MXPA98002143A - Agentes antitumorales de tioxantenona liofilizados - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a formulaciones liofilizadas reconstituidas para el tratamiento de tumores de mamíferos que comprenden un agente antitumoral de tioxantenona en combinación con manitol o sacarosa como un estabilizante en un amortiguador de lactato.

Description

AGENTES ANTITU ORALES DB TIOXANTENONA LIQPTT.T ADOS DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Esta invención se relaciona a soluciones párenteles acuosas liofilizadas de agentes antitumorales . Más particularmente, esta invención se relaciona a agentes antitumorales de tioxantenona acuosos liofilizados . Muchas substancias de fármacos convencionales y proteínas destinadas para uso terapéutico o de diagnóstico son inestables en solución acuosa y requieren conversión a productos sólidos. Para productos farmacéuticos, secando por congelación es uno de los métodos de procesamiento usados más comúnmente para lograr la estabilidad necesaria. Por varias razones los agentes biorreactivos son raramente secados por congelación en su forma pura. Otros compuestos químicos son usualmente agregados para propósitos específicos, tales como amortiguamiento de pH, mejoramiento de solubilidad o equilibrio de osmolaridad- Cuando se designa un proceso de secado por congelación, la formulación como un todo gobierna grandemente los parámetros del ciclo. De esta forma, cualquier alteración en la formulación, no ajustará el nivel del agente activo por sí mismo, requirirá de modificación adicional del ciclo de proceso. Así como también los excipientes agregados por las razones anteriores, el secado por congelación usualmente requiere la incorporación de aún aditivos adicionales para auxiliar al mismo proceso de secado por congelación o para proporcionar resistencia mecánica al tapón de secado por congelación durante el almacenamiento y transporte subsecuentes. Tales excipientes son referidos como lioprotectores o estabilizadores. El uso de estabilizadores se ilustra por las siguientes referencias. La Solicitud Internacional No. PCT/US89/04099 (WO 90/03784) describe una composición liofilizada que comprende un polipéptido y un cantidad estabilizante/solubilizante de ciclodextrina seleccionada del grupo que consiste de derivados de hidroxipropilo, hidroxietilo, glucosilo, maltosilo y maltotriasilo de ß- y ?-ciclodextrina. La Patente de los Estados Unidos NO. 4,983,586 describe un método para disminuir la incidencia de precipitación de un fármaco lipofílico y/o lábil al agua que ocurre en el sitio de inyección, cuando el fármaco está siendo administrado parentalmente, que comprende administrar el fármaco en una solución acuosa que contiene aproximadamente 20% a 50% de hidropropil-ß-ciclodextrina. Se reclaman un gran número de fármacos que incluyen: antineoplásticos, sedantes, tranquilizantes, anticonvulsivos, antidepresivos, hipnóticos, relajantes musculares, antiespasmódicos, antiinflamatorios, anticoagulantes, cardiotóncios, vasodilatadores y antiarrítmicos . La Patente de los Estados Unidos No. 5,298,410 describe formulaciones liofilizadas de substancias activas biológicamente en donde el estabilizante es un derivado de ciclodextrina, un amortiguador tal como fosfato de sodio, acetato de sodio y carbonato de sodio. La formulación opcionalmente puede contener sacarosa o trihalosa. El material de partida para secar por congelación es usualmente una solución acuosa no saturada, y el producto final es sólido. El proceso completo consiste de la eliminación de >99% de agua. Durante el enfriamiento, las soluciones acuosas llegan a ser concentradas por congelación, mientras que el agua es eliminada como hielo. El proceso total implica varias transiciones de varias fases, por ejemplo sólido- líquido y gas-sólido, consideración de la cual es importante para asegurar eficiente procesamiento y productos estables. En cuanto la temperatura disminuye la solución llegará primero a sobre enfriarse (es decir, enfriar debajo de la temperatura de congelación de equilibrio) antes de que ocurra la nucleación de hielo espontáneamente. La nucleación de hielo y el crecimiento de cristales son procesos complejos con velocidades que dependen de la velocidad de enfriamiento, solución, concentración y otros factores. Esta etapa del proceso determina grandemente la textura del producto seco final. Durante el congelamiento, el soluto permanece, en una forma incrementadamente concentrada, en la fase líquida residual, el grado de concentración que está gobernada por un diagrama de fase de equilibrio. Eventualmente la solución llegará a saturarse, en el punto que la fase sólida del soluto también se formará. El sistema entonces consistirá de una mezcla de hielo y cristales de soluto. Los excipientes, agregados fundamentalmente para auxiliar el secado por congelación, usualmente servirán a una de dos funciones. Los agentes de volumen son usados simplemente para incrementar el contenido total de sólidos, con el fin de lograr un producto seco mecánicamente más robusto. Tales excipientes deben ser hechos para cristalizarse a partir de la solución durante el proceso de secado por congelación, preferiblemente durante la etapa de congelación, ya que este está solamente como una fase separada que tendrá un efecto neutral sobre la estabilidad del producto. Los estabilizantes, por otra parte, ofrecen protección química durante la concentración por congelación y auxilian en la formación del estado vitreo; también proporcionan resistencia física al tapón seco. La temperatura de transición de vidrio es una función de la composición química del material sólido total. Mientras que la base fisico-química para formulación correcta de productos para secado por congelación ha recibido atención considerable en la técnica anterio (ver, por ejemplo, Fran s, F. Freeze-Drying: a combination of physics, chemistry, engineering and economics, Jap. J. Freeze Drying, 38, 5-16 (1992)), la base físico-química es insuficiente para permitir a una persona con experiencia en la técnica producir productos finales los cuales satisfagan los objetivos deseados. La investigación minuciosa y/o descubrimiento sorprendente es todavía la base real por la cual productos apropiados pueden ser producidos así como también llega a ser claro como la descripción de la presente invención procede. Se ha descubierto en la presente haciendo investigación minuciosa que los compuestos antitumorales de tioxantenona, los cuales cuando se suministran en vehículos farmacéuticos tradicionales tales como tabletas y cápsulas para administración oral, pueden no satisfacer completamente los requerimientos de un producto efectivo, pueden ser hechos en formulaciones farmacéuticas las cuales, después de reconstitución, llegan a ser inyectables. Las formulaciones liofilizadas son encontradas estables sin degradación/alteración durante la vida de almacenamiento prolongada. De acuerdo con la presente invención, se proporcionan formulaciones liofilizadas reconstituidas para el tratamiento de tumores de mamíferos que comprenden: a) de aproximadamente 1 a aproximadamente 50 mg/ml y preferiblemente de aproximadamente 10 a 20 mg/ml de un agente antitumoral de tioxantenona definido en la presente posteriormente ; b) de aproximadamente 10 mg/ml a aproximadamente 125 mg/ml y preferiblemente de aproximadamente 30 mg/ml a 100 mg/ml de un estabilizante seleccionado del grupo que consiste de manitol y sacarosa; y c) de aproximadamente 0.025 a aproximadamente 0.25 M de un amortiguador de lactato y preferiblemente de amortiguador de lactato de sodio, la formulación que tiene un pH de aproximadamente 3.0 a aproximadamente 4.5 Las formulaciones preferidas de la presente invención contienen el agente antitumoral N-[[l-[[2-(dimetilaminoetil] amino] -9-oxotioxantenen-4-il] metil] -metansulfonamida y sacarosa como el agente estabilizante. Las formulaciones liofilizadas reconstituidas de la presente invención son administradas a mamíferos para el tratamiento de tumores. La formulación liofilizada de la presente invención comprende: un agente antitumoral de tioxantenona; y un vehículo acuoso. T.os agentes antitumorales Los agentes antitumorales de la presente invención tienen la fórmula (I) de acuerdo a la Patente de los Estados Unidos No. 5,346,917 la cual se incorpora en la presente para referencia en su totalidad: R1 2 en donde n es 2 ó 3 ; R1 y R2 son independientemente alquilo inferior; Q es un residuo elegido del grupo que consiste de CH2NHR3, CH2N(R)S02RP CH2NHCHO, CH=N-AR, C(0)NR5R6, CH2N(R4)C(0)RP CH2N(C2H5)CHO, CH2N (R4) P (0) (O-alquilo inferior)^ CH2N=CH-N(R9) (R10) , CH2N (R4) C (0) CF3 y CH2N (R4) C (O) OR7; R3 es hidrógeno o alquilo inferior; R4 es hidrógeno, alquilo inferior o Ar; R5 es hidrógeno, alquilo inferior o Ar; R6 es hidrógeno, o alquilo inferior; R7 es alquilo inferior o Ar; R8 es hidrógeno, alquilo inferior, alcoxi inferior, o hidroxi ; Ar es fenilo o fenilo substituido con metilo, metoxi, hidroxi, halógeno o nitro, con la condición de que cuando n es 2, R1 y R2 son etilo, Rß es hidrógeno y Q es CH2NHS02Ar, el grupo Ar no puede ser 4-monosubstituido por metilo o halógeno; y R9 y R10 son independientemente alquilo inferior; 0 una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo. Los compuestos son útiles para el tratamiento de tumores en mamíferos. Los agentes antitumorales están representados en la fórmula (II) : II donde n es 2 ó 3 ; R1 y R2 son independientemente alquilo inferior; Q es un residuo elegido del grupo que consiste de CH2 HR3, CH2NHCHO, CH=N-AR, C(0)NR5Rß, CH2N (R4) C (0) R7 , CH2N(C2H5)CHO, CH2N (R4) P (0) (O-alquilo inferior)2, CH2N=CH-N(R9) (R10) , CH2N(R4)C(0)CF3 y CH2N (R4) C (0) OR7; R3 es hidrógeno o alquilo inferior; R4 es hidrógeno, alquilo inferior o Ar; R5 es hidrógeno, alquilo inferior o Ar; R6 es hidrógeno, o alquilo inferior; R7 es alquilo inferior o Ar; R8 es hidrógeno, alquilo inferior, alcoxi inferior, o hidroxi; Ar es fenilo o fenilo substituido con metilo, metoxilo, hidroxi, halógeno o nitro, y R9 y R10 son independientemente alquilo inferior; 0 una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo. Los compuestos son útiles para el tratamiento de tumores en mamíferos.

Los compuestos representativos se muestran en los siguientes ejemplos: Ejemplo 1 1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -4- (N-fenilformimidoil) tioxanten-9-ona (I: Rx=R2=Et; Q=CH=N-C6H5; R8=H; n=2) se lleva a reflujo una mezcla de 17.7 g (50 mmol) de 1- [ [2- (dietilamino) -etil] amino] -9-oxo- tioxanten-4 -carboxialdehido y 15. 1 g (150 mmol) de anilina en 100 ml de tolueno por 8 horas con una trampa de Dean-Stark. La cromatografía en capa fina sobre alúmina con cloroformo/hexano/-isopropilamina 10:10:2 indica reacción incompleta. Se separa por destilación el tolueno, se agregan 25 ml de anilina y se lleva a reflujo la mezcla por 4 horas. Se agregan cincuenta ml de xileno y se lleva a reflujo la mezcla otra vez por 3 horas. Se eliminan el solvente y exceso de anilina in vacuo y se recristaliza el residuo del benceno para producir 19.9 g de producto sin purificar. Este se recristaliza de aproximadamente 1.5 1 de hexano para producir 15.8 g (86%) de producto, p.f. 125-126°C. F.jemplo 2 N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] formamida (I:R1=R2=Et; Q=CH2NH-CHO; R8=H; n-2) Se calienta una solución de 35.4 g (0.1 moles) de 1- [ [2- (dietilamino) -etil] amino] -9-oxo-tioxanten-4 -carboxialdehído, 420 ml de formamida y 50 ml (1 mol) de ácido fórmico a 160°C por 1 hora. Se enfría la reacción, se vacía en 2 1 de agua se lleva a pH básico con aproximadamente 50 ml de solución de hidróxido de sodio al 35%. Se separa por filtración el precipitado pegajoso y se seca in vacuo. Se disuelve el precipitado seco en aproximadamente 1.5 1 de acetato de etilo caliente, se trata con carbón vegetal, y se cristaliza por enfriamiento. Se separa por filtración el producto, se lava con acetato de etilo y se seca para proporcionar 29.0 g (75%) del producto, p. f. 154-155°C. Ejemplo 3 N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] N-metilformamida (IV: R1=R2=Et; R4=Me; R8=H; n=2) Por un procedimiento análogo a aquel del Ejemplo 2, se prepara 24.6 g de N-metilformamida a partir de 35.4 g (0.1 mol) de 1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-carboxialdehído, 394 g de N-metilformamida y 50 ml de ácido fórmico. Se recristaliza el producto de 150 ml de acetona a un p.f. de 127-130°C. Ejemplo 4 4- (aminometil) -1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -tioxanten-9-ona (I: R1=R2=Et; Q=CH2NH2; R8=H; n=2) Se calienta una solución de 24.4 g (64 mmol) de la formamida del Ejemplo 2 en 240 ml de ácido clorhídrico 2N sobre un baño de vapor por 1 hora. Se enfría la reacción a temperatura ambiente, se lleva a pH básico con hidróxido de sodio al 35%, y el precipitado amarillo resultante se recolecta por filtración. Se disuelve el producto en benceno, se trata con carbón vegetal, se seca con sulfato de magnesio, se filtra y se forma un azéotropo para eliminar trazas de agua. El residuo seco se cristaliza de metanol e isopropanol por la adición de cloruro ácido etéreo. El sólido resultante se recristaliza en varias cosechas de metanol para producir 10.6 g del producto, p.f. 270-272°C, como la sal diclorhidrato. Ejemplo 5 1 - [ [2 - (dietilamino) etil ] amino] -4 - [ (met i lamino) -metil ] tioxanten- 9 -ona ( I : R1=R2=Et ; Q=CH2NHCH3 ; R8=H ; n-2 ) Por un proceso exactamente análogo a aquel del Ejemplo 4, 10.5 g de la metilamina se obtiene como el diclorhidrato hemidratado a partir de 14.6 g (37 mmol) de la N-metilformamida del Ejemplo 3 y 150 ml de ácido clorhídrico 2N.

