MXPA00005404A - Sintesis quimica de 6-o-alquil eritromicina c - Google Patents

Abstract

Se proporciona un proceso para preparar un derivado 6-O alquilo de eritromicina C. El proceso incluye los pasos de proteger los 2', 4"- y 9-oxima hidroxilos con grupos protectores acetilo y cetal, alquilar el 6-hidroxilo, remover los grupos protectores y desoximar. También se proporcionan intermediarios utilizados en el proceso.

Description

SÍNTESIS QUÍMICA DE 6-O-ALQUIL ERITROMICiNA C CAMPO TÉCNICO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a derivados de eritromicina.

Más particularmente, la presente invención se refiere a un proceso para la síntesis química de derivados 6-O-alquilo de eritromicina C.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Los derivados 6-O-alquilo de eritromicina C tienen uso como agentes antibacterianos. Por ejemplo, la 6-O-metil eritromicina C (claritromicina C), mostrada a continuación, es un potente antibiótico de macrólido.

La 6-O-metil eritromicina C es un producto de fermentación menor de la transformación microbiana de 6-O-metil eritromicina A a través de Mucor circinelloides (McAlpine y otros, 27t International Conference of Antimicrobial Agents and Chemotherapy, New York, Octubre de 1987). Sin embargo, no existen métodos reportados para la síntesis química de 6-O-metil eritromicina C. Existe la necesidad de la técnica, por lo tanto, de proporcionar un método rápido y eficiente para sintetizar químicamente los derivados 6-O-alquilo de eritromicina C y, en particular, 6-O-metil eritromicina C.

COMPENDIO DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona un método eficiente y práctico para sintetizar un derivado de 6-O-alquil eritromicina C y, particularmente, 6-O-metil eritromicina C. El proceso sintético comienza con la conversión de eritromicina C a 9-oxima eritromicina C. el grupo oxima hidroxilo (N-OH) de la 9-oxima eritromicina C es protegido. El derivado protegido 9-oxima es O-protegido en los grupos 2' y 4"-hidroxilo y el grupo 6-hidroxilo es alquilado. El derivado de 6-O-alquil eritromicina C después se obtiene desprotegiendo el grupo 9-oxima hidroxilo, desprotegiendo los grupos 2'- y 4"-hidroxilo y desoximando la 9-oxima. En una modalidad preferida, la protección de un grupo oxima hidroxilo se logra haciendo reaccionar 9-oxima eritromicina C con un agente de cetalización tal como un alquilo inferior cicloalquil cetal.

