MXPA00008165A - Oligomeros de poliamida estabilizantes de enzima - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a un oligómero de poliamida el cual mejora significativamente la estabilidad y vida media de enzimas, particularmente de composiciones enzimáticas líquidas. La especificación describe también una composición estabilizada que contiene por lo menos un oligómero de poliamida y por lo menos una enzima en donde el oligómero de poliamida estápresente en una cantidad efectiva para estabilizar la enzima. Un método para preparar una composición enzimática estabilizada que combina por lo menos un oligómero de poliamida y por lo menos una enzima. El oligómero de poliamida es agregado en una cantidad efectiva para estabilizar la enzima.

Description

OLÍGOMEROS DE POLIAMIDA ESTABILIZANTES DE ENZIMA. DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La invención se refiere oligómeros de poliamida capaces de estabilizar una o más enzimas. La invención 5 también se refiere a composiciones enzimáticas estabilizadas que contiene tales oligómeros de poliamida. Las enzimas estabilizadas por los oligómeros de poliamida de la invención exhiben mejorado almacenamiento, vida de almacén y dispersabilidad a altas y bajas temperaturas. 10 El uso de enzimas y composiciones enzimáticas líquidas en la industria y en el mercado comercial ha crecido rápidamente durante los últimos años. Por ejemplo, muchas enzimas y composiciones enzimáticas líquidas se han asociado con detergentes líquidos y han mostrado utilidad como formulaciones solubilizantes y de limpieza. Las enzimas usadas solas o en composiciones enzimáticas líquidas, comprenden una amplia diversidad de clases de enzimas y pueden ser acidas, alcalinas o neutras, dependiendo del rango de pH en el cual son activas. 20 Las proteasas son una clase bien conocida de enzimas frecuentemente utilizadas en una amplia diversidad de aplicaciones industriales en donde actúan para hidrolizar los enlaces péptidos de las proteínas y en sustratos de proteína. Comercialmente, los usos más grandes de las proteasas es en la industria de detergentes de lavandería, donde ayudan a eliminar manchas basadas en proteína tales como manchas de sangre o de huevo, y en la industria de fabricación de queso, en donde ayudan en el cuajado de la leche. Las proteasas también se usan como suavizadores de carne, para suavizar cuero, para modificar ingredientes alimenticios y para el desarrollo de aroma. Las composiciones enzimáticas líquidas que contienen proteasas alcalinas también han mostrado ser útiles como dispersantes de películas de bacterias, marañas de algas y hongos en bahías de contención para fluidos para trabajo de metales. Las proteasas acidas incluyen cuajos microbianos, renina, quimocina, pepcina, y proteasas acidas de hongo. Las proteasas neutras incluyen tripsina, papaina, bromelaina/ficina, y proteasa neutra bacteriana. Las proteasas alcalinas incluyen subtilisina y proteasas relacionadas. Las composiciones enzimáticas líquidas comerciales que contienen proteasas están disponibles bajo los nombres RENNILASA®, "PTN" (Tripsina Pancreática NOVO) , "PEM" (Mezcla Enzimática Proteolítica) , NEUTRASE®, ALCALASE®, ESPERASE® y SAVINASE™, las cuales se suministran por Novo Nordisk Bioindustrials, Inc. de Danbury, Conn. Otra composición eszimática líquida comercial que contiene proteasas está disponible bajo el nombre HT-Proteolytic suministrada por Solvay Enzyme Products. Otra clase de enzimas conocidas como amilasas también han sido utilizadas en muchos procesos industriales y comerciales en los cuales actúan para catalizar o acelerar la hidrólisis del almidón. Las amilasas se usan principalmente en la industria de jarabe de maíz para la producción de jarabes de glucosa, jarabes de maltosa, y una diversidad de otros productos finales más refinados de hidrólisis de almidón tales como jarabes de fructosa elevada. Como una clase incluyen alfa-amilasa, beta-amilasa, amiloglucosidasa (glucoamilasa) , amilasa de hongo, y pululanasa. Las composiciones enzimáticas líquidas comerciales que contienen almilasas están disponibles bajo los nombres BAN, TERMAMYL®, AMG, FUNGAMYL® y PROMOZYME™, los cuales se suministran por Novo Nordisk, y Diazyme L-200, un producto de Solvay Enzyme Products . Otras clases enzimáticas valiosas comercialmente son aquellas que afectan la hidrólisis de fibras. Estas clases incluyen celulasas, hemicelulasas, pectinasas y betaglucanasas. Las celulasas son enzimas que degradan la celulosa, un polímero lineal de glucosa que se presenta en las paredes celulares de las plantas. Las hemicelulasas están involucradas en la hidrólisis de celulosa, la cual, como la celulosa es un polisacárido encontrado en las plantas . Las pectinasas son enzimas involucradas en la degradación de pectina, un carbohidrato cuyo componente principal es un azúcar ácido. Las betaglucanasas son enzimas involucradas en la hidrósis de beta-glucanas los cuales también son similares a la celulosa en que son polímeros lineales de glucosa. En un contexto comercial, estas enzimas tienen utilidad a un mayor o menor grado en el proceso de fabricación dependiente de la degradación de fibras . Las celulasas han reportado utilidad en el proceso de destintado de papel periódico viejo de desecho (ONP) , que elimina la necesidad de cualesquier tensioactivos y químicos alcalinos. Las enzimas desalojan las tintas de las superficies de las fibras y dispersan las partículas de tinta hasta un tamaño finito. S. Say-Kyoun O , "Biological De-Inking Methods of Newprint astepaper", World Pulp and Paper Technology, 63-64 (1992). Colectivamente, las celulasas incluyen endocelulasa, exocelulasa, exocelo-biohidrolasa, y celoblasa. Las composiciones enzimáticas líquidas comerciales que contienen celulasa están disponibles bajo los nombres CELLUCLAST® y NOVOZYM® 188 las cuales se suministran por Novo Nordisk. Las hemicelulasas también se usan en el proceso de destintado para desalojar partículas de tinta de la superficie de fibras de ONP. D. Y. Prasal et al., "Enzyme Deinking of Black and Whitre Letterpress Printed Ne sprint Waste", Progress in Paper Recycl ing, 21-22 (1992) . Adicionalmente, las hemicelulasas, tales como las xilanasas, se emplean en el proceso de blanqueado de pulpa. El pretratamiento con xilanasa de pulpas kraft ha resultado en mayores reducciones en los requerimientos de blanqueado químico, tales como cloro molecular, y también ha mejorado la calidad de la pulpa como se refleja en límites superiores más altos de brillantez. D. J. Sénior et al., "Reduction in Chlorine Use During Bleaching of Kraft Pulp