El producto funde a 241-243°C. Ejemplo 6 N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten4-il] metil] metansulfonamida (I: R1=R2=Et; Q=CH2NHS02CH3 ; R8=H; n=2) Se enfría una solución de 10.65 g (30 mmol) de la base libre de la amina del Ejemplo 4 en 100 ml de piridina en un baño de hielo y se agrega en una porción de 4 g (35 mmol) de metansulfonilcloruro. Se agita la mezcla por 2 horas a temperatura ambiente y se vacía en 750 ml de agua que contiene 2 g de hidróxido de sodio. Se recolecta el precipitado amarillo oscuro, se lava con agua y se seca in vacuo durante la noche. Se obtiene una segunda cosecha agregando hidróxido de sodio en exceso al filtrado y filtrando el sólido resultante. Los precipitados combinados después de secar se recristalizan del benceno para producir 6.4 g de etansulfonamida, p.f. 169-170°C. Ejemplo 7 1- [ [2'- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-carboxamida (I: Rx=R2=Et; Q=C0NH2; R8=H; n=2) se lleva a reflujo una suspensión de 74 g (0.23 moles) de 1- [ [2'- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-carboxialdehído y 74 g (1.06 moles) de clorhidrato de hidroxilamina en 400 ml de piridina y 400 ml de etanol durante 0.5 horas y se agregan 70 ml de agua para proporcionar una solución homogénea. Se calienta la solución por unas 2 horas adicionales y se permite reposar a temperatura ambiente 14 horas. Se separa por filtración la oxima cristalina resultante para proporcionar un rendimiento cuantitativo, p.f. 215-218°C.

Se calientan brevemente ciento veintitrés gramos de la oxima sobre un baño de vapor en 180 ml de anhídrido acético para lograr la solución. Se enfría la solución, se agregan 100 ml de HCl 1.8 M en éter y se diluye la suspensión resultante con 500 ml de éter. Se permite reposar la suspensión 14 horas a 0o y se filtra. Se forma una suspensión con el residuo (123 g, p.f. 109-112°C) en 250 ml de xileno y se lleva a reflujo 20 minutos. Se enfría la mezcla y se separa por filtración 71.3 g del nitrilo, p. 265°C. Se agitan los gramos de nitrilo en 200 ml de H2S04 concentrado a temperatura ambiente por 3 días. Se neutraliza la reacción con NH4OH concentrado y se separa por filtración el residuo. Se digiere el residuo en EtOAc/EtOH caliente, se filtra y el producto cristaliza de la solución fría, p. f. 241-243 °C. Se disuelve en etanol y se agrega un equivalente de HCl en etanol. Se obtienen seis gramos de clorhidrato de amida, p.f. 271-272°C. Ejemplo 8 N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-il] metil] N-metilmetansulfonamida (I: R1=R2=Et; Q=CH2N (CH3) S02CH3 ; R8=H; n=2) Se enfría una solución de 1.5 g (3.5 mmol) del metansulfonamida del Ejemplo 6 en THF (60 ml) a 0°C en un baño de hielo y se agrega NaH 0.16 g (4.0 mmol). Se calienta la mezcla de reacción a temperatura ambiente, se agita por 10 minutos, se agrega entonces yoduro de metilo 0.25 ml (4.0 mmol) . Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente por 24 horas y se elimina el solvente in vacuo. Se purifica el residuo por cromatografía de columna sobre sílice eluyendo con cloroformo (100%) entonces isopropil -amina/cloroformo al 1% producirá 1.15 g (74%) de N-metilmetansulfonamida como un polvo amarillo, p.f. 175-177°C. Se trata a la base libre también con ácido metansulfónico en metanol para producir la sal metansulfonato, p.f. 194-195.5°C (Ejemplo marcado 8* posteriormente en la presente) Ejemplo 9 N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] fenilsulfonamida (I: R1=R2=Et; Q=CH2NHS02Ph; Rß=H; n=2) Siguiendo un procedimiento substancialmente similar a aquel descrito en el Ejemplo 6, se obtiene 2.4 g (57%) de fenilsulfonamida como una sal del ácido metansulfónico a partir de 2.54 g (7.15 mmol) de la base libre de la amina del Ejemplo 4, piridina (50 ml) y cloruro de bencensulfonilo (1.1 ml, 8.62 mmol) , seguido por el tratamiento con ácido metansulfónico en metanol. El producto se recristaliza del etanol. Ejemplo 1Q N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4 -il] metil] fenilsulfonamida ( I : R1=R2=Et ; Q=CH2NHS02Ph; R8=H; n-2 ) Siguiendo un procedimiento substancialmente similar a aquel descrito en el Ejemplo 6, se obtiene 2.3 g (52%) de la acetamida como un sólido anaranjado a partir de 4.15 g (11.5 mmol) de la base libre de la amina del Ejemplo 4, piridina (60 ml) y cloruro de acetilo (0.82 ml , 11.53 mmol), seguido por el tratamiento con ácido metansulfónico en metanol. El producto se recristaliza de la acetona y se funde a 182-183°C. Ejemplo 11 N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] benzamida (I: Rx=R =Et; Q=CH2NHC (0) Ph; R8=H; n=2) Siguiendo un procedimiento substancialmente similar a aquel descrito en el Ejemplo 6, se obtiene 1.02 g (68%) de la benzamida como un polvo amarillo a partir de 1.17 g (3.29 mmol) de la base libre de la amina del Ejemplo 4, piridina (25 ml) y cloruro de benzoilo (0.42 ml, 3.62 mmol) . El producto se purifica por cromatografía de columna sobre sílice eluyendo con cloroformo (100%) a isopropilamina/cloroformo 1%, seguido por recristalización del acetato de etilo. El producto funde a 161-163°C. Ejemplo 12 N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4 -il] dietilfosforamida (I: Rx=R2=Et; Q=CH2NHP (O) (OEt ) 2 ; R8=H; n=2) Se trata una solución de 2.28 g (6.41 mmol) de la base libre de la amina del Ejemplo 4, CH2C12 (50 ml), y trietilamina (2 ml) a 0°C con fosforocloridato de dietilo (1.0 ml, 6.9 mmol) . Se agita la mezcla de reacción a 0°C por 2 horas, luego a temperatura ambiente por 1 horas. Se elimina el solvente in vacuo y se purifica el residuo por cromatografía de columna sobre sílice eluyendo con acetato de etilo (100%), entonces metanol/acetato de etilo 5% y finalmente metanol/isopropilamina/acetato de etilo (5/5/90) para producir 2.28 g (72%) de la fosforamida de dietilo como un sólido amarillo, p.f. 108-110°C cuando se recristaliza de acetato de etilo. Ejemplo 13 N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] -N-etilformamida (I: Rx=R2=Et; R4=Et; R8=H; n-2) Se calienta una solución de 2.0 g (5.6 moles) de 1- [ [2- (dietilamino) -etil] amino] -9-oxo-tioxanten-4-carboxialdehído, N-etilformamida (24.0 ml) y de ácido fórmico (3.0 ml, 79.5 mmol) a 170°C por 4 horas. Se enfría la mezcla de reacción, se vacía en agua y se lleva a pH básico con hidróxido de sodio al 10%. Se obtiene un sólido el cual se recolecta por filtración y se lava con agua. El residuo sólido se toma en cloroformo/agua, y la capa orgánica se separa y se seca sobre Na2S0. El solvente se elimina in vacuo y el residuo se purifica por cromatografía radial que eluye con isopropilamina/metanol/acetato de etilo (0.5/1/98.5) para producir 1.32 g (57%) de la N-etilformamida como un sólido anaranjado, p.f. 75-77°C. Ejemplo 14 1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -4- [ (etilamino) -metil] tioxanten-9-ona (I: R1=R2=Et; Q----CH2NHC2H5; R8-=H; n=2) Por un procedimiento substancialmente similar a aquel descrito en el Ejemplo 4, se obtiene 1.29 g (92%) de la etilamina como el diclorhidrato a partir de 1.3 g (3.2 mmol) de la N-etilformamida del Ejemplo 13 y 10.8 ml de ácido clorhídrico 2N. El producto se recristaliza del etanol/tetrahidrofurano y funde a 160°C (dec.) . Ejemplo 15 Triclorhidrato de 1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -4- (dimeti1aminometi1en-aminometi1) -1ioxanten-9-ona (I: R1=R2=Et; Q=CH2N=CHC (Me) 2 ; Rß=H; n=2) Se diluye N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] formamida con 50 ml de HCl 2N y se calienta la solución sobre un baño de vapor por 90 minutos. Se enfría la mezcla, se lleva a pH básico 10 con solución de hidróxido de sodio al 35%, y se extrae con cloroformo. Se separa la capa orgánica, se filtra a través de K2C03, y se concentra in vacuo y el producto resultante sin purificar se permite reaccionar con dimetilformamida dimetilacetal durante la noche a 60°C. Se elimina el exceso de DMF-dimetilacetal in vacuo y se purifica el compuesto título deseado por cromatografía rápida (gel de sílice; cloroformo/iPrNH2/MeOH (98:1:1). Este producto se disuelve en HCl/EtOH 2.5 M (100 ml), se enfría en un baño de hielo, se filtra y se seca para dar 2.38 g de triclorhidrato de 1- [ [2- (dietilamino) ] etil] amino] - - (dimetilaminometilenaminometil) -tioxanten-9-ona como un sólido anaranjado, p.f. 258-260°C. Ejemplo 16 N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] trifluoroacetamida (I: R1=R2=Et; Q=CH2NHC (O) CF3 ; R8=H; n-2) Se trata una solución de 4 - (aminometil) -1- [ [2-(dietilamino) etil] amino] -tioxanten-9-ona (2.91 g, 8.19 mmol) en 80 ml de cloruro de metileno a 0°C con cloruro de trifluoroacetilo (14.75 ml de solución 0.61 M en tolueno; 9.0 mmol) y se agita la mezcla de reacción a 0°C por 90 minutos. Se concentra la mezcla in vacuo y se purifica el residuo por cromatografía rápida (gel de sílice; EtOAC (100%) , luego isopropilamina/EtOAc) y se recristaliza de acetato de etilo para producir 2.52 g (68%) del producto como la base libre, p.f. 189-190°C Ejemplo 16. Se disuelve la base libre en metanol y se trata con ácido metansulfónico (0.55 g, 5.72 mmol) para producir la sal de metansulfonato, p.f 152-154°C después de la recristalización de la acetona (Ejemplo 16a) .