La O-protección de los grupos 2" y 4"-hidroxilo se logra utilizando un grupo protector acilo. El grupo acilo protector muy preferido es acetilo. El derivado 9-oxima (oxima protegida o no protegida) puede ser no substituido en la posición 3'-dimetilamino o puede contener un grupo N-protector convencional en esa posición. Los grupos N-protectores ilustrativos y preferidos son grupos alcoxicarbonilo, grupos alcoxialcoxicarbonilo, grupos haloalcoxicarbonilo, grupos alcoxicarbonilo insaturado, grupos benciloxicarbonilo substituido, grupos fenoxicarbonilo substituido, y similares. La presente invención también se refiere a intermediarios novedosos útiles en la preparación de una 6-O-alquilo eritromicina C. Aquellos intermediarios son derivados 9-oxima que son alquilados en la posición 6 y no substituidos o substituidos en las posiciones 2'-, 3'- y/o 4"-.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN I. Definiciones Un número de términos es utilizado en la presente para designar elementos particulares de la presente invención. Cuando así se utilizan, se pretenden los siguientes significados. El término "alquilo" se refiere a radicales hidrocarburo de cadena recta o ramificada, saturados conteniendo de entre 1 y 10 átomos de carbono incluyendo, pero no limitándose a, metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo, ter-butilo, y neopentilo. Muy preferiblemente, el alquilo está limitado a alquilos inferiores, teniendo 1-6 carbonos. El término "agente de alquilación" se refiere a un reactivo capaz de colocar un grupo alquilo sobre un sitio nucleofílico, incluyendo, pero no limitándose a, halogenuros de alquilo tales como bromuro de metilo, bromuro de etilo, bromuro de n-propilo, yoduro de etilo, yoduro de metilo y bromuro de n-propilo; sulfatos de dialquilo tales como sulfato de dimetilo, sulfato de dietilo; y sulfato de di-n-propilo; y alquil o aril sulfonatos tales p-toluensulfonato de metilo, metansulfonato de etilo, metansulfonato de n-propilo, y similares. El término "aril (alquilo inferior)" se refiere a un radical alquilo inferior teniendo anexo al mismo 1-3 grupos de hidrocarburo aromático, como por ejemplo bencilo, difenilbencilo, tritilo y feniletilo. El término "ariloxi" se refiere a un radical hidrocarburo aromático que está unido al resto de la molécula a través de un enlace de éter (es decir, a través de un átomo de oxígeno), por ejemplo fenoxi. El término "cicloalquilo" se refiere a un radical hidrocarburo monocíclico saturado que tiene de 3 a 8 átomos de carbono en el anillo y opcionalmente está substituido con de entre 1 y 3 radicales adicionales seleccionados de alquilo inferior, halo(alquilo inferior), alcoxi inferior, y halógeno. Ejemplos de radicales cicloalquilo incluyen, pero no se limitan a, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciciohexilo, cicloheptilo, 1 -fluoro-ciclopropilo, y 2-fluorociclopropílo. El término "cetal" se refiere a un compuesto en donde el oxígeno carbonilo de una cetona ha sido reemplazado por dos grupos alcoxi. El término "alquenilo inferior" se refiere a un radical hidrocarburo de cadena recta o ramificada conteniendo de entre 2 y 6 átomos de carbono y poseyendo por lo menos un doble enlace de carbono-carbono. Ejemplos de radicales de alquenilo inferior incluyen vinilo, alilo, 2- o 3-butenilo, 2-, 3- o 4-pentenilo, 2-, 3-, 4- o 5-hexenilo, y sus formas isoméricas. El término "alcoxi inferior" se refiere a un radical alquilo inferior que está unido al resto de la molécula a través de un enlace de éter (es decir, a través de un átomo de oxígeno). Ejemplos de radicales alcoxi inferior incluyen, pero no se limitan a, metoxi y etoxi. El término "alquilo inferior" se refiere a un radical alquilo conteniendo de 1 a 6 átomos de carbono que incluye, pero no se limita a, metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo, ter-butilo y neopentilo. El término "solvente aprótico polar" se refiere a solventes orgánicos polares que carecen de un protón fácilmente removible, que incluye, pero no se limitan a, N, N-dimetilformamida, sulfóxido de dimetilo, N-metil-2-pirrolidona, triamida hexametilfosfórica, acetonitrilo, y similares. El término "sililo" se refiere a un radical de la fórmula Si (R1)(R2)(R3), en donde cada uno de R1, R2 y R3 son independientemente hidrógeno, alquilo inferior, arilo, fenilo, alquilo inferior substituido con fenilo, cicloalquilo o alquenilo. El término "base de metal alcalino fuerte" se refiere a una base de metal alcalino que tiene un ácido conjugado débil, incluyendo, pero no limitándose a, hidróxido de sodio, hidróxido de potasio, hidruro de sodio, hidruro de potasio, t-butóxido de potasio y similares. El término "(alquilo inferior) substituido con arilo" se refiere a un residuo arilo (alquilo inferior) como se definió anteriormente teniendo de entre 1 y 3 substituyentes de anillo que no son hidrógeno, cada uno independientemente seleccionado de halógeno, alcoxi inferior, alquilo inferior, alquilo inferior substituido con hidroxi, y (alquilo inferior) amino. Ejemplos de radicales de (alquilo inferior) substituido con arilo incluyen 2-fluorofenilmetilo, 4-fluorofeniletilo y 2,4-difluorofenilpropilo. El término "base de amina orgánica débil" se refiere a una base de amina orgánica que tiene un ácido conjugado fuerte, incluyendo, pero no limitándose a, trimetilamina, triet?lamina, tripropilamina, piridina, 2-metoxipiridina, 1 -metilpirrolidina, 1 -metilpiperidina, y 1-etílpiperidina, y similares.

