MXPA05012491A - Diaril ureas con actividad inhibidora de quinasa - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a métodos de uso de aril ureas para el tratamiento de enfermedades y condiciones asociadas con trayectorias de transducción de señal que comprenden por lo menos un raf, VEGFR, PDGFR, p 38 y/o Flt-3. La presente invención proporciona también composiciones y métodos para identificar condiciones y enfermedades que pueden ser moduladas con los compuestos de la presente invención. Estos métodos facilitan la selección de sujetos quienes pueden ser tratados de manera eficiente con compuestos de la presente invención. En forma adicional, la invención proporciona métodos para monitoreo de sujetos a quienes se ha administrado un compuesto de la presente invención.

Description

DIARIL UREAS CON ACTIVIDAD INHIBIDORA DE QUINASA La presente solicitud reclama el beneficio de las Solicitudes Provisionales de los Estados Unidos de Norteamérica Nos. 60/556,062, presentada el 25 de marzo de 2004, 60/520,399, presentada el 17 de noviembre de 2003, y 60/471 ,735, presentada el 20 de mayo de 2003, cada una de las cuales está incorporada a la presente mediante referencia en su totalidad.

Antecedentes de la invención La activación de la trayectoria de transducción de señal ras indica una cascada de eventos que tiene un profundo impacto en la proliferación, diferenciación y transformación celular. Raf quinasa, un efecto descendente de ras, es un mediado clave de esas señales desde los receptotes de superficie celular para el núcleo de la célula (Lowy, D. R. y Willumsen, B. M. Ann. Rev. Biochem. 1993, 62,851 ; Bos, J. L. Cáncer Res.1989, 49, 4682). Se ha demostrado que la inhibición del efecto de ras activo al inhibir la trayectoria de señalización raf quinasa mediante la administración de anticuerpos de desactivación a raf quinasa o mediante la co-expresión de raf quinasa negativa dominante o MEK negativa dominante, el sustrato de raf quinasa, conduce a la inversión de las células transformadas para el fenotipo de crecimiento normal (e. g., Daum et al. TrendsBiochem.

Sci. 1994,19, 474-80; Fridman et al. J. Biol. Chem. 1994, 269, 30105-8). Kolch et al. (Nature 1991 , 349, 426-28) han demostrado además que la inhibición de la expresión raf mediante ARN antisentido bloquea la proliferación celular en los oncógenos asociados por membrana. De manera similar, la inhibición de raf quinasa (por medio de oligodeoxinucleótidos de antisentido) ha sido correlacionada in vitro e in vivo con la inhibición del crecimiento de una variedad de tipos de tumo humano (Monia et al., Nat. Med. 1996,2; 668-75). Por lo tanto, los inhibidores pequeños de la actividad de Raf quinasa son agentes importantes para el tratamiento del cáncer (Naumann, U.;Eisenmann-Tappe, I.; Rapp.U. R. Recent Results Cáncer Res. 1997, 143, 237; Monia, B. P.; Johnston, J. F.; Geiger, T.; Muller, M.; Fabbro, D. Nature Medicine 1996,2, 668). Para soportar el crecimiento tumoral progresivo más allá del tamaño de 1-2 mm3, las células tumorales requieren un estroma funcional, una estructura de soporte que consta de fibroblasto, células de músculo liso, células endoteliales, proteínas de matriz extracelular, y factores solubles (Folkman, J. , Seinin Oncol, 2002.29 (6 Suppl 16), 15-8). Los tumores inducen la formación de tejidos estromales a través de la secreción del facto de crecimiento soluble tal como PDGF y transformó el factor de crecimiento-beta (TGF-beta), que a su vez estimula la secreción de factores complementarios mediante células huésped tales como facto de crecimiento de fibroblasto (FGF), actividad de quinasa del facto de crecimiento epidérmico (EGF) y factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF). Estos factores de estimulación inducen la formación de nuevos vasos sanguíneos, o angiogensis, los cuales llevan oxígeno y nutrientes hacia el tuno y le permiten crecer y proporciona una ruta para la metástasis. Existe la necesidad de desarrollar un agente novedoso con actividad pluripotente contra un número de trayectorias de señalización clave utilizadas por los tumores para inducir angiogensis en el estroma huésped. Estos incluyen PDGF, un potente estimulado de la formación de estroma (Ostman, A, y C. H. Heldin, Adv. Cáncer Res, 2001 , 80, 1-38), FGF, un quimioatrayente y mitógeno para fibroblastos y células endoteliales, y VEGF, un potente regulado de vascularización. Uno de los reguladores clave de la formación estromal es el PDGF, el cual es secretado por muchos tumores de una manera paracrina y promueve el crecimiento de fibroblastos, células de músculo liso y endoteliales, promueva la formación de estroma y la angiogensis. PDGF fue identificado originalmente como el producto v-sis-oncógeno del virus de sarcoma de simio (Heldin, C. H., et al., J Cell Sci Suppl, 1985, 3, 65-76). Este facto de crecimiento está conformado por dos cadenas de péptido, referidas como cadenas A o B las cuales comparten 60% de homología en su secuencia de aminoácido primaria. Las cadenas son entrelazadas con disulfuro para formar la proteína madura 30 kDa compuesta de homo- o heterodímeros AA, BB o Ab. PDGF se encuentra en altos niveles en plaquetas, y es expresado po células endoteliales y células de músculo liso vasculares. Además la producción de PDGF es sobreregulada bajo condiciones de oxígeno reducido tales como aquellas encontradas en tejido tumoral escasamente vascularizado (Kourembanas, S., et al., Kydney Int, 1997, 51(2), 438-43). PDGF se enlaza con gran afinidad al recepto de PDGF, un receptor de tirosin quinasa de transmembrana 124 kDa aminoácido 1106 (Heldin, C. H., A. Ostman, y L. Ronnstry, Bioqchim Biophys Acta, 1998. 1378(1), 79-113). PDGF es encontrado como cadenas de homo- o heterodímero que tienen 30% de homología general en su secuencia de aminoácido y 64% de homología entre sus dominios de quinasa (Heldin, C. H., et al., Embo J, 1988, 7(5), 1387-93). PDGFR es un miembro de una familia de recepto de tirosín quinasa que separa los dominios de quinasa que incluye VEGFR2 (KDR), c-Kit, y FLT3 de los cuales se ha encontrado que tienen un rol en la promoción de la angiogensis, crecimiento y supervivencia del tumor. El recepto de PDGF es expresado principalmente en fibroblasto, células de músculo liso y perícitos y en un meno grado en neuronas, riñon mesengial, células de Leydig y Schwann del sistema nervioso central. Al enlace con el receptor, el PDGF induce la dimerización del receptor y experimenta la auto- y la transfosforilación de residuos de tirosina lo cual incrementa la actividad de quinasa de los receptores y promueve el alistamiento de los efectores descendentes a través de la activación de los dominios de enlace de la proteína SH2. Un número de moléculas de señalización forman complejos con PDGF activado que incluye PI-3-quinasa, fosfolipasa C-gama, src y GAP (proteína de activación de GTPasa para p21-ras) (Soskic, V., et al. Biochemistry, 1999, 38(6), 1757-64). A través de la activación de PI-3-quinasa, PDGF activa la trayectoria de señalización Rho que induce la motilidad y la migración celular, y a través de la activación de GAP, induce la mitogenesis a través de la activación de p21-ras y la trayectoria de señalización MAPK. En los adultos, la función principal del PDGF es facilitar e incrementar la velocidad de curación de heridas y mantener la homeostasis de los vasos sanguíneos (Baker, E. A. y D. J. Leaper, Wound Repair Reagen, 2000. 8(5). 392-8; Yu, J., A. Moon, y H.R. Kim, Biochem Biophys Res Común, 2001. 282(3), 697-700). PDGF se encuentra en altas concentraciones en plaquetas y es un potente quimioatrayente para fibroblasto, células de músculo liso, neutrófilos y macrófagos. Además de su rol en la curación de heridas el PDGF ayuda a mantener la homeostasis vascular. Durante el desarrollo de nuevos vasos sanguíneos, el PDGF alista perícitos y células de músculo liso que son necesarias para la integridad estructural de los vasos. Se considera que el PDGF desempeña un rol similar durante la neovascularización de tumor. Como parte de su rol en la angiogensis, el PDGF controla la presión del fluido intersticial, regula la permeabilidad de los vasos a través de su regulación de la interacción entre las células de tejido conectivo y la matriz extracelular. Inhibir la actividad de PDGFR puede reducir la presión intersticial y facilitar el influjo de citotóxicos dentro de los tumores mejoró la eficacia anti-tumoral de esos agentes (Piedras, K., et al, Cáncer Res. 2002, 62 (19), 5476-84; Piedras, K., et al, Cáncer Res, 2001. 61 (7), 2929-34). PDGF puede promover el crecimiento tumoral a través de la estimulación paracrina o autocrina de los receptores de PDGFR en células estromales o células tumorales directamente, o a través de la amplificación del recepto o la activación del recepto mediante recombinación. EL PDGF sobre expresado puede transformar las células de melanoma humano y queratinocitos (Forsberg, K., et al. Proc Nati Acad SciUSA., 1993.90 (2), 393-7; Skobe, M. y N. E. Fusenig, Proc Nati Acad Sci USA, 1998. 95 (3), 1050-5), dos tipos de célula que no expresan los receptores de PDGF, presumiblemente po el efecto directo de PDGF en la formación de estroma y la inducción de angiogensis. Esta estimulación paracrina del estroma de tumo también se observa en los carcinomas del colon, pulmón, seno y próstata (Bhardwaj, B., et al. ClinCancer Res, 1996,2 (4), 773-82; Nakanishi, K., et al. Mod Pathol, 1997, 10 (4), 341-7; Sundberg, C, et al. Am J Patlaol, 1997, 151 (2), 479-92; Lindmark, G., et al. Lab Invest, 1993,69 (6), 682-9; Vignaud, J. M., et al, Cáncer Res, 1994,54 (20), 5455-63) en donde los tumores expresan el PDGF, pero no el receptor. La estimulación autocrina del crecimiento de célula tumoral, cuyo una gran fracción de tumores analizados expresan tanto el ligando PDGF como el receptor, se ha reportado en glioblastomas (Fleming, T. P., et al. Cáncer Res, 1992,52 (16), 4550-3), sarcomas de tejido blando (Wang, J., M. D. Coltrera, y A. M. Gown, Cáncer Res, 1994,54 (2), 560-4) y cánceres del ovario (Henriksen, R., et al.Cancer Res, 1993 j 53 (19),4550-4), próstata (Fudge, K., C. Y. Wang, y M. E. Stearns, Mod Pathol, 1994,7 (5), 549-54), páncreas (Fuña, K., et al. Cáncer Res, 1990,50 (3), 748-53) y pulmón (Antoniades, H. N., et al., Proc Nati Acad Sci US. A, 1992, 89 (9), 3942-6). La activación independiente de ligando del recepto se encuentra en un meno grado aunque se ha reportado en leucemia mielomonocítica crónica (CMML) en donde un evento de transubicación cromosómica forma una proteína de fusión entre el facto de transcripción TEL similar-Ets y el recepto de PDGF. Además, las mutaciones de activación en PDGFR se han encontrado en tumores estromales gastrointestinales en los cuales no está involucrada la activación c-Kit (Heinrich; M. C, et al., Science, 2003,9, 9). Los inhibidores de PDGFR interferirán con el desarrollo estromal del tumo e inhibirán el crecimiento y la metástasis del tumo sin efectos colaterales indebidos. Factores adicionales como VEGF y FGF, secretados po células estromales en respuesta al PDGF secretado po el tumor, desempeñan roles clave en la formación estromal, la angiogensis y la progresión del tumor. Otro regulado importante de la angiogensis y la vasculogenesis tanto en el desarrollo embrional como en algunas enfermedades angiogénico-dependientes es el facto de crecimiento endotelial (VEGF; también llamado facto de permeabilidad vascular, VPF). VEGF representa una familia de isoformas de mitógenos que existen en formas homodiméricas debido al empalme ARN alternativo. Las isoformas VEGF son altamente específicas para las células endoteliales vasculares (para revisiones, véase: Farrara et al. Endocr. Rev. 1992, 13, 18; Neufield et al. FASEB J. 1999,13, 9). La expresión VEGF es inducida por hipoxia (Shweiki et al. Nature 1992, 359, 843), así como po una variedad de citoquinas y factores de crecimiento, tales como interleuquina-l, interleuquina-6, facto de crecimiento epidérmico y facto de crecimiento de transformación. Hasta ahora, los miembros de la familia VEGF y VEGF han sido reportados para enlazarse a uno o más de las tres tirosin quinasas de recepto de transmembrana (Mustonen et al. J. Cell Biol., 1995,129, 895), VEGF receptor-1 (también conocido como flt-1 (tirosin quinasa- 1 similar a aletas)), VEGFR-2 (también conocido como dominio de inserto de quinasa que contiene recepto (KDR); el análogo de murina de KDR es conocido como quinasa-1 de hígado fetal (floc-1)), y VEGFR-3 (también conocido como flt-4). Se ha demostrado que KDR y flt-1 tienen diferentes propiedades de transducción de señal (Waltenberger et al.J. Biol. Chem. 1994, 269, 26988); Park et al. Oncogen 1995, 10, 135). Po lo tanto, KDR experimenta fuerte fosforilación de tirosina dependiente de ligando en las células intactas, en tanto que flt-1 exhibe una respuesta débil. Por lo tanto, el enlace a KDR es un requerimiento crítico para la inducción de todo el espectro de respuestas biológicas mediadas po VEGF. In vivo, VEGF desempeña un rol central en la vasculogensis, e induce la angiogensis y la permeabilización de los vasos sanguíneos. La expresión de VEGF desregulada contribuye al desarrollo de un número de enfermedades que están caracterizadas po la angiogensis anormal y/o procesos de hiperpermeabilidad. La regulación la cascada de señal mediada po VEGF proporcionará po lo tanto un modo útil para el control de la angiogensis anormal y/o los procesos de hiperpermeabilidad. La angiogensis es considerada como un requisito previo absoluto para el crecimiento de tumores de más de aproximadamente 1-2 mm. El oxígeno y los nutrientes pueden ser suministrados a las células en tumores menores a este límite a través de difusión. Sin embargo, cada tumo es dependiente de la angiogensis para el crecimiento continuo después de que ha alcanzado un cierto tamaño. Las células tumorigénicas dentro de las regiones hipóxicas de los tumores responden mediante estimulación de la producción de VEGF, la cual inicia la activación de las células endotelíales inactivas para estimular la formación de nuevos vasos sanguíneos. (Shweiki et al. Proc. Nat'l. Acad. Sci., 1995, 92, 768). Además, la producción de VEGF en regiones de tumo no hay angiogensis puede proceder a través de la trayectoria de transducción de señal ras (Grugel et al. J. Biol.Chem., 1995,270, 25915; Rak et al.Cancer Res. 1995, 55, 4575). Los estudios de hibridación ¡n situ han demostrado que VEGF ARNm es fuertemente sobreregulado en una amplia variedad de tumores humanos, incluyendo pulmonar (Mattern et al. Br.J. Cáncer 1996, 73, 931), de tiroide (Viglietto et al.Oncogen 1995, 11 , 1569), de seno (Brown et al. Human Patrol. 1995, 26, 86), tracto gastrointestinal (Brown et al. Cáncer Res. 1993, 53, 4727; Suzuki et al.Cancer Res. 1996, 56, 3004), de riñon y vejiga (Brown et al.Am. J Pathol. 1993,1431,1255), de ovario (Olson et al. Cáncer Res. 1994, 54,1255), y cervical (Guidi et al.J. Nat'l Canceritist. 1995,87, 12137) carcinomas, así como angiosacroma (Hashimoto et al. Lab. Invest. 1995,73, 859) y varios tumores intracraneales severos (Píate et al. Nature1992, 359, 845; Phillips et al. Int. J. Oncol. 1993,2, 913; Berkman et al.J. Clin. Invest., 1993, 91 ; 153). Se ha demostrado que la neutralización de anticuerpos monoclonales para KDR es eficaz en el bloqueo de la angiogensis de tumo (Kim et al.

Nature 1993, 362, 841; Rockwell et al. Mol. Cell. Differ. 1995, 3, 315). La sobreexpresión de VEGF, po ejemplo bajo condiciones de hipoxia extrema, puede conducir a la angiogensis intraocular, resultó en hiperproliferación de vasos sanguíneos, conduciendo finalmente a la ceguera. Dicha cascada de eventos se hay observado para un número de retinopatias, incluyendo retinopatía diabética, oclusión de vena retinal isquémica, y retinopatía de premadurez (Aiello et al. New Engl. J. Med. 1994,331 , 1480; Peer et al. Lab. Invest. 1995, 72,638), y degeneración macular relacionada con la edad (AMD; véase, López et al. Invest.Opththal 7 nol. Vis. Sci. 1996, 37, 855). En la artritis reumatoide (RA), el crecimiento interno de pannus vascular puede ser mediado po la producción de factores angiogénicos. Los niveles de VEGF inmunoreactivo son elevados en el fluido sinovial de los pacientes con RA, en tanto que los niveles de VEGF fueron bajos en el fluido sinovial de pacientes con otras formas de artritis con enfermedad articular degenerativa (Koch et al.J. Immunol. 1994, 152, 4149). El inhibido de angiogensis AGM-170 ha demostrado evitar la neovascularización de la articulación en el modelo de artritis de colágeno en rata (Peacocketal. J. Exper. Med. 1992, 175, 1135). Se ha demostrado también que la expresión incrementada de VEGF en piel psoriática, así como en padecimientos bulosos asociados con formación de ampolla subepidérmica, tales como penfogoidea bulosa, eritema multiforme, y dermatitis herpetiformis (Brown et al.J. Invest. Der7natol. 1995, 104, 744).

Los factores de crecimiento endotelial vascular (VEGF, VEGF-C, VEGF-D) y sus receptores (VEGFR2, VEGFR3) no solamente son reguladores clave de la angiogensis de tumor, sino también la linfangiogensis. VEGF, VEGF-C y VEGF-D son expresados en la mayoría de los tumores, principalmente durante los períodos de crecimiento del tumo y, con frecuencia en niveles sustancialmente incrementados. La expresión de VEGF es estimulada po hipoxia, citocinas, oncógenos tales como ras, o mediante inactivación de genes supresores de tumo (McMahon, G. Oncologist 2000,5 (Suppl. 1), 3-10; McDonald, N. Q.; Hendrickson, W. A.Cell 1993, 73,421-424) Las actividades biológicas de los VEGFs son mediados a través del enlace a sus receptores. VEGFR3 (también llamado flt-4) es expresado predominantemente en el endotelio linfático en tejido de adulto normales. La función de VEGFR3 es necesaria para la formación de nuevos vasos linfáticos, aunque no para el mantenimiento de los vasos linfáticos pre-existentes. VEGFR3 también es sobre regulado en el endotelio de vasos sanguíneos en tumores. Recientemente VEGF-C y VEGF-D, los ligandos para VEGFR3, han sido identificados como reguladores de linfangiogensis en mamíferos. La linfangiogensis inducida po factores linfangiogénicos asociados po tumo podría promover el crecimiento de los nuevos vasos dentro del tumor, proporcionó a las células de tumo acceso a la circulación sistémica. Las células Las células invaden los vasos linfáticos podría encontrar su recorrido dentro del flujo sanguíneo vía el ducto torácico. Los estudios de expresión de tumo han permitido una comparación directa de la expresión VEGF-C, VEGF-D y VEGFR3 con factores clinicopatológicos que se refieren directamente a la habilidad de los tumores primarios para dispersarse (po ejemplo, involucramiento de nodo linfático, invasión linfática, metástasis secundarias, y supervivencia libre de enfermedad). En muchos casos, esos estudios demuestran una correlación estadística entre la expresión de factores linfangiogenicos y la habilidad de un tumo sólido primario para metastasizarse (Skobe, M. et al. Nature Med. 2001 ,7 (2), 192-198; Stacker, S. A. et al. Nature Med. 2001 , 7 (2), 186-191 ; Makinen, T. et al. Nature Med. 2001 , 7 (2), 199-205; Myriota, S. J. et al. EMBO J. 2001 , 20 (4), 672- 82; Karpanen, T. et al. Cáncer Res. 2001, 61 (5), 1786-90; Kubo, H. et al. Blood 2000, 96 (2), 546-53). La hipoxia parece ser un estímulo importante para la producción de VEGF en células malignas. La activación de p38 MAP quinasa es requerida para la inducción de VEGF de las células de tumo en respuesta a la hipoxia (Blaschke, F. et al.Brochent. Biophys. Res. Commun. 2002,296, 890-896; Shemirani, B. et al. Oral Oncology 2002, 38, 251-257). Además de su participación en la angiogensis a través de la regulación de la secreción de VEGF, p38 MAP quinasa promueve la invasión de célula maligna, y la migración de diferentes tipos de tumo a través de la regulación de la actividad de colagenasa y la expresión del activado de plasminogen de uroquinasa (Laferriere, J. et al.J. Biol. Chem. 2001 , 276, 33762-33772; Westermarck, J. et al. Cáncer Res. 2000,60, 7156-7162; Huang, S. et al.J Biol. Chem. 2000,275, 12266-12272; Simón, C. et al. Exp. Cell Res. 2001 ,271 , 344-355). Po lo tanto, se espera que la inhibición de p38 quinasa impacte el crecimiento del tumo al interferir con las cascadas de señalización asociadas tanto con la angiogensis como con la invasión de célula maligna. Las diarilureas son una clase de inhibidores de serina-treonin quinasa así como inhibidores de tirosin quinasa bien conocidos en la técnica. Las siguientes publicaciones ilustran su utilidad como ingrediente activo en composiciones farmacéuticas para el tratamiento de cáncer, alteraciones de la angiogensis, y padecimientos inflamatorios: Redman et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2001 , 11 , 9-12. Smith et al., Bioorg Med. Chem. Lett. 2001 , 11 , 2775-2778. Dumas et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2000,10, 2047-2050. Dumas et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2000, 10, 2051-2054.

Ranges et al., Book of Abstracts, 220th ACS National Meeting, Washitzgton, DC.MM, MEDÍ 149. Dumas et al., Bioorg.Med. Chem. Lett. 2002, 12, 1559-1562. Lowinger et al. , Cliri. Cáncer Res. 2000, 6 (suppl.), 335. Lyons et al, Endocr.-Relat Cáncer 2001 ,8, 219-225. Riedl et al, Book of Abstracts, 92"d AA. CR Meeting, New Orleans, LA, USA, abstract 4956. Khire et al, Bookof Abstracts, 93rdAACR Meeting, San Francisco, CA, USA, abstract 4211. Lowinger et al., CMPharna. Design 2002, 8, 99-110. Regan et al, J. Met Chem. 2002, 45, 2994-3008. Pargellis etal., NatureStmct. Biol. 2002, 9 (4), 268-272. Cárter et al., Book of Abstracts, 92nd AACR Meeting, New Orleans, LA, USA, abstract 4954. Vincent et al., Book of Abstracts, 38th ASCO Meeting, Orlando, FL, USA, abstract 1900. Hilger et al., Book of Abstracts, 38th ASCO Meeting, Orlando, FL, USA, abstract 1916. Moore et al., Book of Abstracts, 38th ASCO Meeting, Orlando, FL, USA, abstract 1816. Strumberg et al., Book of Abstracts, 38th ASCO Meeting, Orlando, FL, USA, abstract 121. Madwed JB: Book of Abstracts, Protein Kinases : Novel Target Identification y Validation for Therapeutic Development, San Diego, CA, USA, March 2002. Roberts et al., Book of Abstracts, 38th ASCO Meeting, Orlando, FL, USA, abstract 473. Tolcher et al., Book of Abstracts, 38th ASCO Meeting, Orlando, FL, USA, abstract 334. Karp et al., Book of Abstracts, 38th AACR Meeting, San Francisco, CA, USA, abstract 2753.

Breve Descripción de los Dibujos Figura 1. La determinación cualitativa consistió en determinar la intensidad de tinción, la identificación de las células de tinción positiva y los compartimientos intracelulares involucrados en la tinción, y la evaluación de la calidad de portaobjeto general. Se realizaron evaluaciones separadas en las células de tumo y el estroma de célula de tumor. La intensidad de tinción fue graduada en base a la siguiente escala: Negativa, (equivocada), 1+ (débil), 2+ (moderada), 3+ (fuerte), 4+ (intensa). La intensidad de tinción fue determinada mediante la evaluación de la muestra completa. La evaluación semi-cuantitativa de la expresión de antígeno de objetivo se condujo utilizando un sistema de graduación en base al porcentaje de células a través de toda la muestra que expresa cada antígeno de objetivo como sigue: 0-5% con expresión de antígeno de objetivo positiva = < 5%; 6-25% = 1er cuartil (1Q); 26-50% = 2do cuartíl (2Q); 51-75% = 3er cuartil (3Q); 76-100% = 4to cuartil (4Q). Fig. 2. Tinción Inmunohistoquímica para fosfo-ERK de Biopsias de Melanoma Humano pre- y post-tratamiento.

