MXPA97006836A - Semilla de aceite de brassica mejorada que lleva un aceite endogeno con concentraciones deseables de acidos grasos saturados e insaturados - Google Patents

Abstract

Una semilla de aceite de Brassica mejorada, una planta mejorada capaz de formar la misma, y un aceite vegetal endógeno, comestible, mejorado derivado de la semilla aceite de Brassica son proporcionados. El aceite vegetal endógeno, comestible de la presente invención posee una distribución mejorada deácidos grasos después de la trituración y extracción en ausencia de hidrogenación u otra modificación química o física. El contenido deácido alfalinolénico es menor que 3.5 por ciento por peso, el contenido deácido oleico es de por lo menos 77 por ciento por peso, el contenido total deácido graso saturado no es más de 4.5 por ciento peso y el contenido deácido erúcico es de no más de 2 por ciento por peso basado en el contenido total delácido graso. Cada una de las características citadas del aceite es controlada por medios genéticos y sorprendentemente es expresada simultáneamente (por ejemplo, en el campo bajo condiciones de cultivo de Brassica desemilla de aceite convencionales) en la ausencia de la cancelación como el resultado de la formación de los otros rasgos citados. La semilla de aceite de Brassica mejorada es capaz de formar por la germinación una planta que tiene características agronómicas satisfactorias, la cual produce después de la autopolinización semillas de aceite de Brassica que poseen la distribución mejorada, especificada deácidos grasos dentro del aceite que estápresente en ellas.

Description

SEMILLA DE ACEITE DE BRASSICA MEJORADA QUE LLEVA ÜN ACEITE ENDÓGENO CON CONCENTRACIONES DESEABLES DE ÁCIDOS GRASOS INSATURADOS Y SATURADOS DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La semilla de aceite de Brassica está creciendo como un cultivo de semilla de aceite cada vez más importante en el mundo. Como una fuente de aceite vegetal, actualmente está clasificado detrás de solamente la soya y la palma y está virtualmente empatado con el girasol para la posición número tres de importancia comercial. El aceite se utiliza como ambos de una aceite para ensalada y aceite para cocinar en muchas partes del mundo. En su forma original, el aceite de Brassica, frecuentemente conocido como aceite de semilla de colza, se encontró que tiene efectos dañinos sobre la salud humana, debido a su concentración relativamente elevada de ácido erúcico, el cual comúnmente está presente en los cultivos nativos en concentraciones de 30 a 50 por ciento por peso basado en el contenido total de ácido graso. En el pasado, los científicos de plantas identificaron una fuente de plasma de germen de aceite de semilla de colza con bajo contenido de ácido erúcico. Véase, Capítulo 6, intitulado 2The Development of Improved Rapeseed Cultivare" por B.R. Stefansson de "High and Low Erucic Acid Rapeseed Oils" editado por John K.G.

Kramer, Frank D. Sauer, y Wallace J. Pigden, Academic Press Canadá (1983) . En Canadá, los científicos de las plantas enfocaron sus esfuerzos en crear las llamadas variedades con "doble bajo contenido", las cuales fueron bajas en ácido erúcico en el aceite y bajas en glucosilación en la harina sólida restante, después de la extracción del aceite (es decir, un contenido de ácido erúcico de menos del 2 por ciento por peso basado en el contenido de ácido graso total y un contenido de glucosinolato de menos de 30 micromoles por gramo de harina sin aceite) . Estas formas de calidad superior de la colza desarrolladas en Canadá son conocidas como cánola. Por el contrario, los científicos europeos trabajaron para lograr solamente tipos "individuales de bajo contenido", los cuales fueron bajos en ácido erúcico, pero no intentaron mejorar la calidad de la harina sólida, la cual retuvo un contenido de glucosinolato de aproximadamente 100 micromoles por gramo de harina sin aceite. El resultado de este cambio principal en la composición del ácido graso del aceite de semilla de colza fue la creación de un nuevo perfil de aceite, el cual frecuentemente contiene de aproximadamente 8 a 15 por ciento por peso del ácido alfa-linolénico, de aproximadamente 62 por ciento por peso de ácido oleico basado en el contenido del ácido graso total y aproximadamente de 6 por ciento o más por peso de ácidos grasos saturados e la forma de ácido esteárico y ácido palmítico basado en el contenido total de ácido graso. Ya que el porcentaje total de aceite en la semilla no cambia apreciablemente cuando se desarrollan nuevos cultivos con bajo contenido erúcico, parece ser que el componente de aceite de ácido erúcico ha sido re-dirigido en otros ácidos grasos dentro del aceite. Véase, Capítulo 7 intitulada "The Introduction of Low Erucic Acid Rapeseed Varieties Into Canadian Production" por J.K. Daun de la publicación de Academic Press Canadá (1983 identificada previamente; "Prospects for the Development of Rapeseed (B. napus L.) With Improved Linoleic and Linolenic Acid Content" por N.N. Roy and A. W. Tarr, Planta Breeding, Vol. 98, Páginas 89 a 96 (1987); y "Genetic Control of Fatty Acid Composition in Oilseed Crops" por R.K. Downey y D.G. Dorrell, Proc . Flax Inst . U. S. A . , Vol. 47, No. 3, Páginas 1 a 3. Durante los años los científicos han intentado mejorar el perfil de ácidos grasos para el aceite de cánola. Véase por ejemplo, el Capítulo 10, por Gerhard Róbbelen intitulado "Changes and Limitations of Breeding for Improved Polyenic Fatty Acids Content in Rapeseed" de "Biotechnology for the Oils and Fats Industry" editado por Colin Ratledge, Peter Dawson, and James Rattray, American Oils Chemists1 Society (1984) .

"Genetical and Physiological Investigations on Mutants for Polyenoic Fatty Acids in Rapeseed, Brassica napus L." por G. Róbbelen y A. Nitsch que aparece en Z. Planzenzüchtg. , 75, Páginas 93 a 105 (1975), y "Opportunities and Problems in Modification of Levéis of Rapeseed C18 Unsaturated Fatty Acids" por G. Rakow y D.I. McGregor que aparece en J. Am. Oil Chem. Soc. 50(10), Páginas 400 a 403 (1973) son descripciones representativas de una mutante de semilla de colza que incluye una cantidad menor que la usual de ácido alfa-linolénico en el aceite. La Patente de los Estados Unidos No. 4,948,811 describe un aceite para ensalada/cocinar, en el que los componentes de ácido graso menos ventajosos son componentes separados físicamente de otros componentes de ácido graso después de la eliminación del aceite de la semilla de colza. Un medio directo operativo para proporcionar la actualmente reclamada distribución altamente ventajosa de ácidos grasos en el aceite de semilla de colza endógena estuvo totalmente ausente . La Publicación Internacional No. WO90/10380, publicada el 20 de septiembre de 1990 y la Solicitud de Patente Europea No. 0 343 753, intitulada "Production of Improved Rapeseed Exhibiting and Enhanced Oleic Acid Content" publicada el 12 de julio de 1989, describe la producción de semilla de colza que incluye una concentración mayor que lo usual de ácido oleico en el aceite. Una descripción similar se encuentra en la Solicitud de Patente de los Estados Unidos No. de Serie 286,708, cedida comúnmente, presentada el 20 de diciembre de 1988. La actualmente reclamada distribución altamente ventajosa de ácido graso no se describió. La Publicación Internacional No. W091/15578, publicada el 17 de octubre de 1991, intitulada "Production of Improved Rapeseed Exhibiting a Reduced Saturated Fatty Acid Content" describe la producción de semilla de colza que incluye una concentración menor que la usual de ácidos esteárico y palmítico en el aceite. Una descripción similar se encontró en la Patente de los Estados Unidos No. 5,387,758. La actualmente reclamada distribución altamente ventajosa de ácidos grasos no se describió. La Publicación Internacional No. WO92/03919 publicada el 19 de marzo de 1992, intitulada "Seeds, Plants and Oils With Altered Fatty Acids Profiles" describe un esfuerzo para modificar la distribución de ácido graso en un aceite obtenido de las semillas de colza. La distribución altamente ventajosa, actualmente reclamada de ácidos grasos no se describió. Como se reportó en las Patentes de los Estados Unidos Nos. 4,517,763; 4,658,084; y 4,658,085; los procesos de hibridación adecuados para la producción de semilla de colza son conocidos en los que la tolerancia al herbicida es utilizada. La necesidad ha permanecido para aceite vegetal endógeno comestible, obtenido de las semillas de Brassica en ausencia de hidrogenación u otra modificación química o física que posea una distribución general mejorada de ácido alfa-linolénico en baja concentración, ácido oleico en una concentración elevada, ácidos grasos saturados en, y una concentración extremadamente baja y simultáneamente una concentración baja en ácido erúcico como se reclama en la presente. En vista de la naturaleza altamente compleja del as rutas de desaturación y alargamiento molecular que son operativas durante la formación de ácido graso en semillas de aceite Brassica, el logro de este objetivo no había sido realizado por investigadores con habilidad en el pasado como se evidencia por los datos reportados en las publicaciones identificadas en lo anterior. Es un objeto de la presente invención proporcionar una semilla de aceite de Brassica madura, mejorada, de producir un aceite vegetal endógeno, comestible que tenga distribución mejorada nueva de ácidos grasos después de la trituración y extrusión sencillas. Es un objeto de la presente invención, proporcionar una planta Brassica de semillas de aceite que tenga características agronómicas satisfactorias, la cual por la autopolinización sea capaz de formar semillas de aceite Brassica que produzca aceite vegetal endógeno con distribución mejorada nueva de ácidos grasos después de la trituración y extracción sencillas. Es otro objeto de la presente invención proporcionar un aceite vegetal comestible, mejorado, que tenga distribución mejorada nueva de ácidos grasos formados por trituración y extracción sencillas de las semillas de aceite de Brassica en ausencia de hidrogenación u otra modificación química o física. Es otro objeto de la presente invención proporcionar un aceite vegetal endógeno, mejorado derivado de las semillas de aceite Brassica en ausencia de la hidrogenación u otras modificaciones químicas o físicas de buen sabor que tenga características saludables y mejoradas, combinadas con las características de estabilidad atractivas que se producen en una base altamente económica. Es otro objeto de la presente invención proporcionar semillas de aceite Brassica maduras capaces de producir un aceite endógeno comestible que tiene una distribución mejorada de ácidos grasos que lo hacen adecuado para muchos usos finales diferentes, por lo que simplifica el manejo, trituración y requisitos de refinamiento para tal producto de la semilla.