II. Proceso para hacer una 6-O-alquil Eritromicina C En un aspecto, la presente invención proporciona un proceso para preparar un derivado 6-O-alquilo de eritromicina C. Ese proceso incluye los pasos de convertir eritromicina C a 9-oxima eritromicina C, proteger el grupo oxima hidroxilo (N-OH) y hacer reaccionar la eritromicina C protegida con 9-oxima con un agente de alquilación. Un proceso de la presente invención comienza con eritromicina C, típicamente producida utilizando fermentación. La conversión de 9-ox?ma a eritromicina C se logra utilizando procesos estándares bien conocidos en la técnica. En resumen, la eritromicina C se hace reaccionar ya sea con clorhidrato de hidroxilamina y una base, hidroxilamina libre en metanol o hidroxilamina y un ácido orgánico (ver por ejemplo, patente de E.U.A. No. 5,274,085, la descripción de la cual se incorpora aquí por referencia). Preferiblemente, la oximación de eritromicina C se logra utilizando hidroxilamina y ácido fórmico. El grupo 9-oxima hidroxilo (N-OH) de 9-oxima eritromicina C después es protegido. Los grupos protectores adecuados para el grupo 9-oxima hidroxilo son grupos sililo y cetal. La 9-oxima eritromicina C puede ser sililada haciendo reaccionar el compuesto con un reactivo de sililación. Un reactivo de sililación preferido tiene la fórmula XSi(R')(R")(R'") en donde R', R" y R'" son independientemente hidrógeno, alquilo inferior, arilo, fenilo, alquilo inferior substituido con fenilo, cicloalquilo o alquenilo, y X es un halógeno o un sulfonato (por ejemplo mesilato, tosilato). La reacción de sililación se realiza en presencia de una base orgánica adecuada tal como trietilamina (Et3N), piridina, imidazol o di-trimetilsilil amina [HN(TMS)2]- La reacción de sililación también puede realizarse en presencia de un ácido adecuado tal como HCO2H. Otro reactivo de sililación ilustrativo tiene la fórmula: HN[Si(R')(R")(R"')]2 en donde R\ R" y R'" son como se definieron anteriormente. La protección del grupo oxima hidroxilo también puede lograrse haciendo reaccionar 9-oxima eritromicina con un reactivo de cetalización adecuado. Un reactivo de cetalización ilustrativo y preferido es un alquilo inferior-cicloalquil cetal. Un reactivo de cetalización especialmente preferido es isopropil ciciohexil cetal. Como es bien conocido en la técnica, para alquilar eficiente y selectivamente eritromicina C en la posición 6-OH, los grupos hidroxilo en las posiciones 2'- y/o 4" deben ser protegidos antes de la metilación. También puede ser deseable proteger el grupo 3'-dimetilamino. Dicha protección se logra protegiendo estos grupos con grupos O- o N- protectores, convencionales. El orden de protección de la 9-oxima y de los grupos 2'-, -4"-OH puede ser intercambiado.

Los grupos O-protectores ilustrativos y preferidos son grupos acilo o grupos alquilo inferior-monocarbonilo tales como acetilo, propionilo, butirilo, isobutirilo, y similares. El uso de grupos-protectores en la preparación de derivados de eritromicina ha sido ampliamente descrito (ver, por ejemplo, patente de E.U.A. No. 4,672,109, y solicitud de patente Europea 0250938A2, las descripciones de las cuales se incorporan aquí por referencia).

