir los requerimientos para completar la prueba particular. La Figura 4 ¡lustra una modalidad alternativa del dispositivo de prueba mostrado en la Figura 3 basado en los requerimientos de prueba y colocaciones de componente previamente descritos en la Figura 3, habilitando un periodo de pre-incubación de una muestra con un conjugado antes del comienzo de flujo/captura. La Figura 4(a) muestra el dispositivo de prueba 41 en la posición primera o cerrada. El miembro de base del dispositivo comprende un panel superior 413 que tiene una ventana 42 a través de la cual las línea sde resultado 45 en la fase sólida 47 pueden ser observadas. El puerto de espécimen 44 está cerrado en la primera posición, y una ventana de instrucción 43 puede estar en blanco o tener una instrucción impresa sobre el procedimiento para la segunda posición de la prueba. Presión aplicada en el punto 46 provoca el desplazamiento del panel movible 410 que forma el segundo miembro a la segunda posición como se muestran en la Figura 4(b). En esta posición, el puerto de espécimen 44 está abierto y la ventana de instrucción 43 puede tener una instrucción sobre la adición de la muestra de prueba del puerto 44. La ventana de resultado 42 es cerrada mediante el panel deslizante 410 al tiempo que el dispositivo está en la segunda posición. La Figura 4(c) muestra el lado inferior del panel superior 413, el cual junto con el panel inferior 412 forma el miembro de base del dispositivo. La Figura 4(d) muestra el lado superior del panel inferior 412 con una tira de prueba inmunocromatográfica 49 fijada ai mismo. La tira de prueba 49 consiste de la fase sólida 47 así como un tope 48, el cual junto con un tope similar 415 mostrado en la Figura 4(e), actúa para prescribir el rango de desplazamiento del panel movible 410. La Figura 4(e) muestra el lado inferior del panel intermedio movible 410. Una tira de soporte plástico claro 416 pre-laminado con un tope 415, cojín de conjugado 417 y absorbente 419 se fija al panel. El panel tiene una ventana 418 (como se muestra en el contorno punteado), la cual coincide con la abertura de ventana 42 del panel superior cuando la prueba está en la primera posición. El cojín de conjugado 417 es accesado mediante un orificio o perforación (punteado) en el panel 410 y un orificio o perforación correspondiente en la tira de soporte 416. El lado superior del panel movible puede ser impreso con instrucciones colocadas para aparecer en la ventana de instrucción 43 en las posiciones primera y segunda. Los paneles superior e inferior 413 y 412 pueden estar unidos por cinta en los bordes longitudinales de los mismos, de manera que el panel intermedio 410 permanece libre para deslizarse dentro del miembro de base del dispositivo. Este formato es diseñado para ser adecuado para procedimientos de montaje completamente automatizados, de alta velocidad, no costosos, por ejemplo, los paneles pueden ser cortados por dado, impresos y los componentes relevantes fijados en una operación continua. En esta etapa, los paneles pueden ser apilados y almacenados en un almacén hasta que sean requeridos para terminar el montaje. Los tres paneles pueden ser alimentados entonces desde los almacenes a un depósito sobre una banda transportadora, los bordes encintados, y el dispositivo ensamblado empacado en una bolsa sellada herméticamente en una operación adicional. El procedimiento de prueba para un dispositivo como se muestra en la Figura 4, es primeramente mover el panel intermedio movible 410 a ia segunda posición y adicionar la muestra al puerto de reactivo 44. En esta posición, el cojín de conjugado 417, accesado a través del puerto de espécimen 44 y los orificios o perforaciones correspondientes en el panel 410 y tira de soporte 416, es desconectado de la fase sólida 47 de manera que no ocurra el flujo/captura. Después de un periodo para la preincubación de la muestra con el conjugado en el cojín 417, el panel movible 410 es regresado a la primera posición. Este establece contacto entre el cojín de conjugado 417 y la fase sólida 47 de la tira de prueba inmunocromatográfica 49, permitiendo el desarrollo del ensayo o prueba. El resultado puede ser leído a través de la ventana de resultado 42. La Figura 5 ilustra otra modalidad del dispositivo de la presente invención, el cual incluye el uso de flujo hacia adelante de la muetra a lo largo de la fase sólida para la captura del analito en la muestra, seguido por el flujo inverso a lo largo de la fase sólida para marcado. La capacidad para conducir flujos hacia adelante e inversos a lo largo de la fase sólida es una ventaja en varios tipos de ensayo. Por ejemplo: - Especímenes pesadamente pigmentados (por ejemplo, sangre lisada), obscurecen la valoración visual de un color en desarrollo en la línea de detección (captura) de la fase sólida. La capacidad para invertir el flujo con, por ejemplo, una solución de lavado limpia habilita que el resultado sea visto claramente. - En algunas aplicaciones de prueba, el conjugado ligado al analito puede obstruir estéricamente la captura eficiente del complejo en la línea de captura. - Para ensayos serológicos, el anticuerpo específico de interés puede ser capturado sobre el flujo hacia adelante y marcado en el flujo inverso. La interferencia desde el exceso vasto de anticuerpo no específico previene el uso de otras configuraciones de ensayo para ensayos serológicos.

