MXPA06000860A - Omega-carboxiaril-difenil-urea sustituida con fluor para el tratamiento y la prevencion de enfermedades y afecciones - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a un compuesto de la fórmula (I) (ver fórmula (I)) sales del mismo, predrogas del mismo, metabolitos del mismo, composiciones farmacéuticas que contienen dicho compuesto y el uso de dicho compuesto y dichas composiciones para tratar enfermedades mediadas por raf, VEGFR, PDGFR, p38 y flt-3.

Description

OMEGA-CARBOXIAR1L-DIFENIL-UREA SUSTITUIDA CON FLÚOR PARA EL TRATAMIENTO Y LA PREVENCIÓN DE ENFERMEDADES Y AFECCIONES Campo de la invención Esta invención se relaciona con nuevos compuestos, con composiciones farmacéuticas que contienen dichos compuestos y con el uso de dichos compuestos o composiciones para el tratamiento de enfermedades y afecciones mediadas por una señalización anormal de VEGFR, PDGFR, raf, p38 y/o flt-3 quinasa, ya sea solos o en combinación con agentes anticancerosos. Antecedentes de la invención La activación de la vía de transducción de señales ras inicia una cascada de eventos que tienen un profundo impacto sobre la proliferación, diferenciación y transformación celular. La raf quinasa, un efector posterior en la vía de ras, es considerada como uno de los mediadores clave de estas señales entre los receptores de la superficie celular y el núcleo de la célula (Lowy, D. R.; Willumsen, B. M. Ann. Rev. Biochem. 1993, 62, 851; Bos, J. L. Cáncer Res. 1989, 49, 4682). Se ha demostrado que la inhibición del efecto de la ras activa mediante inhibición de la vía de señalización de la raf quinasa por administración de anticuerpos desactivadores de la raf quinasa o por co-expresión de una raf quinasa dominante negativa o MEK dominante negativa, el sustrato de la raf quinasa, conduce a la reversión de las células transformadas en el fenotipo de crecimiento normal (véase: Daum et al. Trends Biochem. Sci. 1994, 19, 474-80; Fridman et al. J. Biol. Chem. 1994, 269, 30105-8. Kolch et al. (Nature 1991, 349, 426-28) han indicado además que la inhibición de la expresión de raf mediante ARN antisentido bloquea la proliferación celular en oncogenes asociados a membrana. De manera similar, se ha correlacionado la inhibición de la raf quinasa (con oligodesoxinucleótidos antisentido) in vitro e in vivo con la inhibición del crecimiento de diversos tipos de tumores humanos (Monia et al., Nat. Med. 1996, 2, 668-75). Para poder sustentar un crecimiento tumoral progresivo más allá del tamaño de 1-2 mm3, se considera que las células tumorales requieren de un estroma funcional, una estructura de soporte que consiste de fibroblastos, células de musculatura lisa, células endoteliales, proteínas de la matriz extracelular y factores solubles (Folkman, J., Semin Oncol, 2002. 29(6 Supl. 16), 15-8). Los tumores inducen la formación de tejidos estromáticos a través de la secreción de un factor de crecimiento soluble tal como PDGF y el factor de crecimiento transformante-beta (TGF-beta), que a su vez estimula la secreción de factores complementarios por las células huésped tales como el factor de crecimiento de fibroblastos (FGF), el factor de crecimiento epidérmico (EGF) y el factor de crecimiento del endotelio vascular (VEGF). Estos factores estimulantes inducen la formación de nuevos vasos sanguíneos, o angiogénesis, que le proveen oxígeno y nutrientes al tumor y le permite crecer lo cual proporciona una ruta para la metástasis. Se cree que algunas terapias dirigidas a inhibir la formación de estroma inhibirán el crecimiento de los tumores epiteliales de una amplia variedad de tipos histológicos (George, D. Semin Oncol, 2001. 28(5 Supl. 17), 27-33; Shaheen, R.M., et al., Cáncer Res, 2001. 61 (4), 1464-8; Shaheen, R.M., et al. Cáncer Res, 1999. 59(21 ), 5412-6). Sin embargo, dada la naturaleza compleja y los múltiples factores de crecimiento relacionados con el proceso de angiogénesis y de progresión tumoral, un agente dirigido a una sola vía tendría una eficacia limitada. Sería deseable proveer un tratamiento contra las numerosas vías de señalización clave utilizadas por los tumores para inducir angiogénesis en el estroma del huésped. Estos incluyen PDGF, un potente estimulador de la formación del estroma (Ostman, A. y OH. Heldin, Adv Cáncer Res, 2001 , 80, 1-38), FGF, una sustancia de quimioatracción y mitógeno para fibroblastos y células endoteliales, y VEGF, un potente regulador de la vascularización. El PDGF es un regulador clave de la formación del estroma, que es secretado por muchos tumores de una manera parácrina y se cree que promueve el crecimiento de fibroblastos, células de la musculatura lisa y endoteliales, promoviendo así la formación del estroma y la angiogénesis. El PDGF se identificó originalmente como el producto del oncogen v-sis del virus del sarcoma de simios (Heldin, C.H., et al., J Cell Sci Supl., 1985, 3, 65-76). El factor de crecimiento está formado por dos cadenas de péptidos, denominadas cadenas A o B que comparten un 60% de homología en su secuencia de aminoácidos primaria. Las cadenas están ligadas por puentes disulfuro formando la proteína madura de 30 kDa compuesta por homo o heterodímeros AA, BB o AB. El PDGF está presente a niveles altos en plaquetas y es expresado por células endoteliales y células de la musculatura lisa vascular. Además, la producción de PDGF está sensibilizada bajo condiciones de poco oxígeno, tal como las condiciones observadas en los tejidos tumorales poco vascularizados (Kourembanas, S., et al., Kidney Int, 1997, 51 (2), 438-43). El PDGF se une con gran afinidad al receptor del PDGF, un receptor con tirosina quinasa transmembrana de 124 kDa y 1106 aminoácidos (Heldin, C.H., A. Ostman y L. Ronnstrand, Biochim Biophys Acta, 1998. 1378(1), 79-113). El PDGFR se encuentra en la forma de cadenas de homo o heterodímeros que tienen en general un 30% de homología en su secuencia de aminoácidos y un 64% de homología entre sus dominios quinasa (Heldin, C.H., et al.. Embo J, 1988, 7(5), 1387-93). El PDGFR es miembro de una familia de tirosina quinasa de receptores con dominios quinasa partidos que incluye VEGFR2 (KDR), VEGFR-3 (flt-4), c-Kit y FLT3. El receptor de PDGF se expresa primariamente sobre fibroblastos, células de musculatura lisa y perícitos y en menor grado sobre neuronas, células de mesangio renal, de Leydig y de Schwann en el sistema nervioso central. Después de la unión al receptor, el PDGF induce dimerización del receptor y sufre auto y transfosforilación de los residuos tirosina lo que incrementa la actividad quinasa de los receptores y promueve el reclutamiento de efectores posteriores por medio de la activación de los dominios de unión a la proteína SH2. Numerosas moléculas de señalización forman complejos con el PDGFR activado incluyendo la PI-3-quinasa, la fosfolipasa C-gamma, src y GAP (proteína activadora de GTPasa para p21-ras) (Soskic, V., et al. Biochemistry, 1999, 38(6), 1757-64). El PDGF activa la vía de señalización Rho a través de la activación de la PI-3-quinasa, lo que induce motilidad y migración celular, y a través de la activación de GAP, induce mitogénesis a través de la activación de vía de señalización de MAPK y p21-ras. En adultos, se cree que la principal función de PDGF consiste en facilitar e incrementar la velocidad de cicatrización de heridas y mantener la homeostasis de los vasos sanguíneos (Baker, E.A. y D.J. Leaper, Wound Repair Regen, 2000. 8(5), 392-8; y Yu, J., A. Moon, y H.R. Kim, Biochem Biophys Res Commun, 2001. 282(3), 697-700).

El PDGF se encuentra a concentraciones altas en plaquetas y es una potente sustancia de quimioatracción para fibroblastos, células de la musculatura lisa, neutrófilos y macrófagos. Además de su función en la cicatrización de heridas, el PDGF es conocido por su participación en el mantenimiento de la homeostasis vascular. Durante el desarrollo de nuevos vasos sanguíneos, el PDGF recluta los pericitos y las células de musculatura lisa necesarios para mantener la integridad estructural de los vasos. Se cree que el PDGF cumple una función similar durante la neovascularización de tumores. Como parte de su rol en la angiogénesis, el PDGF controla la presión de los líquidos intersticiales, regulando la permeabilidad de los vasos a través de la regulación de la interacción entre las células del tejido conectivo y la matriz extracelular. La inhibición de la actividad del PDGFR puede disminuir la presión intersticial y facilitar el influjo de sustancias citotóxicas en los tumores mejorando así la eficacia antitumoral de estos agentes (Pietras, K., et al. Cáncer Res, 2002. 62(19), 5476-84; Pietras, K., et al. Cáncer Res, 2001. 61 (7), 2929-34). El PDGF puede promover el crecimiento tumoral a través de una estimulación ya sea parácrina o autócrina de los receptores PDGFR sobre células estromáticas o directamente sobre células tumorales o por medio de la amplificación del receptor o la activación del receptor por recombinación. El PDGF sobreexpresado puede transformar células de melanoma y queratinocitos humanos (Forsberg, K., et al. Proc Nati Acad Sci EE.UU., 1993. 90(2), 393-7; Skobe, M. y N.E. Fusenig, Proc Nati Acad Sci EE.UU., 1998. 95(3), 1050-5), que son dos tipos celulares que no expresan receptores de PDGF, presumiblemente por el efecto directo de PDGF sobre la formación del estroma y la inducción de angiogénesis. Esta estimulación parácrina del estroma tumoral también se observa en carcinomas de colon, pulmón, mama y próstata (Bhardwaj, B., et al. Clin Cáncer Res, 1996, 2(4), 773-82; Nakanishi, K., et al. Mod Pathol, 1997, 10(4), 341-7; Sundberg, C, et al. Am J Pathol, 1997, 151(2), 479-92; Lindmark, G., et al. Lab Invest, 1993, 69(6), 682-9; Vignaud, J.M., et al, Cáncer Res, 1994, 54(20), 5455-63) donde los tumores expresan PDGF, pero no al receptor. La estimulación autócrina del crecimiento de las células tumorales, donde una gran fracción de los tumores analizados expresan el ligando del PDGF y el receptor, se ha descrito en glioblastomas (Fleming, T.P., et al. Cáncer Res, 1992, 52(16), 4550-3), sarcomas de tejido blando (Wang, J., M.D. Coltrera y A.M. Gown, Cáncer Res, 1994, 54(2), 560-4) y distintos tipos de cáncer de ovario (Henriksen, R., et al. Cáncer Res, 1993, 53(19), 4550-4), próstata (Fudge, K., C.Y. Wang, y M.E. Stearns, Mod Pathol, 1994, 7(5), 549-54), páncreas (Fuña, K., et al. Cáncer Res, 1990, 50(3), 748-53) y pulmón (Antoniades, H.N., et al., Proc Nati Acad Sci EE.UU., 1992, 89(9), 3942-6). Se ha observado activación independiente del ligando en menor grado, pero se ha descrito en leucemia mielomonocítica crónica (CMML), donde el evento de translocación cromosómica forma una proteína de fusión entre el factor de transcripción tipo Ets, TEL, y el receptor del PDGF. Además, se han encontrado mutaciones activadoras en el PDGFR en tumores del estroma gastrointestinal en los cuales no hay compromiso de activación de c-Kit (Heinrich, M.C., et al., Science, 2003, 9, 9). Otro importante regulador de la angiogénesis y vasculogénesis en el desarrollo embrionario y algunas enfermedades dependientes de la angiogénesis es el factor de crecimiento del endotelio vascular (VEGF; también denominado factor de permeabilidad vascular, VPF). El VEGF representa una familia de isoformas de mitógenos que existen en sus formas homodiméricas debido a un procesamiento alternativo del ARN. Las isoformas del VEGF son altamente específicas para las células endoteliales vasculares (por revisiones sobre este tema, véase: Farrara et al. Endocr. Rev. 1992, 13, 18; Neufield et al. FASEB J. 1999, 13, 9). La expresión del VEGF es inducida por hipoxia (Shweiki et al. Nature 1992, 359, 843), así como por una variedad de citoquinas y factores de crecimiento, tales como interíeuquina-1 , interleuquina-6, factor de crecimiento epidérmico y factor de crecimiento transformante. Hasta la fecha, se ha descrito que VEGF y los miembros de la familia del VEGF se unen a una o más de tres tirosina quinasas de receptores transmembrana (Mustonen et al. J. Cell Biol., 1995, 129, 895). Se ha demostrado que el receptor de VEGF-1 (también conocido como flt-1 (tirosina quinasa-1 tipo fms-)), VEGFR-2 (también conocido como receptor que contiene un dominio de inserción quinasa (KDR); el análogo murino de VEGFR-2 es conocido como la quinasa-1 de hígado fetal (flk-1)) y VEGFR-3 (también conocido como flt-4). Se ha demostrado que VEGFR-2 y flt-1 presentan diferentes propiedades de transducción de señales (Waltenberger et al. J. Biol. Chem. 1994, 269, 26988); Park et al. Oncogene 1995, 10, 135). Por lo tanto, el VEGFR-2 sufre una fuerte fosforilación de tirosina dependiente del ligando en células intactas, en tanto flt-1 muestra una respuesta débil. Por consiguiente, se cree que la unión al VEGFR-2 constituye un requerimiento crítico para la inducción del espectro completo de las respuestas biológicas mediadas por VEGF. In vivo, el VEGF cumple una función primordial en la vasculogénesis e induce angiogénesis y permeabilización de vasos sanguíneos. Una expresión desregulada del VEGF contribuye en el desarrollo de numerosas enfermedades caracterizadas por procesos anormales de angiogénesis y/o hiperpermeabilidad. Se considera que la regulación de la cascada de transducción de señales mediada por VEGF con algunos agentes puede proveer un control útil de los procesos anormales de angiogénesis y/o hiperpermeabilidad. Las células tumorigénicas dentro de regiones hipóxicas de los tumores responden por estimulación de la producción del VEGF, que desencadena la activación de células endoteliales quiescentes para estimular la formación de nuevos vasos sanguíneos (Shweiki et al., Proc. Nat'l. Acad. Sci. 1995, 92, 768). Además, la producción de VEGF en las regiones tumorales donde no hay angiogénesis puede tener lugar a través de la vía de transducción de señales ras (Grugel et al. J. Biol. Chem. 1995, 270, 25915; Rak et al. Cáncer Res. 1995, 55, 4575). Los estudios de hibridación in situ han demostrado que el ARNm del VEGF está fuertemente sensibilizada en una gran variedad de tumores humanos, incluyendo carcinomas de pulmón (Mattern et al. Br. J Cáncer 1996, 73, 931), tiroides (Viglietto et al. Oncogene 1995, 11 , 1569), mama (Brown et al., Human Pathol. 1995, 26, 86), del tracto gastrointestinal (Brown et al., Cáncer Res., 1993, 53, 4727; Suzuki et al. Cáncer Res., 1996, 56, 3004), de riñon y vejiga (Brown et al. Am. J. Pathol., 1993, 1431 , 1255), de ovario (Olson et al. Cáncer Res., 1994, 54, 1255) y cervical (Guidi et al. J Nat'l Cáncer Inst., 1995, 87, 12137), así como angiosarcomas (Hashimoto et al. Lab. Invest., 1995, 73, 859) y diversos tumores intracraniales (Píate et al. Nature 1992, 359, 845; Phillips et al. Int. J. Oncol. 1993, 2, 913; Berkman et al. J. Clin. Invest., 1993, 91, 153). Se ha demostrado que la neutralización de anticuerpos monoclonales contra VEGFR-2 es eficaz para bloquear la angiogénesis en tumores (Kim et al. Nature 1993, 362, 841 ; Rockwell et al. Mol. Cell. Differ. 1995, 3, 315). La sobreexpresión de VEGF, por ejemplo bajo condiciones de hipoxia extrema, puede conducir a una angiogénesis intraocular que da como resultado la hiperproliferación de vasos sanguíneos, lo que eventualmente terminará con una ceguera. Dicha cascada de eventos fue observada en numerosas retinopatías, incluyendo retinopatía diabética, oclusión isquémica de la vena retinal y retinopatía del prematuro (Aiello et al. New Engl. J. Med. 1994, 331, 1480; Peer et al. Lab. Invest. 1995, 72, 638), así como la degeneración macular relacionada con la edad (AMD; véase, López et al. Invest. Opththalmol. Vis. Sci. 1996, 37, 855). En la artritis reumatoide (RA), el crecimiento hacia dentro del pannus vascular puede estar mediado por la producción de factores angiogénicos. Los niveles de VEGF inmunorreactivo son altos en el líquido sinovial de pacientes con RA, en tanto los niveles de VEGF eran bajos en el líquido sinovial de pacientes con otras formas de artritis en la enfermedad degenerativa de articulaciones (Koch et al. J. Immunol. 1994, 152, 4149). Se ha demostrado que el inhibidor de angiogénesis AGM-170 impide la neovascularización de la articulación en el modelo de artritis por colágeno en rata (Peacock et al. J. Exper. Med. 1992, 175, 1135). Dicha mayor expresión de VEGF también se ha demostrado en la piel psoriática, así como en los trastornos bullosos asociados con la formación subepidérmica de ampollas, tales como penfigoide ampolloso, eritema multiforme y dermatitis herpetiforme (Brown et al. J. Invest. Dermatol. 1995, 104, 744). Los factores de crecimiento del endotelio vascular (VEGF, VEGF-C, VEGF-D) y sus receptores (VEGFR2, VEGFR3) no sólo son reguladores clave de la angiogénesis tumoral, sino también de la linfangiogénesis. Los factores VEGF, VEGF-C y VEGF-D se expresan en la mayoría de los tumores, primariamente durante los períodos de crecimiento tumoral y a menudo a niveles sustancialmente incrementados. La expresión del VEGF es estimulada por hipoxia, citoquinas, oncogenes tal como ras o por inactivación de genes supresores tumorales (McMahon, G. Oncologist 2000, 5(Supl.. 1), 3-10; McDonald, N.Q.; Hendrickson, W.A. Cell 1993, 73, 421-424). Las actividades biológicas de los VEGF están mediadas por la unión a sus receptores. El VEGFR3 (también denominado flt-4) se expresa predominantemente sobre el endotelio linfático en tejidos normales de adultos. La función del VEGFR3 es necesaria para la formación de nuevos vasos linfáticos, pero no para el mantenimiento de vasos linfáticos preexistentes. El VEGFR3 también está sensibilizado sobre el endotelio de vasos sanguíneos en los tumores. Recientemente, se han identificado ligandos para VEGFR3, VEGF-C y VEGF-D, como reguladores de la linfangiogénesis en mamíferos. La linfangiogénesis inducida por factores linfangiogénicos asociados a tumores podría promover el crecimiento de nuevos vasos hacia el tumor, lo que proporcionaría acceso de las células tumorales a la circulación sistémica. Las células que invaden los vasos linfáticos podrán abrirse paso hacia el torrente sanguíneo a través del conducto torácico. Estudios sobre expresión en tumores han permitido efectuar una comparación directa de la expresión de VEGF-C, VEGF-D y VEGFR3 con factores clinicopatológicos que se relacionan directamente con la capacidad de dispersión de los tumores primarios (por ejemplo, compromiso de nodulos linfáticos, invasión linfática, metástasis secundarias y sobrevida sin enfermedad). En muchos casos, estos estudios muestran una correlación estadística entre la expresión de factores linfangiogénicos y la capacidad de un tumor sólido primario de hacer metástasis (Skobe, M. et al. Nature Med. 2001, 7(2), 192-198; Stacker, S.A. et al.. Nature Med. 2001, 7(2), 186-191; Makinen, T. et al. Nature Med. 2001, 7(2), 199-205; Mandriota, S.J. et al. EMBO J. 2001, 20(4), 672-82; Karpanen, T. et al. Cáncer Res. 2001, 61(5), 1786-90; Kubo, H. et al. Blood 2000, 96(2), 546-53). La hipoxia parece ser un importante estímulo para la producción de VEGF en células malignas. La activación de la p38 MAP quinasa es necesaria para la inducción de VEGF por células tumorales como respuesta a la hipoxia (Blaschke, F. et al.

