MXPA98005417A - Composicion de proteina vegetal que contiene un material de proteina vegetal agotado en isoflavona, con un material que contiene isoflavona - Google Patents
Composicion de proteina vegetal que contiene un material de proteina vegetal agotado en isoflavona, con un material que contiene isoflavonaInfo
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Abstract
La presente invención se refiere a una composición de proteína vegetal;la composición de proteína vegetal contiene un material de proteína vegetal agotado es isoflavona y un material que contiene isoflavona que estádispuesto en el material de proteína vegetal agotado en isoflavona;la composición se puede usar en alimentos para proveer los beneficios naturales del material de proteína vegetal agotado en isoflavona, proveyendo al mismo tiempo los beneficios de salud del material que contiene isoflavona;la invención también incluye procedimientos para formar dichas composiciones de proteína vegetal.
Description
COMPOSICIÓN DE PROTEINA VEGETAL QUE CONTIENE UN MATERIAL DE PROTEINA VEGETAL AGOTADO EN ISOFLAVONA. CON UN MATERIAL QUE djDNTIENE ISOFLAVONA
CAJ»1PO DE LA INVENCIÓN
La presente invención se re-fiere a composiciones de proteína vegetal que contienen iso-flavonas. y particularmente» a composiciones de proteína vegetal que contienen un material de proteína vegetal agotado en isoflavona» con un material que contiene isoflavona diisperso en el mismo» y a procedimientos ! para producir las mismas.
ANTE EDENTES pE ? INVECIÓN
Los materiales vegetales que contienen proteína se tratan comercialmente para producir materiales de protei'na vegetal tales como concentrados de proteína vegetal y aislados de proteína vegetal. Los materiales de proteína vegetal producidos comúnmente. incluyen concentrados de proteína de soya» aislados de proteína de soya» materiales de proteína de chícharo» y materiales de proteína derivados de legumbres. Los materiales de proteína vegetal se usan ampliamente en la industria de los alimentos como ingredientes de enriquecimiento de proteína o como ingredientes -funcionales en una amplia variedad de alimentos. Por ejemplo» los materiales de proteína vegetal se usan en productos alimenticios tales como carnes» bebidas nutricionales» sopas» quesos» productos de panadería y yogurts. Algunas variedades de materiales vegetales que contienen proteína» también contienen isoflavonas f toestrogénicas en su estado natural no procesado. Las isoflavonas son compuestos fenólicos presentes de forma natural en numerosos tipos de plantas» que sirven para ayudar a la fijación de nitrógeno en los sistemas de raíz de ciertas plantas» y para actuar como un protector natural contra los parásitos. En la producción de materiales de proteína vegetal» tales como concentrados de proteína vegetal y aislados de proteína vegetal para su uso en alimentos» el enfoque ha sido obtener un material que esté comprendido principalmente de protema. En la produc 1ción de materiales de proteina vegetal a partir de materiales vegetales que contienen proteína e isoflavonas» una porción substancial de las isoflavonas se separa de la proteína vegetal» dando como resultado un material rico en proteínas ?ue ha sido agotado en contenido de isoflavona. Por ejemplo» se producen concentrados de proteína vegetal lavando un material vegetal con una solución acuosa de alcohol o una soluc ion acuosa acida que tiene un pH de aprox madamente el punto isoeléctrico de la proteína, éase» . gr. , Soy Protein Products» Characteristics» Nutritional
Aspects» and Utilization» 3-6 (Pub. Soy Protein Counc l 19B7). El lavado acuoso acido o de alcohol separa materiales solubles en el lavado.' incluyendo una porción substancial de las isoflavonas y carbohidratos en el material vegetal» de la proteína y otros materiales insolubles» tales como materiales de fibra vegetal» dejando un material concentrado de proteína que contiene de S5?í a 90% de proteína en peso» pero que está reducido significat amente en concentración de isoflavona. í i , Los aislados de proteina se forman extrayendo un material vegetal que contiene proteína» con agua o una solución i alcalina acuosa para sdlubi Tizar la proteína y otros materiales i , solubles en la solución acuosa» tales como carbohidratos e isoflavonas. El extracto que contiene la proteína solubil izada I se separa del material de fibra vegetal insoluble» y después el pH del extracto se ajusta a aproximadamente el punto isoeléctrico de la proteína para precipitar la proteína. Después, la proteína ße separa del extracto y los materiales aún solubles en el extrsacto» incluyendo una porción substancial de las isoflavonas» para formar un material aislado de proteína i que contiene 905Í o me-js de proteína en peso. El aislado de proteína se lava con agua para separar adicionalmente de la proteína materiales solubles en agua, véase» v.gr.» Soy Protein
Products. Characteri'stics» Nutri tional Aspects» and
Ut 1 zation, p. 3-6 <Pub. Soy Protein Council, 1987). El aislado de proteína resultante está reducido sign ficantemente en concentración de isoflavona, en relación con el material vegetal a partir del cual se deriva el aislado de proteína.
La separación de isoflavonas de los materiales de proteína vegetal en la Producción de concentrados de proteina y aislados de proteína vegetal» ha sido un objetivo en el tratamiento de tales materiales» ya que las isoflavonas han estado asociadas con pl sabor amargo de los materiales de proteína vegetal taléis como soya. Por ejemplo» la Patente
Japonesa No. 59-232052A, enseña un proced iento para separar isoflavonas de un mat¡srial de proteína de soya» poniendo en contacto el material de proteína con una resina adsorbente para producir una proteína de soya de mejor sabor. Particularmente» se prefiere la extracción con alcohol de materiales de protema vegetal para separar be la proteína componentes solubles en alcohol» ya que la extracción con alcohol produce un material de proteína vegetal de mejor sabor que la extracción acuosa, en parte porque el alcohol es muy efectivo en la separación de compuestos de isoflav na del material de proteína vegetal. i Véase» por ejemplo» la Patente Japonesa No. 63-245 »648A. Si embargo, recientemente se ha considerado a las isoflavonas como compuestos que son responsables de varios beneficios de salud para los humanos. Se ha sugerido que las isoflavonas pueden ser efectivas para prevenir o retardar ciertos cánceres, aléis como cáncer de próstata y cáncer de mama, según se describe en los siguientes artículos: Genistein
Inhibition of the Tro th of Human Breast Cáncer Cells.
Independence from Estrogen Receptors and the Multi-Drug Resistence Gene. Peterson y Barnes, Biochemical and Biophysical Research. Communications» Vol. 179» No. 1» p. 661-67 (Ago. 30» 1991) » Genistein and Biochanin A Inhibit the Growth of Human Prostate Cáncer Cells but not Epidermal Growth Factor Tyrosine
Autophosphorylation» Peterson y Barnes» The Prostate» Vol . 22» p. 335-45» <1993) » y Soybeans Inhibit Mammary Tumors i Models of Breast Cáncer» Barnes y otros» Mutogens and Carcinogens in the Diet» p. 239-53 ¡(1990). Se ha postulado que la baja incidencia de cáncer de mama en las mujeres japonesas se debe a una dieta que contiene grandes cantidades de isoflavonas. Soybean Phytoestrogen Intake and Cáncer RisK » Hermán y otros » First International Symposium on the Role of Soy n Preventing and Treating Chronic Disease» p. 757S-770S (Feb. 20-23. 1994). También se considera que las isoflavonas reducen o previenen los síntomas de la menopausia. Dietary Phyto-oestrogens and the Menopause in Japan» Ad?ercreutz y otros. The Lancet» Vol. 339» p. 1233 (May 16» 1992). Además» se ha identificado a las isoflavonas como agentes vasodilatadores en humanos y en primates no humanos» con correspondientes efectos cardioprotectores. Enhapcement of Coronary Vasodilation by Soy I Phytoestrogens and Genistein. Honoré y otros. Circulation.