Following Xylanasa Treatment", Bleaching: Tappi Press Anthology of Publ ished Papers, 1991-1992 (Jameel, H., ed . ) , Chapter 4:274-279 (1993; TAPPI Press) . El producto PULPZYME®, disponible de Novo Nordisk, y producto ECOPULP®, de Alko Biotechnology, son dos ejemplos de composiciones enzimáticas líquidas disponibles comercialmente que contienen enzimas blanqueadoras basadas en xilanasa.. Como una clase, las emicelulasas incluyen mezclas de emicelulasas y galactomanasas . Las composiciones enzimáticas líquidas comerciales que contienen hemicelulasas están disponibles como PULPZYME® de Novo, ECOPULP® de Alko Biotechnology y NOVOZYM® 280 y GAMANASE™, las cuales son productos de Novo Nordisk. Las pectinasas se usan comercialmente para debilitar las paredes celulares y mejorar la extracción del jugo de frutas, así como para ayudar en la disminución de la viscosidad y prevenir la gelación en estos extractos. Las pectinasas consisten de endopoligalacturonasa, exopoligalacturonasa, endopectatoliasa ( transeliminasa) , exopectato liasa (transeliminasa) , y endopectina liasa ( transeliminasa) . Las composiciones enzimáticas líquidas comerciales que contienen pectinasa están disponibles bajo los nombres PECTINEX™ Ultra SP y PECTINEX™, suministradas por Novo Nordisk. ' Las beta-glucanasas son de importancia en las industrias de malta y elaboración de cerveza en donde la modificación de las paredes celulares de cebada que tienen beta-glucanas es necesaria. Las beta-glucanasas incluyen liquenasa, laminarinasa, y exoglucanasa . Las composiciones enzimáticas líquidas comerciales que contienen betaglucanasas están disponibles bajo los nombres NOVOZYM® 234, CEREFLO®, BAN, FINIZYM®, y CEREMIX®, todas las cuales se suministran por Novo Nordisk. Dos clases adicionales de enzimas útiles industrialmente y comercialmente son las lipasas y fosfolipasas . Las lipasas y fosfolipasas son enzimas estearasa las cuales hidrolizan las grasas y aceite atacando los enlaces éster en estos compuestos. Las lipasas actúan sobre los triglicéridos, mientras que las fosfolipasas actúan sobre los fosfolípidos. En el sector industrial, las lipasas y fosfolipasas representan las estearasas disponibles comercialmente, y tienen actualmente un número de aplicaciones industriales y comerciales. En la industria de la pulpa y el papel, las preparaciones enzimáticas líquidas que contienen lipasas han probado ser particularmente útiles para reducir depósitos pendientes sobre rodillos y otro equipo durante el proceso de producción. Por ejemplo, el tratamiento de pulpa al bisulfito sin blanquear con lipasas antes de blanquear con cloro para reducir el contenido de triglecéridos clorinados, los cuales son referidamente la causa de deposición en declive durante el proceso de fabricación de papel, ha sido reportado. K. Fischer and K. Messher, "Reducing Troublesome Pitch in Pulp Mills By Lipolytic-Enzymes" , Tappi Journal , 130 (1992) . Novo Nordisk comercializa dos preparaciones enzimáticas líquidas bajo los nombres RESINASE™ y RESINASE™ A 2X, ambas de las cuales, bajo ciertas condiciones, se refiere que reducen los depósitos en declive significativamente al romper las resinas de la madera en la pulpa. Otros uso importante de las lipasas es para desengrasar los cueros y pieles en el proceso de fabricación de cuero. Las lipasas alcalinas se usan junto con proteasas especiales y sistemas emulsificantes para ayudar a desengrasar, así como mejorar el efecto de remojo y encalado en la fabricación de cuero. J. Christher, "The Use of Lipases in the Beamhouse Processes", J. A . L . C. A . 87, 128 (1992). Las lipasas también se han usado para el desarrollo de sabores en el queso y para mejorar el buen sabor de la carne encebada para perro. En sistemas no acuosos, las lipasas se han empleado para sintetizar esteres de ácidos carboxílicos y alcoholes. Las composiciones enzimáticas líquidas comerciales que contienen lipasas están disponibles bajo los nombres Lipolase 100, Greasex 50L, PALATASE™ A, PALATASE™ M, y NIPOZYME™ todas las cuales se suministran por Novo Nordisk. Con respecto a las fosfolipasas útiles comercialmente, la fosfolipasa pancreática A2 se ha usado para convertir lecitina en lisolecitina . Referidamente la lisolecitina es un excelente emulsificante en la producción de mayonesa y el horneado de pan. Comercialmente, la fosfolipasa A2 está disponible en una composición enzimática líquida vendida como LECITASA™ por Novo Nordisk. Otra clase comercialmente valiosa de enzimas son las isomerasas, las cuales catalizan las reacciones de conversión entre los isómeros de compuestos orgánicos. Las isomerasas son particularmente importantes en la industria del jarabe de maíz de fructosa, elevada. Por ejemplo, la reacción de aldosa-cetosa isomerasa, catalizada por glucosa isomerasa, involucra la conversión de glucosa a fructuosa y es justamente una de las tres reacciones enzimáticas clave en la industria. El producto SWEETZYME® es una composición enzimática líquida que contiene glucosa isomerasa la cual se suministra por Novo Nordisk. Las enzimas redox son enzimas que actúan como catalizadores en reacciones químicas de oxidación/reducción y, consecuentemente, están involucradas en el rompimiento y síntesis de muchos bioquímicos. Frecuentemente, muchas enzimas redox no han ganado un lugar prominente en la industria puesto que la mayoría de las enzimas redox requieren la presencia de un cofactor. Sin embargo, donde los cofactores son una parte integral de una enzima o no tiene que ser suministrado, las enzimas redox son comercialmente útiles, particularmente en la industria de procesamiento de alimentos. La enzima redox glucosa oxidasa se usa para prevenir reacciones de oscurecimiento no deseadas que afectan el color y sabor del alimento. La glucosa oxidasa se usa también como un "depurador de oxígeno" para prevenir el desarrollo de sabores desagradables en jugos y para preservar el color y la estabilidad en ciertos ingredientes alimenticios sensibles. La enzima redox catalasa se ha utilizado para descomponer peróxido de hidrógeno residual usado como agente esterilizante. Una tercera enzima redox, lipoxidasa (lipoxigenasa) , naturalmente encontrada en la harina de soya y usualmente no purificada para uso industrial, se usa en horneado, no solamente para obtener pan más blanco, sino también para revertir los efectos de suavisado de la masa causados por ciertos agentes. Otras enzimas redox tienen posibles aplicaciones que se extienden desde la síntesis enzimática de derivados de esteroides para uso en las pruebas de diagnóstico. Estas enzimas redox incluyen