Los grupos O-protectores convencionales, como se estableció anteriormente, se colocan utilizando procedimientos estándares bien conocidos en la técnica. A manera de ejemplo, un grupo acetilo puede ser colocado en las posiciones 2'- y 4"-haciendo reaccionar eritromicina C (9-oxima o 9-oximacetal) con un agente de acetilación en un solvente aprótico. Los agentes de acilación adecuados que pueden ser utilizados incluyen compuestos de anhídrido y halogenuro ácidos de la fórmula (R4CO)2O o R4COCI, en donde R4 es hidrógeno o un grupo substituyente tal como alquilo inferior (por ejemplo, metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, sec-butilo, t-butilo, y similares), o arilo (por ejemplo, fenilo, p-metoxifenilo, p-clorofenilo, m-clorofenilo, o-clorofenilo, 2,4-diclorofenilo, p-bromofenilo, m-nitrofenilo, p-nitrofenilo, benzhidrilo, 1-naftilo y similares). Ejemplos de solventes apróticos son diclorometano, cloroformo, DMF, tetrahidrofurano, sulfóxido de dimetilo, acetato de etilo, n-metil-2-pirrolidona, triamida hexametilfosfórica, 1 ,2-dimetoxietano, acetonitrilo, y similares. Un experto en la técnica fácilmente apreciará que puede ser ventajoso también substituir para un grupo metilo de la porción dimetilamino en la posición 3' de eritromicina utilizando un grupo N-protector convencional. Los grupos N-protectores ilustrativos y preferidos son grupos alcoxicarbonilo (por ejemplo, un grupo metoxicarbonilo, un grupo etoxicarbonilo, un grupo isopropoxicarbonilo, un grupo n-propoxicarbonilo, un grupo n-butoxicarbonilo, un grupo isobutiloxicarbonilo, un grupo sec- butiloxicarbonilo, un grupo t-butiloxicarbonilo, un grupo 2-etiletiloxicarbonilo, un grupo ciclohexiloxicarbonilo, un grupo metiloxicarbonilo y similares); grupos alcoxialcoxicarbonilo (por ejemplo, un grupo metoximetoxicarbonilo, un grupo etoximetoxicarbonilo, un grupo 2-metoxietoxicarbonilo, un grupo 2-etoxletilcarbonilo, un grupo 2-etoxietoxicarbonilo, un grupo 2-butoxietoxicarbonilo, un grupo 2-metoxietoximetoxicarbonilo, y similares); grupos haloalcoxicarbonilo (por ejemplo, un grupo 2-cloroetoxicarbonilo, un grupo 2-cloroetoxicarbonilo, un grupo 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo, y similares), grupos alcoxicarbonilo insaturados (por ejemplo, un grupo aliloxicarbonilo, un grupo propargiloxicarbonilo, un grupo 2-butenoxicarbonilo, un grupo 3-metil-2-butenoxicarbonilo, y similares), grupos benciloxicarbonilo substituido (por ejemplo, un grupo benciloxicarbonilo, un grupo p-metilbenciloxicarbonilo, un grupo p-metoxíbenciloxicarbonilo, un grupo p-nitrobenciloxicarbonilo, un grupo 2,4-dinitrobenciloxicarbonilo, un grupo 3,5-dimetilbenciloxicarbonilo, un grupo 4-clorobenciloxicarbonilo, un grupo p-bromobenciloxicarbonilo, y similares), y grupos fenoxicarbonilo substituido [por ejemplo, un grupo fenoxicarbonilo, un grupo p-nitrofenoxicarbonilo, un grupo o-nitrofenoxicarbonilo, un grupo 2,4-dinitrofenoxicarbonilo, un grupo p-metilfenoxicarbonilo, un grupo m-metii-fenoxicarbonilo, un grupo o-bromofenoxicarbonilo, un grupo 3,5-dimetilfenoxicarbonilo, un grupo p-cloro-fenoxicarbonilo, un grupo 2-cloro-4-nitrofenoxicarbonilo, y similares (patente de E.U.A. No. 4,672,109)].