92:i:349 (1995). Los esfuerzos recientes para obtener los beneficios médicos de las isoflavonas se han enfocado en separar y recuperar las isoflavonas de los materiales vegetales. Las siguientes patentes describen varios métodos de separación de isoflavonas de materiales vegetales tales como
Puerar a lobata. legumbres, y soya: Patentes de los Estados Unidos NOS. 4,428,876? 5,702,752; 5,679,806; 4,390,559;
4,366,248; 4,366,082; 4,264,509; 4,232,122; 4,157,984", Patentes
Japonesas NOS. 1-258669A; 5-170756A; 41-90720A; 62-126186A; 62- 126185A; y Solicitud ce Patente Internacional No. WO 93/23069. i Los materiales de ispflavonas separados pueden utilizarse en composiciones farmacé ,u1ticas o de suplementos dietéticos, como I se describe en las .Patentes de los Estados Unidos Nos. 5,516.528," 5,424,331; ¡5,569,459; 5.654,011, y la Solicitud de Patente PCT No. WO 93/23069. Aunque las composiciones de isoflavona purificadas i ¡ pueden se útiles en composiciones farmacéuticas y suplementos I dietéticos para tratar y prevenir una variedad de condiciones. estudios recientes indican que no pueden proveerse algunos i beneficios de salud disponibles de los materiales de proteína 'i vegetal que contienen ^cantidades substanciales de isoflavonas. mediante las isoflavonas solas o el material de proteína vegetal, cuando el • material de proteína vegetal está substancialmente agotado de isoflavonas. Se ha visto que la ingestión de materiales de proteína de soya que contienen cantidades substanciales de isoflavonas. reduce los factores significati os de enfermedad cardíaca coronaria, colesterol total y colesterol-Tipoproteína de baja densidad (LDL-colesterol) en primates no humanos» mientras que se postula que las isoflavonas de soya son responsables de hasta el 70J4 del efecto hipocolesterolemico» y parece tener el mismo efecto en humanos que tienen niveles elevados de colesterol. véase» Se han hecho' esfuerzos para aumentar al máximo los beneficios de salud de las isoflavonas remanentes en materiales tratados de proteína vegetal . tales como concentrados de proteína vegetal o aislados de proteína vegetal, convirtiendo las isoflavonas remanentes de los mismos, en su forma más biológicamente activa. Por ejemplo» la Patente de los Estados Unidos No. 5.637.562 provee un procedimiento para producir un concentrado de proteína vegetal enriquecido con isoflavona de aglucona» en el cual, glucósidos de isoflavona son convertidos en isoflavona de aglucona. biológicamente más activa, mediante rompimiento enzimático de una entidad glucósido de los glucósidos de isoflavpna. La Solicitud de Patente PCT No.
PCT/US94/10697, descr be un proced iento para producir un
BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN
La presente invención provee una composición de proteína vegetal que contiene un material de proteína vegetal agotado en isoflavona. y un material que contiene isoflavona disperso en el material de proteína vegetal. La composición de proteína vegetal de la presente invención, puede tener cualquier cantidad seleccionada de isoflavonas dispersas en la misma, y de preferencia tiene una cantidad de isoflavonas dispersas en la misma para hacer a la composición de proteína vegetal» efectiva para tratar o prevenir condiciones de salud adversas objetivo. En otro aspecto, la presente invención es un procedimiento para producir una composición de proteína vegetal, en la cual sé provee un material de proteína vegetal agotado en isoflavona y un material que contiene isoflavona» y el material que contiene isoflavona está disperso en el material de proteína vegetal agotado en isoflavona. En otro aspecto» la presente invención es un procedimiento para producir una composición de proteína vegetal en la cual se provee una proteína que contiene material vegetal e isoflavonas» y se extrae con un extractor efectivo para solubilizar isoflavónos» para formar un extracto que contiene isoflavonas. Después se separa un material de proteína vegetal agotado en isoflavona del extracto que contiene isoflavonas» y se produce un material que contiene isoflavona a partir del extracto. El material, que contiene isoflavona se dispersa después en el material de proteína vegetal agotado en isoflavona. En una modalidad muy preferida» el material de proteína vegetal agotado en isoflavona es un material de proteína vegetal extraído con alcohol para proveer un material de proteína vegetal de buen sabor.
DESCRIPCIÓN E LAS MODALIDADES PREFERIDAS
La composición de proteína vegetal de !a presente invención» incluye un ¡material de proteína vegetal agotado en isoflavona y un material que contiene isoflavona» que está I disperso en el material de protema vegetal agotado en isoflavona.
Materiales de Proteína Vegetal Agotados en Isoflavona Los materiales de proteína vegetal agotados en isoflavona utilizados en la composición» son materiales de proteína vegetal que pueden usarse como un ingrediente de enriquecimiento de proteína en un material alimenticio» o como un ingrediente funcional en un material alimenticio. Los materiales de proteína vegetal que se usan como un ingrediente de enriquecimiento de proteína en un material alimenticio» incluyen materiales de proteína vegetal que se usan para proveer protema de su 'Iplemento en un material alimenticio» asi como materiales de proteína vegetal que se usan para proveer el contenido total de proteína en un material alimenticio. Los materiales de proteíns, vegetal que se usan como ingredientes funcionales en un material alimenticio» incluyen materiales de proteína vegetal que se usan para proveer propiedades emulsi vas a un material alimenticio» materiales de proteína vegetal que I se usan para aglutina -r grasa» ace tes o agua en un material alimenticio» y materiales de proteína vegetal que se usan para proveer propiedades de gel ficación a un material alimenticio. ! Los materiales de proteína vegetal agotados en isoflavona utilizados en la composición de la invención» se derivan de materiales de vegetales que contienen proteína e isoflavona. Como se usa aquí» el término "agotado en isoflavonas" se refiere a la concentración de isoflavonas en un material de proteína vegetal» en relación a la concentración de isoflavonas en un material vegetal a partir del cual se deriva el material de proteína vegetal. De preferencia» el material de proteína vegetal agotado en isoflavona es un material de proteína de soya» un material de proteína lupina» un material de proteína de legumbre o un material de proteína de chicharro. De preferencia» el material de proteína vegetal agotado en isoflavona es un material de proteína de soya. De preferencia» el material de proteína vegetal agotado en isoflavona es un concentrado de proteína vegetal o un aislado de proteína vegetal. Como se usa aquí» el término "concentrado de proteina vegetal" tiene el mismo significado asociado convencíonaIpente con el término concentrado de proteína vegetal, excepto que el concentrado de proteína vegetal se deriva de un material vegetal que contiene tanto isoflavonas como proteina Específicamente, el termino concentrado de protem i a vegetal, como se usa aquí» es un i material derivado de un material vegetal que contiene isoflavonas y proteína lavando o extrayendo el material vegetal con una solución acuosa que tiene un pH a aproximadamente el punto isoeléctrico de la proteína en el material vegetal» o con una solución alcohol i? -a, y separando la solución de lavado o extracto del material -vegetal para proveer el concentrado de proteína vegetal . Un concentrado de proteína vegetal , como se utiliza en la invención, tiene un contenido de proteína en peso seco de apro i adamente 65?í en peso a aproximadamente 90% en peso. Como se usa aquí, el término "aislado de proteína vegetal" tiene el mismo significado asociado convencionalmente con el término aislaco de proteína vegetal, excepto que el aislado de proteína vegetal se deriva de un material vegetal que contiene tanto isoflavonas como proteina. Específicamente, el término aislado de proteína vegetal, como se usa aquí, es un material derivado de un material vegetal que contiene isoflavonas y proteína por medio de 1) extracción del material vegetal con agua o una solución acuosa alcalina que tiene un pH de aproximadamente 7 a aproximadamente 11» para solubilizar la proteína y las isoflavonas en el extracto; 2) separar el extractor de los materiales vegetales insolubles; 3) precipitar la proteína del extracto separado ajustando el pH del extracto a aproximadamente el punto isoeléctrico de la proteína» 4) separar la proteín.--- precipitada del extracto; y 5) opcionalmente, pero de preferencia, lavar la proteína separada con agua y/o alcohol. Un aislado de proteína vegetal» como se utiliza en la invención, tiene un contenido de proteína en peso seco de por lo menos Sfy'?. En una modalidad particularmente preferida» el concentrado de proteína vegetal o el aislado de proteína vegetal» es un material extraído o lavado con alcohol» ya que la extracción con alcohol provee un material de proteína especialmente adecuado' para usarse en un material alimenticio.
grado alimenticio» prefer lemente con una solución acuosa de I etanol que contiene ,de aprox madamente 555í a aproximadamente
90Jí de etanol .