Eiemplo 17 (a) Se lleva a reflujo una mezcla de ácido tiosolicíclico (50.14 g. 0.33 moles) y acetato cúprico (5.0 g ) en DMSO (500 ml) y se agrega en porciones carbonato de potasio (54.3 g) . Se agrega entonces 3-bromoclorobenceno (42 ml, 0.36 moles) vía jeringa y se lleva a reflujo la mezcla por 3 horas. Se vacía la mezcla de reacción en agua, se trata con carbón y se filtra a través de celita. Se acidifica el filtrado con HCl concentrado y el precipitado formado se recolecta por filtración, se lava con agua y se seca in vacuo a 60°C para producir 75.01 g (85%) de ácido 2- [ (3-clorofenil) tio] benzoico. (b) Se agrega a una mezcla de solución agitada de H2S04 a 0°C ácido 2- [ (3-clorofenil) tio) benzoico (75.00 g, 0.28 moles) en porciones durante una hora. Se agita la mezcla por 2 horas, se vacía a NH40H concentrado (500 ml) en agua (2.5 1) y se recolecta el precipitado que se forma por filtración, se lava con agua y se seca in vacuo a 60°C para producir 65.9 g (95%) de una mezcla de 1-cloro y 3-clorotioxanten-9-ona. (O Se lleva a reflujo una mezcla de 1-cloro y 3-clorotioxanten-9-ona (14.01 g, 56.8 mmol), piridina (20 ml) y dietilaminopropilamina (5.13 g, 39.4 mmol) hasta que se termina la reacción. Se elimina el calor, se elimina el solvente in vacuo y se toma el residuo en cloroformo y se purifica por cromatografía de columna sobre sílice eluyendo con cloroformo para eliminar el 3-cloroisomero no reaccionado y después isopropilamino/cloroformo 5% para producir 5.10 g (54%) de 1- [ [3- ( - (dietilamino) propil] amino] - tioxanten-9-ona como una goma anaranjada . (d) se calienta una mezcla de l-[[3-(dietilamino) propil] amino] -tioxanten-9-ona (5.10 g, 15.0 mmol), formalina (160 ml) y ácido acético 5N (0.8 ml) a 90°C 16 horas, se agrega ácido acético 5N adicional (0.20 ml) , seguido por formalina (50 ml) y se calienta la mezcla a 90°c por aproximadamente 57 horas. Se diluye la mezcla con agua, se lleva a pH básico con NaOH 5N y se extrae con cloroformo. Se seca la capa orgánica durante Na2S04 y se pasa a través de una columna de sílice que eluye con metanol/cloroformo 2% y entonces isopropilamina/metanol/cloroformo (2/2/96) para producir 3.82 g (69%) de 1- [ [3- (dietilamino) propil] amino] -4-(hidroximetil) -tioxanten-9-ona como una goma anaranjada/café. (e) 1- [ [3- (dietilamino) propil] amino] -9-oxotioxanten-4-carboxialdehído (II: R1=R2=Et; R8=H; n-3) Se lleva a reflujo una mezcla de l-[[3- (dietilamino) propil] amino] -4- (hidroximetil) -tioxanten-9-ona (3.82 g) , tolueno (60 ml) y óxido de manganeso (7.5 g) por 6.5 horas. Se enfría la mezcla a temperatura ambiente, se filtra a través de celita, y se concentra el filtrado in vacuo para producir 3.3 g (87%) de 1 -[ [3 - (dietilamino) propil] amino] - 9 -oxotioanten-4 -carboxialdehído como un aceite café. (f) diclorhidrato de 1- [ [3- (dietilamino) propil] amino] -4- (metilaminometil) tioxanten-9-ona 3/2 hidratado (I: R1=R2=Et; Q=CH2NHMe; R8=H; n»3) se lleva a reflujo una solución de l-[[3- (dietilamino) propil] amino] -9-oxotioanten-4-carboxialdehído (3.3 g, 8.96 mmol) y 3 g de ácido fórmico en 50 ml de N-metilformamida por 2 horas. Se lleva a pH básico la mezcla con ml de solución de hidróxido de sodio y se extrae con cloroformo (3 x 150 ml) . Se seca la capa orgánica con sulfato de sodio, se concentra in vacuo, y se disuelve un aceite sin purificar en solución de HCl acuoso 3N (50 ml) y se calienta sobre un baño de vapor por 3 horas. Se enfría la mezcla, se lleva a pH básico con 30 ml de NaOH 35%, se extrae con cloroformo (3xl50ml) , se seca la capa orgánica con sulfato de sodio y se concentra in vacuo para producir un aceite café. Se purifica el aceite café por cromatografía rápida (gel de sílice; trietilamina 5%/Et20, luego Et3N/EtOAc 5%, luego trietilamina/ etanol/EtOAc (5:5:90) para producir 1.1 g de 1-[ [3- (dietilamino) propil] amino] -4- (metilaminometil) tioxanten-9-ona, como una goma anaranjada claro. Se convierte la goma anterior al correspondiente diclorhidrato por tratamiento con HCl 6N para producir 1.04 g del diclorhidrato 3/2 hidratado como un polvo amarillo, p.f. 222-224°C. Eiemplo 18 diclorhidrato de 4- (aminometil) -1- [ [2-(dimetilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-9-ona 1/2 hidratado (I: R1=R2=Me; Q=CH2NH2; R8=H; n=2) Se calienta una mezcla de N-[[l-[[2-(dimetilamino) etil] amino] -9-oxo ioxanten-4 -il] metil] formamida (6.2 g) y HCl 2N (52 ml) a 100°C por 1.5-2 horas. Se vacía la mezcla de reacción en agua de hielo, se lleva a pH básico con NaOH 35%, y se extrae con cloroformo. Se lava la capa orgánica con agua (2X) , luego salmuera (IX) , se seca con Na2S04 y se concentra in vacuo. Se purifica el residuo por cromatografía de columna sobre sílice que eluye con acetato de etilo, luego trietilamina/EtOAc 0.5%, entonces trietilamina/EtOAc 2%, después CHCl3/isopropilamina 1 a 2% y finalmente CHCl3/isopropilamina 1-2%/MeOH 2% para producir 3.3 g (58%) del producto en metanol y se trata con HCl concentrado (3.3 ml) en MeOH (6 ml) para producir 1.2 g del producto como el diclorhidrato hidratado, p.f. 213°C (dec,). (b) metansulfonato de N-[[l-[[2-(dimetilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] metansulfonamida (I: R1=R2=Me; Q=CH2NHS02Me ; R8=H; n=2) Se agita 4- (aminometil) -1- [ [2- (dimetilamino) etil] amino] - tioxanten- 9-ona (2 g, 6 mmol) en 30 ml de piridina seca bajo nitrógeno a temperatura ambiente hasta que se forma la solución. Se enfría la solución en un baño de hielo y se agrega 0.52 ml (6.7 mmol) de cloruro de metansulfonilo en piridina fría en gotas y se agita la mezcla por 1 hora a temperatura ambiente. Se vacía la mezcla de reacción en 500 ml de agua que contiene 0.51 g de hidróxido de sodio, se extrae con cloroformo, se lava la capa orgánica con agua (2X) y salmuera, y se seca en sulfato de sodio anhidro. Se filtra y concentra la mezcla in vacuo. Se agita el residuo (2.5 g) en éter, se filtra, y se seca para producir 2 g de N-[[l-[ [2- (dimetilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] metansulfonamida. P.f. 126-127°C. Se disuelve la base libre en MeOH, y se trata con ácido metansulfónico (0.48 g) para producir 2.0 g (67%) del producto como la sal metansulfonato, p.f. 168°C (dec). (c) se calienta una mezcla de l-[[2- (dimetilamino) etil] amino] -4- (hidroximetil) -tioxanten-9-ona (9.2 g, 0.028 moles) en tolueno (322 ml) a aproximadamente 60°C y se agrega entonces óxido de manganeso (Mn02, 16 g) y se calienta la mezcla a 60°C por 1 hora. Se filtra la mezcla y el filtrado se concentra in vacuo para producir 7.9 g (87%) de l-[[2- (dimetila ino) etil] amino] -9-oxotioanten-4 -carboxialdehído (fórmula II: R1=R=Me; R8=H; n=2) (d) N- [ [1- [ [2- (dimetilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4 -il] metil] formamida (I: R1=R2=Me; Q=CH2NHCHO; R8=H; n=2) se calienta una mezcla de l-[[2- (dimetilamino) etil] amino] -9-oxotioanten-4-carboxialdehído (4.75 g) , formamida (66.5 ml) y ácido fórmico (7.6 ml) a 170°C por 4 horas. Se vacía la mezcla en agua de hielo (250 ml) , se lleva a pH básico con NaOH 35% y se extrae con cloroformo. Se lava la capa orgánica con agua (2X) , luego salmuera (IX) , y el solvente se seca en Na2S04 y se concentra in vacuo para producir 6.3 g de N- [ [1- [ [2- (dimetilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] formamida. (e) diclorhidrato de 4- (aminometil) -1- [ [2-(dimetilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-9-ona 1/2 hidratado (I: R1=R2=Me; Q=CH2NH2; R8=H; n=2) se calienta una mezcla de N-[[l-[[2- (dimetilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] formamida (6.2 g) y HCl 2N (52 ml) a 100°C por 1.5-2 horas. Se vacía la mezcla de reacción en agua de hielo, se lleva a pH básico con NaOH 35%, y se extrae con cloroformo. Se lava la capa orgánica con agua (2X) , luego salmuera (IX) , se seca en Na2S0 y se concentra in vacuo. El residuo se purifica por cromatografía de columna sobre sílice que eluye con acetato de etilo, luego trietilamina/EtOAc 0.5%, entonces trietilamina/EtOAc 2%, después CHCl3/isopropilamina 1 a 2% y finalmente CHCl3/isopropilamina 1-2%/MeOH 2% para producir 3.3 g (58%) del producto como una base libre. Se disuelve una porción de la base libre (1.25 g) en metanol y se trata con HCl concentrado (3.3 ml) en MeOH (6 ml) para producir 1.2 g del producto como el diclorhidrato i hidratado, p.f. 213°C (de.). (f) metansulfonato de N-[[l-[[2- (dimetilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] metansulfonamida (I: R1=R2=Me; Q=CH2NHS02Me ; R8=H; n=2) Se agita 4- (aminometil) -1- [ [2- (dimetilamino) etil] amino] -tioxanten-9-ona (2 g, 6 mmol) en 30 ml de piridina seca bajo nitrógeno a temperatura ambiente hasta que se forme la solución. Se enfría la solución en un baño de hielo y se agrega 0.52 ml (6.7 mmol) de cloruro de metansulfonilo en piridina fría en gotas y se agita la mezcla por 1 hora a temperatura ambiente. Se vacía la mezcla de reacción en 500 ml de agua que contiene 0.51 g de hidróxido de sodio, se extrae con cloroformo, se lava la capa orgánica con agua (2X) y salmuera, y se seca en sulfato de sodio anhidro. Se filtra y concentra la mezcla in vacuo. Se agita el residuo (2.5 g) en éter, se filtra, y se seca para producir 2 g de N-[[l-[ [2- (dimetilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] etil] metansulfonamida. P.f. 126-127°C. Se disuelve la base libre en MeOH, y se trata con ácido metansulfónico (0.48 g) para producir 2.0 g (67%) del producto como la sal metansulfonato, p.f. 168°C (dec.) . Eiemplo 19 (a) Siguiendo un procedimiento similar a aquel descrito en el Ejemplo 17 (c), se prepara 6.83 de l-[[3- (dimetila ino) propil] amino] -tioxanten-9-ona, a partir de una mezcla de 1-cloro y 3-clorotioxanten-9-ona (15.15 g, 61.4 mmol), piridina (20 ml) y dimetilaminopropilamina (6.01 g, 58.7 mmol) . (b) Siguiendo un procedimiento similar a aquel descrito en el Ejemplo 17 (d), se obtiene 6.74 g (90%) de l-([3- (dimetilamino) propil] amino] -4- {hidroximetil) tioxanten-9-ona, de de 1- [ [3- (dimetilamino) propil] amino] tioxanten-9-ona (6.8 g, 21.8 mmol), formalina (175 ml) y ácido acético glacial (0.75 mol) . (O Siguiendo un procedimiento similar a aquel descrito en el Ejemplo 17 (e) , se obtiene 4.2 de l-[[3- (dimetilamino) propil] amino] - 9-oxotioxanten-4 -carboxaldehido (Fórmula II: Rx=R2=Me; R4=H; n=3) a partir de l-[[3-(dimetilamino) propil] amino] -4- (hidroximetil) tioxanten-4-ona (6.7 g) , tolueno (80 ml) y Mn02 (12.15 g) . Se purifica el producto por cromatografía de columna sobre sílice que eluye con CHC13 (1.00%) a isopropilamina/CHCl3 1%. (d) Se lleva a reflujo una mezcla de N-metilformamida (50 ml) , ácido fórmico (5.2 g) y 1- [ [3- (dimetilamino) propil] amino] -9 -oxotioxanten-4 -carboxaldehido (4.14 g, 12.16 mmol) por 3 horas. Se diluye la mezcla con agua (250 ml) , se lleva a pH básico con NaOH 35% y se extrae con CHC13 (3x150 ml) . Se seca la capa orgánica con Na2S04, se pasa a través de un tapón de sílice que eluye con CHC13 (100%) , luego isopropilamina 2%/CHCl3 para producir 3.93 g (84%) de N-[[l-[[3-(dimetilamino) propil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] -N-metilformamida (Fórmula IV: R1=R2=Me; R4=Me; Rß=H; n=3) . (e) diclorhidrato de 1- [ [3- (dimetilamino) propil] amino] -4- [ (metilaminometil] tioxanten-9-ona monohidratado. (R1=R2=Me; Q=CH2NHMe; R8=H; n=3) . Se calienta una solución de la N-metilformamida anterior (3.83 g; 10 mmol) en 40 ml de HCl 3N sobre un baño de vapor por 4 h; se neutraliza con solución de NaOH 35%, y se enfría sobre hielo por 1 hora. Se decanta la capa líquida y se disuelve el producto sin purificar en cloroformo y se filtra a través de gel de sílice (cloroformo; isopropilamina/cloroformo 1%) para producir 2.38 g de la amina deseada como una goma anaranjada. Se convierte el producto a la sal clorhidrato correspondiente por disolución en MeOH y se trata con HCl concentrado para producir 0.98 g del diclorhidrato monohidratado, p.f. 228-229°C. Ejemplo 2Q Se calienta una mezcla de l-[[2-(dimetilamino) etil] amino] - 9 -oxotioxanten-4 -carboxaldehido (4.75 g, 0.15 mmol), N-metilformamida (48 ml) y ácido fórmico (3.9 ml) a 170°C por 4.5 horas y entonces se permite reposar a temperatura ambiente por aproximadamente 64 horas. Se vacía la mezcla de reacción en agua (250 ml) , se lleva a pH básico con NaOH 35%, se extrae con CHC13 (3x) . Se separa la fase orgánica, se lava con agua (2x) y entonces salmuera (IX) y se seca sobre Na2S04. Se elimina el solvente in vacuo para producir 5.75 g de N- [ [1- [ [2- (dimetilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] etil] -N-metilformamida (Fórmula IV: R1=R2=Me; R*=Me; Rß=H; n=3) . (b) diclorhidrato de 1- [ [2- (dimetilamino) etil] amino] -4- [ (metilamino) -metil] ioxanten-9-ona 5/4 hidratado. (R1-R2=Me; Q=CH2NHMe; R8=H; n=2) . Por un proceso similar a aquel del Ejemplo 19E, se obtiene 1.8 g de 1- [ [2- (dimetilamino) etil] amino] -4- [ (metilamino) -metil] tioxanten-9-ona a partir de 5.7 g (15.4 mmol) de la N-metilformamida correspondiente del Ejemplo 20 (a) y 50 ml de HCl 2N, después de la purificación de la base libre por cromatografía rápida (gel de sílice; cloroformo; luego isopropilamina/cloroformo 0.5%; luego isopropilamina/cloroformo 1%) . Se convierte la base libre en la sal diclorhidrato correspondiente 5/4 hidratada tratándola con HCl concentrado en metanol para producir 1.8 g (30%) del producto, p.f. I77°c (dec.) . Ejemplo 21 (a) se lleva a reflujo una solución de [[3-(dimetilamino) propil] amino] -9-oxotioxanten-4-carboxaldehido (3.6 g; 10.57 mmol) en 50 ml de formamida que contiene 3.6 g de ácido fórmico por 1.5 horas y entonces se permite reposar a temperatura ambiente durante la noche. Se diluye la mezcla de reacción con agua (400 ml) , se lleva a pH básico con 3 ml de solución de NaOH 5N, se agita rápidamente por 30 minutos, y se filtra el precipitado sólido, se lava con agua, y se seca, produciendo 3.1 g (79%) de N-[[l-[[3-(dimetilamino) propil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] -N-metilformamida (Fórmula I: R1=R2=Me; Q=CH2NHCHO; Rß=H; n=3) como un polvo amarillo. Se calienta una solución de la formamida del Ejemplo 21 (a) (2.98 g; 8.07 mmol) en 40 ml de HCl 3n sobre un baño de vapor por 4 horas, se permite enfriarse a temperatura ambiente, se enfría en hielo, y se neutraliza a pH 8 con solución de NaOH 5N. La mezcla heterogénea resultante se extrae en cloroformo (5xl00ml) y se seca la capa orgánica sobre sulfato de sodio y se filtra a través de un colchoncillo de gel de sílice (primero trietilamina/éter 5%, luego isopropilamina/cloroformo 1-5%) para producir 2.3 g (83%) de 4 - (aminometil) - 1- [ [2 -(dimetilamino) propil] amino] -tioxanten-9-ona (Fórmula I: R1=R2=Me; Q=CH2N H2 ; R8=H; n=3) . (c) metansulfonato de N-[[l-[[3- (dimetilamino) propil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] metansulfonamida hidratado (I: R1=R2=Me; Q=CH2NHS02Me; R8=H; n=3). Se agrega a una solución enfriada con hielo de la amina del Ejemplo 21 (b) (2.2 g; 6.44 mmol) en piridina cloruro de metansulfonilo (0.51 ml; 6.59 mmol) y se agita la mezcla resultante a temperatura ambiente durante la noche. Se diluye la mezcla con cloroformo y se pasa a través de un gran tapón de gel de sílice que eluye con trietilamina/EtOAc 5% produciendo 1.32 g de N- [ [1- [ [3- (dimetilamino) propil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] metansulfonamida como un polvo amarillo. Se disuelve la base libre en metanol (10 ml) y se trata con ácido metansulfónico (0.31 g, 1 eq.) en metanol para producir 1.38 g de la sal metansulfonato hidratada como un sólido anaranjado, p.f. > 107°C. Ejemplo 22 metansulfonato de N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] -metil-etansulfonamida (I: Rx=R2=Et; Q=CH2N (CH3) S02Et ; R8=H; n=2) . Se enfría a 0°C una solución de 2.03 g (5.49 mmol) de 1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -4- ( ( etilamino) metil] tioxanten- -ona (preparado por el método descrito en el Ejemplo 5) y trietilamina en 45 ml de cloruro de metileno y se trata con cloruro de etansulfonilo (0.74 g, 5.76 mmol) . Después de 15 min a 0°C, se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente por 72 horas. Se concentra la mezcla in vacuo, se disuelve el residuo en cloroformo y se purifica pasándola a través de un colchoncillo de gel de sílice (cloroformo; luego trietilamina/cloroformo 1%) produciendo 2.43 g (96%) de N-[[l- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] N-metil-etansulfonamida. Se recristaliza la sulfonamida de acetato de etilo y se trata con ácido metansulfónico en isopropanol para producir el producto como la sal metansulfonato, p.f. 159-161°C. Ejemplo 23 metansulfonato de N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] (p-metoxi) bencensulfonamida (I: Rx=R2=Et; Q=CH2NHS02C6H4-p-0Me ; R8=H; n-2). Se enfría a 0°C una solución de 1.40 g (3.94 mmol) de 4- (aminometil) -1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -tioxanten-9-ona (preparado por el método descrito en el Ejemplo 4) en 30 ml de cloroformo que contiene 1.5 ml de trietilamina y se trata con cloruro de p-metoxibencensulfonilo (0.83 g, 4.02 mmol). Después de 10 min a 0°C, se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente por 2 horas. Se elimina el cloroformo in vacuo, se disuelve el residuo en 100 ml de cloruro de metileno que contiene 1 ml de trietilamina y se trata con cloruro de pmetoxibencensulfonilo (0.85 g) con agitación a temperatura ambiente. Se concentra la mezcla in vacuo, se purifica el residuo pasándolo a través de un colchoncillo de gel de sílice (trietilamina/cloroformo 1%) produciendo 1.57 g (96%) de N-[[l- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] -p-metoxi-bencensulfonamida. Se trata la sulfonamida con ácido metansulfónico (0.3 g) en isopropanol/acetato de isopropilo/metanol para producir el producto 1.07 g de la sal metansulfonato, p.f. 133-137°C. Ejemplo 24 metansulfonato de N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] etansulfonamida (I: Rx=R2=Et; Q=CH2NHS02E ; R8=H; n=2). Se enfría en un baño de hielo una solución de 2.5 g de 4- {aminometil) -1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] tioxanten-9-ona (preparado por el método descrito en el Ejemplo 4) en 30 ml de piridina por 15 minutos y se agrega rápidamente 0.95 g de cloruro de etansulfonilo en 5 ml de piridina en gotas y se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente por 1 hora. Se vacía la mezcla de reacción en 75 ml de agua que contiene 0.75 g de NaOH, se extrae con cloroformo, se lava la capa orgánica con agua (2x) y salmuera, y se seca sobre sulfato de sodio. Se concentra la mezcla in vacuo, y se agita el residuo en éter y se seca (40°c/0.1 mm) para producir 1.7 g de N-[[l- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] etansulfonamida, p.f 105°C. Se disuelve la sulfonamida en metanol y se trata con ácido metansulfónico en metanol para producir 1.61 g (42%) de la sal metansulfonato, p.f. 135°C (de.) . Ejemplo 25 N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] -N-etil-metansulfonamida (I: R1=R2=Et; Q=CH2N (E ) S02Me; Rß=H; n=2). Se enfría a 0°C una solución de 2.10 g (5.48 mmol) de 1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -4- [ (etilamino) metil] tioxanten-9-ona (preparado por el método descrito en el Ejemplo 14) en 30 ml de cloruro de metileno y se trata con 2 ml de trietilamina y cloruro de metansulfonilo (0.7 ml) y se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente por 6 horas. Se elimina el residuo in vacuo, se disuelve el residuo en cloroformo, y se purifica la solución pasándola a través de un colchoncillo de gel de sílice (que eluye con cloroformo seguido por trietilamina/cloroformo 2%) . El sólido amarillo aislado se recristaliza de acetato de etilo para producir l.ll g (44%) de N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] - 9-oxotioxanten-4 -il] metil] -N-etilmetansulfonamida como un polvo amarillo, p.f. 172-176°C. Ejemplo 26 Metansulfonato de N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] -3 , 4 -diclorobencensulfonamida hidratado (I: R1=R2=Et; Q=CH2NHS02C«H3-3 , 4 -dicloro; R8=H; n=2). Se agrega a una solución de cloruro de 3,4-diclorobencensulfonilo (1.84 g, 7.5 mmol) en 35 ml de piridina seca 2.5 g (7 mmol) de 4- (aminometil) -l- [ [2-(dietilamino) etil] amino] -tioxanten-9-ona (preparada por el método descrito en el Ejemplo 4) bajo nitrógeno y la mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente por 15 minutos, y entonces se permite reposar por aproximadamente 72 horas. Se vacía la mezcla de reacción en 75 ml de agua que contiene 0.75 g de NaOH, y se extrae con cloroformo. Se lava la capa orgánica con agua (2X) y salmuera, y se seca en sulfato de sodio anhidro. Se elimina el cloroformo in vacuo, se recristaliza el residuo de etanol para producir el metansulfonato hidratado, p.f. 55°C (de.) . Ejemplo 27 N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] -2-fluorobencensulfonamida.