La porción dimetilamino en la posición 3' también puede ser protegida como una sal cuaternaria haciendo reaccionar con un derivado 3'-dimetilamino, A-X, en donde A es un grupo 2-alquenilo, un grupo bencilo o un grupo bencilo substituido, y X es un átomo de halógeno (ver por ejemplo, patente de E. U. A. No. 4,670,549). El derivado 9-oximasilil eritromicina C 2'- y 4"- substituido después selectivamente es alquilado en la posición 6. Los procedimientos y reactivos para la alquilación de la posición 6 de derivados de eritromicina A son bien conocidos en la técnica (ver, por ejemplo, patentes de E.U.A. Nos. 4,672,109 y 4,670,549). Después de la protección, el grupo 6-hidroxilo es selectivamente alquilado. En resumen, el compuesto hidroxilo protegido se hace reaccionar con un agente de alquilación adecuado en presencia de una base. Los agentes de alquilación ilustrativos y preferidos son halogenuros de alquilo tales como bromuro de metilo, bromuro de etilo, bromuro de n-propilo, yoduro de metilo, yoduro de etilo, yoduro de n-propilo, sulfato de dimetilo, sulfato de dietilo, sulfato de di-n-propilo, p-toluensulfonato de metilo, metansulfonato de etilo y metansulfonato de n-propilo. Las bases ilustrativas y preferidas son una base de metal alcalino fuerte, preferiblemente seleccionada del grupo que consiste de un hidruro de metal alcalino, hidróxido de metal alcalino o alcóxido de metal alcalino, y una base de amina orgánica débil, seleccionada preferiblemente del grupo que consiste de trimetilamina, trietilamina, tripropilamina, piridina, 2-metoxipiridina, 1 -metilpirrolidina, 1 -metilpiperidina, y 1 -etilpiperidina. El paso de alquilación se realiza en un solvente adecuado que incluye éter metil-t-butílico. Los solventes ilustrativos y preferidos son solventes apróticos polares tales como N,N-dimetilformamida, sulfóxido de dimetilo, N-metil-2-pirrolidona, triamida hexametilfosfórica, tetrahidrofurano, 1 ,2-dimetoxietano, acetonitrilo o acetato de etilo, o una mezcla de dichos solventes apróticos polares mantenida a una temperatura de reacción y un período suficiente para efectuar la alquilación, preferiblemente de -15°C a temperatura ambiente durante un período de 1 a 8 horas. La preparación de 6-O-alquil eritromicina C prosiguen removiendo los grupos O-protectores de las posiciones 2' y 4" y el grupo cetal de la 9-oxima cetal y después desoximando ia 9-oxima. Los medios para remover los grupos O-protectores en las posiciones 2' y 4" son bien conocidos en la técnica y dependen de la naturaleza del grupo protector. A manera de ejemplo, cuando las posiciones 2' y/o 4" son acetiladas, el grupo acetilo puede ser removido haciendo reaccionar el derivado acetilo con un compuesto de la fórmula R5OH, en donde R5 es alquilo (por ejemplo, metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo, sec-butilo, t-butilo, y similares). La reacción puede presentarse en ausencia o presencia de un ácido (por ejemplo, ácido fórmico, ácido acético) o agua, o puede presentarse en ausencia o presencia de una base (por ejemplo, KCO3, NaCO3, KOCO3, NaHCO3). La remoción del grupo cetal de la 9-oxima cetal se logra utilizando acidificación. Un paso final en la preparación de un 6-O-alquil eritromicina C es la desoximación. La desoximación se realiza de acuerdo con los procedimientos estándares bien conocidos en la técnica (ver por ejemplo, patente de E.U.A. No. 4,672,109). En resumen, la 9-oxima eritromicina C se hace reaccionar con sulfito ácido de sodio en alcohol (por ejemplo etanol) y se lleva a reflujo. La solución es enfriada, alcalinizada y precipitada con bicarbonato de metal alcalino acuoso. El precipitado formado en la reacción anterior