Materiales que Contienen Isoflavona Los materiales que contiene isoflavona usados en la composición» pueden ser materiales separados de un material vegetal que contiene iso lavonas. Los materiales vegetales que contienen isoflavonas incluyen» pero no se limitan a» uno más de los siguientes materiales vegetales: soya» garbanzo, trébol morado» trébol subterráneo» cacahuate» astrágalo» frijol de marama. canabalia. haba blanca, ca aba! ia de la costa» algarroba» guar, balú, frijol caballero» almorta» vicia de la India, chicharro d jardín» frijol de Java (djenko)» Psophocarpus tetrágono!obús» jicama» haba cochinera» lenteja» frijol saltador» alfalfa» frijol terciopelo» algarroba de África, inga, vicia de Chipre, árbol del sebo chino, castaña de
Polinesia, raíz de kudzu (Pueraia lobata), árbol de frijol oleaginoso, esqu te» tamarindo» fenogreco» regaliz de la India» chufa» y derivados de estos materiales vegetales, incluyendo escamas de soya desgrasada y harinas de soya. De preferencia, el material que contiene isoflavona se separa de un material de soya o de un material de trébol, ya que estas plantas contienen concentraciones particularmente altas de isoflavonas. En una modalidad» un material que contiene isoflavonas de la composición» es una porción rica en isoflavona de un material vegetal que se separa de otras porciones del material vegetal. En una modalidad preferida» el material vegetal es un material de soya» y la porción rica en isoflavona del material de soya que se separa co o el material que contiene isoflav na» es el hipocotíleo del material de soya. Los hipocotíleos de soya forman una pequeña porción del peso" total de la soya intacta (aproximadamente 25í), pero son ricos en isoflavonas, particularmente daidzeínas. Los hipocotíleos pueden separarse, ya sea de soya intacta desvainando la soya, o separando los hipocotíleos del resto del material de soya, pasarjdo el material de soya sobre un tamiz de tamaño de poro suficiente para separar los hipocotíleos relativamente pequeños del resto del material de soya. El material de hipocotíleo separado se muele de preferencia para producir un polvo» que puede usarse como el material que contiene isoflavona en la composición de la presente invención. II En otra 1oda! idad» un material que contiene isoflavona de la composición de la presente invención, puede ser un extracto de uno o más de los materiales vegetales enlistados anteriormente, en los cuales el material o materiales vegetales se extraen con un extractor en el que son solubles las isoflavonas, y el extracto que contiene las isoflavonas se separa [de materiales vegetales insolubles. Los extractores preferidos para formar el extracto de material que contiene isoflavona incluyen» pero no se limitan a» agua,
condiciones que cambian la composición física o química del extracto. Por ejemplo, un derivado, como se usa aquí, incluye una forma condensada del extracto, un residuo sólido recuperado del extracto, un material de isoflavona purificado recuperado del extracto mediante cromatografía líquida de alto rendimiento
("CLAR"), un material que contiene isoflavonas que se recristaliza del extracto» o un material que contiene isoflavona que se extrae del extracto mediante otro extractor. En una modalidad preferida de la invención, el material que contiene isoflavona es un derivado de un extracto de un material vegetal que contiene isoflavona, en el cual e! material que contiene il isoflavona se forma concentrando el extracto. El material que contiene isoflavona formado mediante concentración del extracto, puede ser un material líquido o sólido, dependiendo de la magnitud de la concentración del extracto. En una modalidad preferida de la invención, el material que contiene isoflavona es un extracto acuoso concentrado de alcohol de un trébol que contiene isoflavona. En otra modalidad preferida de la invención» el material que contiene isoflavona de la invención» son productos solubles condensados de soya, que se usa de acuerdo con su significado convencional en la técnica. En otra modalidad preferida de la invención» el material que contiene isoflavona es un derivado de un extracto de un material vegetal que contiene isoflavona, que comprende un material que contiene isoflavona recristal zado del extracto. De preferencia» el material que contiene isoflavona recristalizado» se deriva de un extracto alcohólico acuoso de uno o más de los materiales vegetales que contienen isoflavona enlistados anteriormenite; en donde el material de isoflavona recristalizado se recupera del extracto» concentrando el extracto» enfriando e Tl extracto concentrado para precipitar el material de isoflavona» y separando del extracto el material precipitado que contiene isoflavona. En otra modalidad preferida de la invención» el material que contiene jisoflavona es un derivado de un extracto de un material vegetal que contiene isoflavona, que comprende un material que contiene isoflavona separado del extracto mediante CLAR o mediante CLAR de fase inversa. El material que 1 contiene isoflavona puede derivarse mediante CLAR o CLAR de fase inversa» eluyendo un extracto de un material que contiene isoflavona a través de una resina adsorbente que une i revers blemente isoflavonas e impurezas en una manera específica de compuesto» con un eluyente en el cual son solubles las isof1avernas» y recolectando las fracciones de eluyente que contienen las isoflavonas. Se puede combinar y concentrar a las fracciones de eluyente que contienen las isoflavonas» para proveer un material purificado que contiene isoflavona. En una modalidad preferida» el material que contiene isoflavona se deriva mediante CLAR de fase inversa» en donde el eluyente se selecciona de etanol o metano! acuosos. acetonitrilo. acetato dp etilo, acetona, o combinaciones de los mismos . Las isofla ólas contenidas en el material que i contiene isoflavona. sbn isoflavonas que están contenidas de manera natural en los materiales vegetales, aunque se puede alterar las concentrac ones relativas de conjugado de isoflavona» glucósidos ide isoflavona e isoflavonas de aglucona» de las concentrac ones naturales de estos materiales» en el material vegetal a partir del cual se separan las isoflavonas» ya sea mediante el procedimiento de separación o mediante procedimientos destinados específicamente a alterar las concentraciones relativas de estos materiales. En una modalidad preferida» el material que contiene isoflavona contiene por lo menos una de las isoflavonas de aglucona seleccionadas de genisteína» daidzeína. glici teína» biochanina A» o formononetina, o por lo menos uno de los glucósidos de isoflavona. genistina. daidzina o glicitina, o por lo menos uno de los conjugados de isoflavona 6' "-OMal-gem'stina, 6"-0Ac-genistina» 6r "-OMal-daidzina. 6" t-0Ac-daidzina» o 6t'-0Mal-glicitina» o mezclas de las mismas» en donde "Mal" designa "malonilo" y "Ac" designa "acetilo". Las estructuras para las isoflavonas de aglucona. glucósidos de isoflavona y conjugados de isoflavona» se muestran en las fórmulas 1 y 2 siguientes.
FORMULA 1 Isoflavona de aglucona
isoflavona de la composición» o puede mezclarse en un vehículo convencional inerte ?irado alimenticio» tal como celulosa» almidón, harina u otros vehículos usados comunmente. La genisteína puede prepararse de acuerdo con métodos conocidos de síntesis» tales como los métodos provistos por
Baker y otros (J. Chem. Soc., p. 3115 (192B)); Narasimbachari y otros (J. Sci. Ind. Fes., Vol. 12, p. 287 (1953)); Yoder y otros (Proc» Iowa Acad. Sci., Vol. 61, p. 271 (1954); y Ze plen y otros (Acta. Chim. Acad. Sci. Hung., Vol. 19, p. 277 (1959)), i cada referencia de las cuales se incorpora en la presente. La genistina puede prepararse sintéticamente mediante el método de i Zemplen y otros (Ber.» Vol 76B» p. 1110 (1943)), incorporado en la presente como referencia. Los conjugados de isoflavona de genisteína, 6r "-OMal-genisteína y 6' r-OAc-genisteína» pueden i prepararse mediante una saponificación convencional de genistina con un anhídrido de malonilo o de acetilo» respectivamente. La daidzeína 'puede prepararse sintéticamente mediante los métodos provistos por Baker y otros (J. Chem. Soc.» p. 274 (1933))» Wesley y otros. (Ber. Vol. G6, p. 685 (1933)), Mahal y otros. (J. Chem. Soc-,, p. 1769 (1934)), Baker y otros. (J.