La Figura 5a muestra una modalidad de un dispositivo que utiliza tanto los flujos hacia adelante como inverso y muestra la cara superior del panel superior 59 del miembro de base que forma un alojamiento de prueba. El panel superior incluye un puerto de espécimen 51 , una ventana 52 para confirmar el flujo de reactivo, una ventana 53 para leer los resultados de la prueba o ensayo junto con un puerto de reactivo 54. La Figura 5(b)(i) muestra la cara inferior del panel superior 59 del alojamiento de prueba, el cual tiene fijado al mismo un cojín de muestra o espécimen 55, un cojín absorbente 56 y un cojín de reactivo 57. La Figura 5(b)(ii) muestra un movimiento de un segundo miembro movible 512 teniendo la fase sólida inmunocromatográfica 58 fija al mismo, desde una primera posición a una segunda posición con respecto al panel inferior 51 1 del miembro de base del alojamiento de prueba. Las Figuras 5(c) y (d) muestran la colocación del miembro movible 512 con respecto al miembro de base o alojamiento de prueba y flujos de reactivo en las posiciones primera y segunda, respectivamente. Con los componentes en la primera posición, se habilita el flujo hacia adelante de reactivos y captura del analito en la muestra. Esta muestra es adicionada vía el puerto de espécimen 51 al cojín de espécimen 55. El flujo de espécimen ocurre a lo largo de la fase sólida 58 en la dirección mostrada mediante flechas en el cojín absorbente 56 (el flujo puede ser observado vía una ventana 52 y puede continuar hasta la supresión de reactivo/esécimen o hasta que los componentes sean movidos a la segunda posición). En la segunda posición, el flujo inverso de los reactivos proporciona el marcado. El líquido es adicionado a través del puerto de reactivo 54 para reconstituir el conjugado en el cojín de conjugado 57. El conjugado fluye a lo largo de la fase sólida 58 en el absorbente 56 y el resultado puede ser observado a través de la ventana 53. Como se notó antes, este formato de ensayo es particularmente adecuado para ensayos serológicos. Por ejemplo, para la detección de anticuerpos para HIV en sangre humana, el procedimiento usando este dispositivo sería como sigue: (i) Con los componentes en la primera posición, se adiciona sangre humana vía el puerto 51 a una membrana de separación de sangre 55. El plasma fluye vía la fase sólida 58 y los anticuerpos contra HIV se ligan a una banda de antígeno específico de HIV inmovilizado en la fase sólida en Y. (ii) Después de un tiempo de flujo especificado o distancia, los componentes son movidos a la segunda posición. El líquido (por ejemplo, amortiguador) adicionado a través del puerto 57 provoca que el conjugado (IgG anti-humana) conjugada a una marca visible fluya hacia abajo de la fase sólida 58 y se ligue a cualquier anticuerpo humano capturado en Y. Una acumulación en color en Y es observada a través de la ventana 53.

