MXPA00004061A - Uso del acido 11-(3-dimetilaminopropiliden) -6, 11-dihidrodibenz [b.e]oxepin -2-acetico para la fabricacion de un medicamento para tratar trastornos inflamatorios oftalmicos no alergicos y para la prevencion de neovascularizacion ocular - Google Patents

Abstract

La presente invención se refieer a las formulaciones oftálmicas que contienen como un ingrediente activoácido 1-(3-dimetilaminopropiliden)-6,11-dihidrodibenz[b,eloxepin-2- acético o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo sonútiles para inhibir la liberación de citocina (por ejemplo IL-6 e IL-8) de células oculares humanas;dichas formulaciones pueden utilizarse para tratar o evitar neovascularización ocular y trastornos inflamatorios no alérgicos tales resequedad del ojo, queratitis, blefaritis, uveitis e inflamación relacionad la infección.

Description

USO DEL ACIDO 11 -,3-DIMETILAMINOPROPILIDEN)-6,11- DIHIDRODIBENZGB.EIOXEPIN-2-ACETICO PARA LA FABRICACIÓN DE UN MEDICAMENTO PARA TRATAR TRASTORNOS INFLAMATORIOS OFTÁLMICOS NO ALÉRGICOS Y PARA LA PREVENCIÓN DE NEOVASCULARIZACION OCULAR ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a formulaciones farmacéuticas oftálmicas. Más particularmente, la presente invención se refiere al uso terapéutico y profiláctico del ácido 11-(3-dimetilamino-propiliden)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético para tratar y/o prevenir la liberación de citocina de las células oculares humanas y neovascularización ocular resultante o condiciones inflamatorias no alérgicas.