peroxidasa, superóxido dismutasa, alcohol oxidasa, polifenol oxidasa, xantin oxidasa, sulfidril oxidasa, hidroxilasas, colesterol oxidasa, lacasa, alcohol deshidrogenasa, y deshidrogenasas de esteroides. Cuando las enzimas, tales como aquellas descritas anteriormente, se preparan para uso o venta en procesos industriales, se formulan generalmente dentro de composiciones enzimáticas líquidas diseñadas para un proceso particular. Estas composiciones enzimáticas líquidas, sin embargo, han estado históricamente plagadas con problemas tales como inestabilidad química la cual puede resultar en la pérdida de actividad enzimática, particularmente en el almacenamiento. Este crítico problema de pérdida de actividad enzimática debido al almacenamiento ha afectado particularmente la industria de detergentes líquidos . No es infrecuente tener productos industriales, tales como composiciones enzimáticas líquidas, almacenadas en almacenes en diversos climas alrededor del mundo en donde el producto está sometido a una temperatura que puede variar desde la congelación hasta arriba de 50°C durante periodos extensos. Después del almacenamiento a temperaturas extremas que varían de 0°C a 50°C durante muchos meses, la mayoría de las composiciones enzimáticas líquidas pierden de 20 hasta 100% de su actividad enzimática debido a la inestabilidad enzimática . Se han hecho diversos intentos para estabilizar las enzimas contenidas en composiciones enzimáticas líquidas. Los intentos para aumentar la estabilidad de composiciones enzimáticas líquidas que usan formulaciones que contienen alcoholes, glicerol, dialquilglicoléteres, copolímeros de bloque, copolímeros de injerto de poliésteres de etilenglicol u óxido de etileno y mezclas de los mismos y otros compuestos solamente han tenido éxito marginal, aún en rangos de temperatura de almacenamiento moderados . En la Patente Norteamericana 5,082,585, la cual fue una continuación en parte de la Patente Norteamericana No. 4,908,150, se describen composiciones detergentes líquidas enzimáticas las cuales comprende enzimas lipolíticas . La estabilidad de las enzimas lipolíticas en las composiciones se mejora significativamente por la inclusión de etilenglicol no iónico particular que contiene copolímeros. Los polímeros comprenden etilenglicol u óxido de etileno copolimerizado con ácidos disfuncionales o copolímeros basados en vinilo. Los copolímeros pueden ser predominantemente de bloque lineal o al azar o pueden ser copolímeros de injerto con cadenas laterales dependientes. Sin embargo, los datos de estabilidad ejemplificados para estos polímeros muestran que solamente estabilizan la lipolasa durante un máximo de 47.7 días a 37°C. En la Patente Norteamericana 4,801,544, se describe un sistema de etilenglicol y tensioactivo no iónico de alcohol lineal etoxilado con solventes de hidrocarburo utilizado- como un estabilizador y el encapsulado de las enzimas en micelas dentro de la mezcla solvente/tensioactivo . El contenido de agua de la composición se mantuvo a menos del 5%, y la estabilidad enzimática se comprobó a 1.7°, 21.1°, 37.8°C (35°, 70°, y 100°F) . En la Patente Norteamericana No. 4,715,990, se describe un detergente líquido basado en un detergente no iónico que contiene una enzima que promueve la liberación de manchas. El detergente comprende un detergente no iónico orgánico sintético, un sulfato polietoxilado de alcohol graso superior, un tipo particular de promotor de liberación de manchas de polietilentereftalato y polioxietilenteraftalato, una proporción de enzimas suficiente para hidrolizar enzimáticamente manchas proteinaceas o amiláceas durante el lavado con una solución de lavado acuosa del detergente líquido, una proporción estabilizante de un estabilizador para enzima o enzimas y un medio acuoso. La estabilización de una preparación enzimática acuosa usando ciertos esteres se ha descrito en la Patente Norteamericana No. 4,548,727. El éster usado como un estabilizador tiene la fórmula RCOOR ' en donde R es un alquilo de 1 a 3 carbonos o hidrógeno, y R' es un alquilo de 1 a 6 carbonos . El éster está presente en la preparación enzimática acuosa en una cantidad de 0.1 hasta aproximadamente 2.5% en peso. La Patente Norteamericana No. 4,318,818 describe un sistema estabilizador para composiciones enzimáticas acuosas en donde el sistema estabilizante comprende iones calcio y un ácido carboxílico de bajo peso molecular o sus sales. El pH del sistema estabilizante es de aproximadamente 6.5 hasta aproximadamente 10.0. En la Patente Norteamericana No. 3,950,277, se describen composiciones que comprenden una enzima lipolítica, un activador de lipasa seleccionado del grupo que consiste de naftalensulfonato solubles en agua; derivados polioxialquileno de etilendiamina solubles en agua; y sales de acilamina acida solubles en agua. En la Patente Norteamericana No. 3,944,470 y Patente Norteamericana No. 4,011,169 las composiciones que contienen enzima y ciertos polisacáridos aminados se describe. Las composiciones detergentes enzimáticas que contienen ciertos agentes tensioactivos orgánicos en combinación con enzimas y polisacáridos aminados también se describe. La Patente Norteamericana No. 4,272,396 describe composiciones detergentes que contiene enzimas que contienen como ingredientes esenciales: a-olefinsulfonatos, polietilenglicoles y enzimas. La Patente Norteamericana No. 4,243,543 describe la estabilización de composiciones de detergente que contienen enzima proteolítica líquida agregando un antioxidante y un poliol hidrofílico a la composición al mismo tiempo que estabiliza el pH de la composición . La Patente Norteamericana No. 4,169,817 describe una composición de . limpieza líquida que contiene enzimas estabilizadas. La composición es una solución acuosa que contiene de 10% a 50% de sólidos y que incluye formadores de detergente, agentes tensioactivos, un sistema enzimático derivado de Bacillus subtilis y un agente estabilizador enzimático. Los agentes estabilizadores comprenden sales de sodio o potasio altamente solubles en agua y/o hidroxialcoholes solubles en agua y permiten que la solución se almacene durante periodos extensos sin la desactivación de las enzimas. También se han descrito otras composiciones de detergente. La Patente Norteamericana No. 4,711,739 describe composiciones para lavandería tipo prespotter de emulsión de agua en aceite que contienen enzimas, y poliéster específico o polioles de poliéster. La Patente Europea No. 0 352 244 A2 describe composiciones de detergente líquido estabilizadas usando un tensioactivo anfotérico y la Patente Europea No.

