MXPA01005817A - 2-cianopirrolidinas n-sustituidas - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a:Un compuesto de la fórmula (I):en donde R es adamantilo sustituido;y n es de 0 a 3;en forma libre o en forma de sal de adición deácido.

Description

2-CIANOPIRROLIDINAS N-SUSTITUIDAS La presente invención proporciona nuevos inhibidores de dipeptidil-peptidasa-IV (DPP-IV) los cuales son efectivos en el tratamiento de condiciones mediadas por DPP-IV. Más recientemente, se descubrió que la DPP-IV es responsable de la inactivación del péptido de tipo glucagon-1 (GLP-1) . Debido a que el GLP-1 es un importante estimulante de la secreción de insulina pancreática, y tiene efectos benéficos directos sobre el desecho de la glucosa, la inhibición de DPP-IV parece representar un planteamiento atractivo para el tratamiento de condiciones tales como diabetes mellitus no dependiente de insulina (NIDDM) . La presente invención se refiere a novedosas N-(glicilo sustituido) -2 -cianopirrolidinas de la fórmula I: en donde : R es adamantilo sustituido; y n es de 0 a 3; en forma libre o en forma de sal de adición de ácido. Los compuestos de la fórmula I pueden existir en forma libre o en forma de sal de adición de ácido. Se prefieren las sales farmacéuticamente aceptables (es decir, no tóxicas, fisiológicamente aceptables) , aunque también son útiles otras sales, por ejemplo en el aislamiento o en la purificación de los compuestos de esta invención. Aunque las sales de adición de ácido preferidas son los clorhidratos, también se pueden utilizar sales del ácido metansulfónico, sulfúrico, fosfórico, cítrico, láctico, y acético. Los compuestos de la invención pueden existir en la forma de isómeros o diaestereoisómeros ópticamente activos, y se pueden separar y recuperar mediante técnicas convencionales, tales como cromatografía. Más adelante se enlistan las definiciones de diferentes términos utilizados para describir esta invención. Estas definiciones se aplican a los términos como se utilizan a través de toda esta memoria descriptiva, a menos que sean limitados de otra manera en casos específicos, ya sea individualmente o bien como parte de un grupo mayor. El término "alquilo" se refiere a grupos hidrocarburo de cadena recta o ramificada que tienen de 1 a 10 átomos de carbono, de preferencia de 1 a 7 átomos de carbono, más preferiblemente de 1 a 5 átomos de carbono. Los grupos alquilo de ejemplo incluyen metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo normal, butilo terciario, isobutilo, pentilo, hexilo, y similares . El término "alcanoílo" se refiere a alquilo-C (O) - .

El término "adamantilo sustituido" se refiere a adamantilo, es decir, 1- ó 2 -adamantilo, sustituido por 1 ó más, por ejemplo 2, sustituyentes seleccionados a partir de alquilo, -ORi, o -NR2R3; en donde R , R2, y R3 son independientemente hidrógeno, alquilo, (alcanoílo de 1 a 8 átomos de carbono) , carbamilo, o -CO-NR4R5; en donde R4 y R5 son independientemente alquilo, arilo insustituido o sustituido, y en donde uno de R4 y R5 es adicionalmente hidrógeno, o R4 y R5 representan juntos alquileno de 2 a 7 átomos de carbono. El término "arilo" representa de preferencia fenilo.