(I: Rx=R2=Et; Q=CH2NHS02CsH4-2-F; R8=H; n=2). Se enfría a 0°C una solución de 1.36 g (3.83 mmol) de 4- (aminometil) -1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -tioxanten- 9-ona (preparado por el método descrito en el Ejemplo 4) en 25 ml de cloruro de metileno que contiene 1 ml de trietilamina y se trata con cloruro de 2-fluorobencensulfonilo (0.84 g, 4.32 mmol) y se agita la mezcla de reacción por varias horas. Se elimina el solvente in vacuo, se disuelve el residuo en cloroformo, y se purifica por cromatografía de columna (gel de sílice: cloroformo seguido por trietilamina/cloroformo 1%). Se elimina el solvente in vacuo y el producto se recristaliza de acetato de etilo para producir 1.08 g (55%) de N-[[l-[[2-(dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] -2-fluorobencensulfonamida como un polvo anaranjado, p.f. 125-127°C. Ejemplo 28 N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] N-propil -metansulfonamida (I: Rx=R2=Et; Q=CH2N (C3H7) S02Me ; R8=H; n=2). Se elimina el aceite de 0.2 g de dispersión al 60% de hidruro de sodio en aceite mineral por trituración con pentano (4x) . Se agrega DMF seco (40 ml) bajo nitrógeno a hidruro de sodio con agitación, y se agrega 2 g de N-[[l-[[2-(dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] metansulfonamida a la mezcla de reacción mientras que se agita bajo nitrógeno y se calienta la mezcla de reacción a 50°C por 2 horas. Se enfría la mezcla anterior en un baño de hielo por 15 min, se agrega 0.87 g de yoduro de propilo en un volumen pequeño de DMF, y se permite agitar la mezcla a temperatura ambiente durante la noche. Se agita la mezcla con 35 ml de agua, se filtra, y se lava el residuo con agua y se seca (50°C/0.1 mm/P205) para producir 2.17 g de N-[[l-[[2-(dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] N-propilmetansulfonamida, p.f. 142-143°C. Ejemplo 23 Metansulfonato de N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] N-metilbencensulfonamida (I: R1=R2=Et; Q=CH2N (Me) S02C6H5 ; R8=H; n=2). Se enfría a 0°C una solución de 5.32 g (14.4 mmol) de 1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -4- [ (metilamino) metil] tioxanten-9-ona (preparado por el método descrito en el Ejemplo 5) en 100 ml de cloruro de metileno y se trata con trietilamina (5 ml) y cloruro de bencensulfonilo (2 ml; 15.67 mmol) y se agita la mezcla de reacción por 2 horas. Se concentra la mezcla in vacuo, y se purifica el residuo pasándola a través de un colchoncillo de gel de sílice (que eluye con cloroformo; entonces isopropilamina/cloroformo %-1%) produciendo 6.24 g de una goma amarilla. Se disuelve el producto en acetato de etilo y el solvente se elimina in vacuo produciendo 6.06 g (83%) de N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] -N-metilbencensulfonamida. Se suspende la sulfonamida (2.5 g) en isopropanol y se trata con ácido metansulfónico (0.51 g) para producir 2.63 g de la sal metansulfonato, p.f. 171-174°C. Ejemplo 30 (a) Se agrega a una mezcla de ácido m-anísico (250 g, 1.67 moles) en ácido acético (1 1) bromo (85 ml) y entonces agua (1 1) . se calienta la mezcla llevándola a reflujo, se enfría en un baño de hielo y el producto el cual precipita se recolecta por filtración y se lava con agua para producir 305.7 g (79%9 de ácido 2-bromo-5-metoxibenzoico, p.f. 154-156°C. (b) se agrega a una mezcla de 3-clorotiofenol (20 g, 138 moles), y acetato cúprico (1.8 g) y DMF (200 ml) K2C03 (23 g) . Se calienta la mezcla a 150 °C por 15-20 minutos, entonces se agrega en porciones ácido 2-bromo-5-metoxibenzoico (35.8 g, 0.155 moles). Se calienta la mezcla durante la noche, se vacía en agua (600 ml) , se filtra y el filtrado se trata con carbón, se filtra y se diluye con HCl. Se recolecta el precipitado resultante por filtración, se lava con agua, y se seca a 50°c in vacuo sobre P205 para producir 27.6 g de ácido 2-[(3-clorofenil) tio] -5-metoxibenzoico. (c) Se agrega ácido 2- [ (3-clorofenil) tio-5-metoxibenzoico (27 g, 0.092 moles) en porciones a ácido sulfúrico frío (89 ml ) bajo nitrógeno durante 1.5-2 horas. Se agita la mezcla a temperatura ambiente durante la noche, se vacía en agua (900 ml) que contiene NH40H concentrado (218 ml) y hielo. Se recolecta el sólido que precipita por filtración y se seca a 50°c in vacuo en P205 para producir 21 g (42%) de una mezcla de 1-cloro y 3-cloro-7-metoxi-tioxanten-9-ona . (d) Se calienta una mezcla de 1-cloro y 3-cloro-7-metoxi-tioxanten-9-ona (20.7 g) , piridina (69 ml) y dietilaminoetila ina (16.1 g, 0.138 moles) a 115°C bajo N2 por 20 horas. Se elimina el solvente in vacuo y se purifica el residuo por cromatografía de columna sobre sílice que eluye con CHC13 (100%) y entonces isopropilamina/cloroformo 1% para producir 11.22 g de 1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -7-metoxi-tioxanten-9-ona. (e) Se calienta una mezcla de 1- [ [2 -(dietilamino) etil] amino] -7-metoxi-tioxanten-9-ona (11.2 g, 0.031 moles), formaldehído al 37% (277 ml) y ácido acético (4.6 ml) a 100°C por 3 horas. Se enfría la mezcla de reacción, se filtra, y el filtrado se vacía en agua hielo (600 ml) y se lleva a pH básico con NaOH 35%. Se extrae la mezcla con cloroformo (3x) , se lava con salmuera y se seca en Na2S04. Se elimina el solvente in vacuo y se purifica el residuo por cromatografía de columna sobre sílice que eluye con CHCl3/hexano 25%, luego en CHCl3/hexano 50%, CHC13/hexano 75%, luego isopropilamina/CHCl3 0.5% para producir 8.8 g (73%) de 1-[ [2- (dietilamino) etil] amino] -4- (hidroximetil) -7-metoxi-tioxanten- 9-ona . (f) se calienta una solución de l-[[2-(dietilamino) etil] amino] -4- (hidroximetil) -7-metoxi-tioxanten-9-ona (8.8 g, 0.023 moles) en tolueno (268 ml) a 60°c bajo nitrógeno y se agrega entonces Mn02 (13.2 g) . Se calienta la mezcla durante la noche, se filtra y el filtrado se concentra in vacuo para producir 7.05 g (81%) de l-[[2-(dietila ino) etil] amino] -7-metoxi-9-oxotioxanten-4-carboxadehido (Fórmula II: R1=R2=Et; R8=7-OCH3; n=2) . Se calienta una solución de l-[[2- (dietilamino) etil] amino] -7-metoxi-9-oxotioxanten-4-carboxaldehido (3 g, 7.8 mmol) y 1.5 ml de ácido fórmico en 25.5 ml de N-metilformamida por 8 horas con agitación bajo nitrógeno. Se vacía la mezcla de reacción en 160 ml de hielo/agua, se lleva a pH básico con 35% de solución de NaOH, y se extrae en cloroformo (3x) . Se lava la capa orgánica con agua (2x) y salmuera, se seca en sulfato de sodio, y se elimina el solvente in vacuo produciendo 3 g (89.9%) de la N-[[l-[[2-(dietilamino) etil] amino] -7-metoxi-9-oxotioxanten-4-il] metil] -N-metilformamida (Fórmula IV: R1=R2=Et; R4=Me; R8=7-OCH3; n=2) . (h) 1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -4- [ (metilamino) metil] -- 7 -metoxi ioxanten- 9 -ona (I: R1=R2=Et; Q=CH2NHMe; R8=7-Ome; n=2). Se calienta la N-metilformamida del Ejemplo 30 (a) (3.0 g) en una solución de HCl acuoso 2N (24 ml ) a 100°C por 2 horas bajo nitrógeno con agitación. Se enfría la mezcla anterior, se vacía en 125 ml de hielo/agua, se lleva a pH básico con solución de NaOH 35%, y se extrae en cloroformo y se lava con agua (2x) , luego salmuera. Se seca la capa orgánica en sulfato de sodio y se concentra in vacuo para producir 3.1 g del producto sin purificar. Se tritura el producto en éter y el filtrado se purifica por varias columnas de cromatografía rápida (gel de sílice: que eluye con hexano/cloroformo 50%, entonces cloroformo, luego isopropilamina 1%/MeOH 1%/CHClj (columna 2); y CHC13, luego isopropilamina 0.5%/CHCl3 (columna 3)) produciendo 0.746 g de 1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -4-[ (metilamino) metil] -7-metoxitioxanten-9-ona. Ejemplo 31 (a) N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -7-metoxi-9-oxotioxanten-4-il]metil] -N-metilformamida (I: R1=R2=Et; Q=CH2NHCHO; R8=7-Ome; n=2). Se calienta una mezcla de l-[[2-(dietilamino) etil] amino] -7-metoxi-9-oxotioxanten-4 -carboxaldehido (3.6 g, 0.0094 mmol) , formamida (48 ml ) y ácido fórmico (6 ml) a 170°C bajo N2 por 8 horas. Se vacía la mezcla en hielo/agua, se lleva a pH básico con NaOH al 35%, y se extrae con cloroformo (3x) . Se separa la capa orgánica, se lava con agua (2x) luego salmuera, y se seca en sulfato de sodio, y se concentra in vacuo produciendo 3.88 g de N-[[l-[[2-(dietila ino) etil] amino] -7-metoxi-9-oxotioxanten-4-il] metil] -N-metilformamida. (b) 4- (aminometil) -1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -7-metoxi - 1 ioxanten- 9 -ona (I: R1=R2=Et; Q=CH2NH2; R8=7-OCH3; n=2) . Se calienta una mezcla de la formamida del Ejemplo 31 (a) (3.88 g) y HCl 2N (32 ml) a 100°C por 2 horas bajo nitrógeno con agitación. Se enfría la mezcla anterior, se vacía en agua, se lleva a pH básico con solución de NaOH 10%, y se extrae con cloroformo y se lava con agua, luego salmuera. Se seca la capa orgánica en sulfato de sodio y se concentra in vacuo para producir 3.6 g del producto sin purificar. Se disuelve el producto en cloroformo y se purifica por cromatografía rápida (sílice gel; que eluye con hexano/cloroformo (50:50) y luego isopropilamina 1% en hexano/cloroformo (50:50)) produciendo 1.75 g del producto deseado. (c) N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -7-metoxi-9-oxotioxanten-4-il] metil] metansulfonamida (I: R1=R2=Et; Q=CH2NHS02Me ; R8=7-Ome; n=2). Se agrega en gotas a una solución de 1.75 g (0.0045 moles) de la amida del Ejemplo 31 (b) en 22.5 ml de piridina enfriada en un baño de hielo bajo nitrógeno con agitación, 0.39 ml (0.005 moles) de cloruro de metansulfonilo en un pequeño volumen de piridina y se agita la mezcla resultante a temperatura ambiente por 2 horas. Se vacía la mezcla en 375 ml de agua que contiene 0.38 g de NaOH, se extrae en cloroformo, y se seca el residuo in vacuo para producir 1.61 g (77%) de N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -7-metoxi-9-oxotioxanten-4-il] metil] metansulfonamida, p.f. 144°C (dec.) . Ejemplo 32 (a) Se agrega K2C03 en porciones a una mezcla de 3-clorotiofenol (20 g, 0.138 moles), acetato cúprico (1.75 g) y DMF (199 ml) bajo N2. La mezcla se calienta a 150°C y entonces se agrega ácido 2, 5-dibromobenzoico (43.5 g) . Se calienta la mezcla durante la noche, se vacía en agua (600 ml) , se filtra, el filtrado se trata con carbón y se filtra otra vez. Se acidifica el filtrado con HCl concentrado, se extrae con CHC13, se lava la capa orgánica con salmuera y se seca con Na2S04. Se elimina el solvente in vacuo para producir 28.8 g de ácido 2-[ (3 -clorofenil) tio] -5-bromobenzoico . (b) Se agita una mezcla de ácido 2- [ ( 3 -clorofenil) tio] - 5-bromobenzoico (28.4 g) y ácido sulfúrico concentrado (180 mml ) a 0°C y entonces a temperatura ambiente durante la noche. Se vacía la mezcla en agua-hielo (850 ml) que contiene NH-.OH concentrado (199 ml) y el producto que precipita se recolecta por filtración y se seca a 50°C in vacuo para producir 15.0 g de una mezcla de 1-cloro y 3-cloro-7-bromo-tioxanten-9-ona. (O Se calienta una mezcla de 1-cloro y 3-cloro-7-bromo-tioxanten-9-ona (13.6 g) , piridina (108 ml) y N,N-dietiletilendiamina (16.3 ml) a 115°C por 20 horas. Se elimina el solvente in vacuo, y se purifica el residuo por cromatografía de columna sobre sílice que eluye con CHC13 (100%), luego isopropilamina 1%/CHC13 para producir 9.3 g de 1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -7-bromotioxanten-9-ona. (d) Se calienta una mezcla de l-[[2- (dietilamino) etil] amino] -7-bromotioxanten-9-ona (9.3 g, 22.9 mmol), 203 ml de solución de formaldehído al 37%, y 3.4 ml de solución de ácido acético 5N a 100°C bajo nitrógeno durante la noche. Se enfría la mezcla a temperatura ambiente y el sólido formado se elimina por filtración. Se diluye el filtrado con agua, se lleva a pH básico con solución de NaOH 35% y se extrae en cloroformo. Se lava la capa orgánica con salmuera, se seca con sulfato de sodio, y se elimina el solvente in vacuo para producir 10 g de aceite. Se filtra el aceite anterior en cloruro de metileno, el solvente se concentra in vacuo, y se purifica el análogo del hidroximetilo sin purificar por cromatografía rápida (gel de sílice; que eluye con cloroformo/hexano 25%, luego cloroformo/hexano (1:1), entonces cloroformo/hexano 25%, luego CHC13 (100%) , y entonces isopropilamina 0.5-1%/cloroformo) para producir 3.2 g de l-[[2- (dietilamino) etil] amino] -4- (hidroximetil) -7-bromotioxanten-9-ona. (e) 1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -7-bromo-9-oxotioxanten-4-carboxialdehído. (II: R1=R2=Et; R8=7-Br; n=2) Se calienta una mezcla de 3.2 g (7.34 mmol) del alcohol del Ejemplo 32 (d) y 4.3 g de Mn02 en 85 ml de tolueno a 60°C por 1 hora bajo nitrógeno. Se filtra la mezcla, se lava con CHC13, y se concentra el filtrado combinado in vacuo produciendo 3 g de un sólido amarillo. Se tritura el sólido amarillo en éter, se filtra, y se seca para producir 2.7 g (94.3%) de 1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -7-bromo-9-oxotioxanten-4-carboxialdehído, p.f. 145-146°C. (f) N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etilj-amino] -7-bromo-9-oxotioxanten-4-il] metil] formamida (I: R1=R2=Et; Q=CH2NHCHO; R8=7-Br; n=2). Se calienta una mezcla de 2.7 g (6.2 mmol) de l-[[2-( ietilamino) etil] amino] -7-bromo-9-oxotioxanten-4 -carboxialdehído, 31.7 ml de formamida, y 3.6 ml de ácido fórmico a 170°C bajo nitrógeno con agitación por 8 horas y se permite a la mezcla reposar a temperatura ambiente por 72 horas. Se vacía la mezcla en 150 ml de hielo/agua, se lleva a pH básico con solución de NaOH 35%, y se filtra el producto sólido y se lava con agua. Se disuelve el producto sólido en cloroformo, se lava con salmuera, se seca en sulfato de sodio, y se concentra el solvente in vacuo para producir 2.85 g de la formamida deseada, como un sólido amarillo/anaranjado, p.f. 132°C (dec. ) . (9) 1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -4- (aminometil) -7-bromotioxanten-9-ona (I: Rx=R=Et; Q=CH2NH2; R8=7-Br; n=2). Se calienta una mezcla de 2.85 g (6.6 mmol) de la formamida anterior (Ejemplo 32 (f)) en 26 ml de solución de HCl 2N a 100°C bajo nitrógeno por 2 horas y se permite a la mezcla reposar a temperatura ambiente durante la noche. Se vacía la mezcla de reacción en 200 ml de hielo/agua, se lleva a pH básico con solución de NaOH 35%, y se extrae en cloroformo. Se lava la capa orgánica con agua y salmuera, se seca en sulfato de sodio, y se concentra in vacuo para producir 2.67 g de un aceite oscuro. Se purifica el aceite oscuro por cromatografía rápida (gel de sílice; 1250 ml de hexano/cloroformo (1:1), y entonces isopropilamina 1% en hexano/cloroformo (1:1)) para producir 1.87 g (70%) de 1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -4 -(aminometil) -7-bromotioxanten-9-ona, p.f. 79-82°C. Ejemplo 33 N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -7-bromo-9-oxotioxanten-4-il] metil] metansulfonamida (I: RL=R2=Et; Q=CH2NHS02Me ; R8=7-Br; n=2). Se agita 1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -4 - (aminometil) -7-bromotioxanten-9-ona (1 g, 2.3 mmol) en 11.5 de piridina seca bajo nitrógeno en un baño de hielo por 15 minutes y se agrega en gotas 0.2 ml (2.6 mmol) de cloruro de metansulfonilo en piridina fría y se agita la mezcla a temperatura ambiente. Se vacía la mezcla de reacción en 200 ml de agua, se agrega 1.9 g de hidróxido de sodio en hielo/agua, y se extrae en cloroformo. Se lava la capa orgánica con agua (2X) y salmuera, y se seca en sulfato de sodio anhidro. Se filtra la mezcla, se concentra in vacuo y se agita el residuo en éter, se filtra, se seca para producir 1.02 g de N-[[l-[[2-(dietilamino) etil] amino] -7-bromo-9-oxotioxanten-4-il] metil] metansulfonamida, p.f. 134-139°C. Ejemplo 34 N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] carbamato de metilo (I: R=R2=Et; Q=CH2NHC00Me; R8=H; n=2). A una solución de 2.94 g (8.27 mmol) de 4- (aminometil) -1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] tioxanten-9-ona en 50 ml de cloruro de metileno que contiene 5 ml de trietilamina enfriada a 0°C se agrega 0.7 ml (9.06 mmol) de cloroformiato de metilo y se agita la mezcla por 2.5 horas. Se elimina el solvente in vacuo, se suspende el residuo en cloroformo y se purifica por cromatografía rápida (gel de sílice; cloroformo, luego isopropilamina 1%/cloroformo] produciendo 2.36 g (69%) de N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4 -il] metil] carbamato de metilo, como un sólido amarillo, p.f. 129-131°C. Eiemplo 35 1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -4- [ (metilamino) metil] -7-hidroxi-tioxanten-9-ona (I: R1=R=Et; Q=CH2NHMe; R8=7-0H; n=2). Se calienta una solución de 1.6 g (4 mmol) de l-[[2-(dietilamino) etil] amino] -4- [ (metilamino) etil] -7-metoxi-tioxanten-9-ona (preparada por el proceso descrito en el Ejemplo 30 (h) ) en 10 ml de una solución al 48% de HBr en 110°C por 5 horas. Después de enfriar, se neutraliza la mezcla de reacción con bicarbonato de sodio saturado y se extrae con cloroformo (3x100 ml) . Se disuelve la goma oscura, insoluble en agua o cloroformo, en metanol y se combina con solución de cloroformo. Se concentra el solvente in vacuo para producir 1.67 g de un sólido anaranjado oscuro. Se purifica el producto sólido anaranjado por cromatografía rápida (gel de sílice; isopropilamida/metanol/cloroformo (1:1:98) seguida por una segunda columna de sílice que eluye ccr. isopropilamina/MeOH/CHCl3 (2:2:96) produciendo 0.56 g (36%) de 1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -4- [ (metilamino) metil] -7-hidroxi-tioxanten-9-ona, p.f. 167-169°C. Ejemplo 36 N- [ [1- [ [2- (dietilamino) etil] amino] -7-metoxi-9-oxotioxanten-4-il] metil] carbamato de metilo (I: R1=R2=Et; Q=CH2NHCOOMe ; R8=7-OMe; n=2). A una solución de 1.55 g de 4- (aminometil) -1- [ [2 - (dietilamino) etil] amino] -7-metoxitioxanten-9-ona en 40 ml de cloroformo que contiene 2 ml de trietilamina enfriada a 0°C se agrega 0.45 ml de cloroformiato de metilo y se agita la mezcla a temperatura ambiente por varias horas. Se elimina el solvente in vacuo, se purifica el residuo por cromatografía rápida (gel de sílice; que eluye con cloroformo, luego trietilamina 1% en cloroformo/hexano (1:1) produciendo 1.2 g de N-[[l-[[2-(dietilamino) etil] amino] -7-metoxi-9-oxotioxanten-4-il] metil] carbamato de metilo el cual se recristaliza de acetato de etilo para producir 0.79 g de un sólido amarillo brillante, p.f. 131-132°C. Ejemplo 37 N- [ [1- (2-dietilamino) etil] amino] -7-hidroxi-9-oxotioxanten-4-il] etil] etansulfonamida 3/4 hidratada. (I: R1=R2=Et; Q=CH2NHS02CH3 ; R8=7-OH; n=2). A una solución de N- [ [-1- (2- (dietilamino) etil] amino] - 7-metoxi-9-oxotioxanten-4-il] metil] metansulfonamida (0.5 g) en CH2CL2 (45 ml ) a -78°C se agrega BBr3 ÍN en CH2C12 (1.75 ml ) . Se calienta la mezcla a temperatura ambiente, se agita durante la noche, y entonces se vacía en hielo-agua (250 ml) que contiene NaOH 35% (8 ml) . Se acidifica la mezcla con HCl diluido, entonces se lleva a pH básico con Na2C03 y entonces se extrae con acetato de etilo. Se separa la fase orgánica, se lava con salmuera, se seca con Na2S04 y se concentra in vacuo. Se purifica el residuo por cromatografía de columna sobre sílice que eluye con MeOH/EtOAc 5% para producir 0.28 g (58%) de N- [ [1- (2-dietilamino) etil] amino] -7-hidroxi-9-oxotioxanten-4-il] metil] metansulfonamida 3/4 hidratada, p.f. 78°c (dec.) . Se prueban los ejemplos representativos de la invención para actividad antitumoral de acuerdo al siguiente procedimiento: Se agrupan loa animales, se implantan subcutáneamente con 30 a 60 mg de fragmentos tumorales por una troca de calibre 12, y se agrupan otra vez antes de la distribución no selectiva a los varios grupos de tratamiento y control. Para tratamiento de fase temprana, se inicia la quimioterapia dentro de 1 a 5 días después de la implantación tumoral mientras el número de células es relativamente pequeño (107 a 108 células) . Para tratamiento de etapa avanzada, se retrasa la quimioterapia hasta que el tumor llega a ser relativamente grande (200 a 300 mg en tamaño) . Un tumor de 300 mg contiene aproximadamente 3 x 108 células totales. Los tumores dentro de una prueba de etapa avanzada están dentro de 2.5 veces el rango de tamaño para 90% de los animales. Los tumores son medidos con un calibrador semanalmente (o dos veces a la semana para tumores que crecen más rápidamente) . Los ratones son sacrificados cuando sus tumores alcanzan 1500 mg (es decir, antes de que puedan provocar el malestar al animal) . Los pesos de los tumores son estimados a partir de dos mediciones dimensionales. Se miden los grupos de tratamiento y de control cuando los tumores del grupo de control alcanzan aproximadamente 700 a 1200 mg en tamaño (Mediana del grupo) . Se determina la median del peso tumoral de cada grupo (incluyendo ceros) . El valor T/C (peso de tumores tratados sobre el peso de tumores de control ) en porciento es una indicación de eficacia antitumoral: una T/C igual o menor a 42% se considera actividad antitumoral significativa por la Drug Evaluation Branch of the División of Cáncer Treatment (NCI) . Un valor T/C <10% se considera para indicar actividad antitumoral significativamente alta. Un nadir de pérdida de peso corporal (media del grupo) mayor a 20% o mayor que 20% de muertes por fármaco se considera una indicación de una dosis excesivamente tóxica. Se muestran los resultados en la Tabla 1 para adenocarcinoma ductal pancreático #03 y en la Tabla 2 para adenocarcinoma de colon #38. TABLA 1 Dosis total Pérdida de Muertes por (mg( g) i.v. o Ejemplo T/C (%) peso (g) * fármaco P-O. 1 0 1.6 0 1738 2 0 2.0 0 576 2 7 1.6 0 144 4 0 0.4 0 570 5 0 1.6 0 222 6 0 1.6 0 124 7 0 3.2 1/5 400 8 0 0.8 0 304 9 8 1.6 0 1395 10 0 2.4 0 540 11 0 0.8 0 855 12 36 3.2 0 1298 13 0 2.4 0 431 14 0 1.2 0 448 15 0 2.0 0 390 16 (a) 21 +0.8 0 1171 17(f) 17 2.0 0 1060 18(e) 82 1.0 0 128 18(f) 0 5.2 2/5 256 19 (e) 4 3.4 0 610 (b) 10 0.4 0 383 21(c) 0 4.5 0 208 22 0 3.2 0 465 23 20 2.4 0 1212 24 0 2.3 0 203 25 0 4.6 0 288 26 13 2.2 0 654 27 5 +0.8 0 2594 28 0 2.8 0 552 29 6 2.4 0 2403 31(C) 0 5.6 0 248 30 (h) 0 1.4 0 880 33 28 2.0 0 1281 34 0 3.6 0 248 36 0 0.4 0 155 37 7 0 0 32 * el peso corporal promedio es 25 g.