Es aún otro objeto de la presente invención, proporcionar en una base económicamente factible y rápida un derivado de ácido endógeno nuevo de semillas de aceite Brassica que sea muy adecuado para un rango amplio de usos finales, por lo que simplifica el almacenamiento y consideraciones de inventario para aquellos quienes suministran el aceite vegetal mejorado de la presente invención. Estos y otros objetos y ventajas de la invención serán aparentes para aquellos con habilidad en la técnica a partir de una lectura de la siguiente descripción y reivindicaciones anexas. Una semilla de aceite de Brassica madura se proporciona, que es capaz de producir un aceite vegetal endógeno comestible que tiene una distribución mejorada de ácidos grasos, la semilla de aceite Brassica que lleva un aceite el cual presenta después de la trituración y extracción en ausencia de hidrogenación u otra modificación química o física (1) un contenido de ácido alfa-linolénico de menos de 3.5 por ciento por peso basado en contenido total de ácido graso, (2) un contenido de ácido oleico de por lo menos 77 por peso, basado en el contenido total de ácido graso, (3) un contenido de ácido graso natural, total de no más de 4.5 por ciento por peso basado en el contenido de ácido graso total y (4) un contenido de ácido erúcico de no más de 2 por ciento por peso basado en el contenido de ácido graso total y en el que cada uno de los rasgos citados del aceite es controlado por medios genéticos en la ausencia de cancelación como el resultado de la formación de otros rasgos citados y en el que la semilla de aceite de Brassica es capaz de formar durante la germinación una planta de Brassica de semilla de aceite que tiene características agronómicas satisfactorias, lo cual produce después de la autopolinización, semillas de aceite de Brassica que poseen la distribución mejorada, especificada de ácidos grasos dentro del aceite presente en ellas . Se proporciona una planta de Brassica de semilla de aceite que tiene características agronómicas satisfactorias, la cual por la autopolinización es capaz de formar semillas de aceite que producen un aceite vegetal endógeno que tiene una distribución mejorada de ácidos grasos, las semillas de aceite que llevan un aceite el cual presenta después de la trituración y extracción en ausencia de hidrogenación u otra modificación química o física (1) un contenido de ácido alfa-linolénico de menos de 3.5 por ciento por peso basado en el contenido total de ácido graso, (2) un contenido de ácido oleico de por lo menos 77 por ciento por peso basado en el contenido total de ácido graso, (3) un contenido total de ácido graso de no más de 4.5 por ciento por peso, en base al contenido total de ácido graso y (4) un contenido de ácido erúcico de no más del 2 por ciento por peso, en base al contenido total de ácido graso y en el que cada uno de los rasgos citados del aceite es controlado por medios genéticos en ausencia de cancelación como el resultado de la formación de otros rasgos citados . Se proporciona un aceite vegetal endógeno, comestible, mejorado que tiene una distribución mejorada de ácidos grasos formados por la trituración y extracción de las semillas de aceite de Brassica en ausencia de hidrogenación u otra modificación química o física la cual presente (1) un contenido de ácido alfa-linolénico de menos de 3.5 por ciento por peso en base al contenido total de ácido graso, (2) un contenido de ácido oleico de menos del 77 por ciento por peso, en base al contenido total de ácido graso, 83) un contenido total de ácido graso saturado de no más de 4.5 por ciento por peso en base al contenido de ácido graso total y (4) un contenido de ácido erúcico de no más de 2 por ciento por peso en base al contenido total de ácido graso y en el que cada uno de los rasgos citados del aceite se controló por medios genéticos en ausencia de la cancelación como el resultado de la formación de los otros rasgos citados. BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La FIGURA 1 ilustra a modo de ejemplificación, la formación de nuevo material de la planta Brassica napus de acuerdo con la presente invención, designada 94SN-52682 como se describió en mayor detalle en el Ejemplo I. Las concentraciones de ácido graso discutidas en la presente se determinaron de acuerdo con un procedimiento estándar en el que el aceite es retirado de las semillas de aceite de Brassica por trituración y se extrae como metiléster del ácido graso después de la reacción con metanol y metóxido de sodio. Enseguida, el éster resultante es analizado para el contenido de ácido graso por cromatografía de gas líquido utilizando una columna capilar, lo cual permite la separación en base del grado de insaturación y longitud de la cadena. Este procedimiento de análisis es descrito en el trabajo de J.K. Duan et al., J. Amer. Oil Chem. Soc. 60: 1751-1754 (1983) la cual se incorpora en la presente para referencia. Se obtiene un aceite vegetal endógeno, comestible, nuevo de semillas de aceite de Brassica en la ausencia de hidrogenación u otra modificación química o física, que posee una distribución total mejorada de ácido alfa-linolénico en una concentración baja, ácido oleico en una concentración elevada, ácidos grasos saturados en una concentración extremadamente baja y ácido erúcico en una concentración baja como se especifica en lo siguiente. Cada rasgo es controlado por medios genéticos y es expresado sorprendentemente en una combinación nueva en ausencia de la cancelación como resultado de la formación de otros rasgos citados. La baja concentración de ácido alfa-linolénico como se especificó imparte estabilidad oxidativa aumentada. La concentración elevada de ácido oleico como se especificó imparte además estabilidad térmica y oxidativa aumentadas y adicionalmente proporciona beneficios nutricionales. La concentración extremadamente baja de ácidos grasos saturados como se especificó, imparte un beneficio nutricional significativo para aquellos relacionados con la reducción al mínimo de colesterol en suero. También, la baja concentración de ácido erúcico como se especificó ofrece un beneficio nutricional. El aceite endógeno comestible, nuevo de la presente invención es formado por la trituración sencilla de las semillas de aceite de Brassica y la extracción física sencilla del aceite sin el gasto de hidrogenación u otra modificación química o física. Inesperadamente, se ha encontrado por medio de investigación empírica, que cada uno de los rasgos citados del aceite vegetal endógeno de la presente invención, puede ser proporcionado aunque bajo el control de medios genéticos independientes, y puede ser combinado por el cultivo de plantas (por ejemplo, en formación de pirámides) u otros medios adecuados y subsiguientemente expresados en una planta de colza resultante sin cancelación de uno o más de los otros rasgos citados. Los medios genéticos requeridos para cada rasgo puede ser formado por la mutagénesis de plasma de germen de Brassica de semilla de aceite, disponible comercialmente, o puede ser seleccionado de fuentes disponibles, no convencionales de plasma de germen de Brassica de semilla de aceite, el cual ya puede incluir mutaciones inducidas o que se presentan en forma natural, capaces de expresar uno o más de los rasgos citados . Durante la combinación de una planta que tiene uno o dos de los medios genéticos requeridos para un rasgo o rasgos específicos, puede servir ya sea como un padre macho o hembra . Cuando puede llevarse a cabo la mutagénesis, de preferencia se seleccionan células de la planta, capaces de la regeneración (por ejemplo, semillas, microesporas, óvulos, polen, partes vegetativas) de cualquiera de las variedades de Brassica de semilla de aceite (por ejemplo, cánola) las cuales son reconocidas que tienen características agronómicas superiores. Tales células de la planta pueden ser derivadas de plantas Brassica napus. Brassica campestris. o Brassica júncea. Las plantas de Brassica napus pueden ser ya sea de los tipos de verano o invierno. Las células de la planta Brassica de semilla de aceite son sometidas por lo menos en una generación a mutagénesis y una planta de Brassica de semilla de aceite es regenerada a partir de las células para producir una planta de Brassica de semilla de aceite y para formar una semilla de aceite de Brassica en por lo menos una generación subsiguiente que posee la capacidad para formar uno o más de los rasgos de calidad del aceite de ácido graso atípico como se especifica en detalle en lo siguiente con cada rasgo que está bajo el control genético. Las plantas de Brassica de semilla de aceite padres que poseen los medios genéticos requeridos para la expresión del rasgo de ácido graso especificado, pueden ser producidas siguiendo la mutagénesis por medio de la autopolinización durante un número suficiente de generaciones (por ejemplo, 2 a 8 generaciones) para lograr la homogeneidad genética sustancial. Alternativamente, la característica deseada puede ser fijada por medio de la formación de una nueva planta a partir de una célula de microespora haploide, provocando el haploide a doble, y produciendo una planta diploide homozigota de acuerdo con las técnicas conocidas. La mutagénesis de preferencia se realiza sometiendo las células de la planta (por ejemplo, una semilla de aceite) a una técnica seleccionada del grupo que consiste del contacto con un mutágeno químico, irradiación gamma, y una combinación de los anteriores, durante una duración suficiente para realizar la modificación genética deseada pero insuficiente para destruir completamente la viabilidad de las células y su capacidad para ser regeneradas en una planta. La semilla de aceite de Brassica de preferencia posee un contenido de humedad de aproximadamente 5 a 6 por ciento por peso en el momento de tal mutagénesis. La mutagénesis deseada puede ser realizada por el uso de medios químicos, tales como por contacto con metilsulfonato de etilo, etilnitrosourea, etc., y por el uso de medios físicos tales como rayos X, etc. La mutagénesis también puede llevarse a cabo por radiación gamma tal como aquella suministrada por una fuente de Cesio 137. La radiación gamma de preferencia es suministrada a las células de la planta (por ejemplo, una semilla de aceite) en una 'dosis de aproximadamente 60 a 200 Krad., y de mayor preferencia en una dosis de aproximadamente 60 a 90 Krad. Debe entenderse que aun cuando se opera a una dosis de radiación dentro de los rangos especificados, algunas células de la planta (por ejemplo, las semillas de aceite) pueden perder completamente su viabilidad y deben ser desechadas. Véase la Solicitud de Patente de los Estados Unidos No. de Serie 286,708, cedida comúnmente, presentada el 20 de diciembre de 1988, para una discusión futura del rasgo de ácido oleico controlado genéticamente y su formación, y la Patente de los Estados Unidos No. 5,387,758, cedida comúnmente para otra discusión de ácido graso saturado y el rasgo y su formación controlados genéticamente. Los contenidos de estas descripciones se incorporan en la presente para referencia .