Chem. Soc., p. 1852 (1953)), o Farkas (Ber. Vol. 90, p. 2940
(1957), cada una de ellas se incorpora en la presente como referencia. La daiazina puede prepararse sintéticamente mediante el método de Farkas y otros (Ber.» Vol. 92» p. 819
(1959))» incorporado -en la presente como referencia. Los
proteína vegetal. De preferencia, la composición de proteína vegetal contiene la cantidad mínima de material que contiene isoflavona, necesaria, para proveer tales beneficios. De preferencia» la composición de proteína vegetal contiene la cantidad mínima necesaria de material que contiene isoflavona para proveer dichos beneficios. De preferencia, la composición de proteína vegetal conitiene entre aproximadamente 2.5 mg y 100 mg de isoflavonas totales por gramo de material de proteína vegetal agotado en isoflavona, o entre aproxi adamente 1.5 mg y
85 mg de isoflavonas de aglucona por gramo de material de proteína vegetal agotado en isoflavona. En otro aspecto, la invención es un procedimiento
Se provee un I material de protei a vegetal agotado en isoflavona: proveyendo un material vegetal que contiene proteína e isoflavonas, y separando un material de proteína del material vegetal, a manera de reducir la cantidad de isoflavonas en el material de proteína en relación con la concentración inicial de isoflavonas en el material vegetal. Los materiales vegetales que contienen proteínas e isoflavonas, incluyen soyas, derivados de soya» tales como escamas de soya con grasa completa y cesgrasadas» harinas de soya y sémola de soya» semillas oleaginosas tales como colza, lupina» legumbres» y algunas variedades de chícharos y frijoles» incluyendo cacahuate» garbanzo» almorta, chícharo de jardín, chícharo de tierra, frijol de mar ma, canabalia, haba blanca, guar» frijol caballero, frijol de Java (djenko), Psophocarpus tetrágono!obús , jicama, haba cochinera, frijol saltador y frijol de terciopelo. , Los materiales vegetales que contienen protema e isoflavonas pueden estar en una forma procesada» tal como una harina» sémola o escamas. El material de proteína puede separarse del material vegetal de cualquier manera que provea un material que contenga una concentración maypr de proteína en peso» que el material vegetal» y que reduzca la cantidad de isoflavonas en el material de proteínas separado» en relación con el material vegetal. Particularmente» se prefiere usar procedimientos convencionales para formar concentrados de proteína vegetal y aislados de proteína ' vegetal , para proveer el material de proteína vegetal agotado en isoflavona. Puede proveerse un concentrado de proteína vegetal agotado en isoflavona, lavando un material vegetal que contiene proteína e isoflavona con una solución acuosa que tiene un pH de aproximadamente el punto isoeléctrico de la proteína, o con una solución de alcohoil. De preferencia, el material vegetal inicial es un material vegetal procesado que se ha hecho escamas o harina, y haber sido procesado para remover grasa del material vegetal. El lavado remueve carbohidratos solubles, isoflavonas, ceniza y otros materiales del material vegetal. Si se usa un lavado acuoso, puede prepararse el lavado ajustando el pH del agua a apro?imadamente el punto isoeléctrico de la proteína con un reactivo ácido o básico adecuado. Típicamente, el punto esoeléctrico de la proteína ocurre a un pH ligeramente ácido» y de preferencia se ajusta una solución acuosa a aproxi adamente el punto isoeléctrico con un acido mineral grado alimenticio» tal como acido clorhídrico. Si se usa un lavado de alcohol» el lavado de alcohol debe ser un reactivo grado alimenticio» y de preferencia es una solución acuosa de etanol. Una solución acuosa de etanol puede contener de aproximadamente 5554 a aproximadamente 9054 de etanol en volumen. Se prefiere un lavado de alcohol para formar el concentrado de proteína vegetal agotado en isoflavona» ya que los concentrados de proteína vegetal formados mediante lavado con alcohol por lo genera! tienen un mejor sabor que los concentrados de proteína vegetal formados mediante lavado acuoso. El material ' vegetal debe ponerse en contacto con I suficiente solución de lavado para formar un concentrado de proteína vegetal que contiene entre 6554 y 9054 de proteína en peso seco. La relación en peso de solución de lavado a material vegetal puede ser de aproximadamente 2:1 a aproxi adamente
: 1» y de preferencia es de apro?imadamente 5:1 a aproximadamente l?:i. De preferencia» el material vegetal se agita en la solución de lavado durante un tiempo para facilitar la remoción de materiales solubles en la solución de lavado del material vegetal. Después» la solución de lavado se decanta del material vegetal para proveer el concentrado de proteína vegetal . Puede proveerse un aislado de proteína vegetal agotado en isoflavona extrayendo un material vegetal que contiene isoflavona y proteína» con agua o un extractor alcalino acuoso para solubilizar la proteína e isoflavonas en el extractor, separando el extracto de los materiales vegetales insolubles tales como fibras vegetales» precipitando la proteína del extracto, ajustando el pH del extracto a aproximadamente el punto isoeléctrico de la proteína, y separando la proteína precipitada del extracto. Nuevamente, se prefiere que el material vegetal inicial sea un material procesado que se ha hecho en forma de escamas o harina, y opcionalmente, ha s do ¡desgrasado. El extractor es una solución acuosa que tiene un pH de aproximadamente 7 a aprox adamente 11. Puede emplearse reactivos alcalinos convenc onales, si se desea, para elevar el I pH del extractor, y los reactivos alcalinos preferidos incluyen hidróxido de sodio, hid ó?ido de potasio e hidróxido de amonio. Se prefiere que el extractor tenga un pH de aproximadamente 9 a aproximadamente 10» ya que la proteína en el material vegetal es más soluble en soluciones acuosas que tienen un pH relativamente alto, ^e evitan los extractores excesivamente alcalinos» por ejemplo que tienen un pH por arriba de 11» ya que las condiciones altamente alcalinas pueden ocasionar la formación de compuestos de üsinoalanina tóxicos de la proteína. La relación en peso de extractor a material vegetal debe ser suficiente para extraer una cantidad substancial de la proteína del material vegetal. De preferencia» la relación en peso de extractor a material vegeta! es de aproximadamente 4:1 a aproximadamente 20:1» de preferencia de aproximadamente 8:1 a aproximadamente 16:1. ; La extracción puede llevarse a cabo mediante métodos de extracción convencionales: en una modalidad» la extracción se lleva a cabo mediante un procedimiento de extracción a contracorriente. En tra modalidad» la extracción es una extracción doble» en ?onde el material vegetal es extraído con un primer volumen de | extractor y después es extraído con un segundo volumen de extractor, y se combina el primero y segundo volúmenes de extractor. I El extractor ' se separa del material vegetal después de la extracción para 'separar la proteína sol ubi Tizada de los materiales vegetales i'nsolubles» tales como fibras vegetales» celulosa» y hemicelulosas insolubles. El extractor puede separarse de manera convencional de los materiales vegetales insolubles, tal como mediante decantación, centrifugación y remoción del sobrenadante de los materiales insolubles, o mediante f ltración. Después de que el extractor se separa de los materiales vegetales insolubles para formar un extracto que contiene proteína solubil izada» !a proteína en el extracto se precipita del extracto ajustando el pH del extracto a aproximadamente el punto isoeléctrico de la proteina. Típicamente» el punto isoeléctrico de la proteína es a un pH ligeramente ácido» por ejemplo, la proteína de soya tiene un punto isoeléctrico a pH 4.5, de manera que el pH del extracto se ajusta añadiendo una cantidad