TABLA 2 Dosis total Pérdida de Muertes por (mg(kg) i.v. o Ejemplo ü T/C (%) peso (g) * fármaco p.o. 2 0 2.8 0 600 5 11 2.9 0 960 6 0 5.0 3/7 132 6 4 1.7 1/7 82 7 16 0.6 0 840 10 0 4.0 0 340(b) 24 2.3 0 200(b) 22 0.6 0 160 (b9 2 4.0 2/5 740 (a) 7 1.2 0 460 (a) 23 2.0 0 865 (b) 11 0 2.0 0 1709{a) 0 0.8 0 885(a) 39 0.8 0 518 (b) 16 (a) 20 1.2 0 1000 27 1.5 0 670 18 (e) 51 2.2 4/5 180 3 1.0 0 120 25 0 4.8 4/5 852(C) 0 0.6 0 529(c) 0 0.8 0 327(c) * el peso corporal promedio es 20.5 -25-5 g. (a) = administración p.o. (b) = administración i.p. (c) = administración i.v. días 3-6 y administración p.o. días 7-10. Se prueba el compuesto del Ejemplo 5 por infusión intravenosa contra un número de otros tumores como se muestra en la Tabla 3, y es activo a 300 mg/kg p.o contra el adenocarcinoma de colon #38. Se prueba el compuesto del Ejemplo 6 por inyección intravenosa de bolo contra un número de otros tumores como se muestra en la Tabla 4. Se prueba el compuesto del Ejemplo 8 (a) contra un número de tumores como se muestra en la Tabla 5. Se prueba el compuesto del Ejemplo 36 contra un número de tumores como se muestra en la Tabla 6. Los compuestos representativos de la invención se prueban contra Adenocarcinoma mamario 16/C/RP como se muestra en la Tabla 7. Los compuestos representativos de la invención se prueban contra leucemia resistente a P388/adriamicina como se muestra en la Tabla 8.