Se apreciará que el tratamiento de mutagénesis potencialmente resultará en una amplia variedad de cambios genéticos dentro de las plantas de Brassica de semilla de aceite, las cuales son producidas. Muchos de estos cambios serán nocivos para la viabilidad de la planta resultante durante un periodo de tiempo prolongado. Algunos cambios también producirán plantas viables, las cuales poseen características agronómicas deficientes. Tales tipos pueden ser desechados sencillamente. En forma alternativa, las plantas las cuales han sufrido la producción de la mutación deseada unida con los rasgos agronómicos indeseables, pueden ser retenidas y utilizadas como criadero o material fuente a partir del cual las plantas que tienen los rasgos objetivo unidos con las características agronómicas satisfactorias, finalmente son derivados por el cultivo de la planta. Después de la mutagénesis, las plantas de Brassica de semilla de aceite son regeneradas a partir de las células tratadas, utilizando técnicas conocidas. Por ejemplo, las semillas de aceite resultantes, pueden ser plantadas de acuerdo con los procedimientos de crecimiento de Brassica convencionales y después de la autopolinización, las semillas de aceite de Brassica son formadas en ella. Alternativamente, las plántulas haploides duplicadas pueden ser extraídas para formar inmediatamente plantas homogéneas. El cultivo de la semilla de aceite de Brassica tratada de preferencia se lleva a cabo en un invernadero, en el cual la polinización es controlada cuidadosamente y monitoreada. Las semillas de aceite de Brassica adicionales son formadas como resultado de tal autopolinización en la presencia de una generación subsiguiente, son cosechas y son sometidas a análisis para el rasgo o característica deseada. Ya que Brassica napus, Brassica campestris y Brassica júncea son dicotiledóneas, el análisis para una mutación deseada puede llevarse a cabo en un solo cotiledón (es decir, la mitad de las semillas) , y la mitad de la semilla restante puede ser retenida para la posible germinación futura, la mutación deseada se encuentra después de la mutagénesis. Las semillas de aceite pueden ser separadas cuidadosamente en dos mitades de semilla antes de tal análisis utilizando técnicas conocidas. Cuando una mitad de la semilla madura se encuentra que posee una mutación deseada, la otra mitad de la semilla, la cual será genéticamente igual que la mitad de la semilla, la cual fue sometida al análisis de la mitad de la semilla, enseguida puede hacerse germinar y la planta Brassica de semilla de aceite se forma a partir de la misma y se deja que lleve a cabo la autopolinización. Tal cultivo de la mitad de la semilla de preferencia también se lleva a cabo en un invernadero, en el cual la polinización es controlada y monitoreada cuidadosamente. Las semillas de aceite resultantes formada en una planta que resulta de la mitad de la semilla son cosechadas, plantadas y son autopolinizadas durante un número suficiente de generaciones para lograr la homogeneidad genética sustancial. La estabilización genética del material de planta de Brassica de semilla de aceite permite la creación de plantas que tienen un genotipo razonablemente predecible, el cual puede ser utilizado como material de cultivo o como material de fuente. De acuerdo con el concepto de la presente invención, es esencial que el aceite vegetal, endógeno, comestible de la semilla de aceite de Brassica contenga un contenido de ácido alfa-linolénico de menos de 3.5 (por ejemplo, de 1 a menos de 3.5) por ciento por peso basado en el contenido total de ácido graso que es controlado por medios genéticos, en combinación con los otros componentes citados como se especificó. El plasma de germen de Brassica de la semilla de aceite que contiene el requisito de determinante genético para este rasgo de ácido alfa-linolénico es conocido y está disponible para el público. Por ejemplo, el plasma de germen de colza para este rasgo ha estado disponible en Alemania, a partir de la mitad de los años 70, y en Norteamérica desde 1983. Las variedades de colza disponibles comercialmente representativas que incluyen el medio genético para la expresión de este rasgo de ácido alfa-linolénico bajo, incluyen STELLAR, y APOLLO. Una fuente particularmente preferida para el requisito de los medios genéticos para la expresión del ácido alfa-linolénico en la concentración establecida en la variedad APOLLO que fue desarrollada en la Universidad de Manitoba, y se registró en Canadá con el No. 3,694 durante febrero de 1992, después del apoyo de Western Canadian Cañóla and Rapeseed Recommending Committee. La semilla para la producción de la variedad Brassica napus de cánola de primavera APOLLO está disponible de la University of Manitoba, Winnipeg, Manitoba, Canadá. El rendimiento de la variedad APOLLO comúnmente excede a aquel de la variedad STELLAR, la cual fue la primera variedad de semilla de colza con bajo contenido de ácido alfa-linolénico registrada en Canadá. También, los medios genéticos para la expresión de tal rasgo pueden ser obtenidos de 94SN-5374 (Cesión ATCC No. 75813), 94SN-53662 (Cesión ATCC No. 75814) y 94SN-52682 (Cesión ATCC No. 75812) discutidos en lo siguiente. Tal concentración baja del ácido alfa-linolénico en el aceite de semilla de aceite Brassica sirve para impartir estabilidad oxidativa aumentada al aceite, por lo que hace posible una duración en almacén prolongada. El aceite vegetal endógeno, comestible de las semillas de aceite Brassica que contienen ácido oleico en una concentración de por lo menos 77 (por ejemplo, por lo menos 77 hasta aproximadamente 84) por ciento por peso en base al contenido total de ácido graso, que es controlado por medios genéticos en combinación con otros componentes citados como se especificó. En una modalidad preferida, el componente ácido oleico se proporciona en una concentración de por lo menos 80 por ciento, hasta aproximadamente 84 por ciento por peso basado en el contenido total de ácido graso. La formación de los medios genéticos para la expresión de tal rasgo de ácido oleico se describe además en la WO90/10380, que se incorpora en la presente para referencia. Los medios genéticos para la expresión de tal rasgo pueden obtenerse de FA677-39 (Cesión ATCC No. 40409), FA677M5-132 (Cesión ATCC No. 40523) y Topas H6-90 (Cesión ATCC No. 40524) . También, los medios genéticos para la expresión de tal rasgo pueden obtenerse de 94SN-53574 (Cesión ATCC No. 75813), 94SN-53662 (Cesión ATCC No. 75814), y 94SN-52682 (Cesión ATCC No. 75812) discutidos en lo siguiente. Debe tenerse cuidado para seleccionar una mutante con alto contenido de ácido oleico en la cual no haya una modificación significativa de la no producción de lípidos en la semilla, que en cualquier otra forma podría interferir con la producción final de las características agronómicas satisfactorias. Tal concentración elevada de ácido oleico proporciona ácido graso monoinsaturado significativo en el aceite de semilla de colza y suministra un beneficio para la saluda y nutricional. También se proporciona estabilidad oxidativa y térmica aumentadas cuando se comparan con los componentes de ácido graso que poseen un mayor nivel de insaturación. Incluidos en el aceite vegetal endógeno de las semillas de aceite de Brassica de acuerdo con la presente invención es un contenido de ácido graso saturado total, extremadamente bajo de no más de 4.5 (por ejemplo, 2.5 a 4.5) por ciento por peso basado en ácido graso total y contenido que es controlado por medios genéticos en combinación con los otros componentes citados como se especificó. Tal contenido de ácido graso total comúnmente consiste principalmente de ácido palmítico que contiene 16 átomos de carbono por molécula y ácido esteárico que contiene 18 átomos de carbono por molécula. Los ácidos grasos saturados inferiores, tales como ácido láurico que contiene 12 átomos de carbono por molécula y ácido mirístico que contiene 14 átomos de carbono por molécula, comúnmente no están presentes o están presentes en cantidades solamente en trazas. Los ácidos grasos saturados superiores, tales como ácido araquídico que contiene 20 átomos de carbono por molécula, el ácido behénico que contiene 22 átomos de carbono por molécula y el ácido lignocérico que contiene 24 átomos de carbono por molécula, comúnmente están presentes en el aceite de Brassica resultante en concentraciones extremadamente bajas y/o no detectables, y son de menor interés desde un punto de vista de salud y nutricional, ya