Biochem. Biophys. Res. Commun. 2002, 296, 890-896; Shemirani, B. et al. Oral Oncology 2002, 38, 251-257). Además de su compromiso en la angiogénesis a través de la regulación de la secreción de VEGF, la p38 MAP quinasa promueve la invasión de células malignas y la migración de diferentes tipos de tumores a través de la regulación de la actividad colagenasa y la expresión del activador de plasminógeno uroquinasa (Laferriere, J. et al. J. Biol. Chem. 2001 , 276, 33762-33772; Westermarck, J. et al. Cáncer Res. 2000, 60, 7156-7162; Huang, S. et al. J. Biol. Chem. 2000, 275, 12266-12272; Simón, C. et al. Exp. Cell Res. 2001, 271, 344-355). Se ha demostrado que la inhibición de la proteína quinasa (MAPK) p38 activada por mitógenos inhibe tanto la producción de citoquinas (por ejemplo, TNF, IL-1 , IL-6, IL-8) como la producción de enzimas proteolíticas (por ejemplo, MMP-1 , MMP-3) in vitro y/o in vivo. La proteína (MAP) quinasa p38 activada por mitógenos está relacionada con las vías de señalización de IL-1 y TNF (Lee, J. O; Laydon, J. T.; McDonnell, P. C; Gallagher, T. F.; Kumar, S.; Green, D.; McNulty, D.; Blumenthal, M. J.; Heys, J. R.; Landvatter, S. W.; Stricker, J. E.; McLaughlin, M. M.; Siemens, I. R.; Fisher, S. M.; Livi, G. P.; White, J. R.; Adams, J. L; Yound, P. R. Nature 1994, 372, 739). Estudios clínicos han relacionado la producción y/o señalización del factor de necrosis tumoral (TNF) con numerosas enfermedades incluyendo artritis reumatoide (Maini, J. Royal. Coll. Physicians, Londres 1996, 30, 344), enfermedades inmunomoduladores, incluyendo fiebre reumática aguda (Yegin et al. Lancet 1997, 349, 170), resorción ósea (Pacifici et al. J. Clin. Endocrinol. Metabol. 1997, 82, 29), osteoporosis postmenopáusica (Pacifici et al. J. Bone Mineral Res. 1996, 11 , 1043), sepsis (Blackwell et al. Br. J. Anaesth. 1996, 77, 110), sepsis Gram-negativa (Debets et al. Prog. Clin. Biol. Res. 1989, 308, 463), shock séptico (Tracey et al. Nature 1987, 330, 662; Girardin et al. New England J Med. 1988, 319, 397), shock endotóxico (Beutler et al. Science 1985, 229, 869; Ashkenasi et al. Proc. Nat'l. Acad. Sci. EE.UU. 1991 , 88, 10535, síndrome de shock tóxico, (Saha et al. J. Immunol. 1996, 157, 3869; Lina et al. FEMS Immunol. Med. Microbiol. 1996, 13, 81 ), síndrome de respuesta inflamatoria sistémica (Anón. Crit. Care Med. 1992, 20, 864), enfermedades de intestino inflamatorio (Stokkers et al. J. Inflamm. 1995-6, 47, 97) incluyendo enfermedad de Crohn (van Deventer et al. Aliment. Pharmacol. Therapeu. 1996, 10 (Supl. 2), 107; van Dullemen et al. Gastroenterology 1995, 109, 129) y colitis ulcerosa (Masuda et al. J. Clin. Lab. Immunol. 1995, 46, 111 ), reacciones de Jarisch-Herxheimer (Fekade et al. New England J. Med. 1996, 335, 311), asma (Amrani et al. Rev. Malad. Respir. 1996, 13, 539), síndrome de dificultad respiratoria de adultos (Roten et al. Am. Rev. Respir. Dis. 1991, 143, 590; Suter et al. Am. Rev. Respir. Dis. 1992, 145, 1016), enfermedades fibróticas pulmonares agudas (Pan et al. Pathol. Int. 1996, 46, 91 ), sarcoidosis pulmonar (Ishioka et al. Sarcoidosis Vasculitis Diffuse Lung Dis. 1996, 13, 139), enfermedades respiratorias alérgicas (Cásale et al., Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 1996, 15, 35), silicosis (Gossart et al. J. Immunol. 1996, 156, 1540; Vanhee et al. Eur. Respir. J. 1995, 8, 834), pneumoconiosis de los mineros del carbón (Borm et al. Am. Rev. Respir. Dis. 1988, 138, 1589), lesiones alveolares (Horinouchi et al. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 1996, 14, 1044), insuficiencia hepática (Gantner et al. J. Pharmacol. Exp. Therap. 1997, 380, 53), enfermedad hepática durante una inflamación aguda (Kim et al. J. Biol. Chem. 1997, 272, 1402), hepatitis alcohólica severa (Bird et al. Ann. Intern. Med. 1990, 112, 917), malaria (Graze et al. Immunol. Rev. 1989, 112, 49; Taverne et al. Parasitol. Today 1996, 13, 290) incluyendo malaria por Plasmodium falciparum (Perlmami et al. Infecí Immunit. 1997, 65, 116) y malaria cerebral (Rudin et al. Am. J. Pathol. 1997, 150, 257), diabetes mellitus no dependiente de insulina (NIDDM; Stefens et al. J. Biol. Chem. 1997, 272, 971 ; Ofei et al. Diabetes 1996, 45, 881), insuficiencia cardíaca congestiva (Doyama et al. Int. J. Cardiol. 1996, 54, 217; McMurray et al. Br. Heart J 1991 , 66, 356), daño después de una enfermedad cardíaca (Malkiel et al. Mol. Med. Today 1996, 2, 336), aterosclerosis (Parums et al. J. Pathol. 1996, 179, A46), mal de Alzheimer (Fagarasan et al. Brain Res. 1996, 723, 231 ; Aisen et al. Gerontology 1997, 43, 143), encefalitis aguda (Ichiyama et al. J. Neurol. 1996, 243, 457), daño cerebral (Cannon et al. Crit. Care Med. 1992, 20, 1414; Hansbrough et al. Surg. Clin. N. Am. 1987, 67, 69; Maraño et al. Surg. Gynecol. Obstetr. 1990, 170, 32), esclerosis múltiple (M.S.; Coile. Adv. Neuroimmunol. 1996, 6, 143; Matusevicius et al. J.

Neuroimmunol. 1996, 66, 115) incluyendo desmielinización y pérdida de oligodendrocitos en la esclerosis múltiple (Brosnan et al. Brain Pathol. 1996, 6, 243), cáncer avanzado (MucWierzgon et al. J. Biol. Regulators Homeostatic Agents 1996, 10, 25), formas malignas linfoides (Levy et al. Crit. Rev. Immunol. 1996, 16, 31), pancreatitis (Exley et al. Gut 1992, 33, 1126) incluyendo complicaciones sistémicas en la pancreatitis aguda (McKay et al. Br. J. Surg. 1996, 83, 919), deterioro de la cicatrización de heridas en infecciones, inflamaciones y cáncer (Buck et al. Am. J. Pathol. 1996, 149, 195), síndromes mielodisplásicos (Raza et al. Int. J Hematol. 1996, 63, 265), lupus eritematoso sistémico (Maury et al. Artritis Rheum. 1989, 32, 146), cirrosis biliar (Miller et al. Am. J. Gasteroenterolog. 1992, 87, 465), necrosis intestinal (Sun et al. J. Clin, Invest. 1988, 81 , 1328), psoriasis (Christophers. Austr. J. Dermatol. 1996, 37, S4), lesiones por radiación (Redlich et al. J. Immunol. 1996, 157, 1705) y toxicidad después de administración de anticuerpos monoclonales tal como OKT3 (Brod et al. Neurology 1996, 46, 1633). Los niveles de TNF también se han relacionado con las reacciones de huésped-versus-injerto (Piquet et al. Immunol. Ser. 1992, 56, 409) incluyendo lesiones por reperfusión isquémica (Colletti et al. J. Clin. Invest. 1989, 85, 1333) y rechazo de aloinjertos incluyendo los de riñon (Maury et al. J. Exp. Med. 1987, 166, 1132), hígado (Imagawa et al. Transplantation 1990, 50, 219), corazón (Bolling et al. Transplantation 1992, 53, 283) y piel (Stevens et al. Transplant. Proc. 1990, 22, 1924), rechazo de aloinjertos de pulmón (Grossman et al. Immunol. Allergy Clin. N. Am. 1989, 9, 153) incluyendo rechazo crónico de aloinjertos de pulmón (bronquitis obliterante; LoCicero et al. J. Thorac. Cardiovasc. Surg 1990, 99, 1059), así como complicaciones debidas a un reemplazo total de cadera (Girino et al. Life Sci. 1996, 59, 86). El TNF también se ha relacionado con enfermedades infecciosas (revisión: Beutler et al. Crit. Care Med. 1993, 21 , 5423; Degre, Biotherapy 1996, 8, 219) incluyendo tuberculosis (Rook et al. Med Malad. Infecí 1996, 26, 904), infección por Helicobacter pilori durante la enfermedad de úlcera péptica (Beales et al. Gastroenterology 1997, 112, 136), enfermedad de Chagas debida a una infección por Trypanosoma cruzi (Chandrasekar et al. Biochem. Biophys. Res. Común. 1996, 223, 365), efectos de la toxina tipo Shiga debidos a una infección por E. coli (Harel et al. J Clin. Invest. 1992, 56, 40), los efectos de la enterotoxina A debido a una infección por Staphilococcus (Fischer et al. J. Immunol. 1990, 144, 4663), infección meningocóccica (Waage et al. Lancet 1987, 355; Ossege et al. J. Neurolog. Sci. 1996, 144, 1) e infecciones por Borrelia burgdorferi (Brandt et al. Infecí. Immunol. 1990, 58, 983), Treponema pallidum (Chamberlin et al. Infecí Immunol. 1989, 57, 2872), citomegalovirus (CMV; Geist et al. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 1997, 16, 31), virus de la influenza (Beutler et al. Clin. Res. 1986, 34, 491a), virus Sendai (Goldfield et al. Proc. Nat'l. Acad. Sci. EE.UU. 1989, 87, 1490), virus de encefalomielitis de Theiler (Sierra et al. Immunology 1993, 78, 399) y el virus de inmunodeficiencia humana (VIH; Poli, Proc. Nat'l. Acad. Sci. EE.UU. 1990, 87, 782; Vyakaram et al. AIDS 1990, 4, 21 ; Badley et al. J. Exp. Med. 1997, 185, 55). Se considera que numerosas enfermedades están mediadas por una actividad excesiva o indeseada de metaloproteasas destructoras de la matriz (MMP) o por un desequilibrio en la relación de las MMP con respecto a los inhibidores tisulares de metaloprotei nasas (TIMP). Estos incluyen osteoartritis (Woessner et al. J. Biol. Chem. 1984, 259, 3633), artritis reumatoide (Mullins et al. Biochim. Biophys. Acta 1983, 695, 117; Woolley et al. Artritis Rheum. 1977, 20, 1231 ; Gravallese et al. Artritis Rheum. 1991, 34, 1076), artritis séptica (Williams et al. Artritis Rheum. 1990, 33, 533), metástasis de tumores (Reich et al. Cáncer Res. 1988, 48, 3307; Matrisian et al. Proc. Nat'l. Acad. Sci., EE.UU. 1986, 83, 9413), enfermedades periodontológicas (Overall et al. J Periodontal Res. 1987, 22, 81), ulceración de la córnea (Quemaduras et al. Invest. Opthalmol. Vis. Sci. 1989, 30, 1569), proteinuria (Baricos et al. Biochem. J. 1988, 254, 609), trombosis coronaria por ruptura de una placa ateroscl erótica (Henney et al. Proc. Nat'l. Acad. Sci., EE.UU. 1991 , 88, 8154), enfermedad de aneurisma aórtica (Vine et al. Clin. Sci. 1991 , 81 , 233), control de la natalidad (Woessner et al. Steroids 1989, 54, 491), epidermolisis bullosa distrófica (Kronberger et al. J Invest. Dermatol. 1982, 79, 208), pérdida de cartílago degenerativo después de una lesión traumática de articulaciones, osteopenias mediadas por actividad MMP, enfermedad de la articulación tempero-mandibular y enfermedades desmielinizantes del sistema nervioso (Chantry et al. J. Neurochem. 1988, 50, 688). Dado que la inhibición de p38 conduce a una inhibición de la producción de TNF y de la producción de MMP, se cree que la inhibición de la enzima p38 proteína (MAP) quinasa activada por mitógenos puede proporcionar un enfoque para el tratamiento de las enfermedades enumeradas precedentemente, incluyendo osteoporosis y trastornos inflamatorias tal como artritis reumatoide y COPD (Badger, A.M.; Bradbeer, J. N.; Votta, B.; Lee, J. C; Adams, J. L; Griswold, D. E. J. Pharm. Exper. Ther. 1996, 279, 1453). La hipoxia parece ser un importante estímulo para la producción de VEGF en células malignas. La activación de la p38 MAP quinasa es necesaria para la inducción del VEGF por células tumorales como respuesta a una hipoxia (Blaschke, F. et al. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2002, 296, 890-896; Shemirani, B. et al. Oral Oncology 2002, 38, 251-257). Además de su compromiso en la angiogénesis a través de la regulación de la secreción de VEGF, la p38 quinasa promueve la invasión de células malignas y la migración de diferentes tipos de tumores por medio de la regulación de la actividad colagenasa y la expresión del activador de plasminógeno uroquinasa (Laferriere, J. et al. J. Biol. Chem. 2001, 276, 33762-33772; Westermarck, J. et al. Cáncer Res. 2000, 60, 7156-7162; Huang, S. et al. J. Biol. Chem. 2000, 275, 12266-12272; Simón, O et al. Exp. Cell Res. 2001 , 271, 344-355). Por ello, también se espera que la inhibición de la p38 quinasa afecte el crecimiento tumoral porque interfiere con las cascadas de señalización asociadas con la angiogénesis y también con la invasión de células malignas. Se ha descrito que determinadas ureas tienen actividad como inhibidores de serina-treonina quinasa y/o tirosina quinasa. En particular, se ha demostrado la utilidad de determinadas ureas como ingrediente activo en composiciones farmacéuticas para el tratamiento de cáncer, trastornos angiogenéticos, trastornos inflamatorios. Para cáncer y angiogénesis, véase; Smith et al., Bioorg. Med. Chem. Letí 2001,11 , 2775-2778. Lowinger et al., Clin. Cáncer Res. 2000, 6(Supl..), 335.

Lyons et al., Endocr.-Relaí Cáncer 2001, 8, 219-225. Riedl et al., Book of Abstracts, 92nd AACR Meeting, Nueva Orleans, LA, EE.UU., resumen 4956. Khire et al., Book of Abstracts, 93r AACR Meeting, San Francisco, CA, EE.UU., resumen 4211. Lowinger et al., Curr. Pharm. Design 2002, 8, 99-110. Cárter et al., Book of Abstracts, 92ndAACR Meeting, Nueva Orleans, LA, EE.UU., resumen 4954. Vincent et al., Book of Abstracts, 38th ASCO Meeting, Orlando, FL, EE.UU., resumen 1900. Hilger et al., Book of Abstracts, 38th ASCO Meeting, Orlando, FL, EE.UU., resumen 1916. Moore et al., Book of Abstracts, 38*11 ASCO Meeting, Orlando, FL, EE.UU., resumen 1816. Strumberg et al., Book of Abstracts, 3^ ASCO Meeting, Orlando, FL, EE.UU., resumen 121. Para las enfermedades mediadas por p38, incluyendo trastornos inflamatorios, véase: Redman et al., Bioorg. Med. Chem. Letí 2001 , 11, 9-12. Dumas et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2000, 10, 2047-2050. Dumas et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2000, 10, 2051-2054. Ranges et al., Book of Abstracts, 220th ACS National Meeting, Washington, DC, EE.UU., MEDÍ 149. Dumas et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2002, 12, 1559-1562. Regan et al., J. Med. Chem. 2002, 45, 2994-3008. Pargellis et al., Nature Strucí Biol. 2002, 9(4), 268-272. Madwed JB: Book of Abstracts, Protein Kinases: Novel Target Identification and Validation for Therapeutic Development, San Diego, CA, EE.UU., Marzo 2002. Pargellis O et al., Curr. Opin. Invest. Drugs 2003, 4, 566-571.

Branger J. et al., J. Immunol. 2002, 168, 4070-4077. Branger J. et al., Blood 2003, 101 , 4446-4448. Las omega-carboxiaril-difenil-ureas se describen en WO00/42012, publicada: 20 de julio, 2000, WO00/41698, publicada: el 20 de julio, 2000, en las siguientes solicitudes de patente de EE.UU. publicadas: US2002-0165394-A1 , publicada el 7 de noviembre, 2002, US2001-003447-A1 , publicada el 25 de octubre, 2001, US2001-0016659-A1 , publicada el 23 de agosto, 2001 , US2002-013774-A1 , publicada el 26 de septiembre, 2002, y en las solicitudes copendientes de patentes de EE.UU.: 09/758,547, presentada el 12 de enero, 2001 , 09/889,227, presentada el 12 de julio, 2001 , 09/993,647, presentada el 27 de noviembre, 2001 , 10/042,203, presentada el 11 de enero, 2002 y 10/071 ,248, presentada el 11 de febrero, 2002, Descripción de la invención Se ha descubierto que la siguiente omega-carboxiaril-difenil-urea de la fórmula I, que tiene un grupo 2-fluoro-4-(2-(N-metilcarbamoil)-4-piridiloxi)fenileno unido a la urea es un potente inhibidor de la raf quinasa, la VEGFR quinasa, la p38 quinasa y la PDGFR quinasa, que son todos blancos moleculares de interés para el tratamiento y la prevención de osteoporosis, trastornos inflamatorios, trastornos hiperproliferativos y trastornos angiogenéticos, incluyendo cáncer: La presente invención provee, por ejemplo, (i) un nuevo compuesto de la fórmula (I), sales, prodrogas y metabolitos del mismo, (ii) composiciones farmacéuticas que contiene dicho compuesto y (iii) el uso de este compuesto o de las composiciones para el tratamiento de enfermedades y afecciones mediadas por raf, VEGFR, PDGFR, flt-3 y p38, ya sea como agente único o en combinación con terapias citotóxicas.

El compuesto de la siguiente fórmula I, y sales, prodrogas y metabolitos del mismo, se denominan en su conjunto como "compuestos de la invención". La fórmula I es como sigue: Los metabolitos del compuesto de esta invención incluyen derivados oxidados de la fórmula I, donde uno o más de los nitrógenos de la urea están sustituidos por un grupo hidroxi. Los metabolitos del compuesto de esta invención también incluyen análogos en los cuales el grupo metilamida del compuesto de la fórmula I es hidroxilado y luego desmetilado por degradación metabólica. Los metabolitos del compuesto de esta invención incluyen además derivados oxidados, donde el átomo de nitrógeno de la piridina se encuentra en la forma del N-óxido (por ejemplo, contiene un sustituyente hidroxi) lo que conduce a aquellas estructuras conocidas en la técnica como 1-oxo-piridina y 1-hidroxi-piridina. Cuando en la presente se utiliza la forma en plural de las palabras compuestos, sales y semejantes, se considera que también hacen referencia a un solo compuesto, sal o semejantes. El uso de sales aceptables para uso farmacéutico de los compuestos de la fórmula I también se encuentra dentro del alcance de esta invención. El término "sal aceptable para uso farmacéutico" se refiere a una sal de adición acida inorgánica u orgánica, relativamente no tóxica, de un compuesto de la presente invención. Por ejemplo, véase S. M. Berge, et al. "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci. 1977, 66, 1-19. Las sales representativas del compuesto de esta invención incluyen las sales convencionales no tóxicas, por ejemplo, de ácidos inorgánicos u orgánicos obtenidos por medios bien conocidos en la técnica. Por ejemplo, dichas sales de adición acida incluyen acetato, adipato, alginato, ascorbato, aspartato, benzoato, bencensulfonato; bisulfato, butirato, citrato, alcanforato, alcanforsulfonato, cinamato, ciclopentanpropionato, digluconato, dodecilsulfato, etansulfonato, fumarato, glucoheptanoato, glicerofosfato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, clorhidrato, bromhidrato; iodhidrato, 2-hidroxietansulfonato, itaconato, lactato, maleato, mandelato, metansulfonato, 2-naftalensulfonato, nicotinato, nitrato, oxalato, pamoato, pectinato, persulfato, 3-fenilpropionato, picrato, pivalato, propionato, succinato, sulfonato, tartrato, tiocianato, tosilato y undecanoato. Las sales o prodrogas de los compuestos de la fórmula I pueden contener uno o más centros asimétricos. Los átomos de carbono asimétricos pueden estar en la configuración (R) o (S) o en la configuración (R,S). Los sustituyentes en el anillo también se pueden encontrar en la forma cis o trans. Se considera que todas dichas configuraciones (incluyendo los enantiómeros y diastereómeros), están incluidos en el alcance de la presente invención. Los isómeros preferidos son aquellos con la configuración permita lograr la actividad biológica más deseable. Los isómeros separados, puros o parcialmente purificados o las mezclas racémicas de los compuestos de esta invención también están incluidos en el alcance de la presente invención. La purificación de dichos isómeros y la separación de dichas mezclas isoméricas se pueden efectuar mediante las técnicas estándar conocidas en la técnica.