O 126 505 describe composiciones de detergente líquido enzimático acuosos las cuales contienen un sistema estabilizador de enzima. El sistema estabilizador de enzima reemplaza los polioles en sistemas estabilizantes de enzima bien conocidos. Basados en mezclas de un poliol con un compuesto de boro o con una sal de reducción, con un ácido dicarboxílico . La Patente Norteamericana No. 5,356,800 describe una formulación estabilizante capaz de mejorar el almacenamiento y la vida de almacén de composiciones enzimáticas líquidas así como para actuar como una ayuda dispersante para aguas de proceso industrial. La formulación estabilizante contiene al menos un agente de acoplamiento soluble en agua seleccionado de un alcohol de cadena corta y un glicol de cadena corta, al menos uno de (i) una alquildiamina polietoxilada y (ii) un óxido de amina, y agua. También se describe una composición enzimática líquida estabilizada la cual puede contener uno o más componentes de la formulación estabilizante y una enzima. También se describen los métodos para estabilizar una composición enzimática líquida. A pesar de tales esfuerzos, algunas formulaciones y composiciones anteriores fueron aplicables a un número limitado de tipos de enzima y/o fueron capaces de estabilizar enzimas o composiciones enzimáticas líquidas durante un periodo de tiempo relativamente corto. Así, permanece una necesidad para formulaciones y composiciones que puedan estabilizar enzimas generalmente, .sin consideración al tipo o forma de la enzima. La polimerización de poliamida ha sido extensivamente desarrollada por Carothers y colaboradores (papeles reunidos de Wallace H. Carothers, Vol. 1, High Polymers; Industrial Engineering Chemistry, 34:53 (1942), Bolton E. K., Interscience, N. Y.) . La polimerización de superpoliamidas, una poliamida que forma fibras altamente polimerizada o de alto peso molecular, se desarrollo por W. E. Hanford en E . I. du Pont de Nemours & Co. Inc. (Patente Norteamericana No. 2,281,576) . El término genérico "nylon" según se aplica a esta clase de poliamidas, se refiere a "cualquier poliamida sintética de cadena larga la cual tiene grupos amida re-ocurrentes como una parte integral de la cadena de polímero principal, y la cual es capaz de formarse en un filamento en el cual los elementos estructurales están orientados en la dirección del eje." ( Nylon TechManual , E. I. du Pont de Nemours & Co . Inc., Wilmington, Delaware (1952); R. E. Kirk, Encyclopedia of Chemical Technology, Vol. 10, (1953) . La química de superpoliamidas puede usarse en la preparación de fibras para uso en las técnicas textiles tales como, por ejemplo, entretejido, tejido, tejidos de pelo, hilos, cuerdas, cordones, telas, carpetas y vestido. Estas poliamidas super resistentes, de alto punto de fusión también pueden usarse para producir papel de estaño, sustitutos de cuero, rellenos, válvulas, lavadoras, pantallas de lámpara, tapas de botella, correas, cartas de juego, sustitutos de fibra de cartón, encuademación, recubrimientos de alambre y otros productos similares. Sin embargo, mientras que las superpoliamidas se han explotado en una amplia variedad de usos, los oligómeros de poliamida (por ejemplo pre-superpoliamida, poliamidas de condensación que forman prefibra, o precursores de superpoliamida y "nylon") no han encontrado una amplia aplicación. Los oligómeros de poliamida se ha encontrado ahora que, de acuerdo con esta invención, estabilizan una amplia diversidad de enzimas y composiciones enzimáticas durante un periodo extenso de tiempo. La invención proporciona una composición enzimática estabilizada. La composición enzimática estabilizada contiene un oligómero de poliamida y al menos una enzima. El oligómero de poliamida está presente en una cantidad efectiva para estabilizar la enzima. La invención proporciona adicionalmente un método para preparar una composición enzimática estabilizada. Tal método involucra combinar un oligómero de poliamida y al menos una enzima. El oligómero de poliamida se agrega en una cantidad efectiva para estabilizar la enzima. Estas y otras características y ventajas de la invención serán más aparentes de la siguiente descripción detallada . Una modalidad de la invención es una composición enzimática estabilizada. Una composición enzimática estabilizada de la invención contiene al menos un oligómero de poliamida y al menos una enzima. El oligómero de poliamida está presente en una cantidad efectiva para estabilizar al menos una enzima de una composición enzimática líquida. Para estabilizar una enzima, la invención emplea un oligómero de poliamida el cual puede ser cualquier presuperpoliamida u oligómero de prepoliamida que forma fibra. Una presuperpoliamida u oligómero de prepoliamida que forma fibra puede prepararse por técnicas conocidas en el arte que incluyen aquellas descritas en la Patente Norteamericana No. 2,281,566 incorporada en la presente en su totalidad por referencia. Preferiblemente, de acuerdo con la invención, un oligómero de poliamida se prepara por medio de una reacción de condensación de monómeros bifuncionales capaces de formar enlaces amida. Kricheldorf, Hans R., Handbook of Polymer Synthesis : Insti tute for Technical Macromolecular Chemistry, University of Hamburg, Hamburg, Germany; Marcel Dekker (1992). Durante la formación de oligómero, cada enlace de amida se forma independientemente de los otros. Más preferiblemente, de acuerdo con la invención, un oligómero de poliamida se prepara por medio de una reacción de condensación fundamental de al menos un monómero de ácido dicarboxílico y al menos un monómero de diamina como se muestra en el Esquema 1: Esquema 1. 0 0 0 0 H2N(CH2)nNH2 + H0C II(CH2)mC II0H - -- [ -NH (CH2) nNH—C II(CH2)ra ICI]p-- Diamina Diácido Poliamida En el Esquema 1, n es mayor que o igual a 1, m es mayor que o igual 1, y p es preferiblemente menor de o igual a 70. La reacción de condensación fundamental puede ser una reacción de policondensación térmica alta o baja, que incluye policondensación térmica en solución, policondensación de fusión, o policondensación de estado sólido. Preferiblemente, de acuerdo con la invención, se prepara un oligómero de poliamida por policondensación por fusión. La reacción de condensación puede realizarse bajo vacío ligero o moderado para eliminación de agua. Cuando se usan monómeros sencillos al calor para preparar un oligómero de poliamida con un alto punto de fusión, debe tenerse cuidado en la selección de un proceso de reacción para minimizar la vaporización del monómero suministrado y del oligómero o subproducto producido. Las condiciones de reacción de 'policondensación a baja temperatura se usan preferiblemente para proporcionar la energía de activación de la reacción, el calor de neutralización del monómero que produce sales de poliamida o sales del oligómero resultante, y el calor de vaporización del subproducto de condensación, el cual es agua en la mayoría de los casos. . El monómero ácido diácido o dibásico puede ser cualquier ácido dicarboxílico sintética o comercialmente disponible. El monómero diácido puede ser hidrofóbico, hidrofílico o ambos. Ejemplos de diácidos adecuados incluyen, pero no se limitan a, ácido oxálico, malónico, glutárico, maleico, fumárico, tereftálico y adípico. Preferiblemente, el diácido es un diácido no aromático de C3-C?o tal como ácido malónico, glutárico, maleico, fumárico y adípico. La fórmula química de los diácidos ejemplares se muestra en la Tabla 1. Tabla 1 Ácidos Dicarboxílicos Ejemplares Acido oxálico HO(0)CC(0)OH Acido malónico HO (0) C-CH2-C (O) OH Acido glutárico HO (0) C- (CH2) 3-C (0) OH Acido maleico ' cis-HO (0) C-CH=CH-C (0) OH Acido fumárico trans-HO (0) C-CH=CH-C (0) OH Acido tereftálico 1 , 4- (C (0) OH) 2-benceno Acido adípico H0 (0) C- (CH2) 4-C (0) OH El monómero diamina puede ser cualquier diamina primaria o secundaria sintética o comercialmente disponible. Preferiblemente, el monómero de diamina es una diamina de C?