que no son fácilmente digeribles por los humanos y por lo tanto no se cree que contribuyan para los niveles de colesterol en suero como lo hacen los ácidos grasos saturados que tienen longitudes de cadena molecular más corta. El aceite vegetal endógeno de las semillas de aceite de Brassica de la presente invención, de preferencia posee un contenido de ácido graso saturado de aproximadamente 2 a 4 (por ejemplo, de aproximadamente 2 a 3.5 o 2.5 a 3.5) por ciento por peso basado en la suma de los ácidos esteárico y palmítico en relación con el contenido de ácido graso total. La formación de los medios genéticos para la expresión del contenido de ácido graso saturado se describe además en W091/15578 y en la Patente de los Estados Unidos No. 5,387,758 que se incorpora en la presente para referencia. Los medios genéticos para la expresión de tal rasgo pueden obtenerse de F32-38-172-X (Cesión ATCC No. 40624) y D-98-49-176 (Cesión ATCC No. 40773) . También, los medios genéticos para la expresión de tal rasgo pueden obtenerse de 94SN-53574 (Cesión ATCC No. 75813), 94SN-53662 (Cesión ATCC No. 75814), y 94SN-52682 (Cesión ATCC No. 75812) discutidos en lo siguiente. Tal concentración extremadamente baja de ácidos grasos saturados ofrece un beneficio nutricional y de salud significativo para el consumidor que se espera que se haga posible una reducción en el nivel de colesterol en suero y acompañado de beneficios para la salud para personas que buscan controlar los niveles de colesterol en suero por medio de la dieta. El ácido erúcico está incluido en el aceite vegetal endógeno de la semilla de aceite Brassica de acuerdo con la presente invención en una concentración baja de no más de 2 por ciento por peso basado en contenido de ácido graso total, que es controlado por los medios genéticos en combinación con los otros componentes citados como se especificó. En una modalidad preferida el contenido de ácido erúcico está presente en una concentración de menos de 0.1 por ciento por peso y de mayor preferencia en una concentración menor de 0.05 por ciento por peso, basado en el contenido total de ácido graso. Los medios genéticos para la expresión de tal rasgo de ácido erúcico pueden ser derivados de numerosas variedades de cánola disponibles comercialmente que tienen buenas características agronómicas, tales como BOUNTY, CYCLONE, DELTA, GARRISON, IMPACT, LEGACY, LEGEND, y PROFIT. Cada una de estas variedades está registrada en Canadá y disponibles comercialmente en ese país. Los medios genéticos para la expresión de tal rasgo además puede obtenerse como FA677-39 (Cesión ATCC No. 40409), FA677M5-132 (Cesión ATCC No. 40523), Topas H6-90 (Cesión ATCC No. 50524), F32-38-172-X (Cesión ATCC No. 40624), y D-98-49-176 (Cesión ATCC No. 40773) . También, los medios genéticos para la expresión de tal rasgo de ácido erúcico bajo puede obtenerse de 94SN-53574 (Cesión ATCC No. 75813), 94SN-53662 (Cesión ATCC No. 75814) y 94SN-52862 (Cesión ATCC No. 75812) discutidos en lo siguiente. Tal contenido de ácido erúcico bajo ofrece una ventaja nutricional. Adicionalmente, el aceite vegetal endógeno de la semilla de aceite de Brassica de acuerdo con la presente invención, incluye comúnmente un contenido de ácido linoleico de aproximadamente 8 a 11, (por ejemplo, de aproximadamente 9 a 10) por ciento por peso en base al contenido total de ácido graso. El componente ácido linoleico, inherentemente presenta más estabilidad oxidativa que el componente ácido alfa-linolénico. En una modalidad preferida, la relación por peso de ácido linoleico a ácido alfa-linolénico en el aceite endógeno es de aproximadamente 3:1 a 4:1. En una modalidad preferida, las semillas de aceite de Brassica de la presente invención además poseen un contenido de glucosinolato en el componente sólido después de la trituración y extracción del componente de aceite de menos de 100 micromoles por gramo, y de mayor preferencia menos de 30 micromoles por gramo. El contenido de glucosinolato puede ser cualquiera de uno o una mezcla de glucosinolato de 3-butenilo, glucosinolato de 4-pentenilo, glucosinolato de 2-hidroxi-3-butenilo y glucosinolato de 2-hidroxi-4-pentenilo. La determinación del glucosinolato de preferencia se hace en el sólido sin aceite secado al aire como se mide por el método de cromatografía gas-líquido de la Canadian Grain Commission. Los niveles de glucosinolato comúnmente se hacen posibles seleccionando los materiales iniciales, los cuales ya se conocen que forman el contenido de glucosinolato deseado, y al hacer las selecciones de las cuales retienen este valor siguiendo la combinación con los rasgos citados. Si se desea, un medio genético para la tolerancia a un herbicida cuando se aplica a un índice el cual es capaz de destruir las plantas de colza, las cuales carecen de los medios genéticos opcionalmente, también pueden ser incorporados en las plantas de colza de la presente invención como se describió en la Patente de los Estados Unidos No. 5,387,758 cedida comúnmente, que se incorpora en la presente para referencia. Se ha encontrado que la combinación de los rasgos deseados descritos en la presente una vez establecidos, pueden ser transferidos a otras plantas dentro de la misma especie de Brassica napus, Brassica campestris o Brassica júncea por técnicas de cultivo de plantas convencionales, que implican polinización cruzada y selección de la progenie. Sorprendentemente, se ha demostrado que la combinación de las características es altamente heredable, pueden ser transmitidos a la progenie y pueden ser recuperadas en segregación de la progenie en las generaciones subsiguientes después de la cruza. También, una vez establecidos los rasgos deseados pueden ser transferidos entre las especies napus . campestris y j ncea utilizando las mismas técnicas de sembrado de plantas convencionales que implica transferencia y selección de polen. Cada una de estas especies es reconocida para incluir el mismo genoma "A" como se reportó previamente en la literatura, en la que el requisito de los medios genéticos pueden ser ubicados. La transferencia de los - rasgos, tales como bajo contenido de ácido erúcico, entre las especies de Brassica, tal como napus y campestris por técnicas de cultivo de plantas estándar, ya está bien documentado en la literatura técnica. Véase, por ejemplo, Brassica Crops and Wild Allies Biolocry and Breedin . editado por S. Tsunada, K. Hinata, y Gomex Campo, Japan Scientific Press, Tokyo (1980) . Como un ejemplo de la transferencia de los rasgos deseados descritos en la presente de napus a campestris, se puede seleccionar una variedad campestris disponible comercialmente tal como REWARD, GOLDRUSH, y KLONDIKE, y llevar a cabo una cruza interespecífica con una planta apropiada de la línea de cultivo napus, tal como aquella discutida en lo siguiente (es decir, 94SN-53662, 94SN-53574, o 94SN-52682) . Alternativamente, otras líneas de cultivo napus pueden ser desarrolladas confiable e independientemente después de la mutagénesis. Después de la cruza interespecífica, los miembros de la generación F-, son autopolinizados para producir la semilla F2. La selección para los rasgos deseados (por ejemplo, contenido de ácido graso saturado inusualmente bajo, etc.) entonces se lleva a cabo en semillas F2 individuales, las cuales entonces se retrocruzan con el padre campestris por medio de muchas generaciones requeridas para obtener una línea campestris euploide (n = 10) que presenta la combinación deseada de rasgos, en los que cada rasgo está bajo el control genético y es expresado sin cancelación como el resultado de la operación de las rutas de desaturación y alargamiento bioquímicas necesarias para la formación de los otros rasgos citados. Para evitar la depresión de la endogamia (por ejemplo, pérdida de vigor y fertilidad) que puede acompañar la endogamia de Brassica campestris, las plantas BC-^ seleccionadas que presentan rasgos deseados similares, aunque bajo el control genético (por ejemplo, producción elevada de ácido oleico, producción de ácido graso saturado, baja, y producción de ácido alfa-linolénico baja) , ventajosamente pueden ser unidos de la misma especie. Las semillas resultantes de estas cruzas pueden ser designadas en semilla BC-j^SIB-^. Por consiguiente, la fijación de los alelos deseados puede lograrse en una forma análoga a la autopolinización, mientras que simultáneamente reduce al mínimo la fijación de otros alelos que potencialmente exhiben una influencia negativa sobre el vigor y la fertilidad.