Fenilo sustituido es de preferencia fenilo sustituido por uno ó más, por ejemplo dos, sustituyentes seleccionados a partir de, por ejemplo, alquilo, alcoxilo, halógeno, y trifluorometilo. El término "alcoxilo" se refiere a alquilo-O- . El término "halógeno" o "halo", se refiere a flúor, cloro, bromo, y yodo. El término "alquileno" se refiere a un puente de cadena recta de 2 a 7 átomos de carbono, de preferencia de 3 a 6 átomos de carbono, y más preferiblemente de 5 átomos de carbono. Un grupo preferido de compuestos de la invención es el de los compuestos de la fórmula I en donde el sustituyente sobre el adamantilo está enlazado sobre una cabeza de puente o un metileno adyacente a una cabeza de puente. Los compuestos de la fórmula I en donde la fracción de glicil-2-cianopirrolidina está enlazada a una cabeza de puente, el sustituyente R' sobre el adamantilo es de preferencia 3 -hidroxilo. Los compuestos de la fórmula I en donde la fracción de glicil-2-cianopirrolidina está enlazada en un metileno adyacente a una cabeza de puente, el sus-tituyente R1 sobre el adamantilo es de preferencia 5-hidroxilo. La presente invención se refiere especialmente a un compuesto de las fórmulas (IA) ó (IB) : en donde R' representa hidroxilo, alcoxilo de 1 a 7 átomos de carbono, alcanoiloxilo de 1 a 8 átomos de carbono, o R5R4N-CO-O-, en donde R4 y R5 son independientemente alquilo de 1 a 7 átomos de carbono, o fenilo que está insustituido o sustituido por un sustituyente seleccionado a partir de alquilo de 1 a 7 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 7 átomos de carbono, halógeno, y trifluorometilo, y en donde R4 es adicionalmente hidrógeno; o R4 y R5 representan juntos alquileno de 3 a 6 átomos de carbono; y R" representa hidrógeno; o R' y R" representan independientemente alquilo de 1 a 7 átomos de carbono; en forma libre o en forma de una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable. Los compuestos de la invención se pueden preparar, por ejemplo, mediante un proceso que comprende acoplar un compuesto de (2-cianopirrolidino) carbonilmetileño reactivo con una amina sustituida apropiada; de una manera más particular, para la preparación de los compuestos de la fórmula I, comprende hacer reaccionar un compuesto de la fórmula II: O en donde Y es un grupo reactivo (de preferencia un halógeno, tal como bromo, cloro, o yodo) , con un compuesto de la fórmula III: NH2(CH2)n-R III en donde R es como se definió anteriormente, y recupe-rar el compuesto resultante de la fórmula I en forma libre o en forma de sal de adición de ácido. El proceso de la invención se puede efectuar de una manera convencional. Por ejemplo, el compuesto de la fórmula II se hace reaccionar con 1 a 3 equivalentes, de preferencia 3 equivalentes, de una amina primaria de la fórmula III. La reacción convenientemente se conduce en la presencia de un solvente orgánico inerte, tal como cloruro de metileno, o un éter cíclico, tal como tetrahidrofurano. La temperatura de preferencia es de aproximadamente 0°C a aproximadamente 35 °C, de preferencia entre aproximadamente 0°C y aproximadamente 25 °C.

Los compuestos de la invención se pueden aislar de la mezcla de reacción, y se pueden purificar de una manera convencional, por ejemplo, mediante cromatografía. Los materiales de partida también se pueden preparar de una manera convencional. Los compuestos de la fórmula II se pueden preparar mediante el siguiente esquema de reacción de dos pasos : PASO 1 PASO 2 STEP1 STEP 2 IV V El Paso I involucra la reacción de la pirrolidina de la fórmula IV con un ligero exceso molar de un haluro de haloacetilo, tal como bromuro de bromoacetilo o cloruro de cloroacetilo, y una base, tal como carbonato de potasio o trietilamina. La reacción convenientemente se conduce en la presencia de un solvente orgánico inerte, tal como tetrahidrofurano, o un hidrocarburo alifático clorado, tal como cloruro de metileno, a una temperatura de aproximadamente 0°C a aproximadamente 25 °C, de preferencia a una temperatura de entre aproximadamente 0°C y aproximadamente 15°C. El Paso 2 se refiere a la deshidratación del compuesto de la fórmula V, preparado en el Paso 1, con 1 a 2 equivalentes de anhídrido trifluoroacético (TFAA) . La deshidratación de preferencia se conduce en la presencia de un solvente orgánico inerte, tal como tetrahidrofurano, o un hidrocarburo alifático clorado, tal como cloruro de metileno, a una temperatura de aproximadamente 0°C a aproximadamente 25°C, de preferencia a una temperatura de entre aproximadamente 0°C y aproximadamente 15 °C. Hasta donde no se describa particularmente su preparación en la presente, un compuesto utilizado como material de partida es conocido, o se puede preparar a partir de compuestos conocidos de una manera conocida, o de una manera análoga a los métodos conocidos, o de una manera análoga a los métodos descri-tos en el Ejemplo. Por ejemplo, los compuestos de amina primaria de la fórmula III son conocidos, y se pueden preparar mediante los procedimientos documentados en la literatura, por ejemplo, Khi .-Farm. Zh (1986), 20(7), 810-15. Finalmente, los compuestos de la invención se obtienen en la forma libre, o bien como una sal de los mismos, si están presentes grupos formadores de sal . Los compuestos de la invención que tienen grupos básicos se pueden convertir a sales de adición de ácido, espe-cialmente sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables. Estas se forman, por ejemplo, con ácidos inorgánicos, tales como ácidos minerales, por ejemplo ácido sulfúrico, un ácido fosfórico o halohídrico, o con ácidos carboxílicos orgánicos. Se prefieren las sales formadas con ácido clorhídrico. En vista de la estrecha relación entre los compuestos libres y los compuestos en la forma de sus sales, siempre que un compuesto sea referido en este contexto, también se pretende una sal correspondiente, en el entendido de que ésta sea posible o apropiada de acuerdo con las circunstancias. Los compuestos, incluyendo sus sales, también se pueden obtener en la forma de sus hidratos, o pueden incluir otros solventes utilizados para su cristalización. La presente invención también incluye composiciones farmacéuticas, por ejemplo, útiles para inhibir la DPP-IV, las cuales comprenden un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable, y una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula I, o una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable del mismo. En todavía otra modalidad, la presente invención proporciona un método para inhibir la DPP-IV, el cual comprende administrar a un mamífero que necesite dicho tratamiento, una cantidad terapéuticamente afectiva de un compuesto de la fórmula I, o una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable del mismo.