La Figura 6 ilustra una variante del formato de la Figura 5 y las colocaciones de componentes y trayectorias de flujo de reactivos son como se describió con respecto a la Figura 5. El dispositivo 64 es emitido con el segundo miembro 65 en su primera posición con respecto al miembro de base o alojamiento de prueba 66. Para coducir una prueba, el miembro 65 es movido a la segunda posición (definida por topes internos), y el espécimen es adicionado al puerto de espécimen 61 de acuerdo con instrucciones proporcionados en la ventana de instrucción (S). E| reactivo es adicionado al puerto de reactivo 62 de acuerdo con instrucciones dadas en la ventana de instrucción (R) con el fin de reconstituir el conjugado contenido en el cojín de conjugado bajo el puerto 62. El miembro 65 es regresado entonces a la primera posición con respecto al alojamiento de prueba 66 y por esta acción los puertos y ventanas de instrucción cierran, el cojín de espécimen es desconectado de la fase sólida, el cojín de conjugado hace contacto con la fase sólida y el marcado de flujo inverso y desarrollo de prueba fluyen como se describió con respecto a la Figura 5. El resultado de la prueba es leído entonces en la ventana 63. El dispositivo mostrado en la Figura 7 es adaptado particularmente para usarse en procedimientos de detección de antígeno, por ejemplo en la detección de antígenos específicos para patógenos bacterianos, virales y de protozoarios en muestras de sangre. El dispositivo de prueba de la Figura 7 comprende paneles superior e inferior, 710 y 71 1 , mostrados en las Figuras 7a y 7b respectivamente, junto con un panel deslizante 712, mostrado en las Figuras 7c y 7d, el cual se desliza dentro de un alojamiento de prueba formado por los paneles superior e inferior, los cuales se unen a lo largo de los bordes longitudinales de los mismos para formar este alojamiento. El panel superior 710 incluye un puerto de reactivo 78 y la ventana 79 para observar los resultados del desarrollo de prueba. La tira de prueba 71 está ubicada en el panel inferior 71 1 y comprende un cojín absorbente 72 y un cojín de conjugado 73 con la fase sólida del medio inmunocromatográfico 74 ubicado entre estos cojines. La tira de prueba 71 está cubierta con una membrana protectora clara 75, la cual proteje el cojín absorbente 72 de humedecerse por plasma de una muestra de sangre aplicada al dispositivo de ensayo cuando ei panel deslizante 712 es regresado a la primera posición para el desarrollo del resultado de ia prueba. La membrana protectora 75 es proporcionada con un orificio o perforación en la misma coincidiendo con el cojín de conjugado 73. Como se muestra en las Figuras 7c y 7d, el panel deslizante 712 es proporcionado con un cojín de reactivo 77 junto con un módulo de separación de 76, mostrado en mayor detalle en las Figuras 7e y 7f. Haciendo referencia a las Figuras 7e y 7f, el módulo de separación de sangre comprende una tira de soporte que tiene un puerto 714 formado en la misma. El puerto 714 está cubierto por una matriz absorbente y una membrana de separación de sangre 715, de preferencia una membrana de separación de múltiples capas, tal como una membrana MPS (disponible de Spectral Diagnostics Inc. , Toronto, Ontario, Canadá). En el uso del dispositivo mostrado en la Figura 7, el panel deslizante 712 es movido a la segunda posición como se muestra en la Figura 7c, y una muestra de sangre es adicinada al dispositivo a través del puerto abierto 78 en el panel superior 710. El plasma es separado de la muestra sanguínea por el