Una variedad de Brassica júncea representativa de bajo contenido de ácido erúcico en la cual los rasgos deseados pueden ser transferidos similarmente, incluyen la variedad ZEM disponible comercialmente. También la Brassica júncea con ácido erúcico bajo, obtenida de Agriculture Canadá, Saskatoon, Saskatchewan, Canadá, tal como la variedad ZEHO, puede ser seleccionada. El material de fuente de la Brassica júncea de contenido de glucosinolato lo más bajo posible, de preferencia son utilizados para eliminar el sabor que se sabe es característico de este componente, cuando está presente en el aceite vegetal endógeno resultante. Las plantas de Brassica de semilla de aceite de la presente invención, de preferencia son proporcionadas como un conjunto de plantas sustancialmente uniforme que son capaces de formar semillas de aceite, que llevan un aceite el cual presenta la distribución mejorada de los ácidos grasos citados. Las semillas de aceite de Brassica de la presente invención de preferencia se proporcionan como un conjunto sustancialmente uniforme de semillas, las cuales poseen la distribución mejorada de ácidos grasos dentro del aceite endógeno presente en ellas. También, el aceite vegetal endógeno, comestible, mejorado de la presente invención, de preferencia se proporciona en una cantidad de por lo menos un litro.

La planta Brassica de semilla de aceite mejorada de la presente invención, es capaz de la producción en el campo bajo condiciones de cultivo de Brassica de semilla de aceite convencionales, que son utilizadas comúnmente durante la producción de la semilla de aceite en una escala comercial. Tal semilla de aceite de Brassica presenta características agronómicas satisfactorias y es capaz por la autopolinización, de formar semillas de aceite que poseen la distribución mejorada de ácidos grasos dentro del aceite presente en ellas. Para los propósitos de la presente invención, "características agronómicas satisfactorias" está definido como la capacidad para producir una cosecha de semilla de aceite bajo condiciones de cultivo de campo estándar de por lo menos 85 por ciento, y de preferencia por lo menos 90 por ciento del rendimiento promedio para las tres variedades de Brassica de semilla de aceite de la misma especie, que crece más comúnmente en una base comercial en la misma región. La capacidad para proporcionar en un sólo aceite vegetal endógeno, comestible, la distribución mejorada, altamente ventajosa de ácidos grasos de la presente invención, aunque bajo el control genético en ausencia de la necesidad para hidrogenación u otra modificación química o física a pesar de su habilidad fácilmente aparente para tener tal aceite de semilla de colza mejorado, se considera que es totalmente inesperado. Un aceite endógeno, comestible como se reclama actualmente es nuevo y su producción evadió previamente a todos los otros investigadores. Es particularmente notable que la combinación total mejorada de cada uno de los rasgos de ácido graso citados pueda ser proporcionada, aunque bajo el control genético en ausencia de la cancelación como el resultado de la formación de otros rasgos citados. Alguien con habilidad en la tecnología de Brassica de semilla de aceite, razonablemente podría haber concluido que la prolongación operativa y rutas biosintéticas de desaturación para la producción de ácido graso podría haber estado en conflicto con la exhibición simultánea de la combinación citada de rasgos y habría evitado la expresión simultánea de todas las características de ácido graso citadas en una sola planta. De acuerdo con el concepto de la presente invención, los rasgos citados sorprendentemente son combinados en una sola planta de Brassica de semilla de aceite en ausencia de antagonismo entre los rasgos citados. Además, es sorprendente que los medios genéticos para la expresión de la combinación de los rasgos citados, pueden ser creados por medio de mutagénesis y combinados satisfactoriamente en ausencia de expresión concomitante de una modificación significativa nociva en la producción de semillas sin lípidos, tales como aquellos requeridos en la formación de las membranas de la hoja que se sabe que juegan un papel esencial en el apoyo de la fotosíntesis y otras funciones fisiológicas de la planta importantes. Alguien con habilidad en la técnica habría anticipado razonablemente que las modificaciones en ambos de lípidos almacenados (TAG) y lípidos sin almacenar (principalmente en la membrana de la célula) podría llevarse a cabo. Las modificaciones en lípidos no almacenados podría esperarse que altere significativamente la función de la membrana. Ambas de las mutaciones de ácido graso oleico elevado y ácido graso alfa-linolénico bajo, se espera que reduzcan la proporción de ácidos grasos poliinsaturados en las fracciones de lípido de la membrana. Si dos de tales mutaciones se combinaron en una sola planta, se esperaría que esto tendría un efecto particularmente dañino sobre la función de la membrana. Sin embargo, sorprendentemente, no se ha observado la reducción en el vigor, índice de crecimiento, producción de materia seca o rendimiento de la semilla en el material de la planta de la presente invención, que puede ser atribuido a una función de la membrana dañada . El aceite vegetal endógeno, comestible, mejorado de la presente invención en una modalidad preferida, presenta un sabor satisfactorio que puede ser descrito que es generalmente comparable a aquel del aceite de cánola refinado, blanqueado y diodorizado. El contenido de ácido graso saturado, reducido, proporciona un beneficio nutricional significativo. Adicionalmente, la estabilidad térmica y oxidativa aumentada del aceite endógeno proporcionado en ausencia de hidrogenación u otra modificación química, un producto altamente atractivo que es muy adecuado para una pluralidad de usos finales. Los usos representativos incluyen ensaladas, freir, cocinar, untar y aplicaciones del producto alimenticio viscoso. Las consideraciones de manejo e inventario son simplificadas en gran medida ya que el aceite vegetal endógeno de la presente invención, cumple bien los requisitos para una amplia variedad de usos finales y además poseen una duración en almacenamiento más prolongada, bajo condiciones de almacenamiento ambientales. Cada uno de estos beneficios se logra en una forma directa en un producto endógeno que posee inherentemente propiedades de salud y nutrición superiores. Los siguientes Ejemplos son presentados como ilustraciones específicas de la presente invención. Debe entenderse, sin embargo, que la invención no está limitada a los detalles específicos en los Ejemplos. EJEMPLO I El procedimiento utilizado en la creación de material de planta nuevo de la presente invención, designado 94SN-52682 está dibujado en la FIGURA 1. Tal procedimiento se describe en mayor detalle en lo siguiente.