En una modalidad adicional, la presente invención proporciona un método para el tratamiento de condiciones mediadas por la inhibición de DPP-IV, el cual comprende administrar a un mamífero que necesite dicho tratamiento, una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula I anterior, o una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable del mismo. La presente invención también se refiere al uso de un compuesto de acuerdo con la presente invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, por ejemplo, para la fabricación de un medicamento para la prevención o el tratamiento de enfermedades o condiciones asociadas con niveles elevados de DPP-IV. Como se indicó anteriormente, todos los compuestos de la fórmula I, y sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables correspondientes, son útiles para inhibir la DPP-IV. La capacidad de los compuestos de la fórmula I , y sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables correspondientes, para inhibir la DPP-IV, se puede demostrar empleando el Ensayo de DPP-IV de Caco-2, el cual mide la capacidad de los compuestos de prueba para inhibir la actividad de DPP-IV a partir de extractos celulares de carcinoma colónico humano. La línea celular de carcinoma colónico humano Caco-2 se obtuvo en la American Type Culture Collection (ATCC HTB 37) . La diferenciación de las células para inducir la expresión de DPP- IV se realizó como es descrito por Reisher y colaboradores, en un artículo titulado "Increased expression of intestinal cell line Caco-2", en Proc. Nati. Acad. Sci., Volumen 90, páginas 5757-5761 (1993) . El extracto celular se prepara a partir de células solubilizadas en Tris-HCl 10 mM, NaCl 0.15 M, aprotinina 0.04 t.i.u., nonidet-P40 al 0.5 por ciento, pH de 8.0, que se centrifugan a 35,000 g durante 30 minutos a 4°C, para remover los desechos celulares . El ensayo se conduce mediante la adición de 20 microgramos de proteína de Caco-2 solubilizada, y se diluye hasta un volumen final de 125 microlitros en regulador de ensayo (Tris-HCl 25 mM, pH de 7.4, NaCl 140 mM, KCl 10 mM, albúmina de suero bovino al 1 por ciento) , en pozos de placa de microtitulación. Después de una incubación de 60 minutos a temperatura ambiente, se inicia la reacción mediante la adición de 25 microlitros de sustrato 1 mM (H-Alanina-Prolina-pNA; pNA es p-nitroanilina) . La reacción se realiza a temperatura ambiente durante 10 minutos, después de cuyo tiempo, se agrega un volumen de 19 microlitros de ácido acético glacial al 25 por ciento para detener la reacción. Los compuestos de prueba se agregan normalmente como adiciones de 30 microlitros, y el volumen de regulador de ensayo se reduce a 95 microlitros. Se genera una curva estándar de p-nitroanilina libre utilizando soluciones 0-500 µM de pNA libre en regulador de ensayo. La curva generada es lineal, y se utiliza para la interpolación del consumo del sustrato (actividad catalítica en nanomoles de sustrato disociado/minuto) . El punto final se determina midiendo la absorbencia a 405 nanómetros en un lector de placas de microtitulación Molecular Devices UV Max. La potencia de los compuestos de prueba como inhibidores de DPP-IV, expresada como IC50, se calcula a partir de curvas de respuesta a la dosis de 8 puntos, utilizando una función logística de 4 parámetros.

Se obtuvo la siguiente IC50 : La capacidad de los compuestos de la fórmula I y sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables correspondientes, para inhibir la DPP-IV, también se puede demostrar midiendo los efectos de los compuestos de prueba sobre la actividad de DPP-IV en plasma humano y de rata, empleando una versión modificada del ensayo descrito por Kubota y colaboradores, en un artículo titulado "Involvement of dipeptidylpeptidase IV in an in vivo immune response" en Clin. Exp. Immunol , Volumen 89, páginas 192-197 (1992) . Brevemente, se agregan 5 microlitros de plasma a placas de microtitulación de fondo plano de 96 pozos (Falcon) , seguidos por la adición de 5 microlitros de MgCl2 80 mM en regulador de incubación (HEPES 25 mM, NaCl 140 mM, RIA-grado de ASB al 1 por ciento, pH de 7.8).. Después de una incubación de 60 minutos a temperatura ambiente, se inicia la reacción mediante la adición de 10 microlitros de regulador de incubación conteniendo sustrato 0.1 mM (H-Glicina-Prolina-AMC; AMC es 7-amino-4-metilcumarina) . Las placas se cubren con lámina de aluminio (o se mantienen en la obscuridad) , y se incuban a temperatura ambiente durante 20 minutos. Después de la reacción de 20 minutos, se mide la fluorescencia utilizando un fluorímetro CytoFluor 2350 (Excitación de 380 nanómetros, Emisión de 460 nanómetros; posición de sensibilidad 4) . Los compuestos de prueba se agregan normalmente como adiciones de 2 microlitros, y el volumen del regulador de ensayo se reduce a 13 microlitros. Se genera una curva de fluorescencia-concentración de AMC libre utilizando soluciones 0-50 µM de AMC en regulador de ensayo. La curva generada es lineal, y se utiliza para la interpolación del consumo del sustrato (actividad catalítica en nanomoles de sustrato disociado/minuto) . Como con el ensayo anterior, la potencia de los compuestos de prueba como inhibidores de DPP-IV, expresada como IC50, se calcula a partir de curvas de respuesta a la dosis de 8 puntos, utilizando una función logística de 4 parámetros.