suficiente de un reactivo ácido al extractor para precipitar la proteína. Los reactivos ácidos preferidos son 'ácidos inerales grado alimenticio tales como ácido clorhídrico y ácido fosfórico. Después, la , proteína precipitada se separa del extracto para formar el aislado de proteína vegetal agotado en isoflavona. La separación de la proteína del extracto, separa la proteína de una porción significat va de las isoflavonas, ya que una porción significativa de las isoflavonas es soluble en el extracto en el punto isoeléctrico del material de proteína. La separación puede efectuarse mediante medios convencionales para separar un material sólido de un líquido, tal como centrifugación y decantación del sobrenadante, o filtración. El aislado de proteína separada contiene por lo menos 9054 de proteína en peso. El aislado de proteína agotado en isoflavona separado, puede lavarse; con agua o una solución de alcohol para remover adicionalmente materiales solubles en agua o alcohol remanentes en el aislado de proteína. La relación en peso del 1 lavado al material aislado de proteína, es de preferencia de aproximadamente 2:1 a aproximadamente 15:1, y el material de proteína puede lavarse múltiples veces para asegurar la remoción de impurezas. En una modalidad preferida, el lavado es un lavado acuoso de etanol que tiene un contenido de etanol de 5554 a aproximadamente ¡I 9054, ya que el lavado con alcohol de materiales de proteína vegetal, provee por lo general un isoflavona. Las plantas frondosas, que contienen cantidades substanciales de isoflavonas en sus hojas» tales como los tréboles» pueden no requerir ser molidos o triturados antes de la separación del material que contiene isoflavona» sin embargo» se prefiere que cualquier material vegetal se triture antes de la separación del material que contiene isoflavona. Un material que contiene isoflavona se separa del material vegetal extrayendo el material vegetal con un extractor en el cual las isoflavonas sean por lo menos parcialmente solubles. Los extractores preferidos incluyen» pero no se limitan a: agua; alcoholes de peso molecular bajo incluyendo metanol» e anol » alcohol isopropílico, propanol, I alcohol isobutílico y butano!; acetato de etilo; acetona; acrilonitri lo; clorofqr o y mezclas de los mismos. Los I extractores particularmante preferidos son soluciones de metanol acuoso y etanol acuoso que contienen de aproximadamente 5554 a aproxi adamente 9054 de alcohol en volumen. La extracción puede realizarse mediante procedimientos de extracción convencionales. En una modalidad, el material vegetal y el extractor se agitan juntos durante un período de 30 minutos a 24 horas a temperatura ambiente (22°C) para efectuar la extracción de las isoflavonas hacia el extractor. En otra modalidad» las isoflavonas son extraídas calentando e! material vegeta! y el extractor durante un período de aproximadamente 15 minutos a aproximadamente 5 horas» a una temperatura de aproximadamente 35°C a la temperatura de reflujo del extractor. En una modalidad preferida» el materisil vegetal se pone a reflujo en una solución acuosa de metanol al 6054-8554» durante un período de aproximadamente una hora a aproxi adamente 2 horas» a una temperatura de aproximadamente 60°C a apro?imadamente 70°C para extraer las isoflavonas en la solución acuosa de metanol. En otra modalidad preferida» el material vegetal se pone a reflujo en una solución acuos de de aproximadamente 1 1 etanol al 6054-8554 durante un período hora a apro?imadamente 2 horas» a una temperatura de aproximadamente 70°C a aproximadamente B0°C» para e?traer laß isoflavonas en la solución acuosa en etanol. El extractor que contiene las isoflavonas puede I separarse después del material vegetal para proveer un material que contiene isoflavona que puede dispersarse en el material de proteína vegetal agotado en isoflavona provisto para dar la composición de proteína vegetal de la presente invención. La separación puede efectuarse mediante procedimientos convencionales para separar un material sólido de un material líquido. En una modalidad, el extractor y el material vegetal se centrifugan» y el extracto que contiene isoflavona en el sobrenadante puede decantarse del material vegetal. En otra modalidad» el extractor y el material vegetal se separan filtrando el material vegetal del extractor y recolectando los extractos enriquecidos con isoflavona como el filtrado. El extracto enriquecido con isoflavonas puede so eterse a tratamiento posterior para producir un materia! que contiane isoflavona derivado del extractor. En una modalidad de la invención» el extractor enriquecido en isoflavona puede concentrarse removiendo parte o todo el solvente del extracto para producir un derivado concentrado del extracto. El extracto enriquecido con ispflavona puede concentrarse mediante procedimientos conven?ionales. Por ejemplo» el extracto puede concentrarse calentando para evaporar el solvente del extracto» siendo colocado bajo presión reducida durante un tiempo suficiente para remover parte o todo el solvente del extracto» o» de preferencia» medi 'Iante una combinación de ambos. También puede derivarse un material que contiene isoflavona, recristalizado a partir del extracto enriquecido de í isoflavona. En primer lugar» el extracto puede concentrarse
Un material que contiene isoflavona altamente purificada puede derivarse también a partir del extracto enriquecido con isoflavona mediante cromatografía» de preferencia mediante CLAR. El extracto puede concentrarse» si se desea» o el extracto puede utilizarse sin concentración subsecuente. El extracto» o el extracto concentrado, se filtran inicialmente para remover material insoluble que pudiera obstruir una columna de CLAR. De preferencia, el extracto se filtra pasándolo a través de un filtro Whatman No. 5» y después a través de un fil ro de 0.45µ. Se prepara una columna de CLAR empacando una columna convencional de CLAR disponible comercialmente con un material adsorbente particuladp, capaz de unir reversible ente isoflavonas e impurezas que no son isoflavona en una manera específica de compuesto. El material adsorbente puede ser -cualquier material de ' e paque de CLAR de fase inversa, sin embargo, puede elegirse un material de empaque preferido en base a la capacidad ¡de carga, efectividad de separación y costo. Uno de estos p^aterial s de empaque preferidos son los glóbulos Kromasil C1S, 16µm 100A, disponibles de Eka Nobel, Nobel Industries, Sueciia. El extracto filtrado, o el extracto concentrado pueden pasarse después a través de la columna empacada de CLAR hasta que todos los sitios de unión de la columna estén completamente saturadas con isoflavonas, lo cual es detectado por la aparición de isoflavonas en el eluyente de !a columna.
Después, puede eluirse la columna de CLAR con un eluyente tal como alcohol acuoso, apetonitri lo, acetato de etilo, acetona, agua, o combinaciones de los mismos, para efectuar la separación de las isbflavonas de otros compuestos en el extracto. En una modalidad particularmente preferida, el eluyente es una solución acuosa de etanol. El etanol acuoso puede tener un contenido de alcohol de entre aproximadamente 1054 y 9054 de alcohol en volumen. Cuando se usa una sola concentración de etanol como eluyente, de preferencia el etanol acuoso tiene un contenido de alcohol de aproximadamente 5054 en volumen. Sin e bargo» se prefiere utilizar un gradiente escalonado de eluyentes» en donde la columna se eluye
contiena isoflavona, ' se combinan después para proveer un material que contiene psoflavona purificada. El eluyente en las fraccionas combinadas de los materiales que contienen isoflavona» puede evap ?orarse mediante calor» mediante presión reducida» o mediante una combinación de ambas, para producir un material sólido que contiene isoflavona purificada.