El proceso particular a utilizar en la preparación del compuesto usado en esta realización de la invención se describirá en el Ejemplo 1. Las formas de sales del compuesto de la fórmula (I) se describirán en los Ejemplos 2, 3 y 4. Métodos de uso La presente invención provee compuestos capaces de modular una o más vías de transducción de señales que comprenden raf, VEGFR, PDGFR, p38 y/o flt-3 quinasas. Raf es una importante molécula de señalización relacionada con la regulación de numerosos procesos celulares clave, incluyendo crecimiento celular, sobrevida e invasión de células. Es un miembro de la vía Ras/raf/MEK/ERK. Esta vía está presente en la mayoría de las células tumorales. VEGFR, PDGFR y flt-3 son moléculas de receptores transmembrana que, cuando son estimuladas por un ligando apropiado, desencadena la vía de señalización celular Ras/raf/MEKJERK, que conduce a una cascada de eventos celulares. Cada una de estas moléculas receptoras presentan actividad tirosina quinasa. Los receptores VEGFR son estimulados por los factores de crecimiento del endotelio vascular (VEGF) y constituyen importantes puntos de control en la regulación del desarrollo y la función de las células endoteliales. El receptor PDGF-beta regula la proliferación y sobrevida celulares en numerosos tipos celulares, incluyendo células mesenquimáticas. Flt-3 es un receptor para el ligando FL. Es similar en cuanto a estructura a c-kit y modula el crecimiento de las células hematopoyéticas pluripotenciales, afectando el desarrollo de células-T, células-B y células dendríticas. Cualquier gen o isoforma de raf, VEGFR, PDGFR, p38 y/o flt-3 puede ser modulado de acuerdo con la presente invención, incluyendo tanto los el tipo salvaje como las formas mutantes. Raf o raf-1 quinasa constituye una familia de serina/treonina quinasas que comprende al menos tres miembros, a-raf, b-raf y c-raf o raf-1. Véase, por ejemplo, Dhillon y Kolch, Arch. Biochem. Biophys. 2002, 404, 3-9. C-raf y b-raf son los blancos preferidos para los compuestos de la presente invención. Se han identificado mutaciones b-raf activadoras (por ejemplo, el mutante V599E) en diversos tipos de cáncer, incluyendo melanoma, y los compuestos descritos en la presente se pueden utilizar para inhibir su actividad. El término "modular" se refiere a que la actividad funcional de la vía (o de un componente de la misma) cambia en comparación con su actividad normal en ausencia del compuesto. Este efecto incluye cualquier calidad o grado de modulación, incluyendo, incremento, agonismo, aumento, mejora, facilitación, estimulación, disminución, bloqueo, inhibición, reducción, disminución, antagonismo, etc. Los compuestos de la presente invención también pueden modular uno o más de los siguientes procesos, incluyendo, en un sentido no limitativo, por ejemplo, crecimiento celular (incluyendo, por ejemplo, diferenciación, sobrevida y/o proliferación celular), crecimiento de células tumorales (incluyendo, por ejemplo, diferenciación, sobrevida y/o proliferación celular), regresión tumoral, crecimiento de células endoteliales (incluyendo, por ejemplo, diferenciación, sobrevida y/o proliferación celular), angiogénesis (crecimiento de vasos sanguíneos), linfangiogénesis (crecimiento de vasos linfáticos) y/o hematopoyesis (por ejemplo, desarrollo de células T y B, desarrollo de células dendríticas, etc.). Sin tener en cuenta ninguna teoría o mecanismo de acción en especial, se ha encontrado que los compuestos de la presente invención tienen la capacidad de modular la actividad quinasa. Sin embargo, los métodos de la presente invención no se limitan a ningún mecanismo particular o manera en que los compuestos logran su efecto terapéutico. El término "actividad quinasa" se refiere a una actividad catalítica en la cual se transfiere gamma-fosfato de la adenosina trifosfato (ATP) a un residuo de aminoácido (por ejemplo, serina, treonina o tirosina) en un sustrato proteico. El compuesto puede modular la actividad quinasa, por ejemplo, inhibirla por competencia directa con el ATP por el sitio de unión del ATP de la quinasa, por provocar un cambio de conformación en la estructura de la enzima que afecta su actividad (por ejemplo, interrumpiendo la estructura tridimensional biológicamente activa), etc. La actividad quinasa puede determinarse de forma rutinaria usando métodos de ensayo convencionales. Los ensayos quinasa comprenden típicamente la enzima quinasa, sustratos, soluciones amortiguadoras y componentes de un sistema de detección. Un ensayo quinasa típico comprende la reacción de una proteína-quinasa con un sustrato peptídico y un ATP, tal como 32P-ATP, para obtener un producto final fosforilado (por ejemplo, una fosfoproteína cuando se usa un sustrato peptídico). El producto final resultante puede ser detectado usando cualquier método adecuado. Cuando se usa ATP radioactivo, se puede separar la fosfoproteína marcada radioactivamente del gamma-32P-ATP sin reaccionar usando una membrana de afinidad o electroforesis sobre gel y luego se puede visualizar sobre el gel usando autorradiografía o se puede detectar con un contador de centelleo. También se pueden usar métodos no radioactivos. Los métodos pueden emplear un anticuerpo que reconoce al sustrato fosforilado, por ejemplo, un anticuerpo anti-fosfotirosina. Por ejemplo, la enzima quinasa se puede incubar con el sustrato en presencia de ATP y solución amortiguadora quinasa bajo condiciones que sean eficaces para que la enzima fosforile el sustrato. La mezcla de reacción se puede separar, por ejemplo, electroforéticamente, y luego se puede medir la fosforilación del sustrato, por ejemplo, por transferencia Western usando un anticuerpo anti-fosfotirosina. El anticuerpo se puede marcar con una marca detectable, por ejemplo, una enzima, tal como HRP, avidina o biotina, reactivos quimioluminiscentes, etc. Otros métodos emplean formatos de ELISA, separación por membrana de afinidad, ensayos de polarización de fluorescencia, ensayos luminiscentes, etc. Una alternativa del formato radioactivo es la fluorescencia por transferencia de energía resonante con resolución temporal (TR-FRET). Este método emplea la reacción quinasa estándar, en el cual se fosforila un sustrato, por ejemplo, poli(GluTyr) biotinilado, con una proteína quinasa en presencia de ATP. El producto final puede ser detectado luego con un anticuerpo de quelato de europio fosfoespecífico (anti-fosfotirosina o fosfoserina/treonina) y estreptavidina-APC, que se une al sustrato biotinilado. Estos dos componentes se son reunidos espacialmente luego con la unión y la transferencia de energía del anticuerpo fosfospecífico al aceptor (SA-APC) produce una lectura fluorescente en el formato homogéneo. Los compuestos de la presente invención se pueden usar para tratar y/o prevenir cualquier enfermedad o afección mediada por una o más vías de transducción de señales celulares que comprenden raf, VEGFR, PDGFR, p38 y/o flt-3 quinasas. El término "tratar" se usa convencionalmente, por ejemplo, para el manejo o cuidado de un sujeto con el fin de combatir, aliviar, reducir, mitigar, mejorar la condición, etc., de una enfermedad o trastorno. Los compuestos también se pueden describir por su uso para prevenir y/o tratar enfermedades y/o afecciones mediadas por las moléculas de señalización. El término "mediado" indica, por ejemplo, que la molécula de señalización forma parte de la vía que es aberrante o alterada en dicha enfermedad y/o afección. Las enfermedades y afecciones que pueden ser tratadas incluyen todas las mencionadas precedentemente y de aquí en adelante, tales como: Las enfermedades asociadas a raf incluyen, por ejemplo, trastornos de proliferación celular, cáncer, tumores, etc; Las enfermedades asociadas a VEGFR-2 incluyen, por ejemplo, cáncer, crecimiento de tumores, enfermedades inflamatorias, artritis reumatoide, retinopatía, psoriasis, glomerulonefritis, asma, bronquitis crónica, aterosclerosis, rechazo de transplantes, afecciones que comprenden angiogénesis, etc.; Las enfermedades asociadas a VEGFR-3 incluyen, por ejemplo, cáncer, enfermedades de la córnea, córnea inflamada (por ejemplo, Hamrah, Am. J. Path. 2003, 163, 57-68), transplante de córnea (Cursiefen et al., Cornea 2003, 22, 273-81), hiperplasia linfática, afecciones que comprenden linfangiogénesis, etc.; Las enfermedades asociadas a PDGFR-beta incluyen, por ejemplo, enfermedades o afecciones caracterizadas por proliferación celular, producción de matriz celular, movimiento celular y/o producción de matriz extracelular. Los ejemplos específicos incluyen, por ejemplo, tumores, formas malignas, cáncer, metástasis, leucemia mieloide crónica, inflamación, enfermedades renales, nefropatía diabética, glomerulonefritis mesangial proliferativa, afecciones fibróticas, aterosclerosis; restenosis, arteriosclerosis relacionada con hipertensión, arteriesclerosis con injerto de derivación [bypass] venosa, escleroderma, enfermedades pulmonares intersticiales, trastornos sinoviales, artritis, leucemias, linfomas, etc; Las enfermedades asociadas a Flt-3 incluyen, por ejemplo, trastornos relacionados con el sistema inmune, trastornos de las células sanguíneas, afecciones que comprenden el desarrollo de células hematopoyéticas (por ejemplo, células T, células B, células dendríticas, cáncer, anemia, VIH, síndrome de inmunodeficiencia adquirida, etc. Las enfermedades asociadas a p38 incluyen trastornos inflamatorios, trastornos inmunomoduladores y otros trastornos que se han relacionado con la producción anormal de citoquinas, en especial TNF-alfa, o una actividad MMP anormal. Estos trastornos incluyen, en un sentido no limitativo, artritis reumatoide, COPD, osteoporosis, enfermedad de Crohn y psoriasis.

Además, los compuestos de la presente invención se pueden usar para tratar las afecciones y los trastornos descritos en la Patente de EE.UU. N°: 6.316.479, por ejemplo, esclerosis glomerular, nefritis intersticial, fibrosis pulmonar intersticial, aterosclerosis, cicatrización de heridas y escleroderma. Los compuestos de esta invención también presentan una amplia actividad terapéutica para tratar o prevenir el avance de un gran conjunto de enfermedades, tales como afecciones inflamatorias, restenosis coronaria, angiogénesis asociada a tumores, aterosclerosis, enfermedades autoinmunes, inflamación, algunas enfermedades renales asociadas con la proliferación de células glomerulares o mesangiales y enfermedades oculares asociadas con la proliferación de vasos retínales, psoriasis, cirrosis hepática, diabetes, aterosclerosis, restenosis, restenosis por injerto vascular, restenosis in-stent, angiogénesis, enfermedades oculares, fibrosis pulmonar, bronquiolitis obliterante, nefritis glomerular, artritis reumatoide. La presente invención también provee la posibilidad de tratar, prevenir, modular, etc., una o más de las siguientes afecciones en seres humanos y/u otros mamíferos: retinopatía, incluyendo retinopatía diabética, oclusión isquémica de la vena retinal, retinopatía del prematuro y degeneración macular relacionada con la edad; artritis reumatoide, psoriasis o trastorno bulloso asociado con la formación subepidérmica de ampollas, incluyendo penfigoide ampolloso, eritema multiforme o dermatitis herpetiforme, fiebre reumática, resorción ósea, osteoporosis postmenopáusica, sepsis, sepsis Gram-negativa, shock séptico, shock endotóxico, síndrome de shock tóxico, síndrome de respuesta inflamatoria sistémica, enfermedad del intestino inflamatorio (enfermedad de Crohn y colitis ulcerosa), reacción de Jarisch-Herxheimer, asma, síndrome de dificultad respiratoria de adultos, enfermedad fibrótica pulmonar aguda, sarcoidosis pulmonar, enfermedad respiratoria alérgica, silicosis, pneumoconiosis de los mineros del carbón, lesiones alveolares, insuficiencia hepática, enfermedad hepática durante una inflamación aguda, hepatitis alcohólica severa, malaria (malaria por Plasmodium falciparum y malaria cerebral), diabetes mellitus no dependiente de insulina (NIDDM), insuficiencia cardíaca congestiva, daño después de una enfermedad cardíaca, aterosclerosis, mal de Alzheimer, encefalitis aguda, daño cerebral, esclerosis múltiple (desmielinización y pérdida de oligodendrocitos en esclerosis múltiple), cáncer avanzado, forma maligna linfoide, pancreatitis, deterioro de la cicatrización de heridas en una infección, inflamación y cáncer, síndromes mielodisplásicas, lupus eritematoso sistémico, cirrosis biliar, necrosis intestinal, lesiones por radiación, toxicidad después de administración de anticuerpos monoclonales, reacción de huésped-versus-injerto (lesiones por reperfusión isquémica y rechazo de aloinjertos de riñon, hígado, corazón y piel), rechazo de aloinjertos de pulmón (bronquitis obliterante) o complicaciones debidas a un reemplazo total de labio, y una enfermedad infecciosa seleccionada entre tuberculosis, infección por Helicobacter pilori durante la enfermedad de úlcera péptica, enfermedad de Chagas debida a una infección por Trypanosoma cruz!, efectos de la toxina tipo Shiga debida a una infección por E. coli, efectos de la enterotoxina A debidos a una infección por Staphilococcus, infección meningocóccica e infecciones por Borrelia burgdorferi, Treponema pallidum, citomegalovirus, virus de la influenza, virus de encefalomielitis de Theiler y virus de inmunodeficiencia humana (VIH), papiloma, blastoglioma, sarcoma de Kaposi, melanoma, cáncer de pulmón, cáncer de ovario, cáncer de próstata, carcinoma de células escamosas, astrocitoma, cáncer de cabeza, cáncer de cuello, cáncer de vejiga, cáncer de mama, cáncer colorrectal, cáncer de tiroides, cáncer pancreático, cáncer gástrico, carcinoma hepatocelular, leucemia, linfoma, enfermedad de Hodgkin, enfermedad de Burkitt, artritis, artritis reumatoide, retinopatía diabética, angiogénesis, restenosis, restenosis in-stent, restenosis por injerto vascular, fibrosis pulmonar, cirrosis hepática, aterosclerosis, glomerulonefritis, nefropatía diabética, síndromes de microangiopatía trombótica, rechazo de transplantes, psoriasis, diabetes, cicatrización de heridas, inflamación y enfermedades neurodegenerativas, trastornos hiperinmunes, hemangioma, angiogénesis miocárdica, vascularización colateral coronaria y cerebral, isquemia, enfermedades de la córnea, rubeosis, glaucoma neovascular, degeneración macular, retinopatía del prematuro, cicatrización de heridas, enfermedades de úlceras relacionadas con Helicobacter, fracturas, endometriosis, una condición diabética, fiebre por arañazo de gato, hiperplasia de tiroides, asma o edema después de quemaduras, traumatismos, enfermedad crónica de pulmón, accidente cerebrovascular, pólipos, quistes, sinovitis, inflamación crónica y alérgica, síndrome de hiperestimulación de ovario, edema pulmonar y cerebral, queloide, fibrosis, cirrosis, síndrome de túnel carpiano, síndrome de dificultad respiratoria de adultos, ascites, una afección ocular, una afección cardiovascular, enfermedad de Crow-Fukase (POEMS), enfermedad de Crohn, glomerulonefritis, osteoartritis, esclerosis múltiple, rechazo de injertos, enfermedad de Lyme, sepsis, enfermedad de von Hippel Lindau, penfigoide, enfermedad de Paget, enfermedad de riñon poliquístico, sarcoidosis, tiroiditis, síndrome de hiperviscosidad, Enfermedad de Osler-Weber-Rendu, enfermedad pulmonar oclusiva crónica, radiación, hipoxia, preeclampsia, menometrorragia, endometriosis, infección por Herpes simplex, retinopatía isquémica, angiogénesis de la córnea, Herpes Zoster, virus de inmunodeficiencia humana, parapoxvirus, protozoa, toxoplasmosis y efusiones y edemas asociadas a tumores. Los compuestos de esta invención pueden presentar más de una de las actividades mencionadas y por ello pueden buscar como blancos a una pluralidad de vías de transducción de señales. Por consiguiente, estos compuestos pueden lograr los efectos terapéuticos y profilácticos que normalmente sólo se obtienen cuando se usa una combinación de compuestos diferentes. Por ejemplo, la capacidad para inhibir tanto la formación de vasos nuevos (por ejemplo, asociada con la función VEGFR-2 y VEGFR-3) (por ejemplo, en sangre y/o linfa) como la proliferación celular (por ejemplo, asociada a la función raf y PDGFR-beta) usando un solo compuesto resulta especialmente beneficioso en el tratamiento de cáncer y otros trastornos de proliferación celular que son facilitados por una neo-vascularización. Por consiguiente, la presente invención se relaciona específicamente con compuestos que presentan al menos actividad anti-proliferación celular y anti-angiogénica (es decir, inhibe la angiogénesis). Cualquier trastorno o afección para el cual sería beneficiosa una inhibición del crecimiento de vasos y proliferación celular puede ser tratado de acuerdo con la presente invención. El uso de un solo compuesto también es ventajoso porque su rango de actividades puede ser definido con mayor precisión. Como se indicara precedentemente, la presente invención se relaciona con métodos de tratamiento y/o prevención de enfermedades y afecciones; y/o con la modulación de una o más de las vías, polipéptidos, genes, enfermedades, afecciones, etc., asociados con raf, VEGFR, PDGFR, p38 y/o flt-3. Estos métodos comprenden generalmente la administración de cantidades eficaces de compuestos de la presente invención, donde una cantidad eficaz es la cantidad de compuesto que sirve para alcanzar el resultado deseado. Los compuestos pueden ser administrados en cualquier forma efectiva por cualquier ruta eficaz, como se describirá con mayor detalle más adelante. Los métodos incluyen modular la proliferación de células tumorales, incluyendo la inhibición de la proliferación celular. Esto último indica que se reduce, disminuye, aminora, demora, etc., el crecimiento y/o la diferenciación de las células tumorales. El término "proliferación" incluye cualquier proceso que se relaciona con el crecimiento y la división celular e incluye diferenciación y apoptosis. Como se describió precedentemente, las raf quinasas cumplen una función clave en la activación de la cascada de señalización citoplasmática comprometida en la proliferación, diferenciación y apoptosis celular. Por ejemplo, hay estudios que han permitido determinar que la inhibición de c-raf mediante oligonucleótidos antisentido puede bloquear la proliferación celular (véase antes). Cualquier cantidad de inhibición es considerada terapéutica. En los métodos de la presente invención se incluye un método para usar el compuesto descrito precedentemente (el compuesto de la fórmula I), incluyendo sales, prodrogas, metabolitos (derivados oxidados) y composiciones del mismo, para tratar trastornos hiperproliferativos de mamíferos que comprende administrar a un mamífero, incluyendo un ser humano, que necesita el mismo, una cantidad de un compuesto de esta invención, una sal, prodroga, metabolito (derivado oxidado) y composición aceptable para uso farmacéutico del mismo, que sea eficaz para tratar el trastorno. Los trastornos hiperproliferativos incluyen, a modo de ejemplo, tumores sólidos, tales como el cáncer de mama, del tracto respiratorio, cerebro, órganos reproductores, tracto digestivo, tracto urinario, ojos, hígado, piel, cabeza y cuello, tiroides, paratiroides y sus metástasis distantes. Dichos trastornos también incluyen linfomas, sarcomas y leucemias. Cualquier tumor o cáncer puede ser tratado, incluyendo, en un sentido no limitativo, los tipos de cáncer que presentan una o más mutaciones en raf, ras y/o flt-3; así como cualquier miembro anterior o posterior en las vías de señalización de las cuales forman parte. Como ya se describiera, el cáncer puede ser tratado con un compuesto de la presente invención independientemente del mecanismo que sea responsable del mismo. Se pueden tratar los tipos de cáncer de cualquier órgano, incluyendo los distintos tipos de cáncer de, en un sentido no limitativo, por ejemplo, colon, páncreas, mama, próstata, hueso, hígado, riñon, pulmón, testículos, piel, páncreas, estómago, colorrectal, carcinoma de células renales, carcinoma hepatocelular, melanoma, etc. Los ejemplos de cáncer de mama incluyen, en un sentido no limitativo, carcinoma invasivo de los ductos, carcinoma invasivo lobular, carcinoma de los ductos in situ y carcinoma lobular in situ. Los ejemplos de tipos de cáncer del tracto respiratorio incluyen, en un sentido no limitativo, carcinoma de pulmón de células pequeñas y de células no pequeñas, así como adenoma bronquial y blastoma pleuropulmonar. Los ejemplos de los tipos de cáncer de cerebro incluyen, en un sentido no limitativo, glioma hipoftálmico y del tallo cerebral, cerebelar y astrocitoma cerebral, meduloblastoma, ependimoma, así como tumores neuroectodérmicos y pineales. Los tumores de los órganos reproductores masculinos incluyen, en un sentido no limitativo, cáncer de próstata y testicular. Los tumores de los órganos reproductores femeninos incluyen, en un sentido no limitativo, cáncer de endometrio, cervical, de ovario, vaginal y vulvar, así como sarcoma del útero.