Se obtuvo la siguiente IC50 : En vista de su capacidad para inhibir la DPP-IV, los compuestos de la fórmula I, y sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables correspondientes, son útiles en el tratamiento de condiciones mediadas por la inhibición de DPP-IV. Basándose en los descubrimientos anteriores y en la literatura, se espera que los compuestos dados a conocer en la presente sean útiles en el tratamiento de condiciones tales como diabetes mellitus no dependiente de insulina, artritis, obesidad, trasplante de aloinjerto, y osteoporosis por calcitonina. En adición, basándose en los papeles de los péptidos de tipo glucagon (tales como GLP-1 y GLP-2) y su asociación con la inhibición de DPP-IV, se espera que los compuestos dados a conocer en la presente sean útiles, por ejemplo, para producir un efecto sedante o ansiolítico, o para atenuar los cambios catabólicos post -quirúrgicos y las respuestas hormonales a la tensión, o para reducir la mortalidad y morbidez después de infarto del miocardio, o en el tratamiento de condiciones relacionadas con los efectos anteriores que puedan ser mediadas por niveles de GLP-1 y/o GLP-2. De una manera más específica, por ejemplo, los compuestos de la fórmula I, y sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables correspondientes, mejoran la respuesta temprana de insulina a un estímulo de glucosa oral, y por consiguiente, son útiles en el tratamiento de diabetes mellitus no dependiente de insulina. La capacidad de los compuestos de la fórmula I , y sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables correspondientes, para mejorar la respuesta temprana de insulina a un estímulo de glucosa oral, se puede medir en ratas resistentes a insulina de acuerdo con el siguiente método: Las ratas Sprague-Dawley machos que se habían alimentado con una dieta alta en grasa (grasa saturada = 57 por ciento de calorías) durante 2 a 3 semanas, se pusieron en ayuno durante aproximadamente 2 horas en el día de la prueba, se dividieron en grupos de 8 a 10, y se dosificaron oralmente con 10 micromoles/ kilogramo de los compuestos de prueba en CMC. Se administró un bolo de glucosa oral de 1 gramo/kilogramo 30 minutos después del compuesto de prueba directamente al estómago de los animales de prueba. Se analizaron las muestras de sangre, obtenidas a diferentes tiempos de catéteres crónicos de la vena yugular, para determinar la glucosa en plasma y las concentraciones de insulina inmunorreactiva (IRI) , y la actividad de DPP-IV en plasma. Los niveles de insulina en plasma se ensayaron mediante un método de radioinmunoensayo de anticuerpo doble (RÍA) utilizando un anticuerpo anti-insulina de rata específico de Lineo Research (St. Louis, MO) . El RÍA tiene un límite inferior de detección de 0.5 µU/mililitro con variaciones intra- e inter-ensayos de menos del 5 por ciento. Los datos se expresaron como un porcentaje de incremento del promedio de los animales de control . Después de la administración oral, cada uno de los compuestos probados amplificó la respuesta de insulina temprana, lo cual condujo a una mejora en la tolerancia a la glucosa en los animales de prueba resistentes a insulina. Se obtuvieron los siguientes resultados: La dosificación precisa de los compuestos de la fórmula I, y sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables correspondientes, que se va a emplear para el tratamiento de condiciones mediadas por la inhibición de DPP- IV, depende de varios factores, incluyendo el hospedero, la naturaleza y la severidad de la condición que se esté tratando, el modo de administración, y el compuesto particular empleado. Sin embargo, en general, las condiciones mediadas por la inhibición de DPP- IV son efectivamente tratadas cuando un compuesto de la fórmula I , o una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable correspondiente, se administra enteralmente, por ejemplo oralmente, o parenteralmente, por ejemplo intravenosamente, de preferencia oralmente, en una dosificación diaria de 0.002 a 5, de preferencia de 0.02 a 2.5 miligramos/kilogramo de peso del cuerpo, o para la mayoría de los primates superiores, una dosificación diaria de 0.1 a 250, de preferencia de 1 a 100 miligramos. Una unidad de dosificación oral típica es de 0.--01 a 0.75 miligramos/kilogramo, de una a tres veces al día. Normalmente, se administra una dosis pequeña inicialmente, y la dosificación se incrementa gradualmente hasta que se determina la dosificación óptima para el hospedero bajo tratamiento. El límite superior de la dosificación es aquél impuesto por los efectos secundarios, y puede ser determinado mediante ensayo para el hospedero que se esté tratando. Los compuestos de la fórmula I, y sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables correspondientes, se pueden combinar con uno o más vehículos farmacéuticamente aceptables, y opcionalmente, uno o más adyuvantes farmacéuticos convencionales diferentes, y se pueden administrar enteralmente, por ejemplo oralmente, en la forma de tabletas, cápsulas, caplets, etcétera, o parenteralmente, por ejemplo intravenosamente, en la forma de soluciones o suspensiones estériles inyectables. Las composiciones entérales y parenterales se pueden preparar por medios convencionales . Los compuestos de la fórmula I, y sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables correspondientes, se pueden formular en composiciones farmacéuticas entérales y parenterales que contengan una cantidad de la sustancia activa que sea efectiva para el tratamiento de condiciones mediadas por la inhibición de DPP- IV, estando tales composiciones en una forma de dosificación unitaria, y comprendiendo estas composiciones un vehículo farmacéuticamente aceptable. Los compuestos de la fórmula I (incluyendo aquéllos de cada uno de los subalcances de los mismos y de cada uno de los ejemplos) se pueden administrar en una forma enantioméricamente pura (por ejemplo, ee >98 por ciento, de preferencia >99 por ciento) , o junto con el enantiómero R, por ejemplo en forma racémica. Los rangos de dosificación anteriores se basan en los compuestos de la fórmula I (excluyendo la cantidad del enantiómero R) . Los siguientes ejemplos muestran compuestos representativos abarcados por esta invención, y su síntesis. Sin embargo, se debe entender claramente que son para propósitos de ilustración solamente.