Dispersión del Material gua Contiene Isoflavona en el Mataría! de Proteína Vagetal Agotado en Isoflavona. El material que contiene isoflavona puede dispersarse en el material de prpteína vegetal agotado en isoflavona, de conformidad con étodos convencionales. Si el material que i contiene isoflavona e$ ur\ líquido, el material que contiene I isoflavona puede rociarse sobre el material de proteína vegetal conforme se agita él material de proteína vegetal. De preferencia, se atomiza un material líquido que contiene isoflavona al rociarse sobre el material de proteína vegetal. También» puede vertirse un material líquido que contiene isoflavona en el material de proteína vegetal agotado en isoflavona» y mezclarse con el material de proteína. Si el material que contiene isoflavona es un solido, el material sólido de preferencia se muele para formar un polvo antes de dispersar el material en el material de proteína vegetal agotado en isoflavona. Después, puede mezclarse directamente el polvo 1con el material de proteina vegetal . El material en polvo enriquecido en isoflavona y el material de agotado en isoflavona agitando la mezcla» por ejemplo» con una paleta agitadora. En otra modalidad» puede mezclarse un material sólido que contiene isoflavona con un agente dispersante líquido» de preferencia aceite de soya o lecitina» y aplicarse como recubrimiento sobre el material de proteína vegetal agotado en ísoflavona. El agente dispersante líquido que contiene el material que contiene isoflavona. puede aplicarse a adiando directamente el agente dispersante líquido al material de proteína vegetal y mezclando, por ejemplo con un mezclador de listón» o rociando el agente dispersante líquido sobre el material de protema 1v?egetal. ientras se agita el material de ll proteina vegetal . En otros 3pecto. la presente invención es un procedimiento para prop cir una composición de proteína vegetal que contiene un material de proteína vegetal agotado en isoflavona y un material que contiene isoflavona» en donde el material de proteína vegetal agotado en isoflavona y el material que contiene isoflavona» se derivan del mismo material vegetal. El procedimiento incluye los pasos de proveer un material vegetal que contiene proteína e isoflavonas, extraer el material vegetal cpn un extractor efectivo para solubilizar isoflavonas para formar un extracto que contiene isoflavonas» separar un material díf proteína vegetal agotado en isoflavona del extracto que contiene las isoflavonas» formar un material que contiene isoflavona a partir del extracto» y dispersar el material que contiene ¡ isoflavona en el material de proteína vegetal agotado en isoflavona. Se provee un material vegetal que contiene proteína e isoflavonas» de preferencia seleccionando un material vegetal de los materiales vegetales indicados antes» que contienen isoflavonas y proteína-- En una modalidad preferida» el material vegetal es un material de soya» incluyendo materiales de soya procesados o no procasados. En una modalidad preferida» el material vegetal consiste de escamas de soya» o de ?n material
en el extractor, y la pjrateina es insoluble en el extractor. En otra modalidad» el material vegetal se extrae con un extractor como se describió antes en el procedimiento para formar un aislado de proteína vegetal» en donde las isoflavonas y la proteína están contenidas en el extractor» y se separan de los materiales vegetales que son insolubles en el extractor. , I , Después» se separa un material de protema vegetal agotado en isoflavona del extracto que contiene las isoflavonas. En una modalidad» el material agotado en isoflavona es un concen 'itrado de proteina vegetal» que se separa del extracto» o lavadp» que contiene las isoflavonas como se ¡ describió antes con rlespecto a los concentrados de proteína vegetal. En otra modalidad» el material agotado en isoflavona es un aislado de proteína vegetal que se separa del extracto que contiene isoflavonps» precipitando el material de proteína vegetal del extracto» y separando el material de proteína precipitado del extracto» como se describió antes con respecto a los aislados de proteína vegetal . Después» se forma un material que contiene isoflavona a partir de! extracto. El material que contiene isoflavona es un derivado del extracto» en donde el material que contiene isoflavona puede derivarse del extracto concentrando el extracto» recristal iza ido el material que contiene isoflavona del extracto, o purificado el material que contiene isoflavona del extracto, como se describió antes con respecto a la provisión de un material que contiene isoflavona a partir de un 3B
extracto. En esta modalidad de la invención, el material que contiene isoflavona np debe ser el extracto mismo, ya que la recombinación del extracto con el material de proteína vegetal agotado en isoflavona formado por la extracción» recombinará todos los componentes del material vegetal inicial» y no producirá un material ce proteína vegetal que tenga propiedades de sabor o funcionales .mejoradas. Después» el material que contiene isoflavona puede dispersarse en el material de proteína vegetal agotado en isoflavona. El material que contiene isoflavona puede dispersarse en el material de proteína vegetal como se describió anteriormente.
miligramos de isoflavonas totales por gramo de proteína.
. Formulación 1 Bebida lista para usarsa Se forma uinaa bebida lista para usarse, de los siguientes componentes:
Ingrediente Porcentaje en la composición, en peso
Agua 80 - 85 Composición de proteína vegetal 10 - 15 Sacarosa 5 - 8 Cacao 0.1 - 1 Vitaminas/Minerales . 0.1 - 1 i Sabor 0.1 - 1 Gel de celulosa 0.1 - 0.5
La bebida lista para usarse puede servirse en porciones de 240 ml co?teniendo aproximadamente 20 gramos de la composición de proteí?a vegetal, que incluye aproxi adamente 5 a aproximadamente 100 miligramos de los compuestos de isoflavona.
Formulación 2 Bebida en polvo Se forma una bebida en polvo» de los siguientes I componentes:
Ingrediente Porcentaje en la composición, en peso Composición de prot ína vegetal 85 - 90 Sacarosa 8 - 15 Mal tode?trina 1 - 5 Vitaminas/Minerales 0.5 - 2 Aspartame 0 - 0.5 Sabor O - 0.5
Pueden añadirse al agua 30 gramos de la formulación de bebida en polvo para formar una porción que contiene aproximadamente 25 gramos de la composición de proteína vegetal, que incluye aproxi adamente 62 a aproximadamente 125 miligramos de los compuestos de isoflavona.
Formulación 3 Barra alimenticia Se forma unaj barra alimenticia, de los síguíentes componentes:
Ingredientes Porcentaje en la composición, en peso
Composición de proteíná vegetal 20 - 30 Jarabe de Maíz 35 - 45 Sólidos de jarabe de arroz 7 - 14 Gl icerina 1 - 5 I ! Cacao 2 - 7 Recubrimiento mixto 15 - 25
La barra alimenticia puede servirse en porciones de
70 gramos conteniendo aproximadamente 15 gramos de la composición de proteína vegetal , que tiene aproximadamente 37 a aproximadamente 75 miligramos de los compuestos de isoflavona en la misma.
Formulación 4 Yogur Se forma un yogur de los siguientes componentes:
Ingrsdi entes Porcentaje en la composición» en peso
Agua 65 - 75 Composición de proteína, vegetal 5 - 15 Sacarosa 3 - 8 Almidón de maíz 1 - 5 Dextrina 0.3 - 1 Gel de celulosa 1 - 3 Cultivo (Yogur) 0.01 - 0.1 Fruta 10 - 20 Vi ta i nas/ inerales 0.05 - 0.3
El yogurt puede servirse en una porción de 170 gramos que contiene aproximadamente 8 gramos de la composición de proteína vegetal » que tiene aproximadamente 20 a aproximadamente 40 miligramos de compuestos de isoflavona en la misma. Los si ejemplos no limitantes» ilustran la composición de vegetal de la presente invención» y los procedimiento para producir la composición.
extra das se redispersa en 405 kg de agua calentada a una temperatura de 33 °Q. El pH de la suspensión de escamas extraídas en este punto es 9.0. Se recolecta un segundo extracto acuoso centrifugando y se combinan el primero y el segundo extractos. A los extractos acuosos combinados» se les agrega ácido fosfórico al 8554 para ajustar el pH a 4.5 (el punto isoeléctrico de 'I la protei a de soya) para precipitar la proteína. Después» la proteína precipitada se separa de los extractos acuosos combinados» y se lava con 45 kg de etanol acuoso (8054) para formar el aislado de proteína agotado en isoflavona.
SJgMPLQ ?
En un segundó experimento» se forma un concentrado de proteína de soya agolado en isoflavona. Se colocan 45 kg de escamas de soya desgrasada en un tanque de mezclado con 450 kg de etanol acuoso (80 54) calentado a 35 °C. Las escamas y el etanol acuoso se aginan en el tanque de mezclado durante 30 minutos. El extracto de alcohol acuoso se separa del material de escama de soya mediante centrifugación y decantación del sobrenadante» para proveer el concentrado de proteína de soya agotado en isoflavona.