es recogido a través de filtración, lavado y recrístalizado con alcohol. Una descripción detallada de la síntesis de 6-O-metil eritromicina C utilizando un proceso de la presente invención se establece a continuación en los ejemplos. Una ilustración esquemática de una modalidad de un esquema sintético de acuerdo con la presente invención se presenta a continuación en el Esquema ESQUEMA 1 Con referencia al Esquema 1, la eritromicina C (Compuesto 1) se hace reaccionar con hidroxilamina en presencia de ácido fórmico y metanol para formar la 9-oxima eritromicina C (Compuesto 2). El Compuesto 2 después se hace reaccionar con un agente de cetalización seguido por la reacción con clorhidrato de piridina y anhídrido acético en acetonitrilo para formar 2 4"-diacetil-9-oxima cetal eritromicina C (Compuesto 3). La metilación del grupo 6-OH después se realiza haciendo reaccionar el Compuesto 3 con un agente de metilación (bromuro de metilo) e hidróxido de potasio en un solvente apropiado [sulfóxido de dimetilo(DMSO) y tetrahidrofurano (THF)] para formar la 27 4"-diacetil-6-O-metil-9-oxima cetal eritromicina C (Compuesto IV). El grupo cetal en la posición 9 es removido haciendo reaccionar el Compuesto 4 con ácido fórmico. La 9-oxima resultante es desoximada con metabisulfito de sodio. Los grupos acetilo en las posiciones 2' y 4" son removidos haciendo reaccionar con alcohol etílico, agua, metanol (MeOH) y carbonato de potasio (K2CO3) para producir 6-O-metil eritromicina C (Compuesto 5). lll. Derivados 6-O-alquil-9-Qxima Eritromicina C La presente invención también proporciona derivados 9-oxima de eritromicina C, dichos derivados son intermediarios en la síntesis de una 6-O-alquil eritromicina C. Un derivado de 9-oxima de la presente invención es alquilado en la posición 6 y no substituido (es decir, 2'-OH, 4"-OH, 3'-dimetiletilo), o substituido en las posiciones 2 4" o 3' con un grupo protector convencional como se estableció anteriormente. Un derivado 9-oxima eritromicina C de la presente invención corresponde a la estructura I a continuación: en donde R es hidrógeno, cetal o sililo, R6 es hidrógeno o alquilo, R7 y R8 son cada uno independientemente hidrógeno o un grupo O-protector convencional, y R9 es -NR 0CH3 en donde R10 es metilo (CH3) o un grupo N-protector convencional o -N + (CH3)2R11X, en donde R11 es 2-alquenilo, benciio o bencilo substituido, y X es un halógeno tal como Br, Cl o I. El compuesto de la estructura I se muestra sin una orientación de enlace espacial. La estructura I, de esta manera, define todas las combinaciones de orientación de enlace y pretende cubrir todas las posibles configuraciones estéreo (por ejemplo epímeros). En una modalidad preferida, las orientaciones de enlace de la estructura I son ¡guales a las mostradas anteriormente para 6-O-metil eritromicina C. En una modalidad, la 9-oxima eritromicina C es insubstituida (no protegida) en las posiciones 2'-, 3' y 4'7 La cetalación de dicho derivado da como resultado la formación de un derivado 9-oximacetal de la estructura I, en donde R7 y R8 ambos son hidrógenos y R6 es metilo. En otra modalidad, la 9-oxima eritromicina C utilizada en el proceso sintético tiene grupos O-protectores convencionales en las posiciones 2'- y/o 4'7 Los grupos O-protectores convencionales para proteger hidroxilos de la alquilación son bien conocidos en la técnica e incluyen grupos sililo, acilo, alquenil monocarbonilo inferior, alcoxicarbonilo, alquilcarbonilo, alcoxicarbonilalquilcarbonilo inferior, y arilcarbonilo. Los siguientes ejemplos ilustran modalidades preferidas de la presente invención y no pretenden limitar la especificación y reivindicaciones de ninguna manera.