TABLA 3 Tumor Dosis Total Horario Pérdida de Valor T/C en % Libre de tumor Días de mg/kg peso en nadir observación g/ratón Adeno guamo de 960 16 horas de -0.4 16% X 33 pulmón humano infusión, días -0.4 16% 0/4 132 # 125 600 7,20 -0.4 15% 0/5 33 -0.4 15% 0/5 132 Mamario 16/C 720 4 horas de -2.0 18% 0/7 13 454 infusión, días -1.2 16% 0/7 13 1,4 Mamario 960 3 horas de -2.8 23% 0/7 27 16/C/Adr* infusión, días 1,4 Ln 4-- Adenocarcinoma 732 3-15 bolo •2.0 0 1/5 100 de colon #38 477 -2.8 9% 0/5 100 Adenocarcinoma 960 4 horas de -2.9 11% 2/7 20 de colon #38 infusión días -2.9 11% 1/7 100 600 6,13 -2.0 26% 0/7 20 -2.0 26% 0/7 100 Colon #51 720 3 horas de -1.1 8% 0/5 50 454 infusión días -2.8 12% 0/7 50 3,7 Pane 03 222 3 horas de -1.6 0 1/4 108 infusión • resistente a adriamicina TABLA 4 Dosis Total Horario Pérdida de Valor T/C en % Libre de tumor Días de Tumor mg/kg peso en nadir observación g/ratón Adenorcarcino- 82 Días 6-9 bolo -1.7 1 2/7 132 ma de colon 51 -1.2 18 1/7 132 #38 Mamario 16/C 82 Días 1-4 bolo -3.0 6 0/5 23 51 -1.2 13 0/5 23 Colon 51/A 96 Días 3-6, 9, 11 -3.0 14 0/6 32 96 bolo -2.3 28 0/6 32 Pane 02 82 Día 1-4 bolo -2.0 23 0/5 28 51 -1.2 42 0/5 28 Pane 03 124 Día 3-4, 6-14 -1.6 0 3/5 245 79 bolo -1.0 0 1/5 245 TABLA 5 Dosis Ruta del Horario Pérdida Muerte Libre de Días de Tumor Total fármaco peso en en % por tumor observación mg/kg nadir fármaco g/ratón Adenocarcino 340 í.p. Días 3-10 -2.0 0 5/5 168 ma de colon #38 196 i.p. Días 3-10 0.0 0 0 1/5 168 112 i.p. Días 3-10 +0.4 3 0 -- 168 550 p.o. Días 3-7 -2.8 0 0 5/5 168 275 p.o. Días 3-7 -0.4 0 0 3/5 168 Colon 51/A 500 p.o. Días 3-7 -4.6 0 4/5 0/5 31 250 p.o. Días 3-7 -1.6 16 0 0/5 31 Mamario 340 i .v. -> i.v. -7.1 32 5/6 0/6 22 16/C/Adr* p.o. 2x/día 1- 3/6 0/6 22 284 i . V. -> 4; p.o. -2.3 61 p.o. día 5 i.v. 2x/día l- ,- p.o.día 5-6 183 1. V. -> i.v. -4.3 39 0/4 0/4 22 p.o. 2x/día 1- 4 ,- p.o. día 5-6 * resistente a adriamicina u Tt tN 01 O -0 Q F a- ts 3 w F ?n i-i -n i-n I? in in m ui i ui -. \ ---. -3 ^ \ s ^-- •>--. •-- -N i- in i-n i-n i-n I o o o o ------- 0- CD >--. o u -Q e 3 J ------ O TABLA 7 Dosis Ruta del Horario Pérdida Valor Muertes Libre de Días de Ejemplo Total fármaco de peso T/C en % por tumor observación # mg/kg en nadir fármaco g/ratón 30 (h) 900 Infusión Infusión días 1- 0 29 1/6 0/5 63 i .v. 4 600 Infusión Infusión días 1- -0.7 23 0/5 0/5 63 i.v. 4 400 Infusión Infusión días 1- -1.0 46 0/5 0/5 63 i .v. 4 31(c) 224 í.v. 2x/Día, día 3-6 -4.4 0 0 1/5 28 oo 2x/Día, día 3-6 156.8 i . v. 2x/Día, día 3-6 -1.6 5 0 0/5 28 109.6 í.v. -1.6 6 0 1/5 28 TABLA 8 #de Dosis Ruta del Horario Pérdida de Muertes ILS Muerte Célula Días de E; )emplo Células Total fármaco peso en por celular tumoral observac #" P388/Adr mg/kg nadir fármaco del ion implantag/ratón umor das i.v. Log!o en el día 0 10 105 520 i.v. 3 horas Días 1-4 -3.75 3/7 54 3.5 0/7 129 deinfusión 105 320 i.v. 3 horas Días 1-4 -1.75 0/5 23 1.5 0/5 129 deinfusión 10* 200 i.v. 3 horas Días 1-4 -1.5 0/7 8 0.5 0/7 129 deinfusión 13 105 450 i.v. 3 horas Días 1-4 -3.0 2/7 38 2.5 0/7 129 deinfusión 10* 300 i . v . 3 horas Días 1-4 -1.75 0/7 15 1.0 0/7 129 Ln de nfusión O * 150 i.v. 3 horas Días 1-4 -1.75 2/8 8 0.5 0/8 129 deinfusión 30(h) 10' 450 i.v. 3 horas Día 1 -2.3 0/7 62 5.3 0/7 43 deinfusión 10* 280 i.v. 3 horas Día 1 -1.7 0/7 69 6.0 2/7 43 deinfusión 31(c) 10* 248 i .v. -> p.o* Días 1-4 -3.0 1/6 0 0 0/6 43 10» 112 i . v. - > p.o* Días 1-4 -2.7 0/6 0 0 0/6 43 34 10* 320 í.v. 3.5 Día 1 -3.6 5/5 TÓX1C LD10o 0/5 23 horas de o 198 infusión Día 1 -1.2 5/5 3.3 0/5 23 i.v. 3.5 41.7 123 horas de Día 1 -1.2 0/5 0.7 0/5 23 infusión 8.3 76 í.v. 3.5 Día 1 -0.4 0/5 0 0/5 23 horas de 0 * . - inyección p.o. día 4 debido a daño en la vena de la cola. %ILS= porcentaje incrementado en la vidaútil.