~ C?o- Ejemplos de diaminas adecuadas incluye, pero no se limitan a 1 , 2-diaminoetano, 1 , 3-diaminopropano, 1,4-dia inobutano, 1, 5-diaminopentano, 1, 6-diaminohexano, 1,8-diaminooctano, 1, 10-diaminodecano, y dietiltriamina . Preferiblemente, la diamina es una diamina lineal y saturada (es decir primaria) . Más preferiblemente, la diamina es una diamina lineal y saturada de C-C3, por ejemplo 1,2-diaminoetano y 1, 3-diaminopropano . Diaminas ejemplares se muestran en la Tabla 2. TABLA 2 Diaminas Ejemplares 1, 3-diaminopropano H2N- (CH2) 3-NH2 1, 2-diaminoetano H2N- (CH2) 2-NH2 1, 6-diaminohexano H2N- (CH2) 6~NH2 Dietilentriamina H2N- (CH2) 2-NH- (CH2) 2-NH2 Cualquier combinación de diamina o diácido, como se describió anteriormente, se contempla por la presente invención siempre y cuando un oligómero de poliamida o un oligómero de superpoliamida reversible pueda formarse. Cuando se usa ácido oxálico para formar un oligómero de poliamida, deben tomarse precauciones adicionales puesto que la reacción es fuertemente exotérmica. Tales precauciones son bien conocidas en las técnica e incluyen, por ejemplo lenta introducción del ácido oxálico a la diamina y mantenimiento y observación de la temperatura de reacción. Un oligómero de poliamida homogénea puede prepararse por la condensación de un tipo de diácido y un tipo de diamina. Un oligómero de poliamida heterogéneo puede prepararse por la polimerización de más de un tipo de diácidos y un tipo de diamina, más de un tipo de diamina y un tipo de diácido, o una combinación de los mismos. Alternativamente, un oligómero de poliamida puede prepararse de la autocondensación de un monómero disfuncional que tiene una porción amina y una porción acida . En general, para preparar un oligómero de poliamida útil en la invención, cantidades equimolares de un monómero diácido y un monómero diamina se usan en la reacción de condensación. Sin embargo, es preferible que un ligero exceso molar de ácido que varía de aproximadamente 1.1-1.4 moles esté presente para producir soluciones de producto que tienen un pH ácido, preferiblemente, un pH que varía entre aproximadamente 5.0 hasta aproximadamente 7.0. Más preferiblemente, el pH varía entre aproximadamente 6.0-6.8. El pH puede ajustarse in si tu antes o durante la formación del oligómero de poliamida o después de la formación del oligómero de poliamida. PreferibLemente, el pH se ajusta in si tu durante la formación del oligómero de poliamida. La temperatura a la cual se conduce la reacción de condensación variará dependiendo del ácido diamina o dibásico usado. En general, la temperatura de reacción es tal que la formación del oligómero de superpoliamida se evita. Preferiblemente, durante la adición inicial de los monómeros reactantes, la temperatura de reacción se mantiene aproximadamente 50-70°C. Después de completar la adición de los monómeros reactantes, la temperatura de reacción se mantiene a una temperatura arriba de aproximadamente 100 °C. Preferiblemente, en este punto, la temperatura de reacción se mantiene a una temperatura de aproximadamente 110-140°C. A la formación de oligómero de poliamida, como un resultado de la naturaleza hexotérmica de las reacciones de formación, la temperatura de reacción se eleva a y generalmente se mantiene a aproximadamente 155-165°C. La reacción se mantiene a esta temperatura hasta que la formación de oligómero de poliamida se completa o justo antes de que comience la formación de superpoliamidas . En la práctica, la formación de superpoliamida puede evaluarse cualitativamente por una prueba de rodillo de vidrio como se describe en la Patente Norteamericana No. 2,281,576, incorporada en la presente por referencia. La producción de oligómero que forma fibra o polímero de presuperpoliamida se prueba fácilmente tocando meramente la superficie del polímero fundido con un rodillo de vidrio y observando la elasticidad de los filamentos del polímero fundido o fibras sacadas durante el retiro del rodillo de vidrio del polímero fundido. Antes de la etapa de formación de fibras o la etapa de superpoliamida, tales filamentos o fibras son bastante elásticos, es .decir se retraen fácilmente dentro de la mezcla de reacción del polímero fundido. A la formación de superpoliamidas se pierde la elasticidad y los filamentos o fibras son quebradizos o duros. Puede lograrse la inversión de la formación de superpoliamida por la adición de agua a la mezcla de reacción. Cuantitativamente, mediciones conocidas en la técnicas tales como, por ejemplo, mediciones de viscosidad, pueden hacerse para determinar hasta que punto debe descontinuarse el calentamiento de los reactantes para evitar la formación de superpoliamida o fibras. Los valores de viscosidad preferidos varían entre aproximadamente 25,000 Cp-100,000 Cp . El valor o rango de viscosidad del oligómero de poliamida puede preseleccionarse dependiendo del estado de la enzima que va a ser estabilizada. Si la enzima que va a ser estabilizada está en un estado no fluido como se discutió anteriormente, el oligómero de poliamida preferiblemente tendrá un valor de viscosidad menor, generalmente que varía entre aproximadamente 25,000-35,000 Cp. Si se va agregar una enzima en estado fluido como se discutió anteriormente, el oligómero de poliamida puede tener un valor -de viscosidad más alto, que varía preferiblemente entre aproximadamente 50,000-100,000 Cp. A la formación de oligómero de poliamida se descontinua el calentamiento de la reacción y el oligómero de poliamida se deja enfriar a temperatura ambiente. En una modalidad preferida, el calentamiento se discontinua en un agente controlado de la viscosidad tal como un agente reológico condicionante se agrega a la mezcla de reacción fundida. El agente que controla la viscosidad o el agente de acondicionamiento reológico permite a las composiciones de la invención que contienen un oligómero de polianillo mantener las características de flujo líquido tales como flexibilidad y maleabilidad a temperaturas al enfriar y hasta muy por debajo de la congelación. Ejemplos de agentes que controlan la viscosidad adecuados incluyen, agua y diversos agentes de acondicionamiento reológico tales como resinas, amidas alifáticas, esteres de