DESCRIPCIÓN DE LA TÉCNICA RELACIONADA Como se enseña en la patente de E.U.A. Nos. 4,871 ,865 y 4,923,892, ambas asignadas a Burroughs Wellcome Co. ("the Burroughs Wellcome Patents"), ciertos derivados de ácido carboxílico de doxepina, incluyendo ácido 1 1-(3-dimetilaminopropiliden)-6,1 1-dihidrodibenz[b,e]oxepin- 2-carboxílico y ácido 1 1-(3-dimetilamino-propiIiden)-6,1 1-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-(E)-acríl¡co, tienen actividad antihistamínica y antiasmática. Estas dos patentes clasifican los derivados de ácido carboxílico de doxepina como estabilizadores de células cebadas con acción antihistamínica ya que se cree que inhiben la liberación de autacoides (es ! decir, histamina, serotonina, y similares) de las células cebadas y que inhiben directamente los efectos de la histamina en los tejidos blanco. Las patentes de Burroughs Wellcome muestran varias formulaciones farmacéuticas que contienen los derivados de ácido carboxílico de doxepina; el ejemplo 8 (I) en ambas patentes describe una formulación de solución oftálmica. La patente de E.U.A. 5,1 16,863, asignada a Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd., ("the Kyowa patent"), muestra que los derivados de ácido acético de doxepina, incluyendo al ácido Z-1 1-(3-dimetilaminopropiliden)-6,11-dihidrodibenz[b-e]oxepin-2-acético, tienen actividad anti-alérgica y antiinflamatoria. La actividad anti-inflamatoria se atribuye a la actividad inhibidora de biosíntesis de prostaglandina (véase col. 28, líneas 51-57). Los derivados de doxepina descritos por la patente de Kyowa se representan por el ¡ compuesto (I): X - (CH2)n - Z ( i ) Compuestos en donde X representa =N-, =CH- o -CH2- se describen con una actividad antialérgica fuerte, mientras que los compuestos en donde X representa =N- se describen con una actividad antiinflamatoria fuerte (véase col. 24, líneas 20-57). De esta forma, para las aplicaciones antiinflamatorias, la patente de Kyowa sugiere los derivados de doxepina del compuesto (I) en donde X es =N-. La patente de Kyowa demuestra actividad anti-alérgica y actividad anti-inflamatoria en ratas macho Wistar. Las formas de medicamento que se enseñan en la patente de Kyowa para los derivados de ácido acético de doxepina incluyen una amplia variedad de vehículos aceptables; sin embargo, sólo se mencionan las formas de administración oral y por inyección. En el tratamiento de la enfermedad del ojo alérgica tal como conjuntivitis alérgica, dichos métodos de administración requieren grandes dosis de medicina. La patente de E.U.A. No. 5,641 ,805 describe formulaciones oftálmicas tópicas que contienen ácido 1 1-(3-dimetílamino-propiliden)-6,1 1-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético para tratar enfermedades oculares alérgicas.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención provee un método para tratar o evitar neovascularización oftálmica y trastornos inflamatorios no alérgicos que implica la liberación de citocina desde las células oculares humanas. El método comprende inhibir la liberación de citocina de las células oculares humanas mediante la administración al ojo de una formulación oftálmica que contiene una cantidad terapéuticamente efectiva de ácido 1 1 -(3-dimetilaminopropiliden)-6,1 1-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético (de aquí en adelante se menciona como "compuesto A") o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. La formulación puede contener el isómero cis del compuesto A (ácido Z-1 1-(3-dimetilaminopropiliden)-6,1 1-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético), el isómero trans del compuesto A (ácido E-1 1-(3-dimetilam¡noprop¡liden)-6,1 1-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético), o una combinación de los isómeros cis y trans del compuesto A. A menos que se especifique de otra manera, el "ácido 11 -(3-dimetilaminopropiliden)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético" o el "compuesto A" significa el isómero cis, el isómero trans o una mezcla de ambos. El "isómero cis" significa el isómero cis sustancialmente libre del isómero trans; el "isómero trans" significa el isómero trans sustancialmente libre del isómero cis. Un isómero está "sustancialmente libre" del otro isómero si menos de alrededor del dos por ciento del isómero que no se desea está presente.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN El compuesto A es un compuesto conocido y tanto el isómero cis como el trans del compuesto A pueden obtenerse mediante los métodos descritos en la patente de E.U.A. No. 5,1 16,863, el contenido total de la cual se incorpora en la presente por referencia en la especificación de la presente. Ejemplos de las sales farmacéuticamente aceptables del compuesto A incluyen las sales de ácido inorgánico tales como, clorhidrato, bromhidrato, sulfato y fosfato; sales de ácido orgánico tales como acetato, maleato, fumarato, tartrato y citrato; sales de metal alcalino tales como sal de sodio y sal de potasio; sales de metal alcalino terreo tales como sal de magnesio y sal de calcio; sales metálicas tales como sal de aluminio y sal de zinc; y sales de adición de amina orgánica tales como sal de adición de trietilamina (también conocida como trometamina), sal de adición de morfolina y sal de adición de piperidina. El compuesto A puede administrarse al ojo en una variedad de formas. La forma más preferida es por medio de formulaciones oftálmicas tópicas convencionales, tales como soluciones, suspensiones o geles. Alternativamente, el compuesto A puede administrarse al ojo por medio de una inyección o implante. Dependiendo del tipo de formulación, los ingredientes convencionales se combinarán con el compuesto A. La formulación preferida para la administración oftálmica tópica del compuesto A es una solución administrada como gotas para los ojos. La forma preferida del compuesto A en las formulaciones oftálmicas de la presente invención es el isómero cis. Un método general para preparar una formulación de gotas para los ojos de la presente invención se describe a continuación como un ejemplo no limitativo.