Una línea de Brassica napus designada D-98-49-176 derivada de la variedad GLACIER se seleccionó como la fuente de los medios genéticos para la producción baja de ácido graso saturada. Las semillas de esta línea identificadas en la Patente de los Estados Unidos No. 5,387,758, cedida comúnmente y están disponibles de American Type Culture Collection, 12301 Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852, U.S.A. bajo el Número de Acceso No. 40773. Durante varias generaciones, los medios genéticos para la producción baja de ácido graso saturado, fue la cruza en volumen con líneas elegidas de Brassica napus. El rasgo de ácido graso saturado, bajo por lo tanto se transfirió a tales líneas de Brassica napus elegidas, que poseen buenas características agronómicas por introgresión. Una línea mejorada resultante designada 91SNQ-975, que contiene los medios genéticos para la baja producción de ácido graso saturado combinada con buenas características agronómicas se seleccionó. Una línea de Brassica napus designada FA677M5-132 derivada de la variedad REGENT se seleccionó como la fuente de los medios genéticos para la producción elevada de ácido oleico. Las semillas de esta línea son identificadas en la Solicitud de Patente de los Estados Unidos No. de Serie 287,708 comúnmente cedida, presentada el 20 de diciembre de 1998 y están disponibles de la American Type Culture Collection, 12301 Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852, U.S.A. bajo el Número de Acceso 40523. Durante varias generaciones, los medios genéticos para la producción elevada de ácido oleico fue una cruz en volumen con líneas selectas de Brassica napus. El rasgo de ácido oleico elevado por lo tanto se transfirió a tales líneas selectas por introgresión. Una línea mejorada resultante designada 91SNQ-925, que contiene los medios genéticos para el contenido elevado de ácido oleico combinado con buenas características agronómicas se seleccionó. Se hizo una cruza entre 91SNQ-975 y 91SNQ-925 por lo que los medios genéticos para el bajo contenido de ácido graso saturado y alto contenido de ácido oleico se combinaron exitosamente en una sola planta designada 91SNQ-3249. La planta 91SNQ-3249 fue cruzada con la variedad BOUNTY de Brassica napus que posee buenas características agronómicas. Una progenie de esta cruza, designada 92SNQ-292 fue seleccionada que continuó para exhibir los medios genéticos para el bajo contenido de ácido graso y alto contenido de ácido oleico. La planta 92SNQ-292 se cruzó con la variedad APOLLO de Brassica napus que posee los medios genéticos para el bajo contenido de ácido alfa-linolénico. Una población heterozigota F _ designada 92SNQ-3717 se obtuvo. Las plantas de esta población F-^ fueron autopolinización para producir una población F2 designada 93SN-6858 que segregó para cada uno de los alelos o medios genéticos para la producción de una baja concentración' de ácidos grasos saturados, la producción de una concentración elevada de ácido oleico y la producción de una concentración baja de ácido alfa-linolénico. Las semillas F3 que se formaron en las plantas F2 después de la autopolinización, se sometieron al análisis de mitad de semilla para evaluar el contenido del ácido graso del aceite vegetal producido endógenamente presente en ella. Una línea F3 designada 93SN-6927 se evalúa además para la integración exitosa de cada uno de los alelos o medios genéticos para la producción de una concentración baja de ácidos grasos saturados, una concentración elevada de ácido oleico y una concentración baja de ácido alfa-linolénico. La semilla F4 designada 94SN-52682 se formó por la autopolinización de una sola planta F3 de la línea 93SN-6927. Las semillas F4 formadas sobre esta sola planta F3 después de la autopolinización, fueron cosechadas selectivamente. Un análisis de semillas completas típico de 93SN-52682 ha determinado que la siguiente distribución de ácido graso como se reportó en la Tabla A se presentó por el aceite vegetal de Brassica de semilla de aceite endógeno, comestible, después de la trituración y extracción sencillas en ausencia de hidrogenación u otra modificación química o física: TABLA A Número de Átomos Número de Porcierrto por Acido Graso de Carbono por Dobles Enlaces Peso de Aceite U Molécula por Molécula de 94SN-52682 Láurico 12 0 no-detectable Mirístico 14 0 no-detectable Palmítico 16 0 2.38 Palmitoleico 16 no-detectable Esteárico 18 1.16 Oleico 18 83.04 Linoleico 18 9.25 Alfa-Linoleico 18 2.49 Araquídico 20 0 0.39 Eiconsenoico 20 1.03 Behénico 22 0 0.18 Erúcico 22 no-detectable Lignocérico Se observará que el contenido total de ácido graso saturado es de 4.16 por ciento por peso basado en el •contenido total de ácido graso y el contenido de ácido graso saturado es de 3.54 por ciento por peso basado en la suma de los ácidos esteárico y palmítico en relación con el contenido total de ácido graso. También, la relación por peso de ácido linoleico a ácido alfa-linolénico es de 3.71:1.

La semilla de colza de las generaciones F¿ y F5 designadas 94SN-52682 han sido depositadas bajo el Tratado de Budapest en la American Type Culture Collection, 12301 Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852, U.S.A., y ha recibido el No. de Acceso 75812. EJEMPLO II El procedimiento utilizado en la creación de material de planta nuevo de la presente invención, designado 94SN-53574, fue idéntico al utilizado en relación con el Ejemplo I, con la excepción de que se hizo la selección de una semilla F4 diferente después de la autopolinización de una planta F3 diferente de la línea 93SN-6927. Un análisis de las semillas completas típico de 94SN-53574 ha determinado que la siguiente distribución de ácido graso como se reporta en la Tabla B es presentado por el aceite vegetal de Brassica de semilla de aceite, endógeno, comestible, después de la trituración y extracción sencilla en ausencia de hidrogenación u otra modificación química o física: TABLA B Se observará que el contenido de ácido graso saturado total es de 4.05 por ciento por peso basado en el contenido total de ácido graso y el contenido de ácido graso saturado es de 3.18 por ciento por peso en base a la suma de ácido esteárico y palmítico en relación con el contenido total de ácido graso. También la relación por peso del ácido linoleico a ácido alfa-linolénico es de 3.23:1.

La semilla de colza de las generaciones F4 y F5 designadas 94SN-53574 han sido depositadas bajo el Tratado de Budapest en la American Type Culture Collections, y ha recibido el Número de Acceso 75813. EJEMPLO III El procedimiento utilizado en la creación de nuevo material de planta de la presente invención, designado 94SN-53662 fue idéntico a aquel utilizado en relación con el Ejemplo I, con la excepción de que la semilla F4 diferente se hizo después de la autopolinización de aún otra planta F3 a partir de la línea 93SN-6927. Un análisis de las semillas completas típicas de 94SN-53662 ha sido determinada que después de la distribución de ácido graso como se reporta en la Tabla C es presentada por el aceite vegetal de Brassica de semilla de aceite, endógeno, comestible, después de la trituración y extracción sencilla en ausencia de hidrogenación u otra modificación química o física: TABLA C Se observará que el contenido total de ácido graso saturado es de 4.17 por ciento por peso en base al contenido total de ácido graso y el contenido de ácido graso saturado es de 3.53 por ciento por peso en base a la suma de los ácidos esteárico y palmítico en relación con el contenido total de ácido graso. También, la relación por peso de ácido linoleico a ácido alfa-linolénico es de 3.68:1.

Las semillas de colza de las generaciones F4 y Fe-designadas 94SN-53662 han sido depositadas bajo el Tratado de Budapest en la American Type Culture Collection, y ha recibido el No. de Acceso 75814. Aunque la invención ha sido descrita con las modalidades preferidas, debe entenderse que las variaciones y modificaciones pueden ser recurridas como será aparente para aquellos con habilidad en la técnica. Tales variaciones y modificaciones van a ser consideradas dentro de la esfera y alcance de las reivindicaciones anexas a la presente.