Ejemplo 1 (S) -1- [ (3-hidroxi-1-adamantil) amino] acetil-2-ciano-pirrolidina A. 1-Aminoadamantan-3 -ol : Se pueden utilizar ligeras modificaciones a la síntesis que se encuentra en Khim. -Farm. Zh (1986), 20(7), 810-15. A una mezcla transparente e incolora enfriada con agua helada, rápidamente agitada, de ácido sulfúrico concentrado al 96 por ciento (210 mililitros; 3,943 milimoles), y ácido nítrico al 65 por ciento (21.0 mililitros; 217.0 milimoles), se le agregan 21.0 gramos (112.0 milimoles) de 1-adaman ilamina HCl (al 99 por ciento), en pequeñas porciones durante 30 minutos. Después de la adición del clorhidrato de adamantilamina, se presenta un ligero burbujeo, y la reacción es ligeramente exotérmica. Esta solución amarilla burbujeante se agita a una temperatura de agua helada durante aproximadamente 2 horas, y luego a temperatura ambiente durante 30 horas. Esta reacción amarilla clara transparente se vierte luego en aproximadamente 100 gramos de hielo, y la solución resultante es azul-verde transparente .

La solución se coloca en un baño de agua helada, y se deja agitándose durante 30 minutos. Luego se agregan aproximadamente 550 gramos de KOH puro al 89 por ciento (8.74 moles) en pequeñas porciones durante 45 minutos. Durante esta adición, la reacción es exotérmica; llegando a 80 °C, y produciendo cantidades copiosas de gas N02 castaño. Al final de la adición, la reacción es espesa con sólidos blancos (tanto producto como sales) . Luego se vierte la pasta blanca resultante sobre un embudo Buchner/coj ín de Celite, y se lava con 1.2 litros de CH2C12. Entonces la capa de CH2C12 se extrae de la capa de agua, y se seca sobre Na2S04. Luego la solución se filtra y se concentra (evaporador giratorio/bomba) para proporcionar l-aminoadamantan-3-ol como un sólido blanco.

B_;_ l-Cloroacetil-2-cianoüirrolidina A una solución mecánicamente agitada de 20.0 gramos (180.0 milimoles) de cloruro de cloroacetilo, y 97 gramos (0.70 milimoles) de carbonato de potasio en 150 mililitros de tetrahidrofurano, se le agrega una solución de L-prolinamida, 20.0 gramos (180.0 milimoles) en 500 mililitros de tetrahidrofurano en una forma por goteo durante 45 minutos. Luego esta reacción se agita mecánicamente durante 2 horas adicionales a temperatura ambiente. Entonces la reacción se filtra para remover las sales de potasio, y el filtrado se seca sobre Na2S04. Entonces se remueve el Na2S04 mediante filtración, y a este filtrado incoloro se le agrega anhídrido trifluoroacético (25.0 mililitros, 0.180 milimoles) en una porción. Luego la reacción se agita magnéticamente durante 1 hora a temperatura ambiente, y la solución amarilla/naranja transparente resultante se concentra por medio del evaporador giratorio. El exceso de anhídrido trifluoroacético se remueve mediante la adición de acetato de etilo al aceite concentrado, y se reconcentra por medio del evaporador giratorio. Esta operación de remoción se realiza tres veces. El aceite resultante se divide entre acetato de etilo y agua. Luego el producto se extrae en acetato de etilo, y la capa acuosa se lava entonces dos veces con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavan luego sucesivamente con agua y salmuera, se secan sobre sulfato de magnesio, se filtran, y se concentran, para obtener l-cloroacetil-2-cianopirrolidina como un sólido amarillo.