El compuesto A y un agente isotónico se añaden al agua purificada esterilizada, y si se requiere, se añaden un conservador, un agente regulador de pH, un estabilizador, un vehículo viscoso y similares a la solución y se disuelven en la misma. La concentración del compuesto A es 0.0001 a 5% p/v, preferiblemente 0.0001 a 0.001 % p/v, y más preferiblemente alrededor de 0.0005% p/v, basándose en el agua purificada esterilizada. Después de la disolución, el pH se ajusta con un controlador de pH que se encuentra dentro de una escala adecuada para utilizarse como una medicina oftálmica, preferiblemente dentro de la escala de 4.5 a 8. Puede utilizarse cloruro de sodio, glicerina, manitol o similares como el agente isotónico; éster de ácido p-hidroxibenzoico, cloruro de benzalconio o similares, como el conservador; hidrogenfosfato de sodio, dihidrogenfosfato de sodio, ácido bórico o similares como el agente regulador de pH; edetato de sodio o similares como el estabilizador; alcohol polivinílico, polivinilpirrolidona, ácido poliacrílico o similares como el vehículo viscoso; e hidróxído de sodio, ácido clorhídrico o similares como el controlador de pH. Si se requiere, pueden añadirse otros fármacos oftálmicos tales como epinefrina, clorhidrato de nafazolina, cloruro de berberina, azulensulfonato de sodio, cloruro de lisozima, glicirrhizato y similares. Las gotas para los ojos producidas por el método antes mencionado típicamente necesitan ser aplicadas únicamente a los ojos pocas veces al día en una cantidad de una a varias gotas al mismo tiempo, aunque en casos más severos las gotas pueden aplicarse muchas veces al día. Una gota típica es a rededor de 30 µl. De acuerdo con el método de la presente invención, las formulaciones oftálmicas que contienen el compuesto A se utilizan para inhibir la secreción de citocina pro-inflamatoria de las células oculares humanas, tales como células epiteliales de conjuntiva de humano. Este tipo de secreción de citocina (por ejemplo lL-6 e IL-8) puede estimular la neovascularización ocular (véase, por ejemplo, Yoshida et al., IOVS, 39:1097 (1998)) y otras condiciones inflamatorias no-alérgicas, tales como resequedad de los ojos, queratitis, blefaritis, uveitis e inflamación relacionada con infección, por ejemplo. Ciertas modalidades de la invención se ilustran en los siguientes ejemplos.

EJEMPLO 1 Formulación de solución oftálmica tópica preferida Ingrediente Concentración (% p/v) Compuesto A*HCI 0.111* Fosfato dibásico de sodio 0.5 (Anhidro), USP Cloruro de sodio, USP 0.65 Cloruro de benzalconio 0.01 Hidróxido de sodio, NF 7.0 cbp pH= Acido clorhídrico, NF 7.0 cbp pH= Agua purificada cbp 100 *0.111% del compuesto A«HCI es equivalente a 0.1 % del compuesto A EJEMPLO 2 Formulación en qel oftálmica tópica Ingrediente Concentración (% p/v) Compuesto A»HCI 0.1 1 * Carbopol 974 P 0.8 EDTA de disodio 0.01 Polisorbato 80 0.05 Solución de cloruro de benzalconio 0.01 +5xs Hidróxido de sodio cbp pH 7.2 Acido clorhídrico cbp pH 7.2 Agua para inyección cbp 100 "0.11 % del compuesto A»HCI es equivalente a 0.1 % del compuesto A EJEMPLO 3 Inhibición de la liberación de citocina A) Cultivos de célula epitelial de conjuntiva de humano (HCE) Se han descrito métodos detallando la preparación de los cultivos de célula epitelial primaria y estudios de liberación de citocina utilizando estas células. Véase Gamache, et al., "Secretion of proinflammatory cytokines by human conjunctival epithelial cells," Ocul Immunol Inflamm., 5:117-128 (1997). Brevemente, los cultivos de las células epiteliales de conjuntiva de humano se iniciaron a partir de tejidos de donadores que se obtuvieron ocho horas después de su muerte por medio de varios bancos de órganos (ojos). Los tejidos se digirieron enzimáticamente durante la noche. Las células epiteliales se rasparon en forma suave de la superficie de tejido, se separaron en una suspensión de célula individual y se cultivaron en un medio de crecimiento de queratinocitos (Clonetics®, San Diego, CA). Las células se utilizaron únicamente a través del pasaje 6. Los cultivos se mantuvieron en un estado preconfluente para evitar la diferenciación. Las células se identificaron como epiteliales mediante tinción de queratina positiva.