poliamida, poliésteres y plastificantes tales como glicoles, glicerol, alcoholes polihídricos, esteres de eteralcoholes, aminas, diaminas, ácidos dicarboxílicos, derivados de celulosa, pirrolidona y polivinilpirrolidona. Preferiblemente, se agrega agua a o una mezcla de agua/glicerol a la mezcla de reacción fundida. Más preferiblemente, se agrega una mezcla de agua/glicerol a la mezcla de reacción fundida como una mezcla 1:3 de agua/glicerol. Para lograr las características de flujo deseadas, el agente que controla la viscosidad puede agregarse generalmente en cantidades de hasta aproximadamente 20% en peso basados en el peso total de la composición enzimática estabilizada final. A temperatura ambiente, el oligómero de poliamidas sólido resultante exhibe propiedades termoplásticas. Un oligómero de poliamida preferido para estabilizar al menos una enzima puede ser claro, transparente, flexible y pegajoso al tacto. Si se ha agregado un plastificante, el oligómero de poliamida también puede ser muy lustroso. Las resinas plastificadas de oligómero de poliamidas también exhiben excelentes propiedades a la resistencia a la transmisión de vapor de humedad. De acuerdo a la invención, al término de la formación de oligómero de poliamida como se describe, puede agregarse entonces una enzima a, o mezclarse con el oligómero de poliamida, para formar una composición enzimática estabilizada. Cualquier tipo o clase de enzima puede estabilizarse usando el oligómero de poliamida. Particularmente las enzimas preferidas son aquellas previamente discutidas. La enzima puede ser soluble en agua, dispersable en agua, emulsificable en agua, estraible en agua o insoluble en agua. La enzima puede estar en un estado fluido o no fluido. Ejemplos de enzimas en estado no fluido incluyen, pero no se limitan a, en polvo, glóbulo, granulado, microencapsuladas, microcristalinas, enlazadas a membrana, absorbidas en partículas o injerto particulado y similares. Preferiblemente, si se usa una enzima no fluida, se hace primero soluble por técnicas conocidas en el arte. Preferiblemente, la enzima no fluida se hace soluble por la mezcla con una solución de agua/alcohol hídrico. La enzima también puede ser cualquier composición enzimática líquida preformulada, que incluye cualquier composición enzimática líquida preformulada disponible comercialmente. La composición enzimática líquida preformulada puede ser una composición basada en agua o formulada o empleada en un solvente o medio orgánico. A la adición de la enzima al oligómero poliamida, la mezcla resultante se agita o agita generalmente por técnicas conocidas en la técnica para formar una dispersión o mezcla homogénea. Como un resultado de la adición de enzima, la viscosidad de la composición enzimática estabilizada puede disminuir para dar una composición con las características deseadas de viscosidad o flujo como se discutió anteriormente . En una composición enzimática estabilizada de la invención, un oligómero de poliamida está presente en una cantidad efectiva para estabilizar al menos una enzima. Generalmente, una composición enzimática estabilizada de la invención contiene aproximadamente 0.1 hasta aproximadamente 99% en peso de un oligómero de poliamida como se describió anteriormente basados en el peso total de la composición enzimática. Preferiblemente, una composición enzimática estabilizada de la invención contiene aproximadamente 25 hasta aproximadamente 95% en peso del oligómero de poliamida. Más preferiblemente, el oligómero de poliamida constituye hasta aproximadamente 50% en peso o más de la composición enzimática estabilizada. Una "enzima estabilizada" se define como una enzima como se describió anteriormente la cual en la presencia de un oligómero de poliamida retiene más actividad sobre su estado original a una temperatura definida. Preferiblemente, una "enzima estabilizada" exhibe aproximadamente 70% de actividad o más después de dos semanas a 50°C. Más preferiblemente, una "enzima estabilizada" exhibe aproximadamente 80% de actividad o más después de 16 semanas a 50°C. Dependiendo de la enzima y de su uso deseado, la composición enzimática estabilizada generalmente tiene un pH final en el rango de aproximadamente 5.0 hasta aproximadamente 7.0. Preferiblemente, el pH de la composición varía de aproximadamente 6.0-6.8. Como se entiende en la técnica, el ajuste del pH puede ser necesario como una pequeña cantidad de material ácido o alcalino. La composición enzimática estabilizada puede contener otros aditivos como se conoce en la técnica dirigidos hacia el uso de la composición en un proceso industrial particular. Por ejemplo, la composición enzimática estabilizada puede contener aditivos tales como un tensioactivo, un emulsificador, un desespumante, y similares. Debido a que la solubilidad de un oligómero de poliamida es agua y solventes orgánicos, una composición enzimática estabilizada de la invención puede agregarse directamente a un sistema en el cual se usa una enzima particular. La enzima puede dispersarse directamente dentro del sistema por agitación, tal como revolviendo. Alternativamente, la enzima puede suministrarse al sistema durante un tiempo prolongado permitiendo que el oligómero de poliamida se disuelva a su propia velocidad dentro del sistema. En otros usos, la enzima puede liberarse de la composición estabilizada disolviendo el oligómero de poliamida usando solventes que contienen grupos hidroxilo tales como, por ejemplo, agua, glicoles o alcoholes hídricos tales como glicerol o mezclas de los mismos. La composición resultante puede usarse entonces en la misma forma que otras composiciones enzimáticas. Otra modalidad de la invención es un método para la preparación de una composición enzimática estabilizada co o se describió anteriormente. El método de la invención se refiere a la etapa de agregar al menos una enzima en al menos un oligómero de poliamida preparado como se describió anteriormente. La combinación forma una composición enzimática estabilizada en donde el oligómero de poliamida está presente en una cantidad efectiva para estabilizar la enzima como se describió anteriormente. La enzima puede agregarse a o combinarse con un oligómero de poliamida ya sea en su estado original o como una composición enzimática líquida preformulada como se describió anteriormente. Como se definió anteriormente, la enzima se estabiliza cuando, en la presencia del oligómero de poliamida, la enzima exhibe mayor actividad sobre su estado original a una temperatura definida. Los aditivos como se describió anteriormente, si se usan, pueden agregarse en cualquier momento. Preferiblemente, el aditivo se incorpora después de que la enzima ha sido agregada al oligómero de poliamida. Los siguientes ejemplos se dan para ilustrar la presente invención. Debe entenderse, sin embargo, que la invención no se limita a las condiciones específicas o detalles descritos en estos ejemplos. Ejemplo 1. Procedimiento General para Sintetizar un Oligómero de Poliamida En un recipiente de reacción, un sólido diácido (1.2-1.4 moles) se agregó a una diamina líquida (1 mol) .