Descripción de la invención La presente invención proporciona métodos para tratar, aliviar, prevenir, modular, etc., condiciones y enfermedades en seres humanos y otros mamíferos que están asociadas con trayectorias de transducción de señal que comprenden, pero no están limitadas a, raf, VEGFR, PDGFR, p38, y/o FLT-3. Los métodos preferidos de la presente invención proporcionan la modulación de las enfermedades y condiciones asociadas con raf, VEGFR2, VEGFR3, y/o PDGFR-beta. Los métodos pueden comprender po ejemplo, administrar un compuesto de aril urea como se describe a continuación, sales farmacéuticamenmte aceptables del mismo compuesto, derivados de las mismas, etc. La presente invención proporciona también composiciones y métodos para identificar condiciones y enfermedades que pueden ser moduladas con compuestos de la presente invención. Estos métodos facilitan la selección de sujetos que pueden ser tratados de manera eficiente con compuestos de la presente invención. De manera adicional, la invención proporciona métodos para monitorear sujetos a los que se ha administrado un compuesto de la presente invención. Esto incluye, por ejemplo, determinar la eficacia de los compuestos de la presente invención en el tratamiento de varias enfermedades y condiciones, y para determinar los regímenes de tratamiento. Los compuestos de aril urea empleados en los métodos de esta invención comprenden compuestos de la Fórmula l, sales farmacéuticamente aceptables de los mismos compuestos, esteres de los mismos, estereoisómeros de los mismos (tanto aislados como en mezclas), profármacos de los mismos, y cualesquiera derivados activos de los mismos, que son referidos de manera colectiva en la presente como los "compuestos de la invención" y similares. La Fórmula I es como sigue: B-NH-C(O)-NH-L-M-L1-(Q)«(l) en donde B es (i) fenilo, opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados d emanera independiente a partir del grupo que comrpende R1, OR1, NR1R2, S(O)qR1, SO2NR1R2, NR1SO2R2, C(O)R1, C(O)OR1, C(O)NR1R2, NR1C(O)R2, NR1C(O)OR2, halógeno, ciano; y nitro; (ii) naftilo, opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R1, OR1, NR1R2, S(0)qR1, S02NR1R2, NR S02R2, C(0)R1, C(0)OR1, C(0)NR1R2, NR1C(0)R2, NR1C(0)OR2, halógeno, ciano, y nitro; (iii) un grupo heteroarilo monocíclico de 5 o 6 miembros, que tiene de 1-3 heteroátomos seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende O, N y S, opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R , OR1, NR1R2, S(0)qR , SO2NR R2, NR1S02R2, 0(0)^, C(0)OR1, C(0)NR1R2, NR1C(O)R2, NR1C(O)OR2, halógeno, ciano, oxo, y nitro; o (iv) un grupo heteroarilo bicíclico de 8 a 10 miembros en el cual el primer anillo está enlazado al NH de la figura 1 y contiene 1-3 heteroátomo seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende O, N, y S, y el segundo anillo está fusionado al primer anillo utilizo 3 a 4 átomos de carbono. El grupo heteroarilo bicíclico está opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R1, OR1, NR1R2, S(O)qR1, SO2NR1R2, NR1SO2R2, C(0)R1, C(0)OR1, C(0)NR1R2, NR1C(0)R2, NR1C(0)OR2, halógeno, ciano, oxo, y nitro. L es (i) fenilo, opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende C1-C5 alquilo lineal o ramificado, C1-C5 haloalquilo lineal o ramificado, C1-C2 alcoxy, hidroxi, amino, C1-C3 alquilamino, C1-C6 dialquilamino, halógeno, ciano, y nitro; (¡i) naftilo, opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende C1-C5 alquilo lineal o ramificado, C1-C5 haloalquilo lineal o ramificado, C1-C3 alcoxi, hidroxi, amino, C1-C3 alquilamino, C1-C6 dialquilamino, halógeno, ciano, y nitro; (iii) un grupo heteroarilo monocíclico de 5 o 6 miembros, que tiene 1-3 heteroátomos seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende O, N y S, opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende C1-C5 alquilo lineal o ramificado, C1-C5 haloalquilo lineal o ramificado, CI-C3 alcoxi, hidroxi, amino, C1-C3 alquilamino, C1-C6 dialquilamino, halógeno, ciano, y nitro; o (iv) un grupo heteroarilo bicíclico de 8 a 10 miembros que tiene 1-6 heteroátomos seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende O, N y S, opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende C1-C5 alquilo o ramificado, C1-C5 haloalquilo lineal o ramificado, CI-C3 alcoxi, hidroxi, amino, C1-C3 alquilamino, C1-C6 dialquilamino, halógeno, ciano, y nitro. M es (a) -{CH2)m-0-{CH2 -, (b) -(CH2)m-(CH2) , (c)- (CH2)m-C(O)-(CH2) , (d)- (CH-^-NR^CH^-, (e) -(CH2)m-NR3C(O)-(CH2) , (f) -(CH2)m-S-(CH2) , (g) -(CH2)m-C(0)NR3-(CH2) , ( ) -(CH2)m-CF2-(CH2) , (i) -(CH2)m,-CCI2-(CH2) , G) -(CH2)m-CHF-(CH2y, (k)- (CH2)m-(CH(OH)- (CH2),-; (I) -(CH2)m-C=C-(CH2) ; (m) -(CH2)m-C=C-(CH2)r; (n) -(CH2)m-CR4R5-(CH2) ; u (o) un enlace simple, en donde m y I son 0; en donde las variables m y I son enteros independientemente seleccionados desde 0-4, L' es (i) fenilo, opcionalmente sustituido con 1-2 sustituyentes adicionales diferentes de Q, seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R1, OR1, NR1R2, S(O)qR\ SO2NR1R2, NR SO2R2, NR1C(O)R2, NR1C(O)OR2, halógeno, ciano y nitro; (ii) naftilo, opcionalmente sustituido con 1-2 sustituyentes adicionales diferentes de Q, seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R1, OR1, NR1R2, S(O)qR\ SO2NR1R2, NR S02R2, NR1C(0)R2, NR1C(0)OR2, halógeno, ciano y nitro; (iii) un grupo heteroarilo monocíclico de 5 y 6 miembros, que tiene 1-3 heteroátomos seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende O, N y S, opcionalmente sustituido con 1-2 sustituyentes adicionales diferentes de Q, seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R1, OR1, NR1R2, S(O)qR1, SO2NR1R2, NR1SO2R2, NR1C(O)R2, NR1C(O)OR2, halógeno, ciano y nitro y también óxidos (po ejemplo = 0, -0' o -OH); (iv) un grupo heteroarilo bicíclico de 8 a 10 miembros, que tiene 1-6 heteroátomos seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende O, N y S, opcionalmente sustituido con 1-2 sustituyentes adicionales diferentes de Q, seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R1, OR1, NR1R2, S(O)qR1, SO2NR1R2, NR1S02R2, NR1C(0)R2, NR1C(0)OR2, halógeno, ciano y nitro y también óxidos (po ejemplo = O, -O- o -OH). (v) una porción carbocíclica monocíclica C3-C6saturada y parcialmente saturada opcionalmente sustituida con 1-2 sustituyentes adicionales diferentes de Q, seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R1, OR1, NR1R2, S(0)qR , S02NR1R2, NR1S02R2, NR1C(O)R2, NR1C(0)OR2, halógeno, ciano y, nitro; (vi) una porción carbocíclica bicíclica C8-C10 saturada y parcialmente saturada, opcionalmente sustituida con 1-2 sustituyentes adicionales diferentes de Q, seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R , OR1, NR R2, S(O)qR1, S02NR R2, NR1S02R2, NR1C(0)R2, NR1C(0)OR2, halógeno, ciano y, nitro; (vii) una porción heterocíclica monocíclica saturada y parcialmente saturada de 5 y 6 miembros, que tiene 1-3 heteroátomos seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende O, N y S, opcionalmente sustituido con 1-2 sustituyentes adicionales diferentes de Q, seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R1, OR1, NR1R2, S(O)qR1 , SO2NR1R2, NR1SO2R2N, R1C(O)R2, NR1C(O)OR2, halógeno, ciano y nitro, y también óxidos (po ejemplo = O, -O- o -OH); o (viii) una porción heterocíclica bicíclica saturada y parcialmente saturada de 8 a 10 miembros, que tiene 1-6 heteroátomos seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende O, N y S, opcionalmente sustituido con 1-2 sustituyentes adicionales diferentes de Q, seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R1, OR1, NR1R2, S(0)qR1, S02NR1R2, NR1SO2R2, NR1C(O)R2, NR1C(0)OR2, halógeno, ciano y nitro, y también óxidos (po ejemplo = O, -O- o -OH); cada Q es independientemente C(O)R4, C(O)OR4 y C(O) NR4R5; en donde cada R1-R5 es seleccionado de manera independiente a partir del grupo que comprende: (a) hidrógeno, (b) C1-C5 alquilo lineal, ramificado, o cíclico, (c) fenilo, (d) C1-C3 alquil-fenil, en donde la porción alquilo es opcionalmente sustituida con halógeno hasta per-halo; (e) hasta per-halo sustituido C1-C5 alquilo lineal o ramificado; (f) -(CH2)q-X, en donde X es un anillo heterocíclico monocícclico de 5 o 6 miembros, que contiene 1-4 átomos seleccionados a partir de oxígeno, nitrógeno y azufre, el cual es saturado, parcialmente saturado o aromático, o un heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros que tiene 1-4 heteroátomos seleccionados a partir del grupo que comprende O, N y S; y en donde la porción alquilo es opcionalmente sustituida con halógeno hasta per-halo, en donde cada R1-R5, diferente de per-halo sustituido C1-C5 alquilo lineal o ramificado, es opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende C1-C5 alquilo lineal o ramificado, hasta perhalo sustituido C1-C5 alquilo lineal o ramificado, C1-C3 alcoxi, hidroxi, carboxi, amino, C1-C3 alquilamino, CI-C6 dialquilamino, halógeno, ciano, y nitro; en donde la variable p es un entero seleccionado a partir de 0, 1 , o 2 y la variable q es un entero seleccionado a partir de 0, 1 , 2, 3, o 4. En la fórmula I, los grupos hetarilo adecuados incluyen, pero no se limitan a, sistemas de anillo de 5-10 miembros que contienen anillos monocíclicos y bicíclicos, po lo menos uno de los cuales es aromático, en el cual uno o más, po ejemplo, 1-4 átomos de carbono en uno o más de los anillos puede ser reemplazado po átomos de oxígeno, nitrógeno o azufre. En sistemas de anillo bicíclico, cada anillo puede tener desde 3-7 átomos. "Heteroarilo monocíclico" representa un anillo monocíclico aromático que tiene 5 a 6 átomos de anillo, po lo menos uno de los cuales es un hetera átomo seleccionado a partir de N, O y S, los átomos restantes que son carbono. Cuando más de un hetera átomo está presente en la porción, son seleccionados independientemente a partir del otro(s) de manera que pueden ser iguales o diferentes. Las porciones heteroarilo monocíclicas incluyen, pero no se limitan a pirrol, furano, tiofeno, imidazol, pirazol, tiazol, oxazol, isoxazol, isotiazol, tríazol, tetrazol, tiadiazol, oxadiazol, piridina, pirimidina, piridazina, pirazina, y triazina. Heteroarilo bicíclico representa porciones bicíclicas fusionadas en donde uno de los anillos es seleccionado a partir de los anillos de heteroarilo monocíclicos antes descritos y el segundo anillo es benceno u otro anillo heteroarilo monocíclico descrito con anterioridad. Cuando ambos anillos en la porción bicíclica son anillos de heteroarilo, pueden ser iguales o diferentes, en tanto que sean químicamente accesibles a través de medios conocidos en la técnica. Los anillos heteroarilo bicíclicos incluyen estructuras aromáticas bicíclicas fusionadas 5-5, 5-6, o 6-6 sintéticamente accesibles que incluyen, po ejemplo pero sin limitación, benzoxazol (fenil y oxazol fusionados), quinolina (fenilo y piridina fusionados), imidazopirimidina (imidazol y pirimidina fusionados), y similares. La frase "anillo heterocíclico de 5 o 6 miembros, que contiene po lo menos un átomo seleccionado a partir de oxígeno, nitrógeno y azufre, que está saturado, parcialmente saturado o aromático" incluye, sin limitación, tetrahidropirano, tetrahidrofurano, 1 ,3-dioxolano, 1 ,4-dioxano, morfolina, tiomorfolina, piperazina, piperidina, piperidinona, tetrahidropirimidona, sulfuro de pentametileno, sulfuro de tetrametileno, dihidropirano, dihidrofurano, dihidrotiofeno, pirrol, furano, tiofeno, imidazol, pirazol, tiazol, oxazol, isoxazol, isotiazol, triazol, piridina, pirimidina, piridazina, pirazina, triazina, y similares. El término "CI-C3 alquil-fenil" incluye, sin limitación, 3-fenil-propil, 2-fenil-1-me.il-etil. Ejemplos sustituidos incluyen 2-[2-clorofenil] etil, 3,4-dimetilfenil-metil, y similares. Los grupos heteroarilo sustituido y no sustituidos para los compuestos de esta invención, tales como aquellos para B, L y L' de la fórmula I, incluyen, aunque no se limitan a los siguientes grupos heteroarilo monocíclicos: 2- o 3-furilo, 2- o 3-tienilo, 2- o 4-triazinilo, 1-, 2- o 3-pirrolilo, 1-, 2-, 4- o 5-imidazolilo, 1-, 3-, 4- o 5-pirazolilo, 2-,4- o 5-oxazolilo, 3-, 4- o 5-isoxazolilo, 2-, 4- o 5-tiazolilo, 3-, 4- o 5-¡sotiazolilo, 2-, 3- o 4-piridilo, 2-, 4-, 5- o 6-pirimidinilo, 1 , 2, 3-triazol-1-,-4- o -5-ilo, 1 , 2, 4-triazol-1-,-3- o -5-ilo, 1- o 5-tetrazolilo, 1 , 2,3-oxadiazol-4- o -5-ilo, 1 , 2,4-oxadiazol-3- o -5-ilo, 1 , 3,4-tiadiazol-2- o -5-ilo, 1 ,2,4-oxadiazol-3- o -5-ilo, 1 , 3, 4-tiadiazol-2- o -5-ilo, 1, 3, 4-tiadiazol-3- o -5-ilo, 1 , 3, 4-tiadiazol-4- o -5-ilo, 2-, 3-, 4-, 5- o 6-2H.tiopiranilo, 2-, 3- o 4-4H-tiopiranilo, 3- o 4-piridazinilo, pirazinilo, y los siguientes grupos heterocíclicos bicíclicos: benzofurilo, benzotienilo, indolilo, benzimidazolilo, benzopirazolilo, benzoxazolilo, benzisoxazolilo, benzotiazolilo, benzisotiazolilo, benz-1 ,3-oxadiazolilo, quinoiinílo, isoquinolinilo, quinazolinilo, tetrahidroquinolinilo, tetrahidroisoquinolinilo, dihidrobenzofurilo, pirazolo[3,4-b]pirimidinilo, purinilo, benzodiazina, pteridinilo, pirrolo[2,3-bjpiridinilo, pirazolo[3,4-b]piridinilo, oxazo[4,5-b]piridinilo, imidazo[4,5-b]piridinilo, ciclopentenpiridina, ciclohexanpiridina, ciclopentanpirimidina, ciclohexanpirimidina, ciclcopentanpirazina, ciclohexanpirazina, ciclopentanpiridiazina, ciclohexanpiridazina, ciclopentanimidazol, ciclohexanimidazol, ciclopentantiofeno y ciclohexantiofeno. Los grupos arilo adecuados que no contienen heteroátomos incluyen, por ejemplo, fenilo y 1- y 2-naftilo, tetrahidronaftilo, indanilo, indenilo, benzociclobutanilo, benzocicloheptanílo y benzocicloheptenilo. Los grupos alquilo lineales y porciones alquilo adecuadas de los grupos, por ejemplo, alcoxi, alquilfenilo y alquilheteroarilo etc. incluyen metilo, etilo, propilo, butilo, pentilo, etc. Los grupos alquilo ramificados adecuados incluyen todos los isómeros ramificados tales como isopropilo, isobutilo, sec-butilo, ter-butilo, etc. El término "alcoxi" representa un grupo alxoxi de cadena recta o ramificada que tiene átomos de carbono saturados que pueden ser lineales o ramificados con ramificación simple o múltiple, e incluye grupos tales como metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi, y similares, incluye también grupos halogenados tales como 2,2-dicloroetoxi, trifluorometoxi, y similares. C1-C3 alquilamino representa metilamino, etilamino, propilamino o isopropilamino. Ejemplos del grupo C1-C6 dialquilamino incluyen aunque no están limitados a dietilamino, etil-isopropilamino, medios de metilamino, metil-isobutilamino, dihexilamino. Los halógenos adecuados incluyen F, Cl, Br, y/o I, desde uno hasta per-sustitución (es decir, todos los átomos H en un grupo reemplazados por un átomo de halógeno) que es posible cuando un grupo alquilo es sustituido por halógeno, sustitución mezclada de tipos de átomos de halógeno que también es posible en una porción determinada. Los halógenos preferidos son Cl, Br y F. El término "hasta perhalo alquilo sustituido lineal o ramificado", incluye grupos alquilo que tienen un alquil hidrógeno reemplazado con halógeno, grupos alquilo en donde todos los hidrógenos son reemplazados con halógeno, grupos alquilo en donde más de uno pero menos de todos los hidrógenos son reemplazados por halógeno y grupos alquilo que tienen alquil hidrógenos reemplazados por halógeno y otros sustituyentes. Los ejemplos incluyen clorometilo, diclorometilo, triclorometilo, fluorometilo, difiuorometilo, trifluorometilo, y similares. El término "cicloalquilo", como se usa en la presente, se refiere a estructuras cíclicas que tienen 3-8 miembros en el anillo tal como ciclopropilo, ciclobutilo y ciclopentilo y estructuras cíclicas que tienen 3-8 miembros con sustituyentes alquilos de manera que, "3 cicloalquilo" incluye grupos ciclopropilo sustituidos con metilo.

El término "porciones carbocíclicas saturadas" define solamente la estructura cíclica, es decir ciclopentilo, ciciohexilo, etc. Cualquier sustitución de alquilo en esas estructuras cíclicas está específicamente identificada. Las porciones carbocíclicas monocíclicas y bicíclicas saturadas incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciciohexilo, y decahidronaftaleno. Las porciones carbocíclicas monocíclicas y. bicíclicas parcialmente saturadas incluyen ciclopentenilo, ciclohexenilo, ciclohexadienilo y tetrahidronaftaleno. Las porciones heterocíclicas monocíclicas y bicíclicas saturadas incluyen tetrahidropiranilo, tetrahidrofuranoilo, 1 ,3-dioxolano, 1 ,4-dioxanilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piperazinilo, piperidinilo, piperidinonilo, tetrahidropirimidonilo, sulfuro de pentametileno y sulfuro de tetrametileno. Las porciones heterocíclicas monocíclicas y bicíclicas parcialmente saturadas incluyen dihidropiranilo, dihidrofuranoilo, dihidrotienilo, dihidropiperidinilo, y dihidropirimidonilo. Cuando cualquier porción es "sustituida", puede tener hasta el número más elevado de los sustituyentes indicados, y cada sustituyente puede estar ubicado en cualquier posición disponible en la porción y puede ser unido a través de cualquier átomo disponible en el sustituyente. "Cualquier posición disponible" significa cualquier posición en la porción que es químicamente accesible a través de medios conocidos en la técnica o enseñados en la presente y que no crean una molécula indebidamente inestable.

Cuando hay dos o más sustituyentes en cualquier porción, cada sustituyente es definido de manera independiente de cualquier otro sustituyente y puede, en consecuencia. El término "opcionalmente sustituida" significa que la porción así modificada puede ser no sustituida o sustituida con el(los) sustituyente(s) identificado(s). Se comprende que cuando L' es piridina, el término "hidroxi" como un sustituyente de piridina sustituyente incluye 2-, 3-, y 4-hidroxipiridina, aunque también incluye aquellas estructuras referidas en la técnica como 1-oxo-piridina y 1-hidroxi-piridina. Cuando en la presente se utiliza la forma plural de la palabra compuestos, sales, y similares, es tomada para representar también un compuesto o sal individual, o similar. Las estructuras sustituidas de B y L' son de preferencia cada una, independientemente, seleccionadas a partir del grupo que comprende metilo, trifluorometilo, etilo, n-propilo, n-butilo, n-pentilo, isopropilo, ter-butilo, sec-butilo, isobutilo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, metoxi, etoxi, propoxi, Cl, Br y F, ciano, nitro, hidroxi, amino, metilamino, dimetilamino, etilamino y dietilamino. Otros sustituyentes para B y L' incluyen de manera particular: fenilo, piridinilo, pirimidinilo, clorofenilo, diclorofenilo, bromofenilo, dibromofenilo, cloropiridinilo, bromopiridinilo, dicloropiridinilo, dibromopiridinil metilfenilo, metilpiridinil quinolinilo, isoquinolinilo, ¡soindolinilo, pirazinilo, piridazinilo, pirrolinilo, imidazolinilo, tienilo, furilo, isoxazolinilo, ¡sotiazolinilo, benzopiridinilo, benzotiazolilo, C1-C5 acilo; NH(C1-C5 alquilo, fenilo o piridinilo), tales como aminofenilo; N(C1-C5 alquilo)(C1-C5 alquilo, fenilo o piridinilo), tales como dietilamino y dimetil amino; S(O)q(C1-C5 alquilo); such as metanesulfonilo; S(0)qH; S02NH2; S02NH(C1-C5 alquilo); S02N(C1-C5 alquilo)(C1-C5 alquilo); NHSO2(C1-C5 alquilo); N(C1-C3 alquilo) SO2(C1-C5 alquilo); CO(C1 -C6 alquilo o fenilo); C(O)H; C(O)O(C1-C6 alquilo o fenilo), tal como C(O)OCH3, -C(O)OCH2CH3, -C(O)OCH2CH2CH3; C(O)OH; C(O)NH2 (carbamoilo); C(O)NH(C1-C6 alquilo o fenilo), tal como N-metiletil carbamoilo, N-metil carbamoilo, N-etilcarbamoilo, o N-dimetilamino etil carbamoilo; C(O)N(C1-C6 alquilo o fenilo)(CI-C6 alquilo, fenilo o piridinilo), tal como N-dimetilcarbamoilo; C(N(C1-C5 alquilo))(C1-C5 alquilo); NHC(O)(C1-C6 alquilo o fenilo) y N(C1-C5 alquilo,)C(O)(CI-C5 alquilo). Cada uno de los sustituyentes anteriores está opcionalmente halógenoado de manera parcial o total, tal como difluorome.il sulfonilo. Una modalidad de esta invención ¡ncluye la administración de compuestos de esta ¡nvención en donde en la fórmula I, L, B y L' siguen una de las combinaciones siguientes: B = fenilo, L = fenilo y L' es fenilo, piridinilo, quinolinilo, isoquinolinilo o no está presente, B = fenilo, L = piridinilo y L' es fenilo, piridinilo, quinolinilo, isoquinolinilo o no está presente, B = fenilo, L = naftilo y L' is fenilo, piridinilo, quinolinilo, isoquinolinilo o no está presente, B = piridinilo, L = fenilo y U is fenilo, piridinilo, quinolinilo, isoquinolinilo o no está presente, B = piridinilo, L = piridinilo y L' es fenilo, piridinilo, quinolinilo, isoquínolinilo o no está presente, B = piridinilo, L = naftilo y L' es fenilo, piridinilo, quinolinilo, isoquinolinilo o no está presente, B = isoquinolinilo, L = fenilo y L' es fenilo, piridinilo, quinolinilo, isoquinolinilo o no está presente, B = isoquinolinilo, L = piridinilo y L' es fenilo, piridinilo, quinolinilo, isoquinolinilo o no está presente, B = isoquinolinilo, L = naftilo y L1 es fenilo, piridinilo, quinolinilo, isoquinolinilo o no está presente, B = quinolinilo, L = fenilo y L' es fenilo, piridinilo, quinolinilo, isoquinolinilo o no está presente, B = quinolinilo, L = piridinilo y L' es fenilo, piridinilo, quinolinilo, isoquinolinilo o no está presente, B = quinolinilo, L = naftilo y L' es fenilo, piridinilo, quinolinilo, isoquinolinilo o no está presente. La estructura M de la fórmula I es preferiblemente -O-, un enlace simple, -S-, -NH-, N(CH3)-, -NHCH2-, -NC2H4-, -CH2-, -C(O)-, -CH(OH)-, -NHC(0)N(CH3)CH2-, - N(CH3)C(O)N(CH3)CH2-, -CH2C(O)N(CH3)-, -C(O)N(CH3)CH2-, -NHC(O)-, -N(CH3)C(0)-, - C(O)N(CH3)-, -C(O)NH-, -CH20-, -CH2S-, -CH2N(CH3)-, -OCH2-, -CHF-, -CF2-, -CCI2-, -S-CH2-, y -N(CH3)CH2-. Los compuestos de la invención de particular interés incluyen aquellos de la fórmula I en donde L\ L, M y Q están definidos como antes y B es fenilo, opcionalmente sustituido con 1-4 halógeno. Los compuestos de la invención de particular interés también incluyen aquellos de la fórmula I en donde L, L' y Q son como se definieron antes, M es -O- y B es fenilo, opcionalmente sustituido con 1-4 halógeno. Los compuestos de la invención de particular interés también incluyen aquellos de la fórmula I en donde B es fenilo o piridilo, opcionalmente sustituido con 1-6 sustituyentes seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R y halógeno, L' y Q son como se definieron antes, M es -O- y L es fenilo, opcionalmente sustituido con 1-4 halógeno. Los compuestos de la invención de particular interés también incluyen aquellos de la fórmula I en donde B es fenilo, opcionalmente sustituido con 1-6 sustituyentes seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R1 y halógeno, L' y Q son como se definieron antes, M es -O- y L es fenilo, opcionalmente sustituido con 1-4 halógeno. Los compuestos de la invención de particular interés también incluyen aquellos de la fórmula I en donde B es 4-cloro (2-trifluorometil) fenilo, opcionalmente sustituido por el grupo que comprende R y halógeno, L' y Q son como se definieron antes, M es -O- y L es fenilo, opcionalmente sustituido con 1-4 halógeno. Alguien con experiencia ordinaria en la técnica reconocerá que algunos de los compuestos de la Fórmula (I) pueden existir en diferentes formas isoméricas geométricas. Se pretende que todas esas configuraciones (incluyendo enantiómeros y diasterómeros), estén incluidas dentro del alcance de la presente invención. Un número de los compuestos de la Fórmula I poseen centros asimétricos, dependiendo de la ubicación de una naturaleza de varios sustituyentes, y pueden por lo tanto existir en formas racémicas y óptimamente activas así como en la forma de mezclas racémicas o no-racémicas de los mismos, y en la forma de diasterómeros y mezclas diasteroméricas. Los átomos de carbono asimétricos pueden estar presentes en la configuración (R) o (S) o la configuración (R, S). En ciertas instancias, la asimetría puede estar presente también debido a la rotación restringida alrededor de un enlace determinado, por ejemplo, el enlace central que está adyacente a dos anillos aromáticos sustituidos de los compuestos especificados. Todos esos compuestos, incluyendo isómeros cis, isómeros trans, mezclas diasteroméricas, racematos, mezclas no-racémicas de enantiómeros, enantiómeros sustancialmente puros y puros, están considerados para estar dentro del alcance de de los compuestos de esta invención y son referidos de manera colectiva cuando se hace referencia a los compuestos de esta invención. Por lo tanto, los métodos de la presente invención abarcan el uso de cualquier forma racémica aislada u óptimamente activa de los compuestos descritos en la Fórmula I que poseen actividad c-raf, b-raf, p38, VEGFR, PDGFR, y/o FLT-3. Los métodos de separación de mezclas enantioméricas y diasteroméricas son bien conocidos por alguien con experiencia en la técnica. Los isómeros ópticos se pueden obtener mediante resolución de mezclas racémicas de acuerdo con los procesos convencionales, por ejemplo, a través de la formación de sales diasteroisoméricas usando un ácido o base óptimamente activa. Ejemplos de ácidos apropiados son ácido tartárico, diacetiltartárico, dibenzoiltartárico, ditoluoiltartárico y camforsulfónico. Las mezclas de diasteroisómeros pueden ser separadas en sus diasterómeros individuales en base a sus diferencias físico químicas a través de métodos conocidos por aquellos con experiencia en la técnica, por ejemplo, a través de cromatografía o cristalización fraccional. Las bases o ácidos ópticamente activos son liberados a partir de las sales diasteroméricas separadas. Otro proceso para la separación de isómeros ópticos involucra el uso de una columna de cromatografía quiral (por ejemplo, columnas HPLC quirales) seleccionadas de manera óptima para aumentar al máximo la separación de los enantiómeros. Las columnas HPLC quirales adecuadas son fabricadas por Diacel, por ejemplo, Chiracel OD y Chiracel OJ. Los compuestos ópticamente activos de la Fórmula (I) pueden de igual manera obtenerse a través de la utilización de materiales de partida óptimamente activos. La presente invención abarca cualesquiera isómeros o mezclas racémicas separadas, aisladas, puras o parcialmente purificadas de los compuestos de la fórmula I que poseen actividad Raf, VEGFR, PDGFR, p38, y/o FLT-3, y/o una eficacia en la modulación de cualquiera de las enfermedades y/o condiciones mencionadas en la presente. Se entiende que el término estereoisómero abarca diasteroisómeros, enantiómeros, isómeros geométricos, etc. Los compuestos preferidos son aquellos con la configuración absoluta del compuesto de la Fórmula I que produce la actividad biológica más deseable también están incluidos dentro del alcance de la presente invención. La purificación de dichos isómeros y la separación de dichas mezclas isoméricas se puede lograr por medio de técnicas estándar conocidas en la técnica. En la presente "enantiómeros sustancialmente puros" significa que no más de aproximadamente 5% p/p del enantiómero opuesto correspondiente está presente. Las sales farmacéuticamente aceptables de esos compuestos, así como los profármacos comúnmente utilizados de esos compuestos, también están dentro del alcance de la invención. El término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a una sal de adición de ácido orgánico o inorgánico, relativamente no tóxica de un compuesto de la presente invención. Por ejemplo, véase S. M. Berge, et al. "Pharmaceutical Salts", J.

Pharm. Sci., 1977, 66, 1-19. Las sales adecuadas son especialmente las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la fórmula (I) o tales como, sales de adición de ácido orgánico o inorgánico de los compuestos de la Fórmula (I). Las sales de adición de ácido adecuadas incluyen acetato, adipato, alginato, ascorbato, aspartato, benzoato, bencensulfonato, bisulfato, butirato, citrato, camforato, camforsulfonato, cinamato, ciclopentanpropionato, digluconato, dodeciisulfato, etansulfonato, fumarato, glucoheptanoato, glicerofosfato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, hidrocloruro, hidrobromuo, hidroyoduro, 2-hidroxietansulfonato, itaconato, lactato, maleato, mandelato, metansulfonato, 2-naftalensulfonato, nicotinato, nitrato, oxalato, parmoato, pectinato, persulfato, 3-fenilpropionato, picrato, pivalato, propionato, succinato, tartrato, tiocianato, tosilato y undecanoato. Los ácidos inorgánicos adecuados incluyen pero no se limitan a ácidos de halógeno (tales como ácido clorhídrico y ácido bromhídrico), ácido sulfúrico o ácido fosfórico. Los ácidos orgánicos adecuados incluyen pero no se limitan a ácidos carboxílico, fosfónico, sulfónico o sulfámico, con ejemplos que incluyen ácido acético, ácido propiónico, ácido octanóico, ácido decanóico, ácido trifluoroacético, ácido dodecanóico, ácido glicólico, ácido láctico, ácido 2- o 3-hidroxibutírico, ácido ?-aminobutírico (GABA), ácido glucónico, ácido glucosemoncarboxílico, ácido benzoico, ácido salicílico, ácido fenilacético y ácido mandélico, ácido fumárico, ácido succínico, ácido atípico, ácido pimélico, ácido subérico, ácido azeiaico, ácido maléico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido glucárico, ácido galactárico, aminoácidos (tales como ácido glutámico, ácido aspártico, N-metilglicina, ácido acetilaminoacético, N-acetilasparagina o N-acetilcisteína), ácido pirúvico, ácido acetoacético, ácido metansulfónico, ácido trifluoronetansulfónico, ácido 4-toluensulfónico, ácido bencensulfónico, ácido 1-naftalensulfónico, ácido 2-naftalensulfónico, fosfoserina, y ácido 2- o 3-glicerofosfórico. Además, las sales farmacéuticamente aceptables incluyen sales acidas de bases inorgánicas que contienen cationes alcalinos (por ejemplo Li+, Na+ o K+), cationes alcalino tórreos (por ejemplo Mg+2, Ca+2, o Ba+2), el catión de amonio, así como sales acidas de base orgánicas, incluyendo amonio sustituido alifático y aromático, y cationes de amonio cuaternario, tales como aquellos que surgen a partir de la protonación o peralquilación de trietilamina, N,N-dietilamina, N,N-diciclohexilamina, lisina, piridina, N,N-dimetilaminopiridina (DMAP), 1 ,4-diazabiciclo[2.2.2]octano (DABCO), 1,5-diazabiciclo[4.3.0]non-5-eno (DBN), y 1 ,8-diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno (DBU). Las sales de base incluyen sales de metal alcalino tales como sales de potasio y de sodio, sales de metal alcalino terreo tales como sales de calcio y de magnesio, y sales de amonio con bases inorgánicas tales como diciciohexilamina y N-metil-D-glucamina. De manera adicional, los grupos que contienen nitrógeno básico pueden ser cuaternizados con agentes tales como haluros de alquilo inferior tales como cloruros, bromuros y yoduros de metilo, etilo, propilo y butilo, dialquil sulfatos como dimetil, dietil y dibutil sulfato; y diamil sulfatos, haluros de cadena larga tales como cloruros, bromuros y yoduros de decilo, laurilo, miristilo y estearilo, haluros de aralquilo como bromuros de bencilo y fenetilo y otros. Los esteres de compuestos apropiados de esta invención son esteres farmacéuticamente aceptable, bien tolerados tales como esteres de alquilo que incluyen esteres de metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo o pentilo. Pueden utilizarce esteres adicionales tales como fenil-C1-C5-alquilo, aunque se prefiere el éster de metilo.