Durante la realización de la prueba descrita anteriormente, se han encontrado problemas de degradación con soluciones inyectables que no son hechas recientemente antes a la inyección. Se ha asumido entonces un proyecto para proporcionar soluciones inyectables que no se degraden en reposo de tal forma que los agentes antitumorales pueden ser usados en el campo médico para el tratamiento de tumores en pacientes . El compuesto del Ejemplo 6 tiene la siguiente estructura Y el nombre químico N-[[l-[[2-(dimetilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] metansulfonamida que tiene actividad antineoplástica citotóxica se usa en los estudios del proyecto. Este compuesto se designará algunas veces posteriormente en la presente como WIN 3337 para facilidad de referencia. El compuesto ha sido evaluado en estudios clínicos usando una formulación de solución ter inalmente estabilizada en ampollas a una concentración de 2.5 mg(ml en amortiguador de citrato (pH 5.5). con el fin de alcanzar una vida de almacén aceptable, se almacena la formulación bajo refrigeración (2-8°C) . El almacenamiento a altas temperaturas lleva a la formación de especies diméricas muy moderadamente solubles las cuales precipitan a baja concentración. Puede ser requerida una formulación secada por congelación para proporcionar un producto comercialmente aceptable el cual puede ser almacenado a temperatura ambiente. Estas formulaciones se emplean, como se muestra en la Tabla 9: TABLA 9 Se hacen formulaciones acuosas de WIN 33377 antes de las adiciones de estabilizantes. Se agregan estos estabilizantes a las soluciones a varias concentraciones: manitol (Fison AR grado M/2405), dextrano (Sigma Chemical Co. Clinical grado D-4751) y sacarosa (Prolabo Normapur Ar grado 27480.294). Se emplea un DSC- II Perkin-Elmer fijo a un accesorio de temperatura subambiental . Se recolectan los datos y se analizan sobre una microcomputadora Dell 210 con software DARES . Se realiza la calibración de temperatura, como se describe en el manual del fabricante, con indio y agua como materiales de referencia. Se sellan las muestras líquidas para análisis en charolas de acero inoxidable. Se cargan en el calorímetro a 27°C y se somete a un ciclo enfriamiento/calentamiento entre -53°C y 27°C. Las velocidades de calentamiento y enfriamiento son 5 grados/minuto. Se sellan también las muestras secadas por enfriamiento en charolas de acero inoxidable, pero bajo atmósfera de nitrógeno seco, para reducir la posibilidad de captación de humedad por la masa seca. Se emplea una velocidad de calentamiento y enfriamiento de 10 grados/minuto para mejorar la amplitud de cualquier señal en un secador por congelamiento de laboratorio. Se realizan las evaluaciones de estabilidad de muestras secadas por congelamiento usando una técnica de cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) la cual proporciona un ensayo de WIN 33377 o de las impurezas cromatográficas totales. Método de ensayo Usando el equipo de HPLC [Kontrol] , se realiza la cromatografía bajo las siguientes condiciones: Columna: Parisil ODS- 3, 5 µm, 10x0.46 cm Fase móvil: A:B (77:23 v/v) Donde A=amortiguador de acetato de amonio 0.5 M, pH 4.8 Y B= acetonitrilo Velocidad de flujo: 2.0 ml/min. Longitud de onda del detector: 258 nm Temperatura: 40°C Volumen de inyección: 20 µl Método de impurezas cromatográficas totalea Se usa una técnica de HPLC de elución de gradiente para determinaciones de impurezas cromatográficas totales, con las siguientes condiciones: Columna: Hypersil BDS, C18, 5 µm, 25x0.46 diámetro interno Fase móvil: A: 7.71 g/1 acetato de amonio + 6.0 ml/1 de ácido acético glacial + 10 ml/1 de trietilamina, ajustado a pH 4.8 B: acetonitrilo rnn irinneg de gradiente: Tiempo (min.) % de A % de B 0.00 80 20 30.00 80 20 60.00 60 40 70.00 60 40 70.01 80 20 80.00 80 20 Velocidad de flujo: 2.0 ml/min.

Longitud de onda del detector 438 nm Temperatura: 40°C Volumen de inyección: 25 µl Desarrollo de la formulación La primera etapa en cualquier desarrollo del proceso de secado por congelamiento caracteriza totalmente las propiedades fisicoquímicas de las soluciones antes de que se intente la formulación por secado por congelamiento. Se analizan muestras de las tres formulaciones, como se da en la Tabla 9, por DSC de acuerdo al procedimiento descrito anteriormente. Las temperaturas de transición relevantes se resumen en la Tabla 10. TABLA 10 Se encuentra que las tres mezclas exhiben diferente comportamiento fisicoquimico: se encuentra que la formulación a base de acetato es cristalina; se encuentra que la formulación a base de citrato es en parte cristalina mientras que la parte restante forma un vidrio; y la formulación a base de lactato forma un vidrio.

De estos tres tipos de comportamientos, la cristalización parcial presenta los problemas mas grandes para secado por congelamiento. La cristalización parcial es usualmente impredecible y, en el caso de armacéuticos producidos en viales, puede resultar en diferencias significativas en la estructura del producto congelado entre los viales. Esto, a su vez, puede provocar variaciones en la eficacia de secado entre viales. El resultado neto es una variación intra lote en la calidad del producto, tal como estabilidad, rehidratación y vida de almacén, entre viales. Las variaciones de contenido de humedad entre viales son el indicador más importante de este problema. La cristalización incompleta, como se exhibe por la formulación de citrato, puede ser prevenida agregando un excipiente formador de vidrio adecuado a la mezcla. Este excipiente previene la cristalización de otros materiales y resulta en vitrificación. La cantidad del formador de vidrio a ser agregada dependerá de la naturaleza del material cristalizante y la velocidad de cristalización. En la presente investigación se rechaza el citrato, principalmente en el terreno que en el amortiguador de citrato, el fármaco, aunque se disuelve durante la preparación inicial, cristaliza durante el almacenamiento a 4 ó 25°C dentro de unas cuantas horas. Ya que el secado por congelamiento no afecta la solubilidad del fármaco, de esta forma, cuando la formulación de citrato se rehidrata al punto de uso, puede ser encontrada algo de dificultad en la disolución y, adicionalmente, puede ocurrir cristalización esporádica durante la administración. El contenido de soluto total de todas las tres formulaciones es bajo, aproximadamente 1 a 2% peso/peso. Este nivel es insuficiente para mantener una estructura de tapón adecuada; es necesaria por lo tanto la reformulación. La formulación 1 cristalina requiere la adición de un agente de volumen. La formulación 3 (amorfa), por otra parte, requiere la adición de un formador de vidrio. Los estabilizantes seleccionados son manitol para la cristalina, y sacararosa o dextrano para la preparación amorfa. Son agregados en concentraciones de 50 mg/ml a las soluciones, descritas en la Tabla 9. Las muestras de las soluciones formuladas son entonces analizadas por DSC. Las mediciones DSC han producido valores de temperatura de transición de vidrio para las tres preparaciones. Estas temperaturas representan las temperaturas de secado primarias permisibles, si se minimiza el colapso y deterioro. El sistema que contiene dextrano tiene la temperatura de transición de vidrio y permitirá, en cuanto la velocidad de sublimación del hielo se incremente exponencialmente con el incremento de la temperatura, el ciclo de secado más corto. Sin embargo, WIN 33377 requiere administración repetida, y el dextrano puede, bajo tales circunstancias, provocar reacciones de choque anafiláctico. Esta formulación es por lo tanto rechazada por razones clínicas . Para las otras dos formulaciones se hacen los siguientes descubrimientos. El secado primario de formulación sacarosa/lactato debe realizarse a aproximadamente -40°C. Esto permite un margen de seguridad de 5°C (suficiente para el secador real empleado) para compensar los gradientes dentro del secador. Cada vial contiene 10 ml del producto a una profundidad de llenado aproximado de 1.63 cm. El diámetro del vial, 2.8 cm, da un área superficial del producto de 6.15 cm2. Se calcula la velocidad de sublimación efectiva para estas muestras como 0.226 g/vial/h de la masa del producto total, aproximadamente 9.4 g consisten de hielo, el resto son sólidos y agua no congelada. A una velocidad de 0.226 g/h se requieren aproximadamente 42 h para sublimar completamente el hielo a -40°C. La formulación de manitol/acetato mezclada el secado primario debe se realizado debajo de la transición térmica más baja detectada por DSC para la formulación de acetato, es decir, -30°c. Los volúmenes de llenado y dimensiones de los viales son los mismos, pero la sublimación puede ser realizada ahora a una temperatura mayor; la velocidad de sublimación efectiva calculada para estas muestras es 0.670 g/vial/h. Como anteriormente, 9.4 g del hielo tiende a ser sublimado; el tiempo de secado primario se reduce ahora a 14 h. Mantener los productos a las temperaturas recomendadas para la duración indicada anteriormente, someterlos a las temperaturas de la sublimación frontal que es igual a la del núcleo de hielo, asegurará la terminación del secado primario. La temperatura del producto debe entonces ser incrementada por medio de una rampa gradual de la temperatura de almacén, con el fin de eliminar la humedad residual en el producto. Prepa ación de los productos secados por congelamiento La Tabla II muestra variables del proceso para secado por congelamiento opcional de soluciones amortiguadas con acetato y lactato, estabilizadas, respectivamente, con manitol y sacarosa. TABLA 11 Formulación manitol Sacarosa Volumen del vial (ml) 20 20 Volumen de llenado (ml) 10 10 Profundidad de llenado (cm) 1.63 1.63 Temperatura de secado primaria (°C) -30 -40 Tiempo de secado primario (°C) 14 42 Velocidad de rampa de temperatura 4 4 4 durante el secado secundario grado/h Temperatura de secado final (°C) 25 25 Presión durante el secado primario 0.3 o.i (mbar) Las formulaciones de la presente invención son liofilizadas usando el siguiente proceso. Se eligen viales de dimensiones requiridas para ser rellenados por una formulación en base a los requerimientos de dosis. En la elección de viales para adecuar una dosis, el volumen de llenado no debe exceder alguna fracción del volumen del vial. Por ejemplo, llenado de 5 ml no debe ser introducido en un vial de menos 10 ml . Después del llenado, los viales son cargados en la cámara de secado y se colocan directamente en cubiertas refrigeradas las cuales son pre enfriadas a 4°C. Se colocan termopares dentro de un número de viales para monitorear la temperatura de la formulación durante el proceso de liofilización. Se permite a los viales equilibrarse a la temperatura de las cubiertas (4°C) antes de disminuir las temperaturas de las cubiertas a -40°C para la formulación de sacarosa y -30°C para la formulación de manitol. Una vez que se alcanza -40°C y -30°C, respectivamente para las formulaciones de sacarosa y manito. (se incluye una etapa de recocido para la formulación de manitol en esta etapa) . Después de este período de tiempo los serpentines del condensador se enfrían a -60°C y se cambia la bomba de vacío para evacuar la cámara del condensador seguido por el proceso de secado primario y secundario. En el proceso de secado primario, la válvula principal entre el condensador y la cámara de secado se abre y la c' ara de secado se evacúa a una presión de aproximadamente 100 micrones con una corriente de gas de nitrógeno. Esta porción del ciclo de liofilizado (secado primario) requiere aproximadamente 40 a 50 horas. Se termina el proceso de secado primario cuando todo el hielo desaparece de la matriz de congelación. En el proceso de secado secundario, se eleva la temperatura de -20°C o -30°C a +25°C para eliminar toda la humedad residual que no se eliminó durante el proceso de secado primario. Este período de secado secundario se requiere por aproximadamente 15 horas. Después de la terminación del proceso de secado secundario la válvula principal se cierra y se llena la cámara de secado con nitrógeno para mantener un ligero vacío en la cámara. Se activa el ariete de detención y las cerraduras se empujan hacia debajo en los viales. Se equilibra entonces la cámara de secado a presión atmosférica y se abre la puerta de la cámara para eliminar los viales y aplican sellos de sujeción. Los viales son almacenados entonces a la temperatura prescrita hasta reconstitución con agua para inyección. Resultados de estabilidad Se evalúa la estabilidad de los productos secos después del almacenamiento a 30°C, 40°C y 50°C por hasta 4 semanas. Se terminan los estudios de impurezas cromatográficas y ensayo sobre las muestras. Los resultados para la formulación de manitol no muestran cambio significativo en el ensayo de fármaco después de almacenar el producto por 4 semanas a temperaturas hasta de 50°C. Las impurezas cromatográficas totales se incrementan de 0.35 inicial a 0.54% peso/peso a 30°C, 0.49% peso/peso a 40°C y 0.56% peso/peso a 50°C. El contenido de humedad del producto es 1.4% peso/peso y la apariencia de la masa es satisfactoria, es decir, no se observa colapso del producto. Dos de los viales, sin embargo, no se rehidratan a una solución amarilla clara. Los viales los cuales pueden ser reconstituido para dar una solución clara tienen un pH más bajo (5.0) que los viales que no dan soluciones claras (pH 5.6) . Se considera que este cambio de pH se debe a la evaporación de ácido acético durante el secado por congelamiento. Los resultados de estabilidad para la formulación de sacarosa (con humedad residual 5%) indican que no hay cambio en el ensayo o impurezas cromatográficas totales después de almacenar a 30°C y 40°C por 4 semanas. Los viales almacenados a 50°C muestran una disminución en el ensayo y un incremento en las impurezas cromatográficas totales. Se observa algo de colapso de la masa secada por congelamiento después de dos semanas de almacenamiento a todas las temperaturas. Se muestran las estabilidades de WIN 33377/formulación de manitol en la Tabla 12, mientras que las estabilidades para WIN 33377/formulación de sacarosa se muestran en la Tabla 13. TABLA 12 Inicial 2 semanas 4 semanas Temp. % del % de % del % de % del % di" fármaco p/p Impurezas fármaco Impurezas fármaco Impurezas p/p p/p p/p p/p p/p Temp. 101.6 0.35 Amb. 30°C 100.3 0.43 98.0 0.54 40°C 102.5 0.54 100.9 0.49 50°C 101.0 0.65 98.1 0.56 TABLA 13 Inicial 2 semanas 4 semanas Temp. % del % de % del % de % del % de~ fármaco p/p Impurezas fármaco Impurezas fármaco Impurezas p/p p p p/p P/P P/p Temp. 98.4 0.35 Amb. 30°C - - 98.4 0.32 96.8 0.33 40°C - - 98.2 0.31 98.1 0.34 50°C - - 96.8 0.51 95.2 0.87 El estudio ha identificado una formulación secada por congelación adecuada (lactato-sacarosa) , pero esta puede ser optimizada adicionalmente y se incorporan requerimientos de uso final adicionales. Se ha encontrado que la concentración del fármaco en la solución inicial puede ser incrementada a 20 mg/ml, de esta forma teniendo los volúmenes de llenado y permitiendo una reducción en el tiempo de secado primario. Es importante también equilibrar la isotonicidad por la adición de cloruro de sodio. Ya que la sal afectará la temperatura de transición de vidrio (Tg') , se examina por DSC las formulaciones revisadas (Tabla 14) . La temperatura de transición de vidrio se da en la Tabla 15. TABLA 14 : Formulaciones de prueba usadas para determinar los efectos relativos de NaCl y sacarosa sobre solución de WIN 33377 amortiguada Formulación A B C D WIN 33377 20.0 mg 20.0 mg 20.0 mg 20.0 mg Acido láctico (0.1 M) 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml Hidróxido de sodio (0.5 M) 12 µl 12 µl 12 µl 12 µl Sacarosa 100 mg 50 mg 40 mg 30 mg NaCl 2.7 mg 2.7 mg 3.8 mg 5.0 mg Agua para inyección 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml pH 3.99 3.99 3.99 3.99 TABLA 15 ; Valores de temperatura de transición de vidrio medidos para las formulaciones mostradas en la Tabla 4.