C. (S) 1- T (3 -hidroxi -1-adamantil) aminol acetil-2-ciano- pirrolidina A una solución heterogénea del compuesto del título A (l-aminoadamantan-3-ol (5.80 gramos, 34.7 milimoles)) en CH2C12 (68.0 mililitros) se le agregan 9.6 gramos (69 milimoles) de K2C03. Esta mezcla heterogénea se enfría entonces en un baño de agua helada, y se agrega por goteo una solución de 3.0 gramos (17 milimoles) del compuesto del título B (l-cloroacetil-2- cianopirrolidina) disueltos en 25.0 mililitros de CH2C12 durante un período de 30 minutos. La mezcla resultante se agita durante 2 horas a 0°C y a temperatura ambiente durante 6 días. Entonces la reacción se concentra para obtener un material pastoso amarillo, el cual se purifica sobre gel de sílice empleando un sistema de cromatografía SIMS/Biotage Flash, y una solución al 7 por ciento de metanol en cloruro de metileno como el eluyente, para producir el compuesto del título en forma de base libre como un sólido cristalino blanco (punto de fusión de 138 °C- 140°C, 13C NMR (ppm) = 119.59).

Ejemplos 2 a 12 Los siguientes compuestos se preparan de una manera análoga al método del Ejemplo 1 (especialmente el Paso C) : (HCl) como clorhidrato Todas las sales de HCl de los productos finales se preparan pasando gas de HCl a través de una solución 0.1 Molar de la base libre en tetrahidrofurano, hasta que la solución sea claramente acida, seguido por remoción del solvente (evaporador giratorio/bomba) .

Los materiales de partida de ami o-adamantano son conocidos en la literatura, o se pueden preparar como sigue: La fabricación de 3 , 5-dimetil-l-adamantilamina se describe en J. Med. Chem, 25; 1; 1982; 51-56. La fabricación de 3-etil-1-adamantilamina se describe en J. Med. Chem, 25; 1; 1982; 51-56. La 3 -metoxi-1-adamantilamina se puede preparar como sigue : A una suspensión enfriada en agua helada, agitada, de hidruro de potasio (0.680 gramos; 5.95 milimoles) en 15.0 mililitros de tetrahidrofurano, se le agrega una mezcla de 1-aminoadamantan-3-ol (1.00 gramo; 5.95 milimoles) y 15.0 mililitros de tetrahidrofurano por goteo durante 30 minutos. La mezcla resultante se agita luego durante 30 minutos adicionales, y luego se agrega por goteo yodometano (0.370 mililitros; 5.95 milimoles) durante un minuto. La reacción blanca opaca resultante se agita entonces a temperatura ambiente durante 18 horas. Luego la mezcla se diluye con 50 mililitros de cloruro de metileno, y se filtra para remover las impurezas inorgánicas. Después se concentra el filtrado, y se purifica sobre gel de sílice, empleando un aparato SIMS/Biotage, y metanol al 19 por ciento e hidróxido de amonio al 1 por ciento en cloruro de metileno como eluyente, para producir 3 -metoxi-1-adamantilamina como un aceite opaco.