La formación de profármacos es bien conocida en la técnica a fin de mejorar las propiedades del compuesto padre; dichas propiedades incluyen solubilidad, absorción, bioestabilidad y tiempo de liberación (véase "Pharmaceutical Dosage Form and Drug Delivery Systems" (Sexta edición), editada por Ansel et al., publicada por Williams & Wilkins, páginas 27-29, (1995) la cual está incorporada a la presente mediante referencia). Los profármacos comúnmente utilizados de los compuestos descritos de oxazolil-fenil-2,4-diamino-pirimidina están diseñados para tomar ventaja de las principales reacciones de biotransformación de fármaco y también están considerados dentro del alcance de la invención. Las principales reacciones de biotransformación de fármaco incluyen N-desalquilación, O-desalquilación, hidroxilación alifática, hidroxilación aromática, N-oxidación, S-oxidación, desaminación, reacciones de hidrólisis glucuronidación, sulfatación y acetilación (véase Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics (Novena Edición), editor Molinoff et al., publicada por McGraw-Hill, páginas 11-13, (1996), la cual está incorporada a la presente mediante referencia). La presente invención proporciona compuestos que son capaces de modular una o más trayectorias de transducción de señal que comprenden, pero no se limitan a, raf, VEGFR- 2, VEGFR-3,p38, PDGFR-beta, y/o Flt-3. Raf es una importante molécula de señalización involucrada en la regulación de un número de procesos celulares clave, incluyendo crecimiento celular, supervivencia celular e invasión. Es un miembro de la trayectoria Ras/Raf/MEK/ERK. Esta trayectoria está presente en la mayoría de las células de tumor. VEGFR-2, VEGFR-3, PDGFR-beta, y Flt-3 son moléculas receptoras de transmembrana que, cuando son estimuladas por un ligando apropiado, activa la trayectoria de señalización de célula Ras/Raf/MEK/ERK, que conducen a una cascada de eventos celulares. Cada una de esas moléculas receptoras tiene actividad de tirosin quinasa. Los receptores VEGFR son estimulados por los factores de crecimiento endotelial vascular (VEGF), y son importantes puntos de control en la regulación del desarrollo y función de la célula endotelial. El receptor PDGF-beta regula la proliferación y supervivencia celular en un número de tipos de células, incluyendo, células del mesenterio. Flt-3 es un receptor Para el ligando FL. Es estructuralmente similar a c-kit, y modula el crecimiento de células hematopoiéticas piuripotentes, influyendo en el desarrollo de células-T, células-B, y células dendríticas. Cualquier gen o isoforma de raf, VEGFR-2, VEGFR-3,p38, PDGFR-beta, y/o Flt-3 puede ser modulado de acuerdo con la presente invención, incluyendo las formas de tipo silvestre y mutante. Raf o raf-1 quinasa es una familia de serina/treonin quinasas que comprenden por lo menos tres miembros de familia, A-Raf, B-Raf, y c-raf o Raf-1. Véase, por ejemplo., Dhillon y Kolch, Arch. Biochem. Biophys., 404: 3-9, 2002. C-raf y B-Raf son objetivos preferidos para compuestos de la presente invención. Se ha identificado la activación de mutaciones B-Raf (por ejemplo, mutante V599E) en varios cánceres, incluyendo melanoma, y los compuestos descritos en la presente pueden ser utilizados para inhibir su actividad. Mediante el término "modular" se representa que la actividad funcional de la trayectoria (o un componente de ella) es cambiado en comparación con su actividad normal en ausencia del compuesto. Este efecto incluye cualquier calidad o grado de modulación, incluyendo, incrementar, agonizar, aumentar, mejorar, facilitar, estimular, decrecer, bloquear, inhibir, reducir, disminuir, antagonizar, etc. Los Cuadros 8 y 9 muestran la actividad de un compuesto N-[4-cloro-3-(trifluoromet¡l)fenil]-N'-{4-[2-N-metilcarbamoil-4-piridiloxiy]fenil} urea de la presente invención en ensayos ín vítro (bioquímico) e in vivo (celular), respectivamente. Como se indica mediante su perfil de de actividad bioquímica (Cuadro 8), el compuesto es un potente inhibidor de un número de diferentes quinasas celulares. Además, tiene la habilidad para afectar la actividad de quinasa, el crecimiento celular y otros procesos celulares en células completas. El Cuadro 9 muestra la concentración del compuesto que inhibió la fosforilación de objetivo en células completas en un 50% (IC50). En tanto que el perfil de actividad es representativo de un compuesto activo de la presente invención, no todos los compuestos activos son requeridos para tener el mismo orden del rango de potencia para que sean útiles en la presente invención. Los ensayos para la actividad bioquímica y celular son convencionales y pueden llevarse a cabo utilizando cualquier formato adecuado, incluyendo como se describe en los ejemplos siguientes. Véase, también, VEGFR-3 kinase assays (e. g., Manley et al., J. Med. Chem., 45 (26): 5687-93, 2002; Stahl et al., Angew Chem. Int. Ed. Engl., 41 (7): 1174-8, 2002); FLT3 kinase assays (Yee et al., Blood, 100 (8): 2941-9, 2002; Kelly et al., Cáncer Cell., 1 (5): 421-32, 2002). Los compuestos de la presente invención también pueden modular uno o más de los siguientes procesos, incluyendo, pero sin limitarse a, por ejemplo, crecimiento celular (incluyendo por ejemplo, diferenciación, supervivencia celular, y/o proliferación), crecimiento de célula de tumor (incluyendo por ejemplo, diferenciación, supervivencia celular, y/o proliferación), regresión tumoral, crecimiento de célula endotelial (incluyendo por ejemplo, diferenciación, supervivencia celular, y/o proliferación), angiogensis (crecimiento de vaso sanguíneo), linfangiogensis (crecimiento de vaso linfático), y/o hematopoiesis (por ejemplo, desarrollo de célula-T y -B, desarrollo de célula dendrítica, etc.). En tanto que no se desea enlazarse a teoría o mecanismo de acción alguno, se ha encontrado que los compuestos de la presente ¡nvención poseen la habilidad para modular la actividad de quinasa. Los métodos de la presente invención, sin embargo, no están limitados a ningún mecanismo particular o a como los compuestos logran su efecto terapéutico. Mediante la frase "actividad de quinasa" se representa una actividad catalítica en la cual un gama-fosfato a partir de adenosin trifosfato (ATP) es transferido hacia un residuo de amino ácido (por ejemplo, serina, treonina, o tirosina) en un sustrato de proteína. Un compuesto puede modular la actividad de quinasa, por ejemplo, inhibiéndola al competir directamente con ATP para el paquete de enlace-ATP de la quinasa, al producir un cambio de conformación en la estructura de la enzima que afecta su actividad ' (por ejemplo, mediante alteración de la estructura tridimensional biológicamente activa), etc. La actividad de quinasa puede determinarse de manera rutinaria utilizando métodos de ensayo convencionales. Los ensayos de quinasa comprenden comúnmente la enzima quinasa, sustratos, reguladores de pH y componentes de un sistema de detección. Un ensayo de quinasa común involucra la reacción de una quinasa de proteína con un sustrato de péptido y un ATP, tal como 32P-ATP, para producir un producto final fosforilatado (por ejemplo una fosfoproteína cuando se utiliza un sustrato de péptido. El producto final resultante puede ser detectado utilizando cualquier método adecuado. Cuando se utiliza ATP radioactivo, una fosfoproteína etiquetada radioactivamente puede ser separada a partir del 32P-ATP utilizando una membrana de afinidad o electroforesis de gel, y después visualizada en el gel utilizando autoradiografía o detectada con un contador de centelleo. También pueden utilizarse métodos no radioactivos. Los métodos pueden utilizar un anticuerpo que reconoce el sustrato fosforilatado, por ejemplo, un anticuerpo de antifosfotirosina. Por ejemplo, la enzima de quinasa puede ser incubada con un sustrato en presencia de ATP y regulador de pH de quinasa bajo condiciones que son efectivas para que la enzima fosforilice el sustrato. La mezcla de reacción puede ser separada, por ejemplo, electroforéticamente, y después la fosforilación del sustrato puede ser medida, por ejemplo, por medio de tinción Western utilizando un anticuerpo de anti-fosfotirosina. El anticuerpo puede ser etiquetado con una etiqueta detectable, por ejemplo una enzima, tal como HRP, avidina o biotina, reactivos quimioluminiscen.es, etc. Otros métodos pueden utilizar formatos ELISA, separación de membrana de afinidad, ensayos de polarización de fluorescencia, ensayos luminscentes, etc. Una alternativa para el formato radioactivo es la transferencia de energía de resonancia de fluorescencia resuelta por tiempo (TR-FRET). Este método sigue la reacción de quinasa estándar, en donde un sustrato, por ejemplo, poli(GluTyr) bioteñido, es fosforilatado por medio de quinasa de proteína en presencia de ATP. El producto final puede ser detectado después con un anticuerpo fosfoespecífico de quelato de europio (anti-fosfortirosina o fosfoserina/treonina), y estreptavidina-APC, la cual enlaza el sustrato bioteñido. Esos dos componentes son llevados juntos espacialmente hasta el enlace, y la transferencia de energía desde el anticuerpo fosfoespecífico hacia el aceptante (SA-APC) produce una lectura fluorescente en el formato homogéneo. Los compuestos de la invención pueden ser utilizados para tratar y/o prevenir cualquier enfermedad o condición que involucre una o más trayectorias de transducción de señal celular que comprenden raf, VEGFR-2, VEGFR-3, p38, PDGFR-beta, y/o Flt3. El término "tratar" es utilizado de manera convencional, por ejemplo el manejo o cuidado de un sujeto con el propósito de combatir, aliviar, reducir, curar, mejorar la condición de, etc., de una enfermedad o padecimiento. Las enfermedades y condiciones que pueden ser tratadas incluyen cualquiera de aquellas mencionadas con anterioridad y a continuación, así como: Enfermedades asociadas con Raf incluyen, por ejemplo, desordenes de la proliferación celular, cáncer, tumores, etc.; Enfermedades asociadas con VEGFR-2 incluyen, por ejemplo, cáncer, crecimiento de tumor, padecimiento inflamatorio, artritis reumatoide, retinopatía, psoriasis, glomerulonefritis, asma, bronquitis crónica, aterosclerosis, rechazo de transplante, condiciones que involucran angiogensis, etc.; Enfermedades asociadas con VEGFR-3 incluyen, por ejemplo, cáncer, enfermedad corneal, cornea inflamada (e. g., Hamrah, Am. J. Path. , 163: 57-68, 2003), transplante de cornea (Cursiefen etal., Cornea, 22: 273-81 , 2003), hiperplasia linfática, condiciones que involucran limfangiogensis, etc.; Las enfermedades asociadas con PDGFR-beta incluyen, por ejemplo, enfermedades o condiciones caracterizadas por proliferación celular, producción de matriz celular, movimiento celular, y/o producción de matriz extracelular. Los ejemplos específicos, incluyen, por ejemplo, tumores, malignidades, cáncer, metástasis, leucemia mieloide crónica, inflamación, enfermedad renal, neuropatía diabética, glomerulonefritis proliferativa mesengial, condiciones fibróticas, aterosclerosis, restenosis, arterosclerosis relacionada con hipertensión, arterosclerosis de injerto de derivación venosa, escleroderma, enfermedades pulmonares intersticiales, padecimientos sinoviales, artritis, leucemias, linfomas, etc. Enfermedades asociadas con Flt-3 incluyen, por ejemplo, padecimientos inmuno-relacionados, padecimientos de los glóbulos, condiciones que involucran desarrollo de célula hematopoietica (e. g., células-T, células-B, células dendríticas, cáncer, anemia, HIV, síndrome de deficiencia inmuno adquirida, etc. Además, los compuestos de la presente invención pueden ser utilizados para tratar condiciones y padecimientos descritos en la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica No. 6,316,479, por ejemplo, esclerosis glomerular, nefritis intersticial, fibrosis pulmonar intersticial pulmonar, aterosclerosis, cicatrización de herida y escleroderma. Los compuestos de esta invención tienen también una amplia actividad terapéutica para tratar o prevenir la progresión de una amplia disposición enfermedades, tales como condiciones inflamatorias, restenosis coronaria, angiogensis asociada con tumor, aterosclerosis, enfermedades autoinmunes, inflamación, ciertas enfermedades del riñon asociadas con la proliferación de células glomerulares o mesengiales, y enfermedades oculares asociadas con proliferación de vasos retínales, psoriasis, cirrosis hepática, diabetes, aterosclerosis, restenosis, restenosis de injerto vascular, estenosis en-stent, angiogensis, enfermedades oculares, fibrosis pulmonar, bronquitis obliterativa, nefritis glomerular, artritis reumatoide. La presente invención proporciona también el tratamiento, prevención, modulación, etc., una o más de las siguientes condiciones en humanos y/u otros mamíferos: retinopatía, incluyendo retinopatía diabética, oclusión de vena retinal isquémica, retinopatía de premadurez y degeneración macular relacionada con la edad; artritis reumatoide, psoriasis, o padecimientos hulosos asociados con formación de ampolla subepidérmica, incluyendo penfigoide bulosa, eritema multiforme, o dermatitis herpetíformis, fiebre reumática, resorción ósea, osteoporosis postmenopáusica, sepsis, sepsis gram negativa, choque séptico, choque endotóxico, síndrome de choque tóxico, síndrome de respuesta inflamatoria sistémica, enfermedad intestinal inflamatoria (enfermedad de Crohn y colitis ulcerativa), reacción de Jarisch-Herxheimer, asma, síndrome de malestar respiratorio del adulto, enfermedad fibrótica pulmonar aguda, sarcoidosis pulmonar, enfermedad respiratoria alérgica, silicosis, neumoconiosis del minero, lesión alveolar, falla hepática, enfermedad hepática durante la inflamación aguda, hepatitis alcohólica severa, malaria (Plasmodium falciparum malaria y malaria cerebral), diabetes mellitus dependiente de insulina (NIDDM), falla cardíaca congestiva, daño posterior a enfermedad cardíaca, aterosclerosis, enfermedad de Alzheimer, encefalitis aguda, lesión cerebral, esclerosis múltiple (desmielación y pérdida de oligiodendrocito en esclerosis múltiple), cáncer avanzado, malignidad linfoide, pancreatitis, curación deteriorada de herida en infección, inflamación y cáncer, síndromes mielodisplásticos, lupus eritematoso sistémico, cirrosis biliar, necrosis intestinal, lesión/toxicidad de radiación posterior a la administración de anticuerpos monoclonales, reacción huésped-contrainjerto (lesión de repercusión isquémica y rechazos de aloinjeto de riñon, hígado, corazón y piel), rechazo pulmonar de aloinjerto (bronquitis obliterativa), o complicaciones debidas al reemplazo total de cadera, y una enfermedad infecciosa seleccionada a partir de tuberculosis, infección por Helicobacter pylori durante la enfermedad de úlcera péptica, enfermedad de Chaga resultante a partir de infección de Tripanosoma cruz, efectos de toxima similar a Shiga resultante a partir de infección de E. coli, efectos de enterotoxina A resultante a partir de infección de Staphylococcus, infección de meningococo e infección a partir de Borrelia burgdorferi, Treponema pallidium, citomegalovirus, virus de influenza, virus de encefalomielitis de Theiler, y el virus de inmunodeficiencia humano (HIV), papiloma, blastoglioma, sarcoma de Kaposi, melanoma, cáncer pulmonar, cáncer de ovario, cáncer de próstata, carcinoma de célula escamosa, astrocitoma, cáncer de la cabeza, cáncer del cuello, cáncer de la vejiga, cáncer del seno, cáncer colorectal, cáncer de la tiroide, cáncer pancreático, cáncer gástrico, carcinoma hepatocelular, leucemia, linfosis, enfermedad de Hodgkin, enfermedad de Burkitt, artritis reumatoide, retinopatía diabética, angiogensis, restenosis, restenosis en-stent, restenosis de injerto vascular, fibrosis pulmonar, cirrosis hepática, aterosclerosis, glomerulonefritis, neuropatía diabética, micoangiopatía trómbica, síndromes, rechazo de transplante, psoriasis, diabetes, curación de herida, inflamación y enfermedades neurodegenerativas, padecimientos hiperinmunes, hemangioma, angiogensis del miocardio, vascularización colateral coronaria y cerebral, isquemia, enfermedad corneal, glaucoma neovascular, retinopatía de degeneración macular de premadurez, curación de herida, enfermedades relacionadas con Helicobacter de úlcera, fracturas, endometriosis, una condición diabética, fiebre por rasguño de gato, hiperplasia tiroidal, asma o edema posterior a quemaduras, traumatismos, enfermedad pulmonar crónica, ataque, pólipos, quistes, sinovitis, inflamación crónica y alérgica, síndrome de hiperestimulación de ovario, edema pulmonar y cerebral, queloide, fibrosis, cirrosis, síndrome de túnel carpiano, síndrome de malestar respiratorio del adulto, ascitos, una condición ocular, una condición cardiovascular, enfermedad de Crow-Fukase (POEMS), enfermedad de Crohn, glomerulonefritis, osteoartritis, esclerosis múltiple, rechazo de injerto, enfermedad de Lyme, sepsis, enfermedad de von Hippel Lindau, penfigoide, enfermedad de Paget, enfermedad de riñon policística, sarcoidosis, troiditis, síndrome de hiperviscosidad, enfermedad de Osler-Weber-Rendu, enfermedad pulmonar oclusiva crónica, radiación, hipoxia, preclampsia, menometrorragia, endometriosis, infección por Herpes simplex, retinopatía isquémica, angiogenisis corneal, Herpes Zoster, virus de inmunodeficiencia humano, parapoxvirus, protozoa, toxoplasmosis, y efusiones y edema asociados con tumor. Los compuestos pueden poseer más de una de las actividades antes mencionadas, y por lo tanto puede dirigirse a una pluralidad de trayectorias de transducción de señal. Por lo tanto, esos compuestos pueden lograr efectos terapéuticos y profilácticos que normalmente se obtienen sólo cuando se emplea una combinación de de diferentes compuestos. Por ejemplo, la habilidad para inhibir la formación de vasos en la vejiga (por ejemplo, asociada con VEGFR-2 y función -3) (por ejemplo, sangre y/o linfa) y proliferación celular (por ejemplo, asociada con raf y función PDGFR-beta) usando un solo compuesto es especialmente benéfico en el tratamiento del cáncer, y otros padecimientos de proliferación celular que son facilitados por neo-vascularización. Por lo tanto, la presente invención se refiere de manera específica a compuestos que poseen por lo menos por lo menos actividad anti-proliferación celular y anti-angiogénica (es decir, inhiben la angiogensis). Cualquier padecimiento o condición que se beneficiaría a partir de la inhibición del crecimiento de vasos y la proliferación celular puede ser tratada de acuerdo con la presente invención. Utilizar un solo compuesto también es ventajoso debido a que su rango de actividades puede ser definido de manera más precisa. Como se indicó antes, la presente invención se refiere a métodos para tratar y/o prevenir enfermedades y condiciones; y/o modular una o más de las trayectorias, polipéptidos, genes, enfermedades, condiciones, etc., asociados con raf, VEGFR-2, VEGFR-3, PDGFR-beta, y/o Flt-3. esos métodos implican administrar cantidades efectivas de compuestos de la presente invención, en donde una cantidad efectiva es la cantidad del compuesto que es útil para lograr el resultado deseado. Los compuestos pueden ser administrados en cualquier forma efectiva mediante cualquier ruta efectiva, como se describe con mayor detalle a continuación Los métodos incluyen modular la proliferación de célula de tumor, incluyendo inhibir la proliferación celular. Esto ultimo indica que el crecimiento y/o diferenciación de las células tumorales se reduce, decrece, disminuye, hace más lento, etc. El término "proliferación" incluye cualquier proceso que se relacione con el crecimiento y la división celular, e incluye la diferenciación y apoptosis. Como se describió antes, raf quinasas desempeñan un rol clave en la activación de la cascada de señalización citoplásmica involucrada en la proliferación de célula, diferenciación, y apoptosis. Por ejemplo, los estudios han encontrado que la inhibición de c-raf 1 por medio de oligonucleótidos de anti-sentido puede bloquear la proliferación de célula (véase arriba). Cualquier cantidad de inhibición es considerada terapéutica. Cualquier tumor o cáncer puede ser tratado, incluyendo, pero sin limitarse a, cánceres que tienen una o más mutaciones en raf, VEGFR-2, VEGFR-3, PDGFR-beta, Flt-3, y/o ras, así como cualquier miembro ascendente o descendente de las trayectorias de señalización de las cuales son parte. Como se describió previamente, un cáncer puede ser tratado con un compuesto de la presente ¡nvención sin importar el mecanismo que sea responsable del mismo. Los cánceres de cualquier órgano pueden ser tratados, incluyendo cánceres de, pero sin limitarse a, por ejemplo, colon, páncreas, seno, próstata, óseo, hígado, riñon, pulmón, testículos, piel, páncreas, estómago, cáncer colorectal, carcinoma de célula renal, carcinoma hepatocellular, melanoma, etc.

Ejemplos de cáncer de seno incluyen, pero no se limitan a, carcinoma ductal invasivo, carcinoma lobular invasivo, carcinoma ductal in situ, y carcinoma lobular in situ.

Ejemplos de cánceres del tracto respiratorio incluyen, pero no se limitan a, carcinoma pulmonar de célula pequeña y de célula no pequeña, así como adenoma bronquial y blastoma pleuropulmonar. Ejemplos de cánceres del cerebro incluyen, pero no se limitan a, tallo encefálico y glioma hipoftálmico, astrocitoma cerebelar y cerebral, meduloblastoma, ependimoma, así como tumor neuroectodérmico y pineal. Los tumores de los órganos reproductivos masculinos incluyen, pero no se limitan a, cáncer de próstata y testicular. Los tumores de los órganos reproductivos femeninos incluyen, pero no se limitan a, cáncer endometrial, cervical, de ovarios, vaginal, y vulvar, así como sarcoma del útero. Los tumores del tracto digestivo incluyen, aunque no se limitan a cánceres anal, de colon, colorectal, esofágico, de la vesícula biliar, gástrico, pancreático, rectal, del intestino delgado, y de glándula salival. Los tumores del tracto urinario incluyen, pero no se limitan a, cánceres de vejiga, del pene, de riñon, pélvico renal, uréter, y uretral. Los cánceres del ojo incluyen, pero no se limitan a, melanoma y retinoblastoma intraocular. Ejemplos de cánceres del hígado incluyen, pero no se limitan a, carcinoma hepatocellular (carcinomas de célula hepática con o sin variante fibrolamelar), colangiocarcinoma (carcinoma de ducto biliar intrahepático), y colangiocarcinoma hepatocelular mixto. Los cánceres de piel incluyen, pero no se limitan a, carcinoma de célula escamosa, sarcoma de Kaposi, melanoma maligno, cáncer de piel de la célula de Merkel, y cáncer de la piel sin melanoma. Los cánceres de cabeza y cuello incluyen, pero no se limitan a, cánceres de laringe, hipofarínego, nasofaríngeo, y/u orofaríngeo, y cáncer de labio y cavidad oral. Los linfomas incluyen, pero no se limitan a, linfoma relacionado con SIDA, linfoma no-Hodgkin, linfoma de célula-T cutánea, enfermedad de Hodgkin, y linfoma del sistema nervioso central. Los sarcomas incluyen, pero no se limitan a, sarcoma del tejido blando, osteosarcoma, histiocitoma fibroso maligno, linfosarcoma, y rabdomiosarcoma. Las leucemias incluyen, pero no se limitan a, leucemia mieloide aguda, leucemia linfoblástica aguda, leucemia linfocítica crónica, leucemia mielogenosa crónica, y leucemia de célula capilar. Además de inhibir la proliferación de células de tumor, los compuestos de la presente ¡nvención también pueden ocasionar la regresión del tumor, por ejemplo, una disminución en el tamaño de un tumor o en la extensión del cáncer en el cuerpo. La presente invención se refiere también a métodos para modular la angiogensis y/o linfangiogensis en un sistema que comprende células, que comprende administrar al sistema una cantidad efectiva de un compuesto descrito en la presente. Un sistema que comprende células puede ser un sistema in vivo, tal como un tumor en un paciente, órganos aislados, tejidos o células, sistemas de ensayos in vitro (CAM, BCE, etc), modelos de animal (por ejemplo, modelos de cáncer subcutáneo in vivo), huéspedes que necesitan de tratamiento (por ejemplo, huéspedes que padecen de enfermedades que tienen componente angiogénico y/o linfangiogénico, tal como cáncer), etc. los compuestos preferidos de la presente invención inhiben la angiogensis y/o linfangiogensis, por ejemplo, la formación de nuevos vasos sanguíneos. La expresión inapropiada y ectópica of la angiogensis puede ser nociva para un organismo. Un número de condiciones patológicas están asociadas con el crecimiento de vasos sanguíneos extraños. Estos incluyen, por ejemplo, retinopatía diabética, glucoma neovascular, psoriasis, fibroplasías retrolentales, angiofibroma, inflamación, etc. además, el suministro sanguíneo incrementado asociado con el tejido canceroso y neoplástico, fomenta el crecimiento, conduciendo a un rápido alargamiento del tumor y a la metástasis.