EJEMPLO 3
Se forma un aislado de protema de soya agotado en isoflavona a partir pe un concentrado de proteína de soya agotado en isoflavona» extraído con alcohol. Se forma un concentrado de proteína de soya agotado en isoflavona extraído con alcohol. como se describe en e! ejemplo 2. El concentrado de proteína de soya extraído con alcohol se suspende en 315 kg de agua calentada a una temperatura de 33 °C en un tanque de extracción. Se agreget suficiente hidróxido de calcio a la suspensión para ajustiar el pH de la suspensión a 9.7. La suspensión se extrae durante un período de 45 minutos, después de lo cual se separa» por medio de centrifugación, ?n extracto acuoso que contiene proteína de soya solubi 1 izada, de los
Se forma un material que contiene isoflavona a partir de un material de escamas de soya desgrasada. Se colocan 45 kg de un material de escamas de soya desgrasada en un tanque de mezclado que contiene 450 kg de etanol acuoso (8054) calentado a 35 °C. La escamas y ¡el etanol acuoso se agitan en el tanque de mezclado durante 30 minutos. El extracto de etanol acuoso, enriquecído en isoflavonas, se separa del material de escamas de soya mediante centrifugación. El extracto de etanol acuoso se concentra calentando el extracto a 45 °C bajo presión reducida, hasta que se separe substancialmente todo el alcohol del extracto. El extra'cto concentrado contiene aproximadamente 50 54 de sólidos en peso, y es un material que contiene isoflavona, E g P 5
Se forma un material que contiene isoflavona recristalizado. Se forman 90 kg de un extracto acuoso de etanol concentrado de acuerdo con el ejemplo 4. Se agregan al extracto concentrado 81 kg de agua fría que tiene una temperatura de 13
•C. La mezc-a ext, - *-* s «.,« a 7.c durante 24 horas, y el material que contiene isoflavona se recupera como un mataría! sólido cristalizado de la solución.
EJEMPLO 6
isoflavona se combinan y se concentran hasta formar un residuo sólido» calentando las fracciones a 50 °C bajo presión reducida. El residuo sólido se recolecta para proveer un material que contiene -fsoflavona purificada,
EJE LO 7
Se forma un material que contiene isoflavona a partir de trébol rojo. Se seca el trébol rojo» y se coloca en un tanque de mezclado c n una solución acuosa de etanol (7554) calentada a 80 °C. Se mezclan las soluciones acuosa de etanol y el trébol durante u período de 10 horas» manteniendo la temperatura de la mezcla a 80 °C. Después de mezclar el trébol y el extracto» se recupera un extracto enriquecido en isoflavona centrifugando la mezcla y decantando el sobrenadante enriquecido en isoflavona. El extracto enriquecido en isoflavona se concentra calentando a 60 °C ba o presión reducida durante un tiempo suficiente para remover el extracto y dejar un residuo enriquecido en isoflavona.
EJEMPLO B
Se forma una composición de proteína vegetal de la presante invención, dispersando cualquiera de los materiales que contienen isoflavona formados en los ejemplos 4-8 en el aislado de proteína de soya formado en el ejemplo 1. El aislado de proteina de soya se coloca en un tanque de mezclado» y el material que contiene ¡ isoflavona se agrega a la proteína de soya. El aislado de proteína de soya y el material que contiene isoflavona se mezclan durante un período de 30 minutos» después de lo cual se recupera la composición de proteína vegetal.
?J?fiP P 9
Se forma una composición de proteína vegetal de la presente invención» dispersando cualquiera de los materiales que contienen isoflavpna formados en los ejemplos 4-8 en el concentrado de proteínia de soya formado en el ejemplo 2. El concentrado de proteína de soya se coloca en un tanque de mezclado» y el material que contiene isoflavona se agrega al ína de urante era lá
de la riales en el islado , y el
material que contiene , isoflavona se agrega a la proteína de soya. El aislado de proteina de soya y e! material que contiene isoflavona se mezc ;llaann ddturante un periodo de 30 minutos, después de lo cual se recupera la composición de proteína vegetal. i I Se entiende aue lo anterior son solamente modalidades pref ridas de la invención, y que pueden hacerse varios cambios I , , y alteraciones sin apartarse del espíritu y los aspectos mas amplios de la misma, como se señala en las reivindicaciones anexas, que se interpretan de acuerdo con los principios de la legislación de patentes, incluyendo la doctrina de equivalentes.
Claims (4)
- NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES 1.- Una composición de proteína vegetal que comprende: un material de proteína vegetal agotado en isoflavona» y un material que contiene isoflavona disperso en dicho material de proteína vegetal agotado en isoflavona. 2.- La composición de proteína vegetal de conformidad con la reivindicación 1» caracterizada porque dicho material de proteína vegetal agotado en isoflavona» es un material de proteína de soya agotado en isoflavona. 3.- La composición de proteína vegetal de conformidad con la reivindicación 2» caracterizada porque dicho material de proteína de soya agotado en isoflavona» es un concentrado de proteína de soya. 4.- La campos-ición de proteína vegetal de conformidad con la reivindicación 3» caracterizada porque dicho concentrado de proteína de soya es un concentrado de proteína de soya extraído con etanol . 5.— La composición de proteína vegeta! de conformidad con la reivindicación 3» caracterizada porque dicho concentrado de proteína de soya es un concentrado de proteína de soya extraído con ácido acuoso. 6.- La composición de proteína vegetal de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada porque dicho material de marama» canabalia» hpba blanca» ca aba! ia de la costa» algarroba» guar» balú» frijol caballero» almorta» vicia de la India» chicharro de' jardín» frijol de Java (djenko), Psophocarpus tatraaonolobus» jicama, haba cochinera. lanteja, frijol saltador, alfalfa, frijol terciopelo, algarroba de África» inga, vicia de Chipre, árbol del sebo chino, castaña de Polinesia, raíz de kqdzú (Pueraia 1obata ) , árbol de frijol oleaginoso, mesquite, ' tamarindo, fenogreco, regaliz de la India, chufa, y derivados de estos materiales vegetales, incluyendo escamas de soya desgrasada y harinas de soya. 9.- La composición de proteína vegetal de conformidad con la reivindicación 7, caracterizada porque dicho material que contiene isoflavona es un extracto de dicho material vegetal . 10, La composición de protema vegetal de conformidad con la reivindicación 9, caracterizada porque dicho extracto de dicho material vegetal es un e?tracto de alcohol, acetato de etilo, acetona, acuoso, acetonítrilo o cloroformo, de dicho material vegetal. 11.- La composición de proteína vegetal de conformidad con la reivindicación 9, caracterizada porque dicho material que contiene .isoflavona es un e?tracto concentrado de dicho material vegetal. 12.- La composición de proteína vegetal de conformidad con la reivindicación 11, caracterizada porque i dicho material vegetal es un material de soya, y dicho extracto concentrado de dicho ¡material vegetal, consista de productos solubles de soya conde?sados. 13.- La composición de proteína vegetal de conformidad con la reivindicación 11, caracterizada porque dicho material vegetal es un material de trébol, y dicho extracto concentrado de dicho material vegetal , es un extracto acuoso alcohólico condensado de trébol. 14.- La cpmposición de proteína vegetal de conformidad con la rei indicación 9» caracterizada porque dicho material que contiene ljisoflavona es un derivado de un extracto de dicho material vegetal. 15.- La qomposición de proteína vegetal de conformidad con la rei indicación 14, caracterizada porque dicho derivado de un e?jjxXtracto de dicho material vegetal, es un material solido concentrado a partir de dicho extracto, genistina, daidzina» [ glicitina» 6"-0Mal-genistina» 6"-0Ac genistina» 6"-0Mal-daidzina» 6"-0Ac-daidzina» 6"-0Mal-glicitina» y mezclas de las mismas. 19.- La composición de proteína vegetal de conformidad con la rei indicación 1» caracterizada porque dicha composición de proteína vegetal contiene de apro?imadamente 2.5 mg a apro?imadamente 100 mg de isoflavonas totales por gramo de proteína. 20.- La composición de proteína vegetal de conformidad con la reivindicación 19, caracterizada porque dicha composición de proteína vegetal contiene de apro?imadamente 1.5 mg a aproximadamente 85 mg de isoflavonas de aglucona por gramo de proteína. 21.- Un procedimíento para formar una composición de proteína vegetal, qi-e comprende: proveer un material de proteína vegetal agotado en isoflavona; proveer un material que contiene isoflavona; y dispersar dicho material que contiene isoflavona en dicho material de proteína vegetal agotado en isoflavona. 22.