Síntesis de 3- \ í (terbutilamino) carbonill oxil -1-aminoa-damantano : A una mezcla de l-aminoadamantan-3-ol (5.00 gramos; 30.0 milimoles) y carbonato de potasio (6.20 gramos; 45 milimo-les) en 150 mililitros de tetrahidrofurano, se le agrega cloro-formato de bencilo (4.70 gramos, 33.0 milimoles) en una forma por goteo, durante un período de 10 minutos. Luego la mezcla se agita a temperatura ambiente durante 2 horas, y entonces se divide entre acetato de etilo y agua. Entonces se extrae el producto en acetato de etilo, y la capa acuosa se lava dos veces con acetato de etilo (100 mililitros) . Luego las capas orgánicas combinadas se lavan sucesivamente con 100 mililitros de hidróxido de sodio acuoso 2N, agua, y salmuera, se secan sobre sulfato de sodio, se filtran y se concentran (evaporador giratorio/bomba) para proporcionar l-bencilcarbamoiladamantan-3-ol como un sólido blanco en un rendimiento del 85 por ciento. A una solución transparente de 1-bencilcarbamoiladamantan-3-ol (1.00 gramo; 3.32 milimoles) e isocianato de terbutilo (380 microlitros, 3.32 milimoles) en 30 mililitros de cloruro de metileno, se le agrega con jeringa cloruro de trimetilsililo (20.0 microlitros, 0.17 milimoles). Luego esta reacción se agita a temperatura ambiente durante 18 horas, se concentra (evaporador giratorio) , y se purifica sobre gel de sílice, empleando un aparato SIMS/Biotage y acetato de etilo al 20 por ciento en hexano como eluyente, para producir 3- [ [ (terbutilamino) carbonil] oxi] -1-bencilcarboniladamantano como un sólido blanco en un rendimiento cuantitativo. A una mezcla de 3- [[ (terbutilamino) carbonil] oxi] -1-bencilcarbamoiladamantano (1.50 gramos, 3.75 milimoles) y paladio sobre carbono al 10 por ciento (400 miligramos) en etanol (150 mililitros) en un matraz de hidrogenación Parr de 1 litro, se le agrega hidrógeno (3.5 kg/cm2). Esta mezcla negra opaca se agita entonces durante 24 horas. Luego la reacción se filtra a través de Celite para remover el catalizador de paladio y se concentra (evaporador giratorio/bomba) para proporcionar 3- [[ (terbutilamino) carbonil] oxi] -1-aminoadamantano como un aceite transparente en un rendimiento del 99 por ciento. El procedimiento para la síntesis de 4- T [ T (metoxifenil) aminol carbonill oxil -1-aminoadamantaño es esencialmente el procedimiento de 3- [[ (terbutilamino) carbonil] oxi] -1-aminoadamantano, excepto en el segundo paso, en donde un equivalente de isocianato de 4-metoxifenilo reemplaza al isocianato de terbutilo, se utiliza 1 , 2-dicloroetano como solvente en lugar de cloruro de metileno, y la reacción se agita a 50 °C durante 18 horas. El intermediario de amina final se proporciona como un aceite. El procedimiento para la síntesis de 3- f f (fenilamino) -carbonill oxi] -1-aminoadamantaño es esencialmente el procedimiento de 3- [ [ (terbutilamino) carbonil] oxi] -1-aminoadamantano, excepto en el segundo paso, en donde un equivalente de isocianato de fenilo reemplaza al isocianato de terbutilo, se utiliza 1,2-dicloroetano como solvente en lugar de cloruro de metileno, y la reacción se agita a 50 °C durante 18 horas. El intermediario de amina final se proporciona como una aceite transparente. El procedimiento para hacer 2-aminoadamantan-5-ol es el mismo que en el Ejemplo 1, excepto que el material de partida es 2 -aminoadamantano en lugar de 1-aminoadamantano. El procedimiento para la síntesis del nucleófilo 3_^ acetoxi- 1-aminoadamantano es esencialmente el procedimiento de 3- [ [ (terbutilamino) carbonil] oxi] -1-aminoadamantano, excepto por una acilación estándar de l-bencilcarbamoiladamantan-3-ol que utiliza 1.2 equivalentes de cloruro de acetilo, 3.0 equivalentes de piridina, 0.1 equivalentes de 4-dimetilaminopiridina, y 1,2-dicloroetano, que se agitan todos a temperatura ambiente durante 24 horas. La amina final se proporciona como un aceite espeso. El procedimiento para la síntesis de 3- í í [ (di-isopro-pil) aminol carbonill oxil -1-aminoadamantano es esencialmente el procedimiento de 3- [[ (terbutilamino) carbonil] oxi] -1-aminoadaman-taño, excepto en el segundo paso, en donde un equivalente de cloruro de di-isopropilcarbamoílo reemplaza al isocianato de terbutilo, se utiliza 1, 2-dicloroetano como solvente en lugar de cloruro de metileno, y la reacción se agita a 85°C durante 18 horas . El intermediario de amina final se proporciona como un sólido gris. El procedimiento para la síntesis de 3- \ \ f (ciclohexil) aminol carbonill oxil -1 -aminoadamantano es esencialmente el procedimiento del 3- [ [ (terbutilamino) carbonil] oxi] -1-aminoadamantano, excepto en el segundo paso, en donde un equiva-lente de isocianato de ciciohexilo reemplaza al isocianato de terbutilo, se utiliza 1, 2-dicloroetano como solvente en lugar de cloruro de metileno, y la reacción se agita a 50 °C durante 18 horas. El intermediario de amina final se proporciona como un aceite espeso transparente . El procedimiento para hacer 3 -etoxi - 1 -adamantilamina (un aceite transparente) es el mismo que para 3 -metoxi -1-adaman-tilamina, excepto que se utiliza yodoetano (1.3 equivalentes) en lugar de yodometano.