Además, el crecimiento de nuevos vasos sanguíneos y linfáticos en un tumor proporciona una ruta de escape para las células apóstatas, fomentando la metástasis y en consecuencia la dispersión del cáncer. Los sistemas útiles para la modulación de la angiogensis, incluyen, por ejemplo, neovascularization de explantes de tumor (por ejemplo, Patentes de los Estados Unidos de Norteamérica Nos. 5,192,744; 6,024,688), ensayo de membrana corioalantóica de pollo (CAM) (por ejemplo, Taylo y Folkman, Nature, 297: 307-312, 1982; Eliceiri et al., J. Cell Biol. , 140, 1255-1263, 1998), ensayo de célula endotelial capilar bovina (BCE) (por ejemplo, Patente de los Estados Unidos de Norteamérica No. 6,024,688; Polverini, P. J. et al., Métodos Enzymol., 198: 440-450, 1991), ensayos de migración, y ensayo de inhibición de crecimiento HUVEC (célula endotelial vascular de cordón umbilical humano (por ejemplo, Patente de los Estados Unidos de Norteamérica No. 6,060,449). Además, los sistemas útiles para modular la linfangiogensis, incluyen, por ejemplo, modelo de oreja de conejo (por ejemplo, Szuba et al., FASEB J., 16 (14): 1985-7, 2002). La modulación de la angiogensis se puede determinar a través de cualquier método adecuado. Por ejemplo, el grado de vascularidad de tejido es determinado de manera común mediante la determinación del número y densidad de vasos presentes en una muestra determinada. Por ejemplo, la densidad de microvaso (MVD) puede ser calculada a través del conteo del número de agrupamientos endoteliales en un campo microscópico de alta potencia, o detectando un marcador específico para endotelio microvascular u otros marcadores de crecimiento o vasos sanguíneos establecidos, tales como CD31 (conocido también como molécula de células endotelial-plaqueta o PECAM). El anticuerpo ACD31 puede ser empleado en métodos inmunohistológicos convencionales para la inmunotinción de secciones de tejido como lo describe, por ejemplo, Penfold et al., Br. J. Oral y Maxill. Surg., 34: 37-41; Patente de los Estados Unidos de Norteamérica No. 6,017, 949; Dellas et al., Gyn. Oncol., 67: 27-33, 1997; y otros. Otros marcadores para angiogensis, incluye, por ejemplo, Vezfl (por ejemplo, Xiang et al., Dev. Bio., 206: 123-141 , 1999), angiopoietina, Tie-1 , y Tie-2 (por ejemplo, Sato et al., Nature, 376: 70-74, 1995). Adicionalmente, los niveles de circulación VEGF, tales como VEGF- 165, VEGF-C, VEGF-D, puede ser medida en un ELISA para determiner si está sobre un valor de umbral que indica la actividad angiogénica en el cuerpo. Adicionalmente, la presente invención de refiere a métodos para seleccionar pacientes para determinar su susceptibilidad a los compuestos de la presente invención. Por ejemplo, la presente invención se refiere a métodos de selección de sujetos que tienen una enfermedad para tratamiento con un compuesto de la formula I, que comprende una o más de las siguientes etapas en cualquier orden efectivo, por ejemplo, medir la expresión o actividad de Raf, VEGFR-2, VEGFR-3, p38, PDGFR-beta, y/o Flt-3, en un a muestra obtenida de un sujeto que tiene una enfermedad, y administrar dicho compuesto de la fórmula I a los sujetos en los que se han identificado altos niveles de expresión o actividad, en donde dicho compuesto es un compuesto de la fórmula I de la reivindicación 1. El término "susceptibilidad" es usado de manera amplia para indicar, por ejemplo, la habilidad para responder a la toxicidad u otros efectos adversos, etc. por ejemplo, la invención se refiere a métodos para determinar si una condición puede ser modulada por un compuesto descrito en la presente, comprende medir la expresión o actividad de Raf, VEGFR-2, VEGFR-3, p38, PDGFR-beta, y/o Flt-3 en células que tienen dicha condición. Los resultados pueden ser utilizados para determinar o pronosticar si un sujeto responderá a un compuesto de la presente invención. Por ejemplo, cuando la condición es un tumor, los métodos pueden ser utilizados para pronosticar si el tumor es susceptible a los compuestos de la presente invención. Mediante el término "susceptible" se representa que el tumor puede ser tratado con el compuesto, por ejemplo, ocasionando la regresión del tumor o la muere celular, inhibiendo la proliferación de célula, inhibiendo el crecimiento del tumor, inhibiendo la metástasis del tumor, etc. Se puede determinar de manera rutinaria si una condición, tal como un tumor, es susceptible o no a un compuesto de la presente invención. Por ejemplo, las células o tejidos (por ejemplo, células de tumor, una muestra de biopsia, etc.) que exhibe la condición pueden ser probadas para la presencia y/o actividad de Raf, VEGFR-2, VEGFR-3, p38, PDGFR-beta, y/o Flt-3. Cuando se identifican altos niveles de expresión y/o actividad, esto puede indicar que el sujeto responderá a, y se beneficiará de, un compuesto de la presente invención. Los niveles de expresión de gen (por ejemplo, niveles de ARNm), amplificación de gen, o actividad de producto de gen (por ejemplo, actividad de tirosin quinasa) se puede utilizar para caracterizar el estado de la célula con respecto al gen correspondiente y la trayectoria de señalización. Por ejemplo, los genes de objetivo de la presente invención poseen actividad de tirosin quinasa, y por lo tanto la actividad de tirosin quinasa puede ser utilizada para determinar el estado de la célula o tejido. En el ejemplo siguiente, la actividad fue medida observando los niveles de sustrato fosforilatado por ella. Esto puede hacerse de manera cuantitativa (e. g., utilizando isótopos, espectroscopia, etc.) o semi- cuantitativamente como en el ejemplo en donde los niveles fueron determinados visualmente y asignados a un nivel de intensidad desde +1 hasta +4. Una célula o tejido que tiene un alto nivel de sustrato fosforilatado (y un alto número de células que exhiben la actividad elevada) pueden ser considerados por tener un alto nivel de actividad de quinasa, y por lo tanto ser un candidato para la terapia con un compuesto de la presente invención. Se puede determinar más de una actividad, y los resultados a partir de varios objetivos pueden ser utilizados en la decisión de si la condición de un sujeto (por ejemplo un tumor) responderá a un compuesto de la presente invención. Los altos niveles de actividad de objetivo pueden ser relativos para un control u otro estándar. De manera ilustrativa, en el siguiente ejemplo, los altos niveles de actividad fueron con referencia un tipo de célula (estromal) en la sección de tejido que normalmente no expresa niveles sustanciales del gen de objetivo. Los altos niveles pueden por lo tanto pueden estar en donde las células expresan una cantidad estadísticamente mayor de la actividad medida o el sustrato fosforilatado que el estándar o control utilizado como una comparación. Los altos niveles también pueden estar en donde 25% o más de las células expresan la actividad de objetivo (por ejemplo, fosfo-ERK). El método puede comprender además una etapa comparación de la expresión en una muestra con un control normal, o la expresión en una muestra obtenida a partir de tejido normal o no afectado. La comparación puede hacerse manualmente, contra un estándar, en una forma electrónica, (por ejemplo, contra una base de datos), etc. El control normal puede ser una muestra estándar que es proporcionada con el ensayo; puede obtenerse a partir de tejido adyacente, aunque no afectado, a partir del mismo paciente; o, pueden ser valores pre-determinados, etc. La expresión de gen, la expresión de proteína (por ejemplo abundancia en una célula), actividad de proteína (por ejemplo actividad de quinasa), etc., se pueden determinar. Por ejemplo, una biopsia de un paciente con cáncer puede ser probada para la presencia, cantidad, y/o actividad de Raf, VEGFR-2, VEGFR-3, p38, PDGFR-beta, y/o Flt- 3. la expresión o actividad incrementada de uno o más de estos puede indicar que el cáncer puede ser enfocado para tratamiento con un compuesto de la presente invención. Por ejemplo, como se describe en los ejemplos siguientes, la actividad raf puede ser monitoreada por su habilidad para iniciar la cascada que conduce a la fosforilación ERK (es decir, raf/MEK/ERK), resultando en fosfo-ERK. Los niveles incrementados de fosfo- ERK en un cáncer muestran que su actividad raf actividad es elevada, sugiriendo el uso de compuestos de la presente ¡nvención para tratarlo. Además de las muestras de biopsia, fosfo-ERK (otros marcadores) puede medirse en otros fluidos corporales, tales como suero, sangre, fluido espinal cerebral, orina, etc., tal como en los linfocitos sanguíneos periféricos (PBLs). Para estos últimos, la inhibición de fosforilación ERK se puede medir después de la activación con acetato de miristato de forbol usando anticuerpos cornos e describe en los ejemplos siguientes. Además, los pacientes que tienen cáncer pueden ser seleccionados y monitoreados en base a si el tejido está experimentando o no neovascularización, y en que grado. Esto se puede determinar como se describió antes, por ejemplo, utilizando inmunohistoquímica para marcadores de vasos (por ejemplo, CD31), niveles de circulación de un ligando VGFR, etc. La selección y monitoreo de paciente también se puede realizar en base a la aparición en un fluido corporal (tal como la sangre) sobre los niveles normales de los ectodominios impartidos derivados a partir de los diferentes receptores, incluyendo las porciones extracelulares de VEGFR-2, VEGFR-3,p38, PDGFR-beta, y Flt-3. Los métodos de detección se pueden llevar a cabo de manera rutinaria, por ejemplo, usando anticuerpos que se enlazan de manera específica al dominio extracelular. La medición de la expresión incluye determinar o detectar la cantidad del polipéptido presente en una célula o impartida por ella, así como medición del ARNm subyacente, en donde la cantidad de ARNm presente es considerada para reflejar la cantidad de polipéptido elaborado por la célula. Además, los genes para Raf, VEGFR-2, VEGFR-3, p38, PDGFR-beta, y/o Flt-3 pueden ser analizados para determinar si hay un defecto de gen responsable de la expresión o actividad de polipéptido aberrante. Las secuencia se genes están públicamente disponibles; por ejemplo, Nu004333 Homo sapiens v-raf homólogo de oncógeno viral de sarcoma de murina Bl (BRAF);NM~004119 Homo sapiens tirosin quinasa relacionada con aletas 3 (FLT3); NM 002609 Homo sapiens receptor de crecimiento derivado de plaqueta, beta polipéptido (PDGFRB); NM002253 Homo sapiens VEGFR2; NM~182925 Homo sapiens tirosin quinasa relacionada con fms 4 (FLT4); L35253 Homo sapiens p38 proteína activada por mitógeno (MAP) quinasa. La detección de polipéptido se puede llevar a cabo a través de cualquier método disponible, por ejemplo tinciones Western, ELISA, tinción de punto, inmunoprecipitación, RÍA, inmunohistoquímica, etc. Por ejemplo, una sección de tejido puede ser preparada y etiquetada con un anticuerpo específico (indirecto o directo y visualizado con un microscopio. La cantidad de un polipéptido puede ser cuantificada sin visualización, por ejemplo, mediante preparación de un lisado de una muestra de interés y determinando después mediante ELISA o Western la cantidad de polipéptido por cantidad de tejido. Se pueden utilizar anticuerpos y otros agentes de enlace específicos. No hay limitación sobre como se ejecuta la detección. Se pueden utilizar los ensayos que permiten la cuantificaci?n y/o detección de presencia/ausencia de un ácido nucleico de objetivo (por ejemplo, genes, ARNm, etc., para raf, VEGFR, PDGFR, Flt-3, etc) en una muestra. Los ensayos pueden ejecutarse en el nivel de célula individual, o en una muestra que comprende muchas células, en donde el ensayo está "promediando" la expresión sobre toda la colección de células y tejidos presentes en la muestra. Se puede utilizar cualquier formato de ensayo, incluyendo pero sin limitarse a, por ejemplo, análisis de tinción Southern, análisis de tinción Northern, reacción de cadena de polimerasa ("PCR") (por ejemplo, Saiki et al., Science, 241 : 53, 1988; Patentes de los Estados Unidos de Norteamérica Nos. 4,683,195, 4,683,202, y 6,040,166; PCR Protocols: A Guide to Métodos y Applications, innis et al., eds., Academic Press, New York, 1990), reacción de cadena de transcriptasa polimerasa inversa ("RT- PCR"), PCR anclado, amplificación rápida de extremos ADNc ("RACE") (por ejemplo, Schaefer in Gen Cloning y Analysis: Current Innovations, Páginas 99-115,1997), reacción de cadena de ligasa ("LCR") (EP 320 308), PCR de un solo lado (Ohara et al., Proc. Nati. Acad. Sci., 86: 5673-5677, 1989), métodos de indexación (por ejemplo, Patente de los Estados Unidos de Norteamérica No. 5,508,169), hibridización in situ, despliegue diferencial (por ejemplo, Liang et al., Nucí. Acid. Res., 21 : 3269 3275, 1993; Patentes de los Estados Unidos de Norteamérica Nos. 5,262,311 , 5,599,672 y 5,965,409; W097/18454; Prashar y Weissman, Proc. Nati. Acad. Sci., 93: 659-663, y Patentes de los Estados Unidos de Norteamérica Nos. 6, 010,850 y 5,712,126; Welsh et al., Nucleic Acid Res., 20: 4965-4970,1992, y Patente de los Estados Unidos de Norteamérica No. 5,487, 985) y otras técnicas de identificación de ARN, amplificación en base a secuencia de ácido nucleico ("NASBA") y otros sistemas de amplificación en base a transcripción (por ejemplo, Patentes de los Estados Unidos de Norteamérica Nos. 5,409,818 y 5,554,527; WO 88/10315), disposiciones de polinucleotido (por ejemplo, Patentes de los Estados Unidos de Norteamérica Nos. 5,143,854, 5,424,186; 5,700,637, 5,874,219, y 6,054,270; PCT WO 92/10092; PCT WO 90/15070), Qbeta Replicasa (PCT/US87/00880), Amplificación de Desplazamiento de Filamento ("SDA"), Reacción de Cadena de Reparación ("RCR"), ensayos de protección de nucleasa, métodos en base a sustracción, Exploración-Rápida, etc. Métodos útiles adicionales incluyen, pero no se limitan a, por ejemplo, métodos de amplificación en base a plantilla, PCR competitivo (por ejemplo, Patente de los Estados Unidos de Norteamérica No. 5,747,251), ensayos en base a redox (por ejemplo, Patente de los Estados Unidos de Norteamérica No. 5,871 ,918), ensayos en base a Taqman (por ejemplo, Holly et al., Proc. Nati. Acad, Sci., 88: 7276-7280, 1991 ; Patentes de los Estados Unidos de Norteamérica Nos. 5,210,015 y 5,994,063), monitoreo en base a fluorescencia en tiempo real (por ejemplo, Patente de los Estados Unidos de Norteamérica No. 5,928, 907), etiquetas de transferencia de energía molecular (por ejemplo, Patentes de los Estados Unidos de Norteamérica Nos. 5,348,853, 5,532,129, 5,565,322, 6,030,787, y 6,117,635; Tyagi y Kramer, Nature Biotech., 14: 303-309, 1996). Se puede utilizar cualquier método adecuado para análisis de célula individual de expresión de gen o proteína, incluyendo hibridización in situ, inmunocitoquímica, MACS, FACS, citometría de flujo, etc. para ensayos de célula individual, los productos de expresión pueden ser medidos utilizando anticuerpos, PCR, o otros tipos de amplificación de ácido nucleico (por ejemplo, Brady et al., Methods Mol. & Cell. Biol. 2,17-25, 1990; Eberwine et al., 1992, Proc. Nati. Acad. Sci., 89, 3010-3014, 1992; Patente de los Estados Unidos de Norteamérica No. 5,723,290). Estos y otros métodos se pueden ejecutar de manera convencional, por ejemplo, cornos e describe en las publicaciones mencionadas.

La actividad de raf, VEGFR-2, VEGFR-3,p38, PDGFR-beta, y Flt-3 se puede determinar en forma rutinaria, por ejemplo, como se describe en los ejemplos siguientes, o utilizando ensayos estándar para la actividad de quinasa (ver arriba). La medición de la expresión incluye la evaluación de todos los aspectos de la maquinaria de transcripción y traslación del gen. Por ejemplo, si un defecto de promotor ocasiona, o se sospecha que ocasiona, la alteración, se puede evaluar entonces una muestra (es decir, "determinar") mediante observación (por ejemplo, secuenciamiento o mapeo de restricción) en la secuencia del promotor en el gen, mediante la detección de los productos de transcripción (por ejemplo, ARN), mediante la detección del producto de traslación (por ejemplo, polipéptido). Se puede utilizar cualquier medida de si el gen es o no funcional, incluyendo, polipéptido, polinucléotido, y ensayos funcionales para ía actividad biológica del gen. En la elaboración de la determinación, puede ser útil comparar los resultados para un gen que no está asociado con el padecimiento, o para el mismo gen aunque en un tejido o región no afectados del mismo tejido. La naturaleza de la comparación se puede determinar de manera rutinaria, dependiendo de como se logra la determinación. Si, por ejemplo, se detectan los niveles de ARNm de una muestra, entonces los niveles de ARNm de un normal pueden servir como una comparación, o un gen que se sabe que no está afectado por el padecimiento. Los métodos de detección de ARNm son bien conocidos, y están descritos con anterioridad, por ejemplos, pero sin limitarse a, análisis de tinción Northern, reacción de cadena de polimerasa (PCR), transcriptasa inversa PCR, RACE PCR, etc. De manera similar, si se utiliza la producción de polipéptido para evaluar el gen, entonces el polipéptido en una muestra de tejido normal puede ser utilizada como una comparación, o, el polipéptido a partir de un gen diferente cuya expresión es conocida por no estar afectada por el padecimiento. Estos son solamente ejemplos de como podría ejecutarse dicho método. Los pacientes también pueden ser seleccionados para tratamiento si tienen un genotipo particular que se sabe que está asociado con un cáncer, en especial genotipos que afectan la trayectoria Raf/Mek/Erk, tales como las mutaciones en los genes BRAF, KRAS, o MEK. Junto con esas líneas, la presente invención se refiere a métodos para seleccionar pacientes para tratamiento que involucran determinar la presencia de una mutación de gen Raf, VEGFR-2, VEGFR-3,p38, PDGFR-beta, y/o Flt-3 en una muestra obtenida a partir de un sujeto, en donde dicha mutación está asociada con una enfermedad, y administrar dicho compuesto de la fórmula I a los sujetos que están identificados por tener dicha mutación. La presencia de la mutación se puede determinar de manera convencional, por ejemplo, la obtención de células o una muestra de tejido a partir de un sujeto, extracción de ácido nucleico del mismo, determinación de la secuencia o estructura de gen de un gen de objetivo (utilizando, por ejemplo, ARNm, ADNc, ADN genómica, etc), comparación de la secuencia o estructura del gen de objetivo para la estructura del gen normal, por lo que una diferencia en la secuencia o estructura indica una mutación en el gen en el sujeto. Las mutaciones se pueden determinar utilizando cualquier método efectivo, por ejemplo, comparación de los mapas de restricción, secuencias de nucleótido, secuencias de aminoácido, RFLPs, sitios ADNse, identificación de metilación de ADN (por ejemplo, Patente de los Estados Unidos de Norteamérica No. 6,214,556), sitios de separación de proteína, pesos moleculares, movilidades electrof oráticas, cargos, movilidad de ¡ón, etc., entre un gen estándar y el gen del sujeto. Las proteínas también pueden ser comparadas. Para ejecutar dichos métodos, todo o parte del gen o polipéptido puede ser comparado. Por ejemplo, si se utiliza el secuenciamiento de nucleotido, todo el gen puede ser secuenciado, incluyendo el promotor, intrones, y exones, o solamente partes de ellos pueden ser secuenciados y comparados, por ejemplo., exon 1 , exon 2, etc. La presente invención también proporciona métodos de determinación de la eficacia de un compuesto de la presente invención en el tratamiento de una enfermedad, que comprende una o más de las siguientes etapas en cualquier orden efectivo, por ejemplo, medición de la expresión o actividad de Raf, VEGFR-2, VEGFR-3, p38, PDGFR-beta, y/o Flt-3 en una muestra obtenida a partir de dicho sujeto que ha sido tratado con un compuesto de la presente ¡nvención, y determinar los efectos de dicho compuesto sobre la expresión o actividad. La etapa de medición puede ser ejecutada como ya se describió. Por ejemplo, las muestras de biopsia pueden ser retiradas desde los pacientes que han sido tratados con un compuesto de la presente invención, y después probadas para la presencia y/o actividad de las moléculas de señalización mencionadas. Como se describió antes, los niveles disminuidos de fosfo-ERK en el tejido con cáncer (por ejemplo en comparación con un tejido normal o antes del tratamiento) indica que el compuesto está ejerciendo eficacia in vivo y un efecto terapéutico. La determinación de los efectos del compuesto sobre la expresión o actividad incluye ejecuta con una etapa de comparación entre una muestra de tejido y un control, u otro tipo de estándar. Los ejemplos de estándares que pueden ser utilizados incluyen, pero no se limitan a, una muestra de tejido antes del tratamiento, una muestra de tejido a partir de un tejido no afectado o a partir de una región no afectada del tejido afectado (por ejemplo, a partir de una región del tejido que no es transformada, cancerosa, etc.), etc. Un estándar también puede ser un valor, o un rango de valores, que es representativo de los niveles normales de expresión que se han establecido para ese marcador. La comparación también se puede hacer entre muestras recolectadas a partir de por lo menos dos puntos en el tiempo diferentes durante el régimen de tratamiento con un compuesto de la presente invención. Por ejemplo, las muestras pueden ser colectadas a partir de varias ocasiones después de la iniciación del tratamiento de fármaco, y análisis de expresión y/o niveles de actividad pueden ser utilizados para monitorear el progreso/prognosis del sujeto, por ejemplo, como está respondiendo el sujeto al régimen de fármaco. Se puede utilizar cualquier punto en el tiempo, por ejemplo, diariamente, dos veces a la semana, semanalmente, cada dos semanas, cada mes, anualmente, a pluralidad de puntos de tiempo (por lo menos 2, 3, 4, 8, 12, etc.). La frase "determinación del efecto" indica que el resultado producido por el compuesto es analizado y/o identificado. De manera ilustrativa, en el Ejemplo 3, se muestran los datos de que el compuesto redujo los niveles de fosfo-ERK (es decir, el efecto del compuesto sobre la actividad raf se determinó a través de la medición de fosfo-ERK). Se puede identificar cualquier tipo de efecto, por ejemplo, cuando la expresión y/o actividad se reduce, decrece, es sub-regulada, inhibida, bloqueada, incrementada, es sobre-regulada, no cambiada, etc. El método puede ser utilizado para determinar las dosis apropiadas y regímenes de dosificación, por ejemplo, como administrar el compuesto y con que frecuencia administrarlo. Mediante el monitoreo de este efecto sobre las moléculas de señalización en el tejido, el clínico puede determinar el protocolo de tratamiento adecuado y si está logrando o no el efecto deseado, por ejemplo, al modular o inhibir la trayectoria de transducción de señal. Por ejemplo, si el compuesto no es efectivo en la reducción de las cantidades de un marcador, tal como fosfo-ERK, la dosis puede ser incrementada en el paciente o suministrada con mayor frecuencia. De manera similar, las dosis y/o la frecuencia se pueden reducir cuando se muestra que el compuesto es efectivo en la reducción de los niveles de fosfo-ERK u otro marcador para el estado de enfermedad. Ya que los compuestos pueden ser administrados en combinación con otros tratamientos, por ejemplo, radiación, quimioterapia, y otros agentes, el monitoreo del sujeto puede utilizarce para determinar el efecto combinado del régimen de tratamiento sobre el avance de la enfermedad. Los ejemplos de mutaciones, incluyen mutaciones en K-RAS; mutaciones en el gen BRAF, tales como las mutaciones en la posición 599, tal como V599E, y posiciones 461 ,462, 463, 465,468, 593,596, 60, etc., las cuales están asociadas con cánceres, tales como melanoma. Los compuestos de la presente invención también pueden ser utilizados como marcadores para determinar la presencia y cantidad de raf, VEGFR-2, VEGFR-3, PDGFR- beta, y/o Flt-3. Los métodos pueden involucrar la presencia de Raf, VEGFR-2, VEGFR-3, PDGFR-beta, y/o Flt-3 en una muestra que comprende material biológico, que comprende una o más de las siguientes etapas en cualquier orden efectivo, por ejemplo, poner en contacto la muestra que comprende un material biológico con un compuesto de la presente invención, y determinar si el compuesto se enlaza o no al dicho material. El compuesto puede ser etiquetado, o puede ser utilizado como un competidor para ser un compuesto etiquetado, tal como ATP-etiquetado. La invención proporciona también métodos para tratar, prevenir, modular, etc., enfermedades y condiciones en mamíferos que comprenden administrar un compuesto de esta ¡nvención con otro modulador de la trayectoria de transducción de señal que comprende, pero no está limitado a raf, VEGFR, PDGFR, y/o FLT-3. Estos pueden estar presentes en la misma composición o en formulaciones separadas o unidades de dosis. La administración puede ser la misma o diferentes rutas, y puede ser simultánea, secuencial, etc. La invención también se refiere a métodos para tratar, prevenir, modular, etc., enfermedades y condiciones, que comprenden administrar un compuesto de esta invención con otro agente activo, por ejemplo, uno o más por día hasta 28 días consecutivos con la administración concurrente o intermitente de otro agente activo durante el mismo período total. Los agentes anti-hiper-proliferativos opcionales que pueden ser agregados a la composición incluyen, pero no se limitan a, compuestos listados en los regímenes de fármaco de quimioterapia del cáncer en la 11a Edición del Merck Index, (1996), la cual está incorporada a la presente mediante referencia, tal como asparaginasa, bleomicina, carboplatina, carmustina, clorambucílo, cisplatina, colaspasa, ciclofosfamida, citarabina, dacarbazina, dactinomicina, daunorubicina, doxorubicina (adriamicina), epirubicina, etoposida, 5-fluorouracilo, hexametilmelamina, hidroxiurea, ifosfamida, irinotecan, leucovorina, lomustina, mecloretamina, 6-mercaptopurina, mesna, metotrexato, mitomicina C, mitoxantrona, prednisolona, prednisona, procarbazina, raloxifen, estreptozocina, tamoxifen, tioguanina, topotecan, vinblastina, vincristina, y vindesina. Otros agentes anti-hiper-proliferativos adecuados para el uso con la composición de la invención incluyen, pero no se limitan a, aquellos compuestos reconocidos para ser utilizados en el tratamiento de enfermedades neoplásticas en The Pharmacological Basis of Therapeutics de Goodman y Gilman (Novena Edición), editada Molinoff et al., publicada por McGraw-Hill, páginas 1225-1287, (1996), la cual está incorporada a la presente mediante referencia, tal como aminoglutetimida, L-asparaginasa, azatioprina, 5-azacitidin cladribina, busulfan, dietilstilbestrol, 2',2'-difluorodeoxicitidina, docetaxel, eritrohidroxinoniladenina, etinil estradiol, 5-fluorodeoxiuridina, monofosfato de 5-fluorodeoxiuridina, fosfato de fludarabina, fluoximesterona, flutamida, caproato de hidroxiprogesterona, idarubicina, interferon, acetato de medroxiprogesterona, acetato de megestrol, melfalano, mitotano, paclitaxel, pentostatin, N-fosfonoacetil-L-aspartato (PALA), plicamicina, semustina, teniposida, propionato de testosterona, tiotepa, trimetilmelamina, uridina, y vinorelbina. Los compuestos de la presente invención pueden ser administrados en cualquier forma mediante cualquier ruta efectiva, incluyendo, por ejemplo, oral, parenteral, enteral, intravenosa, intraperitoneal, tópica, transdérmica (por ejemplo, usando cualquier parche estándar), oftálmica, nasal, local, no- oral, tal como aerosol, inhalación, subcutánea, intramuscular, bucal, sublingual, rectal, vaginal, intra-arterial, y intratecal, etc. Pueden ser administrados solos, o en combinación con cualquier ingrediente(s), activo o inactivo. Pueden ser administrados en cualquier dosis efectiva, por ejemplo, desde aproximadamente 0.1 hasta aproximadamente 200 mg/kg de peso corporal total. La presente invención se refiere a un método para utilizar los compuestos antes descritos (Compuestos de la Fórmula I), incluyendo sales y esteres de los mismos y composiciones de los mismos, para tratar padecimientos hiper-proliferativos de mamíferos. Este método comprende administrar a un mamífero que necesita del mismo, incluyendo un humano, una cantidad de un compuesto de esta invención, o una sal o éster farmacéuticamente aceptable del mismo compuesto, que es efectiva para tratar el padecimiento. Los padecimientos hiper-proliferativos incluyen pero no se limitan a tumores sólidos, tales como cánceres del seno, tracto respiratorio, cerebro, órganos reproductivos, tracto digestivo, tracto urinario, ojo, hígado, piel, cabeza y cuello, tiroide, paratiroide y sus metástasis distantes. Esos padecimientos también incluyen linfomas, sarcomas, y leucemias. Las transformaciones sintéticas que se pueden emplear en la síntesis de los compuestos de la Fórmula I y en la síntesis de los intermediarios involucrados en la síntesis de los compuestos de la Fórmula I son conocidas por o accesibles para alguien con experiencia en la técnica. Las colecciones de transformaciones sintéticas se pueden encontrar en compilaciones, tales como: • J. March. Advanced Organic Chemistry, 4th ed.; John Wiley: New York (1992) • R. O Larock. Comprehensive Organic Transformations, 2nd ed.; Wiley-VCH: New York (1999) • F. A. Carey; R. J. Sundberg. Advanced Organic Chemistry, 2nd ed.; Plenum Press: New York (1984) • T. W. Greene; P. G. M. Wuts. Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd ed.; John Wiley: New York (1999) • L. S. Hegedus.Transition Metals ¡n the Synthesis of Complex Organic Molecules, 2nd ed.; University Science Books: Mili Valley, CA (1994) • L. A. Paquette, Ed. The Enciclopedia of Reagents for Organic Synthesis; John Wiley: New York (1994) • A. R. Katritzky; O. Meth-Cohn; C. W. Rees, Eds. Comprehensive Organic Functional Group Transformations; Pergamon Press: Oxford, UK (1995) • G. Wilkinson; F. G A. Stone; E. W. Abel, Eds.Comprelz. ensive Organometallic Chemistry; Pergamon Press: Oxford, UK (1982) • B. M. Trost; I. Fleming. Comprehensive Organic Synthesis; Pergamon Press: Oxford, UK (1991) • A. R. Katritzky; C. W. Rees Eds. Comprehensive Heterocylic Chemistry; Pergamon Press: Oxford, UK (1984) • A. R. Katritzky; C. W. Rees; E. F. V. Scriven, Eds. Comprehensive Heterocyüc Chemistry II; Pergamon Press: Oxford, UK (1996) « O Hansch; P. G. Sammes; J. B. Taylor, Eds. Comprehensive Medicinal Chemistry Pergamon Press: Oxford, UK (1990).