Formulación Tg' (°C) Formulación de control A sin NaCl -35 A -37 B -38 C -42.5 D "45.5 Como se muestra, la adición de NaCl reduce la temperatura vitrea del concentrado congelado. El NaCl tiene una temperatura de transición de vidrio que es mucho menor que la de la sacarosa (-87°C comparada a -32°C) . De esta forma, en cuanto la fracción de peso de NaCl se incrementa (A a D) , entonces la temperatura de transición de vidrio cae a el valor para NaCl puro. La adición de NaCl a la formulación de sacarosa 5% estándar provoca una reducción en la temperatura de transición de vidrio de 2°C. La reducción del nivel de sacarosa y un incremento compensatorio en la concentración de NaCl la cual es necesaria para mantener la isotonicidad, provoca reducción adicional en la temperatura de transición del vidrio. La temperatura de transición de vidrio del producto seco puede ser considerada para ser la temperatura máxima a la cual el producto debe ser expuesto. Exceder la temperatura vitrea resultará en el colapso eventual del tapón, llevando al producto a la forma líquida, en el cual las velocidades del estado de difusión se incrementarán rápidamente, llevando a la degradación del material activo. La temperatura de transición de vidrio depende del contenido de la humedad; de esta forma cualquier variación del contenido de humedad dentro de un lote provocará variación en la temperatura de transición vitrea. De esta forma, es prudente almacenar el producto al menos a 5°C debajo de la temperatura vitrea, para permitir la variación en la temperatura de almacenamiento seguro máximo dentro de un lote. Formulación que contiene solución WTN 33377 (100 mg) y sacarosa en un vial de 2Q0ml E i i nte Cantidad (mg por vial) WIN 33377 100.0 Sacarosa 250.0 Cloruro de sodio 5.0 Solución de ácido láctico 0.5 M 1.0 ml Hidróxido de sodio 1. OM 57.0 µl Agua para inyectar 5.0 ml PH (rango 3.7-4.30) 4.00 La estabilidad de la formulación de sacarosa preferida se evalúa durante el almacenamiento a 30°C y 40°C por hasta 6 meses. Los resultados del ensayo y pH son presentados en la Tabla 16. El producto tiene un contenido de humedad inicial de 1.3 % p/p. se observa el colapso del producto después de almacenar dos semanas a 40°C. Esto se esperaba ya que esta temperatura de almacenamiento esta cerca de la temperatura de transición vitrea para este lote (42°C) . Los resultados de estabilidad indican que el producto es químicamente estable, es decir, no se observan cambios en el ensayo o pH después de 6 meses de almacenamiento a 30°C o 40°c. TABLA 16 WIN 33377 (% peso/volumen) Tiempo Temp. (°C) análisis duplicado pH Inicial Ambiental 90.85, 90.95 3.95 3 semanas 30°C 89.13, 89.28 3.96 40°C 90.14, 89.79 3.94 2 meses 30°C 90.81, 92.36 3.95 40°C 88.59, 89.49 3.95 4 meses 30°C 93.88, 91.93 3.99 40°C 95.52, 95.2 4.00 6 meses 30°C 90.08, 87.68 4.02 40°C 88.40, 86.75 4.05 La estabilidad mejorada producida por la presente invención permite almacenar el producto a temperatura ambiente e incrementa su vida de almacén. Este producto liofilizado es adecuado para empacar ya sea en un vial de vidrio convencional o en una jeringa prellenada. Las formulaciones tienen gran utilidad en el tratamiento de tumores hasta ahora no proporcionadas .

Claims (10)

1. REIVINDICACIONES 1. Una formulación reconstituida liofilizada para el tratamiento de tumores de mamíferos caracterizada porque comprende : a) de aproximadamente 1 a aproximadamente 50 mg/ml de un agente antitumoral que tiene la fórmula (I)
2. II en donde n es 2 ó 3 ; R1 y R2 son independientemente alquilo inferior; Q es un residuo elegido del grupo que consiste de
3. CH2NHR3, CH2NHCHO, CH=N-AR, C(0)NR5R6, CH2N(C2Hs)CHO, CH2N (R4) P (O) (O-alquilo inferior)., CH2N=CH-N(R9) (R10) , CH2N (R4) C (O) CF3 y CH2N (R4) C (O) OR7; R3 es hidrógeno o alquilo inferior; R4 es hidrógeno, alquilo inferior o Ar; R5 es hidrógeno, alquilo inferior o Ar; R6 es hidrógeno, o alquilo inferior; R7 es alquilo inferior o Ar;
4. R8 es hidrógeno, alquilo inferior, alcoxi inferior, o hidroxi ; Ar es fenilo o fenilo substituido con metilo, metoxi, hidroxi, halógeno o nitro, con la condición de que cuando n es 2, R1 y R2 son etilo, R8 es hidrógeno y Q es CH2NHS02Ar, el grupo Ar no puede ser 4-monosubstituido por metilo o halógeno; y R9 y R10 son independientemente alquilo inferior; 0 una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo. b) de aproximadamente 10 a aproximadamente 125 mg/ml de un estabilizante seleccionado del grupo que consiste de manitol y sacarosa; y c) de aproximadamente 0.025 a aproximadamente 0.25 M de un amortiguador de lactato, la formulación que tiene un pH de aproximadamente 3.0 a aproximadamente 4.5. 2. La formulación liofilizada reconstituida de conformidad con la reivindicación 1 caracterizada porque además comprende de aproximadamente 1.0 a aproximadamente 10.0 mg/ml de cloruro de sodio. 3. La formulación liofilizada reconstituida de conformidad con la reivindicación 1 caracterizada porque el amortiguador de lactato es lactato de sodio. 4. Una formulación liofilizada reconstituida para el tratamiento de tumores de mamíferos caracterizada porque comprende : a) de aproximadamente 1 a aproximadamente 20 mg/ml de un agente antitumoral que tiene la fórmula (II) donde n es 2 ó 3 ; R1 y R2 son independientemente alquilo inferior; Q es un residuo elegido del grupo que consiste de
5. CH2NHR3, CH2NHCH0, CH=N-AR, C(0)NR5R6, CH2N (R4) C (0) R7, CH2N(C2H5)CHO, CH2N(R4)P(0) (O-alquilo inferior)2, CH2N=CH-N(R9) (R10), CH2N(R )C(0)CF3 y CH2N (R4) C (0) OR7; R3 es hidrógeno o alquilo inferior; R4 es hidrógeno, alquilo inferior o Ar; R5 es hidrógeno, alquilo inferior o Ar; R6 es hidrógeno, o alquilo inferior; R7 es alquilo inferior o Ar; R8 es hidrógeno, alquilo inferior, alcoxi inferior, o hidroxi; Ar es fenilo o fenilo substituido con metilo, metoxilo, hidroxi, halógeno o nitro, y R9 y R10 son independientemente alquilo inferior; 0 una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo. b) de aproximadamente 30 a aproximadamente 100 mg de un estabilizante seleccionado del grupo que consiste de manitol y sacarosa; c) de aproximadamente 0.025 a aproximadamente 0.25 M de un amortiguador de lactosa, la formulación que tiene un pH de aproximadamente 3.5 a 4.5. 5. La formulación liofilizada reconstituida de conformidad con la reivindicación 4 caracterizada porque además comprende de aproximadamente 1.0 a aproximadamente 10.0 mg/ml de cloruro de sodio.
6. 6. La formulación liofilizada reconstituida de conformidad con la reivindicación 4 caracterizada porque el amortiguador de lactato es lactato de sodio.
7. 7. Una formulación liofilizada reconstituida para el tratamiento de tumores de mamíferos caracterizada porque comprende : a) 1-50 mg de N- [ [1- [ [2- (dimetilamino) etil] amino] -9-oxotioxanten-4-il] metil] metansulfonamida; b) 0.025 a aproximadamente 0.25 M de amortiguador de lactato de sodio; c) de aproximadamente 10 a 125 mg de sacarosa; d) de aproximadamente 1.0 a aproximadamente 10 mg de cloruro de sodio; e) cantidad suficiente con agua a 1.0 ml .
8. 8. Un método para tratar un tumor susceptible en un mamífero el cual se caracteriza porque comprende administrar al mamífero una cantidad de la formulación de conformidad con la reivindicación 1 efectiva para reducir el tamaño del tumor.
9. 9. Un método para tratar un tumor susceptible en un mamífero el cual se caracteriza porque comprende administrar al mamífero una cantidad de la formulación de conformidad con la reivindicación 4 efectiva para reducir el tamaño del tumor.
10. 10. Un método para tratar un tumor susceptible en un mamífero el cual se caracteriza porque comprende administrar al mamífero una cantidad de la formulación de conformidad con la reivindicación 7 efectiva para reducir el tamaño del tumor.