- El procedimiento señalado en la reivindicación 21» caracterizado porque la provisión de un material de proteína vegeta! agotado en isoflavona comprende proveer un material de proteína de soya agotado en isoflavona. 23.- El procedimiento señalado en la reivindicación 22. caracterizado porque dicho material de proteína de soya agotado en isoflavona es un concentrado de proteína de soya. 28.- El procedimiento señalado en la reivindicación 27, caracterizado porq?e dicho material que contiene isoflavona se separa de por lo menos un material vegetal seleccionado del grupo que consiste de soya, garbanzo, trébol morado, trébol subterráneo, cacahuate, astrágalo, frijol de marama, cañaba! ia» haba blanca» cañaba! -a de la costa, algarroba» guar» balú» frijol caballero, almorta» vicia de la India, chicharro de jardín, frijol de Java (djenko), Psophocarpus tatragonolobus, jicama, haba cochinera» lenteja, fríjol saltador, alfalfa, frijol terciopelo, algarroba de África» inga, vicia de Chipre, árbol del sebo chino» castaña de Polinesia, raíz de kudzú (Puerai a 1obata) , árbol de frijol oleaginoso» mesqui e, tamarindo, fenogreco, regaliz de la India» chufa» y derivados de estos materiales -vegetales» incluyendo escamas de soya i desgrasada y harinas de soya. 29.- El procedimiento se alado en la rei indicación 27» caracterizado porque dicho material que contiene isoflavona se separa de dicho material vegetal extrayendo dicho materíal vegetal con un extractor en el cual son solubles las isoflavonas» y separando dicho extractor de dicho material vegetal para formar un e?tracto que contiene isoflavonas. 30.- El procedimiento señalado en la reivindicación 29» caracterizado porque dicho extractor se selecciona del grupo que consiste de agua» alcoholes de peso molecular bajo, incluyendo metanol, etanol, propanol, alcohol isopropil ico, butanol y alcohol i obutílico; acetato de etilo; acetona; s lido concentrado a partir de dicho e?tracto. 34.- El proc !edimiento señ~alado en la reivindicació rn ¡ 29» caracterizado porque dicho derivado de dicho e?tracto que I contiene isoflavona de dicho material vegetal » es un material purificado de isoflavo?a. 35.- El procedimiento señalado en la reivindicación 21» caracterizado porque la provisión de un material que contiene isoflavona comprende proveer productos solubles de soya condensados. 36.- El procedimiento señalado en la reivindicación i' 21» caracterizado porque la provisión de un material que contiene isoflavona comprende proveer un materia! que contiene por lo menos una o más isoflavonas seleccionadas del grupo de genisteína» daidzeína. gliciteína» formononetína» biochanína A, genistina, daidzina, glicitina, 6"-0Mal-genisti a, 6"-0Ac-genistina» 6"-0Mal-daidzina» 6"-0Ac-daidzi a» 6"-0Mal-glicítina» y mezclas dé las mismas. 37.- El procedimiento señalado en la reívindicación 21» caracterizado porque la dispersión de dicho material que contiene isoflavona» 'en dicho material de proteína vegetal agotado en isoflavona !» comprende mezclar dicho material que ! , contiene isoflavona pn dicho material de protema vegetal agotado en isoflavona. 38.- El procedimiento señalado en la reivindicación 21» caracterizado porque dicho material que contiene isoflavona se dispersa en dicho material de proteína vegetal agotado en I isoflavona, de tal maniera que están presentes aproximadamente | 2.5 mg a apro?imadame'nte 100 mg de isoflavonas totales» por gramo de material de proteína vegetal agotado en isoflavona. 39.- El procedimiento señalado en la reivindicación 31» caracterizado porque dicho material que contiene isoflavona se dispersa en dicho -mataría! de proteína vegetal agotado en isoflavona de tal manera que están presentes apro?imadamente 1.5 mg a apro?i adamente 85 mg de isoflavona de aglucona» por gramo de material de prpteína vegetal agotado en isoflavona. 40.- Un procedimiento para formar una composición de proteína vegetal» que comprende: proveer un material vegetal que contiene proteína e isoflavona; e?traer dicho material vegetal con un e?tractor efectivo para solubilizar las isoflavonas para formar un e?tracto que contiene isoflavonas» separar un material de proteína vegetal agotado en isoflavona a un alcohol de peso molecular bajo» incluyendo metanol. etanol. alcohol isopropílico» propanol» butanol y alcohol isobutílico» acetato de etilo» ac Ietona» acetonitrilo. y mezclas de los mismos. 44.- El procedimiento señalado en la reivindicación 40. caracterizado porque la relación en peso de dicho e?tractor a dicho material vegetal es de apro?imadamente 2:1 a apro?imadamente 16: l. 45.- El procedimiento señalado en la reivindicación 40. caracterizado porque dicho material de proteína vegetal agotado en isoflavona. se separa de dicho extracto que contiene isoflavona. centrifugando dicho material vegetal y dicho e?tractor. y decantando dicho e?tracto de dicho material de protema vegetal. ¡ 46.— El procedimiento señalado en la reivindicación 40» caracterizado porque dicho material de proteína vegetal agotado en isoflavona se separa de dicho extracto que contiene isoflavonas» filtrandp dicho extracto de dicho material de proteína vegetal . 47.- El procedimiento señalado en la reivindicación 40» caracterizado porqi-e dicho e?tractor es un e?tractor acuoso alcalino efectivo para solubilizar dicha proteína y dichas isoflavonas en dicho material vegetal. 48.- El procedimiento señalado en la reivindicación 47» caracterizado además porque comprende los pasos de separar dicho e?tractor alcalino acuoso» de materiales vegetables insolubles antes de separar dicho material de proteína agotado I en isoflavona de dicho e?tracto que contiene isoflavonas. 49.- El procedí" iento señalado en la reivindicación 47. caracterizado porq Jue la separación de dicho material de proteína agotado en isoflavona a partir de dicho e?tracto que contiene isoflavonas. comprende ajustar el pH de dicho extractor alcalino ¡acuoso a aproximadamente el punto isoeléctrico de dichja proteína en dicho extractor, para precipitar dicho material de proteína agotado en isoflavona, y separar dicho materia de proteína agotado en isoflavona precipitado de dicho extractor acuoso a ?n pH aproximadamente el punto isoeléctricoj de dicha proteína» para producir un aislado de proteína vegetal y un extracto que contiene 40, caracterizado porque dicho material que contiene isoflavona se forma a partir eje dicho e?tracto, concentrando dicho I e?tracto. 53.- El procedimiento señalado en la reivindicación 40» caracterizado porque dicho material que contiene isoflavona se forma a partir de dicho e?tracto, recristal izando dicho material que contiene isoflavona en dicho e?tracto, y separando dicho material que contiene isoflavona recristalizado a partir de dicho e?tracto. 54.- El procedimiento señalado en la reivindicación I I 40, caracterizado porque dicho material que contiene isoflavona se forma a partir de aicho e?tracto poniendo en contacto dicho e?tracto con un material adsorbente capaz de aglutinar reversible ente isoflavpnas y compuestos que no son isoflavona de una manera específica de compuesto y» después de poner en contacto dicho e?tracto con dicho material adsorbente, eluir dicho material adsorbente con un eluye te en el cual son solubles las isoflavo?as, y recolectar las fracciones de dicho eluyente que contiene un material de isoflavona purificada. 55.- Una composición alimenticia, que comprende: un material de alimento y una composición de proteína vegetal que contiene un material de proteína vegetal agotado en isoflavona, que tiene un material que contiene isoflavona disperso en el mismo. 56.- La composición alimenticia de conformidad con la reivindicación 55» caracterizada porque dicho material de alimento es una bebida. 57.- La composición alimenticia de conformidad con la I reivinPicación 55» caracterizada porque dicho material de alimento es una carne. 58.- La composición alimenticia de conformidad con la reivindicación 55» caracterizada porque dicho material de alimento es una barra de alimento nutricional. 59.- La composición alimenticia de conformidad con la reivindicación 55» caracterizada porque dicho material da alimento es un queso. 60.- La composición alimenticia de conformidad con la reivindicación 55» caracterizada porque dicho material de alimento es un yogur. 61.- La composición alimenticia de conformidad con la reivindicación 55, caracterizada porque dicho material de proteína vegetal agotado en isoflavona en dicha composición de proteína vegetal, es un aislado de proteína de soya. 62.- La composición alimenticia de conformidad con la reivindicación 55» caracterizada porque dicho material de proteína vegetal agotado en isoflavona en dicha composición de proteína vegetal, es un concentrado de proteína de soya. de proteína vegetal . EA/amm*t.lm*ehp*mrnr*l
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