B) Pruebas de citocina Muchos compuestos con actividad antagonista de histamina Hi se evaluaron por su capacidad para inhibir la secreción de citocinas (IL-6 e IL-8) de las células epiteliales de conjuntiva de humano cultivadas en respuesta a la estimulación de histamina. Las células se sembraron es placas a 2x104 células/cavidad y se cultivaron durante la noche a 5% de CO2/37°C. Al siguiente día, el medio fresco que contenía el compuesto de prueba se añadió directamente a las cavidades y las células se incubaron durante 30 minutos antes de la estimulación de 24 horas con histamina (30 µM). Tres cavidades de cultivo separadas se utilizaron para cada grupo de tratamiento. Durante la cosecha, se recolectaron sobrenadantes, se centrifugaron a 200 x g, y se almacenaron a -20°C. Las muestras se analizaron para IL-6 e IL-8 mediante ELISA (R&D Systems, Mínneapolis, MN) como lo señaló el fabricante. Las sensibilidades de cada ELISA son las siguientes IL-6 0.7 pg/ml e IL-83.0 pg/ml.

C) Análisis de datos La potencia del antagonista (CI5o) se definió como la concentración del fármaco requerida para producir 50% de inhibición de la respuesta funcional estimulada por agonistas. Los datos derivados de los ensayos de citocina se calcularon como medio y valores de error estándares (SEM) que representan la variabilidad entre las cavidades de cultivo idénticamente tratadas. El efecto dependiente de las dosis de los agentes farmacológicos y CI50 se determinaron por regresión lineal. Los datos se expresan como media ± S.E.M de 3-5 experimentos independientes.

D) Resultados La exposición de HCE A 30 µM de histamina incrementó la secreción de lL-6 e lL-8 1.59 ± 0.19 y 1.80 ± 0.28 veces por arriba de los niveles básales, respectivamente. (Los niveles básales de las citocinas fueron 153 ± 42 pg/ml, n = 4, para IL-6 y 197 ± 48 pg/ml, n = 6, para IL-8.) El tratamiento de HCE con fármacos que poseen actividad antihistaminica y disponible para administración ocular tópica antes de la exposición de histamina dio como resultado la inhibición dependiente de la concentración de secreción IL-6 y secreción IL-8. Los resultados se muestran a continuación en el cuadro 1. La potencia de la emedastina en células intactas es consistente con su actividad determinada en pruebas de enlace de receptor utilizando homogenados de tejido. La levocabastina también inhibió la secreción de IL-6 e IL-8 a un nivel consistente con su afinidad de enlace de receptor de H-|. La antazolina y la feniramina, dos compuestos antihistamínicos oculares tópicos de primera generación, fueron inhibidores dramáticamente menos potentes de secreción lL-6 e IL-8 de lo que se predijo a partir de sus afinidades de enlace de receptor de Hi de histamina (20-140 veces). Sin embargo la olopatadina, fue más potente de lo que se predijo a partir de su afinidad de enlace del receptor de de histamina (36 nM). La olopatadina, antazolina y feniramina exhibieron afinidades de enlace de H-i similares (32 - 39 nM). Aun, la olopatadina fue aproximadamente 10 veces más potente que un inhibidor de secreción de citocina (CI50 de 5.5 nM y 1.7 nM para la secreción de IL-6 e IL-8, respectivamente) de lo que se predijo de los datos de enlace. Los resultados indican que, a diferencia de los otros compuestos probados, la capacidad de la olopatadina para inhibir la secreción de citocina se atribuye a algo más que la afinidad de enlace de receptor de H1.