EJEMPLO 1 Preparación de la 9-Oxima Eritromicina C Se disolvió eritromicina C 15.38 g (21.4 mmoles) en 150 ml de metanol, y se agregaron 46.6 g de 505 p/p de hidroxilamina y 14.5 g de ácido fórmico (88%) a temperatura ambiente; la temperatura se elevó a 36°C y se inició el calentamiento externo. La solución se llevó a reflujo durante 16 horas y después se enfrió a temperatura ambiente. El volumen de la solución se redujo a la mitad bajo destilación al vació y se agregaron 200 ml de acetato de etilo para extraer el producto. Después, las capas se separaron, la capa acuosa inferior se volvió a extraer una vez más con 200 ml de acetato de etilo. Las dos capas de acetato de etilo se combinaron y se lavaron con 50 ml de agua. La capa orgánica se secó con sulfato de magnesio y los sólidos se removieron a través de filtración, proporcionando una solución transparente, la cual se separó en un evaporador giratorio para dar 15.06 g del compuesto del título.

EJEMPLO 2 Preparación de 9-Oximacetal Eritromicina C Se disolvió 9-oxima eritromicina C del Ejemplo 1, (3.1 g) (4.2 mmoles) en 12 ml de acetonitrilo y se agregaron 5.4 g de diisopropil ciciohexil cetal seguido por la adición de 12 ml de clorhidrato de piridina en acetonitrilo (solución 1.0 m) la mezcla de reacción se extinguió con 100 ml de heptano y 20 ml de 2 N de NaOH. Las capas se separaron y el producto en la capa de heptano se recogió a través de filtración para dar 1.9 g del compuesto del título.

EJEMPLO 3 Preparación de 2', 4"-Diacetil-9-Oxima Eritromicina C El producto del Ejemplo 2 se disolvió en 20 ml de piridina en donde se agregaron 2 ml de anhídrido acético. La mezcla se agitó durante 26 horas y se extinguió con 100 ml de éter y 50 g de hielo.

Después, se agregaron 20 ml de 2 N de hidróxido de sodio y 10 g de cloruro de sodio. Las capas se separaron y la capa orgánica superior se lavó con 15 ml de una solución de sal saturada. La capa orgánica se secó con sulfato de magnesio y los sólidos se removieron a través de filtración. El solvente se destiló bajo vacío y el aceite residual se combinó tres veces con 15 ml de tolueno cada vez; se obtuvieron 2.0 g del producto del título.

EJEMPLO 4 Preparación de 2'. 4"-Diacetil-ß-0-Metil-9-oxima cetal Eritromicina C Se disolvieron 1.8 g del producto del Ejemplo 3 en 14 ml de tetrahidrofurano, y 18 ml de sulfóxido de dimetilo y se enfriaron a 0-5°C, seguido por 5 ml de bromuro de metilo y 0.1 g de KOH en polvo. La mezcla se agitó a esta temperatura durante 10 minutos y se extinguió con 110 ml de heptano y 10 ml de 2 N de hidróxido de sodio. Las capas se separaron y la capa de heptano superior se secó con sulfato de magnesio y el solvente se removió para dar 1.2 g del compuesto del título.

EJEMPLO 5 Preparación de 6-O-Metil Eritromicina C La reacción de decetalización y desoximación del producto del Ejemplo 4 se logró a través de hidrólisis de ácido de la funcionalidad cetal seguido por el tratamiento con bisulfito de sodio. De esta manera, se disolvieron 1.2 g del producto del Ejemplo 4 en 60 ml de alcohol 3A y 60 ml de agua con 0.31 g de ácido fórmico (88%). La solución se calentó a 60-65°C durante 2 horas. Se agregaron 3.0 g de bisulfito de sodio y la mezcla se agitó durante 2 horas. La solución se enfrió a temperatura ambiente y el volumen se redujo a la mitad bajo destilación ai vacío. Se utilizaron 100 ml de cloruro de metileno para extraer el producto. Después de la remoción del solvente, se obtuvieron 0.82 g de 2'-acetil eritromicina C. Este sólido se disolvió en 20 ml de metanol y 10 ml de carbonato de potasio al 5% y se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. Esta solución se separó a un aceite bajo vacío y el aceite se disolvió en 50 ml de cloruro de metileno, se secó con sulfato de magnesio y se filtró. Después de la remoción del solvente, se obtuvieron 0.66 g de 6-O-metil eritromicína C. Se obtuvieron muestras analíticas a través de HPLC de preparación utilizando la columna YMC y 50/50 de acetonitrilo/regulador de pH. La confirmación de la estructura del producto formado se obtuvo a través de NMR. El regulador de pH contuvo 0.25% de KH2P04 a 7.0. Los resultados del análisis de NMR se establecen en el siguiente cuadro.

Asignaciones 1H y 13C NMR para el Eiemplo 5 Relativo a CHCI3 asignado como 77.0 ppm. Relativo a CHCI3 asignado como 7.27 ppm.