Durante la adición del diácido, el recipiente de reacción se mantuvo a una temperatura de 50°-70°C. La Tabla 3 enlista estequiometrías y combinaciones específicas de diácidos/ diaminas. Una vez que se completó la adición, la temperatura del recipiente de reacción se mantuvo a una temperatura de 110°-140°C hasta que el diácido fundido y diversos complejos de sal resultantes de la reacción ácido/base se formaron. A la fusión del diácido y la formación de los complejos de sal, se observó un aumento significativo en la temperatura a 155o-165°C. La temperatura de reacción se mantuvo después a aproximadamente 162°C durante 0.3 hasta 2.5 horas hasta que los complejos de sal sufrieron fusión de policondensación y formaron el oligómero de poliamida deseado. La reacción de condensación se realizó bajo vacío ligero a moderado durante la eliminación de agua. La formación del oligómero de poliamida o presuperpoliamida se determinó probando las propiedades de la fibra que se forma de la mezcla de reacción con un rodillo de vidrio, es decir la prueba de rodillo de vidrio (Patente Norteamericana No. 2,281,576) . Después que la fusión de policondensación había empezado, se colocó un rodillo de vidrio cada pocos minutos en la mezcla o solución de reacción y se retiró rápidamente para formar hebras finas de polímero parecidas al pelo las cuales en la etapa de oligómero de poliamida se regresarían dentro de la solución de reacción debido a las propiedades elásticas del polímero. El calentamiento de la solución de reacción se continúo durante 1.5-2.0 horas hasta que, como se afirmó por la prueba de rodillo de vidrio, las hebras de polímero empezaron a perder su elasticidad, se volvieron quebradizas y fallaron en regresarse dentro de la solución de reacción-una indicación de la formación de superpoliamida u oligómero que forma prefibras. A la formación de superpoliamida, se agregó agua a la solución de reacción hasta que la prueba de rodillo de vidrio indicó el regreso de la elasticidad a las hebras de polímero. La reacción se detuvo eliminando la fuente de calor y agregando pequeñas cantidades no mayores del 20% en peso de la solución de agua o una mezcla de agua/glicerol que tiene una relación de una parte de agua .a tres partes de glicerol.

Tabla 3. Combinaciones de Diácido y Diamina para la Preparación de Oligómero de Poliamida 'Ácidos disponibles de Sigma Chemical Company of St. Louis, Mo. " Bases disponibles de Fisher Scientific of Norcross, Ga.

Ejemplo 2. Procedimiento General para la Preparación de Composiciones Enzimáticas Estabilizadas Una enzima en su concentrado de fabricación original ya sea en forma sólida' o líquida se agrega a un oligómero de poliamida preparado de acuerdo al Ejemplo 1. A la adición, la mezcla resultante se agitó o revolvió hasta que se logró una dispersión homogénea. La enzima se agregó a un oligómero de poliamida de tal forma que la enzima está presente en una cantidad del 50% en peso o menos con base en el peso total de la composición. Ejemplo 3. Estabilización de las Composiciones de Enzima. La estabilidad enzimática a 50°C de diversas composiciones enzimáticas estabilizadas se determinó midiendo el % de actividad de la enzima a intervalos de 2, 4, 8 y 16 semanas y se comparó con la estabilidad enzimática a 50°C de la enzima correspondiente en su concentrado de fabricación original, es decir en la ausencia de un oligómero de poliamida. Los resultados se resumen en las Tablas 5-8. Otros porcentajes distintos al % de actividad expresan el % en peso de la composición total de cada componente de la composición enzimática estabilizada. Cada oligómero de poliamida se preparó de acuerdo al Ejemplo 1. Cada composición enzimática estabilizada se preparó de acuerdo al Ejemplo 2. Diversos oligómeros de poliamida' se usaron para preparar las composiciones enzimáticas estabilizadas y se resumen en la Tabla 4. Las enzimas usadas para preparar las composiciones enzimáticas estabilizadas estuvieron en su concentrado de fabricación original e incluyen las siguientes : PRIMATAN®, una proteasa alcalina de Genencor Inc. (Tabla 5) : PULPZYME HC™, una xilanasa de Novo-Nordisk Inc. (Tabla 6); MAXAMYL WL™, una amilasa de International Biosynthetics Inc. (Tabla 7); y Celulasa extraída de Penicillium funiculosum (P.f.) (Tabla Tabla 4. Clave para los Oligómeros de Poliamida: Ej Oligómero de Poliamida A un copolímero de ácido oxálico y 1, 3-diaminopropano un copolímero de ácido malónico y 1, 3-diaminopropano C un copolímero de ácido glutárico y 1 , 3-diaminopropano D un copolímero de ácido maleico y 1, 3-diaminopropano un copolímero de ácido fumárico y 1, 3-diaminopropano un copolímero de ácido tereftálico y 1, 3-diaminopropano un copolímero de ácido adípico y 1, 3-diaminopropano H un copolímero de ácido adípico y 1, 3-diaminopropano y 1, 2-aminoetano un copolímero de ácido adípico y dietilentriamina un copolímero de ácido adípico y 1, 6-diaminohexano Tabla 5. Estabilidad Enzimática de PRIMATAN® a 50°C Tabla 6. Estabilidad Enzimática de PULPZYME HC™ A 50°c TM Tabla 7 Estabilidad Enzimática de MAXAMYL WL a 50°C Tabla 8 Estabilidad Enzimática de Ceiulasa P.f. a 50°C Ejemplo 4. Estabilización de Composiciones de Enzima de una Enzima no Fluida. Muchas enzimas se fabrican como polvos, glóbulos, granulaciones, microcristalinos u otros estados no fluidos. Frecuentemente seria ventajoso convertir el material sólido a un estado fluido dispersable estabilizado para facilidad de manejo y utilidad. Este cambio de fase o estado permite por sistemas de bombeo y entrega automatizados para administrar la solución de enzima sin manejo humano o polveado de un polvo. Sin embargo, la estabilidad de la enzima debe asegurarse. Los siguientes datos (Tabla 9) se refiere a la estabilización de una enzima lipasa después de la extracción de su portador granular a un estado fluido. . Las composiciones enzimáticas estabilizadas se prepararon usando la enzima LIPOMAX®, una lipasa de Gist-Brocades Inc., a su concentrado de fabricación original y al menos un oligómero de poliamida de F, G y H (ver Tabla 4) o polivinilpirrolidina (PVP) . La estabilidad enzimática a 50°C de cada composición enzimática estabilizada se determinó midiendo el % de actividad de la enzima a intervalos de 2 , 4, 8 y 16 semanas y se comparó a la estabilidad enzimática a 50°C del concentrado de fabricación original de LIPOXAX®, los porcentajes, distintos al % de actividad dados expresan el por % en peso de la composición total de cada componente de la composición enzimática estabilizada.