CUADRO 1 Antagonistas de histamina Hi: inhibición de la secreción de IL-6 E IL-8 en células epiteliales de conjuntiva de humano y afinidades de enlace de receptor Hi Antagonista H-i IL-6 IL-8 Enlace de H-i IC50 (nM) IC50 (nM) K¡ (nM) Emedastinaa 2.5 4.0 1.22* Olopatadinab 5.5 1.7 36.0 § Levocabastina0 25.1 11.9 52.6* Antazolinad 1014 652 38.4* Feniramina6 4826 1216 33.9* a 1 H-bencimidazol, 1-(2-etoxietil)-2-(hexahidro-4-metil-1 H-1 ,4-diazepin-1-ilo), (E)-2-butendioato (1 :2). Acido Z-11-(3-dimetilaminopropiliden)-6,11-dihidrodibenz[b,e] oxepin-2-acético. c Monoclorhidrato de ácido (-)-trans-1-[cis-4-ciano-4-(p-fluorofenil)cicloexil]-3-metil-4-fenilisonipecótico. d 4,5-dihidro-N-fenil-N-(fenilmetil)-1 H-imidazol-2-metanamina. e N, N-dimetil-?-fenil-2-piridina-propanamina. * Sharif et al., J Ocul Pharmacol., 10:653-664 (1994) § Yanni et al. , Ann Allergy Asthma Immunol., 79:541-545 (1997).

Claims (14)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1.- El uso de ácido 11-(3-dimetilaminopropiliden)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para la fabricación de una composición para tratar o evitar neovascularización ocular y trastornos inflamatorios oftálmicos no alérgicos que implican la liberación de citocina de las células oculares humanas.

2.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde la composición es una solución tópicamente administrable y la cantidad de ácido 11-(3-dimetilaminopropiliden)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético es de alrededor de 0.0001% p/v a aproximadamente 5% (p/v).

3.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 2, en donde la cantidad de ácido 11-(3-dimetilaminopropiliden)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético es de alrededor de 0.0001 a aproximadamente 0.001% (p/v).

4.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 3, en donde la cantidad de ácido 11-(3-dimetilaminopropiliden)-6,11-dih¡drodibenz[b,e]oxepin-2 acético es de alrededor de 0.0005% (p/v).

5.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde el ácido 11-(3-dimetilaminopropiliden)-6,11-dih¡drodibenz[b,e]oxepin-2-acético es ácido (Z)-11-(3-dimetilaminopropiliden)-6,11- dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético, sustancialmente libre de ácido (E)-11-(3-dimetilaminopropiliden)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético.

6,- El uso como el que se reclama en la reivindicación 5, en donde la composición es una solución tópicamente administrable y la cantidad de ácido (Z)-11-(3-dimetilaminopropiliden)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético es de alrededor de 0.0001 a aproximadamente 5% (p/v).

7.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 6, en donde la cantidad de ácido (Z)-11-(3-dimetilaminopropiliden)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético es de aproximadamente 0.0001 a aproximadamente 0.001% (p/v).

8.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 7, en donde la cantidad de ácido (Z)-11-(3-dimetilaminopropiliden)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético es 0.0005% (p/v).

9.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde el ácido 11-(3-dimetilaminopropiliden)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético es ácido (E)-11-(3-dimetilam¡nopropiliden)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético, sustancialmente libre de ácido (Z)-11-(3-dimetilaminopropiliden)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético.

10.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 9, en donde la composición es una composición tópicamente administrable y la cantidad de ácido (E)-11-(3-dimetilaminoprop¡liden)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético es de alrededor de 0.0001 a aproximadamente 5% (p/v).

11.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 10, en donde la cantidad de ácido (E)-11-(3-dimetilaminopropiIiden)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético es de alrededor 0.0001 a aproximadamente 0.001% (p/v). 12.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 11 , en donde la cantidad de ácido (E)-11-(3-dimetilaminopropiliden)-6,11-dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-acético es de alrededor de 0.0005% (p/v). 13.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde el trastorno inflamatorio oftálmico no alérgico se selecciona de un grupo que consiste de resequedad de los ojos, queratitis, blefaritis, uveitis, e inflamación relacionada con la infección. 14.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde la neovascularización ocular y los trastornos inflamatorios oftálmicos no alérgicos implican la liberación de citocina desde las células epiteliales conjuntivas de humano.