Además las revisiones recurrentes de la metodología sintética y temas relacionados incluyen Organic Reactions; John Wiley: New York; Organic Syntheses; John Wiley: New York; Reagents for Organic Synthesis: John Wiley: New York; The Total Synthesis of Natural Products; John Wiley: New York; The Organic Chemistry of Drug Synthesis; John Wiley: New York; Annual Reports in Organic Synthesis; Academic Press: San Diego CA; y Methoden der Organischen Chemie (Houben-Weyl); Thieme: Stuttgart, Germany. Además, las bases de datos de transformaciones sintéticas incluyen Chemical Abstracts, los cuales pueden ser buscados utilizando ya sea CAS OnLine o SciFinder, Hybuch der Organischen Chemie (Beilstein), las cuales pueden ser buscadas usando SpotFire, y REACCS.

Métodos de Preparación Generales Las diaril ureas de la Fórmula I pueden ser preparadas a través del uso de reacciones y procedimientos químicos conocidos, algunos a partir de materiales de partida que están comercialmente disponibles. Sin embargo, los métodos de preparación generales se proporcionan a continuación para ayudar a alguien con experiencia en la técnica en la síntesis de esos compuestos, con ejemplos más detallados que se proporcinan en la sección Experimental siguiente. Las anilinas sustituidas pueden ser generadas utilizando métodos estándar (March. Advanced Organic Chemistry, 3rd Ed.; John Wiley: New York (1985). Larock. Corsaprehensive Organic Transformations; VCH Publishers: New York (1989)). Como se muestra en Schemel, las aril aminas son sintetizadas de manera común mediante la reducción de nitroarilos empleando un catalizador metálico, tal como Ni, Pd, o Pt, y H2 o un agente de transferencia de hidruro, tal como formato, ciclohexadieno, o un borohidruro (Rylyer.Hydrogenation Métodos; Academic Press: London, UK (1985)). Los nitroarilos pueden ser reducidos directamente empleando una fuente de hidruro fuerte, tal como LiAlH4 (Seyden-Penne. Reductions by the Alumino- and Borohydrides in Organic Synthesis; VCH Publishers: New York (1991)), o utilizando un metal de Valencia cero, tal como Fe, Sn o Ca, con frecuencia en medio ácido. Existen muchos métodos para la síntesis de nitroarilos (March. Advanced Organic Chemistry, 3rd Ed.; John Wiley: New York (1985). Larock. Comprehensive Organic Transformations; VCH Publishers: New York (1989)).

H2 / catalizador (eg. Ni, Pd, Pt) \ ArNO [H'l ArNH? M(0) (eg. Fe, Sn, Ca) Esquema I Reducción de Nitroarilos a Aril Aminas Los nitroarilos son formados de manera común mediante nitración aromática electrofílica utilizando HN03, o una fuente alternativa de N02+. Los nitroarilos pueden ser elaborados además antes de la reducción. Por lo tanto, los nitroarilos sustituidos con HN03 Ar-H ArN02 grupos residuales potenciales (por ejemplo F, Cl, Br, etc.) pueden experimentar reacciones de sustitución en el tratamiento con nucleofilos, tales como tiolato (ejemplificados en el Esquema ll) o fenóxido. Los nitroarilos también pueden experimentar reacciones de acoplamiento tipo Ullman (Esquema II). 3 Esquema II Sustitución Aromática Nucleofílica Seleccionada utilizando Nitroarilos Los nitroarilos pueden experimentar también reacciones de acoplamiento cruzado mediadas por metal de transición. Por ejemplo, los electrofilos de nitroarilo, tales como bromuros de nitroarilo, yoduros o triflatos, experimentan reacciones de acoplamiento cruzado mediadas por paladio con nucleofilos de arílo, tales como ácidos arilborónicos (reacciones de Suzuki, ejemplificadas a continuación), arilestaños (reacciones de Stille) o arilzincs (reacción de Negishi) para lograr el biarilo (5). 4 Como se muestra en el Esquema lll, la formación de urea no-simétrica puede involucrar la reacción de un isocianato de arilo (14) con una aril amina (13). El isocianato de heteroarilo puede ser sintetizado a partir de una heteroaril amina mediante tratamiento con fosgeno o un equivalente de fosgeno, tal como cloroformato de triclorometilo (difosgeno), carbonato de bis(triclorometilo) (trifosgeno), o N,N'-carbonildiimidazol (CDI).

El ¡socianato puede ser derivado a partir de un derivado de ácido carboxílico heterocíclico, tal como éster, un haluro ácido o un anhídrido mediante un reacomodo tipo Curtius. Por lo tanto, la reacción de derivado de ácido 16 con una fuente de azida, seguida por reacomodo logra el isocianato. El ácido carboxílico correspondiente (17) puede ser sometido también a reacomodos tipo Curtius utilizando difenilofosforil azida (DPPA) o un reactivo similar.

Ar1-NH2 13 O O ? JL Ar1-^X Ar "Y)l-l 16 17 Esquema lll Métodos Seleccionados de Formación de Urea No-Simétrica Finalmente, las ureas pueden ser manipuladas de manera adicional utilizando métodos familiares para aquellos con experiencia en la técnica. Los compuestos pueden ser administrados en forma oral, tópica, parenteral, mediante inhalación o aspersión o de manera rectal en formulaciones de unidad de dosis.

El término 'administración mediante inyección' incluye inyecciones intravenosas, intramusculares, subcutáneas y parenterales, así como el uso de técnicas de infusión. Uno o más compuestos pueden estar presentes en asociación con uno o más portadores farmacéuticamente aceptables no-tóxicos y si se desea otros ingredientes activos. Las composiciones destinadas para el uso oral pueden ser preparadas de acuerdo con cualquier método adecuado conocido en la técnica para la manufactura de composiciones farmacéuticas, dichas composiciones pueden contener uno o más agentes seleccionados a partir del grupo que comprende diluyentes, agentes edulcorantes, agentes saborizantes, agentes colorantes y agentes de conservación a fin de proporcionar preparaciones apetecibles. Las tabletas contienen el ingrediente activo en mezcla con excipientes farmacéuticamente aceptables no-tóxicos que son adecuados para la fabricación de tabletas. Esos excipientes pueden ser, por ejemplo, diluyentes inertes, tales como carbonato de calcio, carbonato de sodio, lactosa, fosfato de calcio o fosfato de sodio; agentes de granulación y desintegración, por ejemplo, almidón de maíz, o ácido algínico; y agentes de enlace, por ejemplo estearato de magnesio, ácido esteárico o talco.

Las tabletas pueden no ser recubiertas o pueden ser recubiertas a través de técnicas conocidas para retardar la desintegración y adsorción en el tracto gastrointestinal y de esta manera proporciona una acción sostenida durante un período prolongado. Por ejemplo, se puede emplear un material de retardo de tiempo tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo. Esos compuestos también pueden ser preparados en forma sólida de rápida liberación. Las formulaciones para uso oral también pueden ser presentadas como cápsulas de gelatina dura en donde el ingrediente activo es mezclado con un diluyente sólido inerte, por ejemplo, carbonato de calcio, fosfato de calcio o caolín, o como cápsulas de gelatina suave en donde el ingrediente activo es mezclado con agua o un medio de aceite, por ejemplo aceite de cacahuate, parafina líquida o aceite de olivo. Las suspensiones acuosas contienen los materiales activos en combinación con excipientes adecuados para la fabricación de suspensiones acuosas. Dichos excipientes son agentes de suspensión, por ejemplo carboximetilcelulosa de sodio, metilcelulosa, hidroxipropil metilcelulosa, alginato de sodio, polivinilpirrolidona, goma de tragacanto y goma de acacia; agentes de dispersión o humectación pueden ser una fosfatida de presencia natural, por ejemplo, lecitina, o productos de condensación o un óxido de alquileno con ácidos grasos, por ejemplo estearato de polioxietileno, o productos de condensación de óxido de etileno con alcoholes alifáticos de cadena larga, por ejemplo heptadecaetilen oxicetanol, o productos de condensación de óxido de etileno con esteres parciales derivados a partir de ácidos grasos y hexitol tales como monooleato de polioxietilen sorbitol, o productos de condensación de óxido de etileno con esteres parciales derivados a partir de ácidos grasos y anhídridos de hexitol, por ejemplo monooleato de polietilen sorbitan. Las suspensiones acuosas también pueden contener uno o más conservadores, por ejemplo, etil, o n-propil p-hidroxibenzoato, uno o más agentes colorantes, uno o más agentes saborizantes, y uno o más agentes edulcorantes, tales como sacarosa o sacarina. Los polvos y granulos dispersables adecuados para la preparación de una suspensión acuosa mediante la adición de agua proporcionan el ingrediente activo en mezcla con un agente de dispersión o humectación, agente de suspensión y uno o más conservadores. Los agentes de dispersión o humectación adecuados son ejemplificados por aquellos ya mencionados con anterioridad. Excipientes adicionales, por ejemplo, agentes edulcorantes, saborizantes y colorantes, también pueden estar presentes. Los compuestos también pueden estar en la forma de formulaciones líquidas no acuosas, por ejemplo, suspensiones oleosas las cuales pueden ser formuladas mediante la suspensión de ingredientes activos en un aceite vegetal, por ejemplo aceite de maní, aceite de olivo, aceite de ajonjolí o aceite de cacahuate, o en un aceite mineral tal como parafina líquida. Las suspensiones oleosas pueden contener un agente espesante, por ejemplo cera de abeja, parafina dura o alcohol cetílico. Los agentes edulcorantes tales como aquellos antes establecidos, y los agentes saborizantes pueden agregarse para proporcionar preparaciones apetecibles. Estas composiciones pueden ser conservadas a través de la adición de un anti-oxidante tal como ácido ascórbico. Las composiciones farmacéuticas de la invención también pueden estar en la forma de emulsiones aceite en agua. La fase oleosa puede ser un aceite vegetal, por ejemplo aceite de olivo o aceite de maní, o un aceite mineral, por ejemplo parafina líquida o mezclas de éstos. Los agentes de emulsificación adecuados pueden ser gomas de presencia natural, por ejemplo goma de acacia o goma de tragacanto, fosfatidas de presencia natural, por ejemplo frijol de soya, lecitina y esteres o esteres parciales derivados a partir de ácidos grasos y anhídridos de hexitol, por ejemplo monooleato de sorbitan, y productos de condensación de esteres parciales con óxido de etileno, por ejemplo monooleato de polioxietilen sorbitan. Las emulsiones también pueden contener agentes edulcorantes y saborizantes. Los jarabes y elíxires pueden ser formulados con agentes edulcorantes, por ejemplo glicerol, propilen glicol, sorbitol o sacarosa. Dichas formulaciones también pueden contener un demulcente, un conservador y agentes saborizantes y colorantes. Los compuestos también pueden ser administrados en la forma de supositorios para administración rectal del fármaco. Esas composiciones pueden ser preparadas a través de mezclado del fármaco con un excipiente no irritante adecuado el cual es sólido a temperaturas ordinarias pero líquido a la temperatura rectal y por lo tanto se derretirá en el recto para liberar el fármaco. Dicho material incluye manteca de cacao y polietilen glicoles. Los compuestos de esta ¡nvención también pueden ser administrados en forma parenteral, es decir, de manera subcutánea, intravenosa, infraocular, intrasinovial, intramuscular o intreperitoneal, como dosis inyectables del compuesto en un diluyente fisiológicamente aceptable con un portador farmacéutico que puede ser un líquido estéril o una mezcla de líquidos tales como agua, solución salina, dextrosa acuosa y soluciones de azúcar relacionadas, un alcohol como etanol, isopropanol, o alcohol hexadecíiico, glicoles como propilen glicol o polietilen glicol, glicerol cetales como 2,2-dimetil-1 ,1-dioxolan-4-metanol, éteres tales como poli(etilen glicol) 400, un aceite, un ácido graso, un éster de ácido graso o, glicérido de ácido graso, o un glicérido de ácido graso acetilatado, con o sin la adición de un agente tensioactivo farmacéuticamente aceptable tal como un jabón o un detergente, agente de suspensión tal como pectina, carbómeros, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, o carboximetilcelulosa, o agente de emulsificación y otros auxiliares farmacéuticos. Ejemplos de los aceites que pueden ser utilizados para las formulaciones parenterales de esta invención son aquellos de origen petrolífero, animal, vegetal o sintético, por ejemplo, aceite de cacahuate, aceite de frijol de soya, aceite de ajonjolí, aceite de semilla de algodón, aceite de maíz, aceite de olivo, petrolato y aceite mineral. Los ácidos grasos adecuados incluyen ácido oléico, ácido esteárico, ácido isoesteáríco y ácido mirístico. Los esteres de ácido graso adecuados son, por ejemplo, oleato de etilo y miristato de isopropilo. Los jabones adecuados incluyen sales de ácido graso, de metal alcalino, de amonio y de trietanolamonio y los detergentes adecuados incluyen detergentes catiónicos, por ejemplo haluros de dimetil dialquil amonio, haluros de alquil piridinio y acetatos de alquilamina; detergentes aniónicos, por ejemplo, alquil, aril y olefin sulfonatos, sulfonatos de alquilo, olefina, éter y monoglicérido, y sulfosuccinatos; detergentes no iónicos, por ejemplo, óxidos de amina grasa, alcanolamidas de ácido graso, y poli(oxietilen-oxipropileno)s u óxido de etileno o copolímeros de óxido de propileno; y detergentes anfotéricos, por ejemplo, alquil beta-aminopropionatos, y sales de amonio cuaternario de 2-alquilimidazolino, así como mezclas. Las composiciones parenterales de esta invención contendrán de manera común desde aproximadamente 0.5% hasta aproximadamente 25% en peso del ingrediente activo en solución. Los conservadores y reguladores de pH pueden ser utilizados de manera ventajosa. A fin de reducir al mínimo o eliminar la irritación en el sitio de inyección, dichas composiciones pueden contener un agente tensioactivo no iónico que tiene un equilibrio hidrofilo-lipofilo (HLB) desde aproximadamente 12 hasta aproximadamente 17. La cantidad de agente tensioactivo en dicha formulación varía desde aproximadamente 5% hasta aproximadamente 15% en peso. El agente tensioactivo puede ser un componente individual que tiene el HLB anterior o puede ser una mezcla de dos o más componentes que tienen el HLB deseado. Ejemplos de agentes tensioactivos utilizados en las formulaciones parenterales son de la clase de esteres de ácido graso de polietilen sorbitan, por ejemplo, monooleato de sorbitan y los aductos de alto peso molecular de óxido de etileno con una base hidrofóbica, formados por medio de la condensación de óxido de propileno con propilen glicol. Las composiciones farmacéuticas pueden estar en la forma de suspensiones acuosas inyectables estériles. Dichas suspensiones pueden ser formuladas de acuerdo con los métodos conocidos utilizando agentes de dispersión o humectación adecuados como por ejemplo, carboximetilcelulosa de sodio, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, alginato de sodio, polivinilpirrolidona, goma de tragacanto y goma de acacia; agentes de dispersión o humectación que pueden ser una fosfatida de presencia natural como lecitina, un producto de condensación de óxido de alquileno con un ácido graso, por ejemplo, estearato de polioxietileno, un producto de condensación de óxido de etileno con un alcohol alifático de cadena larga, por ejemplo, heptadeca-etilenoxicetanol, un producto de condensación de óxido de etileno con un éster parcial derivado a partir de un ácido graso y un hexitol tal como monooleato de polioxietilen sorbitol, o un producto de condensación de un óxido de etileno con un éster parcial derivado a partir de un ácido graso y un anhídrido de hexitol, por ejemplo monooleato de polioxietilen sorbitan. La preparación inyectable estéril también puede ser una solución o suspensión inyectable estéril en un diluyente o solvente parenteralmente aceptable no toxico. Los diluyentes y solventes que se pueden emplear son, por ejemplo, agua, solución de Ringer, soluciones de cloruro de sodio y soluciones de glucosa isotónicas. Además, los aceites fijos estériles son empleados de manera convencional como solventes o medios de suspensión. Para este propósito, se puede emplear cualquier aceite fijo suave incluyendo mono- o diglicéridos sintéticos. Además, los ácidos grasos tales como el ácido oléico pueden ser utilizados en la preparación de composiciones inyectables. Los compuestos de la invención también pueden ser administrados en forma transdérmica empleando métodos ("parches") conocidos por aquellos con experiencia en la técnica (véase por ejemplo: Chien; "Transdermal Controlled Systemic Medications"; Marcel Dekker, Inc.; 1987. Lipp et al. WO94/04157 3 de marzo de 1994). Dichos parches transdérmicos pueden ser utilizados para proporcionar infusión continua o discontinua de los compuestos de la presente invención en cantidades controladas. La construcción y el uso de parches transdérmicos para el suministro de agentes farmacéuticos son bien conocidos en la técnica (véase, por ejemplo, Patente de los Estados Unidos de Norteamérica 5,023,252, publicada el 11 de junio de 1991 , incorporada a la presente mediante referencia). Dichos parches pueden ser fabricados para suministro continuo, por impulsos o por pedido de agentes farmacéuticos. Por ejemplo, una solución o suspensión de un compuesto de la Fórmula I en un solvente volátil adecuado que contiene de manera opcional agentes mejoradores de penetración se pueden combinar con aditivos adicionales conocidos por aquellos con experiencia en la técnica, tales como materiales de matriz y bacteriocidas. Después de la esterilización, la mezcla resultante puede ser formulada siguiendo procedimientos conocidos en formas de dosis. Además, en el tratamiento con agentes de emulsificación y agua, una solución o suspensión de un compuesto de la Fórmula I puede ser formulada en una loción o ungüento. Los solventes adecuados para el procesamiento de sistemas de suministro transdérmico son conocidos por aquellos con experiencia en la técnica, e incluyen alcoholes inferiores tales como etanol, o alcohol isopropílico, cetonas inferiores tales como acetona, esteres de ácido carboxílico inferior tales como acetato de etilo, éteres polares tales como tetrahidrofurano, hidrocarburos inferiores tales como hexano, ciciohexano o benceno, o hidrocarburos halógenoados tales como diclorometano, cloroformo, triclorotrifluoroetano o triclorofluoroetano. Los solventes adecuados pueden incluir también mezclas de uno o más materiales seleccionados a partir de alcoholes inferiores, cetonas inferiores, esteres de ácido carboxílico, éteres polares, hidrocarburos inferiores, hidrocarburos halógenoados. Los materiales de mejoramiento de penetración para sistema de suministro transdérmico son conocidos por aquellos con experiencia en la técnica, e incluyen, por ejemplo, alcoholes monohidroxi o polihidroxi tales como etanol, propilen glicol o alcohol bencílico, alcoholes grasos C8-C18 saturados tales como alcohol laurílico o alcohol cetílico, ácidos grasos saturados o instaturados C8-C18 tales como ácido esteárico, esteres grasos saturados o insaturados de hasta 24 átomos de carbono tales como metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo, sec-butil isobutil ter-butilo o esteres de monoglicerina de ácido acético, ácido caprónico, ácido láurico, ácido miristínico, ácido esteárico, o ácido palmítico, o diésteres de ácidos dicarboxílicos saturados o insaturados con un total de hasta 24 carbonos tales como adipato de diisopropilo, adipato de diisobutilo, sebacato de diisopropilo, maleato de diisopropilo, fumarato de diisopropilo. Los materiales de mejoramiento de penetración adicionales incluyen derivados de fosfatidilo tales como lecitina o cefalina, terpenos, amidas, cetonas, ureas y sus derivados, y éteres tales como éter de dimetil isorbid y de dimetilenglicol monoetilo. Las formulaciones de mejoramiento de penetración adecuadas también pueden incluir mezclas de uno o más materiales seleccionados a partir de alcoholes monohidroxí o polihidroxi, alcoholes grasos C8-C18 saturados o insaturados, ácidos grasos C8-C18 saturados o insaturados, esteres de ácidos grasos saturados o insaturados con hasta 24 carbonos, diésteres de ácidos dicarboxílicos saturados o insaturados con un total de hasta 24 carbonos, derivados de fosfatidilo, terpenos, amidas, cetonas, ureas y sus derivados, y éteres. Los materiales de enlace adecuados para sistemas de suministro transdérmico son conocidos para aquellos con experiencia en la técnica e incluyen poliacrilatos, siliconas, poliuretanos, polímeros de bloque, copolímeros de estireno-butadieno, y hules sintéticos y naturales. Los éteres de celulosa, polietilenos derivados, y silicatos también pueden ser utilizados como componentes de matriz. Aditivos adicionales, tales como resinas viscosas o aceites pueden ser agregados a fin de incrementar la viscosidad de la matriz. Las formulaciones de liberación controlada para administración parenteral incluyen formulaciones liposomales, de microesfera polimérica y de gel polimérico, que son conocidas en la técnica. Puede ser deseable o necesario introducir la composición farmacéutica a un paciente por medio de un dispositivo de suministro mecánico. La construcción y uso de los dispositivos de suministro mecánico para el suministro de agentes farmacéuticos es bien conocido en la técnica. Las técnicas directas, por ejemplo, para administrar un fármaco de manera directa al cerebro involucran en forma usual la colocación de un catéter de suministro de fármaco dentro del sistema ventricular del paciente para desviar la barrera sangre-cerebro. Un sistema de suministro implantable de este tipo, utilizado para el transporte de agentes hacia regiones anatómicas específicas del cuerpo, se describe en la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica No. 5,011 ,472, publicada el 30 de abril de 1991. Las composiciones de la invención también pueden contener otros ingredientes componentes farmacéuticamente aceptables convencionales, referidos de manera general como portadores o diluyentes, según sea necesario o deseable. Se pueden utilizar procedimientos convencionales para la preparación de dichas composiciones en formas de dosis apropiadas. Dichos ingredientes y procedimientos incluyen aquellos descritos en las siguientes referencias, cada una de las cuales está incorporada a la presente mediante referencia: Powell, M.F. et al., "Compendium of Excipients for Parenteral Formulations" PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 1998, 52(5), 238-311 ; Strickley, R. G. "Parenteral Formulations of Small Molecule Therapeutics Marketed in the United States (1999)-Part-1" PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 1999, 53(6), 324-349; y Nema, S. et al., "Excipients and Their Use in Injectable Products" PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 1997, 51(4), 166-171. Esta invención se refiere también a la administración de composiciones farmacéuticas que contienen uno o más compuestos de la presente invención. Esas composiciones pueden ser utilizadas para lograr el efecto farmacológico deseado mediante la administración a un paciente que necesita del mismo. Un paciente para el propósito de esta invención, es un mamífero, incluyendo un ser humano, que necesita de tratamiento para la condición o enfermedad particular. Por lo tanto, la presente invención incluye composiciones farmacéuticas que están comprendidas de un portador farmacéuticamente aceptable y una cantidad farmacéuticamente efectiva de un compuesto, o sal del mismo, de la presente invención. Un portador farmacéuticamente aceptable es cualquier portador que es relativamente no tóxico e inocuo para un paciente en concentraciones compatibles con la actividad efectiva del ingrediente activo de manera que cualesquiera efectos colaterales atribuibles al portador no invalidan los efectos benéficos del ingrediente activo. Una cantidad farmacéuticamente efectiva de compuesto es aquella cantidad que produce un resultado o ejerce una influencia en la condición particular que se trata. Los compuestos de la presente invención pueden ser administrados con portadores farmacéuticamente aceptables bien conocidos en la técnica utilizando cualesquiera formas de unidad de dosis convencional efectiva, incluyendo preparaciones de liberación inmediata, lenta y sincronizada, orales, parenterales, tópicas, nasales, oftálmicas, óticas, sublinguales, rectales, vaginales y similares. Para administración oral, los compuestos pueden ser formulados en preparaciones sólidas o líquidas tales como cápsulas, pildoras, tabletas, trociscos, pastillas, fusiones, polvos, soluciones, suspensiones, o emulsiones, y se pueden preparar de acuerdo con métodos conocidos en la técnica para la fabricación de composiciones farmacéuticas. Las formas de dosis unitaria sólida pueden ser una cápsula que puede ser de un tipo de gelatina de coraza dura o suave ordinaria que contiene por ejemplo, agentes tensioactivos, lubricantes, y rellenos inertes tales como lactosa, sacarosa, fosfato de calcio y almidón de maíz. En otra modalidad, los compuestos de esta invención pueden ser formados en tabletas con bases de tableta convencionales tales como lactosa, sacarosa y almidón de maíz en combinación con aglutinantes tales como acacia, almidón de maíz o gelatina, agentes de desintegración destinados a ayudar a la separación y disolución de la tableta después de la administración tal como almidón de papa, ácido algínico, almidón de maíz, y goma guar, goma de tragacanto, acacia, lubricantes destinados a mejorar el flujo de la granulación de tableta y para evitar al adhesión del material de tableta a las superficies de los dados y punzones de tableta, por ejemplo talco, ácido esteárico, o estearato de calcio o zinc, tintes, agentes colorantes, y agentes saborizantes tales como menta, aceite de gaulteria, o saborizante de cereza, destinados a mejorar las cualidades estéticas de las tabletas y hacerlas más aceptables para el paciente. Los excipientes adecuados para el uso en las formas de dosis unitaria líquida oral incluyen fosfato dicálcico y diluyentes tales como agua y alcoholes, por ejemplo etanol, alcohol bencílico y alcoholes de polietileno, ya sea con o sin la adición de un agente tensioactivo, agente de suspensión o agente de emulsificación farmacéuticamente aceptable. Muchos otros materiales pueden estar presentes como recubrimientos o para modificar de otra manera la forma física de la unidad de dosis. Por ejemplo las tabletas, pildoras o cápsulas pueden ser recubiertas con goma laca, azúcar o ambos. Las composiciones de la invención también pueden contener otros ingredientes de formación de compuesto farmacéuticamente aceptables convencionales referido de manera general como portadores o diluyentes, según sea necesario o deseable. Se pueden utilizar procedimientos convencionales para la preparación de dichas composiciones en formas de dosis apropiadas. Dichos ingredientes y procedimientos incluyen aquellos descritos en las siguientes referencias, cada una de las cuales está incorporada a la presente mediante referencia: Powell, M.F. et al., "Compendium of Excipients for Parenteral Formulations" PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 1998, 52(5), 238-311; Strickley, R. G. "Parenteral Formulations of Small Molecule Therapeutics Marketed in the United States (1999)-Part-1" PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 1999, 53(6), 324-349; y Nema, S. et al., "Excipients and Their Use in Injectable Products" PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 1997, 51 (4), 166-171. Los ingredientes farmacéuticos empleados de manera común que se pueden utilizar como apropiados para formular la composición para su ruta de administración pretendida incluyen: agentes de acidificación (ejemplos incluyen pero no se limitan a ácido acético, ácido cítrico, ácido fumárico, ácido clorhídrico, ácido nítrico); agentes de alcalinización (ejemplos incluyen pero no se limitan a solución de amoníaco, carbonato de amonio, dietanolamina, monoetanolamina, hidróxido de potasio, borato de sodio, carbonato de sodio, hidróxido de sodio, trietanolamina, trolamina); adsorbentes (ejemplos incluyen pero no se limitan a celulosa en polvo y carbón vegetal activado); propulsores de aerosol (ejemplos incluyen pero no se limitan a dióxido de carbono, CCI2F2, F2CIC-CCIF2 y CCIF3); agentes de desplazamiento de aire (ejemplos incluyen pero no se limitan a nitrógeno y argón); conservadores antifungales (ejemplos incluyen pero no' se limitan a ácido benzoico, butilparabeno, etilparabeno, metilparabeno, propilparabeno, bensoato de sodio); conservadores antimicrobiales (ejemplos incluyen pero no se limitan a cloruro de benzalconio, cloruro de bencentonio, alcohol bencílico, cloruro de cetilpiridinio, clorbutanol, fenol, alcohol feniletílico, nitrato de fenilmercúrico y timerosal); antioxidantes (ejemplos incluyen pero no se limitan a ácido ascórbico, palmitato de ascorbilo, hidroxianisol butilado, hidroxitolueno butilado, ácido hipofosforoso, monotioglicerol, propil galato, ascorbato de sodio, bisulfito de sodio, sulfoxilato de formaldehído sódico, metabisulfito de sodio); materiales de enlace (ejemplos incluyen pero no se limitan a polímeros de bloque, hule natural y sintético, poliacrilatos, poliuretanos, siliconas, polisiloxanos y copolímeros de estireno-butadieno); agentes reguladores de pH (ejemplos incluyen pero no se limitan a metafosfato de potasio, fosfato dipotásico, acetato de sodio, citrato de sodio anhidro y dihidrato de citrato de sodio); agentes portadores (ejemplos incluyen pero no se limitan a jarabe de acacia, jarabe aromático, elixir aromático, jarabe de cereza, jarabe de cacao, jarabe de naranja, jarabe, aceite de maíz, aceite mineral, aceite de cacahuate, aceite de ajonjolí, inyección de cloruro de sodio bacteriostático y agua bacteriostática para inyección); agentes quelantes (ejemplos incluyen pero no se limitan a edetato de disodio y ácido edético); colorantes (ejemplos incluyen pero no se limitan a FD&C Rojo No. 3, FD&C Rojo No. 20, FD&C Amarillo No. 6, FD&C Azul No. 2, D&C Verde No. 5, D&C Anaranjado No. 5, D&C Rojo No. 8, caramelo y rojo de óxido férrico); agentes aclarantes (ejemplos incluyen pero no se limitan a bentonita); agentes de emulsificación (ejemplos incluyen pero no se limitan a acacia, cetomacrogol, alcohol cetílico, monoestearato de glicerilo, lecitina, monooleato de sorbitan, monoestearato de polioxietileno 50); agentes de encapsulado (ejemplos incluyen pero no se limitan a gelatina y ftalato de acetato de celulosa); saborizantes (ejemplos incluyen pero no se limitan a aceite de anís, aceite de canela, cacao, mentol, aceite de naranja, aceite de menta y vainilla); humectantes (ejemplos incluyen pero no se limitan a glicerol, propilen glicol y sorbitol); agentes de levigación (ejemplos incluyen pero no se limitan a aceite mineral y glicerina); aceites (ejemplos incluyen pero no se limitan a aceite de maní, aceite mineral, aceite de olivo, aceite de cacahuate, aceite de ajonjolí y aceite vegetal); bases de ungüento (ejemplos incluyen pero no se limitan a lanolina, ungüento hidrofílico, ungüento de polietilen glicol, petrolato, petrolato hidrofílico, ungüento blanco, ungüento amarillo y ungüento de agua de rosas); mejoradores de penetración (suministro transdérmico) (ejemplos incluyen pero no se limitan a alcoholes monohidroxi o polihidroxi, alcoholes mono- o polivalentes, alcoholes grasos saturados o insaturados, esteres grasos saturados o insaturados, ácidos dicarboxílicos saturados o insaturados, aceites esenciales, derivados de fosfatidilo, cefalina, terpenos, amidas, éteres, cetonas y ureas); plastificantes (ejemplos incluyen pero no se limitan a ftalato de dietilo y glicerol); solventes (ejemplos incluyen pero no se limitan a etanol, aceite de maíz, aceite de semilla de algodón, glicerol isopropanol, aceite mineral, ácido oléico, aceite de cacahuate, agua purificada, agua para inyección agua estéril para inyección y agua estéril para irrigación); agentes de refuerzo (ejemplos incluyen pero no se limitan a alcohol cetílico, cera de esteres de cetilo, cera microcristalina, parafina, alcohol estearílico cera blanca y cera amarilla); bases de supositorio (ejemplos incluyen pero no se limitan a manteca de cacao y polietilen glicoles (mezclas)); agentes tensioactivos (ejemplos incluyen pero no se limitan a cloruro de benzalconio, nonoxinol 10, oxtoxinol 9, polisorbato 80, lauril sulfato de sodio y monopalmitato de sorbitan); agentes de suspensión (ejemplos incluyen pero no se limitan a agar, bentonita, carbómeros, carboximetil celulosa de sodio, hidroxietil celulosa, hidroxipropil celulosa, hidroxipropil metilcelulosa, caolín, metilcelulosa, tragacanto y goma vee ["veegum"]); agentes edulcorantes (ejemplos incluyen pero no se limitan a aspartame, dextrosa, glicerol, manitol, propilen glicol, sacarina sódica, sorbitol y sacarosa); anti-adherentes de tableta (ejemplos incluyen pero no se limitan a estearato de magnesio y talco); aglutinantes de tableta (ejemplos incluyen pero no se limitan a acacia, ácido algínico, carboximetilcelulosa de sodio, azúcar comprimible, etilcelulosa, gelatina, glucosa líquida, metilcelulosa, polivinil pirrolidona no entrelazada y almidón pregelatinizado); diluyentes de tableta y cápsula (ejemplos incluyen pero no se limitan a fosfato de calcio dibásico, caolín, lactosa, manitol, celulosa microcristalina, celulosa en polvo, carbonato de calcio precipitado, carbonato de sodio, fosfato de sodio, sorbitol y almidón); agentes de recubrimiento de tableta (ejemplos incluyen pero no se limitan a glucosa líquida, hidroxietil celulosa, hidroxipropil celulosa, hidroxipropil metilcelulosa, metilcelulosa, etilcelulosa, ftalato de acetato de celulosa y goma laca); excipientes de compresión directa de tableta (ejemplos incluyen pero no se limitan a fosfato de calcio dibásico); desintegrantes de tableta (ejemplos incluyen pero no se limitan a ácido algínico, carboximetilcelulosa de calcio, celulosa microcristalina, polacrilin potasio, polivinilpirrolidona entrelazada, alginato de sodio, glicolato de almidón sódico y almidón); glidantes de tableta (ejemplos incluyen pero no se limitan a sílice coloidal, almidón de maíz y talco); lubricantes de tableta (ejemplos incluyen pero no se limitan a estearato de calcio, estearato de magnesio, aceite mineral, ácido esteárico y estearato de zinc); opacadores de tableta/cápsula (ejemplos incluyen pero no se limitan a dióxido de titanio); agentes de pulido de tabletas (ejemplos incluyen pero no se limitan a cera de carnauba y cera blanca); agentes de espesamiento (ejemplos incluyen pero no se limitan a cera de abeja, alcohol cetílico y parafina); agentes de tonicidad (ejemplos incluyen pero no se limitan a dextrosa y cloruro de sodio); agentes de incremento de viscosidad (ejemplos incluyen pero no se limitan a ácido algínico, bentonita, carbómeros, carboximetilcelulosa de sodio, metilcelulosa, polivinilpirrolidona, alginato de sodio y tragacanto); y agentes de humectación (ejemplos incluyen pero no se limitan a heptadecaetilen oxicetanol, lecitinas, monooleato de sorbitan, monooleato de polioxietilen sorbitol, y estearato de polioxietileno). La cantidad total del ingrediente activo que se va a administrar variará de manera general desde aproximadamente 0.001 mg/kg hasta aproximadamente 200 mg/kg, y de preferencia desde aproximadamente 0.01 mg/kg hasta aproximadamente 20 mg/kg de peso corporal por día. Una dosis unitaria puede contener desde aproximadamente 0.5 mg hasta aproximadamente 1500 mg de ingrediente activo, y puede ser administrada una o más veces al día. Para todos los regímenes de uso descritos en la presente para compuestos de la Fórmula I, el régimen de dosis oral diaria será de preferencia desde 0.001 hasta 200 mg/kg el peso corporal total. La dosis diaria para administración mediante inyección, incluyendo inyecciones intravenosas, intramusculares, subcutáneas y parenterales, y el uso de técnicas de infusión será de manera preferible desde 0.01 hasta 200 mg/kg del peso corporal total. El régimen de dosis rectal diaria será de preferencia desde 0.01 hasta 200 mg/kg del peso corporal total. El régimen de dosis vaginal diaria será de manera preferible desde 0.01 hasta 200 mg/kg del peso corporal total. El régimen de dosis tópica diaria será de manera preferible desde 0.01 hasta 200 mg/kg administrada de una a cuatro veces diariamente. La concentración transdérmica será preferiblemente aquella requerida para mantener una dosis diaria desde 0.01 hasta 200 mg/kg. El régimen de dosis de inhalación diaria será de manera preferible desde 0.01 hasta 100 mg/kg del peso corporal total. Esos regímenes de dosis se pueden lograr con múltiples dosis durante un solo día o dosis prolongadas, tales como aquellas dadas en una base semanal o mensual. En base a las técnicas de laboratorio estándar conocidas para evaluar los compuestos útiles para el tratamiento de padecimientos hiper-proliferativos, mediante pruebas de toxicidad estándar y por medio de ensayos farmacológicos estándar para la determinación de tratamiento de las condiciones identificadas arriba en mamíferos, y mediante la comparación de esos resultados con los resultados de medicamentos conocidos que son utilizados para tratar esas condiciones, la dosis efectiva de los compuestos de esta ¡nvención puede ser determinada con facilidad para el tratamiento de cada indicación deseada. La cantidad del ingrediente activo que se va a administrar en el tratamiento de una de esas condiciones puede variar ampliamente de acuerdo con consideraciones tales como el compuesto particular y la unidad de dosis empleados, el modo de administración, el período de tratamiento, la edad y género del paciente tratado, y la naturaleza y la extensión de la condición tratada. Aquellos con experiencia en la técnica apreciarán que el método particular de administración dependerá de una variedad de factores, todos los cuales son considerados en forma rutinaria cuando se administran agentes terapéuticos. Alguien con experiencia en la técnica apreciará también que el nivel de dosis específico para un paciente determinado depende de una variedad de factores, incluyendo actividad específica del compuesto administrado, edad, peso corporal, salud, sexo, dieta, hora y ruta de administración, velocidad de excreción, etc. Alguien con experiencia en la técnica apreciará también que el curso de tratamiento óptimo, es decir el modo de tratamiento y el número diario de dosis de un compuesto de la Fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para un número definido de días, pueden ser determinados por aquellos con experiencia en la técnica utilizando pruebas de tratamiento convencionales.