Los tumores del tracto digestivo incluyen, en un sentido no limitativo, cáncer anal, de colon, colorrectal, esofágico, de vesícula, gástrico, pancreático, rectal, del intestino delgado y de las glándulas salivales. Los tumores del tracto urinario incluyen, en un sentido no limitativo, cáncer de vejiga, en el pene, de riñon, de la pelvis renal, de uréter y uretra. Los tipos de cáncer oculares incluyen, en un sentido no limitativo, retinoblastoma y melanoma intraocular. Los ejemplos de tipos de cáncer del hígado incluyen, en un sentido no limitativo, carcinoma hepatocelular (carcinomas de células hepáticas con o sin variantes fibrolamelares), colangiocarcinoma (carcinoma de los ductos biliares intrahepáticos) y carcinoma hepatocelular-colangiocarcinoma mixto. Los tipos de cáncer de piel incluyen, en un sentido no limitativo, carcinoma de células escamosas, sarcoma de Kaposi, melanoma maligno, cáncer de piel de células de Merkel y cáncer de piel no melanómico. Los tipos de cáncer de cabeza y cuello incluyen, en un sentido no limitativo, los tipos de cáncer de laringe, hipolaringe, nasofaríngeo y/u orofaríngeo y cáncer de labios y de la cavidad oral. Los linfomas incluyen, en un sentido no limitativo, linfoma relacionado con SIDA, linfoma no Hodgkin, linfoma de células T cutáneas, enfermedad de Hodgkin y linfoma del sistema nervioso central. Los sarcomas incluyen, en un sentido no limitativo, sarcoma de tejidos blandos, osteosarcoma, histiocitoma fibroso maligno, linfosarcoma y rabdomiosarcoma. Las leucemias incluyen, en un sentido no limitativo, leucemia mieloide aguda, leucemia linfoblástica aguda, leucemia linfocítica crónica, leucemia mielogénica crónica y leucemia de células pilosas. Además de inhibir la proliferación de células tumorales, compuestos de la presente invención también pueden causar regresión de los tumores; por ejemplo, un disminución en el tamaño de un tumor o en la extensión del cáncer en el cuerpo.

La presente invención también se relaciona con métodos de modulación de la angiogénesis y/o linfangiogénesis en un sistema que comprende células, que consiste en administrar al sistema una cantidad eficaz de un compuesto descrito en la presente. Un sistema que comprende células puede ser un sistema in vivo, tal como un tumor en un paciente, órganos, tejidos o células aislados, sistemas de ensayo in vitro (CAM, BCE, etc), modelos en animales (por ejemplo, modelos de cáncer subcutáneos, in vivo), huéspedes que necesitan tratamiento (por ejemplo, huéspedes que sufren de enfermedades con un componente angiogénico y/o linfangiogénico, tal como el cáncer), etc. Una expresión inapropiada y ectópica de angiogénesis puede ser nociva para un organismo. Hay numerosas afecciones patológicas están asociadas con el crecimiento de vasos sanguíneos extraños. Estas incluyen, por ejemplo, retinopatía diabética, glaucoma neovascular, psoriasis, fibroplasias retrolentales, angiofibroma, inflamación, etc. Además, el mayor suministro sanguíneo asociado con tejidos cancerosos y neoplásicos estimula el crecimiento, lo que conduce a un rápido agrandamiento del tumor y metástasis. Más aún, el crecimiento de nuevos vasos sanguíneos y linfáticos en un tumor provee una ruta de escape para las células "renegadas", lo cual estimula la metástasis y la consecuente dispersión del cáncer. Los sistemas que son de utilidad para medir la angiogénesis y/o linfangiogénesis, y la inhibición de los mismos, incluyen, por ejemplo, neovascularización de explantes tumorales (por ejemplo, Patentes de EE.UU. N°: 5.192.744; 6.024.688), ensayo de membrana corioalantoica de pollos (CAM) (por ejemplo, Tailor y Folkman, Nature 1982, 297, 307-312; Eliceiri et al., J. Cell Biol. 1998, 140, 1255-1263), ensayo con células del endotelio capilar bovino (BCE) (por ejemplo, Patente de EE.UU. N°: 6.024.688; Polverini, P. r. et al., Methods. Enzymol. 1991, 198, 440-450), ensayos de migración y ensayo de inhibición del crecimiento de HUVEC (células del endotelio vascular del cordón umbilical humano) (por ejemplo, Patente de EE.UU. N°: 6.060.449) y el uso del modelo de oreja de conejo (por ejemplo, Szuba et al., FASEB J 2002, 16(14), 1985-7).

La modulación de la angiogénesis puede determinarse mediante cualquier otro método. Por ejemplo, el grado de vascularidad tisular se determina típicamente evaluando la cantidad y densidad de vasos presentes en una muestra dada. Por ejemplo, la densidad de la microvascularización (MVD) puede estimarse efectuando un recuento de la cantidad de agrupaciones endoteliales en una campo de microscopía de gran aumento o detectando un marcador específico para el endotelio microvascular u otros marcadores de vasos sanguíneos en crecimiento o ya establecidos, tal como CD31 (también conocido como molécula de adhesión de células endoteliales-plaquetas o PECAM). El anticuerpo CD31 se puede emplear asimismo en métodos inmunohistológicos convencionales para inmunotinciones de secciones de tejidos como se describe, por ejemplo, en la Patente de EE.UU. N°: 6.017.949; Dellas et al., Gyn. Oncol. 1997, 67, 27-33; y otros. Hay otros marcadores de la angiogénesis e incluyen; por ejemplo, Vezfl (por ejemplo, Xiang et al., Dev. Bio. 1999, 206, 123-141), angiopoyetina, Tie-1 y Tie-2 (por ejemplo, Sato et al., Nature 1995, 376, 70-74). Además, la presente invención se relaciona con métodos para examinar pacientes a fin de determinar su sensibilidad a los compuestos de la presente invención. Por ejemplo, la invención se relaciona con métodos para determinar si una afección puede ser modulada mediante el compuesto descrito en la presente, que comprende medir la expresión o actividad de raf, VEGFR-2, VEGFR-3, PDGFR-beta, p38 y/o flt-3 en una muestra que comprende células o un extracto celular, donde dicha muestra se obtuvo a partir de una célula o sujeto que padece dicha afección. Cuando los resultados de la determinación indican que uno o más de los genes mencionados (y/o de los polipéptidos que codifican) difieren del estado normal, se identifica entonces a la afección como tratable con un compuesto de la presente invención, es decir, que dicho trastorno o afección puede ser modulado por el compuesto cuando dicha expresión o actividad está aumentada en dicha afección en comparación con un control normal. El método puede comprender además un paso de comparar la expresión en una muestra con un control normal, o con la expresión en una muestra obtenida de un tejido normal o no afectado. La comparación se puede efectuar manualmente, contra un estándar, de forma electrónica (por ejemplo, contra una base de datos), etc. El control normal puede ser una muestra estándar provista con el ensayo; se puede obtener de tejido adyacente, pero no afectado, del mismo paciente; o puede comprender valores predeterminados, etc. Se puede determinar la expresión de genes, la expresión de proteínas (por ejemplo, la abundancia en una célula), la actividad de la proteína (por ejemplo, la actividad quinasa), etc.. Por ejemplo, se puede evaluar una biopsia de un paciente con cáncer por la presencia, cantidad y/o actividad de raf VEGFR-2, VEGFR-3, PDGFR-beta, p38 y/o flt-3. La mayor expresión o actividad de uno o más de ellos puede indicar que el cáncer puede ser blanco del tratamiento con un compuesto de la presente invención. Por ejemplo, como se describirá más adelante en los ejemplos, se puede monitorear la actividad raf por su capacidad para iniciar la cascada que conduce a la fosforilación de ERK (es decir, raf/MEK/ERK), dando como resultado fosfo-ERK. Los mayores niveles de fosfo-ERK en una muestra de cáncer muestra que su actividad raf es elevada, lo que sugiere el uso de los compuestos de la presente invención para tratarlo. La medición de la expresión incluye determinar o detectar la cantidad de polipéptido presente en una célula o liberada por la misma, así como medir el ARNm subyacente, donde se considera que la cantidad de ARNm presente refleja la cantidad de polipéptido elaborada por la célula. Aún más, se pueden analizar los genes para raf, VEGFR-2, VEGFR-3, PDGFR-beta, p38 y/o Flt-3 con el fin de determinar si existe un defecto en uno de dichos genes que pueda ser responsable de una expresión aberrante o de la actividad del polipéptido. La detección del polipéptido puede efectuarse mediante cualquier método disponible, por ejemplo, con transferencias Western, ELISA, transferencia puntual, inmunoprecipitación, RÍA, inmunohistoquímica, etc. Por ejemplo, se puede preparar una sección de tejido y marcarla con un anticuerpo específico, indirecto o directo y visualizarla con un microscopio. La cantidad de polipéptido puede ser cuantificada sin visualización, por ejemplo, preparando un usado de la muestra de interés y determinando luego por ELISA o Western la cantidad de polipéptido por cantidad de tejido. Se pueden utilizar anticuerpos y otros agentes de unión específicos. No hay limitaciones acerca de la manera de efectuar la detección. Se pueden utilizar ensayos que permitan cuantificar y/o detectar la presencia/ausencia de un ácido nucleico blanco (por ejemplo, genes, ARNm, etc., para raf, VEGFR, PDGFR, p38 y/o flt-3) en una muestra. Los ensayos se pueden efectuar a nivel de una sola célula o en una muestra que comprende muchas células, donde dicho ensayo "promedia" la expresión para todo el grupo de células y tejido presente en la muestra. Se puede emplear cualquier formato de ensayo adecuado, incluyendo, en un sentido no limitativo, por ejemplo, análisis por transferencia Southern, análisis por transferencia Northern, reacción en cadena de la polimerasa ("PCR") (por ejemplo., Saiki et al., Science 1988, 341 , 53; Patentes de EE.UU. N°: 4.683.195, 4.683.202 y 6.040.166; PCR Protocols: A: Guide to Methods and Applications, Innis et al., eds., Academic Press, Nueva York, 1990), transcriptasa inversa con la reacción en cadena de la polimerasa ("RT-PCR"), PCR anclada, amplificación rápida de extremos de ADNc ("RACE") (por ejemplo, Schaefer en Gene Cloning and Analysis: Current Innovations, páginas 99-115, 1997), reacción en cadena de la ligasa ("LCR") (EP 320 308), PCR unilateral (Ohara et al., Proc. Nati. Acad. Sci. 1989, 86, 5673-5677), métodos de indexación (por ejemplo, Patente de EE.UU. N°: 5.508.169), hibridación in situ, expresión diferencial (por ejemplo, Liang et al., Nucí. Acids Res. 1993, 21 , 3269 3275; Patentes de EE.UU. N°: 5.262.311, 5.599.672 y 5.965.409; WO97/18454; Prashar y Weissman, Proc. Nati. Acad. Sci., 93:659-663, y Patentes de EE.UU. N°: 6.010.850 y 5.712.126; Welsh et al., Nucí. Acid Res., 20:4965-4970, 1992, y Patente de EE.UU. N°: 5.457.985) y otras técnicas de huellas dactilares del ARN, amplificación basada en la secuencia de ácido nucleico ("NASBA") y otros sistemas de amplificación basados en la transcripción (por ejemplo, Patentes de EE.UU. N°: 5.409.818 y 5.554.527; WO 88/10315), ordenamientos de polinucleótidos (por ejemplo, Patentes de EE.UU. N°: 5.143.854, 5.424.186, 5.700.637, 5.874.219 y 6.054.270; PCT WO 92/10092; PCT WO 90/15070), Qbeta Replicasa (PCT/US87/00880), amplificación por desplazamiento de cadena ("SDA"), reacción de reparación en cadena ("RCR"), ensayos de protección de nucleasa, métodos basados en sustracción, barrido rápido [Rapid-Scan], etc. Otros métodos que son de utilidad incluyen, en un sentido no limitativo, por ejemplo, métodos de amplificación basados en templados, PCR competitivo (por ejemplo, Patente de EE.UU. N°: 5.747.251), ensayos basados en redox (por ejemplo, Patente de EE.UU. N°: 5.871.918), ensayos basados en Taqman (por ejemplo, Holland et al., Proc. Nati. Acad, Sci. 1991, 88, 7276-7280; Patentes de EE.UU. N°: 5.210.015 y 5.994.063), monitoreo basado en fluorescencia en tiempo real (por ejemplo, Patente de EE.UU. N°: 5.928.907), marcas de transferencia de energía molecular (por ejemplo, Patentes de EE.UU. N°: 5.348.853, 5.532.129, 5.565.322, 6.030.787 y 6.117.635; Tyagi y Kramer, Nature Biotech., 14:303-309, 1996). Se puede usar cualquier método adecuado para el análisis en una sola célula de la expresión de un gen o proteína, incluyendo hibridación in situ, inmunocitoquímica, MACS, FACS, citometría de flujo, etc. Para el ensayo con células individuales, los productos de expresión se pueden medir usando anticuerpos, PCR u otros tipos de amplificación de ácido nucleico (por ejemplo, Brady et al., Methods Mol. & Cell. Biol. 1990, 2, 17-25; Eberwine et al., Proc. Nati. Acad Sci. 1992, 89, 3010-3014; Patente de EE.UU. N°: 5.723.290). Estos y otros métodos se pueden llevar a cabo de manera convencional, por ejemplo, como se describe en las publicaciones mencionadas. La actividad de raf, VEGFR-2, VEGFR-3, PDGFR-beta, p38 y/o flt-3 puede ser evaluada de forma rutinaria, por ejemplo, como se describe más adelante en los ejemplos o usando ensayos estándar para la actividad quinasa. La presente invención también provee métodos para evaluar la eficacia de un compuesto de la presente invención en el tratamiento de un trastorno, que comprende uno o más de los siguientes pasos en cualquier orden efectivo, por ejemplo, administrando una cantidad de un compuesto, midiendo la expresión o actividad de raf, VEGFR-2; VEGFR-3, PDGFR-beta, p38 y/o flt-3 (véase antes), determinando el efecto de dicho compuesto sobre dicha expresión o actividad. Por ejemplo, se pueden retirar muestras de biopsia de los pacientes que han sido tratados con un compuesto de la presente invención y evaluar luego la presencia y/o actividad de las moléculas de señalización mencionadas. De manera similar, como se describió precedentemente, la disminución en los niveles de fosfo-ERK en el tejido de cáncer (por ejemplo, en comparación con un tejido normal o antes del tratamiento) indica que el compuesto está ejerciendo eficacia in vivo y un efecto terapéutico. El método se puede usar para determinar las dosificaciones apropiadas y los regímenes de dosificación, por ejemplo, cuánto compuesto se debe administrar y la frecuencia a la que debe ser administrado. El monitoreo de este efecto sobre las moléculas de señalización en el tejido permite al clínico determinar el protocolo de tratamiento apropiado y si se está alcanzando el efecto deseado, por ejemplo, sobre la modulación o inhibición de la vía de transducción de señales. Los compuestos de la presente invención también se pueden usar como marcadores para determinar la presencia y cantidad de raf, VEGFR-2, VEGFR-3, PDGFR-beta, p38 y/o flt-3 en una muestra que comprende un material biológico. Esto comprende uno o más de los siguientes pasos en cualquier orden que sea efectivo: (i) poner dicha muestra que comprende un material biológico en contacto con un compuesto de la presente invención y (ii) determinar si dicho compuesto se une a dicho material. El compuesto puede marcarse o se puede usar como un competidor de un compuesto marcado, tal como ATP marcado. La invención también provee métodos para tratar, prevenir, modular, etc., enfermedades y afecciones en mamíferos que comprenden administrar un compuesto de esta invención con otro modulador de la vía de transducción de señales que comprende, en un sentido no limitativo, raf, VEGFR, PDGFR, p38 y/o flt-3. Dichos moduladores pueden hallarse en la misma composición o en formulaciones o unidades de dosificación separadas. La administración puede efectuarse por la misma ruta o por rutas diferentes y puede ser simultánea o sucesiva. Las siguientes publicaciones están relacionadas con la modulación de VEGFR-3 y se incorporan en la presente por su descripción de estados de enfermedad mediados por VEGFR-3 y de ensayos para determinar dicha actividad. WO95/33772 Alitalo, et al.

WO95/33050 Charnock-Jones, et al. WO96/39421 Hu, et al. WO98/33917 Alitalo, et al. WO02/057299 Alitalo, et al. WO02/060950 Alitalo, et al. WO02/081520 Boesen, et al. Las siguientes publicaciones se relacionan con la modulación de VEGFR-2 y se incorporan en la presente por sus descripciones de los estados de enfermedad mediados por VEGFR-2 y de los ensayos para determinar dicha actividad. EP0882799 Hanai, et al. EP1167384 Ferraram, et al. EP1086705 Sato, et al. EP11300032 Tesar, et al. EP1166798 Haberey, et al. EP1166799 Haberey, et al. EP1170017 Maini, et al. EP 1203 827 Smith WO02/083850 Rosen, et al. Las siguientes publicaciones se relacionan con la modulación de flt-3 y se incorporan en la presente por sus descripciones de los estados de enfermedad mediadas por flt-3 y de los ensayos para determinar dicha actividad. 2002/0034517 Brasel, et al. 2002/01073.65 Lyman, et al. 2002/0111475 Graddis, et al. EP0627487 Beckermann, et al. WO9846750 Bauer, et al. WO9818923 McWherter, et al. WO9428391 Beckermann, et al. WO9426891 Bimbaum, et al.

Las siguientes patentes y publicaciones se relacionan con la modulación de PDGF/PDGFR y se incorporan en la presente por sus descripciones de los estados de enfermedad mediados por PDGFR-beta y de los ensayos para determinar dicha actividad. 5.094.941 Hart, et al. 5.371.205 Kelly, et al. 5.418.135 Fang 5.444.151 Vassbotn, et al. 5.468.468 LaRochelle, et al. 5.567.584 Sledziewski, et. al. 5.618.678 Kelly, et al. 5.620.687 Hart, et al. 5.648.076 Ross, et al. 5.668.264 Janjic, et al. 5.686.572 Wolf, et al. 5.817.310 Ramakrishnan, et al. 5.833.986 LaRochelle, et al. 5.863.739 LaRochelle, et al. 5.872.218 Wolf, et al. 5.882.644 Chang, et al. 5.891.652 Wolf, et al. 5.976.534 Hart, et al. 5.990.141 Hirth, et al. 6.022.854 Shunian 6.043.211 Williams, et al. 6.110.737 Escobedo, et al. 6.207.816B1 Gold, et al. 6.228.600B1 Matsui, et al. 6.229.002B1 Janjic, et al. 6.316.603B1 McTigue, et al. 6.372.438B1 Williams, et al. 6.403.769B1 LaRochelle, et al. 6.440.445B1 Nowak, et al. 6.475.782B1 Escobedo, et al.

WO02/083849 Rosen, et al. WO02/083704 Rosen, et al. WO02/081520 Boesen, et al. WO02/079498 Thomas, et al.

WO02/070008 Rockwell, et al.

WO09959636 Sato, et al. WO09946364 Cao, et al. WO09940118 Hanai, et al. WO9931238 Yabana, et al. WO9929861 Klagsbrun, et al.