Tabla 9 Estabilidad Enzimática de LIPOMAX® a 50°C Ejemplo 5 Las composiciones enzimáticas poliméricas y los concentrados de enzima de GREASEX 100L™, una lipasa líquida de Novo-Nordisk Inc., se sometieron a ciclos de congelación/descongelación seguidos por una prueba de % de actividad enzimática remanente después de cada ciclo. Las composiciones enzimáticas estabilizadas retuvieron sus características de flujo líquido por debajo de -25°C antes de congelarse y aún después de cuatro ciclos de congelamiento/descongelamiento estas composiciones exhibieron más del 95% de actividad remanente. Adicionalmente, se observó que aún un • ciclo de congelamiento/descongelamiento inactiva significativamente los concentrados de enzima. Los resultados se presentan en la Tabla 10: Tabla 10 % de Actividad de GREASEX 100L™ después del ciclo de congelación/descongelación ln todas las formulaciones el plastificante usado fue alcohol hídrico, glicerol ' GREASEX 100L™ es una lipasa bacteriana fabricada por Novo-Nordisk Inc.

Claims (18)

1. REIVINDICACIONES 1. Una composición enzimática estabilizada caracterizada porque comprende al menos un oligómero de poliamida y al menos una enzima, en donde el oligómero de poliamida está presente en una cantidad efectiva para estabilizar la enzima.
2. 2. La composición enzimática estabilizada de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el oligómero de poliamida es un polímero producto de condensación de al menos un ácido dibásico y al menos una diamina .
3. 3. La composición enzimática estabilizada de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada porque el oligómero de poliamida es el polímero producto de condensación de un ácido dibásico seleccionado del grupo que consiste de un ácido dicarboxílico saturado o no saturado de C3-C?o y una diamina seleccionada del grupo que consiste de 1 , 2-diaminoetano, 1, 3-diaminopropano, 1, 4-diaminobutano, 1,5-diaminopentano, 1, 6-diaminohexano, 1 , 8-diaminooctano, y 1,10-diaminodecano .
4. 4. La composición enzimática estabilizada de conformidad con la reivinicación 3, caracterizada porque el ácido dicarboxílico se selecciona del grupo que consiste de ácido malónico, ácido glutárico, ácido maleico, ácido furmárico, y ácido adípico.
5. 5. La composición enzimática estabilizada de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el oligómero de poliamida está presente en una cantidad de aproximadamente 0.1 a 99% en peso de la composición total.
6. 6. La composición enzimática estabilizada de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque comprende adicionalmente un agente que controla viscosidad seleccionado del grupo que consiste de agua y un agente de acondicionamiento reológico.
7. 7. La composición enzimática estabilizada de conformidad con la reivindicación 6, caracterizada porque el agente de acondicionamiento reológico se selecciona del grupo que consiste de una resina, una amida alifática, un éster de poliamida, un poliéster, y un plastificante.
8. 8. La composición enzimática estabilizada de conformidad con la reivindicación 7, caracterizada porque el plastificante se selecciona del grupo que consiste de un glicol, un glicerol, un alcohol polihídrico, un éster de eteralcohol, una amina, una diamina, un ácido dicarboxílico, un derivado de celulosa, una pirrolidona, y una polivinilpirrolidona . .
9. 9. La composición enzimática estabilizada de conformidad la reivindicación 1, caracterizada porque la enzima es soluble en agua o dispersable en agua.
10. 10. La composición enzimática estabilizada de conformidad con la reivindicación 9, caracterizada porque la enzima está en un estado fluido o no fluido.
11. 11. La composición enzimática estabilizada de conformidad la reivindicación 10, caracterizada porque la enzima está en un estado no fluido seleccionado del grupo que consiste de un polvo, un glóbulo, un granulo, un microcristal, y un particulado sobre el cual se absorbe la enzima .
12. 12. La composición enzimática estabilizada de conformidad la reivindicación 1, caracterizada porque la enzima es una composición enzimática líquida preformulada .
13. 13. La composición enzimática estabilizada de conformidad la reivindicación 1, caracterizada porque la enzima es una proteasa, xilanasa, amilasa, celulasa, o una lipasa.
14. 14. Un método para la preparación de una composición enzimática estabilizada caracterizado porque comprende la etapa de agregar una enzima a un oligómero de poliamida en donde el oligómero de poliamida está presente en una cantidad efectiva para estabilizar la enzima.
15. 15. El método de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque el oligómero de poliamida es un polímero producto de condensación de al menos un ácido dibásico y al menos una diamina.
16. 16. El método de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque la enzima es una proteasa, xilanasa, amilasa, celulosa, o lipasa.
17. 17. El método de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque el oligómero de poliamida está presente en una cantidad de aproximadamente 0.1 a 99% en peso de la composición total.
18. 18. El método de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque la enzima se agrega como una composición enzimática líquida preformulada .