Claims (52)

1. REIVINDICACIONES 1. Una semilla de aceite de Brassica napus, madura, capaz de producir un aceite vegetal endógeno, comestible, caracterizado porque tiene una distribución mejorada de ácidos grasos, la semilla de aceite de Brassica napus que lleva un aceite, el cual presenta después de la trituración y extracción en ausencia de la hidrogenación u otra modificación química o física (a) un contenido de ácido alfa-linolénico de menos de 3.5 por ciento por peso, basado en el contenido total de ácido graso, (b) un contenido de ácido oleico de por lo menos 77 por ciento por peso en base al contenido total de ácido graso, (c) un contenido total de ácido graso saturado de no más de 4.5 por ciento por peso en base al contenido total de ácido graso y d) un contenido de ácido erúcico de no más de 2 por ciento por peso, basado en el contenido total de ácido graso y en el que cada uno de los rasgos citados del aceite es controlado por medios genéticos en ausencia de la cancelación como el resultado de la formación de los otros rasgos citados y los medios genéticos para el contenido de ácido oleico y el contenido de ácido graso saturado son obtenidos por mutagénesis y en la que semilla de aceite de Brassica napus es capaz de formarse por germinación de una planta de Brassica napus de semilla de aceite, que tiene características agronómicas satisfactorias, la cual produce después de la autopolinización de la semilla de aceite de Brassica napus que posee la distribución mejorada especificada de ácidos grasos dentro del aceite presente en ella.
2. 2. Una semilla de aceite de Brassica napus, madura, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el aceite presenta un contenido de ácido alfa-linolénico de aproximadamente 1 a menos de 3.5 por ciento por peso basado en el contenido total de ácido graso.
3. 3. La semilla de aceite de Brassica napus, madura, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el aceite presenta un contenido de ácido oleico de menos de 80 por ciento por peso basado en el contenido total de ácido graso.
4. 4. La semilla de aceite de Brassica napus, madura, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el aceite presenta un contenido de ácido oleico de por lo menos 77 por ciento por peso hasta aproximadamente 84 por ciento por peso basado en el contenido total de ácido graso.
5. 5. La semilla de aceite de Brassica napus, madura, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el aceite presenta un contenido de ácido oleico de por lo menos 80 por ciento hasta aproximadamente 84 por ciento por peso basado en el contenido total de ácido graso.
6. 6. La semilla de aceite de Brassica napus. madura, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el aceite presenta un contenido total de ácido graso saturado de 2.5 a 4.5 por ciento por peso basado en el contenido total de ácido graso.
7. 7. La semilla de aceite de Brassica napus, madura, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el aceite presenta un contenido de ácido graso saturado de aproximadamente 2 a 4 por ciento por peso en base a la suma de los ácidos esteárico y palmítico en relación con el contenido total de ácido graso.
8. 8. La semilla de aceite de Brassica napus, madura, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el aceite presenta un contenido de ácido graso saturado de aproximadamente 2 a 3.5 por ciento por peso en base a la suma de los ácidos esteárico y palmítico en relación con el contenido total de ácido graso.
9. 9. La semilla de aceite de Brassica napus, madura, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el aceite presenta un contenido de ácido graso saturado de aproximadamente 2.5 a 3.5 por ciento por peso, en base a la suma de los ácidos esteárico y palmítico en relación con el contenido de ácido graso total .
10. 10. La semilla de aceite de Brassica napus, madura, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el aceite presenta un contenido de ácido erúcico de por lo menos 0.1 por ciento por peso basado en el contenido total de ácido graso.
11. 11. La semilla de aceite de Brassica napus, madura, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el aceite presenta un contenido de ácido erúcico de por lo menos 0.05 por ciento por peso basado en el contenido total de ácido graso.
12. 12. La semilla de aceite de Brassica napus, madura, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el aceite presenta adicionalmente un contenido de ácido linoleico de aproximadamente 8 a 11 por ciento por peso, en base al contenido total del ácido graso.
13. 13. La semilla de aceite de Brassica napus, madura, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el aceite presenta adicionalmente ácido linoleico y exhibe una relación de ácido linoleico a ácido alfa-linolénico de aproximadamente 3:1 a 4:1.
14. 14. La semilla de aceite de Brassica napus, madura, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el contenido de glucosinolato del componente sólido de la semilla de aceite de Brassica napus es menor de 100 micromoles por gramo después de la trituración y extracción del aceite.
15. 15. La semilla de aceite de Brassica napus, madura, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el contenido de glucosinolato del componente sólido de la semilla de aceite de Brassica napus es menor de 30 micromoles por gramo después de la trituración y extracción del aceite.
16. 16. La semilla de aceite de Brassica napus, madura, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque se produce en el campo bajo condiciones de cultivo de Brassica napus convencionales .
17. 17. La semilla de aceite de Brassica napus, madura, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque está presente como un componente de un conjunto sustancialmente homogéneo de semillas, las cuales poseen la distribución mejorada, especificada de ácidos grasos dentro del aceite presente en ella.
18. 18. La semilla de aceite de Brassica napus. madura, de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque los medios genéticos para la expresión de los rasgos citados (1) , (2) y (3) son aquellos presentes en 94SN-52682 que tiene el No. de Acceso ATCC No. 75812, 94SN-53574 que tiene el No. de Acceso ATCC No. 75813, o 94SN-53662 que tiene el No. de Acceso ATCC 75814.
19. 19. Una planta de Brassica napus de semilla de aceite que tiene características agronómicas satisfactorias, las cuales por la autopolinización es capaz de formar semillas de aceite que producen un aceite vegetal endógeno, caracterizada porque tiene una distribución mejorada de ácidos grasos, la semilla de aceite que lleva un aceite el cual presenta después de la trituración y extracción en ausencia de la hidrogenación u otra modificación química o física (a) un contenido de ácido alfa-linolénico de menos de 3.5 por ciento por peso en base al contenido total de ácido graso, (b) un contenido de ácido graso oleico de por lo menos 77 por ciento por peso en base al contenido total e ácido graso, (c) un contenido total de ácido graso saturado de no más de 4.5 por ciento por peso en base al contenido de ácido graso total y (d) un contenido de ácido erúcico de no más de 2 por ciento por peso en base al contenido de ácido graso total, donde , cada uno de los rasgos citados es controlados por medios genéticos en ausencia de la cancelación como el resultado de la formación de los otros rasgos citados y los medios genéticos para el contenido de ácido oleico y el contenido de ácido graso saturado son obtenidos por mutagénesis .
20. 20. La planta de Brassica napus de semilla de aceite de conformidad con la reivindicación 19, caracterizada porque el aceite presenta un contenido de ácido alfa-linolénico de aproximadamente 1 a menos de 3.5 por ciento por peso en base al contenido de ácido graso total .
21. 21. La planta de Brassica napus de semilla de aceite de conformidad con la reivindicación 19, caracterizada porque el aceite presenta un contenido de ácido oleico de por lo menos 80 por ciento por peso basado en el contenido total de ácido graso.
22. 22. La planta de Brassica napus de semilla de aceite de conformidad con la reivindicación 19, caracterizada porque el aceite presenta un contenido de ácido oleico de por lo menos 77 por ciento por peso hasta aproximadamente 84 por ciento por peso basado en el contenido total de ácido graso.
23. 23. La planta de Brassica napus de semilla de aceite de conformidad con la reivindicación 19, caracterizada porque el aceite presenta un contenido de ácido oleico de por lo menos 80 por ciento hasta aproximadamente 84 por ciento por peso basado en.el contenido total del ácido graso.
24. 24. La planta de Brassica napus de semilla de aceite de conformidad con la reivindicación 19, caracterizada porque el aceite presenta un contenido total de ácido graso saturado de 2.5 a 4.5 por ciento por peso basado en el contenido total del ácido graso.
25. 25. La planta de Brassica napus de semilla de aceite de conformidad con la reivindicación 19, caracterizada porque el aceite presenta un contenido de ácido graso saturado de aproximadamente 2 a 4 por ciento por peso basado en el suma de los ácidos esteárico y palmítico en relación al contenido total del ácido graso.
26. 26. La planta de Brassica napus de semilla de aceite de conformidad con la reivindicación 19, caracterizada porque el aceite presenta un contenido de ácido graso saturado, de aproximadamente 2 a 3.5 por ciento por peso basado en la suma de ácidos esteárico y palmítico en relación al contenido total del ácido graso.