WO9858053 Kendall, et al. WO985134B1 Maini, et al. WO9833917 Alitalo, et al. WO9831794 Matsumoto, et al.

WO9816551 Ferrara, et al. WO9813071 Kendall, et al. WO9811223 Martiny-Baron, et al.

WO9744453 Chen, et al. WO9723-510 Plouet, et al. WO9715662 Stinchcomb, et al.

WO9708313 Ferrara, et al. WO9639515 Cao, et al. WO9623065 Smith, et al. WO9606641 Fleurbaaij, et al.

WO9524473 Cao, et al. WO9822316 Kyowa WO9521868 Rockwell, et al. WO02/060489 Xia, et al. PDGFR-beta: EP0869177 Matsui, et al. WO09010013 Matsui, et al. WO9737029 Matsui, et al. PDGFR-alfa: EP 1000617 Lanuners, et al. EP0869177 Matsui, et al. EP0811685 Escobedo, et al. Composiciones farmacéuticas basadas en los compuestos de la presente invención Esta invención también se relaciona con composiciones farmacéuticas que contienen un compuesto de la presente invención y sales aceptables para uso farmacéutico del mismo. Estas composiciones se pueden utilizar para lograr el efecto farmacológico deseado mediante la administración a un paciente que necesita el mismo. Un paciente, a los efectos de esta invención, es un mamífero, incluyendo un ser humano, que necesitan tratamiento para una afección o enfermedad particular. Por ello, la presente invención incluye composiciones farmacéuticas que están compuestas de un vehículo aceptable para uso farmacéutico y una cantidad eficaz para uso farmacéutico de un compuesto, o una sal del mismo, de la presente invención. El término "vehículo aceptable para uso farmacéutico" significa cualquier vehículo que sea relativamente no tóxico e inocuo para un paciente a las concentraciones coherentes con una actividad eficaz del ingrediente activo de modo tal que los efectos secundarios atribuibles al vehículo no interfieran con los efectos beneficiosos del ingrediente activo. Un cantidad eficaz para uso farmacéutico de un compuesto es una cantidad que produce un resultado o que ejerce un efecto sobre la afección particular en tratamiento. El compuesto de la presente invención puede administrarse con vehículos aceptables para uso farmacéutico bien conocidos en la técnica usando cualquier forma de dosificación unitaria eficaz convencional, incluyendo preparaciones de liberación inmediata, lenta y predeterminada, por vía oral, parenteral, tópica, nasal, oftálmica, óptica, sublingual, rectal, vaginal y semejantes. Para la administración oral, el compuesto se puede formular en preparaciones sólidas o líquidas tales como cápsulas, pildoras, tabletas, comprimidos, grageas, formas fundidas, polvos, soluciones, suspensiones o emulsiones, y se pueden preparar de acuerdo con métodos conocidos en la técnica para la elaboración de composiciones farmacéuticas. Las formas de dosificación unitarias sólidas pueden comprender una cápsula que puede ser dei tipo común de gelatina dura o blanda que contiene, por ejemplo, agentes tensioactivos, lubricantes y rellenos inertes tales como lactosa, sacarosa, fosfato de calcio y almidón de maíz. En otra realización, los compuestos de esta invención se pueden conformar como tabletas con las bases para tabletas convencionales tales como lactosa, sacarosa y almidón de maíz en combinación con aglutinantes tales como acacia, almidón de maíz o gelatina, agentes de desintegración destinados a romper y disolver la tableta después de la administración tales como almidón de papa, ácido algínico, almidón de maíz y goma guar, goma tragacanto, acacia, lubricantes destinados a mejorar el flujo de la granulación de la tableta y a prevenir la adhesión del material de la tableta a las superficies de la tableta, de matrices y sacabocados, por ejemplo talco, ácido esteárico o estearato de magnesio, calcio o zinc, tinturas, agentes colorantes y agentes saborizantes tales como menta peperina, aceite de gaultería o sabor a cereza, destinados a mejorar las cualidades estéticas de las tabletas y volverlas más aceptables para el paciente. Los excipientes adecuados para uso en formas de dosificación líquidas orales incluyen fosfato dicálcico y diluyentes tales como agua y alcoholes, por ejemplo, etanol, alcohol bencílico y alcoholes de polietileno, ya sea con o sin la adición de un agente tensioactivo, agente de suspensión o agente emulsionante aceptable para uso farmacéutico. Puede haber diversos materiales adicionales como recubrimientos o para modificar de otra manera la forma física de la unidad de dosificación. Por ejemplo las tabletas, pildoras o cápsulas se pueden recubrir con goma laca, azúcar o ambos. Los polvos y granulos dispersables son adecuados para la preparación de una suspensión acuosa. Proveen al ingrediente activo mezclado con un agente dispersante o humectante, un agente de suspensión y uno o más conservantes. Los agentes dispersantes o humectantes y agentes de suspensión adecuados quedan ejemplificados por las sustancias ya mencionadas. También se pueden incluir otros excipientes, por ejemplo los agentes edulcorantes, saborizantes y colorantes descritos precedentemente. Las composiciones farmacéuticas de esta invención también se pueden encontrar en la forma de emulsiones de aceite-en-agua. La fase oleosa puede ser un aceite vegetal, tal como parafina líquida, o una mezcla de aceites vegetales. Los agentes emulsionantes adecuados pueden ser (1) gomas naturales tales como goma acacia y goma tragacanto, (2) fosfátidos naturales tales como soja y lecitina, (3) esteres o esteres parciales derivados de ácidos grasos y anhídridos de hexitol, por ejemplo, monooleato de sorbitano, (4) productos de condensación de dichos esteres parciales con óxido de etileno, por ejemplo, monooleato de polioxietilensorbitano. Las emulsiones también pueden contener edulcorantes y agentes saborizantes. Las suspensiones oleosas se pueden formular suspendiendo el ingrediente activo en un aceite vegetal tal como, por ejemplo, aceite de araquis, aceite de oliva, aceite de sésamo o aceite de coco, o en un aceite mineral tal como parafina líquida. Las suspensiones oleosas pueden contener un agente espesante tal como, por ejemplo, cera de abeja, parafina sólida o alcohol cetílico. Las suspensiones también pueden contener uno o más conservantes, por ejemplo, p-hidroxibenzoato de etilo o n-propilo; uno o más agentes colorantes; uno o más agentes saborizantes; y uno o más agentes edulcorantes tales como sacarosa o sacarina. Los jarabes y elixires se pueden formular con agentes edulcorantes tales como, por ejemplo, glicerol, propilenglicol, sorbitol o sacarosa. Dichas formulaciones también pueden contener un emoliente y un conservante, tal como metil y propilparabeno y agentes saborizantes y colorantes. Los compuestos de esta invención también se pueden administrar por vía parenteral, es decir, subcutánea, intravenosa, intraocular, intrasinovial, intramuscular o intraperitoneal, como dosificaciones inyectables del compuesto en un diluyente aceptable para uso fisiológico con un vehículo farmacéutico que puede ser un líquido o una mezcla de líquidos estéril tal como agua, salina, dextrosa acuosa y soluciones de azúcares relacionados, un alcohol tal como etanol, isopropanol o alcohol hexadecílico, glicoles tales como propilenglicol o polietilenglicol, cetales de glicerol tal como 2,2-dimetil-1 ,1-dioxolan-4-metanol, éteres tal como poli(etilenglicol) 400, un aceite, un ácido graso, un éster de un ácido graso o un glicérido de un ácido graso o un glicérido de un ácido graso acetilado, con o sin la adición de un agente tensioactivo aceptable para uso farmacéutico tal como un jabón o un detergente, un agente de suspensión tal como pectina, carbómeros, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa o carboximetilcelulosa o un agente emulsionante y otros adyuvantes farmacéuticos. Los aceites ilustrativos que se pueden usar en las formulaciones parenterales de esta invención son los de origen de petróleo, animal, vegetal o sintético, por ejemplo, aceite de maní, aceite de soja, aceite de sésamo, aceite de algodón, aceite de maíz, aceite de oliva, vaselina y aceite mineral. Los ácidos grasos adecuados incluyen ácido oleico, ácido esteárico, ácido isoesteárico y ácido mirístico. Los esteres de ácidos grasos adecuados son, por ejemplo, oleato de etilo y miristato de isopropilo. Los jabones adecuados incluyen sales de metales alcalinos y ácido graso, amonio y trietanolamina y los detergentes adecuados incluyen detergentes catiónicos, por ejemplo haluros de dimetildialquilamonio, haluros de alquilpiridinio y acetatos de alquilamina; detergentes aniónicos, por ejemplo, sulfonatos de alquilo, arilo y olefina, sulfatos y sulfosuccinatos de alquilo, olefina, éter y monoglicéridos; detergentes no iónicos, por ejemplo, óxidos de aminas grasas, alcanolamidas de ácidos grasos y poli(oxietileno-oxipropileno)s o copolímeros de óxido de etileno u óxido de propileno; y detergentes anfotéricos, por ejemplo, alquil-beta-aminopropionatos y sales de amonio cuaternario 2-alquilimidazolina, así como mezclas de los mismos. Las composiciones parenterales de esta invención contienen típicamente entre aproximadamente 0,5% y aproximadamente 25% en peso del ingrediente activo en solución. También se pueden usar ventajosamente conservantes y soluciones amortiguadoras. Con el fin de minimizar o eliminar la irritación en el sitio de inyección, dichas composiciones pueden contener un agente tensioactivo no iónico que presenta un equilibrio de hidrófilo-lipófilo (HLB) que comprende entre aproximadamente 12 y aproximadamente 17. La cantidad de agente tensioactivo en dicha formulación varía en un rango entre aproximadamente 5% y aproximadamente 15% en peso. El agente tensioactivo puede comprender un solo componente con los valores anteriores de HLB o puede ser una mezcla de dos o más componentes con el valor deseado de HLB. Los agentes tensioactivos ilustrativos usados en las formulaciones parenterales pertenecen a la clase de esteres de ácidos grasos de polietilensorbitano, por ejemplo, monooleato de sorbitano y los aducios de alto peso molecular de óxido de etileno con una base hidrofóbica, formados por la condensación de óxido de propileno con propilenglicol. Las composiciones farmacéuticas se pueden encontrar en la forma de suspensiones acuosas inyectables estériles. Dichas suspensiones se pueden formular de acuerdo con métodos conocidos usando los agentes dispersantes o humectantes adecuados y agentes de suspensión tales como, por ejemplo, carboximetilcelulosa de sodio, metilcelulosa, hidroxipropilmetil-celulosa, alginato de sodio, goma tragacanto y goma acacia; agentes dispersantes o humectantes que pueden comprender un fosfátido natural, tal como lecitina, un producto de condensación de un óxido de alquileno con un ácido graso, por ejemplo, estearato de polioxietileno, un producto de condensación de óxido de etileno con un alcohol alifático de cadena larga, por ejemplo, heptadeca-etilenoxicetanol, un producto de condensación de óxido de etileno con un éster parcial derivado de un ácido graso y un hexitol tal como sorbitolmonooleato de polioxietileno o un producto de condensación de un óxido de etileno con un éster parcial derivado de un ácido graso y un anhídrido de hexitol, por ejemplo monooleato de polioxietilensorbitano. La preparación inyectable estéril también puede ser una solución o suspensión inyectable estéril en un diluyente o solvente no tóxico aceptable para uso parenteral. Los diluyentes y solventes que se pueden emplear son, por ejemplo, agua, solución de Ringer, soluciones isotónicas de cloruro de sodio y soluciones isotónicas de glucosa. Además, convencionalmente se emplean aceites fijos estériles como solventes o medios de suspensión. Para tal fin, se puede emplear cualquier aceite suave, fijo incluyendo mono o diglicéridos sintéticos. Además, se pueden utilizar ácidos grasos, tal como ácido oleico, en la preparación de inyectables. La composición de la invención también puede administrarse en la forma de supositorios para una administración rectal de la droga. Estas composiciones se pueden preparar mezclando la droga con un excipiente no irritante adecuado que sea sólido a las temperaturas comunes pero líquido a la temperatura rectal y que por ende se fundirá en el recto para liberar la droga. Dicho material comprende, por ejemplo, manteca de cacao y polietilenglicol. Otra formulación empleada en los métodos de la presente invención utiliza dispositivos de administración transdérmicos ("parches"). Dichos parches transdérmicos se pueden usar para proveer una infusión continua o discontinua de los compuestos de la presente invención en cantidades controladas. La construcción y el uso de parches transdérmicos para la administración de agentes farmacéuticos es bien conocido en la técnica (véase, por ejemplo, la Patente de EE.UU. N°: 5.023.25, presentada el 11 de junio, 1991 , incorporada en la presente a modo de referencia). Dichos parches pueden ser construidos para lograr una administración continua, pulsátil o según-demanda de los agentes farmacéuticos. Las formulaciones de liberación controlada para una administración parenteral incluyen formulaciones de liposomas, de microesferas poliméricas y de gel poiimérico que son conocidas en la técnica.

Puede ser deseable, o necesario, introducir la composición farmacéutica en el paciente mediante un dispositivo de administración mecánico. La construcción y el uso de dispositivos de administración mecánicos para administrar agentes farmacéuticos es bien conocido en la técnica. Las técnicas directas para administrar, por ejemplo, una droga directamente en el cerebro habitualmente comprende la colocación de un catéter para administrar la droga en el sistema ventricular del paciente para poder atravesar la barrera hematoencefálica. Uno de dichos sistemas de administración implantables, usados para el transporte de agentes a regiones anatómicas específicas del cuerpo, se describe en la Patente de EE.UU. N°: 5.011.472, presentada el 30 de abril, 1991. Las composiciones de la invención también pueden contener otros ingredientes para conformar composiciones convencionales aceptables para uso farmacéutico, generalmente denominados vehículos o diluyentes, según necesidad o convenga. Se pueden utilizar los procedimientos convencionales para preparar dichas composiciones en formas de dosificación apropiados. Dichos ingredientes y procedimientos incluyen los que se describen en las siguientes referencias, cada una de las cuales es incorporada en la presente a modo de referencia: Powell, M.F. et al., "Compendium of Excipients for Parenteral Formulations" PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 1998, 52(5), 238-311 ; Strickley, R.G "Parenteral Formulations of Small Molecule Therapeutics Marketed in the United States (1999), Part 1" PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 1999, 53(6), 324-349; y Nema, S. et al, "Excipients and Their Use in Injectable Products" PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 1997 , 51 (4), 166-171. Los ingredientes farmacéuticos de uso común que se pueden emplear según convenga para formular la composición según la ruta de administración pretendida incluyen: - agentes acidificantes (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, ácido acético, ácido cítrico, ácido fumárico, ácido clorhídrico, ácido nítrico); agentes alcalinizantes (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, solución de amoníaco, carbonato de amonio, dietanolamina, monoetanolamina, hidróxido de potasio, borato de sodio, carbonato de sodio, hidróxido de sodio, trietanolamina, trolamina); - adsorbentes (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, celulosa en polvo y carbón activado); - propelentes de aerosol (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, dióxido de carbono, CCI2F2, F2CIC-CCIF2 y CCIF3) - agentes de desplazamiento de aire (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, nitrógeno y argón); - conservantes antifúngicos (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, ácido benzoico, butilparabeno, etilparabeno, metilparabeno, propilparabeno, benzoato de sodio); - conservantes anti microbianos (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, cloruro de benzalconio, cloruro de bencetonio, alcohol bencílico, cloruro de cetilpiridinio, clorobutanol, fenol, alcohol feniletílico, nitrato fenilmercúrico y timerosal); - antioxidantes (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, ácido ascórbico, palmitato de ascorbilo, hidroxianisol butilado, hidroxitolueno butilado, ácido hipofosforoso, monotioglicerol, galato de propilo, ascorbato de sodio, bisulfito de sodio, sulfoxilato formaldehído sódico, metabisulfito de sodio); - materiales aglutinantes (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, polímeros de bloques, goma natural y sintética, poliacrilatos, poliuretanos, siliconas, polisiloxanos y copolímeros de estireno-butadieno); - agentes amortiguadores (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, metafosfato de potasio, fosfato dipotásico, acetato de sodio, citrato de sodio anhidro y citrato de sodio dihidrato); - agentes de soporte (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, jarabe de acacia, jarabe aromático, elixir aromático, jarabe de cereza, jarabe de cacao, jarabe de naranja, jarabe, aceite de maíz, aceite mineral, aceite de maní, aceite de sésamo, cloruro de sodio bacteriostático inyectable y agua para inyecciones bacteriostática) - agentes quelantes (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, edetato disódico y ácido edético); - colorantes (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, FD&C Rojo N° 3, FD&C Rojo N° 20, FD&C Amarillo N° 6, FD&C Azul N° 2, D&C Verde N° 5, D&C Anaranjado N° 5, D&C Rojo N° 8, caramelo y rojo óxido férrico); - agentes clarificantes (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, bentonita); - agentes emulsionantes (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, acacia, cetomacrogol, alcohol cetílico, monoestearato de glicerilo, lecitina, monooleato de sorbitano, polioxietileno 50 monoestearato); - agentes encapsulantes (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, gelatina y acetato ftalato de celulosa); - saborizantes (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, aceite de anís, aceite de canela, cacao, mentol, aceite de naranja, aceite de menta peperina y vanillina); - humectantes (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, glicerol, propilenglicol y sorbitol); - agentes homogeneizantes (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, aceite mineral y glicerina); - aceites (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, aceite de araquis, aceite mineral, aceite de oliva, aceite de maní, aceite de sésamo y aceite vegetal); - bases para ungüentos (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, lanolina, ungüento hidrofílico, ungüento de polietilenglicol, vaselina, vaselina hidrofílica, ungüento blanco, ungüento amarillo y ungüento de agua de rosas); - mejoradores de la penetración (administración transdérmica) (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, monohidroxi o polihidroxi alcoholes, alcoholes mono o polivalentes, alcoholes grasos saturados o insaturados, esteres grasos saturados o insaturados, ácidos dicarboxílicos saturados o insaturados, aceites esenciales, derivados de fosfatidilo, cefalina, terpenos, amidas, éteres, cetonas y ureas); - plastificadores (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, ftalato de dietilo y glicerol); - solventes (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, etanol, aceite de maíz, aceite de algodón, glicerol, isopropanol, aceite mineral, ácido oleico, aceite de maní, agua purificada, agua para inyecciones, agua para inyecciones estéril y agua para irrigación estéril); - agentes de endurecimiento (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, alcohol cetílico, cera de esteres de cetilo, cera microcristalina, parafina, alcohol estearílico, cera blanca y cera amarilla); - bases para supositorios (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, manteca de cacao y polietilenglicoles (mezclas)); - agentes tensioactivos (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, cloruro de benzalconio, nonoxinol 10, octoxinol 9, polisorbato 80, laurilsulfato de sodio y monopalmitato de sorbitano); - agentes de suspensión (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, agar, bentonita, carbómeros, carboximetilcelulosa sódica, hidroxietilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, caolín, metilcelulosa, tragacanto y veegum); - agentes edulcorantes (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, aspartama, dextrosa, glicerol, manitol, propilenglicol, sacarina sódica, sorbitol y sacarosa); - anti-adherentes para tabletas (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, estearato de magnesio y talco); 7 - aglutinantes para tabletas (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, acacia, ácido algínico, carboximetilcelulosa sódica, azúcar compresible, etilcelulosa, gelatina, glucosa líquida, metilcelulosa y almidón pregelatinizado); - diluyentes para tabletas y cápsulas (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, fosfato de calcio dibásico, caolín, lactosa, manitol, celulosa microcristalina, celulosa en polvo, carbonato de calcio precipitado, carbonato de sodio, fosfato de sodio, sorbitol y almidón); - agentes de recubrimiento para tabletas (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, glucosa líquida, hidroxietilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, metilcelulosa, etilcelulosa, acetato ftalato de celulosa y goma laca); - excipientes para la compresión directa de tabletas (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, fosfato de calcio dibásico); - desintegrantes para tabletas (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, ácido algínico, carboximetilcelulosa de calcio, celulosa microcristalina, polacrilina de potasio, alginato de sodio, almidón glicolado sódico y almidón); - deslizantes para tabletas (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, sílice coloidal, almidón de maíz y talco); - lubricantes para tabletas (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, estearato de calcio, estearato de magnesio, aceite mineral, ácido esteárico y estearato de zinc); - opacantes para tabletas/cápsulas (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, dióxido de titanio); - agentes de acabado para tabletas (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, cera de carnauba y cera blanca); - agentes espesantes (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, cera de abeja, alcohol cetílico y parafina); - agentes de tonicidad (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, dextrosa y cloruro de sodio); 8 - agentes para aumentar la viscosidad (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, ácido algínico, bentonita, carbómeros, carboximetilcelulosa sódica, metilcelulosa, alginato de sodio y tragacanto); y - agentes humectante (los ejemplos incluyen, en un sentido no limitativo, heptadecaetilenoxicetanol, lecitina, monooleato de sorbitol, monooleato de polioxietilensorbitol y estearato de polioxietileno). Las composiciones farmacéuticas acordes con la presente invención se ilustran de la siguiente manera: Solución estéril IV: Solución 5 mg/ml del compuesto deseado de esta invención elaborada usando agua inyectable, estéril y ajusfando el pH si fuera necesario. La solución se diluye para la administración a 1-2 mg/ml con dextrosa 5% estéril y se administra como una infusión IV durante 60 minutos. Polvo liofilizado para administración IV: La preparación estéril se puede obtener con (i) 100-1000 mg del compuesto deseado de esta invención como un polvo liofilizado, (ii) citrato de sodio 32-327 mg/ml y (iii) 300-3000 mg de Dextrano 40. La formulación se reconstituye con salina inyectable, estéril o dextrosa 5% hasta una concentración de 10 a 20 mg/ml, que se diluye adicionalmente con salina o dextrosa 5% hasta 0,2-0,4 mg/ml y se administra ya sea como un bolo IV o por infusión IV durante 15-60 minutos. Suspensión intramuscular: La siguiente solución o suspensión se prepara para inyecciones intramusculares: compuesto deseado de esta invención, insoluble en agua, 50 mg/ml carboximetilcelulosa sódica 5 mg/ml TWEEN 80 4 mg/ml cloruro de sodio 9 mg/ml alcohol bencílico 9 mg/ml Cápsulas duras: Se prepara una gran cantidad de cápsulas unitarias rellenando cápsulas de gelatina dura de dos piezas estándar, cada una con 100 mg de ingrediente activo en polvo, 150 mg de lactosa, 50 mg de celulosa y 6 mg de estearato de magnesio. Cápsulas de gelatina blanda: Se prepara una mezcla de ingrediente activo en un aceite comestible, tal como aceite de soja, aceite de algodón o aceite de oliva, y se inyecta con una bomba de desplazamiento positivo a gelatina fundida para formar cápsulas de gelatina blanda que contienen 100 mg de ingrediente activo. Las cápsulas se lavan y se secan. El ingrediente activo se puede disolver en una mezcla de polietilenglicol, glicerina y sorbitol para preparar una mezcla medicinal miscible en agua. Tabletas: Se prepara una gran cantidad de tabletas utilizando procedimientos convencionales de modo que la unidad de dosificación contenga 100 mg de ingrediente activo, 0,2 mg de dióxido de silicio coloidal, 5 mg de estearato de magnesio, 275 mg de celulosa microcristalina, 11 mg de almidón y 98,8 mg de lactosa. Se pueden aplicar los recubrimientos apropiados acuosos y no acuosos para incrementar el sabor, mejorar el aspecto y la estabilidad o demorar la absorción. Tabletas/cápsulas de liberación inmediata: Estas son formas de dosificación orales sólidas elaboradas con procesos convencionales y novedosos. Estas unidades se ingieren oralmente sin agua para la disolución y distribución inmediata de la medicación. El ingrediente activo se mezcla en un líquido que contiene ingredientes tales como azúcar, gelatina, pectina y edulcorantes. Estos líquidos se solidifican en tabletas o capsuletas sólidas mediante técnicas de secado por congelamiento y extracción en estado sólido. Los compuestos de droga se pueden comprimir con azúcares y polímeros viscoelásticos y termoelásticos o componentes efervescentes para producir matrices porosos destinados a una liberación inmediata, sin necesidad de agua. Dosificación de las composiciones farmacéuticas de la presente invención La dosificación eficaz de los compuestos de esta invención se puede determinar fácilmente para el tratamiento de cada indicación deseada basado en las técnicas de laboratorio estándar conocidas para evaluar los compuestos que puedan ser de utilidad en el tratamiento de cualquiera de los trastornos mencionados precedentemente, mediante pruebas de toxicidad estándar y mediante ensayos farmacológicos estándar para determinar el tratamiento de las afecciones identificadas precedentemente en mamíferos y mediante comparación de estos resultados con los resultados de los medicamentos conocidos usados para tratar estas afecciones. La cantidad de ingrediente activo a administrar en el tratamiento de una de estas afecciones puede variar ampliamente de acuerdo con consideraciones tales como el compuesto particular y la unidad de dosificación empleados, el modo de administración, el período de tratamiento, la edad y el sexo del paciente tratado, y la naturaleza y la extensión de la afección tratada. La cantidad total de ingrediente activo a administrar puede variar en un rango entre aproximadamente 0,001 mg/kg y aproximadamente 200 mg/kg y preferentemente entre aproximadamente 0,1 mg/kg y aproximadamente 50 mg/kg de peso corporal por día. La dosificación unitaria puede contener preferentemente entre aproximadamente 5 mg y aproximadamente 4000 mg de ingrediente activo y puede ser administrada una o más veces por día. La dosificación diaria para la administración oral comprende preferentemente entre 0,1 y 50 mg/kg de peso corporal total. La dosificación diaria para una administración por inyección, incluyendo inyecciones intravenosas, intramusculares, subcutáneas y parenterales y de uso en técnicas de infusión comprenderá preferentemente entre 0,1 y 10 mg/kg de peso corporal total. El régimen de dosificación rectal diaria comprenderá preferentemente entre 0,1 y 50 mg/kg de peso corporal total. El régimen de dosificación vaginal diaria comprenderá preferentemente entre 0,1 y 50 mg/kg de peso corporal total. El régimen de dosificación tópica diaria comprenderá preferentemente entre 0,1 y 10 mg/kg administrado entre una y cuatro veces por día. La concentración transdérmica será preferentemente la necesaria para mantener una dosis diaria entre 0,1 y 10 mg/kg. El régimen de dosificación para inhalación diaria comprenderá preferentemente entre 0,1 y 10 mg/kg de peso corporal total. Otras dosificaciones y cantidades se seleccionarán de forma rutinaria.