Sin embargo, se comprenderá que el nivel de dosis específico para cualquier paciente particular dependerá de una variedad de factores, incluyendo la actividad del compuesto específico empleado, la edad, el peso corporal, la salud general, sexo, dieta, hora de administración, ruta de administración y velocidad de excreción, combinación de fármaco y la severidad de la condición que recibe la terapia. Alguien con experiencia en la técnica apreciará también que el curso óptimo de tratamiento, es decir, el modo de tratamiento y el número diario de dosis de un compuesto de esta invención dado por un número de días definido, pueden ser determinados por aquellos con experiencia en la técnica utilizando pruebas de tratamiento convencionales. Las preparaciones específicas de esta invención ya están descritas en la literatura de patente, y se pueden adaptar para los compuestos de la presente invención, por ejemplo, Riedl, B., et al, "O-Carboxy Aryl Substituted Diphenyi Ureas as raf Kinase Inhibitors" PCT Int. Appl. WO 42012, Riedl, B., et al, "O-Carboxy Aryl Substituted Diphenyl Ureas as p38 Kinase Inhibitors" PCT Int. Appl. WO 00/41698 incorporadas a la presente mediante referencia. Las composiciones farmacéuticas de acuerdo con la presente invención se pueden ilustrar como sigue: Solución Estéril IV: Una solución de 5 mg/ml del compuesto deseado de esta invención es elaborada utilizando agua inyectable estéril, y se ajusta el pH si es necesario. La solución es diluida para administración hasta 1 - 2 mg/ml con dextrosa 5% estéril y es administrada como una infusión IV durante 60 minutos.

Polvo liofilizado para administración IV: Una preparación estéril puede ser preparada con (i) 100 - 1000 mg del compuesto deseado de esta invención como un polvo liofilizado, (ii) 32-327 mg/ml de citrato de sodio, y (iii) 300 - 3000 mg de Dextran 40. La formulación es reconstituida con solución salina inyectable, estéril o dextrosa 5% para una concentración de 10 hasta 20 mg/ml, la cual es diluida adicionalmente con solución salina o dextrosa al 5% hasta 0.2 - 0.4 mg/ml, y es administrada ya sea como bolo IV o mediante infusión IV durante 15 - 60 minutos.

Suspensión Intramuscular: La siguiente solución o suspensión puede ser preparada para inyección intramuscular: 50 mg/ml del compuesto insoluble en agua deseado de esta invención 5 mg/ml carboximetilcelulosa sódica 4 mg/ml TWEEN 80 9 mg/ml cloruro de sodio 9 mg/ml alcohol bencílico Cápsulas de Capa Dura: un gran número de cápsulas unitarias son preparadas mediante llenado de cápsulas de gelatina dura de dos piezas estándares cada una con 100 mg de ingrediente activo en polvo, 150 mg de lactosa, 50 mg de celulosa y 6 mg de estearato de magnesio.

Cápsulas de Gelatina Suave: Una mezcla de ingrediente activo en un aceite digerible tal como aceite de frijol de soya, aceite de semilla de algodón o aceite de olivo se prepara e inyecta por medio de una bomba de desplazamiento positivo en gelatina fundida para formar cápsulas de gelatina suave que contienen 100 mg del ingrediente activo. Las cápsulas son lavadas y secadas. El ingrediente activo puede ser disuelto en una mezcla de polietilen glicol, glicerina y sorbitol para preparar una mezcla de medicina miscible en agua.

Tabletas: Un gran número de tabletas son preparadas a través de procedimientos convencionales de manera que la unidad de dosis fue de 100 mg de ingrediente activo, 0.2 mg de dióxido de sílice coloidal, 5 mg de estearato de magnesio, 275 mg de celulosa microcristalina, 11 mg de almidón, y 98.8 mg de lactosa. Los recubrimientos acuosos y no acuosos apropiados pueden ser aplicados a fin de Incrementar el carácter apetecible, mejorar la elegancia y la estabilidad o retardo de absorción.

Tabletas/Cápsulas de Liberación Inmediata: Estas son formas de dosis oral sólidas hechas a través de procesos convencionales y novedosos. Estas unidades son tomadas oralmente sin agua para disolución inmediata y suministro del medicamento. El ingrediente activo es mezclado en un líquido que contiene un ingrediente tal como azúcar, gelatina, pectina y edulcorantes. Estos líquidos son solidificados en tabletas sólidas o caplets mediante secado por congelación y técnicas de extracción de estado sólido. Los compuestos de fármaco pueden ser comprimidos con azúcares y polímeros viscoelásticos y termoelásticos, componentes efervescentes para producir matrices porosas destinadas para liberación inmediata, sin la necesidad de agua. Los métodos para la preparación de los compuestos de esta invención también se describen en las siguientes solicitudes de los Estados Unidos de Norteamérica: 09/425,228, presentada el 22 de Octubre de 1999; 09/722,418, presentada el 28 de noviembre de 2000 09/758,547, presentada el 12 de enero de 2001 ; 09/838,285, presentada el 20 de abril de 2001 ; 09/838,286, presentada el 20 de abril de 2001; y La descripción completa de todas las solicitudes, patentes y publicaciones antes citadas y a continuación están incorporadas a la presente mediante referencia. Los compuestos pueden ser producidos a partir de compuestos conocidos (o a partir de materiales de partida que, a su vez, pueden ser producidos a partir de compuestos conocidos), por ejemplo, a través de métodos de preparación generales mostrados a continuación. La actividad de un compuesto determinado para inhibir raf quinasa pude ser probada de manera rutinaria, por ejemplo, de acuerdo con los procedimientos descritos a continuación. Los siguientes ejemplos son solamente para fines ilustrativos y no están destinados, ni serán interpretados como limitantes de la invención en forma alguna.

EJEMPLOS Todas las reacciones son ejecutadas en material de vidrio secado por flama o secado en horno bajo una presión positiva de argón seco o nitrógeno seco y fueron agitadas en forma magnética a menos que se indique de otra manera. Los líquidos y soluciones sensibles fueron transferidos por medio de jeringa o cánula, e introducidos en los recipientes de reacción a través de septos de hule. A menos que se establezca lo contrario, el término "concentración bajo presión reducida" se refiere al uso de un evaporador giratorio Buchi a aproximadamente 15 mm Hg. A menos que se establezca lo contrario, el término 'bajo alto vacío' se refiere a un vacío de 0.4-1.0 mm Hg. Todas las temperaturas son reportadas sin corrección en grados Celsius (°C). A menos que se indique lo contrario, todas las partes y porcentajes están en peso. Los reactivos y solventes de grado comercial fueron utilizados sin purificación adicional. N-ciclohexil-N'-(metilpoliestiren) carbodiimida fue adquirida de Calbiochem-Novabiochem Corp. 3-ter-Butilanilina, 5-ter-butil-2-metoxianilina, 4-bromo-3-(trifluorometil) anilina, 4-cloro-3-(trifluorometil)an¡lina 2-metoxi-5-(trifluorometil) anilina, 4-ter-butil-2-nitroanilina, 3-amino-2-nafthol, etil 4-isocianatobenzoato, N-acetil-4-cloro-2-metoxi-5-(trifluorometil)anilina e isocianato de 4-cloro-3-(trifluorometil)fenilo fueron adquiridos y utilizados sin purificación adicional. Las síntesis de 3-amino-2-metoxiquinolina (E. Cho et al. WO 98/00402; A. Cordi et al. EP 542,609; IBID Bioorg Med.Chem. 3, 1995, 129), 4-(3-carbamoilfenoxi)-1 -nitrobenceno (K. Ikawa Yakugaku Zasshi 79, 1959, 760; Chem. Abst. 53, 1959, 12761b), 3-ter-butilfenilo isocianato (O. Rohr et al. DE 2,436,108) y 2-metoxi-5-(trifluorometil)fenilo isocianato (K. Inukai et al. JP 42,025,067; IBID Kogyo Kagaku Zasshi 70, 1967, 491) han sido descritos previamente. La cromatografía de capa delgada se ejecutó (TLC) utilizando placas de gel de sílice con respaldo de vidrio pre-recubiertas Whatman 60A F-254 250 µm. La visualización de las placas se efectuó a través de una o más de las siguientes técnicas: (a) iluminación ultravioleta, (b) exposición a vapor de yodo, (c) inmersión de la placa en una solución al 10% de ácido fosfomolíbdico en etanol seguida por calentamiento, (d) inmersión de la placa en una solución de sulfato de cerio seguida por calentamiento, y/o (e) inmersión de la placa en una solución de etanol ácido de 2,4-dinitrofenilohidrazina seguida por calentamiento. La cromatografía de columna (cromatografía instantánea) se ejecutó utilizando gel de sílice de 230-400 mallas EM Science®. Los puntos de fusión (mp) se determinaron utilizando un aparato de punto de fusión Thomas-Hoover o un aparato de punto de fusión automatizado Mettier FP66 y no se corrigieran. Los espectros infrarrojos de transformación Fourier se obtuvieron utilizando un espectrofotómetro Mattson 4020 Galaxy Series. Los espectros de resonancia magnética nuclear (NMR) de Protón (1H) se midieron con un espectrómetro General Electric GN-Omega 300 (300 MHz) ya sea con Me4Si (d 0.00) o solvente protonado residual (CHCI3 d 7.26; MeOH d 3.30; DMSO d 2.49) como estándar. Los espectros NMR de carbono (13C) fueron medidos con un espectrómetro General Electric GN-Omega 300 (75 MHz) con solvente (CDCI3 d 77.0; MeOD-d3; d 49.0; DMSO-d6 d 39.5) como estándar. Los espectros de masa de baja resolución (MS) y los espectros de masa de alta resolución (HRMS) se obtuvieron como espectro de masa de impacto de electrón (El) o como espectros de masa de bombardeo atómico rápido (FAB). Los espectros de masa de impacto de electrón (EI-MS) se obtuvieron con un espectrómetro de masa Hewlett Packard 5989A equipado con una Sonda de Ionización Química de Deserción Vacumétrica para introducción de muestra. La fuente de ion se mantuvo a 250°C. La ionización de impacto de electrón se ejecutó con energía de electrón de 70 eV y corriente de trampa de 300 µA. Los espectros de masa de ion secundario de cesio líquido (FAB- MS), una versión actualizada del bombardeo atómico rápido se obtuvieron utilizando un espectrómetro Kratos Concept 1-H. los espectros de masa de ionización química (CI-MS) se obtuvieron utilizando un Hewlett Packard MS-Engine (5989A) con metano o amoniaco como el gas reactivo (1 x 10"4 torr para 2.5 x 10"4 torr). La sonda de ionización química de desorción de inserción directa (DCI) (Vaccumetrics, Inc.) fue elevada desde 0-1.5 amps en 10 segundos y mantenida a 10 amps hasta que desaparecieron todas las trazas de muestra (~1-2 min). Los espectros fueron examinados desde 50-800 amu a 2 segundos por examinación. Los espectros de masa HPLC-electroaspersión (HPLC ES-MS) se obtuvieron utilizando una Hewlett-Packard 1100 HPLC equipada con una bomba cuaternaria, un detector de longitud de onda variable, una columna C-18, y un espectrómetro de masa de trampa de ion Finnigan LCQ con ionización de electroaspersión. Los espectros fueron examinados desde 120-800 amu utilizando un tiempo de ion variable de acuerdo con el número de iones en la fuente. Los espectros de masa de cromatografía de gas-ion selectivo (GC-MS) se obtuvieron con un cromatógrafo de gas Hewlett Packard 5890 equipado con una columna de metil silicona HP-1 (0.33 mM recubrimiento; 25 m x 0.2 mm) y un Detector Selectivo de Masa Hewlett Packard 5971 (energía de ionización 70eV). Los análisis elementales fueron conducidos por Robertson Microlit Labs, Madison NJ. Todos los compuestos exhibieron espectros NMR, LRMS y análisis elemental o HRMS compatibles con las estructuras asignadas.

Lista de Abreviaturas y Acrónimos: AcOH ácido acético anh anhidro atm atmósfera(s) BOC ter-butoxicarbonilo CDI 1 , 1 '-carbonildiimidazol conc concentrado d día(s) dec descomposición DMAC N,N-dimetilacetamida DMPU 1 ,3-dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(1H)-pirimidinona DMF N,N-dimetilformamida DMSO dimetilsulfoxido DPPA difenilofosforil azida EDCI 1 -(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida EtOAc acetato de etilo EtOH etanol (100%) Et2O éter de dietilo Et3N trietilamina h hora(s) HOBT 1-hidroxibenzotriazol m-CPBA ácido 3-cloroperoxibenzóico MeOH metanol pet. ether éter de petróleo (rango de ebullición 30-60°C) temp. temperatura THF tetrahidrofurano TFA trifluoroAcOH Tf trifluorometansulfonilo.

Los siguientes métodos generales están descritos en la solicitud copendiente de número de serie 09/948,915, presentada el 10 de septiembre de 2001 , y está incorporada a la presente mediante referencia.

A. General Methods for Synthesis of Substituted Anilines, páginas 18-43, B. Synthesis of Urea Precursors, página 43, C. Methods of Urea Formation, páginas 44-51 y D. Interconversion of Ureas, páginas 52-56.

EJEMPLO A N-[4-cloro-3-(tr¡fluorometil)fenil]-N'-{4-[2-carbamo¡l-(4-iridiloxi)]fenil}urea Etapa 1 : Preparación de 4-cloro-2-piridincarboxamida A una mezcla agitada de hidrocloruro de metil-4-cloro-2-piridinacarboxilato (1.0 g, 4.81 mmol) disuelta en amoniaco acuosos concentrado (32 mL) se agregó cloruro de amonio (96.2 mg, 1.8 mmol, 0.37 equiv.), y la mezcla de reacción heterogénea fue agitada a temperatura ambiente durante 16h. La mezcla de reacción fue vertido en EtOAc (500 mL) y agua (300 mL). La capa orgánica fue lavada con agua (2 x 300 mL) y una solución de NaCI saturada (1 x 300 mL), secada (MgS04), concentrada en vacío para dar 4-cloro- 2-piridinacarboxamida como un sólido de color beige (604.3 mg, 80.3%): TLC (50% EtOAc/hexano) Rf 0.20; 1H-NMR (DMSO-d6) d 8.61 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.20 (amplio s, 1H), 8.02 (d, J = 1.8 Hz, 1 H), 7.81 (amplio s, 1H), 7.76 to 7.73 (m, 1H).

Etapa 2: Preparación de 4-(4-aminofenoxi)-2-piridincarboxamida A 4-aminofenol (418 mg, 3.83 mmol) en DMF anh (7.7 mL) se agregó ter-butoxido de potasio (447 mg, 3.98 mmol, 1.04 equiv.) en una porción. La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 2h, y una solución de 4-cloro-2piridincarboxamida (600 mg, 3.83 mmol, 1.0 equiv.) en DMF anh (4 mL) se agregó después. La mezcla de reacción fue agitada a 80°C durante 3 días y vertido en una mezcla de EtOAc y una solución NaCI saturada. La capa orgánica fue lavada secuencialmente con una solución de NH4CI saturada después una solución NaCI saturada, secada (MgS04), y concentrada bajo presión reducida. El producto crudo fue purificado utilizando cromatografía MPLC (Biotage®; gradiente desde 100% EtOAc seguido por 10% MeOH/50% EtOAc/40% hexano) para dar el 4-cloro-5-trifluorometilanilina como un sólido de color café (510 mg, 58%).1H-NMR (DMSO-d6) d 8.43 (d, J = 5.7 Hz, 1 H), 8.07 (br s,1H), 7.66 (br s, 1 H), 7.31 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.07 (dd, J = 5.7 Hz, 2.7 Hz,1 H), 6.85 (d,J = 9.0 Hz, 2 H), 6.62 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 5.17 (amplio s, 2H); HPLC EI-MS m/z 230((M+H)+. Etapa 3: Preparación de N-[4-cloro-3-(trifluorometil)feniI]-N'-{4-[2-carbamoil-(4piridiloxi)]fenil} urea Una mezcla de 4-cloro-5-trifluorometilanilina (451 mg, 2.31 mmol, 1.1 equiv.) y 1 ,1' carbonil diimidazol (419 mg, 2.54 mmol, 1.2 equiv.) en dicloroetano anh (5.5 mL) fue agitada bajo argón a 65°C durante 16 h. Una vez enfriada a temperatura ambiente, se agregó una solución de 4-(4-aminofenoxi)-2-piridincarboxamida (480 mg, 2.09 mmol) en THF anh (4.0 mL), y la mezcla de reacción fue agitada a 60°C durante 4 h. La mezcla de reacción fue vertida en EtOAc, y la capa orgánica fue lavada con agua (2x) y una solución de NaCI saturada (1x), secada (MgSO4), filtrada, y evaporada en vacío. La purificación utilizando cromatografía MPLC (Biotage®; gradiente desde 100% EtOAc hasta 2% MeOH/EtOAc) dio N-[4-cloro-3-(trifluorometil)fenil]-N'-{4-[2-carbamoil-(4-piridiloxi)]fenil} urea como un sólido blanco (770 mg, 82%): TLC (EtOAc) Rf 0.11 , 100% acetato de etilo 1H-NMR (DMSO- d6) d 9.21 (s, 1 H), 8.99 (s, 1H), 8.50 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 8.11 (s, 1H), 8.10 (s, 1 H), 7.69 (amplio s, 1 H), 7.64 (dd,J = 8.2 Hz, 2.1 Hz, 1 H), 7.61 (s, 1H), 7.59 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.39 (d, J = 2.5 Hz,1 H), 7.15 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.14 (m, 1 H); MS LC-MS (MH+ = 451). Anal, caled para C2oH14CIF3N403: C 53.29% H 3.13% N 12.43%. Encontrado: C 53.33% H 3.21% N 12.60%.

EJEMPLO B N-[4-cloro-3-(trifluorometil)fen¡l]-N'-{4-[2-N-met¡lcarbamoil-4-piridiloxi]fenil} urea Etapa 1 : 4-Cloro-N-metil-2-piridincarboxamida es sintetizada primero a partir de cloruro de 4-cloropiridina-2-carbonilo mediante la adición de sal HCl de cloruro de 4-cloropiridina-2-carbonilo (7.0 g, 32.95 mmol) en porciones a una mezcla de una solución de 2.0 M metilamina en THF (100 mL) y MeOH (20 mL) a 0°C. La mezcla resultante es almacenada a 3°C durante 4 h, concentrada después bajo presión reducida. Los sólidos casi secos resultantes son suspendidos en EtOAc (100 mL) y filtrados. El filtrado es lavado con una solución saturada de NaCI (2 x 100mL), secado (Na2SO4) y concentrado bajo presión reducida para proporcionar 4-cloro-N-met¡l-2-piridincarboxamida como un sólido cristalino de color amarillo.

Etapa 2: Una solución de 4-aminofenol (9.60 g, 88.0 mmol) en DMF anh (150 mL) es tratada con ter-butoxido de potasio (10.29 g, 91.7 mmol), y la mezcla de color café rojizo es agitada a temperatura ambiente durante 2 h. Los contenidos son tratados con 4-cloro-N-metil-2-piridincarboxamida (15.0 g, 87.9 mmol) de la etapa 1 y K2CO3 (6.50 g, 47.0 mmol) y después calentados a 80°C durante 8 h. La mezcla es enfriada a temperatura ambiente y separada entre EtOAc (500 mL) y una solución de NaCL saturada (500 mL). La fase acuosa es retro-extraída con EtOAc (300 mL). Las capas orgánicas combinadas son lavadas con una solución de NaCI saturada (4 x 1000 mL), secadas (Na2S0 ) y concentradas bajo presión reducida. Los sólidos resultantes son secados bajo presión reducida a 35°C durante 3 h para obtener 4-(2-(N-metilcarbamoil)-4-piridiloxi) anilina como un sólido de color café claro. 1H-NMR (DMSO-d6) d 2.77 (d,J=4. 8 Hz, 3H), 5.17 (br s, 2H), 6.64, 6.86 (AA'BB' cuarteto, J = 8.4 Hz, 4H), 7.06 (dd, J=5. 5,2. 5 Hz, 1 H), 7.33 (d, J=2. 5 Hz, 1 H), 8.44 (d, J=5. 5 Hz,1 H), 8.73 (br d,1 H); HPLC ES-MS m/z 244 ((M+H)+).