27. 27. La planta de Brassica napus de semilla de aceite de conformidad con la reivindicación 19, caracterizada porque el aceite presenta un contenido de ácido graso saturado, de aproximadamente 2.5 a 3.5 por ciento por peso basado en la suma de ácidos esteárico y palmítico en relación al contenido total del ácido graso.
28. 28. La planta de Brassica napus de semilla de aceite de conformidad con la reivindicación 19, caracterizada porque el aceite presenta un contenido de ácido graso saturado, de aproximadamente 2 a 3.5 por ciento por peso basado en la suma de ácidos esteárico y palmítico en relación al contenido total del ácido graso.
29. 29. La planta de Brassica napus de semilla de aceite de conformidad con la reivindicación 19, caracterizada porque el aceite presenta un contenido de ácido erúcico de menos de 0.5 por ciento por peso basado en el contenido total de ácido graso.
30. 30. La planta de Brassica napus de semilla de aceite de conformidad con la reivindicación 19, caracterizada porque el aceite presenta un contenido adicional de ácido linoleico, de aproximadamente 8 a 11 por ciento por peso basado en el contenido total del ácido graso.
31. 31. La planta de Brassica napus de semilla de aceite de conformidad con la reivindicación 19, caracterizada porque el aceite comprende adicionalmente ácido linoleico y presenta una relación por peso de ácido linoleico a ácido alfa-linolénico de aproximadamente 3:1 a 4:1.
32. 32. La planta de Brassica napus de semilla de aceite de conformidad con la reivindicación 19, caracterizada porque el contenido de glucosinolato del componente sólido de semilla de colza es menor que 100 micromoles por gramo después de la trituración y extracción del aceite.
33. 33. La planta de semilla de aceite de Brassica napus , de conformidad con la reivindicación 19, caracterizada porque el contenido de glucosinolato del componente sólido de la semilla de aceite es menor de 30 micromoles por gramo después de la trituración y extracción del aceite.
34. 34. La planta de semilla de aceite de Brassica napus , de conformidad con la reivindicación 19, caracterizada porque se produce en el campo bajo condiciones de cultivo de Brassica convencionales .
35. 35. La planta de semilla de aceite de Brassica napus . de conformidad con la reivindicación 19, caracterizada porque se presenta como un componente de un conjunto sustancialmente uniforme de plantas de Brassica de semilla de aceite, en la que las plantas son capaces de formar semillas de aceite que llevan un aceite, el cual presenta distribución mejorada de ácidos grasos.
36. 36. La semilla de aceite de Brassica napus, de conformidad con la reivindicación 19, caracterizada porque los medios genéticos para la expresión de los rasgos citados (1), (2) y (3) son aquellos presentes en 94SN-52682 que tiene el No. de Acceso ATCC No. 75812, 94SN-53574 que tiene el No. de Acceso ATCC No. 75813, o 94SN-53662 que tiene el No. de Acceso ATCC 75814.
37. 37. Un aceite vegetal comestible, mejorado que tiene una distribución mejorada de ácidos grasos, que resultan de la trituración y extracción de las semillas de aceite de Brassica napus caracterizado porque la distribución de ácidos grasos es formada endógenamente y el aceite vegetal presenta (a) un contenido de ácido alfa-linolénico de menos de 3.5 por ciento en base al contenido total de ácido graso, (b) un contenido de ácido oleico de por lo menos 77 por ciento por peso en base al contenido de ácido graso total (c) un contenido total de ácido graso saturado de no más de 4.5 por ciento por peso en base al contenido de ácido graso total y (d) un contenido de ácido erúcíco de no más de 2 por ciento por peso en base al contenido de ácido graso total y en el que cada uno de los rasgos citados del aceite fue controlado por medios genéticos en ausencia de la cancelación como el resultado de la formación de los otros rasgos citados.
38. 38. El aceite vegetal comestible, mejorado de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado porque presenta un contenido de ácido alfa-linolénico de aproximadamente 1 a menos de 3.5 por ciento por peso en base al contenido total de ácido graso.
39. 39. El aceite vegetal comestible, mejorado de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado porque el aceite presenta un contenido de ácido oleico de por lo menos 80 por ciento por peso basado en el contenido total de ácido graso.
40. 40. El aceite vegetal comestible, mejorado de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado porque el aceite presenta un contenido de ácido oleico de por lo menos 77 por ciento por peso hasta aproximadamente 84 por ciento por peso basado en el contenido total de ácido graso.
41. 41. El aceite vegetal comestible, mejorado de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado porque el aceite presenta un contenido de ácido oleico de por lo menos 80 por ciento hasta aproximadamente 84 por ciento por peso basado en el contenido total del ácido graso.
42. 42. El aceite vegetal comestible, mejorado de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado porque el aceite presenta un contenido total de ácido graso saturado de 2.5 a 4.5 por ciento por peso basado en el contenido total del ácido graso.
43. 43. El aceite vegetal comestible, mejorado de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado porque el aceite presenta un contenido de ácido graso saturado de aproximadamente 2 a 4 por ciento por peso basado en el suma de los ácidos esteárico y palmítico en relación al contenido total del ácido graso.
44. 44. El aceite vegetal comestible, mejorado de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado porque el aceite presenta un contenido de ácido graso saturado, de aproximadamente 2 a 3.5 por ciento por peso basado en la suma de ácidos esteárico y palmítico en relación al contenido total del ácido graso.
45. 45. El aceite vegetal comestible, mejorado de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado porque el aceite presenta un contenido de ácido graso saturado, de aproximadamente 2.5 a 3.5 por ciento por peso basado en la suma de ácidos esteárico y palmítico en relación al contenido total del ácido graso.
46. 46. El aceite vegetal comestible, mejorado de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado porque el aceite presenta un contenido adicional de ácido linoleico, de aproximadamente 8 a 11 por ciento por peso basado en el contenido total del ácido graso.
47. 47. El aceite vegetal comestible, mejorado de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado porque el aceite comprende adicionalmente ácido linoleico y presenta una relación por peso de ácido linoleico a ácido alfa-linolénico de aproximadamente 3:1 a 4:1.
48. 48. El aceite vegetal comestible, mejorado de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado porque el aceite presenta un contenido de ácido erúcico de por lo menos 0.1 por ciento por peso basado en el contenido total de ácido graso.
49. 49. El aceite vegetal comestible, mejorado de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado porque el aceite presenta un contenido de ácido erúcico de por lo menos 0.05 por ciento por peso basado en el contenido total de ácido graso.
50. 50. El aceite vegetal comestible, mejorado de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado porque el medio genético para la expresión de los rasgos citados (1) , (2) y (3) son obtenidos por mutagénesis.
51. 51. El aceite vegetal comestible, mejorado de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado porque los medios genéticos para la expresión de los rasgos citados (1) , (2) y (3) son aquellos presentes en 94SN-52682 que tiene el No. de Acceso ATCC No. 75812, 94SN-53574 que tiene el No. de Acceso ATCC No. 75813, o 94SN-53662 que tiene el No. de Acceso ATCC 75814.
52. 52. El aceite vegetal comestible, mejorado de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado porque el aceite está presente en una cantidad de por lo menos un litro. RESUMEN DE LA INVENCIÓN Una semilla de aceite de Brassica mejorada, una planta mejorada capaz de formar la misma, y un aceite vegetal endógeno, comestible, mejorado derivado de la semilla de aceite de Brassica son proporcionados. El aceite vegetal endógeno, comestible de la presente invención posee una distribución mejorada de ácidos grasos después de la trituración y extracción en ausencia de hidrogenación u otra modificación química o física. El contenido de ácido alfa-linolénico es menor que 3.5 por ciento por peso, el contenido de ácido oleico es de por lo menos 77 por ciento por peso, el contenido total de ácido graso saturado no es más de 4.5 por ciento peso y el contenido de ácido erúcico es de no más de 2 por ciento por peso basado en el contenido total de ácido graso. Cada una de las características citadas del aceite es controlada por medios genéticos y sorprendentemente es expresada simultáneamente (por ejemplo, en el campo bajo condiciones de cultivo de Brassica de semilla de aceite convencionales) en la ausencia de la cancelación como el resultado de la formación de los otros rasgos citados. La semilla de aceite de Brassica mejorada es capaz de formar por la germinación una planta que tiene características agronómicas satisfactorias, la cual produce después de la autopolinización semillas de aceite de Brassica que poseen la distribución mejorada, especificada de ácidos grasos dentro del aceite que está presente en ellas.