El régimen de dosificación inicial y de continuidad específico para cada paciente varía de acuerdo con la naturaleza y severidad de la afección según lo determina el profesional a cargo, la actividad del compuesto específico empleado, la edad y estado general del paciente, el momento de administración, la ruta de administración, el índice de excreción de la droga, las combinaciones de droga y semejantes. El modo de tratamiento deseado y la cantidad de dosis de un compuesto de la presente invención, o una sal aceptable para uso farmacéutico o éster o composición del mismo, puede ser determinado por los especialistas en la técnica usando pruebas de tratamiento convencionales. Combinación de los compuestos y composiciones de la presente invención con otros ingredientes activos Los compuestos de esta invención se pueden administrar como el único agente farmacéutico o en combinación con uno o más agentes farmacéuticos adicionales, donde dicha combinación no causa efectos adversos inaceptables. Esto puede ser de particular importancia para el tratamiento de enfermedades hiperproliferativas, tal como cáncer. En este caso, el compuesto de esta invención se puede combinar con agentes citotóxicos conocidos, inhibidores de la transducción de señales o con otros agentes anticancerosos, así como con mezclas y combinaciones de los mismos. En una realización, los compuestos de la presente invención se pueden combinar con agentes citotóxicos anticancerosos. Los ejemplos de dichos agentes se pueden consultar en la 11a Edición del índice Merck (1996). Estos agentes incluyen, a modo de ejemplo, asparaginasa, bleomicina, carboplatino, carmustina, clorambucilo, cisplatino, colaspasa, ciclofosfamida, citarabina, dacarbazina, dactinomicina, daunorubicina, doxorubicina (adriamicina), epirubicina, etopósido, 5-fluorouracilo, hexametilmelamina, hidroxiurea, ifosfamida, irinotecano, leucovorina, lomustina, mecloretamina, 6-mercaptopurina, mesna, metotrexato, mitomicina C, mitoxantrona, prednisolona, prednisona, procarbazina, raloxifeno, estreptozocina, tamoxifeno, tioguanina, topotecan, vinblastina, vincristína y vindesina.

Otras drogas citotóxicas adecuadas para su uso con. los compuestos de la invención incluyen, en un sentido no limitativo, aquellos compuestos reconocidos por su uso en el tratamiento de enfermedades neoplásicas en el texto de Goodman y Gilman, The Pharmacological Basis of Therapeutics (Novena Edición, 1996, McGraw-Hill). Estos agentes incluyen, a modo de ejemplo, amino glutetimida, L-asparaginasa, azatioprina, 5-azacitidina cladribina, busulfán, dietilestilbestrol, 2',2'-difluorodeoxicitidina, docetaxel, eritrohidroxinoniladenina, etinilestradiol, 5-fluorodeoxiuridina, monofosfato de 5-fluorodeoxiuridina, fosfato de fludarabina, fluoximesterona, flutamida, caproato de hidroxiprogesterona, idarubicina, interferón, acetato de medroxiprogesterona, acetato de megestrol, melfalán, mitotano, paclitaxel, pentostatina, N-fosfonoacetil-L-aspartato (PALA), plicamicina, semustina, tenipósido, propionato de testosterona, tiotepa, trimetilmelamina, uridina y vinorelbina. Otros agentes citotóxicos anticancerosos adecuados para su uso en combinación con los compuestos de la invención también incluyen los principios citotóxicos recientemente descubiertos tales como oxaliplatino, gemcitabina, capecitabina, epotilona y sus derivados naturales o sintéticos, temozolomida (Quinn et al., J Clin. Oncology 2003, 21(4), 646-651), tositumomab (Bexxar), trabedectina (Vidal et al., Proceedings of the American Society for CHnicai Oncology 2004, 23, resumen 3181) y los inhibidores de la proteína del huso quinesina Eg5 (Wood et al., Curr. Opin. Pharmacol. 2001, 1, 370-377). En otra realización, los compuestos de la presente invención se pueden combinar con otros inhibidores de la transducción de señales. De particular interés son los inhibidores de la transducción de señales dirigidos contra la familia EGFR, tal como EGFR, HER-2 y HER-4 (Raymond et al., Drugs 2000, 60 (Supl. 1), 15-23; Harari et al., Oncogene 2000, 19 (53), 6102-6114), y sus respectivos ligandos. Los ejemplos de dichos agentes incluyen, a modo de ejemplo, terapias con anticuerpos tal como Herceptina (trastuzumab), Erbitux (cetuximab) y pertuzumab. Los ejemplos de dichas terapias también incluyen, a modo de ejemplo, inhibidores de quinasa de pequeñas moléculas tal como ZD-1839 / Iressa (Baselga et al., Drugs 2000, 60 (Supl. 1), 33-40), OSI-774 / Tarceva (Pollack et al. J. Pharm. Exp. Ther. 1999, 291 (2), 739-748), CI-1033 (Bridges, Curr. Med. Chem. 1999, 6, 825-843), GW-20 6 (Lackey et al., 92"d AACR Meeting; Nueva Orleans, 24-28 de marzo, 2001, resumen 4582), CP-724,714 (Jani et al., Proceedings of the American Society for Clinical Oncology 2004, 23, resumen 3122), HKI-272 (Rabindran et al., Cáncer Res. 2004, 64, 3958-3965) y EKB-569 (Greenberger et al., 11th NCI-EORTC-AACR Symposium on New Drugs in Cáncer Therapy, Amsterdam, 7-10 de noviembre, 2000, resumen 388). En otra realización, los compuestos de la presente invención se pueden combinar con otros inhibidores de la transducción de señales dirigidos contra quinasas de receptores de las familias de dominio quinasa partido (VEGFR, FGFR, PDGFR, flt-3, c-kit, c-fms y semejantes), y sus respectivos ligandos. Estos agentes incluyen, a modo de ejemplo, anticuerpos tal como Avastina (bevacizumab). Estos agentes también incluyen, a modo de ejemplo, inhibidores de pequeñas moléculas tal como STI-571 / Gleevec (Zvelebil, Curr. Opin. Oncol. Endocr. Metab. Invest. Drugs 2000, 2(1 ), 74-82), PTK-787 (Wood et al., Cáncer Res. 2000, 60(8), 2178-2189), SU-11248 (Demetri et al., Proceedings of the American Society for Clinical Oncology 2004, 23, resumen 3001), ZD-6474 (Hennequin et al., 92"d AACR Meeting Nueva Orleans, 24-28 de marzo, 2001, resumen 3152), AG-13736 (Herbst et al., Clin. Cáncer Res. 2003, 9, 16 (Supl. 1), resumen C253), KRN-951 (Taguchi et al., 95th AACR Meeting, Orlando, FL, 2004, resumen 2575), CP-547,632 (Beebe et al., Cáncer Res. 2003, 63, 7301-7309), GP-673,451 (Roberts et al., Proceedings of the American Association of Cáncer Research, 2004, 45, resumen 3989), CHIR-258 (Lee et al., Proceedings of the American Association of Cáncer Research, 2004, 45, resumen 2130), MLN-518 (Shen et al., Blood 2003, 102, 11 , resumen 476) y AZD-2171 (Hennequin et al., Proceedings of the American Association of Cáncer Research, 2004, 45, resumen 4539). En otra realización, los compuestos de la presente invención se pueden combinar con inhibidores de la vía de transducción Raf/MEK/ERK (Avruch et al., Recent Prog. Horm. Res. 2001, 56, 127-155) o la vía PKB (akt) (Lawlor et al., J. Cell Sci. 2001, 114, 2903-2910). Estos incluyen, a modo de ejemplo, PD-325901 (Sebolt- Leopold et al., Proceedings of the American Association of Cáncer Research, 2004, 45, resumen 4003) y ARRY-142886 (Wallace et al., Proceedings of the American Association of Cáncer Research, 2004, 45, resumen 3891). En otra realización, los compuestos de la presente invención se pueden combinar con inhibidores de histona desacetilasa. Los ejemplos de dichos agentes incluyen, a modo de ejemplo, ácido suberoílanilida-hidroxámico (SAHA), LAQ-824 (Ottmann et al., Proceedings of the American Society for Clinical Oncology, 2004, 23, resumen 3024), LBH-589 (Beck et al., Proceedings of the American Society for Clinical Oncology, 2004, 23, resumen 3025), MS-275 (Ryan et al., Proceedings of the American Association of Cáncer Research, 2004, 45, resumen 2452) y FR-901228 (Piekarz et al., Proceedings of the American Society for Clinical Oncology, 2004, 23, resumen 3028). En otra realización, los compuestos de la presente invención se pueden combinar con otros agentes anticancerosos tales como inhibidores de proteasoma e inhibidores m-TOR. Estos incluyen, a modo de ejemplo, bortezomib (Mackay et al., Proceedings of the American Society for Clinical Oncology, 2004, 23, Resumen 3109) y CCI-779 (Wu et al., Proceedings of the American Association of Cáncer Research, 2004, 45, resumen 3849). En general, el uso de un agente anticanceroso citotóxico y/o citostático en combinación con un compuesto o una composición de la presente invención para el tratamiento de cáncer servirá para: (1) lograr una mejor eficacia en la reducción del crecimiento de un tumor o aún eliminar el tumor en comparación con la administración de cualquiera de los agentes solos, (2) proveer una administración de menores cantidades de los agentes quimioterapéuticos administrados, (3) proveer un tratamiento quimioterapéutico que sea bien tolerado en el paciente con menos complicaciones farmacológicas nocivas que las observadas con las quimioterapias de un solo agente y algunas otras terapias combinadas, (4) proveer el tratamiento de un espectro más amplio de diferentes tipos de cáncer en mamíferos, en especial en seres humanos, (5) proveer una mayor índice de respuesta entre los pacientes tratados, (6) proveer un tiempo de sobrevida más prolongado entre los pacientes tratados en comparación con los tratamientos de quimioterapia estándar, (7) proveer un tiempo más prolongada para la progresión del tumor y/o (8) lograr resultados de eficacia y tolerabilidad al menos tan buenos como los agentes usados solos, en comparación con casos conocidos donde otras combinaciones de agentes cáncer produce efectos antagónicos. Ejemplos En esta memoria descriptiva se usan las siguientes abreviaturas: HPLC cromatografía líquida de alta presión MS espectrometría de masa ES electroatomización DMSO dimetilsulfóxido MP punto de fusión NMR espectroscopia de resonancia nuclear TLC cromatografía en capa delgada rt temperatura ambiente Preparación de 4-amino-3-fluorofenol En un frasco seco purgado con argón se agregó 10% Pd/C (80 mg) seguido de 3-fluoro-4-nitrofenol (1 ,2 g, 7,64 mmol) como una solución en acetato de etilo (40 mi). La mezcla se agitó bajo atmósfera de H2 durante 4 h. La mezcla se filtró a través de un lecho de Celite y el solvente se evaporó bajo presión reducida para obtener el producto deseado como un sólido tostado (940 mg, 7,39 mmol; 97% de rendimiento); 1H-NMR (DMSO-d6) 4,38 (s, 2H), 6,29-6,35 (m, 1 H), 6,41 (dd, J=2,5, 12,7, 1H), 6,52-6,62 (m, 1 H), 8,76 (s, 1 H). Preparación de metilamida del ácido 4-(4-amino-3-fluorofenoxi)piridin-2-carboxílico Se trató una solución de 4-amino-3-fluorofenol (500 mg, 3,9 mmol) en N,N-dimetilacetamida (6 mi) enfriada a 0 °C con fer-butóxido de potasio (441 mg, 3,9 mmol) y la solución marrón se dejó con agitación a 0 °C durante 25 min. A la mezcla se agregó 4-cloro-?/-metil-2-piridincarboxamida (516 mg, 3,0 mmol) como una solución en dimetilacetamida (4 mi). La reacción se calentó a 100 °C durante 16 h. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente, se neutralizó con H2O (20 mi) y se extrajo con acetato de etilo (4 x 40 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con H2O (2 x 30 mi), se secaron (MgSO4) y se evaporaron para obtener un aceite marrón rojizo. 1H-NMR indicó la presencia de dimetilacetamida residual, por lo cual el aceite se tomó en dietiléter (50 mi) y se lavó adicionalmente con salina (5 x 30 mi). La capa orgánica se secó (MgSO ) y se concentró para obtener 950 mg del producto deseado como un sólido marrón rojizo, que se usó en el paso siguiente sin purificación. En Bankston et al., Org. Proc. Res. Dev. 2002, 6(6), 777-781 se describe un método de preparación de 4-cloro-N-metil-2-piridincarboxamida. Ejemplo 1 : Preparación de metilamida del ácido 4{4-[3-(4-c!oro-3-trifluorometilfenil)-ureido]-3-fluorofenoxi}-piridin-2-carboxílico A una solución de metilamida del ácido 4-(4-amino-3-fluorofenoxi)piridin-2-carboxílico (177 mg, 0,68 mmol) en tolueno (3 mi) se agregó isocianato de 4-cloro-3-(trifluorometil)fenilo (150 mg, 0,68 mmol). La mezcla se agitó a rt durante 72 h. La reacción se concentró bajo presión reducida y el residuo se trituró con dietiléter. Los sólidos resultantes se recolectaron por filtración y se secaron bajo vacío durante 4 h para obtener el compuesto del título (155 mg, 0,32 mmol; 47% de rendimiento); 1H-NMR (DMSO-d6) 2,78 (d, J=4,9, 3H), 7,03-7,08 (m, 1 H), 7,16 (dd, J=2,6, 5,6, 1 H), 7,32 (dd, J=2,7, 11 ,6, 1 H), 7,39 (d, J=2,5, 1 H), 7,60 (s, 2H), 8,07-8,18 (m, 2H), 8,50 (d, J=5,7, 1H), 8,72 (s, 1 H), 8,74-8,80 (m, 1 H), 9,50 (s, 1H); MS (HPLC/ES) 483,06 m/z = (M + 1). Ejemplo 2: Preparación de metilamida del ácido 4{4-[3-(4-cIoro-3-trifluorometilfenil)-ureido]-3-fluorofenoxi}-piridin-2-carboxílico, clorhidrato El compuesto del ejemplo 1 como la base libre (2,0 g) se disolvió en tetrahidrofurano anhidro (15 mi) y se agregó HCI/dioxano 4 M (exceso). La solución se concentró luego bajo vacío para obtener 2,32 gramos de sólidos blancuzcos. La sal cruda se disolvió en etanol caliente (125 mi), se agregó carbón activado y la mezcla se calentó a reflujo durante 15 minutos. La suspensión caliente se filtró a través de un lecho de Celite 521 y se dejó enfriar hasta temperatura ambiente. El frasco se colocó en el congelador durante la noche. Los sólidos cristalinos se recolectaron mediante filtración por succión, se lavaron con etanol, luego hexano y se secaron al aire. Los licores madre se concentraron y se dejó que cristalizaran (en el congelador) durante la noche. Se recolectó una segunda cosecha de sólidos y se combinó con la primera cosecha. La sal incolora se secó en un horno de vacío a 60 °C durante dos días. El rendimiento de la sal clorhidrato obtenida era de 1 ,72 g (79%). Punto de fusión: 215 °C Análisis elemental: Calculado Hallado c 48,57 48,68 H 3,11 2,76 N 10,79 10,60 Cl 13,65 13,63 F 14,63 14,88 Ejemplo 3: Preparación de metilamida del ácido 4{4-[3-(4-cloro-3-trifluorometiIfenil)-ureido]-3-fluorofenoxi}-piridin-2-carboxílico, mesilato El compuesto del ejemplo 1 como la base libre (2,25 g) se disolvió en etanol (100 mi) y se agregó una solución madre de ácido metansulfónico (exceso). La solución se concentró luego bajo vacío para obtener un aceite amarillo. Se agregó etanol y se repitió la concentración, con lo cual se obtuvieron 2,41 g de sólidos blancuzcos. La sal cruda se disolvió en etanol caliente (~125 mi) y luego se enfrió lentamente para que cristalizara. Después de alcanzar temperatura ambiente, el frasco se colocó en un congelador durante la noche. El material cristalino incoloro se recolectó mediante filtración por succión; la torta de filtrado se lavó con etanol, luego con hexano y se secó al aire, para obtener 2,05 g de material, que se secó en un horno de vacío a 60 °C durante la noche. Punto de fusión: 231 °C Análisis elemental: Calculado Hallado C 45,64 45,34 H 3,31 3,08 N 9,68 9,44 Cl 6,12 6,08 F 13,13 13,42 S 5,54 5,59 Ejemplo 4: Preparación de metilamida del ácido 4{4-[3-(4-cloro-3-trif(uorometilfenil)-ureido]-3-fluorofenoxi}-piridin-2-carboxílico, fenilsulfonato El compuesto del ejemplo 1 como la base libre (2,25 g) se suspendió en etanol (50 mi) y se agregó ácido bencensulfónico (0,737 g) en etanol (50 mi). La mezcla se calentó bajo agitación vigorosa. Todo el material sólido se disolvió para obtener una solución rojiza. La solución se dejó enfriar hasta temperatura ambiente y se rayó el frasco. La formación de cristales fue difícil de lograr, se encontraron algunas semillas, se agregaron a la solución y se colocaron en congelador durante la noche. Se habían formado sólidos de color grisáceo-tostado en el frasco; el material rompió se recolectó mediante filtración por succión. Los sólidos se lavaron con etanol, luego con hexano y se secaron al aire. El producto pesado: 2,05 g, 69% de rendimiento. Punto de fusión: 213 °C Análisis elemental: Calculado Hallado C 50,59 50,24 H 3,30 3,50 N 8,74 8,54 F 11,86 11 ,79 Cl 5,53 5,63 S 5,00 5,16 Ejemplo 5: Ensayo bioquímico con c-raf (raf-1) El ensayo bioquímico con c-Raf se realizó con una enzima c-Raf activada (fosforilada) por la Lck quinasa. La c-Raf activada por Lck (Lck/c-Raf) se produjo en células de insecto Sf9 por co-infección de células con baculovirus que expresan, bajo el control del promotor de polihedrina, GST-c-Raf (desde el aminoácido 302 hasta el aminoácido 648) y Lck (longitud completa). Ambos baculovirus se utilizaron a una multiplicidad de infección de 2,5 y las células se cosecharon 48 horas después de la infección. La proteína MEK-1 se produjo en células de insecto Sf9 infectando las células con el baculovirus que expresa la proteína de fusión GST-MEK-1 (longitud completa) a una multiplicidad de infección de 5 y cosechando las células 48 horas después de la infección. Se usó un procedimiento de purificación similar para GST-c-Raf 302-648 y GST-MEK-1. Las células transfectadas se suspendieron a razón de 100 mg de biomasa celular húmeda por mi en una solución amortiguadora que contenía fosfato de sodio 10 mM, cloruro de sodio 140 mM pH 7,3, Tritón X-100 0,5% y el cóctel de inhibidores de proteasas. Las células se rompieron con un homogeneizador Politron y se centrifugaron a 30.000g durante 30 minutos. El sobrenadante de 30.000g se aplicó sobre GSH-Sepharose. La resina se lavó con una solución amortiguadora que contenía Tris 50 mM, pH 8,0, NaCl 150 mM y Tritón X-100 0,01%. Las proteínas marcadas con GST se eluyeron con una solución que contenía Glutatión 100 mM, Tris 50 mM, pH 8,0, NaC1 150 mM y Tritón X-100 0,01%. Las proteínas purificadas fueron dializadas en una solución amortiguadora que contenía Tris 20 mM, pH 7,5, NaC1 150 mM y glicerol 20%.