módulo de separación 76, y como el módulo de separación 76 está en el contacto con el cojín de conjugado 73 en esta posición, el plasma penetra el cojín de conjugado 73. Después de un tiempo adecuado, por ejemplo, 1 minuto, el panel deslizante 712 es movido a la primera posición donde el módulo de separación 76 se mueve sobre el cojín absorbente 72 (pero el cojín absorbente 72 está protegido de humedecerse por plasma del módulo de separación 76 mediante la membrana protectora 75). En esta posición, el cojín de reactivo 77 tiene contacto con el cojín de conjugado 73. Una cantidad apropiada del reactivo de desarrollo es adicionado al cojín de reactivo 77 a través del puerto abierto 78, de manera que el reactivo adicionado desplaza la mezcla conjugado/plasma a lo largo de la fase sólida 74 al cojín absrobente 72. Después de un tiempo apropiado, el resultado de la prueba es observado a través de la ventana 79. La Figura 8 muestra diagramáticamente una modalidad adicional del dispositivo de ensayo o prueba de la presente invención, el cual opera sobre principios similares al dispositivo mostrado en la Figura 5, sin embargo, mientras que el dispositivo de la Figura 5 opera usando tanto flujo hacia adelante como inverso en la secuencia, con flujo de captura hacia adelante seguido por marcado en flujo inverso, el dispositivo de la Figura 8 es diseñado para habilitar estos ensayos secuenciales a ser conducidos usando solo flujo hacia adelante, esto es con la muestra y el conjugado siendo aplicados en secuencia al mismo extremo u origen del medio cromatográfico. El dispositivo mostrado en la Figura 8 comprende un miembro de base del alojamiento de prueba formado de un panel superior 86 y un panel inferior 87. El panel superior 86 es proporcionado con puertos y ventanas apropiadas para la adición de reactivos y muestras y para observar los resultados de las pruebas. En el lado inferior del panel superior 85 están ubicados un cojín de aplicación de muestra 84, el cual puede comprender un módulo de separación de sangre como es descrito con referencia a la Figura 7 anterior, y un cojín de conjugado 85. El segundo miembro del dispositivo de la Figura 8, el cual es movible con respecto al alojamiento de prueba comprendiendo paneles 86 y 87 entre las posiciones primera y segunda como son mostradas, comprende un medio cromatográfico 81 en contacto líquido en un extremo con un cojín absorbente 82, el cual está cubierto con una membrana de barrena impermeable al líquido 83. En uso del dispositivo mostrado en la Figura 8, el dispositivo es dispuesto inicialmente en la primera posición como es mostrado donde el cojín de aplicación de la muestra 84 está en contacto con el primer extremo u origen del medio cromatográfico 81 . La muestra es aplicada al cojjín de aplicación 84 y fluye al medio cromatográfico en el cojín absorbente 82. Después de un periodo apropiado de tiempo, el segundo miembro es movido a la segunda posición como se meustra donde el cojín de conjugado 85 es llevado a contacto con el primer extremo de origen del medio cromatográfico 81 . El cojín de aplicación de muestra 84 es colocado sobre el cojín absorbente 82 y ya que el cojín abosrbente está cubierto con la membrana de barrera 83, el cojín de muestra 84 está fuera de contacto líquido con el medio cromatográfico en esta posición. La adición de reactivo de cojín de conjugado 85 aplica conjugado al primer extremo u origen del medio cromatográfico 81 y permiyte el flujo de cojuntado a lo largo del medio cromatográfico para el desarrollo del ensayo.