EJEMPLO 6 Actividad Antibacteriana de 6-O-Metil Eritromicina C La 6-O-metil eritromicina c preparada de acuerdo con los Ejemplos 1-5 se analizó in vitro para su actividad antibacteriana como sigue: se prepararon 12 cajas de Petri conteniendo diluciones acuosas sucesivas del compuesto de prueba mezclado con 10 ml de agar de infusión de corazón de cerebro esterilizado (BHI) (Difco 0418-01-5) cada placa se inoculó con 1:100 (o 1:10 para tinciones de lento desarrollo, tales como Streptococcus) de hasta 32 diferentes microorganismos, utilizando un bloque de replicación Steers. Las placas inoculadas fueron incubadas a 25-37°C durante 20 a 24 horas. Además, se preparó una placa de control, utilizando agar BHI conteniendo ningún compuesto de prueba, se incubó al principio y al final de cada prueba. Una placa adicional conteniendo un compuesto con patrones de susceptibilidad conocidos para los organismos siendo probados y que pertenecen a la misma clase de antibiótico como el compuesto de prueba también se preparó y se incubó como un control adicional, así como para proporcionar una comparación de prueba a prueba. Después de la incubación, cada disco se leyó. Se definió la concentración inhibidora mínima (MIC) como la concentración más baja de fármaco que no produce ningún crecimiento, una turbiedad ligera, o colonias escasamente aisladas sobre la mancha del inoculo según comparado con el control de crecimiento. Los resultados de este ensayo, mostrados a continuación en los Cuadros 2 y 3, apoyan la conclusión de que 6-O-metil eritromicina C es un agente efectivo ant?bacteriano.

CUADRO 2 Datos Microbiológicos ORGANISMO MIC (µg(ml) MEDIO: MHA + LYHB + N CUADRO 3 ORGANISMO MIC (µg(ml)

Claims (11)

REIVINDICACIONES

1.- Un proceso para preparar un derivado 6-O-alquilo de eritromicina C, que comprende los pasos de: a) oximar eritromicina C para formar 9-oxima eritromicina C; b) cetalizar la 9-oxima eritromicina C para formar 9-oximacetal eritromicina C; c) acilar la 9-oximacetal eritromicina C para formar 2'-, 4"-diacil-9-oximacetal eritromicina C; d) alquilar el grupo 6-hidroxilo de la 2',4"-diacil-9-oximacetal eritromicina C para formar un derivado de 2',4"-dlacil-6-O-alquil-9-oximacetal eritromicina C; y c) desproteger el 9-oxima hidroxilo, los grupos 2'- y 4"-hidroxilo y desoximar la 9-oxima eritromicina C para proporcionar el derivado 6-O-alquil eritromicina C.

2.- El proceso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la eritromicina C se hace reaccionar con hidroxilamina en presencia de un ácido orgánico.

3.- El proceso de acuerdo con la reivindicación 2, en donde el ácido orgánico es ácido fórmico.

4.- El proceso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la 9-oxima eritromicina C se hace reaccionar con alquilo inferior-cicloalquil cetal.

5.- El proceso de acuerdo con la reivindicación 4, en donde el alquilo inferior-cicloalquil cetal es isopropil ciciohexil cetal.

6.- El proceso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el derivado 9-oximacetal eritromicina C se hace reaccionar con anhídrido acético en piridina.

7.- El proceso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde 2',4"-diacil-9-oxímacetal eritromicina C se hace reaccionar con un halogenuro de alquilo.

8.- El proceso de acuerdo con la reivindicación 7, en donde el halogenuro de alquilo es bromuro de metilo.

9.- Un compuesto que tiene la estructura I, a continuación: en donde R es hidrógeno, cetal o sililo, R6 es hidrógeno o alquilo, R7 y R8 son cada uno independientemente hidrógeno o un grupo O-protector convencional, y R9 es -NR10CH3, en donde R10 es metilo (CH3) o un grupo N-protector convencional o -N + (CH3)2R11X", en donde R11 es 2-alquenilo, bencilo o bencilo substituido, y X es un halógeno.

10.- El compuesto de acuerdo con la reivindicación 9, en donde R es isopropil ciciohexil cetal.

11.- El compuesto de acuerdo con la reivindicación 9, en donde R7 y R8 ambos son acetilo y R9 es dimetilo.