Los compuestos de prueba se diluyeron en serie en DMSO usando diluciones al tercio hasta obtener concentraciones madre en un rango típicamente entre 50 µM y 20 nM (concentraciones finales en el rango de ensayo entre 1 µM y 0,4 nM). El ensayo bioquímico c-Raf se efectuó como un ensayo con Filtermat radioactivo en placas de polipropileno Costar de 96 cavidades (Costar 3365). Las placas se cargaron con 75 µl de una solución que contenía HEPES 50 mM pH 7,5, NaCI 70 mM, 80 ng de Lck/c-Raf y 1 µg de MEK-1. A continuación, se agregaron 2 µl de los compuestos individuales diluidos en serie a la reacción, antes de la adición de ATP. La reacción se inició con 25 µl de solución de ATP que contenía ATP 5 µM y 0,3 µCi [33P]-ATP. Las placas se sellaron y se incubaron a 32 °C durante 1 hora. La reacción se detuvo con la adición de 50 µl de ácido fosfórico 4% y se cosechó sobre Filtermats P30 (PerkinElmer) usando un cosechador Wallac Tomtec. Los Filtermats se lavaron primero con ácido fosfórico 1% y luego con H2O desionizada. Los filtros se secaron en un microondas, se embebieron en líquido de centelleo y se leyeron en un contador Wallac 1205 Betaplate (Wallac Inc., Atlanta, GA, EE.UU.). Los resultados se expresaron como la inhibición porcentual. % Inhibición = [100-(Tib/T¡)] x 100, donde Tib = (cuentas por minuto con inhibidor)-(valor basal) T¡ = (cuentas por minuto sin inhibidor)-(valor basal) El compuesto de la presente invención presenta una potente inhibición de raf quinasa en este ensayo.

Ejemplo 6: Ensayo con p38 quinasa in vitro Se activó p38 a2 (expresada en E. coli) purificada y marcada con His in vitro con MMK-6 hasta una gran actividad específica. Usando un formato de microtitulación, todas las reacciones tuvieron lugar en volúmenes de 100 µl con reactivos diluidos para obtener 0,05 µg/cavidad de p38 a2 activada y 10 µg/cavidad de proteína mielina básica en solución amortiguadora de ensayo (HEPES 25 mM 7,4, MgCI2 20 mM, NaCI 150 mM). Los compuestos de prueba (5 µl de una solución de DMSO 10% en agua) fueron preparados y diluidos en el ensayo para abarcar un rango de concentraciones finales entre 5 nM y 2,5 µM. El ensayo con quinasa se inició por adición de 25 µl de un cóctel de ATP para obtener una final concentración 10 µM de ATP frío y 0,2 µCi [?-33P] ATP por cavidad (200-400 dpm/pmol de ATP). La placa se incubó a 32 °C durante 35 min, y la reacción se detuvo con 7 µl de una solución 1 N de HCI ac. Las muestras se cosecharon sobre un Filtermat P30 (Wallac, Inc.) usando un cosechador TomTec 1295 (Wallac, Inc.) y el conteo se efectuó en un contador de centelleo líquido LKB 1205 Betaplate (Wallac, Inc.). Los controles negativos incluyeron sustrato más ATP solo. Ensayo con células SW1353: Se sembraron células SW1353 (condrosarcoma humano, ATCC, Bethesda, MD) (1000 células/100 µl de DMEM 10% FCS/cavidad) en placas de 96 cavidades y se incubaron durante la noche. Después de sustituir el medio, las células fueron expuestas a los compuestos de prueba durante 1 h a 37 °C, en cuyo momento se agregó IL-1 humana (1 ng/ml, Endogen, Woburn, WA) y TNF recombinante humana (10 ng/ml). Los cultivos se incuban durante 48 h a 37 °C, luego se determinaron los valores de IL-6 en el sobrenadante con un y ELISA. El compuesto de esta invención presenta una inhibición significativa de la p38 quinasa. Ejemplo 7: Inmunoensayo con Bio-Plex Fosfo-ERK 1/2 Se estableció un inmunoensayo con pERK en 96 cavidades, usando una plataforma de citometría de flujo láser (Bio-Rad) para medir la inhibición de pERK basal en una línea celular de cáncer de mama. Se plaquearon células MDA-MB-231 a razón de 50.000 células por cavidad en placas para microtitulación de 96 cavidades en medio de crecimiento completo. Para evaluar los efectos de los compuestos de prueba sobre la inhibición basal de pERK1/2, al día siguiente del plaqueado, las células MDA-MB-231 se transfirieron a DMEM con BSA 0,1% y se incubaron con los compuestos de prueba diluidos 1 :3 hasta una concentración final entre 3 µM y 12 nM en DMSO 0,1 %. Las células se incubaron con los compuestos de prueba durante 2 h, se lavaron y se usaron en solución amortiguadora A para lisis de células completas Bio-Plex. Las muestras se diluyen con solución amortiguadora B 1 :1 (v/v) y se transfirieron directamente a la placa de ensayo o se congelaron a -80 °C hasta su procesamiento. Se incubaron 50 µl de usados de células MDA-MB-231 diluidos con aproximadamente 2000 de esferas Bio-Plex de 5 micrones conjugados con anticuerpo anti-ERK1/2 durante la noche sobre un agitador a temperatura ambiente. Al día siguiente, se realizó el inmunoensayo sandwich con fosfo-ERK1/2 biotinilada, las esferas se lavaron 3 veces por cada incubación y luego se usaron 50 µl de PE-estreptavidina como reactivo de revelado. Las unidades de fluorescencia relativa de pERK1/2 fueron detectadas por conteo de 25 esferas con una celda de flujo Bio-Plex (sonda) a una sensibilidad alta. El valor de la IC50 se calculó considerando las células no tratadas como el máximo y ninguna célula (solamente esferas) como valor basal usando un programa basado en la hoja de cálculo de Excel. El compuesto de esta invención presenta una inhibición significativa en este ensayo. Ejemplo 8: Ensayo bioquímico con Flk-1 (VEGFR-2 murino) Este ensayo se realizó en placas opacas de 96 cavidades (Costar 3915) en el formato TR-FRET. Las condiciones de reacción fueron: ATP 10 µM, poli GT-biotina 25 nM, fosfo-Tyr Ab marcado con Eu (PY20 Perkin Elmer) 2 nM, APC 10 nM (Perkin Elmer), Flk-1 7 nM (dominio quinasa), DMSO 1%, HEPES 50 mM pH 7,5, MgCI2 10 mM, EDTA 0,1 mM, BRIJ 0,015%, BSA 0,1 mg/ml, mercaptoetanol 0,1 %). La reacción se inicia con la adición de enzima. El volumen de reacción final en cada cavidad es de 100 µl. Las placas se leen a 615 y 665 nM con un contador Perkin Elmer Victor V Multilabel aproximadamente 1,5-2,0 horas después de iniciar la reacción. La señal se calcula como una relación: (665 nm / 615 nm) * 10000 para cada cavidad.

El compuesto de esta invención presenta una inhibición significativa de la VEGFR2 quinasa. Ejemplo 9: Ensayo bioquímico con PDGFR FRET Murino Este ensayo se estableció con un formato en placas negras de 96 cavidades (Costar 3915). Se usaron los siguientes reactivos: anticuerpo anti-fosfotirosina pY20 marcado con europio (Perkin-Elmer) y estreptavidina-APC; poli GT-biotina de y PDGFR de ratón. Las condiciones de reacción fueron como sigue: se combinó PDGFR de ratón 1 nM con ATP 20 µM, poli GT-biotina 7 nM, anticuerpo pY20 1 nM, estreptavidina-APC 5 nM y DMSO 1 % en solución amortiguadora de ensayo (HEPES 50 mM pH 7,5, MgCI2 10 mM, EDTA 0,1 mM, BRIJ 35 0,015%, BSA 0,1 mg/ml, mercaptoetanol 0,1 %). La reacción se inicia con la adición de la enzima. El volumen de reacción final en cada cavidad es de 100 µl. Después de 90 minutos, la reacción se detuvo con la adición de 10 µl/cavidad de estaurosporina 5 µM. Las placas se leyeron a 615 y a 665 nm con un contador Perkin Elmer Víctor V Multilabel aproximadamente 1 hora después que se detuvo la reacción. La señal se calcula como una relación: (665 nm / 615 nm) * 10000 para cada cavidad. El compuesto de esta invención presenta una inhibición significativa de PDGFR quínasa. Para generar la IC50 para ambos PDGFR y Flk-1 , los compuestos se agregaron antes de iniciar a la enzima. Se obtuvo una placa madre a 50 veces con compuestos diluidos en serie 1:3 en una solución de DMSO 50%/dH2O 50%. La adición de 2 µl de la solución madre al ensayo permitió obtener concentraciones de compuesto finales en un rango entre 10 µM-4,56 nM en DMSO 1 %. Los datos se expresaron como inhibición porcentual: % inhibición = 100-((Señal con inhibidor-valor basal)/(Señal sin inhibidor -valor basal)) * 100. Ejemplo 10: Ensayo de proliferación con MDA-MB231 Se cultivaron células de carcinoma de mama humana (MDA MB-231 , NCI) en medio de crecimiento estándar (DMEM) suplementado con FBS 10% inactivada por calor a 37°C en CO2 5% (vol/ vol) en un incubador humidificado. Las células se plaquearon a una densidad de 3000 células por cavidad en 90 µl de medio de crecimiento en un disco de cultivo de 96 cavidades. Con el fin de determinar los valores de CTG T0h, 24 horas después del plaqueado, se agregaron 100 µl de reactivo luminiscente CelITiter-Glo (Promega) a cada cavidad y se incubaron a temperatura ambiente durante 30 minutos. La luminiscencia se registró con un instrumento Wallac Víctor II. EL reactivo CelITiter-Glo da como resultado la lísis celular y la generación de una señal luminiscente proporcional a la cantidad de ATP presente, lo cual a su vez es directamente proporcional a la cantidad de células presentes. Los compuestos de prueba se disuelven en DMSO 100% para preparar soluciones madre 10 mM. Las soluciones madre se diluyeron aún más 1:400 en medio de crecimiento para obtener soluciones de trabajo de compuesto de prueba 25 µM en DMSO 0,25%. Los compuestos de prueba se diluyeron en serie en medio de crecimiento que contiene DMSO 0,25% para mantener concentraciones constantes de DMSO en todas las cavidades. Se agregaron 60 µl de compuesto de prueba diluido a cada cavidad cultivo para obtener un volumen final de 180 µl. Las células con y sin compuestos de prueba individuales se incubaron durante 72 horas, en cuyo momento se midió la luminiscencia dependiente de ATP, como se describió previamente, para obtener los valores de T 2h- Opcionalmente, se pueden determinar los valores IC50 con un programa de análisis de cuadrados mínimos usando la concentración de compuesto versus la inhibición porcentual. % Inhibición = [1-(TprUeba72h -Toh)/(Tctri72h -Toh)] x 100, donde prueba 72h = luminiscencia dependiente de ATP a las 72 horas en presencia del compuesto de prueba Tctri. 2n = luminiscencia dependiente de ATP a las 72 horas en ausencia de compuesto de prueba To = luminiscencia dependiente de en tiempo cero El compuesto de esta invención presenta una inhibición significativa de proliferación usando este ensayo. Ejemplo 11: ELISA sandwich con pPDGFR-beta en células AoSMC Se plaquearon SMC aórticas 100K P3-P6 (Clonetics, CC-2571) en cada cavidad de un grupo de 12 cavidades a razón de 1000 µl de volumen/cavidad de SGM-2 (Clonetics, N° Cat. CC-3182) usando técnicas de cultivo celular estándar. Al día siguiente, las células se lavaron con 1000 µl de D-PBS (Gibco) una vez, luego se privaron de suero en 500 µl de SBM (Clonetics) (media basal para células de musculatura lisa) con BSA 0,1% (Sigma, N° Cat A9576) durante la noche. Los compuestos se diluyeron a un rango de dosis entre (10 µM a 1 nM en pasos de dilución al décimo en DMSO, concentración final de DMSO 0,1%). El medio usado se retiró por inversión rápida sobre el sumidero y luego se agregaron 100 µl de cada dilución a la correspondiente cavidad celular durante 1 hs a 37 °C. Las células fueron estimuladas luego con ligando PDGF BB (Leinco) 10 ng/ml durante 7 minutos a 37 °C. El medio se decantó y se agregaron 150 µl de solución amortiguadora de lisis isotónica (M-POR de Pierce) con una tableta de inhibidor de proteasas (Completo; sin EDTA) y vanadato de Na 0,2 mM. Las células se usaron durante 15 min a 4 °C sobre agitador en un cuarto frío. Los usados se colocaron en tubos Eppendorf a los cuales se agregaron 15 µl de anticuerpo anti-PDGFR-b conjugado con agarosa y se incubaron a 4 °C durante la noche. Al día siguiente, las esferas se lavan tres veces en 50 volúmenes de PBS y se llevaron a ebullición en solución amortiguadora de muestra LDS 1x (Invitrogen) durante 5 minutos. Las muestras se corrieron sobre geles con gradiente de Tris-Acetato 3-8% (Invitrogen) y se transfirieron sobre nitrocelulosa. Las membranas se bloquearon en BSA/TBS-T 1% durante 1 hs antes de la incubación en anticuerpo anti-fosfo-PDGFR-b (Tyr-857) en solución amortiguadora de bloqueo (dilución 1 :1000) durante 1 hora. Después de tres lavados en TBS-T, las membranas se incubaron en IgG anti-conejo de cabra HRP (dilución 1 :25000) durante 1 hs. Se efectuaron otros tres lavados antes de la adición de sustrato ECL. Las membranas se expusieron a Hyperfilm-ECL. A continuación, las membranas fueron agotadas y se volvieron a exponer a anticuerpo anti-PDGFR-b (Santa Cruz, SC-339) para el PDGFR-b total. En la Tabla 1 se ilustran los resultados de los ensayos bioquímicos con quinasa in vitro para la p38 quinasa, PDGFR quinasa y VEGFR2 quinasa. Estas tres quinasas blanco están relacionadas todas en la activación del estroma y la proliferación de células endoteliales que conduce a una angiogénesis y a la provisión de suministro de sangre al tejido tumoral. Tabla 1 En la Tabla 2 se muestran los resultados de dos ensayos celulares para la actividad raf quinasa, que comprenden (i) inhibición de pERK en células MDA-MB231 , una lectura del mecanismo de la actividad raf quinasa y (ii) un ensayo de proliferación de células MDA-MB231 , un ensayo funcional de la actividad raf quinasa. Además, la Tabla 2 ilustra los resultados de la fosforilación dirigida por PDGFRbb de PDGFR-beta en células de musculatura lisa aórtica, que es una lectura del mecanismo de la inhibición de la PDGFR quinasa.

En general, los compuestos de la presente invención proveen una combinación única de inhibición de la angiogénesis y de la proliferación de células tumorales. También poseen un perfil de inhibición mejorado contra numerosos blancos quinasa clave tal como raf, p38, PDGFR y VEGFR-2, que son blancos moleculares de interés para el tratamiento de osteoporosis, enfermedades inflamatorias y enfermedades hiperproliferativas, incluyendo cáncer. Se considera que el especialista en la técnica, usando la información precedente y la información disponible en la técnica, puede utilizar la presente invención en su extensión más amplia. Debería ser evidente para el especialista en la técnica que es posible efectuar cambios y modificaciones en esta invención sin apartarse del espíritu o alcance de la invención tal como se describe aquí. Todas las publicaciones, solicitudes y patentes citadas previamente y más adelante se incorporan en la presente a modo de referencia. Los encabezados temáticos indicados previamente y más adelante se ofrecen como lineamientos, donde determinada información se pueden consultar en la solicitud, pero no se pretende que sea la única fuente en la solicitud donde se pueda encontrar información sobre dicho tópico.