Ejemplo de Formulación Se pueden preparar tabletas, conteniendo cada una 50 miligramos de ingrediente activo, por ejemplo, (S) 1- [ (3-hidroxi-1-adamantil) amino] acetil-2-ciano-pirrolidina, como sigue: Composición (para 10,000 tabletas) Ingrediente Activo 500.0 gramos Lactosa 500.0 gramos Almidón de papa 352.0 gramos Gelatina 8.0 gramos Talco 60.0 gramos Estearato de magnesio 10.0 gramos Sílice (altamente dispersa) 20.0 gramos Etanol c.s. El ingrediente activo se mezcla con la lactosa y 292 gramos de almidón de papa, y la mezcla se humedece utilizando una solución alcohólica de la gelatina, y se granula por medio de un tamiz. Después de secarse, se mezclan el resto del almidón de papa, el talco, el estearato de magnesio, y la sílice altamente dispersa, y la mezcla se comprime para dar tabletas de un peso de 145.0 miligramos cada una, y un contenido de ingrediente activo de 50.0 miligramos que, si se desea, pueden ser provistas con muescas para cortarse, para un ajuste más fino de la dosis.

Claims (9)

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de la fórmula I : en donde : R es adamantilo sustituido; y n es de 0 a 3 ; en forma libre o en forma de sal de adición de ácido.

2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, de las fórmulas (IA) ó (IB) : en donde R' representa hidroxilo, alcoxilo de 1 a 7 átomos de carbono, alcanoiloxilo de 1 a 8 átomos de carbono, o R5R4N-CO-O-, en donde R4 y R5 son independientemente alquilo de 1 a 7 átomos de carbono, o fenilo que está insustituido o sustituido por un sustituyente seleccionado a partir de alquilo de 1 a 7 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 7 átomos de carbono, halógeno, y trifluorometilo, y en donde R4 es adicionalmente hidrógeno; o R4 y R5 representan juntos alquileno de 3 a 6 átomos de carbono; y R" representa hidrógeno; o R' y R" representan independientemente alquilo de 1 a 7 átomos de carbono; en forma libre o en forma de una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable.

3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 de la fórmula I , seleccionado a partir del grupo que consiste en: (S) -1- [ [ (3 , 5-dimetil-l-adamantil) amino] -acetil] -2-ciano-pirrolidina; (S) -1- [ [ (3-etil-l-adamantil) amino] acetil] -2-ciano-pirrolidina; (S) -1- [ [ (3-metoxi-l-adamantil) amino] -acetil] -2-ciano-pirrolidina; (S) -1- [ [ [3- [ [ (t-butilamino) carbonil] oxi] -1-adamantil] amino] acetil] -2 -ciano-pirrolidina; (S) -1- [ [ [3- [ [ [ (4-metoxifenil) amino] carbonil] oxi] -1-adamantil] amino] acetil] -2-ciano-pirrolidina; (S)-l-[[[(3-[[ (fenilamino) carbonil] oxi] -1-adaman-til] amino] acetil] -2-ciano-pirrolidina; (S) -1- [ [ (5-hidroxi-2-adamantil) amino] -acetil] -2-ciano-pirrolidina; (S) -1- [ [ (3 -acetiloxi-1-adamantil) amino] acetil] -2-ciano-pirrolidina; (S) -1- [ [ [3- [ [ [ (di-isopropil) amino] carbonil] oxi] -1- adamantil] amino] acetil] -2 -ciano-pirrolidina; (S) -1- [ [ [3- [ [ [ (ciclohexil) amino] carbonil] -oxi] -1-adamantil] amino] acetil] -2-ciano-pirrolidina; y (S) -1- [ [ (3 -etoxi-1-adamantil) amino] -acetil] -2-ciano-pirrolidina; o en cada caso, una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable de las mismas.

4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, el cual es: (S) -1- [ (3 -hidroxi-1-adamantil) amino] acetil-2-ciano-pirrolidina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

5. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en forma libre o en forma de sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable, junto con cuando menos un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

6. El uso de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, o de una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable del mismo, para la fabricación de un medicamento para inhibir la dipeptidil-peptidasa-IV; o un método para inhibir la dipeptidil-peptidasa- IV, el cual comprende administrar a un mamífero que necesite dicho tratamiento, una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable del mismo.

7. El uso de acuerdo con la reivindicación 6, en donde el medicamento se utiliza para tratar condiciones mediadas por la inhibición de dipeptidil-peptidasa-IV, o un método para tratar condiciones mediadas por la inhibición de dipeptidil-peptidasa-IV, el cual comprende administrar a un mamífero que necesite dicho tratamiento, una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable del mismo.

8. El uso de acuerdo con la reivindicación 7, en donde el medicamento se utiliza para el tratamiento de diabetes mellitus no dependiente de insulina; o el método de acuerdo con la reivindicación 7, en donde la condición tratada es diabetes mellitus no dependiente de insulina.

9. El uso de acuerdo con la reivindicación 7, en donde el medicamento se utiliza para el tratamiento de obesidad; o el método de acuerdo con la reivindicación 7, en donde la condición tratada es obesidad.