Se apreciará por una persona experta en esta técnica que mientras que se ha descrito antes un número de modalidades particulares de la presente invención con detalle, y son mostradas en las figuras acompañantes, pueden hacerse muchas variaciones y alteraciones a estas modalidades sin apartarse del espíritu y alcance de la presente invención como se describió ampliamente antes. De acuerdo a ésto, la presente invención se extiende a todas las modalidades de la invención, las cuales caen dentro del amplio alcance y espíritu de la invención como se describe en la presente.

Claims (6)

REIVINDICACIONES

1. Un dispositivo de prueba o ensayo cromatográfico para la detección y/o determinación de un analito en una muestra de prueba , el cual comprende (a) un miembro de base, y (b) un medio cromatográfico ubicado en o sobre un miembro de base, siendo proporcionado dicho miembro de base con un receptáculo para recibir un aplicador que tiene dicha muestra aplicada al mismo, dicho aplicador siendo movible lateralmente cuando se ubica en dicho receptáculo entre una primera posición en la cual dicho aplicador ubicado en dicho receptáculo está fuera de contacto fluido con dicho medio cromatográfico, y una segunda posición en la cual dicho aplicador ubicado en dicho receptáculo está en contacto fluido con dicho medio cromatográfico, con el fin de aplicar una muestra en dicho aplicador a dicho medio cromatográfico.

2. Un dispostivo de prueba o ensayo cromatográfico para detección y/o determinación de un analito en una muestra de prueba, el cual comprende (a) un miembro de base, y (b) un segundo miembro, incluyendo al menos uno de dicho miembro de base y dicho segundo miembro un medio cromatográfico, y siendo dicho segundo miembro movilbe lateralmente con respecto al miembro de base desde una primera posición a una segunda posición, en donde en dicha primera posición una muestra a ser ensayada aplicada a uno de dichos miembros de base o segundo está fuera de contacto fluido con dicho medio cromatográfico, y en dicha segunda posición, dicha muestra está en contacto fluido con dicho medio cromatográfico.

3. Un dispositivo de prueba o ensayo cromatográfico para detección y/o determinación de un analito en una muestra, el cual comprende: (a) un miembro de base, y (b) un segundo miembro, incluyendo al menos uno de dicho miembro de base y dicho segundo miembro un medio cromatográfico y siendo dicho segundo miembro movible lateralmente con respecto al miembro de base desde una primera posición a una segunda posición, en donde en dicha primera posición una parte del ensayo de una muestra usando dicho medio cromatográfico es habilitada, y en dicha segunda posición otra parte del ensayo de dicha muestra usando dicho medio cromatográfico es habilitada.

4. Un dispositivo de prueba o ensayo de acuerdo a la reivindicación 1 , reivindicación 2 o reivindicación 3, el cual comprende un medio inmunocromatográfico.

5. Un dispositivo de prueba o ensayo de acuerdo con la reivindicación 1 , reivindicación 2 o reivindicación 3, en donde el miembro de base y/o el segundo miembro, cuando está presente, comprende un matepal seleccionado de materiales plásticos, cartón grueso a prueba de agua o resistente al agua o material similar. rectangular y los cuales están unidos a lo largo de los bordes longitudinales opuestos para formar un alojamiento de prueba. 13. Un dispositivo de ensayo o prueba de acuerdo a la reivindicación 12, en donde dicho segundo miembro comprende un miembro plano generalmente cuadrado o rectangular el cual es recibido dentro, y es movible de manera deslizable dentro de, dicho alojamiento de prueba entre las posiciones primera y segunda de dicho segundo miembro. 14. Un dispositivo de ensayo o prueba para la reivindicación 13, en donde una tira de prueba inmunocromatográfico está ubicada en dicho segundo miembro, y en dicha primera posición dicha tira de prueba está fuera de contacto fluido con un cojín de conjugado o muestra ubicado en el lado inferior del panel superior del alojamiento de prueba, mientras que en la segunda posición dicha tira de prueba está en contacto fluido con dicho cojín de conjugado o muestra. 15. Un dispositivo de prueba o ensayo de acuerdo con la reivindicación 13, en donde una tira de prueba inmunocromatográfica está ubicada en el lado superior del panel inferior del alojamiento de prueba, y en dicha primera posición dicha tira de prueba está en contacto fluido con un cojín de conjugado o muestra ubicado en dicho segundo miembro, mientras que en dicha segunda posicón dicha tira de prueba está fuera de contacto fluido con dicho cojín de conjugado o muestra. 1

6. Un dispositivo de prueba o ensayo de acuerdo con la reivindicación 13, en donde una tira de prueba inmunocromatográfica está ubicada en dicho segundo miembro, y dicho segundo miembro es movible de dicha primera