Claims (51)

1. REIVINDICACIONES: 1. Un compuesto de la fórmula (I) o una sal, o una prodroga o un metabolito o un estereoisómero aislado del mismo
2. 2. Una sal aceptable para uso farmacéutico de un compuesto de la fórmula I de la cláusula 1 que es a) una sal básica de un ácido orgánico o un ácido inorgánico que es ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido metansulfónico, ácido trifluorometansulfónico, ácido bencensulfónico, ácido p-toluensulfónico (sal tosilato), ácido 1-naftalensulfónico, ácido 2-naftalensulfónico, ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido mélico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido láctico, ácido oxálico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido maleico, ácido benzoico, ácido salicílico, ácido fenilacético o ácido mandélico; o b) una sal acida de una base orgánica o inorgánica que contiene un catión de un metal alcalino, un catión de un metal alcalino-térreo, un catión de amonio, un catión de amonio sustituido con un alifático o un catión de amonio sustituido con un aromático.
3. 3. Un compuesto que es metilamida del ácido 4{4-[3-(4-cloro-3-trifluorometilfenil)-ureido]-3-fluorofenoxi}-piridin-2-carboxílico, o una sal del mismo.
4. 4. Una sal aceptable para uso farmacéutico de un compuesto de la cláusula 3 que es una sal básica de un ácido orgánico tal como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido metansulfónico, ácido trifluorometansulfónico, ácido bencensulfónico, ácido p-toluensulfónico (sal tosilato), ácido 1-naftalensulfónico, ácido 2-naftalensulfónico, ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido mélico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido láctico, ácido oxálico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido maleico, ácido benzoico, ácido salicílico, ácido fenilacético o ácido mandélico.
5. 5. Un compuesto que es una sal clorhidrato, bencensulfonato o metansulfonato de N-(4-cloro-3-(trifluorometil)fenil)-N'-2-fluoro-(4-(2-(N-metilcarbamoil)-4-piridiloxi)fenil)urea.
6. 6. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la cláusula 1 y un vehículo aceptable para uso fisiológico.
7. 7. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la cláusula 3 y un vehículo aceptable para uso fisiológico.
8. 8. Una composición farmacéutica para el tratamiento de una enfermedad en un ser humano u otro mamífero que es regulada por una proteína quinasa, asociada con una aberración en la vía de transducción de señales de proteína quinasas que comprende un compuesto de la cláusula 1 y un vehículo aceptable para uso fisiológico.
9. 9. Una composición farmacéutica para el tratamiento de un trastorno hiperproliferativo que comprende un compuesto de la cláusula 1 y un vehículo aceptable para uso fisiológico.
10. 10. Una composición farmacéutica para el tratamiento del crecimiento de células cancerosas que comprende un compuesto de la cláusula 1 y un vehículo aceptable para uso fisiológico.
11. 11. Una composición farmacéutica que comprende una sal aceptable para uso farmacéutico de N-(4-cloro-3-(trifluorometil)fenil)-N'-2-fluoro-(4-(2-(N-metilcarbamoil)-4-piridiIoxi)fenil)urea y un vehículo aceptable para uso fisiológico.
12. 12. Un método para regular la transducción de señales de tirosina quinasa que comprende administrar a un ser humano u otro mamífero un compuesto de la cláusula 1.
13. 13. Un método para tratar o prevenir una enfermedad en un ser humano u otro mamífero que es regulada por una tirosina quinasa y está asociada con una aberración en la vía de transducción de señales de una tirosina quinasa, donde dicho método comprende administrar a un ser humano u otro mamífero un compuesto de la cláusula 1.
14. 14. Un método para tratar o prevenir una enfermedad en un ser humano y/u otro mamífero que es un trastorno mediado por VEGFR-2, donde dicho método comprende administrar a un ser humano u otro mamífero un compuesto de la cláusula 1.
15. 15. Un método para tratar o prevenir una enfermedad en un ser humano y/u otro mamífero que es un trastorno mediado por PDGFR, donde dicho método comprende administrar a un ser humano u otro mamífero un compuesto de la cláusula 1.
16. 16. Un método para tratar o prevenir una enfermedad en un ser humano u otro mamífero que es un trastorno mediado por raf, donde dicho método comprende administrar a un ser humano u otro mamífero un compuesto de la cláusula 1.
17. 17. Un método para tratar o prevenir una enfermedad en un ser humano u otro mamífero que es un trastorno mediado por p38, donde dicho método comprende administrar a un ser humano u otro mamífero un compuesto de la cláusula 1.
18. 18. Un método para tratar o prevenir una enfermedad en un ser humano u otro mamífero que es un trastorno mediado por VEGF, donde dicho método comprende administrar a un ser humano u otro mamífero un compuesto de la cláusula 1.
19. 19. Un método para tratar o prevenir una enfermedad en un ser humano u otro mamífero que es un trastorno hiperproliferativo, inflamatorio y/o angiogenético que comprende administrar a un ser humano u otro mamífero un compuesto de la cláusula 1.
20. 20. Un método para tratar o prevenir una enfermedad en un ser humano u otro mamífero que es un trastorno hiperproliferativo que comprende administrar a un ser humano u otro mamífero un compuesto de la cláusula 1.
21. 21. El método de la cláusula 20, donde dicho trastorno hiperproliferativo es cáncer.
22. 22. El método de la cláusula 21 , donde dicho método comprende administrar a un ser humano u otro mamífero un compuesto de la cláusula 1 en combinación con uno o numerosos agentes anticancerosos adicionales.
23. 23. Un método para tratar o prevenir una enfermedad en un ser humano u otro mamífero caracterizadas por procesos anormales de angiogénesis o hiperpermeabilidad que comprende administrar a un ser humano u otro mamífero un compuesto de la cláusula 1.
24. 24. El método de la cláusula 23, para tratar o prevenir una enfermedad en un ser humano u otro mamífero caracterizada por procesos anormales de angiogénesis o hiperpermeabilidad, que comprende administrar, a un ser humano u otro mamífero, un compuesto de la cláusula 1 simultáneamente con otro agente anti-angiogénesis, ya sea en la misma formulación o en formulaciones separadas.
25. 25. Un método para tratar o prevenir una o más de las siguientes afecciones en seres humanos y/u otro mamíferos: crecimiento tumoral, retinopatía, oclusión isquémica de la vena retinal, retinopatía del prematuro, degeneración macular relacionada con la edad; artritis reumatoide, psoriasis, un trastorno bulloso asociado con formación subepidérmica de ampollas, incluyendo penfigoide ampolloso, eritema multiforme o dermatitis herpetiforme; artritis reumatoide, osteoartritis, artritis séptica, metástasis de tumores, enfermedad periodontológica, ulceración de la córnea, proteinuria y trombosis coronaria de una placa aterosclerótica, aneurisma aórtico, control de la natalidad, epidermolisis bullosa distrófíca, pérdida de cartílago degenerativo después de una lesión traumática de las articulaciones, osteopenias mediadas por actividad MMP, enfermedad de la articulación tempero-mandibular o enfermedad desmielinizante del sistema nervioso, donde dicho método comprende administrar a un ser humano u otro mamífero, un compuesto de la cláusula 1.
26. 26. Un método para tratar o prevenir una o más de las siguientes afecciones en seres humanos y/u otro mamíferos: crecimiento tumoral, retinopatía, oclusión isquémica de la vena retinal, retinopatía del prematuro, degeneración macular relacionada con la edad; artritis reumatoide, psoriasis, un trastorno bulloso asociados con formación subepidérmica de ampollas, incluyendo penfigoide ampolloso, eritema multiforme o dermatitis herpetiforme; en combinación con otra afección seleccionada del grupo formado por: fiebre reumática, resorción ósea, osteoporosis postmenopáusica, sepsis, sepsis Gram-negativa, shock séptico, shock endotóxico, síndrome de shock tóxico, síndrome de respuesta inflamatoria sistémica, enfermedad de intestino inflamatorio (enfermedad de Crohn y colitis ulcerosa), reacción de Jarisch-Herxheimer, asma, síndrome de dificultad respiratoria de adultos, enfermedad fibrótica pulmonar aguda, sarcoidosis pulmonar, enfermedad respjratoria alérgica, silicosis, pneumoconiosis de los mineros del carbón, lesiones alveolares, insuficiencia hepática, enfermedad hepática durante una inflamación aguda, hepatitis alcohólica severa, malaria (malaria por Plasmodium falciparum y malaria cerebral), diabetes mellitus no dependiente de insulina (NIDDM), insuficiencia cardíaca congestiva, daño después de una enfermedad cardíaca, aterosclerosis, mal de Alzheimer, encefalitis aguda, daño cerebral, esclerosis múltiple (desmielinización y pérdida de oligodendrocitos en la esclerosis múltiple), cáncer avanzado, forma maligna linfoide, pancreatitis, deterioro de la cicatrización de heridas en una infección, inflamación y cáncer, síndromes mielodisplásicas, lupus eritematoso sistémico, cirrosis biliar, necrosis intestinal, lesiones por radiación; toxicidad después de administración de anticuerpos monoclonales, reacción de huésped-versus-injerto (lesiones por reperfusión isquémica y rechazo de aloinjertos de riñon, hígado, corazón y piel), rechazo de aloinjertos de pulmón (bronquitis obliterante) y complicaciones debidas a un reemplazo total de cadera, donde dicho método comprende administrar a un ser humano u otro mamífero un compuesto de ia cláusula 1.
27. 27. Un método para tratar o prevenir una o más de las siguientes afecciones en seres humanos y/u otro mamíferos: crecimiento tumoral, retinopatía, retinopatía diabética, oclusión isquémica de la vena retinal, retinopatía del prematuro, degeneración macular relacionada con la edad; artritis reumatoide, psoriasis, trastorno bulloso asociado con formación subepidérmica de ampollas, penfigoide ampolloso, eritema multiforme y dermatitis herpetiforme, en combinación con una enfermedad infecciosa seleccionada del grupo formado por: tuberculosis, infección por Helicobacter pilori durante la enfermedad de úlcera péptica, enfermedad de Chagas debida a una infección por Trypanosoma cruzi, efectos de la toxina tipo Shiga debida a una infección por E. coli, efectos de la enterotoxina A debida a una infección por Staphilococcus, infección meningocóccica e infecciones por Borrelia burgdoríerí, Treponema pallidum, citomegalovirus, virus de la influenza, virus de encefalomielitis de Theiler y el virus de inmunodeficiencia humana (VIH); donde dicho método comprende administrar a un ser humano u otro mamífero un compuesto de la cláusula 1.
28. 28. El método de la cláusula 22 donde dicho agente anti-cáncer adicional se selecciona del grupo formado por asparaginasa, bleomicina, carboplatino, carmustina, clorambucilo, cisplatino, colaspasa, ciclofosfamida, citarabina, dacarbazina, dactinomicina, daunorubicina, doxorubicina (adriamicina), epirubicina, etopósido, 5-fluorouracilo, hexametilmelamina, hídroxiurea, ifosfamida, irinotecan, leucovorina, lomustina, mecloretamina, 6-mercaptopurina, mesna, metotrexato, mitomicina C, mitoxantrona, prednisolona, prednisona, procarbazina, raloxifeno, estreptozocina, tamoxifeno, tioguanina, topotecan, vinblastina, vincristina, vindesina, aminoglutetimida, L-asparaginasa, azatioprina, 5-azacitidina cladribina, busulfán, dietilestilbestrol, 2',2'-difluorodeoxicitidina, docetaxel, eritrohidroxinonil adenina, etinilestradiol, 5-fluorodeoxiuridina, monofosfato de 5-fluorodeoxiuridina, fosfato de fludarabina, fluoximesterona, fiutamida, caproato de hidroxiprogesterona, idarubicina, interferón, acetato de medroxiprogesterona, acetato de megestrol, melfalán, mitotano, paclitaxel, pentostatina, N-fosfonoacetil-L-aspartato (PALA), plicamicina, semustina, tenipósido, propionato de testosterona, tiotepa, trimetilmelamina, uridina y vinorelbina, oxaliplatino, gemcitabina, capecitabina, epotilona y sus derivados naturales o sintéticos, tositumomab, trabedectina y temozolomida, trastuzumab, cetuximab, bevacizumab, pertuzumab, ZD-1839 (Iressa), OSI-774 (Tarceva), CI-1033, GW-2016, CP-724,714, HM-2272, EKB-569, STI-571 (Gleevec), PTK-787, SU-11248, ZD-6474, AG-13736, KRN-951 , CP-547,632, CP-673,451 , CHIR-258, MLN-518, AZD-2171 , PD-325901, ARRY-142886, ácido suberoílanilida- hidroxámico (SARA), LAQ-824, LBH-559, MS-275, FR-901228, bortezomib y CCI-779.
29. 29. El método de la cláusula 22 donde el agente anti-cáncer adicional es un agente citotóxico seleccionado del grupo formado por inhibidores de ADN topoisomerasa I y II, intercaladores de ADN, agentes alquilantes, anti-metabolitos, bloqueantes del ciclo celular, interruptores de microtúbulos e inhibidores de Eg5.
30. 30. El método de la cláusula 22 donde el agente anti-cáncer adicional se selecciona del grupo formado por inhibidores de la señalización de receptores de factores de crecimiento, inhibidores de histona desacetilasa, inhibidores de la vía PKB, inhibidores de la vía Raf/MEK/ERK, inhibidores de la vía de m-TOR e inhibidores de proteasomas.
31. 31. Un método para tratar o prevenir una o más de las siguientes afecciones en seres humanos y/u otro mamíferos: fiebre reumática, resorción ósea, osteoporosis postmenopáusica, sepsis, sepsis Gram-negativa, shock séptico, shock endotóxico, síndrome de shock tóxico, síndrome de respuesta inflamatoria sistémica, enfermedad de intestino inflamatorio (enfermedad de Crohn y colitis ulcerosa), reacción de Jarisch-Herxheimer, asma, síndrome de dificultad respiratoria de adultos, enfermedad fibrótica pulmonar aguda, sarcoidosis pulmonar, enfermedad respiratoria alérgica, silicosis, pneumoconiosis de los mineros del carbón, lesiones alveolares, insuficiencia hepática, enfermedad hepática durante una inflamación aguda, hepatitis alcohólica severa, malaria (malaria por Plasmodium falciparum y malaria cerebral), diabetes mellitus no dependiente de insulina (NIDDM), insuficiencia cardíaca congestiva, daño después de una enfermedad cardíaca, aterosclerosis, mal de Alzheimer, encefalitis aguda, daño cerebral, esclerosis múltiple (desmielinización y pérdida de oligodendrocitos en esclerosis múltiple), cáncer avanzado, forma maligna linfoide, pancreatitis, deterioro de la cicatrización de heridas en una infección, inflamación y cáncer, síndromes mielodisplásicas, lupus eritematoso sistémíco, cirrosis biliar, necrosis intestinal, psoriasis, lesiones por radiación; toxicidad después de administración de anticuerpos monoclonales, reacción de huésped-versus-injerto; (lesiones por reperfusión isquémica y rechazo de aloinjertos de riñon, hígado, corazón y piel), rechazo de aloinjertos de pulmón (bronquitis obliterante) o complicaciones debidas a reemplazo total de cadera, donde dicho método comprende administrar a un ser humano, u otro mamífero, un compuesto de la cláusula 1.
32. 32. Un método para tratar o prevenir una o más de las siguientes afecciones en seres humanos y/u otro mamíferos: tuberculosis, infección por Helicobacter pilorí durante la enfermedad de úlcera péptica, enfermedad de Chagas debida a una infección por Trypanosoma cruzi, efectos de la toxina tipo Shiga debida a una infección por E. coli, efectos de enterotoxina A debida a una infección por Staphilococcus, infección meningocóccica e infecciones por Borrelia burgdorferi, Treponema pallidum, citomegalovirus, virus de la influenza, virus de encefalomielitis de Theiler y el virus de inmunodeficiencia humana (VIH), donde dicho método que comprende administrar a un ser humano, u otro mamífero, un compuesto de la cláusula 1.
33. 33. Un método para tratar o prevenir osteoporosis, inflamación y trastornos angiogenéticos, con excepción de cáncer, en un ser humano y/u otro mamífero que comprende administrar una cantidad eficaz de un compuesto de la cláusula 1 a dicho mamífero.
34. 34. Un método para tratar y/o prevenir una enfermedad y/o afección en un sujeto que lo necesita, que comprende administrar una cantidad eficaz de un compuesto de la cláusula 1 ó 2.
35. 35. El método de la cláusula 37, donde dicho método comprende causar la regresión de un tumor en un sujeto o células del mismo.
36. 36. El método de la cláusula 37, donde dicho método comprende inhibir la linfangiogénesis.
37. 37. El método de la cláusula 37, donde dicho método comprende inhibir la angiogénesis.
38. 38. El método de la cláusula 37, donde dicho método comprende inhibir la linfangiogénesis y la angiogénesis.
39. 39. El método de la cláusula 37, donde dicho método comprende estimular la proliferación de células progenitoras hematopoyéticas.
40. 40. El método de la cláusula 37, donde dicho método comprende tratar un trastorno en un sujeto mamífero mediado por raf, VEGFR-2, VEGFR-3, PDGFR-beta, p38 y/o flt- 3.
41. 41. El método de la cláusula 37, donde dicho método comprende determinar si una afección puede ser modulada por dicho compuesto, que comprende medir la expresión o actividad de raf, VEGFR-2, VEGFR-3, PDGFR-beta, p38 y/o flt-3 en una muestra que comprende células o un extracto celular, donde dicha muestra se obtiene de un sujeto o una célula con dicha afección, por el cual dicha afección puede ser modulada por dicho compuesto cuando dicha expresión o actividad es diferente en dicha afección en comparación con un control normal.
42. 42. El método de la cláusula 44, que además comprende comparar la expresión en dicha muestra con dicho control normal.
43. 43. El método de la cláusula 37, donde dicho método comprende evaluar la eficacia de dicho trastorno compuesto, que comprende administrar dicho compuesto, medir la expresión o actividad de raf, VEGFR-2, VEGFR-3, PDGFR-beta, p38 y/o flt-3 y determinar el efecto de dicho compuesto sobre dicha expresión o actividad.
44. 44. El método de la cláusula 37, donde dicho método comprende determinar la presencia de raf, VEGFR-2, VEGFR-3, PDGFR-beta, p38 y/o flt-3 en una muestra de un material biológico, poner dicha muestra en contacto con dicho compuesto y determinar si dicho compuesto se une a dicho material.
45. 45. El método de la cláusula 37, donde dicho método comprende tratar un tumor en un sujeto que lo necesita, que comprende administrar una cantidad eficaz de dicho compuesto, donde dicha cantidad es eficaz para inhibir la proliferación celular y neovascularización en tumores.
46. 46. Un compuesto que es un metabolito natural del compuesto de la cláusula 3.
47. 47. El compuesto de la cláusula 49 donde el sitio de metabolismo es ya sea uno de los dos átomos de nitrógeno de la urea o el átomo de nitrógeno de la piridina o la funcionalidad metilamida o cualquier combinación de los mismos.
48. 48. El compuesto de la cláusula 49 donde el átomo de nitrógeno de la urea lleva un grupo hidroxilo y/o el átomo de nitrógeno de la piridina está oxidada y/o la funcionalidad amida es desmetilada.
49. 49. El compuesto de la cláusula 49 que se selecciona entre: amida del ácido 4{4-[3-(4-cloro-3-trifluorometilfenil)-ureido]-3-fluorofenoxi}-pirid¡n-2-carboxílico, metilamida del ácido 4{4-[3-(4-cloro-3-trifluorometilfenil)-ureido]-3-fluorofenoxi}-1-hidroxi-p¡ridin-2-carboxílico o amida del ácido 4{4-[3-(4-cloro-3-trifluorometilfenil)-ureido]-3-fluofenoxi}-1-hidroxi-piridin-2-carboxílico.
50. 50. El método de la cláusula 19, donde el trastorno inflamatorio se selecciona entre artritis reumatoide, COPD, enfermedad de Crohn y psoriasis.
51. 51. Un método para tratar o prevenir una enfermedad en un ser humano u otro mamífero que es un trastorno mediado por flt-3, donde dicho método comprende administrar a un ser humano u otro mamífero un compuesto de la cláusula 1.