Etapa 3: Una solución de isocianato de 4-cloro-3-(trifluorometil)fenilo (14.60 g, 65.90 mmol) en CH2CI2 (35 mL) es agregada por goteo a una suspensión de 4-(2-(N-metilcarbamoil)-4-piridiloxi) anilina de la Etapa 2; (16.0 g, 65.77 mmol) in CH2CI2 (35 mL) a 0°C. La mezcla resultante es agitada a temperatura ambiente durante 22 h. Los sólidos de color amarillo resultantes son retirados mediante filtración, lavados después con CH2CI2 (2 x 30 mL) y secados bajo presión reducida (aproximadamente 1 mm Hg) para dar N-(4-cloro-3-(trifluorometil)fenil)-N'-(4-(2-N-metilcarbamoil)-4-pirid¡loxi)fenil) urea como un sólido blanquecino: mp 207-209 C; 1H-NMR (DMSO-d6) d 2.77 (d, J=4. 8 Hz, 3H), 7.16 (m, 3H), 7.37 (d, J = 2.5 Hz, 1 H), 7.62 (m, 4H), 8.11 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 5.5 Hz, 1 H), 8.77 (br d,1 H), 8.99 (s, 1H), 9.21 (s, 1 H); HPLC ES-MS m/z 465 ((M+H)+).

EJEMPLO C N-[2-metox¡-5-(tr¡fluorometil)fenil]-N'-{4-[2-N-metilcarbamoil-4- piridiloxi]fenil} urea Etapa 1 : 4-Cloro-N-metil-2-piridincarboxam¡da es sintetizada primero a partir de cloruro de 4-cloropiridina-2-carbonilo mediante la adición de sal HCl de cloruro de 4-cloropiridina-2-carbonilo (7.0 g, 32.95 mmol) en porciones a una mezcla de una solución de 2.0 M metilamina en THF (100 mL) y MeOH (20 mL) a 0°C. La mezcla resultante es almacenada a 3°C durante 4 h, concentrada después bajo presión reducida. Los sólidos casi secos resultantes son suspendidos en EtOAc (100 mL) y filtrados. El filtrado es lavado con solución de NaCI saturada (2 x 100mL), secado (Na2SO4) y concentrado bajo presión reducida para proporcionar 4-cloro-N-metil-2-piridincarboxamida como un sólido cristalino amarillo.

Etapa 2: Una solución of 4-aminofenol (9.60 g, 88.0 mmol) en DMF anh (150 mL) es tratada con ter-butoxido de potasio (10.29 g, 91.7 mmol), y la mezcla de color café rojizo es agitada a temperatura ambiente durante 2 h. Los contenidos son tratados con 4- cloro-N-metil-2-piridincarboxamida (15.0 g, 87.9 mmol) de la Etapa 1 y K2CO3 (6.50 g, 47.0 mmol) y calentados después a 80°C durante 8 h. La mezcla es enfriada a temperatura ambiente y separada entre EtOAc (500 mL) y una solución de NaCI saturada (500 mL). La fase acuosa es retro-extraída con EtOAc (300 mL). Las capas orgánicas combinadas son lavadas con una solución de NaCI saturada (4 x 1000 mL), secadas (Na2SO4) y concentradas bajo presión reducida. Los sólidos resultantes son secados bajo presión reducida a 35°C durante 3 h para obtener 4-(2-(N-metilcarbamoil)-4-piridilox¡) anilina como un sólido de color café claro. 1H-NMR (DMSO-d6) d 2.77 (d, J=4.8 Hz, 3H), 5.17 (br s, 2H), 6.64, 6.86 (AA'BB' cuarteto, J=8. 4 Hz, 4H), 7.06 (dd, J=5.5, 2.5 Hz, 1H), 7.33 (d, J=2.5 Hz, 1H), 8.44 (d, J=5.5 Hz, 1H), 8.73 (br d, 1H); HPLC ES-MS m/z 244 ((M+H)+).

Etapa 3: A una solución de 2-metoxi-5-(trif luorometil) anilina (0.15 g) en CH2CI2 anh (15 mL) a 0°C se agregó CDI (0.13 g). La solución resultante se deja calentar hasta temperatura ambiente durante 1 h, es agitada a temperatura ambiente durante 16 h, después es tratada con 4-(2-(N-metilcarbamoil)-4-piridilox¡) anilina (0.18 g) de la Etapa 2. La solución de color amarillo resultante es agitada a temperatura ambiente durante 72 h, después es tratada con H2O (125 mL). La mezcla acuosa resultante es extraída con EtOAc (2 x 150 mL). Los elementos orgánicos combinados son lavados con una solución de NaCI saturada (100 mL), secados (MgS04) y concentrados bajo presión reducida. El residuo es triturado (90% EtOAc/10% hexano). Los sólidos de color blanco resultantes son recolectados mediante filtración y lavados EtOAc. El filtrado es concentrado bajo presión reducida y el aceite residual purificado mediante cromatografía de columna (gradiente desde 33% EtOAc/67% hexano hasta 50% EtOAc/50% hexano hasta 100% EtOAc) para dar N-(2-metoxi-5-(trifluorometil)fenil)-N'-(4-(2-(N-metilcarbamoil)-4- piridiloxi)fenil) urea como un sólido de color marrón claro: TLC (100% EtOAc) Rf 0.62; 1H NMR (DMSO-d6) d 2.76 (d, J=4.8 Hz, 3H), 3.96 (s, 3H), 7.1-7. 6 y 8.4-8.6 (m,11H), 8.75 (d, J=4.8 Hz, 1H), 9.55 (s, 1 H); FAB-MS m/z 461 ( (M+H)+). A continuación se listan los compuestos mencionados en los Cuadros siguientes que han sido sintetizados de acuerdo con los Procedimientos Experimentales Detallados proporcionados con anterioridad: Síntesis de Compuestos Ejemplificados La síntesis de los compuestos ejemplificados se describe de manera más particular en la Solicitud de Patente de los Estados Unidos de Norteamérica No. 20020042517, publicada el 11 de abril de 2002.

Cuadros Los compuestos listados en los Cuadros 1-6 a continuación fueron sintetizados de acuerdo con los métodos generales antes mostrados, y los procedimientos ilustrativos más detallados descritos en la Solicitud de Patente de los Estados Unidos de Norteamérica No. 20020042517, publicada el 11 de abril de 2002.

Cuadro 1. 3-tert-Butilfenilo Ureas Cuadro 2. 5-ter-butil-2-metoxifenil Ureas Cuadro 3. 5-(Trifluorometil)-2-metoxifenil Ureas Cuadro 4. 3- (Trifluorometil)-4-clorofenil Ureas Cuadro 5. 3-(trifluorometil)4-bromofenil Ureas Cuadro 6. 5-(Trifluorometíl)-4-cloro-2-metoxifenil Ureas Cuadro 7. Ureas Adicionales Los compuestos seleccionados se mencionan a continuación A partir de WO 2000/41698 Los compuestos listados a continuación son adecuados para el uso en esta invención y su síntesis está descrita con mayor particularidad en WO 2002/85859 No. de Entrada Nombre y WO 2002/85857 No. de Entrada Nombre Las siguientes publicaciones se refieren a inhibición de VEGFR-3 inhibición y están incorporadas en la presente para su descripción de estados de enfermedad mediada por VEGFR-3 y ensayos para determinar dicha actividad.

W095/33772 Alitalo, et. al. W095/33050 Charnock-Jones, et. al. W096/39421 Hu, et. al. W098/33917 Alitalo, et. al. W002/057299 Alitalo, et. al.

W002/060950 Alitalo, et. al. W002/081520Boesen, et. al.

Las siguientes publicaciones se refieren a la inhibición de VEGFR-2 y están incorporadas en la presente para su descripción de estados de enfermedad mediada por VEGFR-2 y ensayos para determinar dicha actividad.

EP0882799 Hanai, et. al. EP1167384 Ferraram, et, al. EP1086705 Sato, et. al. EP11300032 Tesar, et. al. EP1166798 Haberey, et. al. EP1166799 Haberey, et. al. EP1170017 Maini, et. al. EP1203827 Smith W002/083850 Rosen, et. al.

Las siguientes publicaciones se refieren a la inhibición de FLT-3 y están incorporadas en la presente para su descripción de estados de enfermedad mediada por FLT-3 y ensayos para determinar dicha actividad. 2002/0034517Brasel, et. al. 2002/0107365Lyman, et. al. 2002/0111475Graddis, et. al. EP0627487 Beckermann, et. al.

W09846750 Bauer, et. al. W09818923 McWherter, et. al. W09428391 Beckermann, et al. W09426891 Birnbaum, et. al. Las siguientes patentes y publicaciones se refieren a la inhibición de PDGF/PDGFR y están incorporadas en la presente para su descripción de estados de enfermedad mediada por PDGFR-beta y ensayos para determinar dicha actividad. ,094,941 Hart, et. al. 5,371 ,205 Kelly, et. al. 5,418,135 Pang 5, 444,151 Vassbotn, et. al. 5,468,468 LaRochelle, et. al. 5,567,584 Sledziewski, et. al. 5,618,678 Kelly, et. al. 5,620,687 Hart, et. al. 5,648,076 Ross, et. al. 5, 668,264 Janjic, et. al. 5,686,572 Wolf, et. al. 5,817,310 Ramakrishnan, et. al. 5,833,986 LaRochelle, et. al. 5,863,739 LaRochelle, et. al. 5,872,218 Wolf, et. al. 5,882,644 Chang, et. al. 5,891 ,652 Wolf, et. al. ,976,534 Hart, et. al. ,990,141 Hirth, et. al. 6,022,854 Shuman 6, 043,211 Williams, et. al. 6,110,737 Escobedo, et. al. 6,207,816B1 Gold, et. al. 6,228,600B1 Matsui, et. al. 6,229,002B1 Janjic, et. al. 6,316,603B1 McTigue, et. al. 6,372,438B1 Williams, et. al. 6,403,769B 1 La Rochelle, et. al. 6,440,445B1 Nowak, et. al. 6,475,782B1 Escobedo, et. al. W002/083849 Rosen, et. al. W002/083704 Rosen, et. al. W002/081520Boesen, et. al. W002/079498Thomas, et. al. W002/070008 Rockwell, et. al. W009959636 Sato, et. al. W009946364 Cao, et. al. W009940118 Hanai, et. al. W09931238 Yabana, et. al. W09929861 Klagsbrun, et. al. W09858053 Kendall, et. al. W09851344 Maini, et. al.

W09833917 Alitalo, et. al. W09831794 Matsumoto, et. al.

W09816551 Ferrara, et. al. W09813071 Kendall, et al. W09811223 Martiny-Baron, et. al.

W09744453 Chen, et.al. W09723510 Plouet, et. al. W09715662 Stinchcomb, et. al.

W09708313 Ferrara, et. al. W09639515 Cao, et. al. W09623065 Smith, et. al. W09606641 Fleurbaaij, et. al.

W09524473 Cao, et. al. W09822316 Kyowa W09521868 Rockwell, et. al.

W002/060489X¡a, et. al.

PDGFR-beta EP0869177 Matsui, et. al. W009010013 Matsui, et. al. W09737029 Matsui, et. al.

PDGFR-alfa EP1000617 Lammers, et. al. EP0869177 Matsui, et. al. EP0811685 Escobedo, et. al.

Las siguientes publicaciones se refieren a la inhibición de PDGF/PDGFR y están incorporadas en la presente para su descripción de estados de enfermedad mediada por FGFR y ensayos para determinar dicha actividad. ,191 ,067 Lappi, et. al. 5,288,855 Bergonzoni, et. al. 5,459,015 Janjic, et. al. 5,478,804 Calabresi, et. al. 5,576,288 Lappi, et. al. 5,639,868 Janjic, et. al. 5,648,076 Ross, et. al. 5,670,323 Nova, et. al. 5,676,637 Lappi, et. al. 5,707,632 Williams, et. al. 5,744,313 Williams, et. al. 5,789,182 Yayon, et. al. 5,789,382 Wellstein 5,843,893 Courtois 5,891 ,655 Omitz 5,965,132 Thorpe, et. al. 6,051 ,230 Thorpe, et. al. 6,350,593B1 Williams, et. al.

Bioquímica y ejemplos celulares 1. c-Raf(Raf-l) Ensayo Bioquímico El ensayo bioquímico c-Raf fue ejecutado con una enzima c-Raf que fue activada (fosforilatada) medíante Lck quínasa. Lck-activada c-Raf(Lck/c-Raf) fue producida en células de insecto Sf9 mediante co-infección de células con baculovirus que expresan, bajo el control del promotor de tepolihedrina, GST-c-Raf (a partir del amino ácido 302 hasta el amino ácido 648) y Lck (longitud total). Ambos baculovirus fueron utilizados en la multiplicidad de la de infección de 2.5 y las células fueron cultivadas 48 horas después de la infección. La proteína MEK-1 fue producida en células de insecto Sf9 mediante infección de células con el baculovirus que expresa la proteína de fusión GST-MEK-1 (longitud total) en la multiplicidad de la infección de 5 y se cultivaron las células 48 horas después de la infección. Se utilice el procedimiento de purificación similar para GST-c-Raf 302-648 y GST-MEK-1. Las células transfectadas fueron suspendidas en 100 mg de biomasa celular húmeda por mL en un regulador de pH que contiene 10 mM fosfato de sodio, 140 mM cloruro de sodio pH 7.3, 0.5% Tritón X-100 y el cocktail de inhibición de proteasa. Las células fueron alteradas con el homogenizador Polytron y centrifugadas 30,000 g durante 30 minutos. El sobrenadante 30,000 g fue aplicador sobre GSH-Sefarosa. La resina fue lavada con un regulador de pH que contiene 50 mM Tris, pH 8.0, 150mM NaCI y 0.01% Tritón X-100. Las proteínas GST-etiquetadas fueron eluidas con una solución que contiene 100 mM Glutationa, 50 mM Tris, pH 8.0, 150 mM NaCI y 0.01% Tritón X-100. Las proteínas purificadas fueron dializadas en un regulador de pH que contiene 20 mM Tris, pH 7.5, 150 mM NaCI y 20% Glicerol. Los compuestos de prueba fueron diluidos de manera serial en DMSO utilizando diluciones triples para concentraciones de existencia que varían en forma común desde 50 µM hasta 20 nM (concentraciones finales en el rango de ensayo desde 1 µM to 0.4 nM). El ensayo bioquímico c-Raf fue ejecutado como un ensayo de malla de filtro radioactivo en placas de polipropileno Costar de 96-pozos (Costar 3365). Las placas fueron cargadas con 75 µL de solución que contiene 50 mM HEPES pH 7.5, 70 mM NaCI, 80 ng de Lck/c-Raf y 1 µg MEK-1. Subsecuentemente, 2 µL compuestos individuales diluidos de manera serial fueron agregados a la reacción, antes de la adición de ATP. La reacción fue iniciada con 25 µL de solución ATP que contiene 5 µM ATP y 0.3 µCi [33PJ-ATP. Las placas fueron selladas e incubadas a 32°C durante 1 hora. La reacción fue extinguida con la adición de 50 µL de 4% Ácido Fosfórico y cultivada sobre mallas de filtro P30 (PerkinElmer) utilizando un WallacTomtec Harvester. Las mallas de filtro fueron lavadas con 1 % ácido Fosfórico primero y desinonizadas H20 en segundo lugar. Los filtros fueron secados en un horno de microondas, sumergidos en fluido de escintilación y leídos en un Wallac 1205 Betaplate Counter (Wallac Inc., Atlanta, GA, U. S. A.), los resultados fueron expresados como inhibición porcentual.

% Inhibición = [100-(Tl /T¡)] x 100 where Ti = (conteos por minuto con inhibidor) - (antecedente) T¡ = (conteos por minuto sin inhibidor) - (antecedente) 2. Bio Plex Fosfo-ERK1/2 inmunoensayo. < Se ha establecido un inmunoensayo de fosfo-ERK (pERK) de 96 pozos, utilizando plataforma de citometría de flujo láser para medir la inhibición de pERK basal en líneas celulares. Las células MDA-MB-231 fueron colocadas en placas a 50,000 células por pozo en placas de microtitulación de 96-pozos en medio de crecimiento completo. Para efectos de los compuestos de prueba sobre la inhibición pERKI/2 basal, el día posterior a la colocación en placas, las células MDA-MB-231 fueron transferidas a DMEM con 0.1% BSA e incubadas con compuestos de prueba diluidos 1 :3 para una concentración final de 3 µM hasta 12 nM en 0.1% DMSO. Las células fueron incubadas con compuestos de prueba durante 2 h, lavadas y lisadas en regulador de lisis de célula completa Bio-Plex. Las muestras fueron diluidas con regulador de pH B 1 :1 (v/v) y transferidas directamente a placa de ensayo o congeladas a -80°C hasta que son procesadas. 50 µL de lisados de célula MDA-MB-231 diluidos fueron incubados con aproximadamente 2000 lechos Bio- Plex de 5 mieras conjugados con un anticuerpo anti-ERK1/2 durante la noche en un agitador a temperatura ambiente. Al día siguiente, se ejecutó el ensayo de intercalación de fosfo-ERKI/2 bioteñido, los lechos fueron lavados 3 veces durante cada incubación y después se utilizaron 50 µL de PE-estrepavidina como un reactivo de desarrollo. Las unidades de fluorescencia relativa de pERK1/2 fueron detectadas mediante conteo de 25 lechos con celda de flujo Bio-Plex (sonda) a alta sensibilidad. El IC50 fue calculado al tomar las células no tratadas como máximo y sin células (solamente lechos) como antecedente. 3. Tinción inmunohistoquímica de secciones de tumor con anticuerpos anti-pERK La Raf quinasa activada fosforila y activa MEK (quinasa de proteína quinasa activada por mitógeno), la cual a su vez fosforila y activa ERK (quinasa regulada por señal extracelular), la cual transloca hacia el núcleo y modifica la expresión de gen. Esta trayectoria con frecuencia es activada de manera aberrante en células de tumor debido a la presencia de ras activado, BRAF mutante, o elevación de los receptores del factor de crecimiento. Se desarrollo un método inmunohistoquímico semi-cuantitativo para detector ERK (pERK) fosforilatado en biopsias de tumor humano como un biomarcador de selección de paciente para determinar si un paciente responderá o no a un compuesto de la presente invención, y para determinar también su eficacia. El anticuerpo utilizado fue un anticuerpo policlonal (conejo) que detecta el estatus de fosforilación de p44 y p42 (fosfo-p44/42 MAPK (Thr202/Tyr204)) MAP quinasas (ERK1 y ERK2). El procedimiento fue ejecutado como sigue: 1. Se obtuvieron muestras de tumor a partir de pacientes. Las muestras fueron incrustadas en parafina y seccionadas. 2. Los cortes de sección de tumor fueron desparafinizados, y los cortes fueron incubados a 950°C en regulador de pH de citrato durante 35 min. 3. Los cortes (en regulador de pH) fueron colocados en un generador de vapor precalentado durante 30 min. 4. Cuando se completó, se permitió que los cortes en el regulador de pH calentado se aclimataran a temperatura ambiente (RT) durante 30 minutos. 5. Los cortes fueron lavados en Regulador de Lavado y cargados sobre rejillas de tinción en tintura, asegurando que todos los cortes fueron humedecidos con el regulador de pH en todo momento. 6. Los cortes fueron bloqueados en una solución de Peróxido de Hidrógeno al 1.5 % durante 10 min y después con suero de bloqueo normal (cabra) durante 20 min. 7. Los cortes fueron lavados en regulador de pH. 8. Los cortes fueron incubados con anticuerpos anti-pERK primarios [fosfo-p44/42 MAPK(Thr202/Tyr204)] a una dilución de 1 :50 durante 30 min. Los cortes de control negativo permanecieron en el suero de bloqueo. 9. Los cortes fueron enjuagados con regulador de pH. 10. Los cortes fueron incubados en una solución de anticuerpo secundario bioteñido durante 30 min. 11. Los cortes fueron enjuagados con regulador de pH. 12. Los cortes fueron expuestos al complejo preformado que comprende peroxidasa de rábano conjugada para avidina durante 30 min. 13: Los cortes fueron enjuagados con regulador de pH. 14. Se aplicó un cromagen de sustrato DAB a los cortes durante 1 min. 15. Los cortes fueron enjuagados con agua destilada. 16. Los cortes fueron cortes teñidos por contraste con hematoxilina durante 1 min. 17. Los cortes fueron enjuagados con regulador de pH. 18. Los cortes fueron enjuagados con agua destilada. 19. Los cortes fueron rehidratados, y colocados en cubreobjetos con solución de polímero naftalénico en tolueno. 20. Cada corte de tejido fue determinado utilizando el sistema de análisis de imagen Bioquant TCW98. Se seleccionaron y capturaron cinco campos/tejido no-traslapantes de manera electrónica utilizando un microscopio Olympus BX-60 y una cámara digital a color Optronics DEI-750 conectada a un computador en base a PC que opera el software Bioquant. Un sujeto que tiene un melanoma fue tratado con un compuesto de acuerdo con presente invención, y después se determinó una muestra de biopsia utilizando el ensayo antes descrito. La Figura 1 muestra el procedimiento semi-cuantitativo utilizado para analizar los las secciones de tejido. La Figura 2 muestra datos que establecen, antes de la administración del compuesto, que un sujeto que tiene un melanoma tuvo altos niveles de fosfo-ERK en tejido de tumor en comparación con células estromales, indicando que el sujeto fue un candidato para tratamiento con un compuesto de la presente invención. El sujeto recibió después una dosis de 600 mg BID del compuesto. Se observó una respuesta para el compuesto mediante comparación de las exploraciones PET tomadas en la línea de base contra el segundo ciclo. La exploración PET, la cual había demostrado actividad metabólica significativa en la línea de base, fue reportada como "completamente inactiva" después del tratamiento. Esta respuesta corresponde con una disminución en el porcentaje de núcleos que expresan pERK en la biopsia posterior al tratamiento. Este sujeto continuó teniendo la enfermedad estable en base a las mediciones de exploración CT por medio de RECIST a través del ciclo 6 del tratamiento. Por lo tanto, no solamente fosfo-ERK (raf actividad) pronosticó que el sujeto respondería al compuesto al demostrar mejoría medible, sino que el compuesto también redujo los niveles de actividad raf en las células (como se mide mediante fosfor-ERK). El compuesto utilizado fue N-[4-cloro-3-(trifluorometil)fenil]-N'-{4-[2-N-metilcarbamoil-4-piridiloxijfenil} urea. 4. Flk-1 (murina VEGFR-2) Ensayo Bioquímico Este ensayo fue ejecutado en placas opacas de 96-pozos (Costar 3915) en el formato TR-FRET. Las condiciones de reacción son como sigue: 10 µM ATP, 25 nM poíi GT-biotin, 2nM Eu-etiquetado fosfo-Tyr Ab, 10 nM APC, 7nMFIk-1 (dominio de quinasa), 1% DMSO, 50 mM HEPES pH 7.5, 10 mM MgCI2, 0.1 mM EDTA, 0.015% BRIJ, 0.1 mg/mL BSA, 0.1% mercapto-etanol). La reacción es iniciada a la adición de la enzima. El volumen de reacción final en cada pozo es 100 µL. las placas fueron leídas a 615 y 665 nM en un contador Perkin Elmer Victo V Multilabel a aproximadamente 1.5-2.0 horas después del inicio de la reacción. La señal es calculada como una relación: (665 nm/615 nm) * 10000 para cada pozo.

. Murina PDGFR FRET ensayo bioquímico Este ensayo fue formateado en una placa oscura de 96-pozos (Costar 3915). Se utilizaron los siguientes reactivos (y sus fuentes): anticuerpo pY20 anti-fosfotirosina Europio-etiquetada y estreptavidin-APC; poli GT-biotin, y PDGFR de ratón en DRT. Las condiciones de reacción son como sigue: 1 nM PDGFR de ratón se combina con 20 µM ATP, 7nM poly GT-biotin, 1 nM antibody pY20, 5 nM estreptavidin-APC, y 1% DMSO en regulador de ensayo (50 mM HEPES pH 7.5, 10 mM MgCI2, 0.1 mM EDTA, 0.015% BRIJ 35, 0.1 mg/mL BSA, 0.1% mercaptoetanol). La reacción es iniciada a la adicción de una enzima. El volumen de reacción final en cada pozo es 100 µL. Después de 90 minutes, la reacción es detenida mediante la adición de 10 µL/pozo de 5 uM estaurosporina. Las placas son leídas a 615 y 665 nm en un contador Perkin Elmer VictorV Multilabel a aproximadamente 1 hora después de que la reacción es detenida. La señal es calculada como una relación: (665nm/615 nm) * 10000 por cada pozo. Para la generación de IC50 para PDGFR y Flk-I, los compuestos fueron agregados antes de la iniciación de enzima. Una placa de existencia de 50-pliegues fue elaborada con los compuestos diluidos de manera serial 1 :3 en una solución 50% DMSO/50% dH2O. Una adición 2VtL de la existencia al ensayo dio las concentraciones de compuesto finales variando desde 10 µM-4.56 nM en 1% DMSO. Los datos fueron expresados como inhibición porcentual." % inhibición = 100 - ((Señal con inhibidor-antecedente)/(Señal sin inhibidor-antecedente)) * 100 6. pPDGFR-b intercalado ELISA en células AoSMC 100K P3-P6 de Aorta SMC fueron colocados en placas en cada pozo del grupo de 12 pozos en 1000 uL volumen/pozo de SGM-2 usando técnicas de cultivo de célula estándar. Al día siguiente, las células fueron lavadas con 1000 uL D-PBS (Gibco) una vez, después agotamiento de suero en 500 uL SBM (medio basal de célula de músculo liso) con 0.1%o BSA (Sigma, Cat A9576) durante la noche. Los compuestos fueron diluidos en un rango de dosis desde (10 uM hasta 1nM en etapas de dilución de 10-pliegues en DMSO. La concentración de DMSO final 0.1 %). Se remueven todos los medios anteriores mediante inversión en el vertedero rápidamente después de agregar 100 ul de cada dilución al pozo correspondiente de células durante 1 hr a 37°C. Las células fueron estimuladas después con 10 ng/mL de ligando PDGF BB durante 7 minutos a 37°C. Los medios son decantados y se agregaron 150 uL de regulador de lisis isotónico con tableta inhibidora de proteasa (Completo; libre de EDTA) y 0.2 mM de vanadato de Na. Las células son lisadas durante 15 min a 4°C en agitador en un cuarto frío. Los lisados son colocados en tubos Eppendorf a los cuales se agregó 15 uL de anticuerpo anti-PDGFR-b conjugado con azarosa (Santa Cruz, sc-339) y incubados a 4°C durante la noche. Al siguiente día, los lechos son enjuagados en 50-volúmenes de PBS tres veces y colocados en ebullición en regulador de muestra 1x LDS (Invitrogen) durante 5 minutos. Las muestras fueron operadas en geles de Tris-Acetato 3-8% gradiente (Invitrogen) y transferidas sobre Nitrocelulosa. Las membranas fueron bloqueadas en 1% BSA TBS-T durante 1 hr. Antes de la incubación en anticuerpo de anti-fosfo-PDGFR-b (Tyr-857) en regulador de bloqueo (1:1000 dilución) durante 1 hora. Después de tres lavados en TBS- T, las membranas fueron incubadas en Cabra anti-conejo HRP IgG (Amersham, 1 :25000 dilución) durante 1 hr. Tres lavados más siguieron antes de la adición al sustrato ECL. Las membranas fueron expuestas a Hyperfilm-ECL. Subsecuentemente, las membranas fueron separadas y probadas nuevamente con anticuerpo anti-PDGFR-b (Santa Cruz, SC-339) para el PDGFR-b total. 7. MDA-MB231 ensayo de proliferación Las células de carcinoma de seno humano (MDA MB-231, NCl) fueron cultivadas en medio de crecimiento estándar (DMEM) complementado con 10% FBS inactivado por calor a 37°C en 5% CO2 (vol/vol) en un incubador humidificado. Las células fueron colocadas en placas a una densidad de 3000 células por pozo en 90 µL de medio de crecimiento en un plato de cultivo de 96 pozos. Para determinar los valores Toh CTG, 24 horas después de la colocación en placas, 100 µL de CelITiter-Glo Luminescent Reagent (Promega) fue agregado a cada pozo e incubado a temperatura ambiente durante 30 minutos. La luminiscencia fue registrada en un instrumento Wallac Victo II. El reactivo CelITiter-Glo resulto en lisis y generación de célula de una señal luminiscente proporcional a la cantidad de ATP presente, que, a su vez es directamente proporcional al número de células presentes. Los compuestos de prueba fueron disueltos en 100% DMSO para preparar 10 mM de existencias. Las existencias fueron diluidas adicionalmente 1:400 en medio de crecimiento para producir existencias funcionales de 25 µM de compuesto de prueba en 0.25%o DMSO. Los compuestos de prueba fueron diluidos de manera serial en medio de crecimiento que contiene 0.25%> DMSO para mantener constantes las concentraciones de DMSO para todos los pozos. 60 µL del compuesto de prueba diluido fueron agregados a cada pozo de cultivo para dar un volumen final de 180 µL. Las células con y sin compuestos de prueba fueron incubados durante 72 horas en cuyo tiempo la luminiscencia dependiente de ATP fue medida, como se describió previamente, para producir valores T72h. de manera opcional, los valores IC50 pueden ser determinados con un programa de análisis de mínimos cuadrados utilizando la concentración del compuesto contra la inhibición porcentual.

% Inhibición = [l-(T72htesrTo )/(T72tlctr?-Toh)] x 100, en donde T 2 test = luminiscencia dependiente de ATP a 72 horas en presencia del compuesto de prueba T72h ctp = luminiscencia dependiente de ATP a 72 horas en ausencia del compuesto de prueba To = luminiscencia dependiente de ATP en Tiempo Cero. 8. Tratamiento de tumor Para probar la eficacia de un compuesto de la presente invención contra un cáncer, se administró una sal de N-[4-cloro-3-(trifluorometil)fenil]-N'-{4-[2-N-metilcarbamoil-4-piridiloxi]fen¡l} urea a modelos de xeno injerto de colon HCT 116 graduado (mutante k- Ras), MÍA PaCa-2 pancreático (mutante k-Ras), NCI-H460 de pulmón (mutante k-Ras) y SK-OV-3 de ovario (wt k-Ras). Todos los tratamientos fueron administrados p. o. en un programa qd x 14. Las dosis de 10, 30 y 100 mg/kg/dosis produjeron inhibición dependiente de dosis de crecimiento del tumor HCT-116 que varió entre 45% y 68%. De manera similar, el crecimiento de los tumores MÍA PaCa-2 se inhibió en 44%, 66%o, y 73% en dosis de 10, 30, y 100 mg/kg/dosis, respectivamente. El crecimiento de los tumores NCI-H460 se inhibió en 27% y 56% en dosis de 10 y 30 mg/kg/dosis de este inhibidor de Raf quinasa. El modelo SK-OV-3 fue ligeramente más sensible, generando 45%-81% de inhibiciones de crecimiento de tumor en dosis de 3 hasta 100 mg/kg/dosis. La eficacia anti-tumor de mayor duración también fue evaluada en el modelo HCT 116. El compuesto produjo una estasis de tumor neta en dosis de 30 y 100 mg/kg/dosis cuando el tratamiento se extendió hasta 30 días de duración. Los tumores de cepa HCT 116, SK-OV-3, y MÍA PaCa-2 se mantuvieron como pasajes s.c. seriales de fragmentos en ratones hembra CD-1 Nu/Nu (HCT 116 y SK-OV-3) o ratones hembra CB17 SCID (MIA-PaCa-2). Los tratamientos fueron administrados por vía oral y se iniciaron contra los tumores establecidos. Las dimensiones de tumor fueron medidas mediante calibradores de 2-3 veces por semana y fueron convertidas en la masa del tumor a través de la fórmula [L x (W2)]2, en donde L y W se refieren a las dimensiones más grande y más pequeña respectivamente. 9. Ensayo de P38 Quinasa Las propiedades inhibidoras in vitro de los compuestos se determinaron utilizando un ensayo de inhibición de p38 quinasa. La actividad de p38 fue detectada utilizando un ensayo de quinasa in vitro operado en placas de microtitulación de 96-pozos. P38 humano recombinante (0.5 D g/mL) se mezcló con sustrato (proteína básica de mielina, 5 Dg/mL) en regulador de quinasa (25 mM Hepes, 20 mM MgCI2 y 150 mM NaCI) y compuesto. One µCi/pozo de ATP 33P-etiquetado (10, µM) se agregó hasta un volumen final de 100 µL. la reacción fue operada a 32°C durante 30 minutos y detenida con una solución de 1M HCl. La cantidad de radioactividad incorporada dentro del sustrato se determinó mediante el atrapamiento del sustrato etiquetado sobre papel filtro de fibra de vidrio con carga negativa utilizando una solución de ácido fosfórico al 1 % y leída con un contador de escintilación. Los controles negativos incluyen sustrato más ATP solo. Sin mayor elaboración, se considera que alguien con experiencia en la técnica puede, utilizando la descripción precedente, emplear la presente ¡nvención en su más completa extensión. Las siguientes modalidades específicas son, por lo tanto, para ser consideradas como meramente ilustrativas, y no limitantes de del resto de la descripción en cualquier forma. La descripción completa de todas las solicitudes, patentes y publicaciones, citadas con anterioridad y en las figuras están incorporadas a la presente mediante referencia en su totalidad, incluyendo las Solicitudes Provisionales de los Estados Unidos de Norteamérica Nos. 60/556,062, presentada el 25 de marzo de 2004, 60/520,399, presentada el 17 de noviembre de 2003 y 60/471 ,735, presentada el 20 de mayo de 2003.

CUADRO 8. ENSAYO BIOQUÍMICO

Claims (31)

1. REIVINDICACIONES 1. Un método para la determinación de la eficacia de un compuesto de la fórmula I en el tratamiento de una enfermedad en un sujeto mamífero, o una células derivada del mismo, que comprende: medir la expresión o actividad de Raf, VEGFR-2, VEGFR-3, p38, PDGFR-beta, y/o Flt-3 en una muestra obtenida a partir de dicho sujeto que ha sido tratado con un compuesto de la fórmula I, y determinar los efectos de dicho compuesto sobre la expresión o actividad, en donde el compuesto de la fórmula I is: B-NH-C(O)-NH-L-M-L1-(Q)1.3 (I) en donde B es (i) fenilo, opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende o R1, OR1, NR1R2, S(O)qR1, SO2NR1R2, NR1SO2R2, C(O)R1, C(O)OR1, C(O)NR1R2, NR1C (O)R2, NR1C(O)OR2, halógeno, ciano, y nitro; (ii) naftilo, opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R1, OR1, NR R2, S(O)qR1, SO2NR1R2, NR1SO2R2, C(O)R1, C(O)OR1, C(O)NR1R2, NR1C(O)R2, NR1C(O)OR2, halógeno, ciano, y nitro; (iii) a grupo heteroarilo monocíclico de 5 o 6 miembros, que tiene 1-3 heteroátomos seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende O, N y S, opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R1, OR1, NR1R2, S(O)qR1, SO2NR1R2, NR1SO2R2, C(O)R1, C(O)OR1, C(O)NR1R2, NR1C(O)R2, NR1C(O)OR2, halógeno, ciano, oxo, y nitro; o (iv) un grupo heteroarilo bicíclico de 8 a 10 miembros en el cual el primer anillo está enlazado al NH de la Figura I y contiene 1-3 heteroátomos seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende O, N, y S, y el segundo anillo está fusionado al primer anillo utilizando 3 to 4 átomos de carbono. El grupo heteroarilo bicíclico es opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R1, OR1, NR1R2, S(O)qR1, SO2NR1R2, NR.,SO2R2, C(O)R1, C(0)OR\ C(O)NOR1R2, NR1C(0)R2, NR1C(O)OR2, halógeno, ciano, oxo, y nitro. L es (i) fenilo, opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende C1-C5 alquilo lineal o ramificado, C1-C5 haloalquilo lineal o ramificado, CI-C3 alcoxi, hidroxi, amino, C1-C3 alquilamino, C1-C6 dialquilamino, halógeno, ciano, y nitro; (ii) naftilo, opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende C1-C5 alquilo lineal o ramificado, C1-C5 haloalquilo lineal o ramificado, C1-C3 alcoxi, hidroxi, amino, C1-C3 alquilamino, C1-C6 dialquilamino, halógeno, ciano, y nitro; (iii) un grupo heteroarilo monocíclico de 5 o 6 miembros, que tiene 1-3 heteroátomos seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende O, N y S, opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende C1-C5 alquilo lineal o ramificado, C1-C5 haloalquilo lineal o ramificado, C1-C3 alcoxi, hidroxi, amino, C1-C3 alquilamino, C1-C6 dialquilamino, halógeno, ciano, y nitro; o (¡v) un grupo heteroarilo bicíclico de 8 a 10 miembros que tiene 1-6 heteroátomos seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende O, N y S, opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende C1-C5 alquilo lineal o ramificado, C1-C5 haloalquilo lineal o ramificado, C1-C3 alcoxi, hidroxi, amino, C1-C3 alquilamino, C1-C6 dialquilamino, halógeno, ciano, y nitro. M is (a) -(CH2)m-O-(CH2),-, (c) -(CH2)m-C(O)-(CH2) , (d) -(CH2)m-NR3-(CH2)rI (e) -(CH2)m-NR3C(O)-(CH2)1-, (f) -(CH2)m-S-(CH2) , (g) -(CH2)m-C(O)NR3-(CH2) , (h) -(CH2)m-CF2-(CH2) , (i) -(CH2)m-CCI2-(CH2)1-, (j) -(CH^-CHF-ÍCH^-, (k) -(CH2)m-CH(OH)-(CH2)?-; (I) -(CH2)m-C3C-(CH2)1-; (m) -(CH2)m-C=C-(CH2)1-; (n) -(CH2)m-CR4R5-(CH2) ; o (o) un enlace sencillo, en donde m y 1 son 0; en donde las variables m y 1 son enteros seleccionados de manera independiente a partir de 0-4, L' es (i) fenilo, opcionalmente sustituido con 1-2 sustituyentes adicionales diferentes de Q, seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R1, OR1, NR1R2, S(O)qR\ SO2NR1R2, NR1SO2R2, NR1C(O)R2, NR1C(O)OR2, halógeno, ciano y nitro; (ii) naftilo, opcionalmente sustituido con 1-2 sustituyentes adicionales diferentes de Q seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R1, OR1, NR1R2, S(O)qR1, SO2NR1R2, NR1SO2R2, NR1C(O)R2, NR1C(O)OR2, halógeno, ciano, y nitro; (iii) un grupo heteroarilo monocíclico de 5 y 6 miembros, que tiene 1-3 heteroátomos seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende O, N y S, sustituido de manera opcional con 1-2 sustituyentes adicionales diferentes de Q, seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R1, OR1, NR1R2, S(O)qR1, SO2NR1R2, NR1SO2R2, NR1C(0)R2, NR1C(0)OR2, halógeno, ciano, y nitro y también óxidos (por ejemplo, =O, -O o -OH); (iv) un grupo heteroarilo bicíclico de 8 a 10 miembros, que tiene 1-6 heteroátomos seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende O, N, y S, y opcionalmente sustituido con 1-2 sustituyentes adicionales diferentes de Q, seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R1, OR1, NR1R2, S(O)qR1, SO2NR1R2, NRiSOzR2, C(O)R1, C(O)OR1, C(O)NOR1R2, NR C(O)R2, NR1C(O)OR2, halógeno, ciano y nitro y también óxidos (por ejemplo, =0, -O o -OH); (v) una porción carbocíclica monocíclica C3-C6 saturada y parcialmente saturada, opcionalmente sustituida con 1-2 sustituyentes diferentes de Q, seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R1, OR1, NR1R2, S(0)qR\ S02NR1R2, NR^OzR2, C(0)R\ C(0)OR1, C(0)NOR1R2, NR1C(0)R2, NR1C(0)OR2, halógeno, ciano, oxo, y nitro; (vi) una porción carbocíclica bicíclica C8-C10 saturada y parcialmente saturada, opcionalmente sustituida con 1-2 sustituyentes diferentes de Q, seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R1, OR1, NR1R2, S(O)qR1, SO2NR1R2, NR^OsR2, C(0)R\ C(0)OR1, C(0)NOR1R2, NR1C(0)R2, NR1C(O)OR2, halógeno, ciano, oxo, y nitro; (vii) una porción heterocíclica monocíclica de 5 y 6 miembros saturada y parcialmente saturada, que tiene 1-3 heteroátomos seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende O, N y S, sustituido de manera opcional con 1-2 sustituyentes adicionales diferentes de Q, seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R1, OR1, NR1R2, S(0)qR1, S02NR1R2, NR1SO2R2, NR1C(O)R2, NR1C(O)OR2, halógeno, ciano, y nitro y también óxidos (por ejemplo, =0, -O o -OH); o (viii) una porción heterocíclica bicíclica de 8 a 10 miembros saturada y parcialmente saturada, que tiene 1-6 heteroátomos seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende O, N, y S, y opcionalmente sustituido con 1-2 sustituyentes adicionales diferentes de Q, seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R , OR1, NR1R2, S(0)qR1, SO2NR1R2, NR-¡S02R2, NR1C(O)R2, NR1C(O)OR2, halógeno, ciano y nitro y también óxidos (por ejemplo, =O, -O o -OH); y cada Q es independientemente C(O)R4, C(0)OR4 y C(O)NR4R5; en donde cada R1-R5 es seleccionado de manera independiente a partir de: (a) hidrógeno, (b) C1-C5 alquilo lineal, ramificado, o cíclico, (c) fenilo, (d) C1-C3 alquil-fenilo, en donde la porción alquilo es opcionalmente sustituida con halógeno hasta per-halo; (e) hasta per-halo sustituido C1-C5 alquilo. O (f) -(CH2)q-X, en donde X es un anillo heterocíclico monocíclico de 5 o 6 miembros, que contiene 1-4 átomos seleccionados a partir de oxígeno, nitrógeno y azufre, el cual es saturado, parcialmente saturado, o aromático, o un heteroarilo bicíclico de 8-10 miembros que tiene 1-4 heteroátomos seleccionados a partir del grupo que comprende O, N y S; y en donde dicha porción alquilo es opcionalmente sustituida con halógeno hasta per-halo, en donde cada R1-R5, diferente de per-halo sustituido C1-C5 alquilo lineal o ramificado, es opcionalmente sustituido con 1-3 sustituyentes seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende C1-C5 alquilo lineal o ramificado, hasta perhalo sustituido C1-C5 alquilo lineal o ramificado, C1-C3 alcoxi, hidroxi, carboxi, amino, C1-C3 alquilamino, C1-C6 dialquilamino, halógeno, ciano, y nitro; en donde la variable p es un entero seleccionado a partir de 0, 1 , o 2 y la variable q es un entero seleccionado a partir de 0, 1 , 2, 3, o 4.
2. 2. Un método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado porque la expresión está determinando las cantidades de ARNm que corresponden a Raf, VEGFR-2, VEGFR-3, p38, PDGFR-beta, y/o Flt-3.
3. 3. Un método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado porque la medición de la expresión está determinando las cantidades de polipéptido que corresponden a Raf, VEGFR-2, VEGFR-3, p38, PDGFR-beta, y/o Flt-3.
4. 4. Un método de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque la medición de la actividad está determinando las cantidades de fosfo-ERK.
5. 5. Un método de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque dicho sujeto tiene cáncer, y la medición de la actividad está determinando las cantidades de fosfo-ERK en los linfocitos sanguíneos periféricos o una biopsia de tejido de un cáncer.
6. 6. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, que comprende además comparar la expresión o actividad en dicha muestra con un control normal.
7. 7. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, que comprende además comparar la expresión o actividad en por lo menos una muestra antes de tratamiento con dicho compuesto y en por lo menos una muestra después del tratamiento con dicho compuesto.
8. 8. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-7, que comprende además medir la expresión en por lo menos dos muestras diferentes recolectadas en puntos de tiempo diferentes en el régimen de tratamiento con dicho compuesto.
9. 9. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-8, caracterizado porque una reducción en la expresión o actividad indica que el compuesto es efectivo en el tratamiento de dicha enfermedad.
10. 10. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-9, caracterizado porque la enfermedad es carcinoma o melanoma de célula renal.
11. 11. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-10, caracterizado porque la muestra comprende células de tumor.
12. 12. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-11 , caracterizado porque la muestra comprende células sanguíneas periféricas.
13. 13. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-11 , que comprende además administrar un compuesto de la fórmula I en una pluralidad de puntos de tiempo.
14. 14. Un método para seleccionar sujetos que tienen una enfermedad para tratamiento con un compuesto de la fórmula I, que comprende: medir la expresión o actividad de Raf, VEGFR-2, VEGFR-3, p38, PDGFR-beta, y/o Flt-3, en una muestra obtenida a partir de un sujeto que tiene una enfermedad, y administrar dicho compuesto de la fórmula I a sujetos que son identificados por tener altos niveles de expresión o actividad, en donde dicho compuesto es un compuesto de la fórmula I de la reivindicación 1.
15. 15. Un método para seleccionar sujetos que tienen una enfermedad para tratamiento con un compuesto de la fórmula I, que comprende: determinar la presencia de una mutación de gen Raf, VEGFR-2, VEGFR-3, p38, PDGFR-beta, y/o Flt-3 en una muestra obtenida a partir de un sujeto, en donde la mutación está asociada con una enfermedad, y administrar dicho compuesto de la fórmula I de la reivindicación 1 a sujetos que son identificados por tener dicha mutación.
16. 16. Un método de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado porque la mutación es en el gen BRAF.
17. 17. Un método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque la mutación BRAF está en la posición de aminoácido 599 de la secuencia de codificación de dicho gen.
18. 18. Un método de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado porque la mutación BRAF es V599E.
19. 19. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 15-18, caracterizado porque la enfermedad es melanoma.
20. 20. Un método para tratar o prevenir una enfermedad o condición en un mamífero o célula de mamífero, que comprende: administrar a un sujeto que necesita de la misma, una cantidad efectiva de un compuesto de aril urea de la fórmula I, una forma de sal de un compuesto de la fórmula I, un esteroisómero aislado o mezclado de un compuesto de la Fórmula I, un éster de un compuesto de la fórmula I, un metabolito de un compuesto de la fórmula I, o un profármaco de un compuesto de la fórmula I de la reivindicación 1.
21. 21. Un método de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque el método es para inhibir la proliferación de célula de tumor.
22. 22. Un método de conformidad con la reivindicación 21 , caracterizado porque la cantidad efectiva resulta en regresión del tumor.
23. 23. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 20-22, caracterizado porque el método está ocasionando regresión de tumor en un sujeto, o células del mismo que tiene cáncer.
24. 24. Un método de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque el método comprende inhibir linfangiogensis.
25. 25. Un método de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque el método comprende inhibir angiogensis.
26. 26. Un método de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque el método comprende tratar un padecimiento en un sujeto mamífero mediado por Raf, VEGFR-2, VEGFR-3, PDGFR-beta, y/o Flt- 3.
27. 27. Un método de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque el método comprende tratar un tumor en un sujeto que necesita del método, que comprende: administrar una cantidad efectiva de dicho compuesto en donde dicha cantidad es efectiva para inhibir la proliferación celular y la neovascularización del tumor.
28. 28. Un método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado porque para los compuestos de la fórmula (I): L is fenilo, opcionalmente sustituido con 1-4 halógenos, M es -O-, B es fenilo o piridilo, opcionalmente sustituido con 1-6 sustituyentes seleccionados de manera independiente a partir del grupo que comprende R1 y halógeno, y L1 es opcionalmente fenilo o piridinilo sustituido.
29. 29. Un método de conformidad con la reivindicación 28, caracterizado porque los sustituyentes en los grupos para B y L' son seleccionados a partir del grupo que consta de: metilo, etilo, propilo, butilo, pentilo, isopropilo, isobutilo, sec-butilo, y ter-butilo, metoxi, etoxi, F, Cl, Br, e I.
30. 30. Un método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado porque la sal farmacéuticamente aceptable de un compuesto de la fórmula I es seleccionada a partir del grupo que comprende a) sales básicas de ácidos orgánicos y ácidos inorgánicos seleccionados a partir del grupo que comprende ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido metansulfónico, ácido trifluorosulfónico, ácido bencensulfónico, ácido p-toluen sulfónico (sal de tosilato), ácido 1-naftalen sulfónico, ácido 2-naftalen sulfónico, ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido málico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido láctico, ácido oxálico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido maléico, ácido benzoico, ácido salicílico, ácido fenilacético, y ácido miélico; y b) sales acidas de bases orgánicas e inorgánicas que contienen cationes seleccionados a partir del grupo que comprende cationes alcalinos, cationes alcalino férreos, el catión de amonio, los cationes de amonio sustituidos alifáticos y cationes de amonio sustituidos aromáticos.
31. 31. Un método para determinar la eficacia de un compuesto en el tratamiento de una enfermedad en un sujeto mamífero, o una célula derivada a partir del mismo, que comprende: medir la expresión o actividad de Raf, VEGFR-2, VEGFR-3, p38, PDGFR-beta, y/o Flt-3 en una muestra obtenida a partir de dicho sujeto que ha sido tratado con el compuesto, y determinar los efecto de dicho compuesto sobre la expresión o actividad, en donde el compuesto es : N-(4-cloro-3-(trifluorometil)fenil)-N'-(4-(2-(N-metilcarbamoil)-4-piridiloxi)fenil) urea, N-(4-bromo-3-(trifluorometil)fenil)-N'-(4-(2-(N-metilcarbamoil)-4-piridiloxi)fenil) urea, N-(4-bromo-3-(trifluoromet¡l)fenil)-N'-(4-(2-(N-metilcarbamoil)-4-piridiloxi)-2-clorofenil) urea, N-(4-cloro-3-(trifluorometil)fenil)-N'-(4-(2-carbamoil-4-piridiloxi) fenilo) urea, N-(4-cloro-3-(trifluorometil)fenil)-N'-(4-(1-hidroxy-2-carbamoil-4-pirid¡loxi)fenil) urea, N-(4-cloro-3-(trifluorometil)fenil)-N'-(4-(1-hidroxi-2-(N- metilcarbamo¡l)-4-piridil oxy)fenil) urea, N-(4-cloro-3-(tr¡fluorometil)fenil)-N'-(4-(2-(N-metilcarbamoil)-4-piridil oxy)-2-fluorofenil) urea, N-(4-bromo-3-(trifluorometil)fenil)-N'-(4-(2-(N-metilcarbamoil)-4-piridil oxy)-2-fluorofenil) urea, N-(4-fluoro-3-(trifluorometil)fenil)-N'-(4-(2-(N-met¡lcarbamoil)-4-piridil oxy)-2-fluorofenil) urea, N-(4-cloro-3-(trifluorometil)fenil)-N'-(4-(2-(N-metilcarbamoil)-4-piridil oxy)-2-clorofenil) urea, N-(6-(2,2,4,4-tetrafluoro-4H-benzo[1 ,3]dioxinil))-N-(4-2-ciano-4-piridiloxi)fenil) urea, o N-(6-(2,2,4,4-tetrafluoro-4H-benzo[1 ,3]dioxinil))-N-(4-2-ciano-4-piridiloxi)-2-fluorofenil) urea. 33. Un método de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque el compuesto de la fórmula I es de la fórmula (X) siguiente, en donde: A es fenilo, opcionalmente sustituido 1 , 3 o 3 veces por R3, en donde cada R3 es independientemente C1-C5 alquilo, C1-C5 haloalquilo, hasta per-haloalquilo, C1-C5 alcoxi, C1-C5 haloalcoxi, hasta per-haloalcoxi, halógeno, ciano o nitro; o A es un grupo de la fórmula: opcionalmente sustituido 1, 2, 3, 4, 5 o 6 veces con R4 en donde cada R4 es independientemente C1-C5 alquilo o halógeno; B es fenileno, opcionalmente sustituido 1 , 2 o 3 veces por R2, o naftileno, opcionalmente sustituido 1 , 2 o 3 veces por R2, en donde cada R2 es independientemente C1-C5 alquilo, C1-C5 haloalquilo, hasta per-haloalquilo, C1-C5 alcoxi, C1-C5 haloalcoxi hasta per-haloalcoxil, halógeno, ciano o nitro; Q es ciano, -C(O)-Ra, o -C(O)-NRbRc, en donde cada Ra, Rb y Rc es independientemente H o C1-C5 alquilo, L es -O- o -S-, m es un entero 0, 1 , 2 o 3, y cada R1 es independientemente halógeno, C1-5 alquilo, C1-5 haloalquilo, hasta per-haloalquilo, C1-5 alcoxi, C1-5 haloalcoxi, hasta per-haloalcoxi, N-oxo o N-hidroxi. 34. Un método de conformidad con las reivindicaciones 32 o 33, caracterizado porque para el compuesto de la fórmula (X), cada R3 es de manera independiente flúor, cloro, bromo, metilo, etilo, propilo, butilo, pentilo, isopropilo, iso-butilo, sec-butilo, terbutilo, trifluorometilo, metoxi, etoxi, trifluorometoxi, CN o NO2 y cada R4 es de manera independiente flúor, cloro, bromo o metilo. 35. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 32-34, caracterizado porque para el compuesto de la fórmula (X), cada R1 es independientemente metilo, etilo, propilo, oxígeno, ciano, n-oxo o n-hidroxi y cada Ra, Rb y Rc es de manera independiente H o metilo. 36. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 32-35, caracterizado porque para el compuesto de la fórmula (X), A es fenilo sustituido. 37. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 32-35, caracterizado porque para el compuesto de la fórmula (X), A es un grupo de la fórmula: opcionalmente sustituido 1 , 2, 3 o 4 veces con R4, en donde cada R4 es de manera independiente cloro o flúor. 38. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 32-37, caracterizado porque para el compuesto de la fórmula (X), B es feníleno. 39. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 32-37, caracterizado porque para el compuesto de la fórmula (X), B es naftileno. 40. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 32-37, caracterizado porque para el compuesto de la fórmula (X), B is fenileno sustituido mediante por lo menos un átomo de flúor. 41. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 32-40, caracterizado porque para el compuesto de la fórmula (X), L es oxígeno. 42. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 32-41, caracterizado porque para el compuesto de la fórmula (X), cada R3 es cloro, bromo, ter-butilo, trifluorometilo o metoxi. 43. Un método de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque para el compuesto de la fórmula (X), A es 4-cloro-3-trifluorometilfenilo, 4-fluoro-3-trifluorometilfenilo, 4-bromo-3-trifluorometilfenilo, o 2,2,4,4-tetrafluoro-4H-benzo[1 ,3]dioxin-6-ilo; B is fenileno, clorofenileno o fluorofenileno; L es -O-; Y Q es ciano, C(O)-NH2, o C(O)-NHMe. 44. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 32-43, caracterizado porque se utiliza una sal básica farmacéuticamente aceptable de un ácido orgánico de un compuesto de la fórmula (X). 45. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 32-43, caracterizado porque una sal básica farmacéuticamente aceptable de un ácido orgánico de la fórmula (X) es administrada, seleccionada a partir de ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido metansulfónico, ácido trifluorometansulfónico, ácido bencensulfónico, ácido p-toluen sulfónico (sal de tosilato), ácido 1-naftalen sulfónico, ácido 2-naftalen sulfónico, ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido málico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido láctico, ácido oxálico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido maléico, ácido benzoico, . ácido salicílico, ácido fenilacético, o ácido miélico. 46. El método de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque el compuesto de la fórmula X es una sal de hidrocloruro, bencensulfonato o metansulfonato farmacéuticamente aceptable de N-(4-cloro-3-(trifluorometil)fenil)-N'-2-fluoro-(4-(2-(N-metilcarbamoil)-4-p¡ridiloxi)fenil) urea o N-(4-cloro-3-(trifluorometil)fenil)-N'-(4-(2-(N-metilcarbamoil)-4-piridiloxi)fenil) urea. 47. Un método para determinar la eficacia de un compuesto en tratamiento de una enfermedad en un sujeto mamífero, o una célula derivada del mismo, que comprende: medir la expresión o actividad de Raf, VEGFR-2, VEGFR-3, p38, PDGFR-beta, y/o Flt-3 en una muestra obtenida a partir de dicho sujeto que ha sido tratado con dicho compuesto, y determinar los efectos de dicho compuesto sobre la expresión o actividad, en donde el compuesto es un compuesto de aril urea de las fórmulas X, Y, ZA, ZB, ZC o ZD, una forma de sal de un compuesto de las fórmulas X, Y, ZA, ZB, ZC o ZD, un esteroisómero aislado o mezclado de un compuesto de las fórmulas X, Y, ZA, ZB, ZC o ZD, un éster de un compuesto de las fórmulas X, Y, ZA, ZB, ZC o ZD, un metabolito de un compuesto de las fórmulas X, Y, ZA, ZB, ZC o ZD, o un profármaco de un compuesto de las fórmulas X, Y, ZA, ZB, ZC o ZD, ZB ZC and en donde cada R3 es independientemente halógeno o trifluorometilo y cada R2 es independientemente flúor, cloro, bromo, metilo, trifluorometilo, metoxi, CN o NO2 la variable n es 0, 1 , 2, 3 o 4 y la variable p es 0, 1 o 2.